NL8005293A - Werkwijze voor de bereiding van 6-d-alfa-amino-p- -hydroxyfenylaceetamido penicillaanzuur. - Google Patents

Description

803113/vdVeken

Korte aanduiding: Werkwijze voor de bereiding van 6-D-a-amino-p- hydroxyfenylaceetamido penicillaanzuur.

33e uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor de bereiding van 6-D-a-amino-p-hydroxyfenylaceetamido penicillaanzuur, een antibioticum dat algemeen bekend staat onder de naam amoxicilline.

Amoxidïïne is een algemeen bekend produkt en beschreven in 5 Brits octrooischrift 978*178* Volgens dit octrooischrift wordt amoxidïïiie bereid door synthese van 6-aminopenici1laanzuur (algemeen bekend als 6-APA) met het gemengde anhydride gevormd door de reaktie van ethylchloorformiaat met 0,K-dibenzyloxycarbonyl-p-hydroxy fenylglycine en daarop volgend de verwijdering van de beschermende 10 groepen door katalytische hydrogenering.

Er zijn reeds talrijke andere werkwijzen bekend, die echter vanuit economisch oogpunt gezien van weinig belang zijn met betrekking tot de bereiding van amoxidïïiie.

Zo is in Belgisch octrooischrift 737*848 de synthese be-15 schreven van arnoxidSte uit 6-APA en het gemengde anhydride verkregen door een Dane zout van het p-hydroxyfenylglycine en ethylchloorformiaat. De tijdens deze reaktie gevormde tussenprodukten worden geïsoleerd; het is niet mogelijk om de totale opbrengsten aan amoxidïïiie te berekenen. Een analoge werkwijze is beschreven in 20 Duits 0ffenlegöngsschrift2.520.647 waar, dankzij het gebruik van een katalysator, zoals dimethylaceetamide hydrochloride, opbrengsten verkregen worden tot 78%. Er is echter niets beschreven met betrekking tot de zuiverheid van het eindprodukt.

Brits octrooischrift 1.241.844 beschrijft een werkwijze 25 waarbij de aminogroep van het p-hydroxyfenylglycine beschermd wordt door een carbobenzyloxygroep en het gebruik van p-hydroxy-fenylglycinechloride hydrochloride door reaktie met 6-APA in een waterige fase, waarbij de opbrengsten echter niet vermeld zijn.

Volgens Amerikaans octrooischrift 5*980.637 laat men p-50 hydroxyfenylglyoinechloride hydrochloride in een organisch oplosmiddel reageren met de mono- en disilylverbinding van 6-APA. De opbrengsten zijn hoog doch het aldus verkregen amoxidBinemoet ge-zuiverd worden met harsen vanwege het gebruik van dimethylaniline.

W De werkwijze beschreven in Amerikaans octrooischrift \\ 35 4.I27.57I berust ook op het gebruik van p-hydroxyfenylglycine- \ 80 0 5 29 3 - 2 - chloridehydrochloride dat men laat reageren met het 0,ïï-digesub-stitueerd 6-APA met cyclische boriraverbindingen.

Europees octrooischrift 1,133 beschrijft een werkwijze waarbij men een silylderivaat van 6-APA laat reageren met een gemengd 5 anhydride van een Dane zout van p-hydroxyfenylglycine onder toepassing van een mengsel van oplosmiddelen en co-.oplosmiddelen. Als co-*oplosmiddelen worden genoemd dimethylformamide, sulfolaan, tetrahydrofuran, ïï-methylpyrrolidon, 1,4-dioxan, acetonitril, di-methylaceetamide en tetramethylureum. Het volgens de werkwijze van 10 Europees octrooischrift 1.153 verkregen eindprodukt (amoxjfillfe ) bevat onzuiverheden die voortkomen uit het gebruik van een silylverbinding van 6-APA (zoals hexamethyldisiloxan) welke moeilijk te verwijderen zijn tengevolge van hun onoplosbaarheid in water.

Om de bovengenoemde nadelen te ondervangen heeft aanvraag-15 ster getracht het silylderivaat van 6-APA te vervangen door andere 6-APA .derivaten doch zonder merkbare resultaten. Tan deze 6-APA derivaten werden door aanvraagster gebruikt de boasumclLerivaten van 6-APA (beschreven in het Amerikaans octrooischrift 4·127·571 en Italiaanse octrooiaanvrage 26.865 A/79) doch de verkregen opbreng-20 sten bleken niet van industrieel belang te zijn.

