NO138905B - Fremgangsmaate ved fremstilling av 2-(6-carbalkoxyhexyl)-4(r)-hydroxycyclopent-2-enoner - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte ved fremstilling av 2-(6-car"balkoxyhexyl)-4 (R) -hydroxy-cyclopent-2-en-oner som er nøkkelforbindelser ved fremstilling av prostaglandiner eller prostaglandinlignende forbindelser.

Spesielt angår oppfinnelsen fremgangsmåte ved fremstilling av 2-(6-carbomethoxyhexyl)-4(R)-hydroxy-2-cyclopenten-l-on,

en forbindelse som er en nøkkelforbindelse ved fremstilling av prostaglandiner.

Symbolet R som anvendt her angir den stereokjemiske konfigurasjon til en forbindelse som definert i Cahn-Ingold-Prelog nomenclatursystemet.

Prostaglandinene som er cycliske, oxygenerte C2Q-fettsy-rer basert på prostansyreskjelettet, er antatt å spille en viktig rolle som terapeutiske midler på grunn av det store antall fysio-logiske responser de fremkaller i det cardiovaskulære system, i det sentrale og perifere nervesystem, i forplantningssystemet, det endocrine-, renale- og gastrointestinale system ved administrering til dyr innbefattet mennesket. Forrådet av disse materialer er for tiden meget begrenset, og de foreslåtte metoder for fremstilling av disse medfører bruk av tidkrevende spaltningsmetoder for å oppnå de ønskede optisk aktive forbindelser.

Målet med denne oppfinnelse er å tilveiebringe en fremgangsmåte ved fremstilling av kirale forbindelser som er nøkkel-forbindelser ved fremstilling av prostaglandiner eller prostaglandinlignende forbindelser.

Oppfinnelsen angår således en fremgangsmåte ved fremstilling av 2-(6-carbalkoxyhexyl)-4(R)-hydroxy-cyclopent-2-enon av formelen

hvori R er en alkylgruppe med 1-2 carbonatomer, hvilken fremgangsmåte er kjennetegnet ved at a) et 2-(6-carbalkoxyhexyl)-4(R)-hydroxycyclopentan-1,3-dion av formelen:

omsettes med et alkyliodid av formelen:

R'I

hvori R' er en isoamyl, isopropyl, isobutyl eller pivalylgruppe, under dannelse av en C-l og en C-3 enolether av formlene:

eller med benzoylklorid under dannelse av en C-l og C-3 enolester av formlene:

hvor R" er fenyl,

b) C-l enoletheren henholdsvis esteren separeres fra C-3 enoletheren- eller esteren, c) den fremstillede C-l substituerte enolester eller ether reduseres, og d) 2-(6-carbalkoxyhexyl)-4(R)-hydroxycyclopent-2-enon utvinnes fra reaksjonsblandingen.

Tidligere har R. Pappo et al. (Annals of the New York Academy of Sciences, Vol. 180, s. 64 (1971)) vist følgende metode for fremstilling av methylenoletheren fra 2-(6<1->carbomethoxyhexyl)-4-hydroxy-cyclopenten-l,3-dion:

Denne prosedyre ble utført ved å koke hydroxydionesteren (A) under tilbakeløp med dimethoxypropan under sure betingelser under dannelse av de to angitte isomere enolestere (B og C).

Ulempene ved den av Pappo et al. beskrevne fremgangsmåte er: (1) den gir bare ca. 40 % av den ønskede C-l enolether (C), og (2) det asymmetriske senter ved C-4 ødelegges.

Den siste ulempe er meget alvorlig ved prostaglandinfrem-stilling under anvendelse av 1,4-addisjonsreaksjoner, da stereokjemien til prostansyreskjelettet (C-8 og C-12-stillingene i prostaglandinene) dikteres av stereokjemien ved C-4.

Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen medfører ikke de ulem-per som Pappo et al. prosessen er beheftet med. Det viktigste er at fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen tillater at det asymmetriske senter ved C-4 bibeholdes slik at det dannede 2-substituert-4-hydr-oxy-2-cyclopenten-l-on er kiral, et vesentlig trekk for hvordan prostaglandinene skal fremstilles. I tillegg aktiverer fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen preferentielt acy-lering eller alkylering av oxygenatomet ved C-l stillingen i molekylet den molekylære konfigurasjon som er._ønsket for den etterfølgende reduksjon til den ønskede forbindelse, nemlig 2-(6-carbalkoxvhexyl)-4(R)-hydr-oxy-cyclopent-2-enon.

