MXPA97002357A - Microparticulas secadas por aspersion como vehiculos terapeuticos - Google Patents

Abstract

Las micropartículas de un material soluble en agua, que son suaves y esféricas, y por los menos 90%de las cuales tiene un tamaño de partícula medio de masa de 1 a 10æm, y que llevan un agente terapéutico o diagnóstico o el uso de dicho agente como el material soluble en agua, puede exitosamente utilizarse en inhaladores de polvo seco para surtir dicho agente.

Description

ItlCROPARTICULAS SECADAS POR ASPERSIÓN COMO VEHÍCULOS TERAPÉUTICOS CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a rnicroparticulae secadas por aspersión y a s? uso como vehículos terapéuticos. En particular, la invención se refiere a medios para la liberación de agentes ce diagnóstico y terapéuticos, asi como productos de biotecnología, incluyendo terapéuticos basados en la tecnología de ODNr.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La ruta de administración mas comúnmente usada para los agentes terapéuticos, oral o gastrointestinal, es ampliamente inaplicable a péptidos y proteínas derivados de la industria del ADNr. La susceptibilidad de péptidos y proteínas normalmente portados en la sangre al ambiente ácido/proteolitico del intestino, impide ampliamente esta ruta de administración. El medio lógico de administración es el intravenoso, pero esto presenta problemas de consentimiento deficiente del paciente durante la administración crónica y muy comúnmente el espacio de primer paso rápido por el hígado, dando como resultado tiempos de vida i.v. cortos. Recientemente, el potencial para la liberación mediante transferencia en mucosas ha sido explorado. Aunque la liberación nasal ha sido extensamente explorada, la liberación potencial ce péptidos a través de los conductos de aire pulmonares está ampliamente inexplorada. Las celdas alveolares, en su propio derecho, proveen una barrera efectiva. Sin embargo, incluso el pasaje de material hacia la región alveolar representa ?n impedimento signi icativo para este método de administración. Existe un tamaño óptimo de partícula que accesará las regiones rnás bajas de los conductosde aire pulmonares, es decir, un diámetro aerodinámico de >5 u . Las partículas sobre este tamaño serán atrapadas por impacción en los canales de aire superiores, por lo que en preparaciones de suspensiones comerciales normales, únicamente 10-30% de las partículas, de las cuales son suspensiones polidispersadas normalmente alcancen los conductos de aire más bajos. Los métodos normales de aerosolizar fármacos para su inhalación incluyen la nebulización, los inhaladores de dosis medidas y los sistemas de polvo seco. La nebulización de soluciones acuosas requiere amplios volúmenes de fármacos e incluye el uso de dispositivos bultosos y no portátiles. El método de administración más común al pulmón es mediante eL uso de dispositivos basados en propulsores volátiles, comúnmente llamados inhaladores de dosis medida. El diseño básico es una solución de propulsor, comúnmente CFC 11, 12 ó 114, que contiene ya sea fármaco disuelto o una suspensión del fármaco en un frasco presurizado. La dosificación se obtiene presionando un accionador que libera un aerosol de propulsor de suspensión o solución de fármaco el cual es llevado en los conductos de aire. Durante su pasaje hacia el pulmón, el propulsor se evapora para producir precipitados microscópicos de la solución o partículas libres de la suspensión. La dosificación es fácilmente reproducible y barata pero existe una creciente presión ambiental para reducir el uso de los CFCE.. Más aún, el uso de solventes de CFC sigue siendo ampliamente incompatible con muchos de los fármacos de biotecnología moderna, debido a su susceptibilidad a la desnaturalización y baja estabilidad. Concurrentemente, existe una inclinación hacia los dispositivos de polvo seco, los cuales consisten de polvos secos de fármacos usualmente mezclados con un excipiente, corno lactosa o glucosa, lo cual facilita la aerosolización y dispersión de las partículas de fármaco. La energía para la disgregaciór es comúnmente suministrada por la respiración o inspiración de aire a través del dispositivo. Les fármacos son normalmente micronizados para reducir el tamaño de partícula. Este alcance no es aplicable para los productos de biotecnología. En general, los productos de biotecnología son disponibles en bajas cantidades y, además, son susceptibles a los métodos actualmente empleados para secar y icronizar antes de mezclar con un excipiente. Adicionalrnente, es particularmente difícil proveer mezclas de fármaco y excipiente que sean lo suficientemente libres de flujo para que fluyan y dosifiquen reproduciblernente en los inhaladores de dosis múltiple modernos como el Turbohaler (flstra) y I?skhaler (Glaxo). Los estudios han revelado que, contrario a lo que se espera, las rnicropartículas de ealbutamol (esféricas) secadas por aspersión mostraron mayores fuerzas de cohesión y de adhesión que las partículas de tamaño similar de fármaco micronizado. Las micrografías de electrón del material secado por aspersión revelaron que las partículas poseían superficies porosas y ásperas. Ha hpanah y otros reportaron en la Conferencia Farmacéutica Británica de 1994, que las icropartículas de albúmina que incorporan salbutamol han sido producidas mediante el secado por aspersión y fueron de un tamaño adecuado para la liberación de fármaco respiratorio, es decir, 1-5 µm. El propósito fue el de encapsular el salbuta ol para su liberación lenta. No parece que el producto sea de micropartículas substancial y uniformemente suaves o esféricas que tengan propiedades de flujo satisfactorias para los inhaladores de polvo seco rnultidosis. Los agentes de diagnóstico que consisten de microcapsulas huecas han sido usados para mejorar la formación de imagen de ultrasonido. Por ejemplo, el documento EP-A-458745 (Sintética) describe un procedimiento para preparar microglobos inflados con aire o gas mediante la polimerización interfacial de polímeros sintéticos como poliláctidos y poliglicólidos. El documento ¡JO-A-9112823 (Delta) describe un procedimiento similar usando albúmina. Uheatley y otros (1990) Biornaterials 11:713-717, describen la gelación ionotrópica de alginato para formar micrDburbujas de un diámetro mayor a 30 um. El documento UO-A-9109623 describe liposomae para su uso como agentes de contraste de ultrasonido. P-zyborowski y otros, Eur. 3. Nucí. Med. 7:71-72 (1982), describen la preparación de microesferas de albúmina de suero humano (HSA) mediante el secado por aspersión, para radioetiquetado y su uso subsecuente en la formación de imagen scintigráfica del pulmón. No se mencionó que las microesferas fueran huecas y en la repetición del trabajo por los presentes inventores, se produjeron microesferas sólidas predominantemente y deficientemente formaron microesféras sólidas, fl menos que las partículas sean huecas, no son adecuadas para la ecocardiografía. Has aún, las rnicroesferas se prepararon en un procedimiento de un paso, el cual se ha descubierto que no es adecuado para preparar microcápsulas adecuadas para la ecocardiografía; fue necesario en el procedimiento anterior remover albúmina no desnaturalizada de las microesiferas, y aparentemente se obtuvo una escala de tamaño amplia de rnicroesferas, al haber sido necesario un paso de corte adicional. Przyborowski y otros se refieren a dos descripciones anteriores ce métodos para obtener partículas de albúmina para la scintigrafía de pulmón. Aldrich a Johneton (1974) Int.3.