Verrassenderwijze is nu gevonden dat wanneer men, in plaats van een mengsel te gebruiken van oplosmiddelen en co-roplosmiddelen zoals beschreven in het Europese octrooischrift, boriumderivaten van 6-APA laat reageren met een gemengd anhydride van een Dane zout 25 van p-hydroxyfenylglycine bereid in een oplosmiddel gekozen uit alleen dimethylformamide of dimethylsulfoxyde tezamen met methyleen-chloride of chloroform, hoge opbrengsten aan eindprodukt verkregen kunnen worden, welke eindprodukten -in zeer zuivere toestand geïsoleerd kunnen worden.

50 De uitvinding heeft derhalve betrekking op een werkwijze voor de bereiding van 6-D-cc-amino-p-hydroxyfenyl-aceetamidopenicil-laanzuur die gekenmerkt is doordat men een boriumderivaat van 6-APA met de algemene formule 1 van het formuleblad waarin R een water-/-¾. stofatoom of een groep met formule 5 voorstelt waarin n 2 of 3 is> 1. 4 3 35 met een tenminste equimolaire hoeveelheid van een acyleringsmiddel \ afkomstig van D(-)-p-hydroxyfenylglycine met formule 2, waarin R^ een alkylgroep is zoals methyl, ethyl en isobutyl en Rg een 80 0 5 29 3 * <* - 3 - alkyxogroep zoals methoxy of ethoxy, in een oplosmiddel bestaande nit alleen dimethylformamide of dimethylsulfoxyde gemengd met methyleenchloride of chloroform, het reaktiemengsel gehydrolyseerd wordt met water waarbij men twee fasen verkrijgt, de enaminegroep 5 verwijderd wordt door verlaging van de pH van het reaktiemengsel tot 0,8-1,8 door toevoegen van een waterige oplossing van een zuur, uit de amoxi'dllrchydrochloride bevattende waterige oplossing het amoxióül©trihydraat volgens op zichzelf bekende wijze geïsoleerd kan worden. De verbindingen met formule 1 worden bereid volgens de 10 werkwijzen als beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4.I27.57I en Italiaanse octrooischrift 26.865 A/79»

De p-hydroxyfenylglycinederivaten met formule 2 zijn algemeen bekend en beschreven in Belgisch octrooischrift 737*848.

Bij voorkeur worden zij bereid volgens de werkwijze als be-15 schreven in Europees octrooischrift 1.153 waarbij men het overeenkomstige Dane zout van het D(-)-p-hydroxyfenylglycine (gevormd door condensatie van p-hydroxyfenylglycine met methylacetoacetaat of met ethylacetoacetaat) met een chloorformiaat bestaande uit ethyl-chloorformiaat, methylchloorformiaat of isobutylchloorformiaat in 20 tegenwoordigheid van U-methylmorfoline of F,U-dimethylbenzylamine als katalysatoren.

De verwijdering van de beschermende enaminegroepen aan het einde van de reaktie wordt uitgevoerd met behulp van zoutzuur met

*7J

een concentratie van ongeveer 57$.

25 De fasen worden gescheiden en de waterige fase die het opge loste amoxialÏÏiBChloorhydraat bevat wordt gezuiverd. Uit de gezuiverde waterige fase isoleert men arnoxiaffinstrihydraat door neerslaan met behulp van een anorganische base zoals verdund ammoniak, verdunde natriumhydroxyde of verdunde kaliumhydroxyde tot de pH van 50 het mengsel een waarde bereikt van 4,7 tot 5»2. Het verkregen produkt wordt vervolgens gefiltreerd, gewassen en aan de lucht gedroogd.

Een van de voordelen verkregen volgens de werkwijze der uitvinding bestaat uit de zeer grote zuiverheid van het verkregen pro-35 dukt; de produkt en afkomstig van de hydrolyse van de boriumesters \ zijn namelijk buitengewoon oplosbaar in water.

\ Een ander voordeel ligt in de uitstekende opbrengsten die λ Λ Λ E 0 O 7 - 4 - verkregen worden bij de werkwijze der uitvinding daar men een omzetting tot in oplossing aanwezig amoxddffihe verkrijgt van 97$ en na isolatie nog een opbrengst aan amoxidffire van ongeveer 84$» welke opbrengsten hoger zijn dan de opbrengsten verkregen volgens de be-5 kende werkwijzen.

Bovendien bezit de werkwijze volgens de uitvinding het voordeel dat men gebruik maakt van de Dane zouten van p-hydroxyfenyl-glycine die zeer stabiel zijn en gedurende langere perioden bewaard kunnen worden in tegenstelling tot het gebruik van p-hydroxyfenyl-10 glycinechloridehydrochloride volgens andere octrooischriften, welke verbinding zeer duur en instabiel is zodat deze verbinding niet lang bewaard kan worden.

De uitvinding zal nu worden toegelicht aan de hand van een aantal uitvoeringsvoorbeelden.