Selvom man ikke vil bindes til teoretiske betraktninger, er det antatt at en moderat massiv gruppe må anvendes ved acyler-inq slik at acylerinqen ved sterisk hindring fortrinnsvis skjer ved oxyqenerinq av C-l stillinq. Likeledes er det antatt at 0-al-kvlerinqen ved C-l favoriseres under basiske betinqelser, oq at størrelsen av den alkylerende qruppe er av mindre betydninq enn ved acylerinqen. I alle tilfeller ble det fvftmet at de ovenfor an-qitte betinqelser tillater bibeholdelse av det asymmetriske senter ved C-4, oq at der ikke skjer noen racematdannelse.

Den asymmetriske reduksjon av 2-substituerte cyclopen-tan-l,3,4-trion til det tilsvarende 2-substituerte-4(R)-hydroxy-cyclopentan-l,3-dion utføres ved katalytisk hydroqenerinq i nærvær av et rhodiumkompleks med en kiral fosfinkjede (liqand) som katalysator. (Katalysatorer av denne type er beskrevet i Chem. Soc, Chem. Comm., 19, (1972) av W.S. Knowles et al.). Den foretrukne Katalysator ved denne fremgangsmåte kan betegnes som I^Rl^COD BF^~

(tilgjengelig fra Monsanto Co., St.Louis, Mo., under typebeteg-nelsen CP71327), hvor L indikerer o-anisylcyclohexylmethylfosfin, og COD indikerer 1,5-cyclooctadien.

En metode for hydrogenering av 2(6-carbomethoxyhexyl)-cyclopentan-l,3,4-trion under anvendelse av den foretrukne katalysator er angitt i det etterfølgende: Fremstilling av 2-(6-carbomethoxyhexyl)-4(R)-hydroxy-cyclopentan-1,3-dion 5,0 g 2(6-carbomethoxyhexyl)-cyclopentan-1,3,4-trion, 95,8 mg av den angitte katalysator og 2,78 ml triethylamin ble oppløst i 35 ml methanol og underkastet hydrogenering ved en at-mosfære. Efter at 92,6 % av den teoretiske mengde hydrogen var forbrukt, ble reaksjonen avsluttet ved at hydrogeneringsreaksjons-blandingen ble heldt over i HCl-I^O (ca. pH 2). Den resulterende blanding ble ekstrahert tre ganger med ethylacetat, de organiske lag ble fraskilt og vasket med natriumbicarbonatoppløsning (5 % oppløsning) inntil ingen farve var synlig i den vandige fase. De kombinerte bicarbonatekstrakter ble ekstrahert med ethylacetat, det resulterende gule vandige lag ble forsiktig surgjort til pH 2 med saltsyre og ekstrahert med ethylacetat. Det organiske lag ble fraskilt, tørket over Na2S0^ og fordampet til tørrhet. Det tørkede materiale ble oppløst i ethylacetat og derefter krystal-lisert fra dette, hvorved der ble erholdt 1,7 g produkt (34 % ut-bytte med følgende karakteristika: UV A JJ^°jj 272 nm ( £ 24 000), CDA281 nm, 6 = -58,3 x.IO<3>, 9 =

+60 x IO<3> ved A 262 nm (68 % ootisk renhet). Svmbolet UV betea-ner ultrafiolett, og CD betegner sirkeldikroisme. En annen mengde (1,6 %) viste ingen optisk aktivitet, filtratet praktisk talt ingen optisk aktivitet.