Appl. ad. Isot. 25:15-18, describen el uso de un disco giratorio para generar partículas de un diámetro de 3-70 µrn, las cuales son posteriormente desnaturalizadas en aceite caliente. Eil aceite es removido y las partículas etiquetadas con radioisótopos. Raju y otros (1978) Isotopenpraxis 14(2) :57-61, usaron el mismo disco giratorio pero desnaturalizaron la albúmina simplemente calentando las partículas. En ninguno de los dos casos se mencionaron micropartículas huecas, y las partículas preparadas no fueron adecuadas para la ecocardiografía. EJ documento EP-A-0606486 (Teijin) describe la producción de polvos en los cuales un ingrediente activo se incorpora en partículas pequeñas, con vehículos que consisten de celulosa o de derivados de celulosa. La intención es la de prevenir que las partículas de fármaco se adhieran a las capsulas gelatinosas usadas en un inhalador de polvo seco de dosis unitaria. La página 12 de esta publicación se refiere al secado por aspersión de "medicamento y base" para obtener partículas ce las cuales 80% o más tenían un tamaño de 0.5-10 µm. No se dieron indicaciones acerca de qué condiciones deben ser usadas para obtener de esta forma tal producto. El documento EP-A-0611567 (Teijin) está rnás específicamente relacionado con la producción de polvos para inhalación, mediante secado por aspersión. El vehículo es una celulosa, elegida por su resistencia a la humedad. Las condiciones que se dan en el ejemplo 1 íetanol como solvente, 2-5% p/v de soluto) significan que no existe un control de la morfología de superficie, y el ejemplo 4 reporta una fracción respirable de conducto de aire inferior deficiente (12%), indicando propiedades de dispersión deficientes. Las partículas esféricas üe obtienen aparentemente a un alto contenido de fármaco, indicando que la morfología de partícula es regida por los contenidos de fármaco y vehículos respectivos. Conté y otros (1994) Eur. 3. Pharm. Biopharrn. 40(4) : 203 -208, describen el secado por aspersión de solución acuosa, con una concentración máxima de soluto de 1.5%. El alto contenido de fármaco es requerido, para obtener así las partículas más cercanamente esféricas. Esto implica una morfología de partícula encogida y rugosa. Además, después de la suspensión en butanol, para facilitar el análisis de Coulter es aparent€?rnente necesaria la sonicación, implicando que las partículas no están completamente secas. Ee. un objeto de la presente invención proveer un vehículo y composición de liberación terapéutica que estén mejor adaptados que los productos de la técnica anterior para la liberación hacia los alveolos en particular.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De conformidad con la presente invención, ha sido sorprendentemente descubierto que, en micropartículas (y también icrocápsulas y microesferas) que también son adecuadas como producto intermedio, es decir, antes de la fijación, en la producción de rnicrocáps?las que contienen aire para la formación de imagen de diagnóstico, v.gr. lo que se describe en el documento UO-A-9218164 como "microcápsulas intermedias", el material formador de pared es substancialmente inafectado por el secado con aspersión. De esta manera, micropartículas, nicroeeferas o microcápsulas altamente uniformes de materiales sensibles al calor como las enzimas, péptidos y proteínas, •j . qr. , USA y otros polímeros, pueden ser preparados y formulados como polvos secos, para el uso terapéutico o de diagnóstico. En contraste con la técnica anterior, se ha descubierto ahora también que se pueden preparar vehículos solubles y efectivos para agentes terapéuticos y de diagnóstico mediante secado por aspersión, y los cuales son micropartículas esféricas de un material soluble en agua de libre flujo y suaves, v.gr., albúmina de suero humano (HSA), que tienen un tamaño de partícula medio de masa de 1 a 10 µm. Más en general, un procedimiento para preparar microcápsulas de la invención consiste en atomizar una solución (o dispersión) de un material formador de pared. Un agente terapéutico de diagnóstico puede ser atomizado con la misma, o copulado a las rnicrocápsulae asi producidas. Alternativamente, el material puede ser un ingrediente activo en sí. En particular, se ha descubierto que, bajo las condiciones mencionadas en la presente, y rnás generalmente descrito por Sutton y otros (1992), v.gr., usando una combinación apropiada de concentraciones de soluto rnás altas y relaciones rnás altas de flujo de aire: líquido que Haghpanah y otros, y mejoradores de formación de coraza, rnicropartículas esféricas notablemente suaves de varios materiales pueden ser producidas. La naturaleza esférica de las micropartículas se pude establecer por medios diferentes al del mero análisis de tamaño máximo, es decir, la técnica de difracción de luz láser descrita por Haghpanah y otros. Has aún, el ta año de partícula y la distribución de tamaño del producto se pueden controlar dentro de una escala más estrecha y con una habilidad de reproducción más alta. Por ejemplo, mediante el análisis de Coulter, 98% de las partículas pueden ser menores de 6 µm, en una base numérica, dentro de una escala de entrecuartilas de 2 µm y con menos de 0.5 µrn de variación de tamaño medio entre los lotes. Más aún, cuando se probó en un inhalador ce polvo seco bajo desarrollo, se obtuvo una dosificación reproducible y la aerolización subsecuente bajo condiciones de flujo normales (30 1/min) resultaron en una separación excelente de micropartículas del excipiente. Las cápsulas no fijas de esta invención, compuestas de HSA no desnaturalizada o de otro materiale secable por aspersión, poseen superficies altamente lisas y pueden ser procesadas con niveles relativamente bajos de excipientes para producir polvos de libre flujo ideales para inhaladores de polvo seco. Usando este alcance, es posible producir rmcrocápsulas heterogéneas que consistan de un principio activo y de excipientee de suspensión. Esto tiene la ventaja de producir polvo de libre flujo de principios activos, el cual puede ser procesado adicionalrnente para dar polvos que se dosifiquen y se aerosolicen con una habilidad de reproducción y precisión excelentes. Además, el procedimiento de secado por aspersión, esta forma normal, eleva una desnaturalización y conversión relativamente pequeña a polímeros en la producción del polvo de libre flujo., En todos los casos, el tamaño de la suspensión de microcápsul puede ser tal que el 90% de la masa esté dentro del tamaño deseado, v.gr., la región respirable de 1-5 µrn. Por lo tanto y en esencia, se ha definido cómo producir rnioropartículas que sean: predominantemente de tamaño de 1-5 µ ; Jisas y esféricas; que contengan gas y compuestas de moléculas proteínicas no dañadas y que puedan ser almacenadas y embarcadas antes de otros pasos de procesamiento. Para preparar rnicrocápsulcs intermedias para la formación de imagen de ultrasonido, se han definido aquellas características de un procedimientos y el polvo resultante, los cuales son esenciales para la producción de polvos superiores para inhaladores de polvo seco (DPI's). Se ha descubierto que muchas de las pruebas que se han desarrollado para el agente de ecocontraste son adecuadas para definir aquellos parámetros de las partículas que son ventajosos para los polvos DPI, a saber; ecogenicidad y resistencia a la presión de partículas entre lazadas definiendo micropartículas perfectamente formadas; evaluación microscópica en DPX o solventes, definiendo la esfericidad y las propiedades de contenido de gas de cápsulas intermedias solubles; tamaño y análisis de distribución de tamaño y también la prueba de proteína monomérica para definir el nivel final de fijación del producto. E pecialmente para su uso en terapia, es necesario un cuidado considerable para poder controlar el tamaño de partícula v la distribución de tamaño. Se ha elegido un polímero biocompatible que cuando es entrelazado permanece inocuo y también se ha aprendido cómo entrelazar reproductivamente esta molécula. Para obtener un entrelazamiento controlado, se han divorciado los procedimientos de formación de partícula y de entrelazamiento lo cual no hacen otros procedimientos de emulsión y de evaporación de solvente. Esto significa que el paso inicial del procedimiento no daña al material formador de pared. Se han definido los parámetros particulares, los cuales son importantes para la formación de partícula completa y adicionalmente se han definido condiciones más ventajosas que producen partículas más intactas. Para elegir el HSA como un polímero particularmente favorable se ha elegido también una molécula portadora potencial, la cual puede: proteger moléculas lábiles; mejorar la asimilación de péptidos a través del pulmón; unir fármaco de bajo peso molecular a través de afinidades de unión naturales y ser covalente ente modificado para portar fármacos a través de barreras celulares hacia la circulación sistérnica y más allá. Cuando los investigadores usan el secado por aspersión para producir micropartículas de dimensiones pequeñas, han tendido a usar solventes volátiles, lo cual fomenta el encojimiento rápido de la gotita. Alternativamente, los investigadores han usado alimentadores con bajo contenido de soluto para mantener la viscosidad de la solución baja, para mejorar la producción de gotitas más pequeñas. En ambos casos, cuando las rnicropartículas son producidas, el procedimiento tiene muy poco impacto en la morfología final; esto es debido a los componentes usados para formar las partículas. Se ha asimilado la extensa enseñanza de cómo producir partículas de tamaño controlado de HSA y se ha aplicado esto a muchos otros materiales incluyendo fármacos activos. Es posible usar contenidos de soluto relativamente altos, v.gr., 10-30% p/v opuesto a C.5-2%, para producir icroparticulas que consistan de un bajo peso molecular activo con lactosa; activo únicamente: péptidos con HSA y vehículos poliméricos modificados con activo. Se ha descubierto ahora que es el procedimiento el que dicta la morfología final de partícula, más que la composición de los solutos. Además, es ahora posible usar combinaciones de solventes acuosos y miscibles en agua para mejorar la morfología de partícula. De esta manera, se tiene una metodología impulsada por un "procedimiento", la cual permite la producción benéfica de partículas de tamaño controlado esféricas y lisas adecuadas para la liberación pulmona . S€' ha descubierto que el procedimiento de la invención p>uede ser controlado para obtener microesferas con características deseadas. De esta manera, la presión a la cual la soluciór. de proteína es suministrada a la boquilla de aspersión puede ser variada, por ejemplo de 1.0-10.0 x 10*5 Pa, preferiblemente 2-8 x 105 Pa, y rnuy preferiblemente aproximadamente 7.5 x 105 Pa. Otros parámetros se pueden variar como se describirá posteriormente. De esta manera, se pueden obtener microesferas novedosas. Ur aspecto adicional de la invención provee rnicroesferae huecas en las cuales más de 30%, preferiblemente rnáe de 40%, 50% ó 60% de las microesferas tienen un diámetro dentro de una escala de 2 µm y por lo menos 90%, preferiblemente por lo menos 95% ó 99%, tienen un diámetro dentro de la escala de 1.0-8.0 µm. La escala entrecuartilas puede ser de 2 µ , con un diámetro medio de 3.5, 4.0, 4.5, 5.0, 5.5, 6.0 ó 6.5 µm. De esta manera, por lo menos 30%, 40%, 50% ó 60% de las microesferas pueden tener diámetros dentro de la escala de 1.5-3.5 µm, 2.0-4.0 µm, 3.0-5.0 µ , 4.0-6.0 µm, 5.0-7.0 µm ó 6.0-8.0 µ . Preferiblemente un porcentaje mencionado de las microesferas tienen diámetros dentro de una escala de 1.0 µm, como 1.5-2.5 µm, 2.0-3.0 µm, 3.0-4.0 µm, 4.0-5.0 µm, 5.0-6.0 µm, 6.0-7.0 µm ó 7.0-8.0 µm. Otro aspecto de la invención provee microesferas huecas con paredes proteináceas en las cuales por lo menos 90% , preferiblemente por lo menos 95% ó 39% de las microesferas tienen un diámetro en la escala de 1.0-8.0 µrn ; por lo menos 90% , preferiblemente por lo menos 95% ó 99% de las microes feras tienen un grosor de pared de 40-500 n n , preferiblemente 100-500 nm .

