MXPA04011943A - Formulacion farmaceutica de liberacion inmediata. - Google Patents

Formulacion farmaceutica de liberacion inmediata.

Info

Publication number
MXPA04011943A
MXPA04011943A MXPA04011943A MXPA04011943A MXPA04011943A MX PA04011943 A MXPA04011943 A MX PA04011943A MX PA04011943 A MXPA04011943 A MX PA04011943A MX PA04011943 A MXPA04011943 A MX PA04011943A MX PA04011943 A MXPA04011943 A MX PA04011943A
Authority
MX
Mexico
Prior art keywords
compound
formulation
acid
aze
pab
Prior art date
Application number
MXPA04011943A
Other languages
English (en)
Inventor
Magnusson Anders
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=20288036&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=MXPA04011943(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of MXPA04011943A publication Critical patent/MXPA04011943A/es

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/397—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having four-membered rings, e.g. azetidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
    • A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A61K9/2018—Sugars, or sugar alcohols, e.g. lactose, mannitol; Derivatives thereof, e.g. polysorbates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/2027—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/205—Polysaccharides, e.g. alginate, gums; Cyclodextrin
    • A61K9/2054—Cellulose; Cellulose derivatives, e.g. hydroxypropyl methylcellulose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

De acuerdo con la presente invencion, se proporciona una formulacion farmaceutica de liberacion inmediata que comprende como ingrediente activo un compuesto de formula (I) en donde R1 representa alquilo de 1 a 2 atomos de carbono sustituido por uno o mas sustituyentes fluoro; R2 representa hidrogeno, hidroxi, metoxi o etoxi; y n representa 0, 1 o 2; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un diluyente o portador farmaceuticamente aceptable; con la condicion de que cuando el ingrediente activo es diferente de aquel en forma de una sal, la formulacion no contiene unicamente: ( una solucion de un ingrediente activo y agua; ( una solucion de un ingrediente activo y sulfoxido de dimetilo; o ( una solucion de un ingrediente activo en una mezcla de etanol: 12-hidroxiestearato de PEG 660: AGUA 5:5:90; tales formulaciones son de uso para el tratamiento de un desorden cardiovascular.

Description

For two-leíter codes and other abbreviations, refer to the "Guid-ance Notes on Codes and Abbreviations " appearing at the begin-ning of each regular issue of the PCT Gazette. - 1 - FORMULACIÓN FARMACEUTICA DE LIBERACIÓN INMEDIATA DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta invención se relaciona con una formulación farmacéutica de liberación inmediata novedosa que proporciona la administración de sustancias farmacéuticas particulares, con la elaboración de tal formulación y con el uso de tal formulación en el tratamiento o prevención de trombosis. Con frecuencia es deseable formular compuestos farmacéuticamente activos para liberación inmediata después de administración oral o parenteral con el objetivo de proporcionar una concentración suficiente de medicamento en plasma dentro del período de tiempo requerido para generar una respuesta terapéutica deseada. La liberación inmediata puede ser deseable en particular en casos en donde, por ejemplo, se requiere una respuesta terapéutica rápida (por ejemplo, en el tratamiento de problemas agudos) o en el caso de administración parenteral, cuando la administración peroral al tracto gastrointestinal es incapaz de proporcionar una captación sistémica suficiente dentro del período de tiempo requerido . En el caso del tratamiento o profilaxis de - - trombosis, las formulaciones de liberación inmediata pueden ser necesarias para asegurar que se suministra una cantidad suficiente del medicamento en plasma dentro de un período de tiempo relativamente breve para permitir el inicio rápido de la acción. Las formulaciones de liberación inmediata también son típicamente más sencillas de desarrollar en comparación con las formulaciones de liberación modificada y también pueden proporcionar mayor flexibilidad en relación a la variación de dosis que van a ser administradas a pacientes. Las formulaciones de liberación inmediata son superiores cuando no se requieren dosis múltiples y cuando no es necesario mantener la concentración en plasma a un nivel constante por un período prolongado. La solicitud de patente internacional No.
PCT/SE01/02657 (WO 02/44145, con fecha de prioridad inicial de 01 de diciembre del 2000, presentada el 30 de noviembre del 2001, publicada el 06 de junio del 2002) describe muchos compuestos que son o que están metabolizados a Compuestos los cuales son inhibidores competitivos de proteasas similares a tripsina, tales como trombina. Los siguientes tres Compuestos están entre aquellos que se describen de manera específica: (a) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S) -Aze-Pab (O e) : - - compuesto el cual se denomina en lo siguiente como compuesto A; (b) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH (OH) C(0) - (S) Aze-Pab (2, 6-diF) (OMe) : compuesto el cual se denomina en lo siguiente compuesto B; y (c) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R)CH (OH) C(0) - (S) Aze-Pab (OMe) compuesto el cual se denomina en lo siguiente como compuesto C. - 4 - Los Compuestos A, B y C en forma de metoxiamidina se metabolizan después de administración oral o parenteral a los Compuestos ' amidina libres correspondientes, Compuestos estos últimos los cuales se ha encontrado que son inhibidores potentes de trombina. Por lo tanto: • El Compuesto A es metabolizado a Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S) -Aze-Pab (Compuesto el cual se denomina en lo siguiente como Compuesto D) vía un precursor intermediario Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S) -Aze-Pab(OH) (Compuesto el cual se denomina en lo siguiente como Compuesto G) ; • El Compuesto B es metabolizado a Ph(.3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (2 , 6-diF) (Compuesto el cual se denomina en lo siguiente como Compuesto E) vía un intermediario precursor Ph (3 -Cl ) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -(S)Aze-Pab (2 , 6-diF) (OH) (Compuesto el cual se denomina en lo siguiente como Compuesto H) ; y • El Compuesto C se metaboliza a Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R)CH (OH) C (O) - (S)Aze-Pab (Compuesto el cual se denomina en lo siguiente como Compuesto F) vía un intermediario precursor Ph (3-Cl) (5-OCH2C¾F) - (R) CH (OH) C (0) -(S)Aze-Pab (OH) Compuesto el cual se denomina en lo siguiente como Compuesto J) . Los procedimientos para la síntesis de los Compuestos A, B, C, D, E, F, G y J se describen en los - 5 - Ejemplos 12, 40, 22, 3, 39, 21, 2 y 31 (respectivamente) de la solicitud de patente internacional No. PCT/SE01/02657. Una formulación de liberación inmediata de estos compuestos, o sus metabolitos, aún no ha sido descrita en la literatura. Hemos encontrado que los Compuestos de la fórmula (I) y sus sales se pueden formular como formulaciones farmacéuticas de liberación inmediata las cuales son fáciles de administrar, por ejemplo por administración oral o parenteral . De acuerdo con un primer aspecto de la invención, se proporciona una formulación farmacéutica de liberación inmediata que comprende, como ingrediente activo, un Compuesto (i: en donde R1 representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono sustituido por uno o más sustituyentes fluoro,- R2 representa hidrógeno, hidroxi, metoxi o etoxi; y n representa 0, 1 ó 2; - 6 - o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable; con la condición de que la formulación no contenga solamente: · una solución de un ingrediente activo y agua; • una solución de un ingrediente activo y sulfóxido de dimetilo; o • una solución de un ingrediente activo en una mezcla de etanol : 12 -hidroxiestearato de PEG 660 ragua 5:5:90; formulaciones las cuales se denominan en lo siguiente como "las formulaciones de la invención" el 12-hidroxiestearato de PEG 660 es un tensioactivo no iónico y se conoce mejor como Solutol KMR. De acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto H, Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S) Aze-Pab (2 , 6-diF) (OH) el cual se puede preparar por métodos similares a los descritos en lo siguiente para la preparación de los compuestos G y J. Los compuestos de fórmula (I) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden estar en forma de un solvato, un hidrato, un solvato/hidrato mixto o preferiblemente un ansolvato, tal como un anhidrato . Los sol atos pueden ser de uno o más solventes orgánicos, tales - 7 - como alcoholes de alquilo inferior (por ejemplo de 1 a 4 átomos de carbono) (por ejemplo metanol, etanol o isopropanol) , cetonas (tal como acetona), esteres (tal como acetato de etilo) o mezclas de los mismos. En un aspecto particular de la invención R1 es CHF2 o CH2CH2F . La variable n preferiblemente es 0 ó 2. Los Compuestos más preferidos de fórmula (I) incluyen aquellos en los cuales n representa 0 o aquellos en los cuales n representa 2, de manera que se proporcionan dos átomos de fluoro localizados en las posiciones 2 y 6 (esto es, las dos posiciones orto en relación al punto de unión del anillo benceno para el grupo -NH-CH2-) . El Compuesto de fórmula (I) es especialmente el Compuesto A, el Compuesto B o el Compuesto C. Las sales preferidas de los Compuestos de fórmula (I) son sales de adición de ácido. Las sales de adición de ácido incluyen sales de adición de ácido inorgánicas tales como aquellas de ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y ácidos halohídricos, tales como ácido bromhidrico y ácido clorhídrico. Las sales de adición de ácido más preferidas incluyen aquellas de ácidos orgánicos tales como aquellas de ácido dimetilfosfórico; ácido sacarínico; ácido ciclohexilsulfámico; aquellas de ácidos carboxílicos (tales como ácido maleico, ácido fumárico, - 8 - ácido aspártico, ácido succínico, ácido malónico, ácido acético, ácido benzoico, ácido tereftálico, ácido hipúrico, ácido l-hidroxi-2 -naftoico, ácido pamoico, ácido hidroxibenzoico y similares) ; aquellas de hidroxiácidos (tales como ácido salicílico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido milico (que incluye ácido L- ( -) -málico y ácido D.L-málico), ácido glucónico (que incluye al ácido D-glucónico) , ácido glicólico, ácido ascórbico, ácido láctico y similares) ; aquellas de aminoácidos (tales como ácido glutámico (que incluyen los ácidos D-glutámico, L-glutámico y D, L-glutámico) , arginina (que incluye L-arginina) , lisina (que incluye L-lisina y clorhidrato de L-lisina) , glicina y similares) ; y particularmente aquellos de ácidos sulfónicos (tales como ácido 1 , 2 -etandisulfónico, ácidos camforsulfónicos (que incluyen al ácido lS-(+)-10-camforsulfónico y ácidos (+/-) -camforsulfónicos) , ácido etansulfónico, un ácido propansulfónico (que incluye al ácido n-propansulfónico) , un ácido butanosulfónico, un ácido pentanosulfónico, un ácido toluensulfónico, ácido metansulfónico, ácido p-xilensulfónico, ácido 2-mesitilensulfónico, ácidos naftalensulfónicos (que incluyen-ácido 1 , 5-naftalensulfónico y ácido naftalensulfónico) , ácido bencensulfónico, ácidos hidroxibencensulfónicos, ácido 2-hidroxietansulfónico, ácido 3 -hidroxietansulfónico y similares) . - 9 - Las sales particularmente preferidas incluyen aquellas de ácidos alcanosulfónicos de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo de 1 a 4 átomos de carbono), tales como ácido etansulfónico (esilato) y ácido propansulfónico (por ejemplo ácido n-propansulfónico) y ácidos arilsulfónicos opcionalmente sustituidos (por ejemplo, con uno o más grupos alquilo de 1 a 2 átomos de carbono) tales como ácido bencensul ónico (besilato) y ácido naftalendisulf nico . Las proporciones estequiométricas adecuadas de ácido respecto a base libre están en el intervalo de 0.25:1.5 a 3.0:1, por ejemplo, tales como 0.45:1.25 hasta 1.25:1, que incluye 0.50:1 a 1:1. De acuerdo con un aspecto adicional