MXPA05003431A - Quimioterapia de combinacion. - Google Patents

Abstract

Esta invencion se refiere a un procedimiento para tratar cancer utilizando una combinacion de agentes oncoliticos conocidos. Especificamente, esta invencion se refiere a un procedimiento para tratar cancer que utiliza una combinacion de un inhibidor de MEK y capecitabina.

Description

QUIMIOTERAPIA DE COMBINACIÓN CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un procedimiento para tratar cáncer utilizando una combinación de agentes oncológicos conocidos. Específicamente, esta invención se refiere a la combinación de un inhibidor de MEK y capecitabina.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La quimioterapia del cáncer ha avanzado espectacularmente en los años recientes. Muchos tumores se pueden tratar eficazmente utilizando compuestos, que o bien se producen naturalmente o son agentes sintéticos. La quimioterapia de cáncer puede suponer el uso de una combinación de agentes, generalmente como un medio para reducir los efectos tóxicos de los agentes individuales cuando se usan solos y en algunos casos debido a que la combinación tiene mayores efectos terapéuticos que cuando se usa el agente solo. En los tumores, la ruta Ras - Raf - MEK - ERK parece ser la única ruta más importante para la transmisión de señales mitogénicas desde la membrana plasmática al núcleo. Raf activado activa mediante fosforilación las quinasas de señalización MEK1 y MEK2 (abreviadamente MEK 1/2). Éstas son quinasas de especificidad dual que activan las quinasas de la familia ERK, ERK1 y ERK2, mediante fosforilación tanto de la treonina como de la tirosina. La activación de las ERK da como resultado la fosforilación y activación de la quinasa ribosomal S9 y factores de transcripción, tales como c-Fos, C-Jun y c-Myc, que dan como resultado el intercambio de un número de genes implicados en la proliferación. Una diversidad de factores de crecimiento, tales como la familia erbB, PDGF, FGF y VEGF transmiten señales a través de la ruta Ras - Raf - MEK -ERK. Además las mutaciones en los proto-oncogenes ras pueden dar como resultado una activación constitutiva de esta ruta. Los genes ras mutan en aproximadamente el 30% de todos los cánceres humanos y las frecuencias de las mutaciones ras son particularmente altas en cánceres de colon y páncreas (50% y 90%, respectivamente). Debido a su posición hacia abajo de diversos factores mitogénicos, MEK1 y 2 tienen un papel central en la transmisión de señales proliferativas desde la membrana plasmática al núcleo. Esto hace de estas proteínas una diana potencialmente mejor para terapia de cáncer debido a que su inhibición anularía numerosas rutas de señalización diferentes. Por lo tanto, un inhibidor MEK puede ser activo contra un amplio intervalo de cánceres, tales como, pero no limitados a, cáncer de mama, de colon, de pulmón, de ovarios y de páncreas. 2-(2-Cloro-4-yodofenilamino)-N-ciclopropilmetiloxi-3,4-difluorobenzamida, también conocida como CI-1040 es un potente y altamente selectivo inhibidor de ambas formas isomorfas de MEK, MEK1 y MEK2. La inhibición de la actividad de MEK por CI-1040 da como resultado una disminución significativa de los niveles de ERK1 y ERK2 fosforiladas. Esta disminución produce un bloqueo de G1 y deteriora el crecimiento de las células tumorales, tanto en cultivo como en ratones. CI-1040 ha demostrado actividad anticáncer contra un amplio espectro de tipos de tumores, incluyendo los de origen de colon o de páncreas (Sebolt -Leopold J., y col., Blockade of the MAP kinase pathway suppresses growth of colon tumors in vivo. Nature Med 1999; 5: 810 - 16; y Sebolt - Leopold J S, Summary of the preclinical pharmacology of CI-1040. RR 700 - 00156. 27 de Junio de 2000.).

CI-1040 se describe en la publicación PCT NQ WO 99/01426, que se incorpora en esta memoria descriptiva como referencia para su enseñanza de cómo preparar CI-1040, cómo formularlo en formas de dosificación y cómo usarlo para tratamiento oral crónico de tumores sólidos, tales como cánceres de mama, de colon, de próstata, de piel y de páncreas. CI-1040 también se describe en la patente de Estados Unidos Ns 6.251.943 para uso en el tratamiento o prevención de choque séptico. A/-[(R)-2,3-d¡hidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)-benzamida ("Compuesto A") es un inhibidor potente y altamente selectivo de MEK 1/2 que inhibe significativamente la fosforilación de ERK1 y ERK2 . El compuesto A se describe en la publicación PCT N9 WO 02/06213 que se incorpora en esta memoria descriptiva como referencia para su enseñanza de cómo prepararlo, cómo formularlo en formas de dosificación y cómo usarlo para tratamiento oral crónico de tumores sólidos, tales como cánceres de mama, de colon, de próstata, de piel y de páncreas. Es más potente y metabólicamente más estable que su predecesor CI-1040. La capecitabina es un carbamato de fluoropirimidina con actividad antineoplásica. Es un profármaco sistémico administrado oralmente de 5'-desoxi-5-fluorouridina (5'-DFUR) que se convierte a 5-fluorouracilo. El nombre químico de capecitabina es 5'-desoxi-5-fluoro-N-[(pentiloxi)carbonil]citidina. Se comercializa en los Estados Unidos como Xeloda™ (Laboratorios Roche). Está indicado para el tratamiento de pacientes con cáncer de mama con metástasis y tumores colorrectales. Se administra generalmente durante 14 días, seguido de un período de descanso de 7 días durante cada ciclo de 21 días. La Capecitabina se describe en la patente de Estados Unidos Ne 5.472.949.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona un procedimiento para tratar cáncer en un paciente en necesidad de dicho tratamiento, el procedimiento comprende la administración al paciente de una combinación de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de MEK y una cantidad terapéuticamente eficaz de capecitabina. La combinación de la presente invención se puede administrar simultáneamente, el inhibidor de MEK se puede administrar antes de la capecitabina o la capecitabina se puede administrar antes del inhibidor de MEK. Según la combinación o procedimiento de la presente invención, el inhibidor de MEK puede ser CI-1040 o N-[(R)-2,3-dihidroxipropox¡]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)benzamida. Adicionalmente, el procedimiento de la presente invención dispone que CI-1040 o N-[(R)-2,3-dihidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)benzamida se puede administrar antes que la capecitabina o la capecitabina se puede administrar antes de CI-1040 o N-[(R)-2,3-dihidroxipropox¡]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofen¡lamino)benzamida. La presente invención también proporciona un procedimiento para tratar cáncer en un paciente en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo el procedimiento la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de capecitabina seguido de la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de CI-1040. Adicionalmente la presente invención proporciona un procedimiento para tratar cáncer en un paciente en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo el procedimiento las etapas de administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de N-[(R)-2,3-dihidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)benzamida seguido de la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de capecitabina. Una realización de la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende capecitabina, CI-1040 y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Otra realización de la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende capecitabina, N-[(R)-2,3-dihidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilam¡no)benzamida y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Otro aspecto de la invención es un kit que comprende en un compartimiento una dosificación de CI-1040 o compuesto A y en otro compartimiento una dosificación de capecitabina. Por ejemplo, la invención incluye: (a) un envase blister que contiene formulaciones separadas de cada producto activo, tal como una forma de comprimido o cápsula de CI-1040 o compuesto A, y una forma de comprimido de capecitabina; y (c) un kit con formulaciones separadas de cada producto activo envasadas juntas en una caja con instrucciones para administración de la combinación.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN El paciente a tratar según esta invención incluye cualquier animal de sangre caliente, tal como, pero no limitado un ser humano, caballo, perro, cobaya o ratón. Por ejemplo el paciente es un ser humano. Los expertos en la técnica médica son capaces fácilmente de identificar pacientes individuales que están afectados con cáncer y que están en necesidad de tratamiento. Los cánceres típicos a tratar según esta invención incluyen, pero no se limitan a, cáncer de cerebro, de mama, de pulmón, tal como de pulmón de células no pequeñas, de ovarios, de páncreas, de próstata, de riñon, de colon, de cuello del útero, leucemia aguda, de estómago y otros cánceres susceptibles a tratamiento con capecitabina y/o inhibidores de MEK, tales como CI-1040 y compuesto A. El término "tratamiento" para el propósito de la presente invención incluye tratamiento, inhibición, control, profilaxis o prevención, mejoría o eliminación de una afección determinada, tal como cáncer, una vez que se ha verificado la afección determinada. CI-1040 y el compuesto A son inhibidores selectivos de MEK 1 y MEK 2. Los inhibidores selectivos de MEK 1 o MEK 2 son aquellos compuestos que inhiben las enzimas MEK 1 o MEK 2 sin inhibir sustancialmente otras enzimas tales como MKK3, ERK, PKC, Cdk2A, fosforilasaquinasa, quinasas de receptores de EGF y PDGF y C-src. En general, un inhibidor selectivo de MEK 1 o de MEK2 tiene un valor de CI5o para MEK1 o MEK 2 que es al menos un cincuentavo (1/50) de su CI50 para una de las otras enzimas mencionadas anteriormente. Un inhibidor selectivo puede tener un valor de CI50 que es al menos 1/100, 1/500 o incluso 1/1000, 1/5000 o menos de su CI50 para una o más de las enzimas mencionadas anteriormente. Un compuesto que es un inhibidor de MEK se puede determinar mediante el uso de un ensayo conocido por los expertos en la técnica que mide la inhibición de MEK. Por ejemplo, la inhibición de MEK se puede determinar usando los ensayos titulados "Ensayos enzimáticos" en la patente de Estados Unidos N9 5.525.625, columna 6, que comienza en la línea 35. La descripción completa de la patente de Estados Unidos Ne 5.525.625 se incorpora en esta memoria descriptiva como referencia. Específicamente, un compuesto es un inhibidor de MEK si un compuesto muestra actividad en el ensayo titulado "Ensayo en cascada para inhibidores de la ruta de la MAP quinasa" columna 6, línea 36 hasta columna 7, línea 4 de la patente de Estados Unidos 5.525.625 y/o muestra actividad en el ensayo titulado "Ensayo de MEK in vitro" en la columna 7, líneas 4 hasta 27 de la patente mencionada anteriormente. Alternativamente, la inhibición de MEK se puede medir en el ensayo descrito en el documento WO 02/06213 A1 , la descripción completa de la cual se incorpora en esta memoria descriptiva como referencia. Los ejemplos de inhibidores de MEK según la presente invención incluyen, pero no se limitan a los inhibidores de MEK descritos en las siguientes publicaciones PCT: documentos WO 99/01426, WO 99/01421 , WO 00/42002, WO 00/42022, WO 00/41994, WO 00/42029, WO 00/41505, WO 00/42003, WO 01/68619 y WO 02/06213. Una cantidad o dosificación terapéutica o farmacéuticamente eficaz de CI-1040, compuesto A o capecitabina se puede entender que comprende una cantidad suficiente para evitar o inhibir el crecimiento de células tumorales o la progresión de metástasis de cáncer en las combinaciones de la presente invención. La efectividad terapéutica o farmacológica de los regímenes de dosis y administración también se puede caracterizar como la capacidad de inducir, potenciar, mantener o prolongar la remisión en pacientes que experimentan tumores específicos.