15 Voorbeeld I.

a) Bereiding van een ethyxocarbonyl D-a-(l-carbotnethoxy propenyl)-amino-p-hydroxyfenylacetaat (met formule 2).

In een 2 liter rondbodemkolf brengt men 37*4 g (0,123 mol) methylkalium Dane zout van p-hydroxyfenylglycine/220 ml CH2C12(K.F. 20 0,0015$), voegt vervolgens 26 ml dimethylsulfoxyde (DMSO) toe en koelt het mengsel onder roeren tot -40°C. Men voegt dan 13,9 g ethylchloorformiaat en 0,35 ml N-methylmorfoline toe.

Tijdens de reaktie laat men de temperatuur ten hoogste stijgen tot -35°C waarna men nog 2 uren bij -35°C laat reageren.

25 Het reaktiemengsel koelt men af tot -50°C.

b) Bereiding van een suspensie van 6-APA boriumester in een oplosmiddel.

In een rondbodemkolf brengt men 266 ml watervrij CE^Cl^ (K.F. 0,0015$). Het oplosmiddel wordt afgekoeld tot -50°C en bij 30 deze temperatuur voegt men 80 g toe van een produkt verkregen volgens de werkwijze beschreven in de Italiaanse octrooiaanvrage 26.865 A/79, dat eeg^ö-A^Ji tussenprodukt bevat overeenkomende met 26,6 g 6-APA base/door middel van hogedruk vloeistof chromatogra-fie; bij I.R. analyse valt de verdwijning van de carboxylband bij 35 1800 nm op.

Qc) Bereiding van arnox^cilline.

Het tot -50°C gekoelde mengsel als verkregen onder trap (b) V 80 0 5 29 3 - 5 - • > wordt zo snel als mogelijk toegevoegd aan een suspensie van het in trap (a) verkregen ge mengde anhydride} de reaktietemperatuur wordt binnen een grens van -35° c gehouden en het mengsel nog 1 uur op deze temperatuur gehouden. 1 ml van het reaktiemengsel wordt ont-5 trokken en gehydrolyseerd met een oplossing van 4 ml water en 1 ml aceton; 30-50-10 μΐ van de oplossing worden op silicagel plaat GF 254 aangebracht en vergeleken met amoxiline en 6-ΑΡΔ.

Elutie wordt uitgevoerd in mengsel van 20 ml CE^-CN: 3,5 nil water: 2 ml HC00H.

10 De plaat wordt ontwikkeld met ninhydrine en de aanwezigheid van een amoxidïïine vlek en de afwezigheid van niet omgezet 6-APA beoordeeld. Aan het einde van de condensatie voegt men een mengsel toe van 133 ml water en 40 ml aceton; vervolgens voegt men druppelsgewijs bij 0°G een 37$’s zoutzuuroplossing toe 15 om het enamine te hydrolyseren tot een konstante pH in het gebied van 1-1,3» na 1 uur bij konstante pH scheiden zich twee fasen af.

De organische fase wordt opnieuw geëxtraheerd bij een pH van 1-1,3 met een mengsel van 133 ml water en 40 ml aceton.

De bij elkaar gevoegde amoxidffine·-bevattende waterige fasen 20 worden gefiltreerd en de hoeveelheid amoxidUiie wordt bepaald door middel van hogedruk vloeistof chromatografie en microbiologisch.

Men verkrijgt 95$ van de theoretische opbrengst. Bij kristalliseren volgens op zichzelf bekende wijze verkrijgt men 42,3 g amoxi.ciIli.ne trihydraat met een microbiologische zuiverheid van 847 mcg/mg met 25 een opbrengst van 82$.

Toorbeeld_II.

a) Bereiding van ethoxycarbonyl D-a-(l-carbomethoxypropenyl)-amino-p-hydroxyfenylacetaat (formule 2).

In een 2 1 rondbodemkolf brengt men 42,2 g (0,1388 mol) 30 methylkalium Dana zout van p-hydroxyfenylglycine in 250 ml water-vrij CSgClg (E.i1. 0,0015$); men voegt vervolgens 30 ml dimethyl-sulfoxyde toe en onder roeren koelt men het mengsel tot -40°C.

Men voegt dan 15,7 g (0,144 mol) ethylchloorformiaat en 0,4 ml lime thylmorf o line toe.

35 Tijdens de exotherme reaktie houdt men de temperatuur op

%Sf: ten hoogste -35° C waarna men het reaktiemengsel nog 2 uren bij -55° C

% laat reageren. Het reaktiemengsel wordt vervolgens afgekoeld tot '5O°8 0 0 5 29 3 - 6 - b) Bereiding van de boriumester van 6-ABA (formule l).

