NL8100053A - Geneesmiddel met antibiotische werking en een cefalosporine als actief bestanddeel en een werkwijze voor de bereiding daarvan. - Google Patents

Description

N/30.030-Kp/vdM « - 1 - *

Geneesmiddel met antibiotische werking en een cefalosporine als actief bestanddeel en een werkwijze voor de bereiding daarvan.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een geneesmiddel met als actief bestanddeel een nieuw cefalosporine , 8-OXO-7-(2-thienylaceetamido)-3-(1,2,4-triazol-3-ylthio-methyl)-5-thia-l-azabicyclo/4.2.07oct-2-een-2-carbonzuur, met 5 formule 1 van het formuleblad en de farmaceutisch aanvaardbare additiezouten daarvan.

De uitvinding heeft eveneens betrekking op een werkwijze voor de bereiding van boven genoemde verbinding volgens het schema op het reactieschemablad.

10 De werkwijze voor de bereiding van 8-oxo-7-(2- thienylaceetamido)-3-(1,2,4-triazol-3-ylthiomethyl)-5-thia- l-azabicyclo/4.2.07oct-2-een-2-carbonzuur (formule 1) is hoofdzakelijk gebaseerd op de substitutiereactie van de ace-toxygroep van hetzij 3-acetoxymethyl-7-amino-8-oxo-5-thia-l-15 azabicyclo/4.2.07oct-2-een-2-carbonzuur, het z.g. 7-amino-cefalosporanzuur, hetzij 3-acetoxymethyl-8-oxo-7-(2-thienylaceetamido) -5-thia-l-azabicyclo/4.2.07oct-2-een-2-carbonzuur (formule 3 van het formuleblad), door 3-mercapto-l,2,4-tria-zool in een oplossing van water of aceton: water in basisch 20 milieu, bijv. in aanwezigheid van alkalibicarbonaten, terwijl de base niet noodzakelijk is, wanneer van een alkalizout van het cefalosporine wordt uitgegaan. Nadat de acetoxygroep door 3-mercapto-l,2,4-triazool is gesubstitueerd, wordt in het eerste geval het 7-amino-cefalosporanzuur geacyleerd met een 25 actief derivaat van 2-thienylazijnzuur, zoals het gemengde anhydride of het chloride, in basisch milieu door aanwezigheid van bij voorkeur een tertiair amine. Voor de bescherming van de carbonzuurrest van het 7-aminocefalosporanzuur tegen reactie met zuurhalogeniden, moet deze rest worden veresterd, bij 30 voorkeur tot de trimethylsilaanester, en aan het eind van de werkwijze worden gehydrolyseerd.

De uitvinding wordt nader toegelicht aan de hand van de volgende voorbeelden.

VOORBEELD I: 7-amino-8-oxo-3-(l,2,4-triazol-3-yl- 3 1 0005 3 4.

- 2 - thiomethyl)-5-thia-l-azabicyclo/4.2.07oct-2-een-2-carbonzuur (formule 2 van het formuleblad).

1/68 g natriumbicarbonaat (0,02 mol) werd opgelost in 20 ml water en vervolgens werd 2,72 g 7-ACA (0,01 mol), 5 20 ml water en 10 ml aceton toegevoegd. De verkregen oplossing werd verwarmd tot 45°C, waarna 1,54 g 3-mercapto-l,2,4-tria-zool (0,0152 mol) in 20 ml aceton en 4 ml van een 5 % oplossing van natriumbicarbonaat werden toegevoegd. Het reactie-mengsel werd tot terugvloeien verwarmd, waarbij de pH op 7,5 10 werd gehouden. Daarna werd.de oplossing gekoeld tot 10°C en werd de pH met 3N zoutzuur op 3,5 gesteld. Het gevormde neerslag werd afgescheiden, met aceton gewassen en over fosfor-pentoxide onder vacuum gedroogd. Het aldus verkregen produkt bleek 7-amino-8-oxo-3-(1,2,4-triazol-3-ylthiomethyl)-5-thia-15 l-azabicyclo^4.2.07oct-2-een-2-carbonzuur (opbrengst: 73,5 %) te zijn. IR (KBr): 1795 cm 1 (C = 0 van het β-lactam), 1630 cm * (C = N) en 1550 cm ^ (C = O van het zuur, zwitterion).

UV (E* * = 200,5 in ethanol) = 260 nm.

1 cm • VOORBEELD II: 8-OXO-7-(2-thienylaceetamido)-3-20 (1,2,4-triazol-3-ylthiomethyl)-5-thia-l-azabicyclo^4.2.0/oct-. 2-een-2-carbonzuur (formule 1).