Los compuestos a utilizar en los procedimientos o combinaciones de la presente invención se pueden administrar en dosificaciones o dosis comúnmente empleadas clínicamente. Los expertos en la técnica serán capaces de determinar, según procedimientos conocidos, la cantidad o dosificación terapéuticamente eficaz adecuada de cada compuesto, como se usa en la combinación de la presente invención, y de administrar a un paciente, teniendo en cuenta factores tales como edad, peso, salud general, el compuesto administrado, la vía de administración, la naturaleza y avance del cáncer que requiere tratamiento y la presencia de otras medicaciones. Dichas dosis se pueden calcular de la manera normal, por ejemplo, sobre el área superficial del cuerpo. Alternativamente, una cantidad eficaz o una cantidad terapéuticamente eficaz se puede calcular en mg/kg de peso corporal. Se pueden administrar cápsulas, comprimidos u otras formulaciones comercialmente disponibles (tales como líquidos y comprimidos recubiertos con una película) según los procedimientos descritos. Generalmente la capecitabina para monoterapia se administra oralmente a una dosis de aproximadamente 2500 mg/m2 diariamente durante 2 semanas, seguido de un período de una semana de descanso. El producto se suministra comercialmente en comprimidos de 150 mg y 500 mg. Los comprimidos se administran a la cadencia de aproximadamente 1 a aproximadamente 4 veces al día durante el período de tratamiento. Las dosis diarias de capecitabina pueden, por ejemplo, variar entre aproximadamente 1000 mg/m2 y aproximadamente 3500 mg/m2 por día en las combinaciones de esta invención. Generalmente el CI-1040 para monoterapia se puede administrar hasta que se observa progresión del estado de la enfermedad, por ejemplo, CI-1040 se puede administrar diariamente entre aproximadamente 2 - 4 semanas y la duración de la vida del paciente. Cl-1040 se puede administrar a dosis entre aproximadamente 100 mg y aproximadamente 1600 mg una vez al día (abreviadamente "qd"), o entre aproximadamente 400 y aproximadamente 800 mg dos o tres veces al día (abreviadamente "bid" o "tid" respectivamente) con o sin alimento. Por ejemplo, CI-1040 se puede administrar a 800 mg dos veces al día con alimento. Típicamente CI-1040 se administra oralmente, por ejemplo, en forma de cápsulas que tienen ingrediente activo en la cantidad de 5, 25 y 200 mg por cápsula. Se pueden practicar períodos de tratamiento múltiple, según dictamine el médico facultativo asistente y el paciente particular y la afección que se está tratando. Generalmente el compuesto A para monoterapia se puede administrar hasta que se observa la progresión del estado de la enfermedad, por ejemplo, el compuesto A se puede administrar diariamente entre aproximadamente 2 - 4 semanas y la duración de la vida del paciente. El compuesto A se puede administrar a dosis entre aproximadamente 0,2 mg/m2 y aproximadamente 2,5 mg/m2. Por ejemplo, el compuesto A se puede administrar a dosis entre aproximadamente 0,6 mg/m2 y aproximadamente 1 ,8 mg/m2, que es equivalente a 1 a 3 mg en un paciente de 60 kg. El compuesto A se puede administrar oralmente, por ejemplo, en forma de cápsulas, tales como cápsulas duras de gelatina, que tienen ingrediente activo en las cantidades de 0,25, 1 , 5 y 25 mg por cápsula. Se pueden practicar períodos de tratamiento múltiple, según dictamine el médico facultativo asistente y el paciente particular y la afección que se está tratando. En algunos casos, niveles de dosificación inferiores al límite inferior del intervalo anteriormente mencionado pueden ser más que adecuados, mientras en otros casos todavía se pueden emplear dosis mayores, según determinen los expertos en la técnica. Más particularmente, según el procedimiento de la presente invención, el nivel de dosificación eficaz de un inhibidor de MEK puede variar entre aproximadamente 5% y aproximadamente 100% del nivel de dosificación eficaz cuando se usa sin capecitabina. Además, el nivel de dosificación eficaz de capecitabina puede variar entre aproximadamente 5% y aproximadamente 100% del nivel de dosificación eficaz cuando se utiliza sin inhibidor de MEK. De acuerdo con procedimientos generalmente conocidos y practicados en la técnica, cuando se usa en combinación, el nivel de dosificación de capecitabina y del inhibidor de MEK se puede ajustar para conseguir el nivel de dosificación eficaz óptimo. La práctica de los procedimientos de esta invención se puede llevar a cabo mediante diversos regímenes de administración. Un procedimiento de tratamiento o inhibición de células cancerosas o tumores de esta invención comprende la administración contemporánea o simultánea de cantidades farmacéutica o terapéuticamente eficaces de un Inhibidor de MEK, tales como CI-1040 y el compuesto A, y capecitabina a un paciente en necesidad de dicho tratamiento. Una administración conjunta de ambos compuestos se puede llevar a cabo durante un período de tiempo considerado apropiado por un profesional médico para el receptor en cuestión. Un régimen puede incluir la administración de ambos compuestos durante un período entre 2 y 4 semanas. La repetición de la administración conjunta se puede llevar a cabo durante una serie de períodos de dosificación, según sea necesario para lograr la reducción o disminución deseada de células cancerosas. Opcionalmente, la serie de administración conjunta se puede separar mediante períodos de no tratamiento de entre, por ejemplo 2 y 6 semanas para permitir descanso y recuperación convencional del paciente. Los procedimientos de esta invención también incluyen la administración a un paciente en necesidad del mismo de una cantidad farmacéutica o terapéuticamente eficaz de CI-1040 o compuesto A para o durante un período o régimen específico, seguido de la administración al paciente de un régimen posterior de una cantidad farmacéutica o terapéuticamente eficaz de capecitabina. Un ejemplo de dicho régimen incluiría la administración a un paciente de una cantidad terapéutica o farmacéuticamente eficaz de CI-1040 durante entre 14 y 28 días, seguido de la administración de una cantidad farmacéutica o terapéuticamente eficaz de capecitabina durante un período posterior y de conexión de entre 7 y 14 días. La administración de capecitabina se puede separar con períodos de no tratamiento de entre, por ejemplo, 2 días y una semana para permitir descanso y recuperación convencional del paciente. Otro procedimiento para practicar esta invención comprende administraciones secuenciales de un régimen de administración de capecitabina, seguido de un régimen de administración de CI-1040 o compuesto A. Los ejemplos de dicho régimen incluirían una administración inicial de una cantidad farmacéutica o terapéuticamente eficaz de capecitabina durante entre 7 y 14 días con períodos de no tratamiento de entre 2 días y una semana para permitir descanso y recuperación convencional del paciente, seguido de la administración de una cantidad farmacéutica o terapéuticamente eficaz de CI-1040 durante entre 14 y 28 días. Las secuencias repetitivas de este tipo de régimen de capecitabina seguido de régimen de CI-1040 se pueden continuar, según sea necesario, con períodos opcionales provisionales de no tratamiento según lo determine un profesional médico. Los compuestos de los procedimientos o combinaciones de la presente invención se pueden formular antes de la administración. Estos compuestos se pueden formular bien separadamente o en combinación con vehículos farmacéuticamente aceptables como se sabe en la técnica y administrar en una amplia diversidad de formas de dosificación según se conoce en la técnica. Cuando se preparan las composiciones farmacéuticas de la presente invención, el ingrediente activo se mezclará usualmente con un vehículo, o se diluirá con un vehículo o estará contenida en un vehículo. Dichos vehículos incluyen, pero no se limitan a, diluyentes o cargas sólidas, excipientes, medios acuosos estériles y diversos disolventes orgánicos no tóxicos. Las formas o composiciones farmacéuticas de dosificación unitaria incluyen comprimidos, cápsulas, tales como cápsulas de gelatina, pildoras, polvos, gránulos, soluciones y suspensiones orales acuosas y no acuosas, pastillas, trociscos, caramelos duros, pulverizaciones, cremas, pomadas, supositorios, gelatinas, geles, pastas, lociones, ungüentos, soluciones inyectables, elixires, jarabes y soluciones parenterales envasadas en recipientes adaptados para la subdivisión en dosis individuales. Los inhibidores de MEK, tales como CI-1040 y compuesto A, se pueden formular para la administración mediante vías oral o parenteral. También se pueden administrar tópicamente, tal como transdérmicamente, en forma de parches cutáneos o lociones, o en forma de supositorios. La administración simultánea de un inhibidor de MEK y capecitabina puede ser mediante la misma (ambos ingredientes activos mediante inyección local o sistémica) o diferentes vías. Por ejemplo, mientras CI-1040 se puede formular con capecitabina, por ejemplo, en solución para Inyección o Infusión intravenosa, los agentes activos se formularan más típicamente individualmente en sus preparaciones normales y se administraran individualmente. Por ejemplo, CI-1040 y capecitabina se pueden formular individualmente y envasarse juntas, en un kit por ejemplo, para uso conveniente. Alternativamente, los agentes se pueden formular juntos en una sola formulación, en cuyo caso la capecitabina estará presente en concentraciones que varían entre aproximadamente 1 y aproximadamente 1000 partes en peso relativo al inhibidor de MEK, y el inhibidor de MEK estará presente a concentraciones entre aproximadamente 1000 y aproximadamente 1 parte en peso relativo a la capecitabina. Generalmente, los agentes se administrarán a aproximadamente dosis iguales o de otra manera aprobadas por las agencias reguladoras de salud.