de la invención, se proporciona una formulación que comprende un Compuesto de fórmula (I) en forma sustancialmente cristalina. Aunque hemos encontrado que es posible producir Compuestos de la invención en formas las cuales son más de 80% cristalinas, mediante el término "sustancialmente cristalino" incluimos a aquellas de más de 20%, de manera preferible más de 30%, y de manera más preferible, más de 40% (por ejemplo, más de cualquiera de 50, 60, 70, 80 o 90%) cristalinas. De acuerdo con un aspecto adicional de la - 10 - invención, también se proporciona un Compuesto de la invención en forma parcialmente cristalina. Mediante el término "parcialmente cristalino" incluimos 5% o entre 5% y 20% cristalino. El grado (%) de cristalinidad se puede determinar por una persona experta en la técnica utilizando difracción en polvo de rayos X (XRPD) . También se pueden utilizar otras técnicas, tales como RMN en estado sólido, FT-IR, espectroscopia Raman, calorimetría de exploración diferencial (DSC) y microcalorimetría . Los Compuestos preferidos de fórmula (I) que se pueden preparar en forma cristalina incluyen sales de ácidos alcanosulfónicos de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo de 2 a 6 átomos de carbono, tal como 2 a 4 átomos de carbono) tales como ácido etansulfónico, ácido propansulfónico (por ejemplo ácido n-propansulfónico y ácidos arilsulfónicos opcionalmente sustituidos tales como ácido bencensulfónico y ácido naf alendisulfónico . El término formulación farmacéutica de "liberación inmediata" incluye cualquier formulación en la cual la velocidad de liberación del medicamento a partir de la formulación o la absorción del medicamento, no es retardada de manera apreciable o intencionalmente por manipulaciones galénicas. En el presente caso, la liberación inmediata se puede proporcionar por medio de un - - diluyente o portador farmacéuticamente aceptable apropiado, diluyente o portador los cuales no prolongan, en un grado apreciable, la velocidad de liberación o absorción del medicamento. A su vez, el término excluye formulaciones las cuales están adaptadas para proporcionar liberación de medicamento "modificada", "controlada", "sostenida", "prolongada", "extendida" o "retrasada". En este contexto, el término "liberación" incluye el suministro (o presentación) del medicamento a partir de la formulación al tracto gastrointestinal, a tejidos corporales o al interior de la circulación sistémica. Para liberación en el tracto gastrointestinal, la liberación se realiza bajo condiciones de pH de manera tal que el pH sea igual a 1 a 3, especialmente en, o aproximadamente a un pH de 1. En un aspecto de la invención, una formulación como se describe en la presente con un compuesto de fórmula (I) o una sal de adición de ácido de la misma, en forma cristalina libera medicamento bajo un intervalo de condiciones de pH. En otro aspecto de la invención, una formulación como se describe en la presente con un compuesto de fórmula (I) o una sal de adición de ácido del mismo, libera el medicamento bajo condiciones de pH tales como pH de 1 a 3, especialmente en, o aproximadamente a pH = 1. Por lo tanto, las formulaciones de la invención puede liberar por lo menos 70% (preferiblemente 80%) del - 12 - ingrediente activo en las siguientes 4 horas, por ejemplo en las siguientes 3 horas, de manera preferible 2 horas, y de manera más preferible en las siguiéntes 1.5 horas, y especialmente dentro de la siguiente hora (por ejemplo dentro de los siguientes 30 minutos) de administración, ya sea por vía oral o parenteral . Las formulaciones de la invención se pueden formular con una diversidad de técnicas conocidas, por ejemplo como se describe por M.E. Aulton en " Pharmaceutics : The Science of Dosage Form Design" (1988) (Churchill Livingstone) ; las descripciones pertinentes en dicho documento se incorporan en la presente como referencia. Las formulaciones de la invención pueden ser, o se pueden adaptar de acuerdo con técnicas estándares para que sean adecuadas para administración peroral, por ejemplo en forma de una tableta de liberación inmediata, una cápsula de liberación inmediata o como una forma de dosificación líquida, que comprende al ingrediente activo. Estos tipos de formulación son bien conocidos por las personas expertas y se pueden preparar de acuerdo con técnicas conocidas en el arte. Los diluyentes/portadores adecuados (los cuales también de denominarán los "rellenos") para uso en formulaciones perorales de la invención, por ejemplo aquellos en forma de tabletas de liberación inmediata - 13 - incluyen fosfato monobásico de calcio, fosfato dibásico de calcio (que incluye fosfato dibásico de calcio dihidratado y fosfato dibásico de calcio anhidro) , fosfato tribásico de calcio, lactosa, celulosa microcristalina, celulosa microcristalina silisificada, manitol, sorbitol, almidón (tal como maíz, papa o arroz), glucosa, lactato de calcio, carbonato de calcio y similares. Los diluyentes/portadores preferidos incluyen fosfato dibásico de calcio y celulosa microcristalina, la cual se puede utilizar sola o combinada con otro diluyente/portador tal como manitol. Una formulación de la invención en la forma de una tableta de liberación inmediata puede comprender uno o más excipientes para mejorar las propiedades físicas o químicas de la composición final o para facilitar el procedimiento de elaboración. Tales excipientes son convencionales en la formulación de formulaciones de liberación inmediata para la administración de un medicamento peroral e incluyen una o más de las siguientes: uno o más lubricantes (tales como estearato de magnesio, ácido esteárico, estearato de calcio, alcohol estearílico o preferiblemente estearilfumarato de sodio) ; un fluidificante (tal como talco o sílice coloidal) ; uno o más aglutinantes (tales como polivinilpirrolidona, celulosa microcristalina, un polietilenglicol (PEG) , un óxido de polietileno, una hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC) de un - - peso molecular bajo, una metilcelulosa (MC) de un peso molecular bajo, una hidroxipropilcelulosa (HPC) de un peso molecular bajo, una hidroxietilcelulosa (HEC) de un peso molecular bajo, un almidón (tal como maíz, papa o arroz) o carboximetilcelulosa de sodio de un peso molecular bajó; (los aglutinantes preferidos son polivinilpirrolidona o un HPMC de un peso, molecular bajo) ; uno o más agentes que controlan el pH (tal como un ácido orgánico (por ejemplo ácido cítrico) o una sal de metal alcalino (por ejemplo sodio), un óxido de magnesio, un sulfato, metabisulfato, propionato o sorbato de un metal alcalino o alcalinotérreo (por ejemplo sodio, calcio o potasio) ) ; uno o más desintegrantes (por ejemplo glicolato de almidón de sodio, una polivinilpirrolidona reticulada, una carboximetilcelulosa de sodio reticulada, un almidón (tal como maíz, papa o arroz) o un alginato) ; un colorante, un saborizante, un agente modificador de tonicidad, un agente de recubrimiento o un conservador. Se apreciará que algunos de los excipientes mencionados en lo anterior, los cuales pueden estar presentes en una formulación oral de liberación inmediata final (por ejemplo una tableta) de la invención pueden tener más de una de las funciones establecidas en lo anterior . En un aspecto adicional de la invención, una - - formulación líquida de la invención está adaptada para ser adecuada para administración oral . Las formulaciones líquidas adecuadas que se van a administrar oralmente incluyen aquellas en las cuales un compuesto de fórmula (I) , especialmente un compuesto A, compuesto B o compuesto C, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, se presentan junto con un portador acuoso, tal como agua. Se notará, no obstante que no se reclaman ciertas formulaciones específicas (véanse los aspectos particulares y las reivindicaciones) . Una formulación acuosa de la presente invención que comprende un portador acuoso puede comprender uno o más excipientes, tal como un conservador antimicrobiano; un modificador de tonicidad (por ejemplo cloruro de sodio, manitol o glucosa) ; un agente para ajustar el pH (por ejemplo un ácido o base inorgánica común, que incluye ácido clorhídrico o hidróxido de sodio) ; agentes que controlan el pH (es decir, un amortiguador; por ejemplo ácido tartárico, ácido acético o ácido cítrico) ; un tensioactivo (por ejemplo dodecilsulfato de sodio (SDS) o Solutol"11) ; un solubilizante el cual sirve para ayudar a solubilizar al ingrediente activo (por ejemplo etanol, un polietilenglicol o hidroxipropil^-ciclodextrina o cloruro de polivinilo (PVP) ) ; o un antioxidante. Las formulaciones orales líquidas pueden estar en - - forma de suspensiones de ingrediente activo en asociación con un solvente acuoso o, de manera más preferible ¦ soluciones acuosas (es decir, soluciones de compuesto activo que incluyen agua como un solvente) . En este contexto, el término "solución acuosa" incluye formulaciones en las cuales por lo menos 99% del ingrediente activo está en solución por encima de 5°C y presión atmosférica, y el término "suspensión" significa que más de 1% del ingrediente activo no está en solución bajo tales condiciones. Los agentes de dispersión típicos para suspensiones son hidroxipropilmetilcelulosa, AOT (sulfosuccinato de dioctilo), PVP y SDS . Son posibles otras alternativas. En otro aspecto, la presente invención proporciona una formulación oral líquida que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, agua y por lo menos un agente adicional. Los agentes adicionales incluyen: i. polietilenglicol (PEG) y opcionalmente también etanol, ácido tartárico, ácido cítrico o ácido clorhídrico; o ii. cloruro de sodio (el cual se disolverá en la formulación) y opcionalmente también etanol; o iii. ácido clorhídrico o hidróxido de sodio para llevar el pH a un valor adecuado (preferiblemente en el - 17 - intervalo de 3-8 para un compuesto de fórmula (I) en donde R2 es metoxi o etoxi, tal como un compuesto A, B o C) ; o iv. DMA (dimetilacetamida) y opcionalmente también un triglicérido de cadena media (tal como miglyol) ; o v. una ß-ciclodextrina (tal como hidroxipropil-ß-ciclodextrina) ; vi. un modificador de tonicidad tal como cloruro de sodio o manitol. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una solución oral que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (preferiblemente el compuesto A, B o C) , agua y por lo menos un agente adicional como se menciona en los incisos (i) a (vi) anteriores. En otro aspecto, la invención proporciona una formulación acuosa de un compuesto de fórmula (I) (tal como un compuesto A, B o C) que comprende un agente solubilizante tal como polietilenglicol , ß-ciclodextrina (tal como hidroxipropil- 3-ciclodextrina) , sorbitol o etanol . En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una formulación de solución oral que comprende un compuesto de fórmula (I) y etanol. Esta formulación puede comprender adicionalmente un triglicérido de cadena - - media (tal como miglyol) . En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una formulación de solución oral que comprende un compuesto de fórmula (I) y DMA. Esta formulación puede comprender además un triglicérido de cadena media (tal como miglyol) . En otro aspecto, el compuesto de fórmula (I) es cristalino (especialmente una sal de un compuesto A; preferiblemente una sal de ácido alcanosul fónico de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo de 2 a 6 átomos de carbono, tal como 2 a 4 átomos de carbono) , tal como ácido etansul fónico, ácido propansulfónico (por ejemplo ácido n-propansul fónico) u opcionalmente una sal de ácido arilsulfónico sustituido, tal como ácido bencensulfónico o sal de ácido naftalendisulfónico) . Se proporciona una formulación farmacéutica oral de liberación inmediata líquida particular, como se reivindica en la reivindicación 1, en donde el ingrediente activo es: Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (OMe) , Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0) - (S ) Aze-Pab (2 , 6-diF) (Orne) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (OMe) , o una sal f rmacéuticamente aceptable del mismo.