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN EJ. material formador de pared y las condiciones de procedimiento deben de ser elegidas para que el producto sea lo suficientem€'nte no tóxico y no inmunogénico en las condiciones de uso, lo cual dependerá claramente de la dosis administrada y de la duración del tratamiento. El material forrnador de pared puede ser un derivado de almidón, un polímero sintético corno poliglutama-t.o de ter-butiloxi-carbonil etilo (US-A-4888398) o un polisacárido como polidextrosa. Generalmente, el material formador de pared se puede seleccionar de la mayoría de los polímerost fisiológicamente compatibles biodegrabdables e hidrofílicos como los descritos en más detalle en el documento UO-A-9218164. Preferiblemente, el material formador de pared es proteináceo. Por ejemplo, puede ser colágeno, gelatina o albúmina (suero), en cada caso preferiblemente de origen humano (es decir, derivado de humanos o correspondiendo en estructura a la proteína humana). Muy preferiblemente, es la albúmina de suero humano (HSA) derivada de donaciones de sangre o, idealmente, de la fermentación de microorganismos (incluyendo líneas celulares) que han sido transformadas o transfectadas para expresar HSA. Más detalle se da en el documento UO--A-9218164. La solución o dispersión de proteina es preferiblemente 0.1 a 50% p/v, muy preferiblemente aproximadamente 5.0-25.0% de proteína, particularmente cuando la proteína es albúmina. Aproximadamente 20% es óptimo. Las mezclas de Materiales forrnadores de pared pueden ser usadas, en cuyo caso los porcentajes en las últimas dos oraciones se refieren al contenido total de material forrnador de pared. La preparación que será aspereada puede contener substancias diferentes al material formador de pared y el solvente o líquido portador. De nuevo, se puede hacer referencia al documento WO-A-9218164. La solución o dispersión de proteína (preferiblemente solución), referida en la presente posteriormente corno "preparación de proteína", es atomizada y secada por aspersión por medio de cualquier técnica adecuada que resulte en icroesferas? o microcápsulas discretas de un diámetro de 1 a 10 µm. Estas cifras se refieren a por lo menos 90% de la población de rnicrocápsulas, siendo medido el diámetro con un Coulter Master Si^er II. El término "microcápsulas" significa partículas huecas que envuelven un espacio, tal espacio es llenado con un gas o vapor pero no con algún material sólido.