Las formas de dosificación unitarias se pueden adaptar para diversos procedimientos de administración, incluyendo formulaciones de liberación controlada, tales como implantes subcutáneos. Los procedimientos de administración incluyen oral, rectal, parenteral (intravenosa, intramuscular y subcutánea), intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, intravesical, local (gotas, polvos, ungüentos, geles o crema) y mediante inhalación (un pulverizador bucal o nasal). Para la administración oral, se pueden emplear comprimidos que contienen diversos excipientes tales como celulosa microcristalina, citrato sódico, carbonato cálcico, fosfato dicálcico y glicina junto con diversos disgregantes tales como almidón (y preferiblemente almidón de maíz, de patata o de tapioca), ácido algínico y ciertos silicatos complejos, junto con aglutinantes de granulación como polivinilpirrolidona, sacarosa, gelatina y goma arábiga. Adicionalmente, los agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, lauril sulfato sódico y talco son a menudo muy útiles para propósitos de formación de comprimidos. Las composiciones sólidas de un tipo similar también se pueden emplear como cargas en cápsulas de gelatina; los materiales preferidos a este respecto también incluyen lactosa o azúcar de leche así como polietilenglicoles de alto peso molecular. Cuando se desean suspensiones y/o elixires acuosos para administración oral, se puede combinar el ingrediente activo con diversos agentes edulcorantes o aromatizantes, materias colorantes o tintes y, si se desea, agentes emulsionantes y/o de suspensión así como, junto con tales diluyentes como agua, etanol, propilenglicol, glicerina y diversos tipos de combinaciones de los mismos. Las formulaciones parenterales incluyen soluciones, dispersiones, suspensiones, emulsiones acuosas y no acuosas y polvos estériles farmacéuticamente aceptables para la preparación de los mismos. Los ejemplos de vehículos incluyen agua, etanol, polioles (propilenglicol, polietilenglicol), aceites vegetales y ésteres orgánicos inyectables tales como oleato etílico. La fluidez se puede mantener mediante el uso de un revestimiento tal como lecitina, un tensioactivo o manteniendo el tamaño de partícula apropiado. Adicionalmente, también es posible administrar los agentes activos usados de acuerdo con la presente invención tópicamente, y esto se puede hacer mediante cremas, gelatinas, geles, pastas, parches, ungüentos y similares, de acuerdo con la práctica farmacéutica habitual.

Los vehículos para formas de dosificación sólida incluyen (a) cargas o extensores, (b) aglutinantes, (c) humectantes, (d) agentes disgregantes, (e) retardadores de solución, (f) aceleradores de absorción, (g) adsorbentes, (h) lubricantes, (i) agentes de tamponación y (j) propulsores. Las composiciones farmacéuticas también pueden contener adyuvantes tales como agentes conservantes, humectantes, emulsionantes y dispersantes; agentes antimicrobianos tales como parabenos, clorobutanol, fenol y ácido sórbico; agentes isotónicos tales como un azúcar o cloruro sódico; agentes prolongadores de absorción tales como monoestearato de aluminio y gelatina; y agentes potenciadores de absorción. Los siguientes ejemplos detallados posteriormente establecen los procedimientos de la presente invención como se describe en general anteriormente. Estos ejemplos son solamente ilustrativos y no tienen la intención de limitar la invención de ninguna manera.

EJEMPLO 1 Modelo tumoral. Carcioma de colon de ratón C26/clon 10 (también denominado "tumor C26/clon 10") se utilizó para evaluar la actividad antitumoral que se producía cuando CI-1040 se proporcionaba en combinación con capecitabina. Los procedimientos descritos por Corbett y col., se usaron para transplante de tumores y para la medición del desarrollo tumoral (descrito más adelante) [Corbett T. y col., "Tumor models and the discovery and secondary evaluation of solid tumor active agents," Int J. Pharmacognosy, 1995; 33 (suplemento): 102 - 122.; Corbett T, y col "Is the P38 murine tumor no longer adequate as a drug discovery model?" Invest New Drugs 1987; 5: 3 - 20; Corbett TH, y col., 'The use of rodent tumors in experimental cáncer therapy: Conclusions and recommendations," En: RF Kallman (ed), Rodent models in experimental chemotherapy, (Perqamon Press, 1987), 233 - 247.; Corbett T, Valeriot F, y col "Use of rodent solid tumors for drug discovery". En: BA Teicher, (ed), Cáncer Drug Discovery, (Human Press Inc., 1997) 75 - 99. Corbett, TH, y col., "Tumor induction relationships in development of transplantable cancers of the colon in mice of chemotherapy assays, with a note on carcinogen structure," Cáncer fles.1975; 35 (9): 2434 - 2439; y Corbertt, TH, y col., "Evaluation of single agents and combinations of chemotherapeutic agents in mouse colon carcinomas", Cáncer, 1977; 40 (5): 2660 - 2690]. Ratones hembra Balb/C obtenidos de los laboratorios Charles River (Wilmington, MA) se utilizaron para mantener el tumor y para el ensayo antitumoral. Estos ratones son el hospedador singénico para el tumor C26/clon 10. Se les suministró alimento y agua a los ratones a voluntad. Los tiempos medios de duplicación del tumor C26/clon 10 en estos estudios variaban entre 3,6 y 4,5 días. A los animales de ensayo se les implantaron subcutáneamente el día 0 de 30 a 60 mg de fragmentos de tumor usando una aguja trocar de calibre 12. Se midieron los tumores con un calibrador 3 veces por semana. El peso de los tumores se calculó a partir de las mediciones del calibrador mediante la siguiente ecuación. Peso del tumor (mg) = (a x b2)/2, en la que "a" es la longitud del tumor en milímetros (abreviadamente "mm") y "b" es la anchura del tumor en mm. El día 7, cuando los pesos medios de los tumores estaban entre 220 y 260 mg, se distribuyó aleatoriamente a los animales de ensayo en los grupos de control y de tratamiento y se comenzó la quimioterapia. Estos tamaños de tumores representan un estado avanzado del tumor C26/clon 10. Agentes antitumorales. Se suspendió CI-1040 en hidroxipropilmetilcelulosa al 0,5% y Tween - 80 al 0,2% en agua y se administró oralmente a diversas dosificaciones en 0,5 mi de suspensión de fármaco. Se suspendió la capecitabina en metilcelulosa al 0,5% en agua y se administró oralmente a diversos niveles de dosificación en 0,5 mi de suspensión de fármaco. Programas de dosificación v tratamiento. Los niveles de dosificación y programas de tratamiento de los agentes antitumorales, CI-1040 y capecitabina fueron los usados comúnmente en estudios preclínicos para tratar tumores sólidos experimentales. Estas dosis y programas se pueden pasar a escala alométricamente para seres humanos. CI-1040 se administró oralmente, tres veces al día (abreviadamente "tid") durante 14 días consecutivos. Las dosis de CI-1040 eran 37,5, 75, 150 y 300 mg/kg/tratamiento (1 12,5, 225, 450 y 900 mg/kg/día). La capecitabina se administró oralmente, una vez al día (abreviadamente "qd"), durante 2 cursos de 5 días con dos días de descanso entre los cursos. Las dosificaciones de capecitabina eran 500 y 750 mg/kg/día, siendo la dosis más alta la dosis máxima tolerada. Ningún fármaco, proporcionado solo a estas dosis, ocasionaba pérdidas de peso significativas o muerte tóxica. Para todos los programas, los tratamientos comenzaron 7 días después del implante tumoral cuando el tumor estaba en fase avanzada. Mediciones de actividad antitumoral. Los puntos finales usados para evaluar la actividad antitumoral eran los siguientes: respuestas tumorales completas y parciales, retraso de desarrollo tumoral, y el número de ratones exentos de tumores al final del estudio. Una respuesta completa se clasificaba como una disminución de 100% de la masa tumoral, y una respuesta parcial se clasificaba como un descenso de al menos un 50% en la masa tumoral. Además de la reducción de la masa tumoral, el retraso del desarrollo tumoral (medido mediante procedimientos descritos por Coibett y col., enumerados anteriormente) se utilizó para cuantificar la actividad antitumoral de tumores que no respondían completamente, o se volvían a desarrollar después de una respuesta completa. El retraso del desarrollo tumoral se expresaba como valor T - C, donde "T" y "C" son el tiempo medio en días requerido para que los tumores del grupo de tratamiento y grupo de control (respectivamente) alcanzaran un tamaño predeterminado de 750 mg (el "tamaño de evaluación"). A partir del valor de retraso de crecimiento tumoral se calculó el log-?? de la destrucción neta de células tumorales como sigue: Logio de destrucción neta de células tumorales = [(T - C) - Rx] / 3,32 x Td donde Td" es el número de días para que la masa tumoral se duplique y "Rx" es el total de días de tratamiento. Td se estimó a partir de la línea recta de mejor ajuste de una representación lineal logarítmica de los tumores de los grupos de control en desarrollo exponencial. La conversión de los valores T - C a logio de destrucción de células es posible debido a que el valor de Td para los tumores que se vuelven a desarrollar después del tratamiento es aproximadamente el mismo que para los ratones control no tratados. El valor de log 0 de destrucción neta normaliza los datos de eficacia para regímenes de tratamiento de duración variable. Los valores positivos indican que se ha producido una reducción real de peso tumoral. Los valores negativos indican el desarrollo real tumoral (aunque posiblemente más lento) durante el tratamiento. Los supervivientes exentos de tumores se excluyeron de estos cálculos. Resultados. Las actividades antitumorales que se produjeron cuando se administraban CI-1040 y capecitabina simultáneamente se muestran en la tabla 1. En este estudio, comenzando el día 7 y terminando el día 20, CI-1040 se administraba oralmente, tres veces al día. La dosis de CI-1040 variaba entre 37,5 y 300 mg/kg/tratamiento (1 12,5 a 900 mg/kg/día). La capecitabina se proporcionó oralmente, una vez al día, los , . mg/kg/día. Como se muestra en la tabla 1 , los ratones de control de vehículo perdieron el 10,5% de su peso corporal inicial durante el tratamiento. El carcinoma C26/clon 10 es un tumor altamente caquéxico y se esperaba esta cantidad de pérdida de peso. Los tumores en los ratones tratados con vehículo se desarrollaron a una velocidad normal y no diferían notablemente del crecimiento de los tumores en los ratones de control no tratados. Todos los animales que recibieron CI-1040 solo, sobrevivieron a un curso total de tratamiento y no hubo muertes retrasadas. En el intervalo de dosificación de CI-1040 administrado, los ratones perdieron aproximadamente el 5% de su peso corporal inicial que es aproximadamente la mitad de la observada en los ratones de control de vehículo. Una cantidad inferior de pérdida de peso en los ratones que llevaban el carcinoma de colon C26/clon 10 se observa consecuentemente con la terapia CI-1040. CI-1040 solo, produjo un retraso de desarrollo tumoral dependiente de la dosis que variaba entre 3,8 días para la dosis inferior y 16,7 días para la dosis alta. A 300 mg/kg/tratamiento, CI-1040 no produjo respuestas tumorales completas y produjo un 20% de respuestas parciales. Se observó un 10% de respuestas tumorales completas y ninguna respuesta parcial a una dosis de 150 mg/kg/tratamiento. No se observó ninguna respuesta completa o parcial con las dosis inferiores de CI-1040. Ninguno de los ratones estaba exentos de tumores cuando finalizó el estudio. Todos los animales que recibieron solo capecitabina sobrevivieron a toda la duración del tratamiento, y no hubo muertes retrasadas. Similar a CI-1040, los ratones tratados con capecitabina sola a ambas dosis perdieron aproximadamente el 5% de su peso corporal inicial. Ambas dosificaciones de capecitabina produjeron el mismo retraso de desarrollo tumoral de aproximadamente 18 días. A 500 mg/kg, la capecitabina produjo un 40% de respuestas tumorales completas y un 10% de respuestas parciales. De los ratones cuyos tumores respondían completamente, un 30% estaban todavía exentos de tumores cuando terminó el estudio el día 93. La dosis más alta de capecitabina produjo un 70% de respuestas tumorales completas y un 10% de respuestas parciales. Todos los ratones que tuvieron respuesta tumoral completa estaban exentos de tumores cuando terminó el estudio. Como se muestra en la tabla 1 , CI-1040 no se puede administrar a 150 ó 300 mg/kg/tratamiento con capecitabina a 750 mg/kg debido bien a una pérdida inaceptable de peso o a un número inaceptable de muertes. CI-1040 a su dosis más alta no se podría tampoco administrar con capecitabina a 500 mg kg debido a un número inaceptable de muertes. Cl-1040 a 75 mg/kg/tratamiento en combinación con capecitabina a 750 mg/kg produjo un 100% de respuestas tumorales completas. El sesenta por ciento de estos ratones estaban exentos de tumores cuando terminó el estudio.