- - Se proporciona una formulación farmacéutica oral de liberación inmediata líquida particular adicional, como se reivindica en la reivindicación 1, en donde el ingrediente activo es: Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (OMe) o un ácido alcansulfónico de 1 a 6 átomos de carbono o una sal de ácido arilsulfónico opciónalmente sustituido del mismo. Se proporciona una formulación farmacéutica oral de liberación inmediata líquida particular adicional, como se reivindica en la reivindicación 1, en donde el ingrediente activo es: Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab (2 , 6-diF) (Orne) o una sal de ácido arilsulfónico opciónalmente sustituido del mismo (tal como la sal del ácido naftalen- 1 , 5-disulfónico) . Se notará, no obstante, que algunas formulaciones específicas no se reclaman (véanse los aspectos particulares y las reivindicaciones) . En un aspecto adicional de la invención, una formulación de la invención está adaptada para ser adecuada para administración parenteral . El término "parenteral " incluye cualquier modo de administración que no comprenda la administración peroral al tracto gastrointestinal y que incluye la administración por vías subcutánea, intravenosa, - 20 - intraarterial , transdérmica, intranasal, intrabucal, intracutánea, intramuscular, intralipomatosa, intraperitoneal, rectal, sublingual, tópica, por inhalación o por cualquier otra vía parenteral . Las formulaciones adecuadas de la invención que se van a administrar parenteralmente incluyen aquellas en las cuales un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se presenta junto con un portador acuoso, tal como agua. Una formulación de la presente invención que comprende un portador acuoso puede comprender además uno o más excipientes, tal como un conservador antimicrobiano; un modificador de tonicidad (por ejemplo cloruro de sodio, manitol o glucosa) ; un agente que ajusta el pH (por ejemplo, un ácido o base inorgánica común, que incluye ácido clorhídrico o hidróxido de sodio; agentes que controlen el pH (es decir, un amortigudor; por ejemplo ácido tartárico, ácido acético o ácido cítrico; un tensioactivo (por ejemplo dodecilsulfato de sodio (SDS) o SolutolR) ; un solubilizante el cual sirve para ayudar a solubilizar el ingrediente activo (por ejemplo etanol, un polietilenglicol o hidroxipropil- -ciclodextrina o cloruro de polivinilo (PVP) ) ; o un antioxidante. Las formulaciones parenterales pueden estar en forma de sususpensiones de ingrediente activo en asociación - - con un solvente acuoso o, de manera más preferible en soluciones acuosas (es decir, soluciones del compuesto activo que incluyen agua como un solvente) . En este contexto, el término "solución acuosa" incluye formulaciones en las cuales 99% del ingrediente activo está en solución por encima de 5°C y presión atmosférica; y el término "suspensión" significa que más de 1% del ingrediente activo no está en solución bajo tales condiciones. Los agentes de dispersión típicos para suspensiones son hidroxipropilmetilcelulosa, AOT, PVP y SDS, pero son posibles otras alternativas. El número de excipientes utilizados en las formulaciones perorales y parenterales de la invención depende de muchos factores, tales como la naturaleza y cantidad del ingrediente activo presente y la cantidad de diluyente/portador (solvente acuoso o de otro tipo) que se incluya . En otro aspecto, la presente invención proporciona una formulación parenteral que comprende un compuesto de fórmula (I) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, agua y por lo menos agentes adicionales. Los agentes adicionales incluyen: i. polietilenglicol (PEG) y opcionalmente también etanol o ácido tartárico o ácido clorhídrico; o ii. cloruro de sodio (el cual se disolverá en la - - formulación) y opcionalmente también etanol; o iii. ácido clorhídrico o hidróxido de sodio para llevar el pH a un valor adecuado (preferiblemente en el intervalo de 3-8 para un compuesto de fórmula (I) en donde R2 es hidrógeno, tal como un compuesto D, E o F) ; o preferiblemente en el intervalo de 3.5-8 para un compuesto de fórmula (I) en donde R2 es metoxi o etoxi, tal como un compuesto A, B o C) ; o iv. DMA (dimetilacetamida) y opcionalmente también un triglicérido de cadena media (tal como miglyol) ; o v. una ß-ciclodextrina (tal como hidroxipropil-ß-ciclodextrina) ; vi. un modificador de tonicidad tal como cloruro de sodio o manitol . En un aspecto adicional , la presente invención proporciona una solución inyectable que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (preferiblemente el compuesto D, E o F) , agua y por lo menos un agente adicional como se menciona en los incisos (i) a (vi) anteriores. En otro aspecto, la invención proporciona una formulación acuosa de un compuesto de fórmula (I) (tal como un compuesto D, E o F) que comprende un agente solubilizante tal como polietilenglicol , ß-ciclodextrina - - (tal como hidroxipropil^-ciclodextrina) , sorbitol o etanol . En un aspecto adicional , la presente invención proporciona una formulación parenteral que comprende un compuesto de fórmula (I) y etanol. Esta formulación puede comprender adicionalmente un triglicérido de cadena media (tal como miglyol) . En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una formulación parenteral que comprende un compuesto de fórmula (I) y DMA. Esta formulación puede comprender además un triglicérido de cadena media (tal como miglyol) . En otro aspecto, el compuesto de fórmula (I) es cristalino (especialmente una sal del compuesto A; preferiblemente una sal de ácido alcanosulfónico de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo de 2 a 6 átomos de carbono, tal como 2 a 4 átomos de carbono) , tal como ácido etansulfónico, ácido propansulfónico (por ejemplo ácido n-propansulfónico) u opcionalmente una sal de ácido arilsulfónico sustituido, tal como la sal de ácido bencensulfónico) . En otro aspecto adicional, la formulación de la presente invención está en una forma de dosificación sólida, en donde R2 es hidroxi, metoxi o etoxi (preferiblemente metoxi) (el compuesto de fórmula (I) es - - especialmente el compuesto A, el compuesto B o el compuesto C) . En otro aspecto adicional, la presente invención proporciona una formulación parenteral (especialmente una solución inyectable basada en agua) que comprende un compuesto de fórmula (I) en forma de base libre. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una formulación parenteral que comprende un compuesto de fórmula (I) en forma de base libre, en donde R2 es hidrógeno. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una formulación sólida que comprende celulosa microcristalina y polivinilpirrolidona (PVP) ; o que comprende celulosa microcristalina y glicolato de almidón de sodio. Las formulaciones de la invención, tales como las formulaciones parenterales, que comprenden sales, se pueden preparar por adición del diluyente/portador a la sal preparada previamente apropiada. Las composiciones que incluyen al ingrediente activo también se puede proporcionar en forma sólida adecuada para uso en la preparación de una formulación de la invención (por ejemplo una solución, tal como una solución acuosa, por ejemplo para administración parenteral) ex tepore. Tales composiciones pueden estar en - - forma de un sólido que comprende el ingrediente activo, opcionalmente en presencia de uno o más excipientes adicionales como se definen en lo anterior y, opcionalmente, hasta 10% (p/p) de diluyente o portador como se define en lo anterior, composiciones las cuales se denominan en lo siguiente como "las composiciones sólidas de la invención". Las composiciones sólidas de la invención se pueden elaborar por separación del diluyente/portador (por ejemplo solvente) a partir de una formulación de la invenció o una formulación concentrada de la invención la cual puede estar, por ejemplo, en forma de una solución, tal como una solución acuosa. En otro aspecto, la presente invención proporciona una formulación de liberación inmediata susceptible de administrarse por vía oral, que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo, un portador (tal como celulosa microcristalina) , un desintegrante (tal como un glicolato de almidón de sodio) , un aglutinante (tal como polivinilpirrolidona) y un lubricante (tal como estearilfumarato de sodio) . Tal formulación también puede comprender un portador adicional (o relleno) tal como manitol . Las formulaciones de la invención que están en forma de tabletas de liberación inmediata se pueden - - preparar al colocar al ingrediente activo en asociación con el diluyente/portador utilizando técnicas estándar, y utilizando equipo estándar, conocido por las personas expertas en la técnica que incluye la granulación en húmedo o en seco, compresión/compactación directa, secado, molido, mezclado, tableteado y recubierto, así como combinaciones de estos procedimientos, por ejemplo como se describe en lo siguiente. En un aspecto de la invención, la sales de adición de ácido de los compuestos de fórmula (I) en forma cristalina se formulan en tabletas. Por lo tanto, aquí se proporciona un procedimiento para la formación de una composición sólida adecuada para uso en la preparación de una formulación de la invención (por ejemplo una solución, tal como una solución acuosa) ex tempore, procedimiento el cual comprende la separación del diluyente/portador (por ejemplo el solvente) de una formulación de la invención, o una formulación concentrada de la invención. El solvente se puede separar por medio de una diversidad de técnicas conocidas por los expertos en la técnica, por ejemplo evaporación (bajo presión reducida o de alguna otra manera) , liofilizado o cualquier procedimiento de separación de solvente (secado) que elimie solventes (tal como agua) y que al mismo tiempo mantenga la integridad del ingrediente activo. Un ejemplo es - - liofilizado . Así, de acuerdo con un aspecto adicional de la invención, se proporciona una composición sólida liofilizada de la invención. En la preparación de composiciones sólidas de la invención, una persona experta en la técnica apreciará que se pueden agregar excipientes adicionales apropiados en una etapa adecuada antes de la separación del diluyente/portador . Por ejemplo, en el caso de soluciones acuosas, se puede controlar o ajustar el pH como se describe en lo anterior. Además, se puede agregar un excipiente adicional con el objetivo de ayudar a la formación de una composición sólida de la invención durante el procedimiento de separación del diluyente/portador (por ejemplo manitol, sacarosa, glucosa, mañosa o trehalosa) . Una composición sólida de un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de esta manera incluye una composición en la cual el contenido de solvente (por ejemplo agua) diferente del solvente de cristalización, es no mayor de 10%, por ejemplo menor de 2% de solvente no unido, tal como agua . Las formulaciones de la invención pueden ser esterilizadas, por ejemplo, por filtración estéril o por esterilización en autoclave, o se pueden rellenar en envases primarios, tales como frascos, cartuchos y jeringas - - llenadas previamente. Tales etapas de procesamiento también se llevan a cabo antes del secado para formar una composición sólida de la invención. · Antes de la administración, la composición sólida seca se puede reconstituir o diluir, por ejemplo, en agua, solución salina fisiológica, solución de glucosa o cualquier otra solución adecuada. La cantidad de diluyente/portador en una formulación oral (por ejemplo una tableta de liberación inmediata) de la invención depende de muchos factores tales como la naturaleza y cantidad del ingrediente activo como se utiliza así como la naturaleza y cantidades de cualquier otro constituyente (por ejemplo excipientes adicionales) que están presentes en la formulación, pero típicamente es de hasta 40% (p/p) , preferiblemente hasta 30%, de manera más preferible hasta 20%, y de manera particularmente hasta 10% (p/p) de la composición final . La cantidad de excipientes adicionales en tal formulación oral de la invención también depende de factores tales como la naturaleza y cantidad del ingrediente activo que se utiliza, así como la naturaleza y cantidades de cualquier otro constituyente (por ejemplo diluyentes/portadores u otros excipientes adicionales) que están presentes en la formulación, pero, para lubricantes y fluidificantes, típicamente es de hasta 5% (p/p) y para aglutinantes y - - desintegrantes típicamente es de hasta 10% (p/p) de la composición final . Las formulaciones de la invención se administran a pacientes mamíferos (que incluyen humanos) y, para Compuestos de fórmula (I) , en donde R2 no es hidrógeno, posteriormente se metabolizan en el cuerpo para formar Compuestos de fórmula (I) , en donde R2 es hidrógeno, que son farmacológicamente activos. De acuerdo con un aspecto adicional de la invención, de esta manera se proporciona una formulación de la invención para uso como una sustancia farmacéutica. En particular, los Compuestos de fórmula (I) son inhibidores, o se metabolizan después de la administración para formar inhibidores potentes de trombina, por ejemplo, como se puede demostrar en las pruebas descritas, por ejemplo, en la solicitud de patente internacional No. PCT/SE01/02657, así como en las solicitudes de patentes internacionales WO 02/14270, WO 01/87879 y WO 00/42059, las descripciones pertinentes en los documentos las cuales se incorporan en la presente como referencia. Por "precursor de un inhibidor de trombina" , incluimos Compuestos que se metabolizan después de la administración y que forman un inhibidor de trombina, en una cantidad detectable experimentalmente , después de la administración.
