CN115581703A - 复方吉西他滨组合物及应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种具有协同增强作用的抗肿瘤药物组合物，具体提供一种复方吉西他滨组合物及应用，属于肿瘤药物治疗领域。该组合物包括有效剂量的抗肿瘤药物吉西他滨，合适比例的5‑FU类抗肿瘤药物，减少5‑FU类药物用量的吉美嘧啶。本发明证实吉西他滨+5‑FU类+吉美嘧啶的组合具有协同增强作用，其抗肿瘤效果远远大于二个单药的总合，协同增强作用显著，毒性没有明显增加。组成的复方制剂从多靶点作用在肿瘤细胞，是高效、低毒、广谱的最有效化疗药物之一，具有明显的使用价值。

Description

复方吉西他滨组合物及应用

技术领域

本发明属于肿瘤药物治疗领域，涉及一种复方吉西他滨组合物及应用,具体涉及一种以吉西他滨、5-氟尿嘧啶类药物和吉美嘧啶组成的复方制剂。

背景技术

吉西他滨（Gemcitabine）是目前最常用的抗肿瘤药物，广泛用于胰腺癌、肺癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌和头颈部癌的治疗。吉西他滨通过伪核苷掺入到DNA。5-氟尿嘧啶（5-Fluorouracil,5-FU） 抑制DNA的合成，和以伪代谢物形式掺入到RNA，其衍生物替加氟（Tegafur）和卡培他滨(Capecitabine)是5-FU前药，是治疗结肠癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌的最常用的药物。替加氟通常组成替吉奥使用，替吉奥（S-1）由替加氟+吉美嘧啶+奥替拉西钾组成。奥替拉西钾的作用是减少口服药物后的胃肠道毒性。

肿瘤化疗药物具有杀伤肿瘤细胞和损伤正常组织的双重作用。化疗药物常用两种以上药物进行联合应用，其目的是提高治疗的效果，减少毒性反应。联合用药有益的治疗效果是协同作用，协同作用根据药效又分为是协同相加作用（1+1＝2）和协同增强作用（1+1＞2）。协同增强对肿瘤作用超过了各单药的总和，最大限度的杀灭肿瘤细胞，从根本上改变了药物特性，对难治、耐药肿瘤也产生明显的治疗效果，给治疗带来最大益处。无论协同相加还是协同增强，其毒性反应不能同比增加，才具有实际治疗益处。

联合用药是否具有协同增强作用是由药物的药理特性和配伍比例所决定。没有协同增强的机理，不会产生协同增强作用。如果有协同增强的机理，没有合适的剂量配比也不会出现协同增强作用。是否有协同增强作用需要进行药理学研究和实验。药物协同增强成功的例子是复方新诺明，其由磺胺甲恶唑（SMZ）和甲氧苄啶（TMP）按5：1比例组成。它们分别作用在细菌的二氢叶酸合成酶和还原酶，使叶酸合成双重受阻，增加了抗菌谱及和数倍抗菌活性。如果改变SMZ和TMP组成比例，协同增强作用减弱或消失。

目前使用的化疗联合用药，几乎都是协同相加作用，如吉西他滨+铂类、吉西他滨+紫杉醇、紫杉醇+铂类和5-氟尿嘧啶类+铂类等。这些联合用药是按照每个药物自己标准剂量和方法给药，对药物本身而言，是自身最佳选择。但组成复方后，一方面没有协同增强的合适比例,另一方面不能同时作用在肿瘤细胞的靶部位，很难产生协同增强作用。特别是与本发明相关的吉西他滨+5-FU类药物联合用药，因为它们都是治疗消化道肿瘤的首选药物。因此，几十年来对吉西他滨+5-FU类的联合用药进行了大量的、不同给药方案的研究，临床试验的文献成百上千，但至今没有一个标准的治疗方案被权威机构推荐。多数临床试验中治疗结果是协同相加作用，同时伴有毒性增加。例如，在834例晚期胰腺癌进行了吉西他滨、S-1和吉西他滨+S-1的研究，该研究病例多，设计合理，是权威性的III期临床研究。试验剂量如下表1。