Las partículas alveolares que simulan la confitería vendida en Inglaterra como MaltesersR no son formadas. El atomizado consiste en formar un aerosol de la preparación de proteína por, por ejemplo, forzar la preparación a través de por lo menos un orificio bajo presión en, o usando un atomizador centrífugo en una cámara de aire caliente u otro gas inerte. La cámara deber ser lo suficientemente grande para que las gotas salidas más grandes no golpeen las paredes antes de secar. E!l gas o vapor en la cámara es limpio (es decir, preferibleme-nte estéril y libre de pirógeno) y no tóxico cuando es administrado en el torrente sanguíneo en las cantidades concomitantes con la administración de las microcápsulas en uso. La veJocidad de evaporación de el liquido proveniente de la preparación de proteína debe ser lo suficientemente alta para forma microcápsulas huecas pero no tan alta como para reventar las microcápsulas. La velocidad de evaporación se puede controlar variando la velocidad de flujo del gas, la concentración de proteína en la preparación de proteina, la naturaleza del portador líquido, la velocidad de alimentación de la solución y, muy importante, la temperatura del gas encontrado por el aerosol. Con una concentración de albúmina de 15-25% en agua, una temperatura de gas de entrada de por lo menos aproximadamente 100°C, preferiblemente por lo menos 110°C es generalmente suficiente para asegurar el carácter hueco y la temperatura puede ser tan alta como 250°C sin que las cápsulas revienten. Aproximadamente 180-240°C, preferiblemente aprox imadamente 210-230°C y muy preferiblemente aprox imadamente 220°C es óptimo , por lo menos para la albúmina . Toda vez que la temperatura del gas encontrado por el aerosol dependerá también de la velocidad a la cual el aerosol es liberado y en el contenido de líquido de la preparación de proteína , la temperatura de salida puede ser onítoreada para asegurar una temperatura adecuada en la cámara . Se ha descubierto que una temperatura de salida de 40-150°C es adecuada . Se ha descubierto que el controlar la velocidad de flujo es útil para controlar J os otros parámetros como el número de partículas huecas intactas. LciS microcápsulas consisten típicamente de 96-98% de HSA onoméri co. Muy particularmente , las micropartículas de la invención t ienen preferiblemente una escala de intercuartila máxima de µm, muy preferiblemente de 2 µm , y todavía rnuy preferibleme nte de 1.5 µm , con respecto a su tamaño de partícula me dio de masa . El diámetro de partícula medio de masa se determina por el contador Coulter con una conversión a # distribución de tamaño-volumen. Esto se obtiene secando por aspersión cuando existe una combinación de una velocidad de flujo de alimentación baja con altos niveles de atomización y de aire de secado. El efecto es producir microcápsulas de un tamaño muy definido y de una distribución de tamaño estrecha. Varios expertos han diseñado ecuaciones para definir el tamaño medio de gotita de las boquillas neumáticas; una versión sirrple de los varios parámetros que afectan el tamaño medio de gotita son corno sigue: D=A/(V2.d)»+B.(Mairt/M?io )-b En donde D = Tamaño medio de gotita A = Constante relacionada con el diseño de la boquilla B = Constante relacionada con la viscosidad del liquido V = Velocidad de aire relativa entre líquido y boquilla d = Densidad del aire Mair« y Müq = Masa de aire y flujo de líquido a y b = Constantes relacionadas con el diseño de la boquilla. Claramente, para cualquier diseño de boquilla, el tamaño de gotita es principalmente afectado por la velocidad relativa en la boquilla y concurrentemente la relación de masa de aire a liquido. Para el uso de secado más común, la relación aire a líquido está en la escala de 0.1-10 y en estas relaciones es aparente que el tamaño promedio de gotita es de -20 µm. Para la producción de micropartículas en la escala de tamaño descrita en la presente se usa una relación aire a líquido en la escala de 20-1000:1. El efecto es el de producir partículas en las relaciones altas, las cuales sean extremadamente pequeñamente por los parámetros comparativos, con distribuciones de tamaño muy estrechas. Para las rnicropartículas producidas a relaciones más bajas de aire a líquido, se producen partículas ligeramente mayores, pero sin embargo éstas nunca tendrán distribuciones de tamaño estrechas que sean superiores a las micropartículas producidas por técnicas de emulsión. La cantidad de principio activo añadido no es crítica; las microparticulas pueden consistir de por lo menos 50, muy preferiblemente 70 u 80, y rnuy preferiblemente 90% en peso de HSfi o de otro material portador. Para su uso en un dispositivo inhalador, las micropartículas pueden ser formuladas con un excipiente convencional como lactosa o glucosa. Las microparticulas pueden consistir de un agente y un vehículo terapéutico, o un compuesto que por sí solo sea terapéuticamente activo. La cantidad del principio activo será elegida habiendo hecho referencia a su naturaleza y actividad, a la forma de administración y otros factores conocidos por aquellos expertos en la técnica. A manera de ejemplo únicamente, el número de partículas administradas puede ser tal que libere 100 mg/día a-1 antitripsina o 0.1 rng/día de un material activo como beclometasona. El principio activo puede ser, por ejemplo, una sustancia de diagnóstico o una entidad farmacéutica clásica que pueda o no unirse covalente ente o de otra forma al material portador. El agente terapéutico puede ser un material proteináceo corno la insulina, hormona parati rolde, calcitonina o peptido fcioactivo similar, albuterol, salicilato, naproxeno, augmentina o un agente citotóxico. Para los propósitos experimentales, un marcador como la fluoresceina de Usina puede ser ircluido. Las micropartículas de la invención pueden consistir de un antagonista o un componente de unión-receptor además del agente terapéutico o de diagnostico. Por ejemplo, un azúcar u otra molécula puede ser incluida en el vehículo molecular, con vista a dirigir la administración del fármaco unido con vehículo a un receptor dado en o más allá de los alvéolos. La HSA se usa en la presente como un ejemplo ilustrativo de materiales portadores soluble en agua para su uso en la invención. Otros materiales que pueden ser usados incluyen carbohidratos simples y complejos, amino- o poliaminoácidos simples o complejos, ácido graso o esteres de ácido graso o proteínas humanas naturales o recombinantes o fragmentos de formas pequeñas de los mismos. La invención permite que la naturaleza de las microcápsulas secas sea manipulada para optimizar el flujo o las propiedades del vehículo, cargando y reduciendo las fuerzas de cohesión y de adhesión en la preparación de microcápsulas. Por ejemplo, si así se requiere, las microcápsulas pueden ser hechas predominantemente positivas o negativas mediante el uso de materiales poliméricos o monoméricos altamente cargados; v.gr., Usina o poli-lisina y glutamato o poli-glutamato en sistemas sin HSA o sistemas heterogéneos que incluyan HSA y principios a.ctivos. Una modalidad adicional de esta invención es el secado de coaspereión de principio activo con HSA para facilitar así la estabilización del principio activo durante la formulación, el empacado y muy importante, durante la residencia en el revestimiento alveolar. En este medio ambiental puede haber una actividad proteolítica intensa. Aunque puecen usarse inhibidores de proteasa para proteger fármacos de péptidos puede haber contraindicaciones para este alcance. Usando HSA tanto como excipiente y vehículo, se puede ofrecer un exceso amplio de substrato alternativo en el cual las proteasas localmente activas puedan actuar. Otra ventaja es que, toda vez que la HSA ha mostrado cruzar la barrera alveolar, por mecanismos transcitóticos mediados con receptor o sin receptor, se puede usar como un vehículo para facilitar el pasaje de un principio activo a través del revestimiento epitelial. En una modalidad adicional, los principios activos pueden ser covalentemente entrelazados a la HSA a través de entrelazamientos cortables antes del secado por aspersión. Esta modalidad representa un método para portar principios activos a través de toda la trayectoria desde el dispositivo hacia el torrente sanguíneo, y posiblemente a objetivos dentro del cuerpo. La formación de partículas con tamaño aerodinámico TT óptimo significa que el vehículo "físico" libera al principio activo hacia el sitio de absorción. Una vez depositado sobre los alvéolos, el vehículo "molecular" protege entonces y facilita el pasaje hacia el torrente sanguíneo y, una vez en el torrente sanguíneo, puede mejorar adicionalmente la vida media circulatoria e incluso dirigir al principio activo hacia ciertos sitios dentro del cuerpo en base a eventos mediados con receptor. Una tecnología de entrelazamiento adecuada se describe en el documento UO-A-9317713 (Rijksuniversiteit Groningen). Se describen entrelazadores de ácido polhidroxilico sensibles a la eeterasa. Tal tecnología, usada en la derivatizacaón de HSA antes del secado por aspersión, hace posible la producción de un sistema portador covalente para la liberación de fármacos hacía la vasculatura sistémica. Esta utiliza el p>otencial de la HSA para cruzar los alvéolos para portar los fármacos sobre un período de tiempo prolongado a la vez de proteger potencialmente entidades inestables. Aunque al principio activo usado en esta invención puede ser absorbido en o de otra forma asociado con las rnicropartículas después de su formulación, éste es preferible formulado con la HSA. Las micropartículas pueden ser por lo menos parcialmente revestidas con un material hidrofóbico o insoluble en agua como un ácido graso, para retrasar su velocidad de disolución y para protegerlas contra el crecimiento hidroscópico.

