MXPA96005979A - Uso novedoso de peptidos de gluten como estimulantes de absorcion de minerales y como agentes preventivos de hiperlipidemia e hipercolesterolemia - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere al uso novedoso de péptidos de gluten como un estimulante de absorción de minerales, y como un agente preventivo de la hiperlipidemia e hipercolesterolemia inducidas por la grasa dietética. Los péptidos de gluten se preparan mediante la hidrólisis enzimática de proteínas vegetales, que tiene un peso molecular de 200 a 600 daltons, y que comprenden el 20 por ciento molar o más de aminoácidosácidos. Los péptidos de gluten se pueden utilizar para el desarrollo de un estimulante de la absorción intestinal de calcio y hierro, y como un agente preventivo de la hiperlipidemia e hipercolesterolemia inducidas por la grasa dietética en una forma de material alimenticio.

Description

USO NOVEDOSO DE PEPTIDOS DE GLUTEN COMO ESTIMULANTES DE ABSORCIÓN DE MINERALES Y COMO AGENTES PREVENTIVOS DE HIPERLIPIDEMIA E HIPERCOLESTEROLEMIA Campo de la Invención La presente invención se refiere al uso novedoso de péptidos de gluten que ee preparan mediante la hidrólisis enzimática de proteínas vegetales, más específicamente, a un estimulante de absorción de minerales y agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia, el cual comprende a los péptidos de gluten como sus ingredientes activos. Antecedentes de la Invención La nutrición de proteínas dietéticas se ha enfatizado principalmente en vista de su función básica como una fuente de nitrógeno, un proveedor de aminoácidos, y también un intermediario metabólico. Naturalmente, las proteínas dietéticas se han evaluado simplemente a la luz de su cantidad y calidad de aminoácidos que constituyen las proteínas. Sin embargo, la nutrición de la proteína dietética ha llegado a ser recientemente realzada durante una década, ya que se han reportado sucesivamente otras funciones de los péptidos derivados a partir de las proteínas, en adición a su función básica, en las sociedades científicas. En relación con esto, se han confirmado varios péptidos derivados de las proteínas por tener sus propias funciones fisiológicas características, en base a los descubrimientos de que: muchos péptidos derivados a partir de proteínas precursoras en el cuerpo, tienen un significado fisiológico; y, las estructuras primarias comunes a los péptidos también aparecen en las proteínas dietéticas. En conclusión, se ha probado que una variedad de péptidos que tienen diferente peso molecular, producidos en el aparato digestivo durante la descomposición de la proteína, tienen diferentes papeles de un significado fisiológico. Por ejemplo, se ha reportado que el fosfopéptido de caseína ("FPC") producido durante la digestión de una proteína de leche (es decir, caseína) , actúa como un estimulante de la absorción de calcio. También, se ha reportado que algunos péptidos producidos durante la digestión, inhiben la actividad de la enzima convertidora de angiotensina (ECA) , y tienen una función como opioides. Además, los péptidos que pueden inhibir la degeneración de la membrana mucosa del intestino delgado, y que pueden inhibir la actividad de la enzima convertidora de angiotensina de tal manera que se pueda utilizar para el tratamiento de hiperplasia, se han preparado mediante la hidrólisis enzimática de una proteína de trigo, gluten, o una proteína de maíz, zeina. De una manera específica, los péptidos preparados a partir de gluten, un subproducto de la producción de almidón de maíz, se han utilizado ampliamente como un suministro de nutriente, una alimentación del tubo, y un complemento de proteína en la salsa de soya o en la preparación de alimentos para ganado. Por otra parte, el calcio y el hierro, entre los minerales esenciales para el cuerpo humano, han sido conocidos como nutrientes susceptibles de carecerse en el cuerpo. A medida que la vida humana se enriquece cada vez más, la cantidad de ingestión de calorías excede a la cantidad diaria recomendada, lo cual ha llegado a ser un factor causativo para diferentes enfermedades geriátricas. No obstante, la cantidad de ingestión de calcio y hierro todavía está debajo del 90 por ciento de la cantidad diaria recomendada, lo cual a su vez, provoca porosis del hueso y anemia severa. De conformidad con lo anterior, con el objeto de suplementar la carencia de calcio y hierro en el cuerpo, estos deben tomarse en una cantidad excesiva, lo cual tensa naturalmente al estómago produciendo indigestión, etcétera. Bajo las circunstancias, se ha explorado la manera de estimular su índice de absorción, ya que es más eficiente que tomarlos de una manera excesiva. Por otra parte, una terapia alimenticia, que es un método para el tratamiento de enfermedades mediante la ingestión de dietas restringidas, ha llegado a ser el objeto de la preocupación de todos en la prevención y tratamiento de la enfermedad geriátrica, que es la enfermedad más común asociada con el sistema circulatorio. Por ejemplo, un alto nivel de lípido y colesterol en la sangre ha atraído la atención pública como una causa primaria de desórdenes circulatorios tales como problemas del cerebro, arterioesclerosis, hiperplasia, etcétera; la terapia alimenticia acompañada con la regulación de la ingestión de alimento, sin embargo, puede controlar el nivel de lípido y colesterol que es afectado por la cantidad de colesterol, el tipo y la cantidad de lípido, el tipo de carbohidratos, vitaminas y minerales, etcétera. La estrecha relación entre el tipo de proteína y el metabolismo de lípidos, aun cuando varíen los resultados dependiendo del período del experimento, de la condición del experimento, y del tipo y la edad del animal experimental, ha revelado que la caseína eleva el nivel de colesterol en sangre, mientras que la proteína de frijol de soya lo disminuye. Como un mecanismo propuesto, se han