Tabla 1 : Efecto antitumoral de Cl-1040 en combinación con capecitabina frente a carcinoma C26/clon 10 de ratones Cl-1040 Capecitabina Muertes no % de Efecto antitumoral Dosis" Programa Dosis" Programa específicas cambio de CH PRU T-C* (+) Log10 de Exención de pesob destrucción tumores9 neta * Vehículo tid, días 7 - 20 Vehículo qd, días 7-11 , 14- 0/10 -10,5 0/10 0/10 0 0 0/10 1 I R O 37,5 tid, días 7 - 20 Ninguno Ninguno 0/10 -5, 0/10 0/10 3,8 -0,62 0/10 75,0 tid, días 7 - 20 Ninguno Ninguno 0/ 0 -5, 0/10 0/10 9,8 -0,21 0/10 150,0 tid, días 7 - 20 Ninguno Ninguno 0/10 -5, 1/10 0/10 13,5 0,03 1/10 300,0 tid, días 7 - 20 Ninguno Ninguno 0/10 -5, 0/10 2/10 16,7 0,25 0/10 Ninguno Ninguno 500 qd, días 7-11 , 14- 0/10 -5, 4/10 1/10 18,4 0,50 3/10 1 I R O Ninguno Ninguno 750 qd, días 7-11 , 14- 0/10 -5, 7/10 1/10 18,2 0,48 7/10 1 I R O 37,5 tid, días 7 - 20 500 qd, días 7-11 , 14- 0/10 -10,0 4/10 2/10 18,4 (22,2) 0,36 2/10 75,0 tid, días 7 - 20 500 qd, días 7-11, 14- 0/10 -10,5 4/10 1/10 18,3(28,2) 0,35 1/10 18 150,0 t¡d,días7-20 500 qd, días 7-11, 14- 0/10 -10,0 6/10 0/10 18,3(31,9) 0,35 2/10 18 300,0 tid,días7-20 500 qd, días 7-11 , 14- 2/10h -10,0 3/10 3/10 21,2(35,1) Tóxico 2/10 18 37,5 tid, días 7 -20 750 qd, días 7-11, 14- 0/10 -10,0 5/10 3/10 20,0(22,0) 0,47 3/10 18 75,0 tid, días 7 -20 750 qd, días 7- 1 , 14- 0/10 -10,5 10/10 0/10 20,1 (28,0) 0,48 6/10 18 150,0 tid, días 7 -20 750 qd, días 7-11, 14- 0/10 -15,8 10/10 0/10 24,9(31,7) Tóxico 6/10 18 300,0 tid, días 7 -20 750 qd, días 7-11, 14- 2/1 Oh -15,8 8/10 0/10 31,5(34,9) Tóxico 2/10 18 a. Dosis es en mg/kg/inyección. El vehículo para CI-1040 se componía de hidroxipropilmetilcelulosa al 0,5% y Tween-80 al 0,2% en agua. El vehículo para capecitabina era metilcelulosa al 0,5%. Ambos fármacos se administraron oralmente. El tratamiento se inició cuando los tumores tenían aproximadamente 250 mg de masa. b. Una pérdida de peso es el porcentaje de pérdida de peso observado durante el tratamiento; el porcentaje de ganancia de peso es el incremento de peso observado al final del tratamiento. c. La respuesta completa se define como una reducción del 100% de la masa de tumor inicial. d. La respuesta parcial se define como una reducción de al menos el 50% de la masa de tumor inicial. e. T - C es la diferencia en días para que los tumores tratados y de control alcancen 750 mg. Los valores en paréntesis representan los valores T - C para un 5 efecto antitumoral aditivo. Todos los supervivientes exentos de tumores se excluyen de los cálculos T - C. f. Log10 de destrucción neta de células tumorales se calculó a partir del valor T - C. g. Exención de tumores representa los ratones que tenían un tumor indetectable cuando terminó el estudio el día 93. . Esta combinación se considera tóxica debido a un número inaceptable de muertes. Los valores antitumorales para los animales supervivientes se muestran solamente para comparación. 10 i. Esta combinación se considera tóxica debido a una pérdida inaceptable de peso. Los valores antitumorales para los animales supervivientes se muestran solamente para comparación. j. Esta combinación se considera tóxica debido a una pérdida inaceptable de peso. Los valores antitumorales para los animales supervivientes se muestran solamente para comparación.

EJEMPLO 2 La tabla 2 más adelante muestra el efecto antitumoral que se produjo cuando CI-1040 se administró antes de la capecitabina según el procedimiento del ejemplo 1 . CI-1040 se proporcionó oralmente tres veces al día, a dosis de 37,5, 75, 150 y 300 mg/kg/tratamiento. De forma coherente con los resultados del ejemplol , los ratones de control de vehículo que llevaban el carcinoma de colon de ratón C26/clon 10 perdieron el 10% de su peso corporal inicial. Hubo una muerte en el grupo de ratones que se habían tratado con CI-1040 solo a 300 mg/kg/tratamiento. (Este ratón se encontró muerto el día 19 y había perdido el 22% de su peso corporal inicial). Esta muerte no se consideró que estuviera relacionada con el fármaco, pero no se conoció su causa. También coherente con los resultados del ejemplo 1 , los tumores en los ratones tratados con vehículo se desarrollaron a una velocidad normal y no diferían notablemente del desarrollo de los tumores en los ratones de control no tratados. Los ratones restantes en este grupo ganaron un 5,3% de peso corporal el día 19. No se observó ninguna muerte en los otros grupos de tratamiento con CI-1040 y coherente con el ejemplo 1 , CI-1040 tenía un efecto anti - caquexia. El CI-1040 solo, produjo un incremento dependiente de dosis en el retraso del desarrollo tumoral que variaba entre 0,8 y 9,9 días. A 300 mg/kg/tratamiento, CI-1040 no produjo respuestas tumorales completas y produjo un 60% de respuestas parciales. No se observaron respuestas completas o parciales con las otras dosis de CI-1040. Una muerte se produjo en cada uno de los dos grupos tratados con capecitabina sola. Similar a la muerte observada en el grupo de dosis alta de CI-1040, estas muertes eran también inusuales debido típicamente a que la capecitabina a estas dosis no produce muertes. Las muertes en los dos grupos tratados con capecitabina sola se produjeron varios días después del último tratamiento y no se conocen sus causas. La capecitabina produjo un incremento dependiente de dosis en el retraso del desarrollo tumoral que variaba entre 10,4 y 19,1 días. A 500 mg kg/día, la capecitabina no produjo respuestas tumorales completas y produjo un 10% de respuestasparciales. La dosis más alta de capecitabina produjo un 50% de respuestas tumorales completas y un 20% de parciales. El treinta por ciento de los ratones que tuvieron respuestas tumorales completas estaban todavía exentos de tumores cuando terminó el experimento el día 41 . Cuando el CI-1040 se administró antes de capecitabina, todas las combinaciones de dosificación de estos dos fármacos se toleraban bien. Las pérdidas más altas de peso no eran mayores que las observadas en los grupos de control de vehículo, y en la mayoría de los casos eran menos graves que las de este grupo de control. No se observó ninguna muerte en ningún grupo de combinación tratado con CI-1040 y capecitabina. La carencia de muertes en los grupos de combinación soporta la idea de que las muertes en los grupos de fármacos únicos no se relacionaban con los fármacos. En los grupos donde Cl-1040 se combinó con la dosis baja de capecitabina no hubo respuestas tumorales completas ni parciales. Los retrasos de desarrollo tumoral variaban entre 1 ,2 días para la combinación de dosis más baja y 17,5 días para la combinación de dosis alta. En el grupo tratado con la dosis más alta de CI-1040 y la dosis más alta de capecitabina, no hubo respuestas tumorales completas y hubo un 10% de respuestas parciales. No hubo respuestas tumorales completas ni parciales en los otros grupos de combinaciones con la dosis de 750 mg/kg de capecitabina. Los retrasos de crecimiento tumoral en los grupos de combinación con la dosis alta de capecitabina eran similares a los de los grupos de combinación con la dosis de capecitabina baja.