Los siguientes ejemplos ilustran la invención. El secador de aspersión usado en los ejemplos, disponibles de A/S Niro Atomizer, Soeborq, Dinamarca, bajo el nombre comercial de "Mobile Minor", se describe en detalle en el documento UO-A-9218164.

E3EHPL0 1 Una solución al 20% de HSA libre de pirógenos y estéril en agua libre de pirógenos (adecuada para inyección) fue bombeada, hacia la boquilla de un atomizador de boquilla de dos fluidos montada en la unidad comercial de secado por aspersión descrita anteriormente. La velocidad peristáltica de bomba se mantuvo a una velocidad de aproximadamente 10 nl/rninuto para que con de una temperatura de aire de entrada de 220°C la temperatura de aire de salida se mantuviera a 95°C. El aire comprimido fue suministrado a la boquilla atornizadora de dos fluidos a 2.0-6.0 Bar (2.0-6.0 x IOS Pa). En esta escala, microcápsulas con un tamaño medio de 4.25-6.2 µm son obtenidas. Típicamente un aumento en el tamaño de partícula medio (por presión de atomización reducida) llevó a un aumento en la cantidad de microcápsulas sobre 10 µm en tamaño (ver cuadro 1 ) .

CUADRO 1 Efectos de la presión de atomización en la frecuencia de rnicrocápsulas de diámetro mayor a 10 µrn Bajo las condiciones descritas anteriormente, es decir el primer paso del ejemplo 1 del documento UO-A-9218164, con una prensión de boquilla de 7.5 barios, las micropartículas fueron producidas con un tamaño de partícula de 4.7µm. Estas micropartículas solubles eran suaves y esféricas con menos de 1% de las partículas sobre un tamaño de partícula de 6µm. Las micropartículas fueron disueltas en un medio acuoso y el peso molecular ele la HSA fue determinado por cromatografía de filtración de gel. Los cro atogramas resultantes para la HSA antes y después del secado por aspersión a la HSA son esencialmente los mismos. Otro análisis de la HSA antes y después del secado por aspersión por medio de formar péptido tríptico cen HPLC reveló que no hubo alguna diferencia observable en los péptidos liberados. Ambos análisis muestran que, bajo las condiciones de secado por aspersión descritas para producir micropartículas de 4.7µm, poco o ningún daño se hace a la proteina.

E3EMPL0 2 La antitripsina alfa-1 derivada de suero humano fue secada por aspersión bajo condiciones similares al ejemplo 1 con una temperatura de entrada de 150°C y una temperatura de salida de f:0°C. En todos los otros aspectos, las condiciones para el secado fueron las mismas al ejemplo 1. Las rnicropartículae solubles producidas tuvieron un tamaño medio de 4.5µm. Las micropartículas fueron disueltas en un medio acuoso y fueron analizadas para la retención de la estructura de proteína y actividad inhibidora de tripsina normal, después comparadas con el material de partida original secado por congelamiento. Los análisis por perrneación de gel y cromatografía de fase reversa y electrofóresis capilar, revelaron cue no hubo algún cambio estructural significante después del secado por aspersión. Los análisis de la actividad inhibidora (cuadro 2) mostraron que dentro del error experimental, se logró la retención completa de la actividad inhibidora.

CUADRO 2 EJEMPLO 3 Utilizando el método general del ejemplo 1, las microcápsulas compuestas de deshidrogenasa de alcohol (ADH) y lactosa fueron preparadas (ADH 0.1% p/p; lactosa 99.9% p/p). Se descubrió que la opti ización del paso de secado por aspersión es requerida para aumentar al máximo la retención de la actividad €' enzima. Las condiciones generales del ejemplo 1 se utilizaron, pero la temperatura de entrada y salida cambió para dar condiciones que permitieran producir micropartículas del tamaño deseado (4-5µm) que retuvieran la actividad completa después del secado y reconstitución en un medio acuoso. El porcentaje de actividad retenida comparado con el material original se muestra para cada una de las condiciones mostradas de secado por aspersión (cuadro 3). Las microcápsulas eran suaves y esféricas y contenían aire como se probó por su apariencia en difenilxileno (DPX) bajo microscopio de luz.