Trionmethylesteren anvendt som utgangsmateriale ved den ovenfor angitte hydrogeneringsreaksjon kan lett erholdes fra den tilsvarende trionsyre ifølge følgende fremgangsmåte, trionsyren kan lett erholdes efter den av Pappo et al. angitte metode:

En blanding av 1 g trionsyre, 2 ml methanol, 0,2 ml kon-sentrert HC1 og 2,5 ml dimethoxypropan fikk stå ved romtemperatur over natten. Oppløsningen ble derefter fordampet til tørrhet (rotasjonsfordamper), og residuet ble oppløst i 10 ml ethylacetat. Ethylacetatlaget ble eks trahert med en mettet NaHCO-^-oppløsning (2 x 15 ml). Bicarbonatoppløsningen ble surgjort og ekstrahert med ethylacetat (4 x 25 ml). Denne ekstrakt ble vasket med en mettet NaCl-oppløsning og tørket over MgS04. Fordampning av opp-løsningsmidlet ga en rødaktig olje som stivnet ved henstand under dannelse av et gult, fast materiale (tilsetning av en krystall av trionmethylesteren lettet stivningsprosessen).

Alternativt kan dionet fremstilles mikrobiologisk, som beskrevet i norsk ålment tilgjengelig søknad 3795/73 med priori-tet fra 29.september 1972, ved å underkaste 2-substituert-cyclo-penten-1,3,4-trion eller 2-substituert-3-alkoxy-2-cyclopenten-1,4-dion en fermentativ enzymatisk virkning av en mikroorganisme av klassen Ascomycetes, eller via spaltning med brucin som senere angitt. 6 g, 0,022 mol, 2-(6 -carbomethoxyhexyl)-4-hydroxy-cyclo-pentan-1,3-dion ble blandet med 8,7 g, 0,022 mol, brucin. Til denne blanding ble det tilsatt 35 ml aceton og den resulterende løsning ble kokt under tilbakeløp og under nitrogenatmosfære i 15 minutter, kjølt til romtemperatur og fikk deretter stå ved romtemperatur i 3 timer og deretter i et kjøleskap (4 - 10° C) over natten. Produktet, et brucinhydroxydionsalt utskiltes som fine krystaller. Krystallene ble filtrert fra på en buchner-trakt, vasket med kald aceton og ble omkrystallisert til konstant optisk rotasjon fra ethylacetat og Skelly B (fem omkrystallisasjoner). Skelly B er n-hexan.

Optisk rotasjon av saltet i CHCI3:

2,2 g av det spaltede brucin-hydroxydionsalt ble løst i

30 ml ethylacetat. Til denne løsning ble 30 ml 0,25 N HC1 tilsatt og den heterogene blanding ble omrørt meget kraftig i 2 minutter. Ved henstand dannet det seg to lag som ble separart. Det vandige lag ble ekstrahert to ganger med ethylacetat. De organiske lag fra de to ekstraksjoner ble kombinert og ble vasket med vann og mettet saltvannløsning og ble, tørket over vannfritt magnesiumsulfat. Fordampning av løsningsmidlet ga 780 mg 2-(6<1->carbomethoxyhexyl)-4(R)-hydroxy-cyclopentan-1,3-dion som et hvitt fast krystallinsk stoff.

Som tidligere angitt kan enoliseringen av det 2-substituerte dion utføres for omdannelse til enolester eller enoletherkonfi-gurasjon gjennom selektiv O-acylering eller selektiv O-alkylering ifølge følgende generelle metode.

Enolisering med selektiv O- acylering

Generelt kan denne reaksjon utføres etter følgende skje-matiske reaksjonsskjema:

hvor R og R" har de tidligere angitte betydninger.

Ved den angitte O-acyleringsreaksjon er det fordelaktig

å anvende bare én ekvivalent av acyleringsmidlet, da bruk av over-skudd av acyleringsmidler er tilbøyelig til også å aktivere acylering av hydroxylgruppen. Likeledes er acyleringsgruppens stør-relse viktig med hensyn til dannelse av den ønskede fenolester,

en mer massiv gruppering aktiverer dannelsen av mer av den ønskede enolform, dvs. 0,acylering av C-l-stilling. Med acetylklorid som acyleringsmiddel, hvilket er kjent, og 2(6-carbomethoxyhexyl)-4(R)-hydroxy-2-cyclopentan-l,3-dion som substrat dannes f.eks. to enolacylater

i et forhold på 70 - 75 % av A til 30 - 25 % av B. Når imidler-tid et mer passivt acyleringsmiddel slik som pivaloylklorid anvendes, er forholdet mellom det ønskede substituerte C-l-enol-pivaloylat og det substituerte C-3-enolpivaloylat ca. 90:10.