De rondbodemkolf brengt men 300 ml watervrij CHgCl^ (K.P. 0,0015$), voegt vervolgens 30 g (0,1388 mol) 6-APA bij kamertemperatuur toe en daarna 28,05 8 (0,277 mol) TEA waarna men het meng-5 sel 1 uur bij kamertemperatuur roert. Men koelt het mengsel af tot -50°C en voegt druppelsgewijs in 30 min. een oplossing toe van methyleenchloride die 29,49 8 ethylchloorboronaat bevat (256 ml van een oplossing die 11,52 g ethylchloorboronaat per 100 ml bevat).

Aan het einde van de toevoeging laat men het reaktiemengsel 2 uren 10 op -50°C staan. Bij onderzoek van een klein monster met behulp van infrarood spectrografie blijkt-de verdwijning van de carboxylband bij 1600 nm, c) Bereiding van amoxicilline

Het onder trap (b) verkregen reaktiemengsel, afgekoeld tot 15 -50°C, wordt zo snel als mogelijk toegevoegd aan een suspensie van het volgens trap (a) bereide gemengde anhydride. Men houdt de temperatuur tijdens de exotherme reaktie op ten hoogste -35°C en laat vervolgens het reaktiemengsel nog 1 uur bij deze temperatuur. Vervolgens onderwerpt men het mengsel aan een dunnelaagchromatografie 20 volgens voorbeeld I (c) waarbij men de aanwezigheid van amoxicIJEne en afwezigheid van niet omgezet 6-APA kan beoordelen. Aan het einde van de condensatie voegt men een tot 0°C voorgekoeld mengsel van 150 ml water en 45 ml aceton toe en hydrolyseert het enamine bij 0°C door toevoeging van 37$'s zoutzuuroplossing tot een konstante 25 pH van 1-1,3· Het mengsel roert men 1 uur bij een konstante pH.

De fasen worden gescheiden en de organische fase opnieuw geëxtraheerd bij pH 1-1,3 met een mengsel van 150 ml water en 45 ml aceton. De waterfasen worden bij elkaar gevoegd en gefiltreerd. Het juiste volume wordt gemeten en een klein monster daarvan onderwor-30 pen aan een hogedruk vloeistof chromatógrafie bepaling. In de oplossing blijkt 56,7 g amoxiCÜHne aanwezig te zijn overeenkomende met een theoretische opbrengst van 97»5$ welke waarde ook microbiologisch bevestigd werd. Aan de tot 0°C gekoelde waterfasen voegt men een oplossing toe van 10$ natriumhydroxyde om de pH op 5-5»2 te ' 35 brengen. Men leidt de kristallisatie in door toevoegen van ent- krïstallen en na beëindiging van de kristallisatie laat men het mengsel nog 5 uur staan onder roeren. Men filtreert het neerslag 80 0 5 29 3 - 7 - af, wast met 100 ml water: ace ton. (lïl) en vervolgens met ace ton. Fa drogen in vacuum verkrijgt men 48,3 g ver binding overeenkomende met 83$ van de theoretische opbrengst, met een microbiologische zuiverheid van 845 mcg/mg.

5 a_7j) = +503° °P droge basis.

Wanneer men het gemengde anhydride van het Dane zout (formule 2) beschreven onder trap (a) bereidt onder toepassing van alleen CH^Clg verkrijgt men geen gemengd anhydride.

Het is onmogelijk om deze reaktie alleen in dimethylsulfoxyde 10 uit te voeren daar dit, bij een temperatuur van ongeveer 18°0, vast wordt en het derhalve onmogelijk is om de voor de synthese noodzakelijke lage temperaturen te bereiken. Voor de synthese is het noodzakelijk om de temperatuur toe te passen van -50°C, en om dit te bereiken is het derhalve noodzakelijk om het dimethylsulfoxyde te 15 mengen met een oplosmiddel dat vast worden van de dimethylsufoxyde voorkomt.

Yoor dit doel geschikte verbindingen zijn irethyl een chloride en chloroform.

Yoorbeeld__III.

20 Dezelfde werkwijze als beschreven in voorbeeld II wordt her haald, doch in trap (a) gebruikt men 20 ml dimethylsulfoxyde in plaats van 30 ml. Het eindprodukt wordt gekristalliseerd uit de uiteindelijke waterige oplossing door afkoelen tot 0°C en brengen op een pH van 5-5>2 met een 10$'s kaliumhydroxydeoplossing. Kris-25 tallisatie wordt ingeleid door enten met 0,1 g produkt waarna men de oplossing 5 uren bij 0°C laat kristalliseren. De verkregen vaste stof wordt afgefiltreerd, gewassen met 100 ml water:aceton (lil) en vervolgens met 50 ml aceton. Vervolgens wordt het residu bij -40° C gedroogd in een luchtoven waarbij men 48,8 g amoxicilüieverkrijgt 30 overeenkomende met 84$ van de theoretische opbrengst, het amoxiaffihe' bezit een zuiverheid van 98,8$ volgens mercuriometrische bepaling, = +5°2° °P droge basis, K.P. 13,8$.