- - Por "ingrediente activo" y "sustancia activa", queremos significar un agente farmacéutico (que abarca al inhibidor de trombina y precursores del mismo) presente en la formulación. Las formulaciones de la invención de esta manera se espera que sean útiles en aquellas condiciones en donde se requiere inhibición de trombina, o condiciones en donde está indicado un tratamiento anticoagulante, que incluyen las siguientes: El tratamiento o profilaxis de trombosis e hipercoagulabilidad en sangre o tejidos de animales que incluyen al hombre. Se sabe que la hipercoagulabilidad puede llevar a enfermedades tromboembolicas. Las condiciones relacionadas con hipercoagulabilidad y enfermedades tromboembólicas las cuales se pueden mencionar incluyen resistencia a proteína C activada, heredada o adquirida, tal como mutación en el factor V (factor V de Leiden) , y deficiencias heredadas o adquiridas en antitrombina III, proteína C, proteína S y cofactor II de heparina. Otras conocidas que se sabe que están asociadas con hipercoagulabilidad y enfermedades tromboembólicas incluyen anticuerpos circulantes contra fosfolípidos (anticoagulante de Lupus) , homocisteinemia, trombocitopenia inducida por heparina y defectos en fibrinólisis así como síndromes de coagulación (por ejemplo coagulación - - intravascular diseminada (DIC) ) y daño vascular en general (por ejemplo debido a cirugía) . El tratamiento de las condiciones en donde existe un exceso indeseable de trombina sin signos de hipercoagulabilidad, por ejemplo en enfermedades neurodegenerativas tales como enfermedad de Alzheimer. Los estados de enfermedad particulares los cuales se pueden mencionar incluyen el tratamiento terapéutico o profiláctico de trombosis venosa (por ejemplo DVT) y embolia pulmonar, trombosis arterial (por ejemplo en infarto al miocardio, angina inestable, apoplejía basada en trombosis y trombosis arterial periférica) y en embolia sistémica, habitualmente de la aurícula durante la fibrilación auricular (por ejemplo, fibrilación auricular no valvular) o a partir del ventrículo izquierdo después de infarto miocárdico transmural o causado por fallo cardíaco congestivo; profilaxis de reoclusión (es decir trombosis) después de trombólisis, angioplastia transluminal percutánea (PTA) y operaciones de derivación coronaria; la prevención de retrombosis después de microcirugía y cirugía vascular en general. Las indicaciones adicionales incluyen el tratamiento terapéutico o profiláctico de coagulación intravascular diseminada causada por bacterias, traumatismo múltiple, intoxicación o cualquier otro mecanismo; - - tratamiento anticoagulante cuando la sangre está en contacto con superficies extrañas en el cuerpo tales como injertos vasculares, endoprótesis vasculares, catéteres vasculares, válvulas prostéticas mecánicas y biológicas o cualquier otro dispositivo médico y tratamiento anticoagulante cuando la sangre está en contacto con dispositivos médicos fuera del cuerpo por ejemplo durante la cirugía cardiovascular utilizando un sistema de circulación extracorporal o en hemodiálisis ; el tratamiento terapéutico o profiláctico del síndrome del malestar respiratorio idiopático y adulto, fibrosis pulmonar después del tratamiento con radiación o quimioterapia, choque septicémico, septicemia, respuestas inflamatorias que incluyen, pero que no se limitan a edema, aterosclerosis aguda o crónica tal como enfermedad de la arteria coronaria y formación de placas ateroscleroticas, enfermedad arterial cerebral, infarto cerebral, trombosis cerebral, embolia cerebral, enfermedad arterial periférica, isquemia, angina (que incluye angina inestable) , daño por reperfusión, réstenosis después de angioplastia transluminal percutánea (PTA) y cirugía de derivación de la arteria coronaria. La formulación de la presente invención también puede comprender cualesquiera de uno o varios agentes antitrombóticos con un mecanismo de acción diferente al de los Compuestos de la fórmula (I), por ejemplo uno o más de - - los siguientes: los agentes antiplaquetarios ácido acetilsalicílico, ticlopidina y clopidogrel ; receptor de tromboxano o inhibidores de sintetasa; antagonistas de receptor de fibrinógeno; miméticos de prostaciclina, inhibidores de fosfodiesterasa; antagonistas de receptor de ADP (P2T) ; e inhibidores de carboxipeptidasa U (CPU) . Los Compuestos de fórmula (I) que inhiben tripsina o trombina también pueden ser útiles en el tratamiento de pancreatitis. Las formulaciones de la invención de esta manera están indicadas en el tratamiento tanto terapéutico como profiláctico de estas condiciones. De acuerdo con un aspecto adicional de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina, método el cual comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una formulación de la invención a una persona que padece de, o que es susceptible de tal condición. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una formulación de la invención en la elaboración de un medicamento para uso en el tratamiento de trombosis . De acuerdo con un aspecto adicional de la invención, se proporciona un método de tratamiento de - 34 - trombosis, método el cual comprende la administración de una formulación de la invención a una persona que padece de, o que es susceptible de tal condición. Para evitar dudas, mediante el término "tratamiento" incluimos el tratamiento terapéutico así como la profilaxis de una condición. Las cantidades adecuadas de ingrediente activo en las formulaciones (orales o parenterales) , las formulaciones concentradas y las formulaciones sólidas de la invención dependen de muchos factores tales como la naturaleza de dicho ingrediente (base libre/sal, etc.), la dosis que se requiere en una formulación oral o en una formulación parenteral final "lista para usarse" que es o que se va a preparar, así como la naturaleza y cantidades de otros constituyentes de la formulación. No obstante, una dosis diaria típica de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo está en el intervalo de 0.001-100 mg/kg de peso corporal en administración peroral y 0.001-50 mg/kg de peso corporal en la administración parenteral, excluyendo el peso de cualquier contraión ácido, sin importar el número de dosis individuales que se administren durante el curso de ese día. En el caso de una formulación parenteral de liberación inmediata la administración puede ser continua (por ejemplo a modo de infusión) . Una dosis oral diaria preferida es de - 35 - 20-500 mg y una dosis parenteral preferida está en el intervalo de 0.1-50 mg.
Procedimientos Generales Se realiza CCD (cromatografía en capa delgada) sobre gel de sílice. El análisis por CLAR (cromatografía líquida de alta resolución) quiral se realiza utilizando una columna Chiralcel OD de 46 mm x 250 mm con una columna de protección de 5 cm. Se mantiene la temperatura de la columna en 35°C. Se utiliza un caudal de 1.0 ml/min. Se utiliza un detector de radiación Gilson 115 UV a 228 nm. La fase móvil consiste de hexanos, etanol y ácido trifIuoroacetico y las proporciones apropiadas se incluyen para cada Compuesto. Típicamente, el producto se disuelve en una cantidad mínima de etanol y esto se diluye con la fase móvil . En las preparaciones A a I siguientes, se realiza CL-EM/EM (espectro de masas por cromatografía líquida/espectro de masas) utilizando un instrumento HP-1100 equipado con un inyector CTC-PAL y una columna 5 Tm, 4 x 100 mm ThermoQuest , Hypersil BDS-C18. Se utiliza un detector API-3000 (Sciex) EM. El caudal es de 1.2 ml/min y la fase móvil (gradiente) consiste de 10-90% de acetonitrilo con 90-10% de acetato de amonio acuoso 4 mM, ambos con 0.2% de ácido fórmico. De otra manera, los - 36 - espectros de masa de baja resolución (EMAR) se registran utilizando un espectrómetro Micromass ZQ en el modo de ión de conmutación ESI posneg (intervalo de masas m/z 100-800) ; y los espectros de masa de alta resolución (EMAR) se registran utilizando un espectrómetro Micromass LCT en el modo de ionización negativa ES (intervalo de masas m/z 100-1000) con leucina encefalina (C28H37N5O7) como estándar de masa interno . Los espectros de RM ½ se registran utilizando tetrametilsilano como el estándar interno. Los procedimientos para la síntesis de Compuestos de fórmula (I) están contenidos en la solicitud de patente internacional No. PCT/SE01/02657 (WO 02/44145, con fecha de prioridad inicial de 01 de diciembre del 2000, presentado el 30 de noviembre del 2001 y publicado el 6 de junio del 2002) ) , la información relevante de la cual se incorpora en la presente.