Enolisering med selektiv O- alkylering

O-alkyleringsreaksjonen kan utføres efter følgende reaksjonsskjema:

hvor R og R<1> har de tidligere angitte betydninger.

Som bemerket med hensyn til O-acyleringen influerer denne relative størrelse alkyleringsmidlet på forholdet mellom de dannede enolethere, dvs. forholdet mellom substituert C-l-enolether i forhold til substituert C-3-enolether. Med f.eks. isopropyljodid som alkyleringsmiddel og 2(6-carbomethoxyhexyl)-4(R)-hydroxy-2-cyclopentan-1,3-dion som substratet ble de to enolethere

dannet i et forhold mellom A og B på 6:4, mens når isoamyljodid, som er en større gruppering, ble anvendt som alkyleringsmiddel var forholdet mellom den ønskede substituerte C-l-enolether til den substituerte C-3-enolether ca. 7:3.

Den etterfølgende tabell angir de relative mengder av enoletherne erholdt med de angitte alkyleringsmidler:

Reduksjon av den substituerte C-l-enolester eller enolether kan lett utføres med natriumdihydro-bis-(2-methoxyethoxy)-aluminat (kaldt Red-Al middel) som vist av Pappo et al., Tetra-hedron Letters, No. 26, p. 2627 (1972), Pergamon Press. Andre reduksjonsmidler slik som f.eks. lithiumborhydrid, diisobutylalu-miniumhydrid og lithiumaluminiumhydrid er også istand til å redu-sere carbonyl-funksjonen av den substituerte C-l-enolester eller ether ifølge fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen under dannelse av de ønskede 2-substituerte-4(R)-hydroxy-2-cyclopenten-l-on-pro-dukter.

De følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen.

Eksempel. 1 Fremstilling av di- ertolbenzoater

Til en oppløsning av 120 mg (0,467 mmol) 2(6-carbometh-oxyhexyl) -4 (R) -hydroxy-cyclopentan-1, 3-dion (II), 0,4 ml (ca. 3 mmol) triethylamin (Et^N) (destillert over CaH2) i 10 ml tetrahydrofuran (THF) kjølt til -15°C ble tilsatt 0,5 ml (4,34 mmol) benzoylklorid i løpet av 5 minutter under omrøring. Efter at reaksjonsblandingen var omrørt ved -15 til 5°C i 3 timer, ble vann tilsatt, og blandingen ble ekstrahert tre ganger med diethylether. Etherlaget ble vasket henholdsvis med fortynnet HC1, vann, mettet NaHCO-j og NaCl-oppløsninger. Etherlaget ble derefter tørket over Na2S0^ og fordampet til tørrhet. Protonmagnetisk resonans (PMR) analyse viste at det tørkede produkt inneholde 90 % av det ønskede substituerte C-l-dibenzoat (Illa) som lett kunne separeres ved kolonnekromatografi ved bruk av siliciumsyre-Celite (85:15) ko-lonne (21 x 2,5 cm) med en benzen-ethylacetatgradient som beskrevet i eksempel 4.