sugerido cambios en el índice de absorción del lípidos, dependiendo del tipo de proteína y composición de aminoácidos, la proporción de lisina/arginina, la composición de los aminoácidos que contienen azufre, y la cantidad excretora de lípidos y colesterol en las heces, para hacer una contribución en la regulación del lípido y el colesterol, aunque no se entienden claramente. Recientemente, también se ha propuesto que las proteínas y los péptidos producidos durante la digestión, interactúan con la bilis, los lípidos y el colesterol, etcétera. Por ejemplo, se ha propuesto que los péptidos de alto peso molecular producidos durante la digestión, son un material causante de la reducción del nivel de lípidos y colesterol por la proteína de frijol de soya. En conclusión, el significado nutricional y fisiológico de los péptidos dietéticos, ha enfatizado la explotación de péptidos novedosos para utilizarse en una forma de alimentos o fármacos. Bajo las circunstancias, los presentes inventores han hecho un esfuerzo por desarrollar un péptido novedoso producido mediante la hidrólisis enzimática de proteínas vegetales económicas y que se puedan obtener fácilmente. En general, se han preparado péptidos vegetales mediante la hidrólisis enzimática de proteínas a partir de frijol de soya, trigo, y maíz, etcétera. Por ejemplo, la Publicación de Patente Japonesa abierta Número (Hei) 3-204900, describe una sustancia que contiene péptido, que se prepara mediante los pasos de: tratar proteínas vegetales con hidrolasa de almidón; y ' calentar el material así obtenido bajo una condición altamente alcalina, y agregar la proteasa alcalina para eliminar los aminoácidos aromáticos. Este método requiere de un paso esencial de eliminación de los aminoácidos aromáticos con el objeto de eliminar un sabor amargo, e incrementar el contenido relativo de aminoácidos ramificados que se sabe que mejoran el movimiento muscular. La técnica anterior enseña que la sustancia que contiene péptido se puede utilizar como un suministro de nutriente después de ejercicio duro, enfermedad, etcétera, ya que se puede absorber rápidamente en el tracto digestivo de una manera análoga a los aminoácidos. Sumario de la Invención Los presentes inventores han preparado péptidos mediante la hidrólisis enzimática de proteínas vegetales que son subproductos de la producción de almidón, que tienen un peso molecular de 200 a 6000 daltons, y que comprenden el 20 por ciento molar o más de aminoácidos ácidos, y descubrieron que éstos estimulan la absorción intestinal de calcio y hierro, e impiden la hiperlipidemia y la hipercolesterolemia. El objeto primario de la presente invención, por consiguiente es proporcionar un estimulante de absorción de minerales, que comprenda a los péptidos como ingrediente activo. El otro objeto de la invención es proporcionar un agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia, que comprenda a los péptidos como ingrediente activo. Breve Descripción de los Dibujos Los anteriores y otros objetos y características de la presente invención llegarán a quedar claros a partir de la siguiente descripción dada en conjunto con los dibujos acompañantes, en los cuales: La Figura 1 es una gráfica que muestra el peso de ratas alimentadas con dietas que comprenden el 10 por ciento (peso/peso) de gluten, hidrolisato de gluten, el sobrenadante o precipitado del hidrolisato de gluten, de acuerdo con el tiempo de cría. La Figura 2 es una gráfica que muestra el peso de las ratas alimentadas con dietas que comprenden el 2 por ciento (peso/peso) de gluten, hidrolisato de gluten, el sobrenadante o precipitado del hidrolisato de gluten, de acuerdo con el tiempo de cría. Descripción Detallada de la Invención Los presentes inventores prepararon péptidos de gluten que tienen un peso molecular de 200 a 6000 daltons, y que comprenden el 20 por ciento molar o más de aminoácidos ácidos, mediante la hidrólisis enzimática de las proteínas vegetales, tales como gluten de maíz y de trigo con proteasa tal como papaína y bromelaína de 30°C a 80°C, más preferiblemente de 50°C a 60°C, bajo un medio ambiente ácido a neutro de un pH de 4.0 a 8.0, más preferible un pH de 6.0, durante 20 a 30 horas. Se descubrió que los péptidos de gluten así preparados, (referidos posteriormente en la presente como "hidrolisato de gluten") inhiben la precipitación de calcio y hierro in vitro. En adición, se reveló que las ratas alimentadas con los hidrolisatos de gluten tuvieron una alta concentración del calcio soluble en sus intestinos delgados, ya que la cantidad de calcio precipitado era baja. Por consiguiente, los presentes inventores alimentaron a cada grupo de ratas con diferentes dietas en donde se agregaron gluten, hidrolisato de gluten, el sobrenadante o precipitado del hidrolisato de gluten, respectivamente, como la fuente de nitrógeno, e investigaron si el hidrolisato de gluten puede estimular la absorción intestinal de calcio y hierro in vivo . Como un resultado, los grupos experimentales alimentados con el hidrolisato de gluten y el sobrenadante del hidrolisato de gluten, mostraron un mayor índice de absorción de calcio y hierro, mientras que todos los grupos experimentales no mostraron un significado estadístico en el peso promedio, en la ingestión diaria de alimento, en el incremento diario de peso, y en la eficiencia dietética a través de los puntos de inicio y finalización del suministro de alimento. También, se descubrió que el índice de absorción de calcio y hierro se incrementa a medida que se incrementa la concentración de hidrolisato de gluten, lo cual demostró claramente que el hidrolisato de gluten estimula la absorción intestinal de calcio y hierro. Además, también se descubrió que el ácido cítrico, la sal de sodio, la sal de potasio, y la sal de calcio, etcétera, mejoraban la acción inhibidora de los péptidos de gluten sobre la precipitación del calcio y el hierro.

