NL8202403A - Alfa-endorfine fragment bevattend farmaceutisch preparaat. - Google Patents

Description

OA/8655-129 Hermans Akzo N. V. Arnhem α-Endorfine fragment bevattend farmaceutisch preparaat.

De uitvinding heeft betrekking op de farmaceutische toepassing van een bepaald fragment van het peptide a-endorfine.

a- en γ-endorfinen zijn fragmenten van 5 β-endorfine. Zowel α-, β- als γ-endorfine zijn in tal van testsystemen - veelal analgetische en gedragstest systemen - getest.

In een aantal gedragstestsystemen bleken α-endorfine en γ-endorfine een tegenovergestelde 10 werking te vertonen. Een voorzichtige conclusie uit de testresultaten luidde dat α-endorfine psycho-stimulerende activiteit en γ-endorfine neuroleptische activiteit zou bezitten.

Het verwijderen van het eerste aminozuur (Tyr) 15 van γ-endorfine, resulterende in des-Tyr^-endorfine, bleek voorts een versterking van de neuroleptische eigenschappen en een nagenoeg verdwijnen van de opiaat eigenschappen te bewerkstelligen (zie Europese Octrooiaanvrage no.: 0.004.394 }.

20 Verdere structuur/werkingsstudies ten aanzien van γ-endorfine derivaten leidde tot de conclusie dat het kleinste peptide, dat nog alle neuroleptische eigenschappen bezit, het C-terminale fragment 6-17 van γ-endorfine is (zie Europese Octrooiaanvrage 25 No.: 0.015.036 ).

Aan structuur/werkingsstudies ten aanzien van α-endorfine derivaten is tot nu toe veel minder aandacht besteed.

30 8202403 Λ> s.

- 2 - α-Endorfine is, zoals reeds gezegd, bekend als psychostimulant; terwijl ook bekend is dat bij C-terminale afbraak deze psychostimulerende eigenschappen vooralsnog behouden blijven· 5 D.H. Coy beschrijft in een grote reeks van U.S. octrooien (zie bijvoorbeeld U.S.P. 4.127.517 t/m U.S.P. 4.127.541) dat successieve C-terminale afbraak van een β-endorfine derivaat, waarin het tweede aminozuur vervangen is door een D-aminozuur, 10 telkens leidt tot peptiden met psychostimulerende eigenschappen, doch tevens sedatieve, hypnotische, analgetische en prolactine-vrijmakende eigenschappen.

In onze eigen laboratoria werd gevonden dat 15 het α-endorfine fragment (2-9)-a-endorfine niet meer dan slechts een kwart van de werking van α-endorfine vertoont in de bekende paal-klim test.

Met andere woorden (2-9)-a-endorfine is aanzienlijk zwakker in het vertragen van de extinctie van 20 aangeleerd vluchtgedrag (avoidance behavior) dan α-endorfine en zou op deze grond geen of vrijwel geen praktisch bruikbare psychostimulant opleveren.

Verrassenderwijze werd echter gevonden, dat 25 het fragment (2-9)-α-endorfine en structureel zeer verwante analoga hiervan met een aminozuur sequentie: H-R(1)-Gly-L-Phe-R(2)-L-Thr-L-Ser-L-Glu-L-Lys-OH, I waarin R(l) Gly of L-Ala voorstelt en R(2) L-Met, L-Met(O) of L-Met(02) voorstelt, 30 alsmede de functionele derivaten hiervan, bijzonder waardevolle dopaminerge eigenschappen bezitten, waardoor zij zich bij uitstek lenen voor toepassing bij de behandeling van de ziekte van Parkinson, en dat zij bovendien de endogene produktie 35 van vasopressine stimuleren, waardoor zij toepasbaar 8202403 - 3 - zijn bij alle behandelingen, waarbij tot dusver het hormoon vasopressine werd voorgeschreven.

Laatstgenoemde toepassing, waarbij endogeen vasopressine wordt opgewekt, bezit het additionele 5 voordeel dat de bijwerkingen, die het toedienen van (exogeen) vasopressine met zich meebrengt, - bijvoorbeeld de werking op de bloeddruk -, geheel of nagenoeg geheel achterwege blijft.