CUADRO 3 EJEMPLO 4 Una serie de experimentos se realizó bajo las condiciones descritas en el ejemplo 1, para examinar la influencia de la velocidad de alimentación de líquido en el rendimiento de partículas esféricas intactas. Se descubrió que, al usar la habilidad de las rnicropartículae que contienen gas para reflejar ultrasonido, se puede determinar la condición óptima p>ara aumentar al máximo el rendimiento de las microcápsulas esféricas, suaves, intactas. Las micropartículas formadas después del secado por aspersión son fijadas a calor, para hacerlas insolubles, y después suspendidas en agua para hacer las medidas de eco. Se descubrió que al aumentar la velocidad de alimentación de líquido, disminuye el número de rnicroparticulas intactas formadas durante el secado por aspersión inicial (cuadro 4). El tamaño de partícula medio y la estabilidad de presión total, es decir, el grosor de la coraza, no cambian pero la ecogenicidad sí, conforme la velocidad de flujo de líquido disminuye de 4 a 16 rnl/min. Se descubrió que las velocidades más lentas de evaporación (a velocidades de flujo de liquido mayores) hacen que se formen menos partículas esféricas intactas.

CUADRO 4 La prueba se llevó a cabo al resuspender las micropartículas fijadas a calor a una concentración de 1x10* rnl en 350 rnl de agua. Esta solución es agitada lentamente en un vaso de precipitados de 500 mi arriba que tiene una onda de ultrasonido de 3.5 MHz fijada a una máquina médica de formación de imagen Son?s 1000. Las imágenes de escala gris obtenidas son capturadas por un analizador de imagen y comparadas contra un patrón de agua para producir las unidades de densidad de reflejo de eco. La prueba también puede adaptarse para examinar la resistencia de presión, al asegurar la reflejo de eco antes y después de la exposición de la muestra a ráfagas cíclicas de presión aplicada a la solución de surtido de partículas. Este análisis distingue las partículas incompletas que llevan aire al momento de la reconstitución, a partir de partículas completamente esféricas que "encapsulan" aire dentro de la coraza. Las partículas incompletas no muestran resistencia de presión y pierden la habilidad de reflejar ultrasonido inmediatamente. La respuesta de dosis para las partículas de albúmina fijadas del ejemplo 1 es c. 5, 9, 13, 20, 22 y 24 VDU's (intensidad de contraesparcimiento) a concentraciones de microcápsula respectivas de 0.25, 0.5, 1, 2, 3 y 4 x 106 por rnl.

EJEMPLO 5 Se ha realizado la experimentación significante para reducir el tamaño de p>artícula y reducir la distribución de tamaño. Esto se logró para efectivamente aumentar el contenido de gas del agente de ecocontraste y reducir el número de par-.iculas de tamaño mayor. Este ejercicio también es benéfico para las formulaciones respiratorias en cuanto a que aumenta al máximo el número potencial de partículas respi rabies en la escala de l-5µm y produce inherentemente partículas rnás suaves que serán menos cohesivas que las partículas no esféricas de tamaño similar. Se descubrió que es posible reducir el tamaño de partícula al disminuir el contenido de solutos del alimento. Este efecto, es en parte, mediado por los efectos de viscosidad en la formación de gotas. Sin embargo, también se descubrió que al rebajar el contenido de soluto bajo las condiciones que se utilizan, conduce a una reducción significante en el número de partículas intactas. Por medio de experimentación adicional, se descubrió que la incorporación je solventes volátiles, miscibles en agua en el alimento, aumenta de manera significante la velocidad de la formación de coraza durante el secado, con un aumento concomitante en el numero de partículas intactas o partículas huecas (cuadro 5). La seguridad del hueco se hace por medio de evaluación microscópica de partículas que flotan hacia la superficie del forro en un hemocitornet.ro contra el conteo de partícula por medio del conteo de Coulter.

CUADRO 5 EJEMPLO 6 Una escala de materiales ha sido utilizada para fabricar micropartículas suaves, esféricas, solubles. La escala de las micropartículas producidas incluye materiales inertes tales como HSA, lactosa, manitol, alginato de sodio; materiales activos solos tales corno al-antitripsina; y mezclas de vehículo activo e inerte tales corno deshidrogenasa de lactosa/alcohol, lactosa/budesonido, HSA/salbutarnol . En todos los casos, se producen partículas suaves, esféricas y que contienen gas. Se ha asegurado el éxito del procedimiento al mantener el control sobre la morfología de las partículas. Las partículas son suspendidas en propanol y después visualizadas por el microscopio. Aquellas partículas que contienen gas parecen tener un núcleo de color blanco fuerte rodeado por un aro negro intacto mientras que las partículas rotas o mal formadas aparecen como fantasmas. La evaluación microscópica de las siguientes micropartículas ejemplifica la escala de materiales y activos que pueden ser secados para producir partículas suaves, esféricas: HSA Caseína Hí>moglobina Lactosa ADH/lactosa HSA/peroxi dasa La ctosa/salbutarnol La.ctosa/budesonido EJEMPLO 7 Lactosa y Budesonido fueron secados por aspersión bajo las condiciones descritas en el cuadro a continuación ( cuadro 6 ) .

CUADRO 6 Parámetro Ajuste Temperatura de entrada 220°C Teroperatura de salida 85°C Presión de atomización 7.5 barios Ajuste amortiguador 0.5 Velocidad de alimentación 3.88 g/rnin. Solución de surtido 9.3% p/v Budesonido, 85% v/v etanol, 19% p/v lactosa. EJ polvo seco resultante fue mezclado con lactosa de grado de excipiente en un mezclador tipo V en las proporciones delineadas en el cuadro 7. Las mezclas después fueron cargadas en cápsulas de gelatina y descargadas de Rotahaler™ en una prueba de choque de doble etapa a 60 1/min. La fracción respi rabie fue calculada como el porcentaje depositado en la cámara inferior.

CUADRO 7 Las fracciones respi rabies obtenidas son considerabl€>mente superiores al producto micronizado actualmente utilizado en este dispositivo que por lo general están en la escala de 10-20% máximo. Las formulaciones de Budesonido/lactosa descritas en el ejemplo 7 fueron probadas en un multidosis DPI alimentada de gravedad experimental. Los parámetros examinados fueron la variación e la dosis emitida sobre 30 inyecciones y la fracción respirable en un dispositivo de choque de cuatro etapas. Los resultados se muestran a continuación (cuadro 8).

CUADRO 8 Para los dispositivos Je DPI actuales, la recomendación de farmacopea de los Estados Unidos preliminar parece ser menor de 25% en variación en la dosis emitida. Claramente en todas las formulaciones probadas hasta ahora se encuentran dentro de las especificaciones y en el caso de las formulaciones 1 y 2 están significantemente bajo los límites actuales.

EJEMPLO 8 Para disminuir la velocidad de disolución de las microcápsulas solubles como se describió en los ejemplos precedentes, las microcápsulas pueden ser revestidas con ácidos grasos tales como ácidos pal ítico o behénico. Las microcápeulae solubles del ejemplo 1 fueron revestidas al suspender una mezcla de microcápsulas de HSA solubles y glucosa (50% p/p) en una solución etanólica que contiene 10% de ácido palmítico o behénico. La solución fue evaporada y el emparedado resultante fue molido por pasaje a través de un molino Fritsch.