Tabla 2: Efecto antitumoral de CI-1040 en combinación con capecitabina frente a carcinoma C26/clon 10 de ratones tid, días 7 - 37,5 Ninguno Ninguno 0/10 0 0/10 0/10 0,8 -0,94 0/10 20 tid, días 7 - 75,0 Ninguno Ninguno 0/10 +5,3 0/10 0/10 3,7 -0,72 0/10 20 tid, días 7 - 150,0 Ninguno Ninguno 0/10 0 0/10 0/10 8,6 -0,34 0/10 20 tid, días 7 - 300,0 Ninguno Ninguno 1/10 +5,3 0/10 6/10 9,9 -0,24 0/10 20 Ninguno Ninguno 500 qd, días 7-11 , 14-18 1/10 0 0/10 1/10 10,4 -0,05 0/ 0 Ninguno Ninguno 750 qd. días 7-11, 14-18 1/10 -5,3 5/10 2/10 19,1 0,63 3/10 tid, días 7 - qd, días 21-25, 28- 37,5 500 0/10 -10,5 0/10 0/10 1,2(11,2) -1,84 0/10 20 32 tid, días 7 - qd, días 21-25, 28- 75,0 500 0/10 -5,3 0/10 0/10 3,4(14,1) -1,67 0/10 20 32 tid, días 7 - qd, días 21-25, 28- 150,0 500 0/10 0 0/10 0/10 16,0(19,0) -0,70 0/10 20 32 tid, días 7- qd, días 21-25, 28- 300,0 500 0/10 0 0/10 0/10 17,5(20,3) -0,58 0/10 20 32 tid, días 7- qd, días 21-25, 28- 37,5 750 0/10 -5,3 0/10 0/10 1,2(19,9) -1,84 0/10 20 32 tid, días 7 - qd, días 21 -25, 28- 75,0 750 0/10 -10,5 0/10 0/10 16,8 (22,8) -0,63 0/10 20 32 tid, días 7 - qd, días 21-25, 28- 150,0 750 0/10 0 0/10 0/10 9,2 (27,7) -1,22 0/10 20 32 tid, días 7- qd, días 21-25, 28- 300,0 750 0/10 O 0/10 1/10 19,0(29,0) -0,46 0/10 20 32 a. Dosis es en mg/kg/inyección. El vehículo para CI-1040 se componía de hidroxipropilmetilcelulosa al 0,5% y Tween-80 al 0,2% en agua. El vehículo capecitabina era metilcalulosa al 0,5%. Ambos fármacos se administraron oralmente. El tratamiento se inició cuando los tumores tenían aproximadamente 250 mg de masa. b. Una pérdida de peso es el porcentaje de pérdida de peso observado durante el tratamiento; el porcentaje de ganancia de peso es el incremento de peso observado al final del tratamiento. 5 c. La respuesta completa se define como una reducción del 100% de la masa de tumor inicial. d. La respuesta parcial se define como una reducción de al menos el 50% de la masa de tumor inicial. e. T - C es la diferencia en días para que los tumores tratados y de control alcancen 750 mg. Los valores en paréntesis representan los valores T - C para un efecto antitumoral aditivo. Todos los supervivientes exentos de tumores se excluyen de los cálculos T - C. f. Log10 de destrucción neta de células tumorales se calculó a partir del valor T - C. 10 g. Exención de tumores representa los ratones que tenían un tumor indetectable cuando terminó el estudio el día 41.

EJEMPLO 3 La tabla 3 más adelante muestra el efecto antitumoral que se produjo cuando al tratamiento con capecitabina le siguió el tratamiento con CI-1040 según el procedimiento del ejemplo 1. De forma coherente con el ejemplo 1 , hubo una pérdida de peso del 10,5% producida por el tumor en el grupo control de vehículo. Los tumores en los ratones tratados con vehículo se desarrollaron a una velocidad normal y no diferían notablemente del desarrollo de los tumores en los ratones de control no tratados. CI-1040 era bien tolerado a todas las dosis. Las mejoras en los pesos de ratón no eran tan grandes como las de los ejemplos 1 y 2. Las pérdidas de peso variaban entre 5,3% y 10,5%. No hubo respuestas completas de tumores en ninguno de los grupos a los que se proporcionó CI-1040 solo. Sin embargo, se observó un porcentaje tumoral parcial de 40% en el grupo tratado con la dosis más alta de CI-1040 y se observó porcentajes de 10% de respuestas en los grupos tratados con 75 y 150 mg/kg/tratamiento de CI-1040. No se observó ninguna respuesta completa ni parcial en el grupo tratado con la dosis más baja de CI-1040. CI-1040 producía un incremento dependiente de dosis en el retraso de desarrollo tumoral que variaba entre 1 ,9 días y 12,5 días. En los dos grupos tratados con capecitabina sola, no hubo ninguna muerte, y las pérdidas de peso eran similares a las observadas en los grupos tratados con CI-1040 solo. La dosis de 500 mg/kg de capecitabina no produjo ninguna respuesta tumoral completa ni parcial. No hubo respuestas tumorales completas y hubo un 40% de respuestas parciales en el grupo tratado con 750 mg/kg de capecitabina. Las dosis baja y alta de capecitabina produjeron esencialmente el mismo retraso de desarrollo tumoral de 13,4 y 14,6 días respectivamente. La tabla 3 muestra los efectos sinérgicos observados cuando al tratamiento con capecitabina le siguió el tratamiento con CI-1040. Cuando se trataban primero los ratones con 500 mg/kg de capecitabina y después se trataban con CI-1040 a dosis entre 37,5 y 300 mg/kg/tratamiento no hubo ninguna muerte. También, las pérdidas de peso no eran mayores que las observadas en el grupo control de vehículo. La mejor actividad antitumoral se observó cuando al tratamiento con 500 mg/kg de capecitabina seguían tratamientos con CI-1040 bien a 150 ó a 300 mg/kg/tratamiento. En el grupo que recibió 150 mg/Kg/tratamiento de CI-1040 hubo un 40% de respuestas completas y un 10% de respuestas parciales. El retraso de desarrollo tumoral producido por esta combinación era 26,6 días que es mayor que el aditivo. El veinticinco por ciento de los ratones con respuesta tumoral completa estaba todavía exento de tumores cuando el experimento terminaba el día 56. En el grupo tratado con 500 mg/kg de capecitabina seguido del tratamiento con 300 mg/kg/tratamiento de CI-1040, había 60% de respuestas tumorales completas y 10% parciales. El retraso de desarrollo tumoral era 27,9 días que es también mayor que el aditivo. El diez por ciento de ratones estaban exentos de tumores cuando terminó el estudio. En los grupos que obtuvieron menores dosis de Cl-1040, solamente se observó un porcentaje de respuesta completa de 10% cuando a 500 mg/kg de capecitabina seguía 37,5 mg/kg/tratamiento de CI-1040. Los retrasos de crecimiento tumoral producidos por las combinaciones con 500 mg/kg de capecitabina y bien 37,5 ó 75 mg/kg/tratamiento de CI-1040 eran mejor que los producidos por cualquier fármaco solo. La tolerabilidad no era buena en estos grupos que obtuvieron 750 mg/kg de capecitabina y bien 150 ó 300 mg/kg/tratamiento de CI-1040. Con estas combinaciones hubo un 10% de muertes. Sin embargo, las pérdidas de peso eran menores que las del grupo control de vehículo. Se observó reducción tumoral en todas las combinaciones con la dosis alta de capecitabina. En estas combinaciones, las proporciones de respuestas completas variaban entre 20% y 60%, y entre 10% y 20% de los ratones estaban exentos de tumores cuando terminó el experimento. Las proporciones de respuestas tumorales de respuesta parcial variaban entre 0% y 40%, y los retrasos de desarrollo tumoral variaban entre 19,2 y 35,6 días. Estos retrasos de desarrollo tumoral eran mayores que los producidos por cualquier fármaco solo. La capacidad de estos agentes cuando se usan juntos establece la combinación a ser sinérgica como agente tumoral.