Por otra parte, con el objeto de investigar si el hidrolisato de gluten tiene un efecto preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia inducidas por la grasa dietética, se alimentaron ratas maduras con dietas experimentales, cada una de las cuales se preparó para comprender caseína, hidrolisato de caseína, gluten, e hidrolisato de gluten, respectivamente, en adición a las dietas básicas con un alto contenido de grasa y un alto contenido de colesterol, y se examinó el nivel de presentación de hiperlipidemia e hipercolesterolemia. También, se alimentaron ratas maduras con dietas que comprendían un alto contenido de grasa, un alto contenido de colesterol, y caseína como la fuente de proteína, para hacer ratas con hiperlipidemia inducida por la grasa dietética, y luego se alimentaron con las dietas experimentales para investigar su efecto sobre el tratamiento de hiperlipidemia e hipercolesterolemia. En este experimento, se recolectaron la sangre arterial, el hígado, el corazón, y las heces de cada rata, y se midió el contenido de lípidos y colesterol totales de cada muestra. Una serie de experimentos realizados en la invención, y los resultados de los mismos, se resumen como sigue: 1. Se investigó el efecto del hidrolisato de gluten sobre la prevención de la hiperlipidemia e hipercolesterolemia inducidas por la grasa dietética, el cual dio como resultado que: la ingestión de alimento en los grupos experimentales no fue diferente, y la ganancia de peso fue relativamente baja en las ratas alimentadas con gluten o su hidrolisato. También se investigó el efecto del hidrolisato de gluten sobre el tratamiento de la hiperlipidemia y la hipercolesterolemia inducidas por la grasa dietética, el cual dio como resultado que: tanto al ingestión de alimento como la ganancia de peso no fueron diferentes en los grupos experimentales. 2. Se observaron las ratas alimentadas con caseína e hidrolisato de gluten para tener el valor más alto y más bajo en la concentración de lípidos totales en suero, respectivamente, y hubo un efecto significativo de la fuente N y un efecto del hidrolisato en la concentración del lípido en suero, que sugieren que el gluten y el hidrolisato tienen un efecto hipolipidémico. 3. Los efectos de la ingestión de gluten y su hidrolisato sobre la concentración del colesterol total en suero, fueron similares a aquellos de los lípidos totales en suero. Es decir, hubo un efecto significativo de la fuente N y el efecto del hidrolisato en la concentración del colesterol en suero, que revela que el gluten y su hidrolisato tienen un efecto hipocolesterolémico. También, se descubrió que la ingestión del hidrolisato de proteína daba como resultado un nivel elevado de colesterol de lipoproteínas de alta densidad en suero, y un nivel disminuido de colesterol de lipoproteínas de baja densidad en suero. 4. La ingestión de gluten o hidrolisato de proteína baja de una manera significativa los lípidos totales y el colesterol en el hígado, mientras que no muestra efecto en el corazón. 5. La ingestión de gluten eleva de una manera significativa la excreción fecal de lípidos totales y de colesterol total, mientras que la ingestión de su hidrolisato no muestra efecto alguno. Por consiguiente, se demostró claramente que el gluten y su hidrolisato tienen efectos hipolipidémicos e hipocolesterolémicos, es decir, pueden bajar la concentración de lípidos en suero y el contenido de lípidos en el hígado. De conformidad con lo anterior, el gluten y su hidrolisato se pueden utilizar para prevención y el tratamiento de hiperlipidemia e hipercolesterolemia inducidas por la grasa dietética, como ingredientes activos de los' materiales alimenticios. De conformidad con la presente invención, los péptidos de gluten que estimulan la absorción intestinal de calcio y hierro, e impide la hiperlipidemia y la hipercolesterolemia, se pueden preparar a partir de maiz y trigo económicos y que se pueden obtener fácilmente, lo cual garantiza naturalmente que se puede proporcionar masivamente y a un bajo precio un estimulante de absorción de minerales y un agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia que los comprende como ingredientes activos. El estimulante de absorción de minerales y el agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia de la invención, que comprenden al hidrolisato de gluten como un ingrediente activo, se puede administrar oralmente o se puede inyectar como una formulación que comprenda vehículos farmacéuticamente aceptables. Para la administración oral, los péptidos se pueden formular en una preparación sólida, tal como tabletas, pildoras, granulos, polvo, cápsulas, y similares, o una preparación líquida tal como soluciones, suspensiones, emulsiones, y similares. Las preparaciones farmacéuticas para administración oral pueden contener péptidos activos o péptidos junto con los excipientes acostumbrados, tales como (a) rellenos y extensores, por ejemplo, almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, y sílice, (b) aglutinantes, por ejemplo celulosa carboximetílica, alginatos, gelatina, y pirrolidona polivinílica, (c) humectantes, por ejemplo glicerina, (d) agentes desintegrantes, por ejemplo ágar-ágar, carbonato de calcio, y carbonato de sodio, (e) retardadores de solución, por ejemplo, parafina, (f) aceleradores de absorción, por ejemplo, un compuesto de amonio cuaternario (g) agentes humectantes, por ejemplo, alcohol cetílico o monoestearato de glicerina, (h) absorbentes, por ejemplo caolín y bentonita, (i) lubricantes, por ejemplo talco, estearato de calcio, y estearato de magnesio, y glicoles de polietileno sólidos, (j) colorantes, (k) saborizantes, (1) edulcorantes, o mezclas de las sustancias mencionadas en (a) a (1). Cuando la preparación se utiliza para administración parenteral, la preparación se hace en una fórmula para inyección, una infusión de goteo intravenoso, y similares. Para la preparación de un fórmula para inyección, las soluciones y emulsiones pueden estar en una forma estéril que sea isotónica con la sangre. Las suspensiones pueden contener, en adición al péptido o a los péptidos activos, conservadores, estabilizantes, solubilizantes, agentes humectantes, sales para cambiar la presión osmótica, o reguladores del pH. Además puede contener otras sustancias clínicamente útiles. La presente invención se ilustra ad más en los siguientes ejemplos, los cuales no deben tomarse para limitar el alcance de la invención. Ejemplo 1; Preparación del hidrolisato de gluten Para preparar el hidrolisato de gluten, se agregaron 1.5 kilogramos de gluten de maíz o de gluten de trigo a 1 litro de agua y se incubaron a 50 °C con la adición de 10 a 150 gramos de papaína o bromelaína bajo un medio ambiente de un pH de 6.0. Durante la reacción, el reactor se equipó con un controlador del pH, mediante el cual se mantuvo un pH constante mediante la adición de NaOH o HCl. 24 horas de reacción producen el hidrolisato de gluten que comprende el 20 por ciento molar o más de aminoácidos ácidos, y poseen un peso molecular de 200 a 6000 daltons. El hidrolisato de gluten se centrifugó, y se obtuvieron respectivamente el sobrenadante y el precipitado, y se utilizaron en los siguientes ejemplos. Ejemplo 2; Alimentación de ratas con dietas que contienen hidrolisato de gluten al 10 por ciento (peso/peso) . 24 ratas Sprague-Dawley macho, que tenían 4 semanas de edad, se dividieron en 4 grupos, y luego se alimentaron durante 4 semanas a placer con diferentes dietas que contienen una fuente de nitrógeno de gl-uten al 10 por ciento (peso/peso) , hidrolisato de gluten, el sobrenadante o precipitado del hidrolisato de gluten respectivamente, en adición a proteína de frijol de soya al 10 por ciento (peso/peso) . Las ratas se criaron por separado én jaulas de caja de zapatos en una habitación, mientras que se mantenía la temperatura de 22+2 °C, una humedad relativa del 65+5 por ciento y condiciones de luz desde las 6:00 a.m. hasta las 6:00 p.m. También, se utilizaron dietas semipurificadas cuyos componentes y composición, de acuerdo con AIN-76 (American Institute of Nutrition Standards for Nutritional Studies Report, J. Nutr., 107:1340-1348 (1977)) se muestran en la siguiente Tabla 1, como dietas experimentales Tabla 1: Los componentes y la composición de las dietas experimentales (unidades: mg) Ejemplo 2-1: Medición del incremento de peso Se investigaron la ingestión diaria de alimento y el incremento de peso de las ratas. Como resultado, se examinó que todos los grupos experimentales no mostraban diferencias significativas, mientras que el grupo IV mostró poca reducción del incremento de peso debido a la reducción de la ingestión diaria de alimento (ver la Figura 1) . Ejemplo 2-2; índice de absorción de calcio y hierro Se investigó el índice de absorción de calcio y hierro en las ratas, y se resume en las siguientes Tablas 2 y 3. La concentración de calcio se determinó mediante el método convencional, y la concentración de hierro se midió con la ayuda de un reactivo para el análisis cuantitativo de hierro (Wako, Japón) . En este experimento, se determinó la cantidad conservada (mg/dl ó µg/ml) , por la cantidad de la ingestión diaria de alimento a partir de la cual se sustrajo la cantidad de desechos corporales a través de las heces y la orina, y se terminó el índice de absorción aparente (mg/dl ó µg/ml) por la cantidad de ingestión diaria de alimento a partir de la cual se sustrajo la cantidad de desechos corporales a través de las heces, respectivamente. Y los porcentajes de la cantidad conservada y el índice de 'absorción aparente se calcularon contra la ingestión diaria de alimento.