Preparación A: Preparación del Compuesto A (i) 3-cloro-5-metoxibenzaldehído Se agrega a gotas 3 , 5-dicloroanisol (74.0 g, 419 mmoles) en 200 mi de THF a magnesio metálico (14.2 g, 585 mmoles, prelavado con HC1 0.5 N) en 100 mi de THF a 25 °C. Después de la adición se agrega a gotas 1,2-dibromoetano (3.9 g, 20.8 mmoles) . La mezcla de color café - 37 - oscuro resultante se calienta a reflujo durante 3 h. La mezcla se enfría a 0°C y se agregan en una porción 60 mi de ?,?-dimetilformamida. La mezcla se divide con dietiléter (3 x 400 mi) y 500 mi de HCl 6N. Los. extractos orgánicos combinados se lavan con 300 mi de salmuera, se secan con Na2S04, se filtran y se concentran al vacío para proporcionar un aceite. La cromatografía instantánea (2x) sobre gel de sílice eluyendo con Hex:EtOAc (4:1) proporciona el Compuesto del subtítulo (38.9 g, 54%) como un aceite amarillo. RMN XH (300 MHz , CDC13) d 9.90 (s, 1H) ,. 7.53 (s, 1H) , 7.38 (s, 1H) , 7.15 (s, 1H) , 3.87 (s, 3H) . ii) 3 -cloro-5-hidroxibenzaldehído Una solución de 3-cloro-5-metoxibenzaldehído (22.8 g, 134 mmoles; véase la etapa (i) anterior) en 250 mi de CH2C12 se enfría a 0°C. Se agrega a gotas durante 15 min tribromuro de boro (15.8 mi, 167 mmoles). Después de agitar, la mezcla de reacción durante 2 h se agrega lentamente 50 mi de H20. La solución después se extrae con Et20 (2 x 100 mi) . Las capas orgánicas se combinan, se secan con Na2S04, se filtran y se concentran al vacío. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con Hex:EtOAc (4:1) proporciona el Compuesto del subtítulo (5.2 g, 25%) . RMN *H (300 MHz, CDC13) d 9.85 (s, 1H) , 7.35 (s, - 38 - 1H) , 7.20 (s, 1H) , 7.10 (s, 1H) , 3.68 (s, 1H) . (iii) 3-cloro-5-difluorometoxibenzaldehido Una solución de 3 -cloro-5-hidroxibenzaldehído (7.5 g, 48 mmoles; véase la etapa (ii) anterior) en 250 mi de 2-propanol y 100 mi de KOH 30% se calienta a reflujo. Mientras se agita se burbujea CHC1F2 en la mezcla de reacción durante 2 h. La mezcla de reacción se enfría, se acidifica con HC1 1N y se extrae con EtOAc (2 x 100 mi) . Las fracciones orgánicas se lavan con 100 mi de salmuera, se secan con Na2S04, se filtran y se concentran al vacío. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con Hex : EtOAc (4:1) proporciona el Compuesto del subtítulo (4.6 g, 46%) . RMN XH (300 MHz, CDCl3) d 9.95 (s, 1H) , 7.72 (s, 1H) , 7.52 (s, 1H) , 7.40 (s, 1H) , 6.60 (t, JH-F=71:1 Hz, 1H) (iv) Ph(3-Cl) (5-OCHF2- (R,S)CH(OTMS)CN Una solución de 3-cloro-5-difluorometoxibenzaldehído (4.6 g, 22.3 mmoles; véase la etapa (iii) anterior) en 200 mi de CH2C12 se enfría a 0°C. Se agregan Znl2 (1.8 g, 5.6 mmoles) y cianuro de trimetilsililo (2.8 g, 27.9 mmoles) y se permite que la mezcla de reacción se caliente hasta la temperatura ambiente y se agite durante 15 h. La mezcla se concentra parcialmente al vacío lo que proporciona el Compuesto del subtítulo como un líquido, el cual se utiliza directamente - 39 - en la etapa (v) siguiente, sin purificación o caracterización adicionales. (v) Ph(3-Cl) (5-0CHF2) - (R, S) CH (OH) C (NH) OEt Se agrega a gotas Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R, S) CH (OTMS) CN (6.82 g, suponiendo 22.3 mmoles; véase la etapa (iv) anterior) a 500 mi de HCl/EtOH. La mezcla de reacción se agita 15 h, y después se concentra parcialmente al vacío lo que proporciona el Compuesto del subtítulo como un líquido, el cual se utiliza en la etapa (vi) sin purificación o caracterización adicionales. (vi) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R,S)CH(OH) C(0)OEt Se disuelve Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R, S) CH (OH) C (NH) OEt (6.24 g, suponiendo 22.3 mmoles; véase la etapa (v) anterior) en 250 mi de THF, se agregan 400 mi de H2S04 0.5M y la reacción se agita a 40 °C durante 65 h, se enfría y después se concentra parcialmente al vacío para separar la mayor parte del THF. La mezcla de reacción después se extrae con Et20 (3 x 100 mi), se seca con Na2S04, se filtra y se concentra al vacío para proporcionar el Compuesto del subtítulo como un sólido, el cual se utiliza en la siguiente etapa (vii) sin purificación o caracterización adicionales. (vii) Ph(3-Cl) (5-0CHF2) - (R, S) CH (OH) C (O) OH Una solución de Ph (3-C1) (5-OCHF2) -(R, S) CH (OH) C (O) OEt (6.25 g, suponiendo 22.3 mmoles; véase - 40 - la etapa (vi) anterior) en 175 mi de 2 -propanol y 350 mi de KOH 20% se agita a temperatura ambiente durante 15 h. La reacción después se concentra parcialmente al vacío para separar la mayor parte del 2 -propanol. La mezcla restante se acidifica con H2S04 1M, se extrae con Et20 (3 x 100 mi) , se seca con Na2S04 y se concentra al vacío para proporcionar un sólido. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con CHC13 :MeOH: H4OH concentrado (6:3:1) proporciona la sal de amonio del Compuesto del subtítulo. La sal de amonio después se disuelve en una mezcla de 75 mi de EtOAc y 75 mi de H20 y se acidifica con HCl 2N. La capa orgánica se separa y se lava con 50 mi de salmuera, se seca con Na2S04 y se concentra al vacío para proporcionar el Compuesto del subtítulo (3.2 g, 57% a partir de las etapas (iv) a (vii)) . RMN ½ (300 MHz, CD3OD) d 7.38 (s, 1H) , 7.22 (s, 1H) , 7.15 (s, 1H) , 6.89 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H) , 5.16 (s, 1H) (viii) Ph(3-Cl) (5-OCHFz- (R) CH (OH) C (O) OH y Ph(3-Cl) (5-OCHF2- (S)CH(OAc)C(0)OH (b) Una mezcla de Ph (3-Cl) (5-OCHF2) - (R, S) CH (OH) C (O) OH (3.2 g, 12.7 mmoles, véase la etapa (vii) anterior) y aproximadamente -2.0 g de Lipase PS "Amano" en 125 mi de acetato de vinilo y 125 mi de TBE se calienta a reflujo durante 48 h. La mezcla de reacción se enfría, se filtra a - 41 - través de Celite y la torta de filtro se lava con EtOAc. El filtrado se concentra al vacío y se somete a cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con CHCl3 :MeOH : NHOH concentrado (6:3:1) lo que proporciona las sales de amonio de los Compuestos (a) y (b) del subtítulo. El Compuesto (a) como una sal se disuelve en H20, acidificado con HCl 2N y se extrae con EtOAc . La capa orgánica se lava con salmuera, se seca con Na2S04, se filtra y se concentra al vacío para proporcionar el Compuesto (a) del subtítulo (1.2 g, 37%). Para el Compuesto (a) del subtítulo RMN XH (300 Hz, CD3OD) d 7.38 (s, 1H) , 7.22 (s, 1H) , 7.15 (s, 1H) , 6.89 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H) , 5.17 (s, 1H) . (ix) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (Teoc) A una solución de Ph (3-Cl) (5-OCHF2) -(R) CH (OH) C (O) OH (1.1 g, 4.4 mmoles; véase la etapa (viii) anterior) y H-Aze-Pab (Teoc) (véase la solicitud de patente internacional WO 00/42059, 2.6 g, 5.7 mmoles) en 50 mi de D F a 0°C se agrega PyBOP (2.8 g, 5.3 mmoles) y colidina (1.3 g, 10.6 mmoles). La reacción se agita a 0°C durante 2 h y después a temperatura ambiente durante 15 h adicionales. La mezcla de reacción se concentra al vacío y se somete a cromatografía instantánea sobre gel de sílice (3x) , eluyendo primero con CHCl3:EtOH (9:1), y después con - 42 - EtOAc : EtOH (20:1) y finalmente eluyendo con CH2Cl2:CH3OH (95:5) para proporcionar el Compuesto del subtítulo (1.0 g, 37%) como un sólido blanco. RM H (300 MHz, CD30D, mezcla de rotámeros) d 7.79-7.85 (d, J = 8.7 Hz, 2H) , 7.15-7.48 (m, 5H) , 6.89 y 6.91 (t, JH-F=71.1 Hz, 1H) , 5.12 y 5.20 (s, 1H) , 4.75-4.85 (m, 1H) , 3.97-4.55 (m, 6H) , 2.10-2.75 (m, 2H) , 1.05-1.15 (m, 2H) , 0.09 (s, 9H) EM (m/z) 611 (M + 1)+ (x) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(0H)C(0) -Aze-Pab (OMe , Teoc) Se disuelve Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (Teoc) (0.40 g, 0.65 mmoles; véase la etapa (ix) anterior), en 20 mi de acetonitrilo y se agregan 0.50 g (6.0 mmoles) de clorhidrato de O-metilhidroxilamina . La mezcla se calienta a 70 °C durante 2 h. El solvente se evapora y el residuo se divide entre agua y acetato de etilo. La fase acuosa se extrae dos veces más con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se lava con agua, salmuera, se seca con Na2S04, se filtra y se evapora. Rendimiento: 0.41 g (91%). RMN ¾ (300 MHz, CDCl3) d 7.83 (t amplio, 1H) , 7.57 (s amplio, 1H) , 7.47 (d, 2H) , 7.30 (d, 2H) , 7.20 (m, 1H) , 7.14 (m, 1H) , 7.01 (m, 1H) , 6.53 (t, 1H) , 4.89 (s, 1H) , 4.87 (m, 1H) , 4.47 (m, 2H) , 4.4-4.2 (amplio, 1H) , - 43 - 4.17-4.1 (m, 3H) , 3.95 (s, 3H) , 3.67 (m, 1H) , 2.68 (m, 1H) , 2.42 (m, 1H) , 0.97 (m, 2H) , 0.01 (s, 9H) . (xi) Compuesto A Se disuelve Ph (3-C1) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab(OMe, Teoc) (0.40 g, 0.62 mmoles; véase la etapa (x) anterior) en 5 mi de TFA y se permite que reaccione durante 30 min. Se evapora TFA y el residuo se divide entre acetato de etilo y NaHC03 (acuoso) . La fase acuosa se extrae dos veces más con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se lava con agua, salmuera, se seca con Na2S0 , se filtra y se evapora. El producto se liofiliza a partir de agua/acetonitrilo. No es necesario purificación. Rendimiento: 0.28 g (85%). R N ¾ (600 MHz, CDCl3) d 7.89 (t amplio, 1H)', 7.57 (d, 2H) , 7.28 (d, 2H) , 7.18 (m, 1H) , 7.13 (m, 1H) , 6.99 (m, 1H) , 6.151 (t, 1H) , 4.88 (s, 1H) , 4.87 (m, 1H) , 4.80 (s amplio, 2H) , 4.48 (dd, 1H) , 4.43 (dd, 1H) , 4.10 (m, 1H) , 3.89 (s, 3H) , 3.68 (m, 1H) , 2.68 (m, 1H) , 2.40 (m, 1H) . RMN 13C (125 MHz, CDCl3) : (carbonos de carbonilo o amidina, rotámeros) d 172.9, 170.8, 152.7, 152.6 EMAR calculado para C22H23CIF2N4O5 (M-H) " 495.1242, encontrado 495.1247 Preparación B: Preparación del Compuesto B - 44 - (i) 2 , 6-difluoro-4- [ (metilsulfinil ) (metiltio) metil] -benzonitrilo Se disuelve (metilsulfinil ) (metiltio) metano (7.26 g, 0.0584 moles) en 100 mi de THF seco bajo argón y se enfría a -78 °C. Se agrega a gotas con agitación butil-litio en hexano (16 mi, 1.6M, 0.0256 moles). La mezcla se agita durante 15 min. Mientras tanto, se agrega una solución de 3 , 4 , 5-trifluorobenzonitrilo (4.0 g, 0.025 mmoles) en 100 mi de THF seco enfriado a -78°C bajo argón, a través de una cánula a la última solución, durante un período de 35 min. Después de 30 min, se retira el baño de enfriamiento y cuando la reacción ha alcanzado la temperatura ambiente, se vierte en 400 mi