Tabla 3: Efecto antitumoral de CI-1040 en combinación con capecitabina frente a carcinoma C26/clon 10 de ratones CI-1040 Capecitabina Efecto antitumoral % de Muertes no Log 0 de Exención cambio Dosis9 Programa Dosis8 Programa específicas CRC PRd T-Ce (+) destrucción de de pesob neta f tumores9 tid, días 7 - qd, días 7-1 1 , 14- Vehículo Vehículo 0/10 -10,5 0/10 0/10 0 0 0/10 20 18 tid, días 7 - 37,5 Ninguno Ninguno 0/10 -5,6 0/10 0/10 1 ,9 -0,93 0/10 20 tid, días 7 - 75,0 Ninguno Ninguno 0/10 -10,5 0/ 0 1/10 9,0 -0,33 0/10 20 tid, días 7 - 150,0 Ninguno Ninguno 0/10 -5,6 0/10 1/10 12,3 -0,05 0/10 20 tid, días 7 - 300,0 Ninguno Ninguno 0/10 -5,3 0/10 4/10 12,5 -0,04 0/10 20 qd, días 7-1 1 , 14- Ninguno Ninguno 500 0/10 -5,6 0/10 0/10 13,4 0,20 0/10 18 qd, días 7-11, 14- Ninguno Ninguno 750 0/10 -10,5 0/10 4/10 14,6 0,30 0/10 18 tid, días 21- qd, días 7-11, 14- 17,2 37,5 500 0/10 -5,3 1/10 0/10 -0,82 0/10 34 18 (15,3) tid, días 21 ¦ qd, días 7-11, 14- 18,3 75,0 500 0/10 O 0/10 0/10 -0,73 0/10 34 18 (22,4) tid, días 21- qd, días 7-11, 14- 26,6 150,0 500 0/10 -10,5 4/10 1/10 -0,03 2/10 34 18 (25,7) tid, días 21- qd, días 7-11, 14- 27,9 300,0 500 0/10 -5,6 6/10 1/10 0,08 1/10 34 18 (25,9) tid, días 21- qd, días 7-11, 14- 19,2 37,5 750 0/10 O 3/10 4/10 -0,65 2/10 34 18 (16,5) tid, días 21- qd, días 7-11, 14- 19,9 75,0 750 0/10 +5,6 2/10 2/10 -0,59 34 1/10 18 (23,6) tid, días 21- qd, días 7-11, 14- 32,7 150,0 750 1/1 oh -5,6 6/10 0/10 0,48 2/10 34 18 (26,9) 300,0 tid, días 21- 750 qd, días 7-11, 1 - 1/1 o -5,6 5/10 3/10 35,3 0,69 1/10 34 18 (27,1 ) a. Dosis es en mg/kg/inyección. El vehículo para CI-1040 se componía de hidroxipropilmetilcelulosa al 0,5% y Tween-80 al 0,2% en agua. El vehículo para capecitabina era metilcelulosa al 0,5%. Ambos fármacos se administraron oralmente. El tratamiento se inició cuando los tumores tenían aproximadamente 250 mg de masa. b. Una pérdida de peso es el porcentaje de pérdida de peso observada durante el tratamiento; el porcentaje de ganancia de peso es el incremento de peso 5 observado al final del tratamiento. c. La respuesta completa se define como una reducción del 100% de la masa de tumor inicial. d. La respuesta parcial se define como una reducción de al menos el 50% de la masa de tumor inicial. e. T - C es la diferencia en días para que los tumores tratados y de control alcancen 750 mg. Los valores en paréntesis representan los valores T - C para un efecto antitumoral aditivo. Todos los supervivientes exentos de tumores se excluyen de los cálculos T - C. 10 f. Log10 de destrucción neta de células tumorales se calculó a partir del valor T - C. g. Exención de tumores representa los ratones que tenían un tumor indetectable cuando terminó el estudio el día 56. h. Esta combinación se considera tóxica debido a un número inaceptable de muertes. Los valores antitumorales para los animales supervivientes se muestran solamente para comparación.

EJEMPLO 4 Modelo tumoral. Injertos heterólogos de carcioma de colon humano COLO-205 se mantuvieron mediante transplante en serie en forma de implantes subcutáneos en ratones hembra NCr-nu atímicos. Se usaron implantes similares para evaluar la acción antitumoral del compuesto A y capecitabina. Los procedimientos descritos en el ejemplo 1 se usaron para transplante tumoral y para medición del desarrollo tumoral. Se llevaron a cabo tres experimentos, descritos en los ejemplos 4, 5 y 6, empleando cada uno un régimen de tratamiento de combinación diferente. Todos los ratones pesaban > 17 gramos al comienzo de la terapia. Los pesos medios de los grupos estaban bien igualados dentro y a través de los tres experimentos. Los pesos medios de los grupos en el primer tratamiento e intervalos asociados para los ejemplos 4, 5 y 6 eran 21 ,1 (20 - 22), 22,4 (21 - 24) y 24,2 (24 - 25) gramos respectivamente. Se les suministró alimento y agua a los ratones a voluntad. A los animales de ensayo se les implantaron subcutáneamente el día 0 con 30 a 60 mg de fragmentos de tumor usando una aguja para trocar de calibre 12. Se midieron los tumores con un calibrador 2 veces por semana. El peso de los tumores se calculó de las mediciones del calibrador mediante la siguiente ecuación. Peso del tumor (mg) = (a x b2)/2, en la que "a" y "b" son las mediciones respectivas de longitud y anchura del tumor en mm. Los pesos tumorales iniciales para los ejemplos 4, 5 y 6 también estaban bien igualados dentro y a través de los tres estudios. Los pesos tumorales medios iniciales e intervalos asociados para los tres experimentos eran 230 (221 - 237), 221 (216 - 270) y 221 (216 - 270) mg respectivamente. De este modo el tratamiento comenzó en una fase tumoral avanzada. Agentes antitumorales. Se suspendió el compuesto A en hidroxipropilmetilcelulosa al 0,5% y Tween - 80 al 0,2% en agua y se administró oralmente (abreviadamente p. o.) en 0,5 mi mediante sonda. La capecitabina se preparó para inyección en metilcelulosa al 0,5% y se administró mediante sonda. Mediciones de actividad antitumoral. Los puntos finales usados para evaluar la actividad antitumoral eran los siguientes: respuestas tumorales completas y parciales, retraso de desarrollo tumoral, y el número de ratones exentos de tumores al final del estudio. Una respuesta completa se clasificaba como un descenso del 100% de la masa tumoral, y una respuesta parcial se clasificaba como un descenso de al menos el 50% en la masa tumoral. Además de la reducción de la masa tumoral, el retraso del desarrollo tumoral (medido mediante procedimientos descritos por Colbett y col., enumerados anteriormente) se utilizó para cuantificar la actividad antitumoral para tumores que no respondieron completamente, o se volvían a desarrollar después de una respuesta completa. El retraso del desarrollo tumoral se expresaba como valor T - C, donde "T" y "C" son el tiempo medio en días requerido para que los tumores del grupo de tratamiento y grupo control (respectivamente) alcanzaran un tamaño predeterminado de 750 mg (el "tamaño de evaluación"). A partir del valor de retraso dé crecimiento tumoral el logio de destrucción neta de células tumorales se calculó como sigue: Logio de destrucción neta de células tumorales = [(T - C) - Rx] / 3,32 x Td donde 'Td" es el número de días para que la masa tumoral se duplique y "Rx" es el total de días de tratamiento. Td se estimó a partir de la línea recta de mejor ajuste de una representación lineal logarítmico de los tumores de los grupos de control en desarrollo exponencial (200 a 800 mg de intervalo). Los Td medios para los ejemplos 4, 5 y 6 de los grupos control eran 8,8, 9 y 1 1 ,2 días respectivamente. Se observó variabilidad sustancial en tiempos de duplicación dentro de un experimento individual. El intervalo de los Td para los ratones individuales era 3,8 - 15,8, 5,8 - 13,9 y 5,4 - 20,1 para los ejemplos 4, 5 y 6 respectivamente. La conversión de los valores T - C a logio de destrucción celular es válida solamente si el valor de Td para los tumores que se vuelven a desarrollar después del tratamiento es aproximadamente el mismo que para los ratones control no tratados. El valor de log10 de destrucción neta permite cuantificar la comparación de eficacia a través de los protocolos experimentales múltiples y a través de los modelos mediante la normalización de los datos de eficacia para regímenes de tratamiento de duración variable y diferencias en porcentajes de desarrollo tumoral entre experimentos o modelos. Los valores positivos indican que se ha producido una reducción real de peso tumoral al final de la terapia relativa al peso antes del tratamiento. Los valores negativos indican que el tumor realmente se desarrolla (aunque posiblemente más lento que los tumores control) durante el tratamiento. De esta manera los valores negativos de destrucción neta no implican necesariamente una carencia total de actividad. Los supervivientes exentos de tumores se excluyeron de estos cálculos de destrucción neta. El desarrollo tumoral de control estaba dentro de los límites normales para todos los experimentos. Los animales tratados con vehículo y no tratados perdieron entre el 0 y 9% de peso corporal durante el tratamiento, presumiblemente debido a la progresión de la enfermedad y/o dosificación relativa al trauma. Los resultados de estos estudios se resumen en las tablas 4 - 6. Resultados. Las actividades antitumorales que se produjeron cuando se administraba compuesto A antes de capecitabina se muestran en la tabla 4. El compuesto A se proporcionó como un agente único, qd entre los días 16 - 29 después del implante tumoral a dosis que variaban entre 3,13 y 25 mg/kg. El nivel de 25 mg/Kg no era tolerado y 12,5 mg/kg se consideró la máxima dosis tolerada (abreviadamente MDT). La pérdida de peso estaba generalmente limitada (< 5%), producida tempranamente en el régimen de tratamiento, y se observó típicamente la recuperación completa durante el curso de la terapia a dosis entre 3,13 y 25 mg/kg. El compuesto A era activo contra este modelo tumoral, produciendo > 50% de regresiones completas a todas las dosis toleradas y retrasos de desarrollo dependiente de dosis de hasta 42 días a la MDT. Los cálculos de destrucción neta sugieren que > 10% de células tumorales sobrevivían al tratamiento a todos los niveles de dosis tolerados. La capecitabina se proporcionó en forma de un agente único mediante sonda los días 16 - 29 después del implante tumoral a dosis entre 500 y 650 mg/kg. Ningún nivel de dosis era letal, pero se observó una pérdida de 19% de peso corporal al nivel de dosis de 650 mg/kg. El nivel de dosis de 650 mg/kg se declaró como MDT en este experimento. La capecitabina era activa contra este modelo tumoral en un modo dependiente de dosis, produciendo regresiones tumorales y retrasos sustanciales de desarrollo tumoral que sugieren una reducción aproximada 1-log en el peso tumoral. Este experimento examinaba la terapia secuencial con el inhibidor de MEK proporcionado antes de un curso de capecitabina. Por lo tanto, en regímenes de combinación, la capecitabina se administró mediante sonda desde el día 30 al 43, mientras el compuesto A se proporcionaba desde el día 16 al 29. Todos los regímenes de combinación que contenían 25 mg/kg de compuesto A eran tóxicos. Todos los otros regímenes de combinación eran tolerados (= Dl_i0 y/o < 20% de pérdida de peso) y de este modo se evaluaban para eficacia. Debido a la alta incidencia de regresiones completas observadas en el brazo del agente único de compuesto A del estudio, las mediciones de respuesta completa (abreviadamente "RC") y respuesta parcial (abreviadamente "RP") no proporcionaron un discriminador útil entre el agente único y la terapia de combinación. Sin embargo, la incidencia de supervivientes exentos de tumores 188 días después del implante tumoral era coherentemente más alto para todos los regímenes de combinación que los encontrados para los correspondientes regímenes de agente único. Además la mayoría de los regímenes de combinación produjeron retrasos de desarrollo tumoral que eran significativamente más largos que los producidos por los mejores regímenes de agente único. Cuatro de los seis regímenes de combinación tolerados produjeron valores de destrucción neta de células tumorales que estaban entre 0,1 y 0,3 logs mejor que la terapia óptima de agente único. De este modo la terapia de combinación secuencial de la administración del compuesto A seguida de la administración de capecitabina parecía ser marginalmente más activa que la terapia óptima de agente único con una toxicidad comparable. El análisis de los grupos de dosis baja sugiere que la actividad de estos dos agentes es esencialmente aditiva en este protocolo.