表1.吉西他滨和吉西他滨+S-1对835例胰腺癌的疗效和毒性比较

试验组别	每周期给药方案
		吉西他滨	1000mg/m<sup>2</sup>，第1、8、15天
S-1	平均100 mg/天，第1-28天
		吉西他滨+S-1	1000 mg/m<sup>2</sup>第1、8天，平均80 mg/天，第1-14天

从表1看到，吉西他滨+S-1的药物剂量不是二个单药的剂量相加。试验结果表明，吉西他滨、S-1和吉西他滨+S-1各组的平均活存时间分别为8.8、9.7和10.1个月。结论：吉西他滨和S-1的抗瘤作用无差别，吉西他滨+S-1的治疗效果和单药比较没有优势(p=0.15),血液毒性和胃肠道毒性比吉西他滨严重，但可耐受（Hideki Ueno：Journal of ClinicalOncology1640-1648. (C) 2013）。

另一个临床研究是在117例不可切除的胰腺癌进行的II期临床试验。比较了吉西他滨和吉西他滨+S-1联合用药的疗效和安全性。吉西他滨组用药剂量3000mg/m²（是常规治疗剂量），吉西他滨+S-1剂量：其中吉西他滨2000mg/m²，S-1是3878mg/人（是常规治疗剂量）。吉西他滨+S-1用药的剂量基本是二个单药的剂量相加。治疗效果和毒性显示，吉西他滨和吉西他滨+S-1治疗后的平均活存时间分别是8.0和13.7月（p=0.035)。但严重的3-4级白细胞减少的病例分别为22.0% 和54.7%。结论是吉西他滨+替吉奥显示更强的抗癌活性，但毒性明显增强（Cancer Chemotherapy and Pharmacologyvolume69,pages1197-1204，2012)。联合用药的目的至少是协同相加作用，毒性相对减少。多数药物联合使用，可以从不同的药理机制共同杀死肿瘤细胞，达到协同相加治疗效果，而它们的主要毒性靶器官则不相同，这样就相对减少了毒性。而吉西他滨和5-FU类药联合治疗胰腺癌并没有这一作用。

本发明也在动物实验证实，按照临床试验的方案给药，吉西他滨和5-FU类药物的使用比例不合适，不能达到协同增强作用，多次使用5-FU类药物增加了毒性。

对于目前的化疗联合用药，本课题组按照不同的药物比例对多种药物组合进行协同用药研究。如吉西他滨+顺铂，吉西他滨+紫杉醇，紫杉醇+顺铂等，虽然它们已是标准的治疗方案，但均是协同相加作用。而本课题组惊奇地发现：吉西他滨、5-FU类药物和吉美嘧啶按不同比例组合成一种新药，却具有惊人的治疗效果和协同增强作用，且毒性增加不显著。

发明内容

本发明的目的是研制具有协同增强作用的抗肿瘤药物组合，具体提供一种复方吉西他滨组合物及应用。本发明在多种抗肿瘤药物协同作用研究中，首次发现合适重量比例的吉西他滨、5-FU类抗瘤药物与吉美嘧啶的组合物具有协同增强作用。吉美嘧啶可延长5-FU在体内的时间，在复方中加入吉美嘧啶可减少5-FU类药物用量达60-85%,而且吉美嘧啶没有明显的毒性，复方配制更合理。