de agua. El THF se evapora y la capa acuosa remanente se extrae tres veces con dietiléter. La fase etérea combinada se lava con agua, se seca con Na2S04 y se evapora. Rendimiento: 2.0 g (30%) . RMN ½ (500 Hz, CDC13) d 7.4-7.25 (m, 2H) , 5.01 (s, 1H, diasteroisómero) , 4.91 (s, 1H, diasteroisómero) , 2.88 (s, 3H, diasteroisómero), 2.52 (s, 3H, diasteroisómero), 2.49 (s, 3H, diasteroisómero), 2.34 (s, 3H, diasteroisómero), 1.72 (amplio, 1H) . (ii) 2 , 6-difluoro-4-formilbenzonitrilo El 2 , 6-difluoro-4 [ (metilsulfinil) (metiltio) -metil] -benzonitrilo (2.17 g, 8.32 mmoles; véase la etapa (i) anterior) se disuelve en 90 mi de THF y se agregan 3.5 - 45 - mi de ácido sulfúrico concentrado. La mezcla se deja a temperatura ambiente durante 3 días y posteriormente se vierte en 450 mi de agua. La extracción tres veces con EtOAc seguido y la fase etérea combinada se lava dos veces con bicarbonato de sodio acuoso y con salmuera, se seca con Na2S04 y se evapora. Rendimiento: 1.36 g (98%). La posición del grupo formilo se establece por R 13C. La señal de los carbonos fluorados a 162.7 ppm muestra el patrón de acoplamiento esperado con dos constantes de acoplamiento del orden de 260 Hz y 6.3 Hz, respectivamente, que corresponden a un acoplamiento ipso y meta a partir de los átomos de flúor. RMN ?? (400 MHz, CDC13) d 10.35 (s, 1H) , 7.33 (m, 2H) (iii) 2 , 6-difluoro-4 -hidroximetilbenzonitrilo El 2 , 6-difluoro-4-formilbenzonitrilo (1.36 g, 8.13 mmoles; véase la etapa (ii) anterior) se disuelve en 25 mi de metanol y se enfría en un baño con hielo. Se agrega en porciones, con agitación, borohidruro de sodio (0.307 g, 8.12 mmoles) y la reacción se deja reposar durante 65 min. El solvente se evapora y el residuo se divide entre dietiléter y bicarbonato de sodio acuoso. La capa etérea se lava con más bicarbonato de sodio acuoso y salmuera, se seca sobre Na2S04 y se evapora. El producto crudo cristaliza rápidamente y se puede utilizar sin - 46 - purificación adicional. Rendimiento: 1.24 g (90%). RMN XH (400 MHz, CDC13) d 7.24 (m, 2H) , 4.81 (s, 2H) , 2.10 (amplio, 1H) (iv) etansulfonato de 4-ciano-2 , 6-difluorobencilo A una solución enfriada con hielo de 2,6-difluoro-4-hidroximetilbenzonitrilo (1.24 g, 7.32 mmoles; véase la etapa (iii) anterior) y cloruro de metansulfonilo (0.93 g, 8.1 mmoles) en 60 mi de cloruro de metileno se agrega trietilamina (0.81 g, 8.1 mmoles) con agitación. Después de 3 h a 0°C la mezcla se lava dos veces con HCl 1M y una vez con agua, se seca con Na2S04 y se evapora. El producto puede ser utilizado sin purificación adicional. Rendimiento: 1.61 g (89%). RMN XH (300 MHz , CDC13) d 7.29 (m, 2H) , 5.33 (s, 2H) , 3.07 (s, 3H) . (v) 4-azidometil-2 , 6-difluorobenzonitrilo Una mezcla de metansulfonato de 4-ciano-2,6-difluorobencilo (1.61 g, 6.51 mmoles; véase la etapa (iv) anterior) y azida de sodio (0.72 g, 0.0111 moles) en 10 mi de agua y 20 mi de DMF se agita a temperatura ambiente durante la noche. El resultante posteriormente se vierte en 200 mi de agua y se extrae tres veces con dietiléter. La fase etérea combinada se lava cinco veces con agua, se seca con Na2S04 y se evapora. Se evapora una muestra pequeña para propósitos de RMN y el producto cristaliza. El resto se - 47 - evapora con precaución pero no hasta sequedad completa. Se supone que el rendimiento (teóricamente, 1.26 g) es casi cuantitativo en base en RMN y en CLAR analítica. RMN XH (400 MHz, CDCl3) d 7.29 (m, 2H) , 4.46 (s, 2H) . (vi) 4-aminometil-2 , 6-difluorobenzonitrilo Esta reacción se lleva a cabo de acuerdo con el procedimiento descrito en J. Chem. Res. (M) (1992) 3128. A una suspensión de 520 mg de Pd 10%/C (50% de humedad) en 20 mi de agua se agrega una solución de borohidruro de sodio (0.834 g, 0.0221 moles) en 20 mi de agua. Se genera cierta cantidad de gas. Se disuelve 4-azidometil-2 , 6-difluorobenzonitrilo (1.26 g, 6.49 mmoles; véase la etapa (v) anterior) en 50 mi de THF y se agrega a la mezcla acuosa de un baño de hielo durante 15 min. La mezcla se agita durante 4 h, después de lo cual se agregan 20 mi de HC1 2M y la mezcla se filtra a través de Celite. El Celite se enjuaga con más agua y la fase acuosa combinada se lava con EtOAc y posteriormente se vuelve alcalina con NaOH 2M. La extracción tres veces con cloruro de metileno seguido y la fase orgánica combinada se lava con agua, se seca con Na2S04 y se evapora. Rendimiento: 0.87 g (80%) . RMN ? (400 MHz , CDC13) d 7.20 (m, 2H) , 3.96 (s, 2H) , 1.51 (amplio, 2H) . (vii) 2 , 6-difluoro-4-terbutoxicarbonilaminometil- - 48 - benzonitrilo Una solución de 4-aminometil-2 , 6-difluorobenzonitrilo (0.876 g, 5.21 mmoles; véase la etapa (vi) anterior) se disuelve en 50 mi de THF y se agrega bicarbonato de diterbutilo (1.14 g, 5.22 mmoles) en 10 mi de THF. La mezcla se agita durante 3.5 h. El THF se evapora y el residuo se divide entre agua y EtQAc . La capa orgánica se lava tres veces con HCl 0.5 M y agua, se seca con Na2S0 y se evapora. El producto se puede utilizar sin purificación adicional. Rendimiento: 1.38 g (99%) RMN XH (300 MHz , CDCl3) d 7.21 (m, 2H) , 4.95 (amplio, 1H) , 4.43 (amplio, 2H) , 1.52 (s, 9H) . (viii) Boc-Pab(2,6-diF) (OH) Una mezcla de 2, 6-difluoro-4-terbutoxicarbonilaminometilbenzonitrilo (1.38 g, 5.16 mmoles; véase la etapa (vii) anterior), clorhidrato de hidroxilamina (1.08 g, 0.0155 moles) y trietilamina (1.57 g, 0.0155 moles) en 20 mi de etanol se agita a temperatura ambiente durante 36 h. El solvente se evapora y el residuo se divide entre agua y cloruro de metileno. La capa orgánica se lava con agua, se seca con Na2S04 y se evapora. El producto se puede utilizar sin purificación adicional. Rendimiento: 1.43 g (92%). RMN XH (500 MHz, CD3OD) d 7.14 (m, 2H) , 4.97 (amplio, 1H) , 4.84 (amplio, 2H) , 4.40 (amplio, 2H) , 1.43 - 49 - (s, 9H) (ix) Boc-Pab (2, 6-diF) x HOAc Esta reacción se lleva a cabo de acuerdo con el procedimiento descrito por Judkins et al., Synth. Comm. (1998) 4351. Boc-Pab (2 , 6-diF) (OH) (1.32 g, 4.37 mmoles; véase la etapa (viii) anterior) , anhídrido acético (0.477 g, .4.68 mmoles) y 442 mg de Pd 10%/C (50% de humedad) en 100 mi de ácido acético se hidrogena a una presión de 5 atm durante 3.5 h. La mezcla se filtra a través de Celite, se enjuaga con etanol y se evapora. El residuo se liofiliza a partir de acetonitrilo y agua y algunas gotas de etanol. El producto del subtítulo se puede utilizar sin purificación adicional. Rendimiento: 1.49 g (99%) . RMN K (400 MHz, CD3OD) d 7.45 (m, 2H) , 4.34 (s, 2H) , 1.90 (s, 3H) , 1.40 (s, 9H) . (x) Boc-Pab (2 , 6-diF) (Teoc) A una solución de Boc-Pab (2 , 6-diF) x HOAc (1.56 g, 5.49 mmoles; véase la etapa (ix) anterior) en 100 mi de THF y 1 mi de agua se agrega p-nitrofenilcarbonato de 2- (trimetilsilil) etilo (1.67 g, 5.89 mmoles). Se agrega a gotas durante 5 min una solución de carbonato de potasio (1.57 g, 0.0114 moles) en 20 mi de agua. La mezcla se agita durante la noche. El THF se evapora y el residuo se divide entre agua y cloruro de metileno. La capa acuosa se extrae - 50 - con cloruro de metileno y la fase orgánica combinada se lava dos veces con bicarbonato de sodio acuoso, se seca con Na2S04 y se evapora. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice con heptano/EtOAc = 2/1 proporciona 1.71 g (73%) del Compuesto puro. RM XH (400 MHz, CDCI3) d 7.43 (m, 2H) , 4.97 (amplio, 1H) , 4.41 (amplio, 2H) , 4.24 (m, 2H) , 1.41 (s, 9H) , 1.11 (m, 2H) , 0.06 (s, 9H) . (xi) Boc-Aze-Pa (2 , 6-diF) (Teoc) Se disuelve Boc-Pab (2 , 6-diF) (Teoc) (1.009 g, 2.35 mmoles; véase la etapa (x) anterior) en 50 mi de EtOAc saturado con HCl gaseoso. La mezcla se deja reposar durante 10 minutos, se evapora y se disuelve en 18 mi de DMF y después se enfría en un baño de hielo. Se agregan Boc-Aze-OH (0.450 g, 2.24 mmoles), PyBOP (1.24 g, 2.35 mmoles) y finalmente diisopropiletilamina (1.158 g, 8.96 mmoles). La mezcla de reacción se agita durante 2 h y después se vierte en 350 mi de agua y se extrae tres veces con EtOAc . La fase orgánica combinada se lava con salmuera, se seca con Na2S04 y se evapora. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice con heptano:EtOAc (1:3) proporciona 1.097 g (96%) del Compuesto deseado. RMN XH (500 MHz, CDCl3) d 7.46 (m, 2H) , 4.65-4.5 (m, 3H) , 4.23 (m, 2H) , 3.87 (m, 1H) , 3.74 (m, 1H) , 2.45-2.3 (m, 2H) , 1.40 (s, 9H) , 1.10 (m, 2H) , 0.05 (s, 9H) . - 51 - (xii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH(OH)C(0) -Aze-Pab (2 , 6-diF) (Teoc) Se disuelve Boc-Aze-Pab (2 , 6-diF) (Teoc) (0.256 g, 0.500 mmoles; véase la etapa ( i) anterior) en 20 mi de EtOAc saturado con HCl gaseoso. La mezcla se deja durante 10 min y se evapora y se disuelve en 5 mi de DMF. Se agregan Ph (3 -Cl ) (5-0CHF2) - (R) CH (OH) C (0) OH (0.120 g, 0.475 mmoles; véase Preparación A(iii) anterior), PyBOP (0.263 g, 0.498 mmoles) y finalmente diisopropiletilamina (0.245 g, 1.89 mmoles) . La mezcla de reacción se agita durante 2 h y después se vierte en 350 mi de agua y se extrae tres veces con EtOAc . La fase orgánica combinada se lava con salmuera, se seca con Na2S04 y se evapora. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice con EtOAc proporciona 0.184 g (60%) del Compuesto del subtítulo deseado. R N H (400 MHz , CD3OD, mezcla de rotámeros) d 7.55-7.45 (m, 2H) , 7.32 (m, 1H, rotámero mayor), 7.27 (m, 1H, rotámero menor), 7.2-7.1 (m, 2H) , 6.90 (t, 1H, rotámero mayor), 6.86 (t, 1H, rotámero menor) , 5.15 (s, 1H, rotámero mayor), 5.12 (m, 1H, rotámero menor), 5.06 (s, 1H, rotámero menor), 4.72 (m, 1H, rotámero mayor), 4.6-4.45 (m, 2H) , 4.30 (m,l H, rotámero mayor), 4.24 (m, 2H) , 4.13 (m, 1H; rotámero mayor) , 4.04 (m, 1H, rotámero menor), 3.95 (m, 1H, rotámero menor), 2.62 (m, 1H, rotámero menor), 2.48 (m, 1H, rotámero mayor) , 2.22 (m, 1H, rotámero mayor), 2.10 (m, 1H, - 52 - rotámero menor), 1.07 (m, 2H) , 0.07 (m, 9H) (xiii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH(0H)C(0) -Aze-Pab (2 , 6-diF) (0Me,Teoc) Una mezcla de Ph (3 -Cl ) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (2 , 6-diF) (Teoc) (64 mg, 0.099 mmoles; véase la etapa (xii) anterior) y clorhidrato de O-metilhidroxilamina (50 mg, 0.60 mmoles) en 4 mi de acetonitrilo se - calienta a 70 °C durante 3 h. El solvente se evapora y el residuo se divide entre agua y EtOAc . La capa acuosa se extrae dos veces con EtOAc y la fase orgánica combinada se lava con agua, se seca con Na2S0 y se evapora. El producto se puede utilizar sin purificación adicional. Rendimiento: 58 mg (87%) . RMN XH (400 MHz, CDC13) d 7.90 (t amplio, 1H) , 7.46 (m, 1H) , 7.25-6.95 (m, 5H) , 6.51, t, 1H) , 4.88 (s, 1H) , 4.83 (m, 1H) , 4.6-4.5 (m, 2H) , 4.4-3.9 (m, 4H) , 3.95 (s, 3H) , 3.63 (m, 1H) , 2.67 (m, 1H) , 2.38 (m, 1H) , 1.87 (amplio, 1H), 0.98 (m, 2H) , 0.01, s, 9H) (xiv) Compuesto B Se disuelve Ph (3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (2 , 6-diF) (OMe, Teoc) (58 mg, 0.086 mmoles; véase la etapa (xiii) anterior) en 3 mi de TFA, se enfría en un baño de hielo y se permite que reaccione durante 2 h. El TFA se evapora y el residuo se disuelve en EtOAc. La capa orgánica se lava dos veces con carbonato de sodio acuoso y agua, se - 53 - seca con Na2S04 y se evapora. El residuo se liofiliza a partir de agua y acetonitrilo para proporcionar 42 mg (92%) del Compuesto del título. RM XH (300 MHz, CDCl3) d 7.95 (t amplio, 1H) , 7.2-7.1 (m, 4H) , 6.99 (m, 1H) , 6.52 (t, 1H) , 4.88 (s, 1H) , 4.85-4.75 (m, 3H) , 4.6-4.45 (m, 2H) , 4.29 (amplio, 1H) , 4.09 (m, 1H) , 3.89 .(s, 3H) , 3.69. (m, 1H) , 2.64 (m, 1H) , 2.38 (m, 1H) , 1.85 (amplio, 1H) RMN 13C (100 MHz, CDCl3) : (carbonilo y carbonos de amidina) d 172.1, 169.8, 151.9 APCI-EM: (M + 1) = 533/535 m/z Preparación C: Preparación del Compuesto C (i) Metansulfonato de (2 -monofluoroetilo) A una solución agitada magnéticamente de 2-fluoroetanol (5.0 g, 78.0 inmoles) en 90 mi de CH2C12 bajo nitrógeno a 0°C se agrega trietilamina (23.7 g, 234 mmoles) y cloruro de metansulfonilo (10.7 g, 93.7 mmoles). La mezcla se agita a 0°C durante 1.5 h, se diluye con 100 mi de CH2C12 y se lava con 100 mi de HCl 2N. La capa acuosa se extrae con 50 mi de CH2C12 y los extractos orgánicos combinados se lavan con 75 mi de salmuera, se seca con Na2S04, se filtra y se concentra al vacío para proporcionar el Compuesto del subtítulo (9.7 g, 88%) como un aceite amarillo el cual se utiliza sin purificación adicional. RMN XH (300 MHz, CDC13) d 4.76 (t, J = 4 Hz, 1H) , - 54 - 4.64 (t, J = 4 Hz, 1H) , 4.52 (t, J = 4 Hz, 1H) , 4.43 <t, J = 4 Hz, 1H) , 3.09 (s, 3H) . (ii) 3 -cloro-5-monofluoroetoxibenzaldehido A una solución de 3-cloro-5-hidroxibenzaldehído (8.2 g, 52.5 mmoles; véase la preparación A(ii) anterior) y carbonato de potasio (9.4 g, 68.2 mmoles) en 10 mi de D F bajo nitrógeno se agrega una solución de metansulfonato de (2-monofluoroetilo) (9.7 g, 68.2 mmoles; véase la etapa (i) anterior) en 120 mi de DMF, a gotas, temperatura ambiente. La mezcla se calienta a 100 °C durante 5 h y después se agita durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se enfría a 0°C, se vierte en HC1 2N enfriado con hielo y se extrae con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavan con salmuera, se secan con Na2S04, se filtran y concentran al vacío. El aceite café se somete a cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con Hex:EtOAc (4:1) para proporcionar el Compuesto del subtítulo (7.6 g, 71%) como un aceite amarillo. RMN XH (300 MHz, CDC13) d 9.92 (s, 1H) , 7.48 (s, 1H) , 7.32 (s, 1H) , 7.21 (s, 1H) , 4.87 (t, J = 4 Hz, 1H) , 4.71 (t, J = 3 Hz, 1H) , 4.33 (t, J = 3 Hz, 1H) , 4.24 (t, J = 3 Hz, 1H) . (iii) Ph (3-C1) (5-OCH2CH2F) - (R,S) CH (OTMS) CN A una solución de 3-cloro-5-monofluoroetoxibenzaldehído (7.6 g, 37.5 mmoles; véase la - 55 - etapa (ii) anterior) y yoduro de zinc (3.0 g, 9.38 mmoles) en 310 mi de CH2C12 se agrega cianuro de trimetilsililo (7.4 g, 75.0 mmoles) a gotas a 0°C bajo nitrógeno. La mezcla se agita a 0°C durante 3 h y a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se diluye con 300 mi de H20, la capa orgánica se separa, se seca con Na2S04, se filtra y se concentra al vacío para proporcionar el Compuesto del subtítulo (10.6 g, 94%) como un aceite café que se utiliza sin purificación o caracterización adicionales. (iv) Ph(3-Cl) (5-0CH2CH2F) - (R, ¿3) CH (OH) C (O) OH Se agregan 100 mi de ácido clorhídrico concentrado a Ph (3-Cl) (5-0CH2CH2F) - (R, S) CH (OTMS) CN (10.6 g, 5.8 mmoles; véase la etapa (iii) anterior), y la solución se agita a 100 °C durante 3 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la reacción se enfría adicionalmente a 0°C, se vuelve básica lentamente con aproximadamente 300 mi de NaOH 3N y se lava con Et20 (3 x 200 mi) . La capa acuosa se acidifica con 80 mi de HC1 2N y se extrae con EtOAc (3 x 300 mi) . Los extractos combinados de EtOAc se secan con Na2S0 , se filtran y se concentran al vacío para proporcionar el Compuesto del subtítulo (8.6 g, 98%) como un sólido amarillo claro que se utiliza sin purificación adicional . Rf = 0.28 (90:8:2 CHCl3 :MeOH : concentrado NH40H) RMN XH (300 MHz, CD30D) d 7.09 (s, 1H) , 7.02 (s, - 56 - 1H) , 6.93 (s, 1H) , 5.11 (s, 1H) , 4.77-4.81 (m, 1H) , 4.62-4.65 (m, 1H) , 4.25-4.28 (m, 1H) , 4.14-4.18 (m, 1H) . (v) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (S) -CH (OAc) C (O) OH (a) y Ph(3- Cl) (5-0CH2CH2F) - (R)CH(QH)C(0)OH (b) Una solución de Ph(3-Cl) (5-0CH2CH2F) - (R, S) CH (OH) C (O) OH (8.6 g, 34.5 mmoles; véase la etapa (iv) anterior) y 4.0 g de Lipase PS "Amano" en 250 mi de acetato de vinilo y 250 mi de MTBE se calienta a 70 °C bajo nitrógeno durante 3 d. La reacción se enfría a temperatura ambiente y la enzima se separa por filtración a través de CeliteMR. La torta de filtro se lava con EtOAc y el filtrado se concentra al vacío. La cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con CHC13: eOH:Et3N (90:8:2) proporciona la sal trietilamina del Compuesto (a) del subtítulo como un aceite amarillo. Además, se obtienen 4.0 g de la sal de trietilamina del Compuesto (b) del subtítulo. La sal del Compuesto (b) del subtítulo se disuelve en 250 mi de H20, se acidifica con HC1 2N y se extrae con EtOAc (3 x 200 mi) . Los extractos orgánicos combinados se secan con Na2S04/ se filtran y concentran al vacío para proporcionar el Compuesto (b) del subtítulo (2.8 g, 32%) como un aceite amarillo.
Datos para el Compuesto del subtítulo (b) : Rf = 0.28 (90:8:2 CHCl3 :MeOH : concentrado NH4OH) - 57 - R XH (300 MHz, CD3OD) d 7.09 (s, 1H) , 7.02 (s, 1H) , 6.93 (s, 1H) , 5.11 (s, 1H) , 4.77-4.81 (m, 1H) , 4.62-4.65 (m, 1H) , 4.25-4.28 (m, 1H) , 4.15-4.18 (m, 1H) . (vi) Compuesto C A una solución de Ph (3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R)CH(OH)C(0)OH (818 mg, 3.29 mmoles; véase la etapa (v) anterior en 30 mi de DMF bajo nitrógeno a 0°C se agrega HAze-Pab (OMe) «2HC1 (1.43 g, 4.27 mmoles, véase la solicitud de patente internacional O 00/42059), PyBOP (1.89 g, 3.68 mmoles) y DIPEA (1.06 g, 8.23 mmoles). La reacción se agita a 0°C durante 2 h y después a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentra al vacío y el residuo se somete a cromatografía dos veces sobre gel de sílice, eluyendo primero con CHCl3:EtOH (15:1) y una segunda vez con EtOAc :EtOH (20:1) para proporcionar el Compuesto del título (880 mg, 54%) . Rf = 0.60 (10:1 CHCl3:EtOH) RMN XH (300 MHz, CD3OD, mezcla compleja de rotámeros) d 7.58-7.60 (d, J = 8 Hz, 2H) , 7.34 (d, J = 7 Hz, 2H) , 7.05-7.08 (m, 2H) , 6.95-6.99 (m, 1H) , 5.08-5.13 (m, 1H) , 4.77-4.82 (tu, 1H) , 4.60-4.68 (m, 1H) , 3.99-4.51 (m, 7H) , 3.82 (s, 3H) , 2.10-2.75 (m, 2H) . RMN 13C (150 MHz, CD3OD: (carbonos carbonilo o amidina) d 173.3, 170.8, 152.5. APCI-EM: (M + 1) = 493 m/z. - 58 - Preparación del Compuesto D (Ph(3-Cl) (5-OCHF2)- (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab Compuesto D Se disuelve Ph (3 -Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (Teoc) (0.045 g, 0.074 mmoles; véase la preparación A (ix) anterior) , en 3 mi de TFA y se permite que reaccione durante 1 h. Se evapora TFA y el residuo se liofiliza a partir de agua/acetonitrilo para proporcionar 0.043 g (100%) del Compuesto del subtitulo como su sal TFA. RM XH (400 MHz, CD3OD) rotámeros : d 7.8-7.75 (m, 2H) , 7.55-7.5 (m, 2H) , 7.35 (m, 1H, rotámero mayor), 7.31 (m, 1H, rotámero menor), 7.19 (m, 1H, rotámero mayor), 7.15 (m, 1H) , 7.12 (m, 1H, rotámero menor), 6.89 (t, 1H, rotámero mayor), 6.87 (t, 1H, rotámero menor), 5.22 (m, 1H, rotámero menor), 5.20 (s, 1H, rotámero mayor), 5.13 (s, 1H, rotámero menor), 4.80 (m, 1H, rotámero mayor), 4.6-4.4 (m, 2H) , 4.37 (m, 1H, rotámero mayor), 4.19 (m, 1H, rotámero mayor), 4.07 (m, 1H, rotámero menor), 3.98 (m, 1H, rotámero menor), 2.70 (m, 1H, rotámero menor), 2.55 (m, 1H, rotámero mayor), 2.29 (m, 1 H, rotámero mayor), 2.15 (m, 1H, rotámero menor) , RMN 13C (100 MHz, CD3OD) : (carbonilo carbonos amidina, rotámeros) d 172.6, 172.5, 172.0, 171.7, 167.0. EM (m/z) 465 (M - 1)", 467 (M + 1)+. - 59 - Preparación del Compuesto E Ph(3-Cl) (5-OCHF2)- (R)CH(QH) C(0) -Aze-Pab(2, 6-diF) ) Compuesto E Se disuelve Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab(2,6-diF) (Teoc) (81 mg, 0.127 mmoles; véase preparación B (xii) anterior) en 0.5 mi de cloruro de metileno y se enfría en un baño con hielo. Se agregan 3 mi de TFA y la reacción se deja durante 75 min. El TFA se evapora y el residuo se liofiliza a partir de agua y acetonitrilo . El producto crudo se purifica por cromatografía líquida en fase inversa preparativa con CH3CN: NH4OAc 0.1M (35:65) para producir 39 mg (55%) del Compuesto del título como su sal de HOAc, pureza: 99%. RMN 1H (400 MHz, CD3OD mezcla de rotámeros) d 7.5-7.4 (m, 2H) , 7.32 (m, 1H, rotámero mayor), 7.28 (m, 1H, rotámero menor), 7.2-7.1 (m, 3H) , 6.90 (t, 1H, rotámero mayor), 6.86 (t, rotámero menor), 5.15 (s, 1H, rotámero mayor), 5.14 (m, 1H, rotámero menor), 5.07 (s, 1H, rotámero menor), 4.72 (m, 1H, rotámero mayor), 4.65-4.45 (m, 2H) , 4.30 (m, 1H, rotámero mayor), 4.16 (m, 1H, rotámero mayor), 4.03 (m, 1H, rotámero menor), 3.95 (m, 1H, rotámero menor), 2.63 (m, 1H, rotámero menor), 2.48 (m, 1H, rotámero mayor), 2.21 (m, 1H, rotámero mayor), 2.07 (m, 1H, rotámero menor), 1.89 (s, 3H) . RMN 13C (75 MHz , CD30D) : (carbonos carbonilo o - 60 - amidina, mezcla de rotámeros) d 171.9, 171.2, 165.0, 162.8, 160.4. APCI-EM: (M + 1) = 503/505 m/z.