Tabla 2: El Índice de ingestión y absorción de calcio Se compararon los índices de absorción aparentes de calcio (%) . Como se puede ver en la Tabla 2, el grupo I alimentado con dieta que contenía gluten, fue el 38 por ciento, mientras que el grupo II alimentado con dieta que contenía hidrolisato de gluten fue el 54 por ciento, que corresponde al incremento del índice de absorción aparente por el 42 por ciento. Y el grupo III alimentado con dieta que contenía al sobrenadante de hidrolisato de gluten fue el 50 por ciento, que corresponde al incremento de un índice de absorción aparente por el 31 por ciento. De conformidad con lo anterior, se demostró claramente que el hidrolisato de gluten estimula la absorción intestinal de calcio.

Tabla 3: El indide de ingestión y absorción de hierro Cuando se compararon los índices de absorción aparente de hierro (%) , el grupo I alimentado con dieta que contenía gluten fue el 9%, mientras que el grupo III alimentado con dieta que contenía al sobrenadante del hidrolisato de gluten fue el 16 por ciento, que corresponde al incremento del índice de absorción aparente por el 80 por ciento. De conformidad con lo anterior, también se demostró que el hidrolisato de gluten estimula la absorción intestinal de hierro, y también de calcio. Ejemplo 3: Alimentación de ratas con dieta que contiene hidrolisato de gluten al 2 por ciento (peso/peso) 18 ratas Sprague-Dawley macho que tenían 4 semanas de edad, se dividieron en tres grupos, y luego se alimentaron durante 4 semanas a placer con diferentes dietas que contenían una fuente de nitrógeno de gluten al 2 por ciento (peso/peso) , hidrolisato de gluten, o el sobrenadante del hidrolisato de gluten, respectivamente, en adición a la proteína de frijol de soya al 18 por ciento (peso/peso) . Las ratas se criaron de una manera análoga a la del Ejemplo 2, y en la siguiente Tabla 4 se muestran los componentes y la composición de las dietas experimentales .

Tabla 4: Los componentes y la composición de las dietas experimentales (unidades: mg) .

Ejemplo 3-1; Medición del incremento de peso Se examinaron el peso promedio, la ingestión diaria de alimento, el incremento diario de peso, y la eficiencia dietética durante la alimentación. Como resultado, el grupo alimentado con el sobrenadante de hidrolisato de gluten mostró un peso promedio un poco alto en los puntos finales del suministro de alimento, mientras que ninguno de todos los grupos experimentales mostró significado estadístico alguno. (ver la Figura 2) . Ejemplo 3-2; índice de absorción de calcio y hierro Se investigó el índice de absorción de calcio y hierro en las ratas y se resume en las siguientes Tablas 5 y 6. Las concentraciones de calcio y hierro se determinaron de una manera análoga a la descrita en el ejemplo 2-2. En este experimento, la cantidad conservada (mg/dl ó µg/ml) , el índice de absorción aparente (mg/dl ó µg/ml) , y sus porcentajes, se calcularon de una manera análoga a la del Ejemplo 2-2.

Tabla 6 : índice de ingestión y absorción de hierro Se compararon los índices de absorción aparentes de calcio y hierro (%) en las Tablas 5 y 6, con aquellos de las Tablas 2 y 3. Como resultado, el grupo alimentado con sobrenadante de hidrolisato de gluten al 2 por ciento (peso/peso) fue más bajo que aquel del grupo alimentado con sobrenadante de hidrolisato de gluten al 10 por ciento (peso/peso) , pero el grupo fue más alto que el grupo alimentado con gluten al 2 por ciento por el incremento del 10 al 20 por ciento. Ejemplo 4; Mejora de la inhibición de precipitación de calcio por ácido cítrico o NaCl. Con el objeto de mejorar la inhibición de precipitación del calcio por el hidrolisato de gluten, se agregó ácido cítrico, ácido málico, o NaCl 0.01M al hidrolisato de gluten al 0.01 por ciento (peso/volumen), se hizo reaccionar durante 1 a 3 horas de 30°C a 80°C, y luego se convirtió en polvo mediante secado por aspersión. El polvo así preparado se disolvió en 0.2 mililitros de agua destilada. Entonces se agregaron un mililitro de 0.01M CaCl2 • 2H20 y 2 mililitros de regulador de fosfato 0.02M (pH de 7.0) al polvo disuelto, se incubó a 37°C durante 1 hora, y se centrifugó a 12,000 rpm durante 5 minutos, empleando un centrífuga a pequeña escala equipada con una membrana de ultrafiltración de 0.1 mieras, para obtener el sobrenadante. Y luego se determinaron las concentraciones de calcio en los sobrenadantes, respectivamente (ver Tabla 7) .