本发明一种复方吉西他滨组合物，该组合物包括有效剂量的抗肿瘤药物吉西他滨，合适比例的5-FU类抗瘤药物，减少5-FU类药物用量的吉美嘧啶。

优选的，本发明所述抗肿瘤药物吉西他滨选自盐酸吉西他滨、吉西他滨碱或者吉西他滨单磷酸酯中的一种。

优选的，本发明所述5-FU类抗瘤药物选自5-FU、替加氟、5′-去氧氟胞苷（5′-脱氧-5-氟胞苷）、卡培他滨、卡莫氟或者在体内转化为5-FU的化合物中的一种。

优选的，本发明组合物包括吉西他滨、卡培他滨和吉美嘧啶，所述吉西他滨和卡培他滨的重量比为1:(4-20)，所述卡培他滨和吉美嘧啶的重量比为1:（1-2）；所述吉西他滨、卡培他滨和吉美嘧啶的重量比优选为1:10:10。

优选的，本发明组合物包括吉西他滨、5′-去氧氟胞苷和吉美嘧啶，所述吉西他滨和5′-去氧氟胞苷的重量比为1:(2-20)，所述5′-去氧氟胞苷和吉美嘧啶的重量比为1:(1-2），所述吉西他滨、5′-去氧氟胞苷和吉美嘧啶的重量比优选为1:10:10。

优选的，本发明组合物包括吉西他滨、5-FU和吉美嘧啶，所述吉西他滨、5-FU和吉美嘧啶的重量比为1:(0.5-3):(4-8)，优选为1:1:6。

优选的，本发明组合物包括吉西他滨、替加氟和吉美嘧啶，所述的吉西他滨、替加氟和吉美嘧啶的重量比为1:(0.5-3):(1-2)，优选为1:1:1。

本发明一种复方吉西他滨组合物的应用，其用于肿瘤治疗。优选的，其用药间隔1周或2周一次。

与现有技术相比，本发明的技术优点在于：

1）本发明证实了吉西他滨、5-FU类抗瘤药物和吉美嘧啶具有协同增强作用，其抗肿瘤效果远远大于二个单药的总合，毒性没有明显增加，增效比例高，组成的复方制剂从多靶点作用在肿瘤细胞，是高效、低毒、广谱的最有效化疗药物之一，具有明显的使用价值。本发明证实了吉西他滨与紫杉醇、吉西他滨与顺铂的组合物均没有协同增强作用，从而另一个方面说明了本发明复方制剂的可靠性和具有使用性。

2）本发明吉西他滨、5-FU类药物和吉美嘧啶组成的复方和现有的吉西他滨、5-FU类抗瘤药物联合用药完全不同。目前的联合用药的治疗效果是协同相加作用，同时毒性也增加，没有治疗益处。而本发明的复方是协同增强作用，而不是一般的协同相加作用，且毒性没有明显增加。

3）本发明吉西他滨、5-FU类抗瘤药物和吉美嘧啶组成的复方需合适的药物比例才可产生协同增强作用，每一种5-FU类抗瘤药物与吉西他滨和吉美嘧啶的配伍比例均不同。具有协同增强作用的复方从根本上提高了治疗的效果，用于复发、耐药肿瘤的化疗。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的描述。

抗肿瘤药物的使用方法是决定药物疗效和毒性的重要因素。因此，本发明首先完成确定给药方法，按照抗肿瘤药物评价的基本方法，实验证明：本发明每周给药1次比连续5天给药，毒性减少20倍,且抗瘤作用增加。最大耐受剂量分别为600mg/kg和30mg/kg，抑瘤率分别为95%和45%。

本发明复方吉西他滨组合物包括有效剂量的吉西他滨，合适比例的5-FU类药物，减少5-FU类药物用量的吉美嘧啶。本发明的抗肿瘤药物吉西他滨优选盐酸吉西他滨、吉西他滨碱或者吉西他滨单磷酸酯中的一种。本发明的5-FU类抗瘤药物优选5-FU、替加氟、5′-去氧氟胞苷、卡培他滨、卡莫氟和能在体内转化成5-FU的化合物中的一种。这些药物用量、代谢、药效和毒性差别很大，因此，这些药物与吉西他滨和吉美嘧啶组合成协同增强组合物的配方比例也不同。