Eksempel 2 Fremstilling av mono- enolbenzoatesteren

Til en avkjølt (-11° C) omrørt løsning av 102,4 mg (0,4 mmol) av hydroxydionmethylesteren (III) og 0,112 ml (ca. 0,84 mmol) triethylamin (destillert over kalsiumhydrid) i 8 ml tørr tetrahydrofuran (under ( ble tilsatt 0,046 ml (0,4 mmol) benzoylklorid i løpet av 5 minutter. Den resulterende løsning ble omrørt ved -10°C i 35 minutter. 4 ml methano.l ble tilsatt og løsningen ble oppvarmet til romtemperatur og ble deretter heldt over i 60 ml vann. Denne løsning ble ekstrahert fire ganger med 50 ml ethylacetat hver gang og de kombinerte ekstrakter ble vasket henholdsvis med 0,IN HC1 (10 ml), vann (10 ml), mettet natriumbicarbonat (10 ml) (natrium-bicarbonatvaskevannet ble surgjort og ekstrahert med ethylacetat. Ekstraktet ble vasket med mettet natriumkloridløsning og tørket over MgSO^. Fordampning av løsningsmidlet ga uomsatt hydroxydion-methylester (30 mg) II,) og mettet natriumklorid (10 ml) løsninger og tørket over MgSO^. Fordampning av løsningsmidlet ga en gul olje med følgende karakteristika: PMR 63,65 (S, 3H, OCH3, 64,48 (q, 1H, H-C-OH), 87,70 (m, 3H) og 68,18 (m, 2H) aromatiske protoner, m/e ved 360, (cx)q<4> + 35° (C, 2,0 CHCI3) , Xjj][£ s 241 nm (e 20.100), (S) 270 nm (e 8,500) hvilket identifiserte produktet som Hig. Eksempel 3 Fremstilling av isopropylenol- etheren Til 514 mg av hydroxydionesteren (II) (2,0 mmol), ble tilsatt 546 mg I^CO-j (4 mmol), og 5 ml (8,5 g, 50 mmol) isopropyljodid i 25 ml tørr aceton. Blandingen ble oppvarmet under tilbake-løpskjøling (N2-atmosfære) i 24 timer. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen fortynnet med Et20 og etherlaget ble vasket henholdsvis med vann, NaHCO^, vann og mettet NaCl. Løsningsmiddellaget ble deretter tørket over Na2S04 og fordampet til tørrhet hvorved det ble erholdt 560 mg av et oljeaktig residuum. Residuet ble løst i isopropylether hvorved det ble erholdt 316 mg (53 %) av et produkt med følgende karakteristika: sm.p. 60 - 62° C, A*^g 259 nm (e 20.600), PMR (CHC13) 1,35 (d, 6 „„ -""CH3 ), 63,65 (s, COOCH3) , 64,32 (q, 1, CHOH) , 4,67 (s, 1, CH^™3 ), m/e 298, (a)<* >+ 35,1 (C, 1,02 MeOH), hvilket identifiserte 3 det som Illh. Eksempel <4 >Fremstilling av isoamylenoletheren

Til 121 mg II, 287 mg K2CC>3 i 15 ml tørr aceton ble tilsatt 2 ml isoamyljodid. Etter tilbakeløp over natten ble reaksjonsblandingen opparbeidet som beskrevet i eksempel 5. Det ble erholdt 165 mg residuum. PMR-analyse viste en isopropyldublett (60,95 J = 6HZ), kompleks region (61,1 - 3,1), methoxyl (63,65), multiplett ( y^ 64,0 - 4,5, ca. 3H basert på methoxyl) og en bred dublett (65,0, J = 6)

(30 % 1H, basert på methoxyl), ca. 4H total integral fra 64,0 til 65,10 indikerte innbefattelse av -OH, -OCH2-CH2-CH2CHMe2 og OH-CH. Således ble produktet beregnet å inneholde ca. 70 % av den ønskede substituerte C-l enolether Uli, som lett ble fraskilt fra den substituerte C-3 enolether ved kolonnekromatografi som beskrevet i eksempel 4.

Eksempel 5 5

Reduksjon av mono- enolbenzoatesteren med " Red- Al"

Til en kjølt (-78° C), omrørt løsning av 50 mg (0,147

mmol) mono-enolbenzoat (Hig) i 10 ml tørr tetrahydrofuran under N2» ble "Red-Al" løsning (1,5 M i toluen) tilsatt i fire 0,38 ml porsjo-ner i løpet av 15 minutter. Den resulterende løsning ble omrørt ved

-78° C i ytterligere 30 minutter. 2 ml iseddik ble tilsatt og løs-ningen fikk oppvarmes til romtemperatur. Løsningen ble heldt over i 40 ml vann og ekstrahert med ethylacetat (4 x 30 ml). Ethylacetatlaget ble vasket med 10 ml hver av mettet natriumbicarbonat og mettet NaCl-løsninger og tørket over MgSO^. Fordampning av en olje. Oljen ble løst i 10 ml eddiksyre-vann (75:25) løsning. Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer. Eddiksyre vann ble fordampet fra under redusert trykk. Den resulterende olje ble løst i ethylacetat (10 ml) og vasket med mettet natriumbicarbo-natløsning og mettet natriumkloridløsning og tørket over MgS04. Fordampning av løsningsmidlet ga en gul olje (ca. 25 - 30 mg). Kry-stallisasjon fra ethylacetat-Skelly B ga 20 mg IV, som ble identifisert ved følgende karakteristika: sm.p. 60 - 61° C, (ci)q<4> =

17,82° (C, 0,49 MeOH), PMR (CDCII3) 63,65 (s, 3, COOCH3), 64,93 (m, 1, H-C-OH) , 67,23 (m, 1, vinyl H) , UV xjjj£]j 222 nm (e 8 400) CD 231 nm 9 -9,9° x IO<-3> (MeOH).