Tabla 7 : Cantidad de calcio soluble Como se muestra en la Tabla 7 anterior, ee reveló que la inhibición de la precipitación de calcio por el hidrolisato de gluten fue mejorada por la adición de ácido cítrico o NaCl. Ejemplo 5; Efecto del hidrolisato de gluten sobre la prevención de hiperlipidemia e hipercolesterolemia. 32 ratas Sprague-Dawley macho, que tenían un peso promedio de 160 gramos, se dividieron aleatoriamente en 4 grupos, y se alimentaron durante 6 semanas a placer con dietas experimentales, cada una de las cuales comprendía caseína (c) , hidrolisato de caseína (HC) , gluten (G) , e hidrolisato de gluten (HG) , respectivamente, en adición a las dietas básicas que comprendían un alto contenido de grasa (18 por ciento en la dieta) y un alto contenido de colesterol (1 por ciento en la dieta) , con el objeto de investigar el nivel de presentación de hiperlipidemia e hipercolesterolemia. Las ratas se criaron de una manera análoga a la del Ejemplo 2, y se realizaron experimentos metabólicos durante 4 días antes de sacrificar a las ratas, y se utilizaron dietas semipurificadas cuyos componentes y composiciones se muestran en la Tabla 8 más adelante, como dietas experimentales. Las dietas experimentales se prepararon de acuerdo con AIN-76, con la excepción de agregar sebo de res (Seoul Agricultural Products Co., Corea, purificado) en una concentración del 18 por ciento, que es un nivel de grasa alto comparándose con la concentración estándar de grasa, que es del 5 por ciento de acuerdo con NAS-NRC (National Research Council, Nutrient Requirements of Laboratory Animáis No.10, ÑAS, Washington, D.C. (1972)). Además, se agregó proteína de huevo (Shinwoo Chemical Co. , Corea) que tiene el contenido de proteína del 82 por ciento, en una concentración del 10 por ciento como una fuente de nitrógeno. También se agregaron caseína (Maeil Milk Co., Ltd., Corea), hidrolisato de caseína (Maeil Milk Co. , Ltd. , Corea) , gluten e hidrolisato de gluten, en una concentración del 10 por ciento en diferentes dietas, respectivamente. Todas las dietas experimentales tienen el mismo contenido de nitrógeno, y comprenden el 1 por ciento de PEG (glicol de polietileno) #4000 como un marcador para el movimiento de la dieta dentro del tracto digestivo.

Tabla 81 Componentes y composición de las dietas experimentales (unidades: mg) . Se detuvo el suministro de alimento a los animales experimentales durante 12 horas antes de recolectar las muestras, y luego se tomó durante 1.5 horas. Después de 1 hora a partir de que se terminó el suministro de alimento, las ratas se anestesiaron con éter etílico, y se recolectó sangre de la carótida. Entonces, se recolectaron el hígado y el corazón, se removió la grasa unida a ellos, se lavaron con suero fisiológico frío (solución de NaCl al 0.9 por ciento) para remover la sangre, se midieron sus pesos, y se recolectaron sus heces durante 4 días antes de sacrificar a las ratas. La sangre así recolectada se almacenó en el refrigerador (4°C) durante 24 horas, y se centrifugó a 3000 rpm durante 20 minutos para obtener suero. Los tejidos y las heces se secaron por congelación empleando la Secadora por Congelación 18 (Labconco, EUA) , se molieron, y luego se midieron sus pesos seco. Todas las muestras se almacenaron a menos de -40°C hasta que se utilizaron para el análisis. Ejemplo 5-1; Peso corporal e ingestión de alimento Se midieron el peso corporal, la ganancia de peso, la ingestión de alimento, y la eficiencia de la alimentación en las ratas alimentadas con dietas experimentales, y se muestran más adelante en la Tabla 9. En este experimento, la ganancia de peso dividida entre la ingestión de alimento da la eficiencia de la alimentación. Como se puede ver en la Tabla 9, el peso corporal final, la ganancia de peso, y la eficiencia de la alimentación mostraron diferencias significativas entre los grupos experimentales, mientras que la ingestión de alimento en los grupos no fue significativamente diferente. Las ratas alimentadas con caseína e hidrolisato de caseína mostraron una ganancia de peso más alta que aquellas alimentadas con gluten e hidrolisato de gluten, lo cual puede ser causado por la diferencia de la composición de aminoácidos. Los datos experimentales se analizaron empleando el programa SAS, y se representaron como el promedio y el error estándar (promedio + EE) . La diferencia significativa, el efecto de la fuente de nitrógeno (tipo de proteína) [ (C+CH) : (G+GH) ] y el efecto del hidrolisato [ (C+G) : (CH+GH) ] se examinaron empleando la prueba de rango múltiple de Dumcan (p<0.05) .

Tabla 9: Peso corporal, ingestión de alimento, y eficiencia de la alimentación en las ratas alimentadas con dietas experimentales 1) Promedio + EE 2) Los valores con diferente superíndice dentro de la columna son significativamente diferentes en ?<0.05. 3) NS: no significativamente diferente.

Ejemplo 5-2; La concentración de lípidos totales y grasas neutras en suero. Se midió la concentración de lípidos totales y grasas neutras en el suero de las ratas alimentadas con dietas experimentales, y se muestran en la Tabla 10 más adelante. En este experimento, la concentración de lípidos totales en suero se midió mediante el método colorimétrico, empleando la reacción de sulfofosfovainillina de acuerdo con el método de Fringe y Dunn (ver: Fringe, C.S. y Dunn, R.M. , Am. J. Clin. Patho., 53:89-92(1980)), y la concentración de triglicéridos en suero se midió de acuerdo con el método de Biggs y colaboradores (ver: Biggs y colaboradores, Clin. Chem., 21:437-441 (1975) ) .

Tabla 10: Concentración de lípidos totales y triglicéridos en euero 1) Los paréntesis representan el porcentaje (%) contra el grupo con dieta de caseína. Co o se puede ver en la Tabla 10, la concentración de lípidos totales en suero mostró diferencia significativas entre los grupos experimentales, mientras que la concentración de triglicéridos en suero en los grupos no fue significativamente diferente. Se observó que la concentración de lípidos totales en suero fue significativamente más alta en la ratas alimentadas con caseína, que en otros grupos entre los cuales la concentración de lípidos totales en suero no fue significativamente diferente. De una manera particular, se observó que la concentración de lípidos totales en suero es el valor más bajo en la ratas alimentadas con hidrolisato de gluten, es decir, el valor reducido del 40 por ciento, comparándose con el grupo alimentado con caseína, y el valor reducido del 22 por ciento, comparándose con el grupo alimentado con gluten. Por otra parte, se descubrió que hubo un efecto de la fuente de nitrógeno significativo en la concentración de lipidos en suero, en donde el efecto del gluten y su hidrolisato tuvo el valor del 74 por ciento, comparándose con el efecto de la caseína y su hidrolisato. Este resultado coincide con reportes anteriores de que la concentración de lípidos en suero era significativamente más baja en el grupo alimentado con proteína de soya que el grupo alimentado con caseína. También, se descubrió que hubo un efecto significativo del hidrolisato en la concentración de lípidos en suero, en donde el efecto del hidrolisato de proteína tuvo el valor del 75 por ciento, comparándose con el efecto de la proteína. De conformidad con lo anterior, se concluyó que el hidrolisato de gluten tenía un efecto preventivo de hiperlipidemia inducida por la grasa dietética. Ejemplo 5-3; Concentración de colesterol total, colesterol de lipoproteínas de alta densidad, y colesterol de lipoproteínas de baja densidad en suero. Se midió la concentración de colesterol total y de colesterol de lipoproteínas de alta densidad, y se calcularon el colesterol de lipoproteínas de baja densidad en suero y el índice aterogénico de acuerdo con la ecuación de Friedwald, y se muestran en la Tabla 11 más adelante. En este experimento, la concentración de colesterol en suero se midió de acuerdo con el método de Zlat is y Zak (ver: Zlatkis, A. y Zak, B., Anal. Biochem., 29:143-146 (1969)), y se midió la concentración de colesterol de lipoproteínas de alta densidad en suero empleando el estuche enzimático (Youngdong Pharm. Co. , Ltd. , Corea) .