下面以吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶的组合物说明本发明的实验过程和内容。实验选择接种S180肿瘤的小白鼠进行。首先选定吉西他滨抑瘤30-40%的剂量，由于肿瘤生长快，在肿瘤接种后的24、48和72小时给药，其各自的给药剂量分别是20mg/kg、60mg/kg和200mg/kg左右。再选定若干卡培他滨的剂量，按吉西他滨:卡培他滨重量比1:2、1:5、1:10、1:20、1:30、1:40和1：50初步筛选。同时做吉西他滨、卡培他滨单药对照实验。实验发现：当吉西他滨和卡培他滨二者组合时，卡培他滨的用量是吉西他滨的20-40倍，该组合具有一定的协同增强作用。当卡培他滨的剂量是吉西他滨的30倍时，抗瘤效果较好。然而，按照卡培他滨是吉西他滨30倍的重量比例，虽然有协同增强作用，但在制剂技术和药物的使用上不方便。

本发明是吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶三个药物组合时，所述吉西他滨和卡培他滨的重量比为1:(4-20)，所述卡培他滨和吉美嘧啶的重量比为1:（1-2）；所述吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶的重量比优选为1:10:10。

同时，实验发现：本发明选用吉西他滨、5′-去氧氟胞苷和吉美嘧啶的组合物，所述吉西他滨和5′-去氧氟胞苷的重量比为1:(2-20)，所述5′-去氧氟胞苷和吉美嘧啶的重量比为1:(1-2），所述吉西他滨、5′-去氧氟胞苷和吉美嘧啶的重量比优选为1:10:10。

本发明选用吉西他滨、5-FU和吉美嘧啶的组合物，所述的吉西他滨、5-FU和吉美嘧啶的重量比为1:(0.5-3):(4-8)，优选为1:1:6。

本发明选用吉西他滨、替加氟和吉美嘧啶的组合物，所述的吉西他滨、替加氟和吉美嘧啶的重量比为1:(0.5-2):(1-2)，优选为1:1:1。

本发明一种复方吉西他滨组合物的应用，其用于肿瘤治疗，优选的，其用药间隔1周或2周一次。

在以上组合物配方中，注射液优选吉西他滨单磷酸酯+5′-去氧氟胞苷+吉美嘧啶的组合物。

下述实施例进一步详细说明了本发明，但本发明并不受这些实施例的限定。

实施例1 药物协同作用研究方法：昆明种小鼠皮下接种S180肉瘤到右前肢皮下，根据实验要求可在接种24、48、72小时后给药，由于肿瘤生长快，同样抑制肿瘤30%左右需要的剂量是20mg/kg、60mg/kg和200mg/kg左右（吉西他滨的用量是按吉西他滨碱），治疗方法是静脉注射。接种第8-10天后取瘤称重。人移植瘤按常规在裸鼠进行。抑瘤率=（对照组-实验组/对照组）× 100%。实验分A药、B药、C药,C药为A+B药，根据药物协同相加原理，C药理论抑瘤率应等于A药抑瘤率+B药抑瘤率。协同增强作用的计算采用抑瘤率提高百分比。抑瘤率提高百分比={（C药实验抑瘤率-C 药理论抑瘤率）/ C药理论抑瘤率}×100%。

实施例2药物协同作用给药方法的研究。实验药物是吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶1:10:10组合，按肿瘤药物实验要求，测定1次和连续5次给药最大耐受剂量和疗效。结果分别为600mg/kg和30mg/kg，抑瘤率分别为95%和45%。可见，1次给药毒性小，疗效高。

实施例3药物组合注射液（1）制备：吉西他滨单磷酸酯（按碱基含量）50mg，5′-去氧氟胞苷500mg,吉美嘧啶500mg，碳酸氢钠300mg,注射用水10mL溶解，灭菌。