Tabla 4: Efecto antitumoral contra carcinoma de colon humano COLO-205 que se produce mediante tratamiento primero con un curso de compuesto A y después mediante tratamiento con un curso de capecitabina (Exp. 90432 x 19) Compuesto A Capecitabina Tolerancia Efecto antitumoral % de Log10 de Exención Muertes no Dosis8 Programa Dosis3 Programa cambio CRC PRd T-Ce destrucción de específicas de peso" neta ' tumores9 Vehículo QD, días 16-29 Ninguno QD, días 16-29 0/10 0,0 0/10 0/10 Ninguno Ninguno 0/10 25 QD, días 16-29 Ninguno Ninguno 8/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 QD, días 16-29 Ninguno Ninguno 0/10 -4,8 (23) 8/10 0/10 41 ,9 1 ,0 1/10 6,25 QD, días 16-29 Ninguno Ninguno 0/10 0,0 9/10 1/10 30,1 0,6 1/10 3,13 QD. días 16-29 Ninguno Ninguno 0/10 0,0 6/10 3/10 40,6 0,9 0/10 Ninguno Ninguno 650 QD, días 16-29 0/10 -19,0 (26) 3/10 4/10 56,0 1 ,5 2/10 Ninguno Ninguno 500 QD, días 16-29 0/10 -9,1 (23) 0/10 1/10 33,4 07 0/10 25 QD, días 16-29 650 QD, días 30-43 5/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 QD, días 16-29 650 QD, días 30-43 1/10 -4,8 (20) 9/10 0/10 75,4 1 ,7 3/10 6,25 QD, días 16-29 650 QD, días 30-43 0/10 -13,6 (33) 9/10 1/10 69,2 1 ,4 3/10 3,13 QD, días 16-29 650 QD, días 30-43 0/10 -19,0 (47) 1/10 3/10 65,8 1.3 1/10 25 QD, días 16-29 500 QD, días 30-43 4/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 QD, días 16-29 500 QD, días 30-43 1/10 -4,5 (20) 9/10 0/10 68,6 1 ,4 3/10 6,25 QD, días 16-29 500 QD, días 30-43 0/10 -4,8 (20) 10/10 0/10 > 78,8 1 ,8 3/10 3,13 QD, días 16-29 500 QD, días 30-43 0/10 + 9/10 0/10 73,3 1 ,6 2/10 a. Dosis están en mg/kg. Ambos fármacos se administraron oralmente, una vez al día, durante 14 días consecutivos. El vehículo para el compuesto A se componía de hidroxipropilmetilcelulosa al 0,5% y Tween-80 al 0,2% en agua. El vehículo para capecitabina era metilcelulosa al 0,5% en agua. Los tratamientos se comenzaron 16 días después de la implantación tumoral, cuando las masas tumorales medias eran de - 221 mg. b. Pérdida de peso máxima relativa al tratamiento, expresada como porcentaje de peso medio del grupo en el tratamiento inicial. El valor en paréntesis indica 5 el día que se registraba la pérdida máxima de peso. Una ganancia de peso neta se representa por un "+". c. La respuesta completa representa un tumor que ha disminuido en masa hasta menos de 62 mg (límite de detección) durante el estudio. d. La respuesta parcial representa un tumor que ha disminuido y es al menos un 50% de su masa tumoral inicial. e. T - C es la diferencia en días para que los tumores tratados y de control alcancen 750 mg. Todos los supervivientes exentos de tumores se excluyen de los cálculos T - C. 10 f. Log 0 de destrucción neta de células tumorales representa el cambio en peso tumoral durante la terapia. g. Exención de tumores representa los ratones que tenían un tumor indetectable cuando terminó el estudio el día 1 8.

Ejemplo 5 La tabla 5 más adelante muestra el efecto antitumoral que se produjo cuando al tratamiento con capecitabina le siguió el tratamiento con el compuesto A según el procedimiento del ejemplo 4. El compuesto A se proporcionó como un agente único los días 18 - 31 después del implante de tumor a dosis que variaban entre 3,13 y 25 mg/kg. El nivel de 25 mg/kg no era tolerado y 12,5 mg/kg se consideró la MDT. La pérdida de peso estaba en general limitada (0- 5%), se producía tempranamente en el régimen de tratamiento, y se observaba típicamente la recuperación completa durante la terapia en curso a dosis entre 3,13 y 12,5 mg/kg. El compuesto A era activo contra este modelo tumoral, produciendo regresiones completas a todas las dosis toleradas y retrasos de desarrollo dependiente de dosis de hasta 50 días. Los cálculos de destrucción neta sugieren que > 10% de células tumorales sobrevivieron al tratamiento a la mayoría de los niveles de dosis tolerados. La actividad en este experimento era comparable a la del ejemplo 4 y, a través de la respuesta de dosis, ligeramente superior a la del ejemplo 6. La capecitabina se proporcionó en forma de un agente único mediante sonda los días 18 - 31 después del implante tumoral, a dosis de 500 y 650 mg/kg. Ambos niveles de dosis eran tolerados y 650 mg/kg se declaró la MDT en este experimento. La capecitabina también era activa de una manera dependiente de la dosis, produciendo regresiones tumorales y retrasos sustanciales de desarrollo tumoral que sugieren una reducción aproximada de 0,5 log en el peso tumoral. Generalmente la actividad era inferior que la observada en el experimento del ejemplo 4 y comparable al del ejemplo 6.

Este experimento examinaba la terapia secuencial con capecitabina proporcionada antes de un curso del inhibidor de MEK. Por lo tanto, en regímenes de combinación, la capecitabina se proporcionaba mediante sonda los días 18 - 31 , mientras que el compuesto A se proporcionaba los días 32 -45. Muchos de los regímenes de combinación en este experimento ,eran tóxicos. A 650 mg/kg de capecitabina, solamente la dosis inferior del compuesto A se toleraba en la combinación. Solamente los niveles de dosis entre 3,13 y 6,25 mg/kg del compuesto A se toleraban en combinación con capecitabina a 500 mg/kg. De este modo solamente se podían evaluar tres regímenes de combinación para estudiar la eficacia. Dos de éstos producían valores de destrucción neta celular de 1 ,5 logs, 0,2 log mejor que la mejor actividad del agente único observada. La incidencia de supervivientes exentos de tumores no era mayor para estos regímenes de combinación que en los brazos de agente único del experimento. El análisis de los grupos de dosis inferior indicaba que era menor que la actividad aditiva. De este modo, la combinación secuencial de administración de capecitabina seguida de la administración del compuesto A parecía ofrecer un pequeño beneficio comparado con el uso óptimo del agente único más activo.

Tabla 5: Efecto antitumoral contra carcinoma de colon humano COLO-205 que se produce mediante tratamiento primero con un curso de capecitabina y después mediante tratamiento con un curso de Compuesto A Compuesto A Capecitabina Tolerancia Efecto antitumoral % de Log10 de Exención Muertes no Dosis3 Programa Dosis9 Programa cambio CRC PRd T-C9 destrucción de específicas de pesob neta ' tumores8 Ninguno Ninguno Ninguno Ninguno 0/10 + 0/10 0/10 -2,4 -0,5 0/10 Vehículo qd, días 18- 31 Ninguno qd, días 18- 31 1/10 -9,1 (31 ) 0/10 0/10 0,0 -0,4 0/10 25 qd, días 18- 31 Ninguno Ninguno 4/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 qd, días 18- 31 Ninguno Ninguno 0/10 + 4/10 1/10 29,1 0,5 0/10 6,25 qd, días 18- 31 Ninguno Ninguno 1/10 + 7/10 2/10 50,7 1 ,3 1/10 3,13 qd, días 18- 31 Ninguno Ninguno 0/10 -4,3 (24) 1/10 3/10 27,3 0,5 0/10 Ninguno Ninguno 650 qd, días 18-31 0/10 -4,3 (24) 2/10 2/10 34,3 0,7 2/10 Ninguno Ninguno 500 qd, días 18-31 1/9 -9,1 (24) 1/10 1/10 26,3 0,4 1/9 25 qd, días 32-45 650 qd, días 18-31 7/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 qd, días 32-45 650 qd, días 18-31 3/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 6,25 qd, días 32-45 650 qd, días 18-31 2/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 3,13 qd, días 32-45 650 qd, días 18-31 0/10 -9,1 (24) 8/10 2/10 71 ,4 1 ,5 1/10 25 qd, días 32-45 500 qd, días 18-31 2/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 qd, días 32-45 500 qd, días 18-31 2/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 6,25 qd, días 32-45 500 qd, días 18-31 1/10 -4,5 (24) 6/10 1/10 > 72,9 1 ,5 0/10 3,13 qd, días 32-45 500 qd, días 18-31 1/10 -8,7 (24) 5/10 1/10 46,4 0,6 1/10 a. Dosis están en mg/kg. Ambos fármacos se administraron oralmente, una vez al día, durante 14 días consecutivos. El vehículo para el compuesto A se componía de hidroxipropilmetilcelulosa al 0,5% y Tween-80 al 0,2% en agua. El vehículo para capecitabina (PD0205015) era metilcelulosa al 0,5% en agua. Los tratamientos se iniciaron 18 días después de la implantación tumoral, cuando las masas tumorales medias eran de ~ 221 mg. b. Pérdida de peso máxima relativa al tratamiento, expresado como un porcentaje de peso medio del grupo en el tratamiento inicial. El valor en paréntesis 5 indica el día que se registraba la pérdida máxima de peso. Una ganancia de peso neta se representa por un "+". c. La respuesta completa representa un tumor que ha disminuido en masa hasta menos de 62 mg (límite de detección) durante el estudio. d. La respuesta parcial representa un tumor que ha disminuido y es al menos un 50% de su masa tumoral inicial. e. T - C es la diferencia en días para que los tumores tratados y de control alcancen 750 mg. Todos los supervivientes exentos de tumores se excluyen de los cálculos T - C. 10 f. Log10 de destrucción neta de células tumorales representa el cambio en peso tumoral durante la terapia. g. Exención de tumores representa los ratones que tenían un tumor indetectable cuando terminó el estudio el día 112.