Tabla 11: Concentración de colesterol total, colesterol de lipoproteínas de alta densidad, colesterol de lipoproteínas de baja densidad, e índice aterogénico, en suero. 1) Colesterol de lipoproteínas de baja densidad: Colesterol total-(colesterol de lipoproteínas de alta densidad)-Triglicéridos/5 2) índice aterogénico: (Colesterol Total- (Colesterol de lipoproteínas de alta densidad) )/ (colesterol de lipoproteínas de alta densidad). Como se muestra en la Tabla 11, la concentración de colesterol total en suero mostró una diferencia significativa entre los grupos alimentados con proteína y su hidrolisato, respectivamente, mientras que no mostró diferencia alguna de acuerdo con el tipo de proteína. Particularmente, las ratas alimentadas con hidrolisato de caseína mostraron una reducción significativa del 15 por ciento en la concentración de colesterol total en suero, comparándose con el grupo alimentado con caseína. Las ratas alimentadas con hidrolisato de gluten mostraron una reducción en la concentración de colesterol total en suero, comparándose con el grupo alimentado con gluten, aunque esto no mostró una diferencia significativa. También, no hubo una diferencia significativa en la concentración de colesterol total en suero entre los grupos alimentados con caseína y con gluten, respectivamente. Por otra parte, las ratas alimentadas con hidrolisato de proteína mostraron un valor alto significativo en la concentración de colesterol de lipoproteínas de alta densidad total en suero, comparándose con el grupo alimentado con proteína (p<0.05), y particularmente, - las ratas alimentadas con hidrolisato de gluten mostraron un incremento del 40 por ciento o más en la concentración de colesterol de lipoproteínas de alta densidad total en suero, comparándose con el grupo alimentado con caseína o gluten. Por consiguiente, se asumió que la ingestión de hidrolisatos de proteína, entre otras cosas, hidrolisato de gluten, da como resultado la reducción en la presentación de enfermedades asociadas con el sistema circulatorio tales como ateroesclerosis e hiperplasia, ya que se ha sabido que el colesterol de lipoproteínas de alta densidad muestra el efecto inhibidor sobre los factores perjudiciales de las enfermedades. Más aún, las ratas alimentadas con hidrolisato de proteína mostraron una reducción significativa comparándose con el grupo alimentado con proteína en la concentración de colesterol de lipoproteínas de baja densidad en suero que se calculó empleando el colesterol total en suero, el colesterol de lipoproteínas de alto densidad en suero, y los triglicéridos (p<0.05). Y las ratas alimentadas con gluten mostraron una reducción en la concentración de colesterol de lipoproteínas de baja densidad en suero, comparándose con el grupo alimentado con caseína, aunque esto no mostró una diferencia significativa. De conformidad con lo anterior, se demostró que la ingestión de hidrolisato de proteína, baja el colesterol total en suero, y eleva el colesterol de lipoproteínas de alta densidad en suero, lo cual conduce finalmente a una disminución significativa en el índice aterogénico. Ejemplos 5-4; Contenido de lípidos totales, colesterol total y triglicéridos en el hígado. El peso húmedo y seco del hígado y el contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado, se midieron y se muestran en la Tabla 12. La grasa total en el hígado se extrajo mediante el método de Folch y colaboradores (ver: Folch y colaboradores, J. Biol. Chem., 226:497-502 (1957)), y se determinaron los contenidos de colesterol total y triglicéridos de una manera análoga a la del Ejemplo 5-2.

Tabla 12: Contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado.

Co o se puede ver en la Tabla 12 , el peso seco y el peso húmedo del hígado, y el contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado, mostraron diferencias significativas entre los grupos experimentales. Se observó que el peso del hígado es significativamente más alto en las ratas alimentadas con caseína que el grupo alimentado por gluten, mientras que el peso del hígado entre los grupos alimentados con proteína e hidrolisato de proteína, respectivamente, no fue significativamente diferente. El contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado, fue significativamente más bajo en el grupo alimentado con gluten que en el grupo alimentado con caseína. El contenido de lípidos totales y triglicéridos en el hígado fue más bajo en el grupo alimentado con hidrolisato de proteína que en el grupo alimentado con proteína, aunque no mostró una diferencia significativa. Por consiguiente, se podría concluir que el tipo de proteína y la ingestión de hidrolisato de proteína tienen un efecto sobre el metabolismo de lípidos en el hígado. De conformidad con lo anterior, se demostró que el metabolismo de lípidos en el hígado es influenciado por el tipo de proteína y la fuente de nitrógeno, es decir, la ingestión de hidrolisato de proteína o gluten, baja el contenido de lípidos en el hígado.

Ejemplo 5-5; Contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el corazón.

Se midieron el peso húmedo y seco del corazón, y el contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el corazón, de una manera análoga a la del Ejemplo 5-4, y se resumen en la Tabla 13.

Tabla 13: Contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el corazón Como se puede ver en la Tabla 13, el peso del corazón y el contenido del colesterol total no mostró diferencia significativas entre los grupos experimentales, y el contenido de lípidos totales y triglicéridos en el corazón mostró diferencias significativas entre los grupos experimentales. Es decir, el tipo de proteína no dio como resultado una diferencia significativa, mientras que el contenido de lípidos totales y triglicéridos en el corazón fue significativamente más bajo en las ratas alimentadas con hidrolisato de proteína que el grupo alimentado con proteína (p<0.05). De una manera particular, el contenido de lípidos totales fue significativamente bajo en el grupo alimentado con hidrolisato de gluten. El contenido de triglicéridos en el corazón fue más bajo en el grupo alimentado con cada hidrolisato de proteína, que el grupo alimentado con cada proteína.