实施例4药物组合注射液（2）制备：盐酸吉西他滨（按碱基含量）100mg,5′-去氧氟胞苷500mg（或卡培他滨）,注射用水4mL溶解，吉美嘧啶500mg+碳酸氢钠300mg, 注射用水6mL溶解。混合以上液体，加甘露醇适量，过滤除菌，冰冻干燥，得冻干粉。

实施例5吉西他滨+卡培他滨二个药物组合具有协同增强作用的比例。实验在接种24小时后给药，按吉西他滨:卡培他滨重量比（w/w）1:2、1:5、1:10、1:20、1:30、1:40、1:50初步筛选。卡培他滨的用量是吉西他滨的20-40倍，具有协同增强作用。优选30倍比例。

实施例7 吉美嘧啶的用量研究。以卡培他滨为例：卡培他滨1000mg/kg，加入吉美嘧啶分别为卡培他滨的0、0.25、0.5、1和2倍。结果：吉美嘧啶是卡培他滨的1-2倍时的组合物抗瘤作用强。优选吉美嘧啶与卡培他滨的重量比1：1。经实验，优选5-FU与吉美嘧啶重量比1:6，选用替加氟，优选吉美嘧啶与替加氟的重量比1:1，选用5′-去氧氟胞苷，优选吉美嘧啶与5′-去氧氟胞苷的重量比1:1。

实施例8 吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶三个药物组合具有协同增强作用的比例。组合中按卡培他滨：吉美嘧啶重量比1：1加入。当吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶按重量比1:（4-20）：（4：20）组合的复方具有协同增强作用。优选重量比1：10：10。抗瘤实验结果表明，复方比吉西他滨和卡培他滨单药抑瘤率提高31%。

实施例9 吉西他滨+5′-去氧氟胞苷+吉美嘧啶协同增强作用。按吉西他滨+5′-去氧氟胞苷+吉美嘧啶重量比1:10:10配制。接种24小时后给药，药物剂量：A组：吉西他滨20mg/kg，B组：5′-去氧氟胞苷200mg/kg+吉美嘧啶200mg/kg，C组：A组+B组药物。A组、B组、C组的抑瘤率分别为32%、29%和81%。C组理论抑瘤率是32%+29%=61%,抑瘤率提高{（81%-61%）/61%}×100%=33%。

实施例10 对人移植肿瘤的协同增强作用。人移植瘤实验，Nu/Nu雄性裸鼠，24-26克，接种对5-FU耐药的人结肠癌细胞系SW620/5-FU，接种10天后开始给药，静脉注射，每周1次，给3周。第26天取肿瘤称重。观察吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶组合物的抗瘤作用，药物比例按吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶重量比1:10:10。药物剂量：A组：吉西他滨40mg/kg、B组：卡培他滨400mg/kg+吉美嘧啶400mg/kg、C组：A组+B组药物。实验结果：抑瘤率提高32%。

实施例11 药物组合比例和给药方法对协同作用和毒性的影响。以吉西他滨+卡培他滨+吉美嘧啶为例说明。实验方法：A组：吉西他滨100mg/kg，B组：卡培他滨1000mg/kg+吉美嘧啶1000mg/kg，C组：A组1/2+B组1/2，D组:将C组中卡培他滨分5次给药，模拟临床5-FU类药物的连续多次的使用方法。E组：将C组中去除吉美嘧啶，相当于卡培他滨用量减少60-85%，改变了吉西他滨和卡培他滨的比例配制。

表2：吉西他滨+卡培他滨不同组合后的毒性和抗瘤作用

组	组合(mg/kg)	体重%	抑瘤率%
				A	吉西他滨100	+6	45
B	卡培他滨1000+吉美嘧啶1000	+7	41
				C	吉西他滨50+卡培他滨500+吉美嘧啶500	+4	64
D	吉西他滨50+(卡培他滨100+吉美嘧啶100)×5	-15	60
				E	吉西他滨50+卡培他滨500	+12	26