Voorbeeld IV.

Men gebruikt dezelfde werkwijze als beschreven in voorbeeld 35 II behoudens dat men in trap (a) 38 ml dimethylsulfoxyde gebruikt in plaats van 30 ml. Het produkt wordt geïsoleerd door kristalliseren waarbij men 46,2 g amoxialÜB' verkrijgt overeenkomende met een 8005293 - 8 - opbrengst berekend op de theoretische opbrengst van 79,5$ met een microbiologisch bepaalde zuiverheid van 846 mcg/mg, K.F. 14,1$· /~a = +300° op droge basis.

Voorbeeld V.

5 a) Bereiding van 2- e thoxycarb onyl - <x- (1- car b ome thoxyp r op enyl) - amino-p-hydroxyfenylacetaat (formule 2).

In een 2 1 rondbodemkolf brengt men 44»31 8 (0,145 mol) methylkalium Dane zout van p-hydroxyfenylglycine in 250 ml water-vrij methyleenchloride (K.F. 0,0015$), waarna men 30 ml dimethyl-10 sulfoxyde toevoegt en onder roeren bij -25°C nog 16,5 g (0,152 mol) ethylchloorformiaat en 0,4 ml F-methylmorfoline. Tijdens de exo-thermo reaktie houdt men de temperatuur op ten hoogste -20°C. Het reaktiemengsel wordt nog 1 uur op -20°C gehouden en vervolgens afgekoeld tot -50°C.

15 b) Bereiding van de 6-ΔΡΑ boriumester (formule l).

Men gebruikt dezelfde werkwijze en dezelfde stoechiometrische hoeveelheden als in voorbeeld II, trap (b).

c) Bereiding van arnoxi-dJlietrihydraat.

Men gebruikt dezelfde werkwijze als beschreven in voorbeeld 20 II, trap (c).

In de amoxidïöe-rijke vloeistoffen wordt het gehalte aan amoxidl&e bepaald door middel van hogedruk vloeistof chromatografie en op microbiologische wijze waarbij de oplossing 56,1 g amoxiiÖB blijkt te bevatten overeenkomende met 96,5$ van de theoretische op-25 brengst. Ha kristalliseren verkrijgt men 47,7 g amoxidIBhe overeenkomende met 82$ van de theoretische hoeveelheid met een zuiverheid van 98,8$ bepaald met behulp van hogedruk vloeistof chromatografie en op microbiologische wijze 851 mcg/mg,K.P. 13,8$>k£"" +302° op droge basis.

30 Voorbeeld_VI.

a) Bereiding van ethoxycarbonyl D-a-(l-carbomethoxypropenyl)-amino-p-hydroxyfenylacetaat (formule 2).

In een rondbodemkolf van 2 1 brengt men 46,4 8 (0,152 mol) methylkalium Dane zout van p-hydroxyfenylglycine in 250 ml watervrij 35 méthyleenchloride (K.F. 0,0015$) voegt vervolgens 30 ml dimethyl-sulfoxyde toe en koelt het mengsel onder roeren tot -30°C. Yervol-V j gens voegt men 17,26 g (0,159 mol) ethylchloorformiaat en 0,4 ml \ 80 0 5 29 3 *>- »» - 9 - H-rmethylmorfoline toe· Het mengsel wordt tijdens de reaktie op een temperatuur gehouden van ten hoogste -25° C en vervolgens wordt het reaktiemengsel nog 1 uur op -25°C gehouden. Daarna koelt men het reaktiemengsel tot -50°C.

5 h) Bereiding van de 6-APA boriumester (formule l).

Men past dezelfde werkwijze toe als beschreven in voorbeeld II, trap (b).

c) Bereiding van amoxidlliretrihydraat.

Men gebruikt dezelfde werkwijze als beschreven in voorbeeld 10 II, trap (c).

In de vloeistoffen wordt met behulp van hogedruk vloeistof chroma to grafie het gehalte aan amoxialline bepaald wat overeenkomt met 56,4 g of wel 97$ van de theoretische opbrengst. Men isoleert 47,2 g amoxilinetrihydraat wat overeenkomt met 81,5/¾ van het theo-15 retische opbrengst met een zuiverheid van 98,750.