10 Het peptide fragment (2-9)-a-endorfine is overigens onder de naam 62-69 β-LPH beschreven in Biochem.Biophys.Res.com. 8£ (4), 1288, (1979), waar een methode beschreven wordt om op chromatografische wijze diverse β-endorfine fragmenten van elkaar te 15 scheiden. Een biologische werking werd niet beschreven.

Onder functionele derivaten worden verstaan: (a) de C-terminale lagere alifatische esters 20 (1-6 C-atomen) zoals de methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl of isobutyl ester, (b) C-terminale amiden of monomethyl of dimethyl gesubstitueerde amiden, en (c) farmaceutisch aanvaardbare zouten en zuur- 25 additiezouten.

De peptiden volgens de hiervoor beschreven formule I worden bereid op de voor peptiden gebruikelijke wijze via fragment-condensatie of via 30 de vaste phase techniek.

De voorkeur wordt gegeven aan de toepassing van het peptide: H-Gly-Gly-L-Phe-L-Met-L-Thr-L-Ser-L-Glu-L-Lys-OH 35 en farmaceutisch acceptabele zuuradditiezouten hiervan.

* 8202403 - 4 -

De onderhavige peptiden volgens formule I worden bij voorkeur parenteraal, rectaal of intranasaal (via neusspray) toegediend. Zij kunnen op de gebruikelijke wijze gemengd worden met ge-5 bruikelijke farmaceutische hulpstoffen (vulstoffen, oplosmiddelen, verdunningsmiddelen etc.).

De dosering waarin de peptiden volgens de uitvinding bij voorkeur worden toegediend, varieert 10 tussen 0,1 μς en 10 mg per kg lichaamsgewicht per dag.

Testmethode

Het effect van (2-9)-a-endorfine op AVP 15 (arg-vasopressine) levels van oog-plexus plasma.

Vrouwelijke Wistar ratten (140-160 g) werden met ether verdoofd voor een strikt gecontroleerde periode van 45 seconden. Monsters van oog plexus 20 bloed werden genomen en bewaard in gekoelde plastic buisjes waaraan heparine werd toegevoegd.

De buisjes werden gecentrifugeerd bij 4 °C om het plasma te verkrijgen. Het immunoreactieve AVP werd rechtstreeks in 20 μΐ oog plexus plasma gemeten 25 met behulp van RIA (radio-immuno-assay) methodieken.

De ratten werden behandeld met placebo of met 10 μg (2-9)-a-endorfine per rat, subcutaan geinj icieerd.

30 8202403 - 5 - AVP levels

Tijdstip na uitgedrukt in pg/ml injectie in placebo [(2-9)- minuten (0,5 ml saline) a-endorfine 5 2 <50 667 5 <50 92 10 <50 78

Voorbeeld 10 In jectiepreparaat

Een gevriesdroogd mengsel in een afgesloten ampul bestaat uit 0,5 mg H-Gly-Gly-L-Phe-L-Met-L-Thr-L-Ser-L-Glu-L-Lys-OH en 15 50 mg mannitol.

Voor injectie wordt 1 ml water aan het mengsel in de ampul toegevoegd.

8202403

Claims (3)

1. Farmaceutisch preparaat bestaande uit een peptide met de algemene formule I: H-R(1)-Gly-L-Phe-R(2)-L-Thr-L-Ser-L-Glu-L-Lys-OH waarin R(l) Gly of L-Ala voorstelt en R(2) L-Met, L-Met(0) en L-Met(02) voorstelt, of een functioneel derivaat hiervan, als het actieve bestanddeel, en een of meerdere gebruikelijke farmaceutisch acceptabele hulpstoffen.

2. Preparaat volgens conclusie 1 met het kenmerk dat als actief bestanddeel een peptide volgens formule I wordt toegepast, waarin R(l) Gly en R(2) L-Met voorstelt.

3. Peptide met de algemene formule I, beschreven in conclusie 1, of een functioneel derivaat hiervan, voor toepassing als farmaceutisch actieve stof. 8202403