Eksempel 6

Reduksjon av isopropylrénoletheren med Red- Al

De 123 mg av isopropylenoletheren (Illh) (0,412 mmol) i

10 ml THF, rørt under nitrogen ved -78° C, ble fire 1,1 ml's por-sjoner av en løsning av Red-Al i benzen (1,5 M) dråpevis tilsatt i løpet av 7 minutter. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78° C i 45 minutter og 2 ml eddiksyre ble deretter tilsatt. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble fordampet til tørr-het. 10 ml 75 %-ig eddiksyreløsning ble tilsatt og rørt i 24 timer. Eddiksyre og vannet ble fordampet fra under trykk. Den resulterende olje ble løst i 25 ml ethylacetat og vasket med mettet NaHC03 og NaCl-løsninger og deretter tørket over .magnesiumsulfat. Krystalli-sasjon av residuet fra ethylacetat-Skelly B ga 60 mg IV, som ble identifisert ved følgende karakteristika: sm.p. 60 - 61° C, (a)D

+ 17,82° (C, 0,49 MeOH) , UV .xjjjj 222 nm (e 8.400) , CD 231 nm 9.= -9,9° x 10~<3> (MeOH).

Omdannelsen av forbindelsene fremstilt ifølge fremgangsmåten, nemlig., 2-(6-carbalkoxyhexyl)-4 (Rl-hydroxy-cyclopent-2-enoner til prostaglandiner eller prostaglandin-lignende forbindelser kan utfø-res etter fremgangsmåten beskrevet av Charles J. Sih et al. (J.Amer. Chem. Soc, 94' 3643 (mai 17,nde, 1972)). Såsnart den ovenfor stereospesifike forbindelse er erholdt kan omdannelsen til prostaglandiner eller prostaglandin-lignende forbindelser lett utføres med bibeholdelse av den ønskede stereokjemi.

I tillegg til å kunne anvendes som et utgangsmateriale ved fremstilling av prostaglandiner, ble l-isopropoxy-2-(6'-carbo-methoxyhexyl) -4(R)-hydroxy-l-cyclopenten-3-on (isopropylenoletheren) funnet å ha antimikrobiell aktivitet som vist i det følgende eksempel.

Eksempel 7

25 mg l-isopropoxy-2-(6'-carbomethoxyhexyl)-4(R)-hydroxy-l-cyclopenten-3-on ble løst i 1 ml methylalkohol. , 0,1 ml av den resulterende løsning ble påført en filterpapirskive (12,7 mmol) og skiven ble deretter tørket. Hver av de tørkede skiver ble deretter plassert i en petrlskål inneholdende 10 ml antibiotica medium II (Difco) til hvilket det var tilsatt 0,03 ml av et podestoff av test-organismen. Petriskålene ble incubert ved 25° C i 48 timer og inhi-beringssonen ble målt med følgende resultater:

Claims (1)

1. Fremgangsmåte ved fremstilling av 2-(6-carbalkoxy-

   hexyl)-4(R)-hydroxy-cyclopent-2-enon av formelen

   hvori R er en alkylgruppe med 1-2 carbonatomer, karakterisert ved at a) et 2-(6-carbalkoxyhexyl)-4(R)-hydroxycyclopentan-1,3-dion av formelen:

   omsettes med et alkyliodid av formelen: R'I

   hvori R' er en isoamyl, isopropyl, isobutyl eller pivalylgruppe, under dannelse av en C-l og en C-3 enolether av formlene:

   eller med benzoylklorid under dannelse av en C-l og C-3 enolester av formlene: hvor R" er fenyl, _b) C-l enoletheren henholdsvis esteren separeres fra C-3 enoletheren- eller esteren, c) den fremstillede C-l substituerte enolester eller ether reduseres, og d) 2-(6-carbalkoxyhexyl)-4(R)-hydroxycyclopent-2-enon utvinnes fra reaksjonsblandingen.