Voorbeeld VII.

a) Bereiding van ethoxycarbonyl D-cc- (1- car home thoxypr op enyl) -amino-p-hydroxyfenylacetaat (formule 2).

In een rondbodemkolf brengt men 42,2 g (0,1388 mol) van het 20 methylkalium Dane zout van p-hydroxyfenylglycine in 90 ml watervrij dimethylformamide (IMF). Men koelt het mengsel tot -40°C en voegt 15,7 g ethylchloorformiaat en 0,4 ml EF-methy 1 forfoline toe. Men houdt de temperatuur tijdens de exotherme reaktie op ten hoogste -35°C en laat vervolgens het mengsel nog 2 uren bij -35°C reageren.

25 Het reaktiemengsel wordt tenslotte afgekoeld tot -50°C.

b) Bereiding van de 6-APA boriumester (formule l).

Voor de bereiding van de 6-APA boriumester gebruikt men dezelfde werkwijze en hoeveelheden als beschreven in voorbeeld II, trap (b).

30 c) Bereiding van amoxidïlxBtrihydraat.

Aan de tot -50°C afgekoelde, in trap (a) bereide, suspensie voegt men zo snel mogelijk het reaktiemengsel toe als verkregen in trap (b). Tijdens de reaktie houdt men de temperatuur op ten hoogste -25° C waarna men het mengsel nog 1 uur op -25° C houdt. Vervolgens 35 hydrolyseert men 1 ml van de suspensie met 5 ml van een mengsel van LJÜ water:aceton (4:l)« Men voert een dunnelaag chromatografie analyse uit volgens de techniek als beschreven in voorbeeld I. Met 80 0 5 29 3 - 10 - ninhydrine wordt de aanwezigheid van amoxidïÜB aangetoond en de afwezigheid van niet omgezet 6-APA. Het reaktiemengsel wordt behandeld onder toepassing van dezelfde werkwijze en hoeveelheden als beschreven in voorbeeld II, trap (c). De hoeveelheid amoxialliB in 5 de vloeistof wordt bepaald door middel van hogedruk vloeistof chromatografie waarbij men 56,4 S amoxidJIiB bepaalt wat overeenkomt met 97$ van de theoretische opbrengst.

Uit de vloeistof verkrijgt men door kristalliseren 48,8 g arnoxiaOïB wat overeenkomt met 85,8$ van de theoretische opbrengst, 10 waarbij het amoxiïaïïiiBde volgende analytische eigenschappen bezit: K.F. = 13,8$ a = +302° op droge basis.

Spectrofotometrische titer = 98»8$ op droge basis.

Microbiologische titer = 851 mcg/mg.

15 Voorbeeld VIII.

Men gebruikt dezelfde werkwijze als beschreven in voorbeeld II doch in trap (a) gebruikt men 220 ml chloroform in plaats van 250 ml CH2C12.

De amoxiaöie -rijke vloeistoffen koelt men af tot 0° C waarbij 20 men door kristallisatie 46,8 g amoxiaUiBtrihydraat verkrijgt overeenkomende met een opbrengst van 80,5$ van de theoretische opbrengst.

7oorbeeld_IX.

a) Bereiding van ethoxycarbonyl D-a-(l-carbomethoxypropeny3)§ 25 amino p-hydroxyfenylacetaat (formule 2).

In een 2 1 rondbodemkolf brengt men 250 ml watervrij CïïgCl,, (K.P. 0,0015$) en 44»5 S (0,145 mol) van het methylkalium Dane zout van p-hydroxyfenylglycine. Onder roeren voegt men 30 ml dimethyl-sulfoxyde toe en koelt het mengsel tot -40°C. Men voegt dan 16,5 g 30 (0,151 mol) ethylchloorformiaat en 0,4 ml N-methylmorfoline toe.

Tijdens de exotherme reaktie houdt men de temperatuur op ten hoogste -35°C waarna men het mengsel 2 uren bij -35°C laat reageren.

Het reaktiemengsel wordt vervolgens gekoeld tot -50°C.

b) Bereiding van 6-APA boriumester (formule l).

__ 35 Ih een rondbodemkolf brengt men 500 ml watervrij CH^Cl^ (K.P. 0,0015$) waarna men 30 g (0,1388 mol) 6-APA en 25,15 g \ (0,249 mol) ΤΞΑ toevoegt bij kamertemperatuur. Men laat het mengsel \ 80 0 5 29 3 - 11 - 1 uur bij kamertemperatuur staan. Men koelt dan af tot -45° C en voegt In 30 min. druppelsgewijs een oplossing toe van 26,5 g (0,249 mol) ethyleenchloorboronaat in methyleenchloride (230 ml oplossing die 11,52 g boronaat per 100 ml bevat).