La eficacia del revestimiento fue asegurada por un método indirecto derivado de estudios de ultrasonido previos. Las imágen s de ultrasonido fueron recaudadas de un vaso de precipitados de agua que contiene 1 x 106 de nicrocápsulas/rnl usando una máquina de ultrasonido HP Sonus 1000 ligada a un analizador de imagen. La intensidad de video sobre una lectura en blanco (VDU) fue medida durante el tiempo (cuadro 9). Las microcápsulas no revestidas perdieron muy rápidamente todo el aire y de esta manera el potencial para reflejar el ultrasonido. Sin embargo, las rnicrocápsulas no revestidas retuvieron su estructura durante un periodo rnás largo y as>i mostraron una señal prolongada durante varios minutos.

CUADRO 9 Ecogenicidad de microcápsulas de HSA revestidas EJEMPLO 9 Las rnicrocápsulas de manitol solubles fueron preparadas corno se estableció en el ejemplo 1 (15% de alimento de secado por aspersión de rnanitol acuoso) y revestidas con ácido pal j.tico y ácido behénico como se describió en el ejemplo 8. Una muestra de cada una fue suspendida en agua y se midió la ecogenicidad. Diez minutos después del análisis inicial, la ecogenicidad de las muestras suspendidas fue repetida (cuadro 10).

CUADRO 10 EJEMPLO 10 Las microcápsulas solubles con un activo de modelo (Lysine-Fluorescein) contenidas dentro de la matriz fueron preparadas para permitir la producción de una forma de polvo seco de flujo libre del compuesto "activo". En la disolución de estas microcápsulas, el compuesto activo fue liberado en su forrr.a original. Ufando 1 isina como un compuesto de modelo, la molécula fue marcada con isotiocianato fluorescente (FITO para permitir al compuesto ser controlado durante la preparación de las rnicrocápsulas solubles y la liberación subsecuente durante la disolución. 3 g de usina fueron añadidos a FITC (0.5 g total) en un regulador de carbonato. Después de una hora de incubación a 30°C, la solución resultante fue probada para la formación de la aducción de FITC-lisina por TLC. Esto mostró la presencia de un aducción de FITC-lisina estable. El aducción de FITC-lisina fue mezclado con 143 mi de % de etanol que contiene 100 g/ml de HSA para dar el alimento de secado por aspersión. Las condiciones de secado por aspersión utilizadas para formar las microcápsuiae son descritas er detalle en el cuadro 11 más adelante. En ausencia de etanol, se descubrió que solamente un porcentaje pequeño de las partículas eran suaves y esféricas. El procedimiento de secado por aspersión produjo 17.21 g de microcápsulas que no se disolvieron cuando se reeuspendió una muestra en etanol. Además, no se observó alguna liberación de la aducción de FITC-lisina. No obstante, cuando se añadieron 10 rnl de agua a las microcápsulas suspendidas en etanol, las microcápsulas se disolvieron y se liberó el FITC-lisina. El análisis de la aducción usando TLC antes de la incorporación en las microcápsulas y después de la liberación de las microcápsulas en disolución mostró que el compuesto de modelo no cambió.

CUADRO 11 Parámetro Ajuste Temperatura de entrada 220°C Temperatura de salida 85°C Presión de atomización 7.5 barios Ajuste amortiguador 0.5 Velocidad de alimentación 3.88 g/rnin. Solución de surtido 25% v/v de etanol, % v/v de HSA Las microcápsulas solubles fueron hechas al tamaño en un sistema no acuoso de tiocianato de amonio y propan-2-ol usando el Multisizer II (Coulter Electronics). Las microcápsulas tuvieron un tamaño medio de 3.28 ± 0.6 µm y con 90% de la masa dentro de 2-5 µm. Las microcápsulas fueron mezcladas con glucosa (50% p/p de microcápsulas: 50% p/p de glucosa), y molidas por el pasaje de la mezcla a través de un molino Fritsch tres veces. Cuando una muestra del polvo fue añadida a agua, se liberó FITC-lisina intacta en comparación con su forma original como se determinó por el análisis TLC. Este ejemplo muestra la posibilidad de hacer una formulación de amino ácido o péptido que puede tiiizarse para las formulaciones respiratorias, que incorpora HSA entro de la formulación.

EJEMPLO 11 500 rng de beclometasona fueron disueltos en etanol y añadidos a 50 mi de alimento de HSA (10% v/v) y secados por aspersión usando las condiciones delineadas en el ejemplo .1.0. De esta manera, las microcápsulas formadas fueron hechas al tamaño en el sistema no acuoso como se describió en detalle en el ejemplo 10. Las nicrocápsulas tuvieron un tamaño medio de 3.13 ± 0.71 µm. 90% de la cuales estuvieron entre 2 y 5 µm. La beclometasona fue extraída de las rnicrocápsulas por la precipitación de la HSA en 10% de TCA, y el sobrenadante fue extraído en etanol. El extracto de etanol fue analizado al utilizar HPLC, a una longitud de onda de 242 nm. La beclornetasona detectada en este extracto existe en el estado libre, pero cuando la pella de albúmina fue extraída, se observó la presencia de beclometasona ligada a HSA original. Se descubrió que a pesar de que la mayoría del compuesto activo estaba en el estado libre, alguna parte estaba presente en el estado ligado a albúmina. Ya que la albúmina sólo se divide lentamente en la corriente sanguínea, esto permite control sobre la liberación del compuesto activo durante un período extenso, comparado con un fármaco libre.

EJEMPLO 12 Mientras que en los ejemplos 10 y 11 por lo menos, cualquier ligadura de los compuestos activos fue un efecto de la naturaleza intrínseca de albúmina, este ejemplo da un producto sicuiendo el entrelazado inicial del compuesto activo, antes del secado por aspersión. A una solución de 10 rng/rnl de netotrexato, se añadieron 25 mg de carbodii ida (EDCI). La solución fue agitada durante 4 horas p>ara iniciar y asegurar la activación completa del metotrexato. Se añadieron 50 mg de HSA al fármaco activado y agitado durante 3 horas a temperatura ambiente. El metotrexato está químicamente ligado a la HSA por medio de los grupos amina en la albúmina. Este conjugado después fue utilizado como el alimento de secado por aspersión corno se describió en detalle en el ejemplo 10. Las microcápsulae solubles de esta manera hechas fueron probadas, caracterizadas y analizadas para contenido de fármaco. Las microcápsulae tuvieron un tamaño medio de 3.2 ± 0.6 µrn con 90% en masa entre 2-5 µm. El análisis del contenido de fármaco de las microcápsulas mostró que las microcápsulas no liberaron fármaco; aún después de la disolución, el fármaco todavía estaba ligado a la HSA. La digestión de proteinasa K de la albúmina liberó la ligadura de fármaco que se mostró estar unida solamente a un número limitado de a ino-ácidos y péptidos pequeños. Previamente se ha mostrado que la actividad de doxorubicina ligada a vehículos poliméricos es benéfica en tumores, que muestra el fenotipo resistente a multi fármaco.