实验结果和分析:C组剂量是A组1/2+B组1/2，其理论抑瘤率是（A组+B组）1/2，即（41+45）/2=43%，C组实测抑瘤率是64%,抑瘤率提高33%(p＜0.05),抑瘤率显著提高，说明C组具有协同增强作用。A、B、C组的体重变化分别为：+6%、+7%、+4%（p＞0.05），并无显著性差异，说明C组毒性没有明显增加。D组是将卡培他滨分5次使用，模拟临床5-FU类药物连续多次的使用方法，结果D组体重-15%,说明卡培他滨分5次使用增加毒性。E组是在C组去除吉美嘧啶，相当于卡培他滨用量减少60-85%（相比C组），由于卡培他滨本身抗瘤作用减少，配伍比例不合适，因此，E组抗瘤作用很差。

实施例12 吉西他滨+紫杉醇的组合没有协同增强作用。A组：吉西他滨20mg/kg，B组：紫杉醇30mg/kg，C组：A组+B组。均为最佳剂量组合，其抑瘤率分别为34%、33%和69%。C组理论抑瘤率和实际抑瘤率分别为67%和69%，吉西他滨+紫杉醇联合用药是协同相加作用。

实施例13吉西他滨+5-FU+吉美嘧啶协同增强作用。A组:吉西他滨50mg/kg,B组：5-FU 50mg/kg+吉美嘧啶300mg/kg，C组: A组+B组。实验结果C组抑瘤率提高30%。

实施例14吉西他滨+替加氟+吉美嘧啶协同增强作用。A组:吉西他滨20mg/kg，B组:替加氟20mg/kg+吉美嘧啶20mg/kg，C组: A组+B组。实验结果C组抑瘤率提高28%。

Claims (9)

1.一种复方吉西他滨组合物，其特征在于：该组合物包括有效剂量的抗肿瘤药物吉西他滨，合适比例的5-FU类抗肿瘤药物，减少5-FU类药物用量的吉美嘧啶。

2.根据权利要求1所述的复方吉西他滨组合物，其特征在于：所述抗肿瘤药物吉西他滨选自盐酸吉西他滨、吉西他滨碱或者吉西他滨单磷酸酯中的一种。

3.根据权利要求1所述的复方吉西他滨组合物，其特征在于：所述5-FU类抗瘤药物选自5-FU、替加氟、5′-去氧氟胞苷、卡培他滨、卡莫氟或者在体内转化为5-FU的化合物中的一种。

4.根据权利要求1所述的复方吉西他滨组合物，其特征在于：该组合物包括吉西他滨、卡培他滨和吉美嘧啶，所述吉西他滨和卡培他滨的重量比为1:(4-20)，所述卡培他滨和吉美嘧啶的重量比为1:(1-2）。

5.根据权利要求1所述的复方吉西他滨组合物，其特征在于：该组合物包括吉西他滨、5′-去氧氟胞苷和吉美嘧啶，所述吉西他滨和5′-去氧氟胞苷的重量比为1:(2-20)，所述5′-去氧氟胞苷和吉美嘧啶的重量比为1:(1-2）。

6.根据权利要求1所述的复方吉西他滨组合物，其特征在于：该组合物包括吉西他滨、5-FU和吉美嘧啶，所述吉西他滨和5-FU重量比为1:(0.5-3)，所述5-FU和吉美嘧啶的重量比为1:(4-8)。

7.根据权利要求1所述的复方吉西他滨组合物，其特征在于：该组合物包括吉西他滨、替加氟和吉美嘧啶，所述的吉西他滨和替加氟重量比为1:(0.5-3)，替加氟和吉美嘧啶的重量比为1:(1-2)。

8.一种如权利要求1-7任一项所述复方吉西他滨组合物的应用，其特征在于：用于肿瘤治疗。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：用药间隔1周或2周一次。