5 Fa de toevoeging laat men het mengsel 2 uren bij -45°C.

Bij infrarood controle van een monster blijkt de verdwijning van de carboxylband bij I6OO nm.

c) Bereiding van amoxidBitfctrihydraat.

Men past dezelfde werkwijze toe en dezelfde hoeveelheden als 10 beschreven in voorbedM II, trap (c). In de oplossing bepaalt men door middel van hogedruk vloeistof chromatografie de hoeveelheid amoxidlïfetrihydraat welke 55»3 g blijkt te zijn «wat overeenkomt met 95/£ van de theoretische hoeveelheid. Bij kristalliseren verkrijgt men 47»5 g> 81,3$ van de theoretische hoeveelheid, van het 15 arnoxidUiie met een spectrofotometrische zuiverheid van 99»2$, K.3P. 14,2$.

Voorbeeld X.

a) Bereiding van ethoxycarbonyl D-α-(l-carbomethoxypropenyl)-amino p-hydroxyfenylacetaat (formule 2).

20 Men past dezelfde werkwijze en hoeveelheden toe als beschre ven in voorbeeld IX, trap (a).

b) Bereiding van de 6-APA boriumëster (formule l).

In een xondbodemkolf brengt men 300 ml watervrij CHgCl,, (K.F. 0,0015$) en voegt 30 g (0,1388 mol) 6-APA en 21 g (0,207 mol) ISA 25 toe bij kamertemperatuur. Men houdt het mengsel 1 uur op kamertemperatuur. Men koelt dan tot -50°C en voegt in 30 min. druppelsgewijs een oplossing toe van 22,12 g (0,208 mol) ethyleenchloorboro-naat in methyleenchloride toe (192 ml oplossing welke 11,52 g boronaat per 100 ml bevat).

30 Fa de toevoeging laat men het mengsel 2 uren op -50°C. Bij infrarood controle blijkt de verdwijning van de carboxylband bij l600 nm.

c) Bereiding van amoxidïïintrihydraat.

Tewerk gaande op dezelfde wijze en onder toepassing van f35 dezelfde hoeveelheden als beschreven in voorbeeld II, trap (c), kristalliseert men amoxialÖTetrihydraat uit in een hoeveelheid van 11 44,2 g wat overeenkomt met 78$ van de theoretische opbrengst, met 80 0 5 29 3 - 12 - een microbiologische zuiverheid van 851 mcg/mg en een K.P. van 13,8?$.

Yoorbeeld_XI.

a) Bereiding van ethoxycarbonyl Ό-α-(1-carbomethoxypropenyl) 5 amino-p-hydroxyfenylacetaat (formule 2).

De bereiding wordt uitgevoerd onder toepassing van dezelfde werkwijze en hoeveelheden als beschreven in voorbeeld IX, trap (a).

b) Bereiding van de 6-APA boriumester (formule l).

Onder toepassing van dezelfde werkwijze als beschreven in 10 voorbeeld IlAerkrijgt men de 6-APA boriumester onder toepassing van 30 g, (0,1388 mol) 6-APA, 30,84 g (0,304 mol) TEA en 32,45 g ethyleenchloorboronaat in methyleenchloride (281 ml van een oplossing die 11,52 g boronaat per 100 ml bevat).

c) Bereiding van arnoxidDare trihydraat.

15 Tewerk gaande op dezelfde wijze en met dezelfde hoeveelheden als beschreven in voorbeeld II (c) verkrijgt men 46,5 g amoxidlline trihydraat met een opbrengst van 80$ van de theoretische opbrengst en een microbiologisch bepaalde zuiverheid van 852 mcg/mg, X.P. 13,3$ Γa_7p =+300° op droge basis.

20 Voorbeeld XII.

a) Bereiding van ethoxycarbonyl D-a-(l-carbomethoxypropenyl)-amino p-hydroxyfenylacetaat (formule 2).

Men bereidt deze verbinding onder toepassing van dezelfde werkwijze en dezelfde hoeveelheden als beschreven in voorbeeld IX, 25 trap (a).

b) Bereiding van de 6-APA boriumester (formule l).

Op dezelfde wijze als beschreven in voorbeeld II, trap (b) verkrijgt men de 6-APA boriumester onder toepassing van 30 g (0,1388 mol) 6-APA, 26,6 g (0,263 mol) TEA en 26,5 g (0,249 mol) 30 ethyleenchloorboronaat inimthyleenchloride (230 ml van een oplossing die 11,52 g boronaat per 100 ml bevat).

c) Bereiding van arnoxidllië.trihydraat.