EJEMPLO 13 Las microcápsulae de naproxen fueron preparadas corno se describió en detalle en los ejemplos 10 y 12 usando una relación de 1 a 5, fármaco a HSA. Las microcápsulas solubles retuvieron el compuesto activo de un solvente no acuoso. Además, en la disolución de las microcápsulas en solución acuosa, el compuesto activo todavía estaba ligado a la albúmina, cono se mostró anteriormente por el análisis HPLC a 262 nm. El naproxen fue liberado de la albúmina en la digestión con proteinasas K y esterasas.

EJEMPLO 14 Usando muestras de las microcápsulas producidas en los ejemplos 8 a 13, se aseguró su comportamiento en un inhalador de polvo seco. La reproductibilidad de dosis de cada formulación fue asegurada junto con la aerolización de la muestra por medio de evaluación microscópica. Una muestra de cada formulación fue añadida al túnel de surtido de un inhalador de polvo seco experimental (DPI). El inhalador de polvo seco utilizó aire presionado para forzar al polvo en una medida de dosificación. La medida de dosificación utilizada fue calibrada usando lactosa de secado por aspersión. Aunque las cantidades dispersas en la medida de dosificación variaron entre las muestras como una función de su composición, la reproductibilidad de dosificación para cada muestra fue muy consistente; con un medio de 5.0 ± 0.25 rng obtenidos para tres pruebas de dosificación. El comportamiento de aerolización de las muestras fue probado al conectar el inhalador a una cámara al vacío; la inhalación simulada fue lograda por medio de la liberación del vacío a través del DPI y la colección de la dosis transportada por aire f e hecha en porta objetos de microscopio revestidos de resina. Estos porta objetos fueron evaluados para la dispersión de las partículas. Los porta objetos mostraron que el DPI había desaglomerado las muestras fopnando una dispersión igual de micropartículas en los porta objetos de microscopio.

EJEMPLO 15 El desempeño de las formulaciones de polvo seco de los ejemplos; 10 a 13 fue analizado usando el método de choque doble (aparato A para las inhalaciones presionadas, British Phar acopoeia 1988) siguiendo la descarga de un Rotahaler (Glaxo UK) con 7 mi en la etapa 1 y 30 mi en la etapa 2 de agua destilada. Las formulaciones fueron entregadas de cápsulas de gelatina de tamaño 3 usando un Rotahaler fijado al dispositivo de choque doble usando un adaptador de hule. La bomba de vacío fue operada a 60 1/min durante dos ráfagas de 3 segundos. La cantidad de cada muestra que alcanzó niveles de la etapa 1 y la etapa 2 del dispositivo de choque fue analizada. Todas las muestras mostraron la deposición de porcentaje más grande para ocurrir en la etapa 2 del dispositivo de choque que indica partículas de tamaño óptimo para el surtido de alvéoli.

EJEMPLO 16 Una comparación de la dosificación y deposición de microcápsulcis insolubles fijas y microcápsulas solubles como se produjeron en el ejemplo 10 fue hecha en el pulmón de los conejos. Les conejos blancos de Nueva Zelanda anestesiados fueron dosificados con microcápsulas solubles o microcápsulas fijas. La cosificación se llevó a cabo usando un pulverizador controlado por computadora (Mumed Ltd., UK). Las microcápsulas solubles fueron suspendidas en CFC 11 y las partículas fijas fueron suspendidas en agua. Después de la dosificación, los pulmones de los conejos fueron removidos y se aseguró la deposición de las cápsulas. Las cápsulae fijas se encontraron intactas en el tejido de alvéoli del pulmón. Esto mostró que las microcápsulas eran del tamaño apropiado para la dispersión a través de los pulmones. En comparación, no se encontró alguna evidencia de la presencia de las microcápsulas solubles intactas, las cápsulas habiendo sido disueltas en los fluidos del pulmón. Sin embargo, la presencia de la aducción de FITC-lisina fue observada en parte del tejido de alvéoli al ser estudiado usando microscopio fluorescente. Además, la presencia de la aducción también se descubrió en la sangre y orina de los animales, a diferencia de aquella de las cápsulas fijas que no mostraron presencia alguna.

Claims (18)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Las rnicropartíc?las de un material soluble en agua, que son suaves y esféricas, y por lo menos 30% de la cuales tienen un tamaño de partícula medio de masa de 1 a 10 µrn, para usarse en terapia o diagnosis.

2.- Las rnicroparticulas de un material soluble en agua, que son suaves y esféricas, y por lo menos 90% de la cuales tienen un tamaño de partícula medio de asa de 1 a 10 µm que llevan un agente terapéutico o diagnóstico.

3.- Las micropartículas de conformidad con la reivindicación 2, caracterizadas además porque se pueden obtener por medio de secado por aspersión de una solución acuosa de dicho material soluble en agua y el agente terapéutico o diagnóstico.

4.- Las micropartículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizadas además porque dicho tamaño de partícula es de 1 a 5 µrn.

5.- Las micropartículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizadas además porque tienen una escala de intercuartila máxima de 3 µm.

6.~ Las micropartículas de conformidad con la reivindicación 5, caracterizadas además porque tienen una escala de intercuartila máxima de 2 µm.

7.- Las microparticulas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizadas además porque son estériles.

8.- Las micropartículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizadas además porque son por lo menos parcialmente revestidas con un material soluble en agua.

9.- Las micropartículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizadas además porque adicionalmente llevan un componente de unión-receptor.

10.- Las micropartículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizadas además porque el material soluble en agua es carbohidrato.

11.- Las micropartículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizadas además porque el Material soluble en agua es un a ino- o poliamino-ácido.

12.- Las micropartículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizadas además porque el material soluble en agua es ácido graso o éster del mismo.

13.- Las micropartículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizadas además porque el material soluble en agua es una proteína, péptido o enzima.

14.- Las micropartículas de conformidad con la reivindicación 13, caracterizadas además porque el material soluble en agua es una proteína humana o fragmento, en forma natural o recombinante.

15.- Las micropartículas de conformidad con la reivindicación 14, caracterizadas además porque el material soluble en agua es albúmina de suero humana.

16.- Las rnicrof»artículas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizadas además porque en material soluble en agua es químicamente o enzirnáticamente modificado, antes de la formación de las microparticulas .

17 . - Un dispositivo inhalador adaptado para surti r un agente terapéutico por las vías pulmonares , que comprende el agente terapéutico en la forma de rnicropa rtí culas de conformidad con cualquier reivindi cación precedente .

18 . - Uso de un agente terapéutico en la forma de rnicropartí culas de conformi dad con cualquiera de las reivindicaciones l a 16 , caracterizado además para la fabricación de un medi camento para el tratamiento de una enfermedad en la que el agente terapéutico actúa en la administración por las vías pulmonares .