Twee oplossingen, A en B, werden bereid. De oplossing A bevatte 1,42 g 2-thienylazijnzuur (0,01 mol) en 1,01 g triethylamine (0,01 mol) in 20 ml watervrij tetrahydrofuraan 25 en werd gekoeld tot -10°C, waarna 1,365 g isobutylchloor-formiaat (0,01 mol) opgelost in 10 ml watervrij tetrahydro-furaan langzaam en onder roeren werd toegevoegd. De oplossing B werd verkregen door toevoeging van 1,01 g triethylamine (0,01 mol) aan een suspensie van 3,13 g 7-amino-8-oxo-3-30 (l,2,4-triazol-3-ylthiomethyl)-5-thia-l-azabicyclo/4.2.07oct- 2-een-2-carbonzuur (0,01 mol) in water.

De oplossing B werd langzaam en onder roeren bij een temperatuur van -5 tot 0°C toegevoegd aan de oplossing A, waarna het reactiemengsel gedurende 1 h bij 5°C en vervolgens 35 gedurende nog een uur bij omgevingstemperatuur werd geroerd. Het reactieprodukt werd gefiltreerd. Het tetrahydrofuraan werd door verdamping onder vacuum uit het filtraat verwijderd en het resterende produkt werd tweemaal met 20 ml ethylacetaat 8t 0 0 05 3 *? >» v - 3 - gewassen. De waterige fase werd met 3N zoutzuur gesteld op een pH 2, waarbij een neerslag werd gevormd, dat na wassen en drogen werd omgekristalliseerd uit ethanol. De aldus verkregen verbinding bleek 8-oxo-7-(2-thienyl)-5-thia-l-azabicyclo-5 ^4.2.0/oct-2-een-2-carbonzuur (1,87 g; opbrengst: 43 %) te zijn. Smp.: 18^2-183,8°C. IR (KBr) = 1780 cm-1 (C = 0 van het 6-lactam), 1680 cm 1 (C = O van het amide) en 1550 cm 1 (C = 0 1 % van het geassociëerde amide). UV (E1 - 195,1 in ethanol) =

JL CXU

269 nm. Elementaire analyse (ci6Hi5N504S3) = c 43,43 (ber.

10 43,92), H 3,79 (ber. 3,455), N 14,74 (ber. 16,008), S 21,08 (ber. 21,982).

Bij gebruik van het zuurchloride in plaats van het gemengde anhydride voor de amidering, was de werkwijze als volgt: 15 Een suspensie van 4,69 g 7-amino-8-oxo-3-(1,2,4- triazol-3-ylthiomethyl)-5-thia-l-azabicyclo^4.2.o7oct-2-een- 2- carbonzuur (0,015 mol) in 150 ml droog methyleenchloride werd bereid en vervolgens behandeld met 2,72 g triethylamine (0,027 mol), 4,0 g N,N-dimethylaniline (0,033 mol) en 4,9 g 20 trimethylchloorsilaan (0,045 mol). Het mengsel werd onder terugvloeiïng verwarmd totdat een heldere oplossing werd verkregen, die vervolgens tot 4°C werd gekoeld en 2,8 g 2-thie-nylacetylchloride (0,0175 mol) werd toegevoegd. Het reactie-mengsel werd gedurende 1 h bij 4°C en nog een uur bij omge-25 vingstemperatuur geroerd. Daarna werd 80 ml water toegevoegd en weer gedurende 1 h geroerd. De organische fase werd weggegooid en de waterige fase werd met 3N zoutzuur aangezuurd tot aan een pH 2. Het gevormde neerslag werd afgefiltreerd, met water gewassen, gedroogd en omgekristalliseerd uit ethanol. De 30 aldus verkregen verbinding bleek 8-oxo-7-(2-thienylaceetamido)- 3- (1,2,4-triazol-3-ylthiomethyl)-5-thia-l-azabicyclo74.2.θ7~ oct-2-een-2-carbonzuur (3,78 g; opbrengst: 58 %) te zijn.

Het smeltpunt en de spectroscopische eigenschappen waren dezelfde als die van het volgens de werkwijze met het gemengde 35 anhydride verkregen monster.

VOORBEELD III: 8-oxo-7-(2-thienylaceetamido)-3-(1,2,4-triazol-3-ylthiomethyl)-5-thia-l-azabicyclo74.2.07oct- 2-een-carbonzuur (formule 1).