Onder toepassing van dezelfde werkwijze en dezelfde hoeveelheden als beschreven in voorbeeld II, trap (c) verkrijgt men 46,8 g 35 amoxicülfetrihydraat overeenkomende met 80,4$ van de theoretische op-brengst, met een spectrofotometrisch bepaalde zuiverheid van 98,7$ en een K.P. van 14$.

\ 80 0 5 29 3 - 13 -

Bij herhaling van dezelfde urerkwijze als hierboven beschreven, doch onder toepassing van de bereiding van de verbindingen met formule 2 als beschreven in trap (a) van oplosmiddelen in de vorm van mengsels van oplosmiddelen en eo-oplosmiddelen zoals beschreven 5 in Europees octrooi schrift 1.133 in plaats van BMSO+CHgClg» verkrijgt men veel lagere opbrengsten van ongeveer 40$ met de enige uitzondering van het mengsel dimethylformamide en methyleenchloride; in dit geval bevordert het dimethylformamide de reaktie (zie voorbeeld Til) daar het methyleenchloride een inert oplosmiddel is.

10 Tolgens de voorgaande voorbeelden verkrijgt men een amoxicüli netrihydraat met de volgende analytische eigenschappen.

ÏÏiterlijk: kristallijn wit poeder.

Infrarood: positieve identificatie tegen een standaard.

Tochtigheid (K.F.): 13,3$· 15 pH (100 mg/ml): 4»9»

Hogedruk vloeistof chromatografie bepaling: 99*5 gew.$ (op droge basis).

Aminobepaling: 99 gew.$

Jodometrische bepaling: 98,3 gew.$.

20 Zuurbepaling: lol$.

Spectrofotometrische bepaling: 99>1 gew.$.

20 o

Specifieke rotatie /"*J +303° ·

Doorlaatbaarheid (l$ HC1 IN 400 ιημ) : 85$.

Oplosmiddelen bepaald met behulp van gasvloeistofchromatografie: 25 Dimethylaniline (niet aantoonbaar).

Methyleenchloride (0,08$).

Aceton (0,1$).

Triethylamine (0,03$).

Microbiologische titer: 855 mcg/mg.

30 Stabiliteit 65° x 7 dagen: 845 mcg/mg.

Giftigheid: niet giftig.

% 80 0 5 29 3

Claims (7)

1. Werkwijze voor de bereiding van 6-D-a-amino-p-hydroxyfenyl-aceetamido penicillaanzuur, met het kenmerk, dat men onder watervrije omstandigheden en bij een temperatuur tussen -20°C en -60°C een verbinding met formule 1 waarin R een waterstofatoom 5 of een groep met formule 3 voorstelt en n 2 of 3 bedraagt, laat reageren met een verbinding met formule 2 waarin R^ een alkylgroep en Rg een alkoxygroep is, in een oplosmiddel bestaande uit alleen dimethylformamide of dimethylsulfoxyde gemengd met methyleenchlori-de of chloroform.

2. Werkwijze volgens conclusie 1, m e t het kenmerk, dat men het verkregen reaktiemengsel als volgt behandelt: a) het mengsel wordt gehydrolyseerd met water ter verkrijging van twee fasen; b) de pH van het reaktiemengsel wordt verlaagd tot ongeveer 0,8 tot 15 1,8 door toevoegen van een waterige oplossing van een zuur ter ver wijdering van de enaminegroep; c) de waterfase wordt afgescheiden en behandeld volgens op zichzelf bekende wijze om het daarin aanwezige arnoxiSOfe!chloorhydraat om te zetten in amoxidBjbefcrihydraat, en 20 d) het verkregen produkt wordt geïsoleerd.

3. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, met het kenmerk, dat de waterige zure oplossing een oplossing is van zoutzuur met een concentratie van ongeveer 37$·

4. Werkwijze volgens conclusie 1-3» met het kenmerk, 25 dat de temperatuur waarbij men de verbinding met formule 1 laat reageren met een verbinding met formule 2 ongeveer -35°C bedraagt.

5. Werkwijze volgens conclusies 1-4» met het kenmerk, dat R^ een groep is bestaande uit methyl, ethyl of isobu-tyl.

6. Werkwijze volgens een of meer der voorgaande conclusies, met het kenmerk, dat een g^oep is bestaande uit methoxy of ethoxy.

7. Farmaceutisch preparaat dat 6-D-a-amino-p-hydroxyfenylaceet-amido penicillaanzuur bevat, met het kenmerk, dat het 35 preparaat een 6-D-a-amino-p-hydroxyfenylaceetamido penicillaanzuur verkregen onder toepassing van de werkwijze volgens een of meer der \ voorgaande conclusies, bevat. 80 0 5 29 3 A