Ejemplo 5-6: Excreción fecal de lípidos totales Se midieron el peso de las heces, la excreción fecal de lípidos totales, el colesterol total, y los triglicéridos en los grupos experimentales, y se muestran en la Tabla 14. El contenido de colesterol y triglicéridos se determinó de la misma manera que en el Ejemplo 5-4.

Tabla 14: Excreción fecal de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos.

Como se puede ver en la Tabla 14, el peso de las heces no mostró diferencias significativas entre los grupos experimentales. Solamente la excreción fecal de los lípidos totales mostró diferencias significativas entre los grupos experimentales, es decir, fue baja en las ratas alimentadas con caseína, comparándose con los otros grupos. La ingestión de gluten dio como resultado una excreción fecal significativamente alta de colesterol total y lípidos totales. Las ratas alimentadas con hidrolisato de proteína mostraron una tendencia creciente en la excreción fecal de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos, comparándose con el grupo alimentado con proteína intacta, aunque no mostró una diferencia significativa. De conformidad con lo anterior, se demostró que la ingestión de gluten tiene un efecto creciente de excreción fecal de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos. Ejemplo 6; Efecto del hidrolisato de gluten sobre el tratamiento de hiperlipidemia e hipercolesterolemia. 32 ratas Sprague-Dawley macho que tenían un peso promedio de 160 gramos, se alimentaron durante 4 semanas con dietas que comprendían un alto contenido de grasas, un alto contenido de colesterol, y caseína como la fuente de proteína, para hacer ratas con hiperlipidemia inducida por la grasa dietética. Y entonces, se dividieron aleatoriamente en 4 grupos, y se alimentaron durante 4 semanas a placer con dietas experimentales como en el Ejemplo 5, con el objeto de investigar el efecto sobre el tratamiento de hiperlipidemia e hipercolesterolemia. En relación con esto, los componentes y la composición de las dietas experimentales, la condición de cría, la recolección de muestras, el análisis de las muestras, y el análisis estadístico, se realizaron como se describe en el Ejemplo 5. Ejemplo 6-1; Peso corporal e ingestión de alimento Se midieron el peso corporal, la ganancia de peso, la ingestión de alimento, y la eficiencia de la alimentación en las ratas alimentadas con dietas experimentales, y se muestran en la Tabla 15 más adelante. Como se muestra en la Tabla 15, el peso corporal y la ingestión de alimento no mostraron diferencias entre los grupo experimentales, y no hubo un efecto de la fuente de nitrógeno ni un efecto del hidrolisato.

Tabla 15: Peso corporal, ingestión de alimento, y eficiencia de la alimentación en las ratas alimentadas con dietas experimentales.

Ejemplo 6-2; Concentración de lípidos totales y grasas neutras en suero. Se midió la concentración de lípidos totales y grasas neutras en el suero de las ratas alimentadas con dietas experimentales, y se muestran en la siguiente Tabla 16.

Tabla 16: Concentración de lípidos totales y triglicéridos en suero 1 ) Los paréntesis representan el porcentaje ( % ) contra el grupo con dieta de caseína . Como se puede ver en la Tabla 16 , la concentración de triglicéridos en suero no mostró diferencias significativas entre los grupos experimentales. Es decir, no fue influenciada por el tipo de proteína y la fuente de nitrógeno. Pero el grupo alimentado con caseína tuvo el valor más alto en la concentración del lípidos totales en suero, y el grupo alimentado con hidrolisato de gluten tuvo el valor más bajo, que coincide con el resultado del Ejemplo 5-2. Sin embargo, el resultado del Ejemplo 5-2, en donde las ratas se alimentaron con las dietas experimentales durante 6 semanas desde el principio, se debe evaluar de una manera diferente con el del presente ejemplo, en donde, en el aspecto del tratamiento, las ratas se alimentaron con las dietas experimentales durante 4 semanas después de que se alimentaron con dieta enriquecida en grasa que comprendía caseína durante 4 semanas, para inducir la hiperlipidemia. De conformidad con los anterior, se demostró que el hidrolisato de gluten tenía un efecto de tratamiento de hiperlipidemia inducida por la grasa dietética, ya que la ingestión de gluten o su hidrolisato daba como resultado la reducción en la concentración de lípidos totales en suero. Ejemplo 6-3; Concentración de colesterol total, colesterol de lipoproteínas de alta densidad, y colesterol de lipoproteínas de baja densidad en suero. Se midió la concentración de colesterol total y colesterol de lipoproteínas de alta densidad en suero, y se calcularon el colesterol de lipoproteínas de baja densidad en suero y el índice aterogénico de acuerdo con la ecuación de Friedwald, y se muestran en la siguiente Tabla 17.

Tabla 17 : Concentración de colesterol total , colesterol de lipoproteínas de alta densidad, colesterol de lipoproteínas de baja densidad, e índice aterogénico en suero .

Como se muestra en la Tabla 17 , el grupo alimentado con caseína tuvo un valor significativamente alto en la concentración del colesterol total en suero , y el grupo alimentado con hidrolisato de gluten tuvo el valor más bajo . El grupo alimentado con gluten o hidrolisato de proteína mostró una reducción del 55% al 69% en la concentración de colesterol total en suero, comparándose con el grupo alimentado con caseína, lo cual sugiere que se puede utilizar el hidrolisato de gluten para el tratamiento de hipercolesterolemia inducida por la grasa dietética. Las ratas alimentadas con hidrolisato de gluten mostraron un incremento del 40 por ciento o más en la concentración de colesterol de lipoproteínas de alta densidad total en suero, comparándose con el grupo alimentado con caseína o gluten. Por consiguiente, se asumió que la ingestión de hidrolisato de proteína, entre otras cosas, hidrolisato de gluten, da como resultado la reducción en la presentación de enfermedades asociadas con el sistema circulatorio, tales como ateroesclerosis y alta presión, ya que se ha sabido que el colesterol de lipoproteínas de alta densidad tiene el efecto inhibidor sobre los factores perjudiciales de las enfermedades. En adición, las ratas alimentadas con hidrolisato de proteína mostraron una tendencia decreciente en la concentración de colesterol de lipoproteinas de baja densidad en suero, comparándose con el grupo alimentado con la proteína intacta, aunque no mostró una diferencia significativa. También, las ratas alimentadas con gluten mostraron una tendencia decreciente en la concentración de colesterol de lipoproteínas de baja densidad en suero, comparándose con el grupo alimentado con caseína, aunque no mostró una diferencia significativa. De conformidad .con lo anterior, se demostró que la ingestión de hidrolisato de proteína, baja el colesterol total en suero y eleva el colesterol de lipoproteínas de alta densidad en suero, lo cual conduce a una disminución significativa del índice aterogénico. Ejemplo 6-4; Contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado. Se midieron el peso húmedo y el peso seco del hígado, y el contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado, y se muestran en la Tabla 18.