8100053 <r w 1 - 4 - 3,23 g 3-mercapto-l,2,4-triazool (0,032 mol) werd toegevoegd aan een oplossing van 10,03 g natrium-3-acetoxy-8-oxo-7-(2-thienylaceetamido)-5-thia-l-azabicyclo/4.2.o7oct-2-een-2-carboxylaat (0,024 mol) in 48 ml water. Het reactiemeng-5 sel werd gedurende 48 h bij 40°C geroerd. Het gevormde neerslag werd afgefiltreerd en gewassen met water. Het filtraat werd met 3N zoutzuur aangezuurd tot een pH van 2 en het gevormde neerslag werd door filtratie afgescheiden en met water gewassen. De verzamelde neerslagen werden omgekristalliseerd 10 uit ethanol. De aldus verkregen verbinding bleek 8-oxo-7- (2-thienylaceetamido)-3-(1,2,4-triazol-3-ylthiomethyl)-5—thia- l-azabicyclo/4.2.ö7oct-2-een-2-carbonzuur (8,5 g; opbrengst: 81 %) te zijn. Het smeltpunt en de spectroscopische eigenschappen waren dezelfde als die van de in voorbeeld II verkregen 15 monsters.

De verbinding volgens de onderhavige uitvinding heeft een krachtige antibiotische werking ten opzichte van stafylokokken, pneumokokken, enterokokken, E.coli, Klebsiella pneumoniae en Proteus indol negatief. Vanwege zijn geringe 20 giftigheid (de LD5q van het natriumzout ligt tussen 2,8 g/kg en 4 g/kg intraveneus bij de muis) heeft dit geneesmiddel een hoge therapeutische waarde, aangezien het in dagelijkse doseringen van 200-2000 mg door injectie kan worden toegediend. 1 8100053

Claims (2)

1. Geneesmiddel met antibiotische werking, met het kenmerk, dat het 8-oxo-7-(2-thienylaceetamido)- 3- (l,2,4-triazol-3-ylthiomethyl) -5-thia-l-azabicyclO/{4.2.0J-oct-2-een-2-carbonzuur met formule 1 als actief bestanddeel 5bevat.

2. Werkwijze voor de bereiding van de verbinding met formule 1 en zijn farmaceutisch aanvaardbare additiezouten, met het kenmerk, dat de verbinding met formule 1 wordt verkregen uit de reactie van 7-amino-8-oxo-3-(1,2,4-tria- 10zool-3-ylthiomethyl) -5-thia- l-azabicyclo/_4.2, QJ oct-2-een-2-carbonzuur met formule 2 met een actief derivaat van 2-thienyl-azijnzuur met formule 4 van het formuleblad, waarin X een halogeen, bij voorkeur chloor, of COOAlk is, waarbij Alk een lineaire of vertakte alkylrest met 1-5 koolstofatomen voorstelt, 15in aanwezigheid van een tertiair amine, zoals triethylamine of een mengsel van triethylamine en Ν,Ν-dimethylaniline in een inert oplosmiddel, bij voorkeur tetrahydrofuraan of methyleen-chloride.

3. Werkwijze volgens conclusie 2, m e t het 20k e n m e r k , dat de verbinding met formule 2 wordt veresterd, in het bijzonder tot de trimethylsilaanester, wanneer de amide-ring wordt uitgevoerd met 4 (X = halogeen) en daarna de zuur-groep door hydrolyse wordt geregenereerd.

4. Werkwijze volgens conclusie 2,met het 25k e n m e r k , dat de verbinding met formule 2 wordt verkregen uit de reactie van 7-aminocefalosporanzuur (7-ACA) met 3-mercapto-l,2,4-triazool in een oplossing van aceton : water in basisch milieu door aanwezigheid van bij voorkeur alkali-bicarbonaten.

5. Werkwijze voor de bereiding van de verbinding met formule l,met het kenmerk, dat de reactie van 3-acetoxy-8-oxo-7-(2-thienylaceetamido)-5-thia-l-azabicy-clo,(4.2.07oct-2-een-2-carbonzuur met formule 3 in aanwezigheid van een minerale base, bij voorkeur hetzij alkalibicarbonaat, 35hetzij een alkalizout van het uitgangsprodukt, met 3-mercapto- 1,2,4-triazool in waterige oplossing wordt uitgevoerd. 8 1 00 05 3 N/30.030-Kp/et Behoort bij octrooiaanvrage t.n.v. Jb'errer internaclona. S.A., Barcelona, Spanje. FORMULEBLAD 1 ΓΧ s^ch2-conh Cf T CH2Sv COOH V-N

2 V’i Φ COOH \_N o XI\T H J tx s ch2conh CH2-OCOCH3 COOH * ΓΧ s CHj-COX 8100053 m- * S.A., Barcelona, Spanje. REACTIESCHEMA HgN^ ^S,____ 3-mencapto 1,2,4-triazool COOH H2NV_ I—| I AT 7-AC A , γ^=*ν l COOH V-N o ΊΜ actief derivaat H van 2-thienylazijnzuur Π tt s^ch2—conh s 3-mercaptoX^ Nn^^ch-OCOCH, __. f \2,A-\nss^y COOH CX y Λ s ch2-conh (5^ r^Y^S-CH2-S i cooh V\\ n y VN 8100053 H