EJEMPLO 6 La tabla 6 más adelante muestra las actividades antitumorales que se producían cuando se administraban simultáneamente el compuesto A y capecitabina según el procedimiento del ejemplo 4. El compuesto A se proporcionó como un agente único los días 17 - 30 después del implante tumoral a las dosis que variaban entre 3,13 y 25 mg/kg. El nivel de 25 mg/kg no se toleraba y 12,5 mg/kg se consideró la MDT. La pérdida de peso estaba en general limitada (4-8%), se producía tempranamente en el régimen de tratamiento, y se observaba típicamente la recuperación completa durante la terapia en curso a dosis entre 3,13 y 12,5 mg/kg. El compuesto A era una vez más activo contra este modelo tumoral, produciendo regresiones completas a todas las dosis toleradas y retrasos de desarrollo dependientes de dosis de hasta 70 días. Los cálculos de destrucción neta sugieren que < 10% de células tumorales sobreviven al tratamiento a la MDT. El peso tumoral se mantenía esencialmente constante a los niveles de dosis restantes. En este experimento la actividad parecía disminuir rápidamente a niveles de dosis inferiores a 12,5 mg/kg. Una inspección de las curvas de crecimiento tumorales reales muestra que el desarrollo tumoral al nivel de 12,5 mg/kg fallaba para regresar a los porcentajes de desarrollo de control después del tratamiento, en lugar del equilibrio después de que los tumores alcanzaran aproximadamente 500 mg. Esto complica el uso de la destrucción neta de células como punto final para el experimento. En conjunto la actividad del compuesto A en este experimento era comparable o algo inferior a la de los ejemplos 4 y 5. La capecitabina se proporcionó en forma de un agente único mediante sonda los días 17 - 30 después del implante tumoral, a dosis de 500 y 650 mg/kg. Ambos niveles de dosis eran tolerados y 650 mg/kg se declaró como la MDT en este experimento. La capecitabina era activa en este experimento, produciendo regresiones tumorales y retrasos sustanciales de desarrollo tumoral que sugieren un reducción aproximada de 0,5 log en el peso tumoral. La respuesta a la dosis era inversa en este estudio con una actividad mayor observada en el nivel de dosis de 500 mg/kg. En conjunto, en general la actividad era de capecitabina inferior que la del experimento del ejemplo 4 y comparable a la del ejemplo 5. Este experimento examinaba simultáneamente la terapia con capecitabina y PD325901 proporcionados ambos los días 17 - 30. Muchos de los regímenes de combinación en este experimento eran tóxicos. Solamente tres regímenes de combinación se podría evaluar para detectar la eficacia. Uno de estos, 6,25 mg/kg de compuesto A y 650 mg/kg de capecitabina produjo 100% de regresiones completas, un valor de destrucción neta celular de 1 ,9 logs y 40% de supervivientes exentos de tumores el día 129. Esta actividad es significativamente superior comparada con cualquiera de los agentes únicos a sus MDT. Los otros regímenes de combinación eran inferiores óptima a la terapia de agente único.

Tabla 6: Efecto antitumoral contra carcinoma de colon humano COLO-205 que se produce mediante tratamiento simultáneo con capecitabina y compuesto A Compuesto A Capecitabina Tolerancia Efecto antitumoral % de Log10 de Exención Muertes no Dosis3 Programa Dosis8 Programa cambio CRC PRd T-Ce destrucción de específicas de pesob neta ' tumores9 Ninguno Ninguno Ninguno Ninguno 0/10 -4,2 (20) 0/10 0/10 -2,5 -0,4 0/10 Vehículo qd, días 17- 30 Ninguno qd, días 17- 30 0/10 -4,2 (20) 0/10 0/10 0 -0,3 1/10 25 qd, días 17- 30 Ninguno Ninguno 8/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 qd, días 17- 30 Ninguno Ninguno 0/10 -8,0 (20) 9/10 1/10 > 69,0 1 ,5 1/10 6,25 qd, días 17- 30 Ninguno Ninguno 1/10 -4,2 (20) 8/10 1/10 18,1 0,1 1/10 3,13 qd, días 17- 30 Ninguno Ninguno 0/10 -4,0 (20) 7/10 2/10 15,3 0,1 0/10 Ninguno Ninguno 650 qd, días 17- 30 0/10 -12,5 (27) 1/10 1/10 14,0 0,0 0/10 Ninguno Ninguno 500 qd, días 17- 30 0/10 -8,3 (22) 3/10 0/10 43,4 0,8 0/10 25 qd, días 17- 30 650 qd, días 17- 30 8/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 qd, días 17- 30 650 qd, días 17- 30 3/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico > O o en 6,25 qd, días 1 7- 30 650 qd, días 1 7- 30 0/10 -4,2 (20) 10/10 0/10 > 84,0 1 ,9 4/1 0 3, 13 qd, días 1 7- 30 650 qd, días 1 7- 30 0/10 -8,2 (27) 7/10 3/10 32,7 0,5 1/10 25 qd, días 17- 30 500 qd, días 17- 30 10/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 12,5 qd, días 1 - 30 500 qd, días 17- 30 2/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 6,25 qd, días 17- 30 500 qd, días 17- 30 2/10 Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico Tóxico 3,13 qd, días 17- 30 500 qd, días 17- 30 1 /10 -8,3 (44) 2/10 7/10 16,2 0, 1 0/10 Dosis están en mg/kg Ambos fármacos se administraron oralmente, una vez al día, durante 14 días consecutivos. El vehículo para el compuesto A componía de hidroxipropilmetilcelulosa al 0,5% y Tween-80 al 0,2% en agua. El vehículo para capecitabina (PD0205015) era metilceluíosa al 0,5% en agua. Los tratamientos se comenzaron 17 días después de la implantación tumoral, cuando las masas turnorales medias eran de - 221 mg. b. Pérdida de peso máxima relativa al tratamiento, expresado como un porcentaje de peso medio del grupo en el tratamiento inicial. El valor en paréntesis indica el día que se registraba la pérdida máxima pérdida de peso. c. La respuesta completa representa un tumor que ha disminuido en masa hasta menos de 62 mg (límite de detección) durante el estudio. d. La respuesta parcial representa un tumor que ha disminuido y es al menos un 50% de su masa tumoral inicial. e. T - C es la diferencia en días para que los tumores tratados y de control alcancen 750 mg. Todos los supervivientes exentos de tumores se excluyen de los cálculos T - C. t. Log10 de destrucción neta de células turnorales representa el cambio en peso tumoral durante la terapia. Un valor negativo indica un incremento neto en la masa tumoral durante la terapia, mientras que un valor positivo indica una reducción neta en la masa tumoral durante la terapia. El valor próximo a cero indica que el tumor no varía durante la terapia. g. Exención de tumores representa los ratones que tenían un tumor indetectable cuando terminó el estudio el día 129.

Claims (10)

REIVINDICACIONES

1. Un procedimiento para tratar cáncer en un paciente en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo el procedimiento la administración al paciente de una combinación de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de MEK y una cantidad terapéuticamente eficaz de capecitabina.

2. El procedimiento de la reivindicación 1 , en el que el inhibidor de MEK y capecitabina se administran simultáneamente.

3. El procedimiento de la reivindicación 1 , en el que el inhibidor de MEK se administra antes de la capecitabina.

4. El procedimiento de la reivindicación 1 , en el que la capecitabina se administra antes del inhibidor de MEK.

5. El procedimiento de las reivindicaciones 1 a 3 en el que el inhibidor de MEK es CI-1040.

6. Un procedimiento para tratar cáncer en un paciente en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo el procedimiento la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de capecitabina seguido de la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de Cl-1040.

7. El procedimiento de las reivindicaciones 1 , 2 ó 4 en el que el inhibidor de MEK es /V-[(R)-2,3-dihidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)benzamida.

8. Un procedimiento para tratar cáncer en un paciente en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo el procedimiento las etapas de administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de N-[(R)-2,3-dihidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)-benzamida seguido de la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz de capecitabina.

9. El procedimiento de las reivindicaciones 1 a 8, en el que el cáncer es cáncer de cerebro, de mama, de pulmón, de pulmón de células no pequeñas, de ovarios, de páncreas, de próstata, de riñon, de colon, de cuello del útero, leucemia aguda, de estómago o combinaciones de los mismos.

10. Una composición farmacéutica que comprende capecitabina, Cl- 1040 y un vehículo farmacéuticamente aceptable. 1 1. Una composición farmacéutica que comprende capecitabina, N-[(R)-2,3-dihidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)benzamida y un vehículo farmacéuticamente aceptable.