Tabla 18: Contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado.

Como se puede ver en la Tabla 18, el peso corporal del hígado no mostró diferencias significativas entre los grupos experimentales, y el contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado mostró diferencias significativas, en donde sus niveles fueron significativamente bajos en las ratas alimentadas con hidrolisato de proteína, comparándose con el grupo alimentado con la proteína intacta, y no hubo diferencia de acuerdo con el tipo de proteína. De conformidad con lo anterior, se demostró que la ingestión de hidrolisato de proteína da como resultado un efecto decreciente de los lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el hígado. Ejemplo 6-5; Contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el corazón. Se midieron el peso húmedo y el peso seco del corazón, y el contenido de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos en el corazón, y se muestran en la Tabla 19 Tabla 19 : Contenido de lípidos totales, colesterol total , y triglicéridos en el corazón.

Como se puede ver en la Tabla 19 , solamente el contenido de triglicéridos en el corazón mostró diferencias significativas de entre los grupos experimentales. Es decir, el contenido de triglicéridos en el corazón fue significativamente más bajo en las ratas alimentadas con gluten que en el grupo alimentado con caseína. Por consiguiente, se sugirió que el tipo de proteína no tiene influencia sobre el contenido de lípidos totales en el corazón, y no se puede esperar el efecto del hidrolisato por la ingestión durante 4 semanas. Ejemplo 6-6; La excreción fecal de lípidos totales Se midieron el peso de las heces, y la excreción fecal de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos, en los grupo experimentales, y se muestran en la Tabla 20.

Tabla 20: La excreción fecal de lípidos totales, colesterol total y triglicéridos.

Como se puede ver en la Tabla 20, la excreción fecal de lípidos totales y triglicéridos mostró diferencias significativas entre los grupos experimentales, es decir, tuvieron los valores más bajos en la ratas alimentadas con caseína, y los valores más altos en las ratas alimentadas con hidrolisato de gluten. Además, mostraron diferencias significativas de acuerdo con el tipo de proteína, es decir, fueron más altos en el grupo alimentado con gluten o su hidrolisato, que en el grupo alimentado con caseína o su hidrolisato. También, las ratas alimentadas con gluten mostraron una tendencia creciente en la excreción fecal de colesterol total, comparándose con el grupo alimentado con caseína, aunque esto no mostró una diferencia significativa. De conformidad con lo anterior, se demostró que la ingestión de gluten tiene un efecto creciente de la excreción fecal de lípidos totales, colesterol total, y triglicéridos. Prueba de seguridad del hidrolisato de gluten El hidrolisato de gluten de la presente invención se administró oralmente a ratas Sprague-Dawley hembras y machos de 4 semanas de edad con una dosis maximizada de 10 gramos/kilogramo de peso del cuerpo. Como resultado, no se detectó efecto dañino alguno. Como se ilustra claramente y como se demostró anteriormente, la presente invención proporciona un estimulante de la absorción de minerales y un agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia, que comprende péptidos preparados mediante la hidrólisis enzimática de proteínas vegetales, que tiene un peso molecular de 200 a 6000 daltons, como sus ingredientes activos, y que comprende el 20 por ciento molar o más de aminoácidos ácidos. De conformidad con la presente invención, se determinó que se pueden utilizar los péptidos de gluten para el desarrollo de un estimulante de la absorción intestinal de calcio y hierro, y como un agente preventivo de la hiperlipidemia e hipercolesterolemia inducida por la grasa dietética, en una forma de alimento.

Claims (10)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito la invención que antecede, se considera como una novedad, y por lo tanto, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES 1. Un estimulante de la absorción de minerales que comprende péptidos vegetales que tienen un peso molecular de 200 a 6000 daltons, y que comprende el 20 por ciento molar ? más de aminoácidos ácidos.
2. 2. El estimulante de la absorción de minerales de conformidad con lo reclamado en la reivindicación 1, caracterizado porque el mineral es calcio o hierro.
3. 3. El estimulante de la absorción de minerales de conformidad con lo reclamado en la reivindicación 1, caracterizado porque los péptidos vegetales se preparan mediante la hidrólisis enzimática de proteína vegetal, que se selecciona a partir del grupo que consiste en gluten de maíz, gluten de trigo, y zeina de maíz. 4. El estimulante de la absorción de minerales de conformidad con lo reclamado en la reivindicación 3, caracterizado porque la hidrólisis enzimática se realiza de 30°C a 80°C y a un pH de
4. 4.0 a 8.0 durante 20 a 30 horas.
5. 5. El estimulante de absorción de minerales de conformidad con lo reclamado en la reivindicación , caracterizado porque la enzima es papaína o bromelaína.
6. 6. El estimulante de la absorción de minerales de conformidad con lo reclamado en la reivindicación 1 , caracterizado porque además comprende más de una sustancia seleccionada a partir del grupo que consiste en ácido cítrico, sal de sodio, sal de potasio, y sal de calcio.
7. 7. Un agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia, el cual comprende péptidos vegetales que tienen un peso molecular de 200 a 6000 daltons, y que comprenden el 20 por ciento molar o más de aminoácidos ácidos.
8. 8. El agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia de conformidad con lo reclamado en la reivindicación 7, caracterizado porque los péptidos vegetales se preparan mediante la hidrólisis enzimática de proteína vegetal que se selecciona a partir del grupo que consiste en gluten de maíz, gluten de trigo, y zeina de maíz.
9. 9. El agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia de conformidad con lo reclamado en la reivindicación 8, caracterizado porque la hidrólisis enzimática se realiza de 30°C a 80°C, y a un pH de 4.0 a 8.0 durante 20 a 30 horas.
10. 10. El agente preventivo de hiperlipidemia e hipercolesterolemia de conformidad con lo reclamado en la reivindicación 9, caracterizado porque la enzima es papaína o bromelaína.