Preparación del Compuesto F Ph (3 -Cl ) (5-OCH2CH2F) -(R)CH(OH)C(0) -Aze-Pab x TFA (i) Ph(3-Cl) (5-OGH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pab (Teoc) A una solución de Ph (3-C1) (5-OCHF2CH2F) - (R)CH(OH)C(0)OH (940 mg, 3.78 mmoles; véase preparación C (v) anterior) en 30 mi de DMF bajo nitrógeno a 0°C se agrega HAze-Pab (Teoc) *HC1 (2.21 g, 4.91 mmoles), PyBOP (2.16 g, 4.15 mmoles), y DIPEA (1.22 g, 9.45 mmoles). La reacción se agita a 0°C durante 2 h y después a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se concentra al vacío y el residuo se somete a cromatografía dos veces sobre gel de sílice, eluyendo primero con CHC13 :EtOH (15:1) y en segundo lugar con EtOAcrEtOH (20:1) para proporcionar el Compuesto del subtítulo (450 mg, 20%) como una espuma blanca triturable . p.f . : 80-88°C Rf = 0.60 (10:1 CHCl3:EtOH) RM ¾ (300 MHz, CD3OD, mezcla compleja de rotámeros), d 7.79 (d, J = 8 Hz, 2H) , 7.42 (d, J = 8 Hz, 2H) , 7.05-7.08 (m, 1H) , 6.93-6.99 (m, 2H) , 5.08-5.13 (m, 1H) , 4.75-4.80 (m, 2H) , 4.60-4.68 (m, 1H) , 3.95-4.55 (m, - 61 - 8H) , 2.10-2.75 (m, 2?) , 1.05-1.11 (m, 2?) , 0.08 (s, 9?) . APCI-EM: (M + 1) = 607 m/z. (ii) Compuesto F Se disuelve Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (0) - Aze-Pab (Teoc) (0.357 g, 0.589 mmoles; véase etapa (i) anterior) , en 10 mi de TFA y se permite que reaccione durante 40 min. Se evapora TFA y el residuo se liofiliza a partir de agua/acetonitrilo para proporcionar 0.33 g (93%) del Compuesto del título como su sal TFA. RMN XR (600 MHz , CD3OD) rotámeros : d 7.8-7.7 (m, 2H) , 7.5 (d, 2H) , 7.08 (s, 1H, rotámero mayor), 7.04 (s, 1H, rotámero menor), 6.99 (s, 1H, rotámero mayor), 6.95 (s, 1H) , 6.92 (s, 1H, rotámero menor), 5.18 (m, 1H, rotámero menor), 5.14 (s, 1H, rotámero mayor), 5.08 (s, 1H, rotámero menor), 4.80 (m, 1H, rotámero mayor), 4.73 (m, 1H) , 4.65 (m, 1H) , 4.6-4.4 (m, 2H) , 4.35 (m, 1H, rotámero mayor), 4.21 (doblete de multipletes, 2H) , 4.12 (m, 1H, rotámero mayor), 4.06 (m, 1H, rotámero menor), 3.99 (m, 1H, rotámero menor), 2.69 (m, 1H, rotámero menor), 2.53 (m, 1H, rotámero mayor), 2.29 (m, 1H, rotámero mayor), 2.14 (m, 1H, rotámero menor) . RMN 13C (150 MHz, CD30D) : (carbonos carbonilo o amidina) d 172.8, 172.1, 167.4. ESI-EM+: (M+l) = 463 (m/z). - 62 - Preparación del Compuesto G Ph (3 -Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (OH) ) (i) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (OH, Teoc) Se disuelve Ph (3-C1) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab(Teoc) (0.148 g, 0.24 mmoles; véase la Preparación A, etapa (ix) anterior) , en 9 mi de acetonitrilo y se agregan 0.101 g (1,45 mmoles), de clorhidrato de hidroxilamina . La mezcla se calienta a 70°C durante 2.5 h, se filtra a través de CeliteMR y se evapora. El producto crudo (0.145 g, 75% puro) se utiliza directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. (ii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH(OH)C(0) -Aze-Pab (OH) Se disuelve Ph (3 -Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (OH, Teoc) (0.145 g, 0.23 mmoles; véase la etapa (i) anterior), en 0.5 mi de CH2C12 y 9 mi de TFA. Se permite que la reacción se lleve a cabo durante 60 minutos. Se evapora el TFA y el residuo se purifica utilizando CLAR preparativa. Las fracciones de interés se acumulan y liofilizan (2x) , lo que proporciona 72 mg (rendimiento sobre dos etapas 62%) del Compuesto del título. EM (m/z) 482 (m - 1)"; 484 (M + 1)+. RM 1H (400 MHz, CD3OD) d 7.58 (d, 2H) , 7.33 (m, 3H) , 7.15 (m, 2H) , 6.89 (t, 1H, rotámero mayor), 6.86 (t, 1H, rotámero menor), 5.18 (s, 1H rotámero mayor; y m, 1H rotámero menor), 5.12 (s, 1H rotámero menor), 4.77 (m, 1H - 63 - rotámero mayor), 4.42 (m, 2H) , 4.34 (m, 1H rotámero mayor), 4.14 (m, 1H rotámero mayor), 4.06 (m, 1H rotámero menor), 3.95 (m, 1H rotámero menor), 2.66 (m, 1 H rotámero menor), 2.50 (m, 1H rotámero mayor), 2.27 (m, 1H rotámero mayor), 2.14 (m, 1H rotámero menor) RMN 13C (100 MHz, CD30D) : (carbonos carbonilo o amidina, rotámeros) d 172.4, 172.3, 172.0, 171.4, 152.3, 152.1.
Preparación del Compuesto H: Ph(3-Cl) (5-OCHF2) (R)CH(OH)C(0) -Aze-Pab(2, 6-diF) (OH) (i) Boc (S) -Aze-NHC¾-Ph(2 , 6-diF, 4-CN) Se disuelve Boc- (S)Aze-OH (1.14 g, 5.6 mmoles) en 45 mi de DMF. Se agregan 4-aminometil-2 , 6-difluorobenzonitrilo (1.00 g, 5.95 moles, véase Ejemplo 1 (xiv) anterior) PyBOP (3.10 g, 5.95 mmoles) y DIPEA (3.95 mi, 22.7 mmoles) y la solución se agita a temperatura ambiente durante 2 h. El solvente se evapora y el residuo - 64 - se divide entre H20 y EtOAc (75 ral de cada uno) . La fase acuosa se extrae con 50 mi de EtOAc dos veces, y la fase orgánica combinada se lava con salmuera y se seca sobre Na2S04. La cromatografía instantánea (Si02, EtOAc/heptano (3/1)) proporciona el Compuesto del subtítulo (1.52 g, 77%) como un aceite el cual cristaliza en el refrigerador. RMN ¾ (400 Hz, CD3OD) : d 7.19 (m, 2H) , 4.65-4.5 (m, 3H) , 3.86 (m, 1H) , 3.73 (m, 1H) , 2.45-2.3 (m, 2H) , 1.39 (S, 9H) (ü) H- (S)Aze-NHCH2-Ph(2,6-diF,4-CN) x HC1 Se disuelve Boc- (S) Aze-NHCH2-Ph (2, 6-diF, 4-CN) (0.707 g, 2.01 mmoles, véase la etapa (i) anterior) en 60 mi de EtOAc saturado con HC1 gaseoso. Después de agitar a temperatura ambiente durante 15 minutos, el solvente se evapora. El residuo se disuelve en CH3CN/H20 (l/l) y se liofiliza para proporcionar el Compuesto del subtítulo (0.567 g, 98%) como un polvo amorfo blancuzco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) : d 7.49 (m, 2H) , 4.99 (m, 1H) , 4.58 (m, 2H) , 4.12 (m, 1H) , 3.94 (m, 1H) , 2.80 (m, 1H) , 2.47 (m, 1H) EM (m/z) 252.0 (M + 1) + . (iii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze- HCH2- Ph(2,6-diF,4-CN) Se disuelve Ph (3-C1 ) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) OH (0.40 g, 1.42 mmoles, véase Ejemplo l(viii) anterior) en - 65 - 10 mi de DMF y se agrega H- (S) Aze-NHCH2-Ph (2 , 6-diF, 4-CN) x HC1 (0.43 g, 1.50 mmoles, véase la etapa (ii) anterior) y PyBOP (0.779 g, 1.50 mmoles), seguido por DIPEA (1.0 mi, 5.7 mmoles). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, se evapora el solvente. El residuo se divide entre 200 mi de H20 y 75 mi de EtOAc . La fase acuosa se extrae con 75 mi de EtOAc dos veces, y la fase orgánica combinada se lava con salmuera y se seca sobre Na2S04. La cromatografía instantánea (Si02, EtOAc/heptano (4/1)) proporciona el Compuesto del subtítulo (0.56 g, 81%) como un aceite. RMN ¾ (400 MHz, CD3OD) rotámeros : d 7.43 (m, 2H) , 7.31 (m, 1H, rotámero mayor), 7.26 (m, 1H, rotámero menor), 7.2-7.1 (m, 2H) , 6.90 (t, 1H, rotámero mayor), 6.86 (t, 1H, rotámero menor), 5.14 (s, 1H, rotámero mayor), 5.11 (m, 1H, rotámero menor), 5.04 (s, 1H, rotámero menor), 4.71 (mr 1H, rotámero mayor), 4.6-4.45 (m, 2H) , 4.30 (m, 1H, rotámero mayor), 4.2-3.9 (m, 1H; y 1H, rotámero menor), 2.62 (m, 1H, rotámero menor) , 2.48 (m, 1H, rotámero mayor), 2.21 (m, 1H, rotámero mayor), 2.09 (m, 1H, rotámero menor). RMN 13C (100 MHz, CD3OD) : (carbonos carbonilo) d 171.9, 171.8 EM (m/z) 484.0, 485.9 (M - 1)"; 486.0 487.9 (M + D+. (iv) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (2 , 6- - 66 - diF) (OH) Se disuelve Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S)Aze-NHCH2-Ph(2,6-diF, 4-CN) (0.555 g, 1.14 mmoles, a partir de la etapa (iii) anterior) en 10 mi de EtOH (95%) . A esta solución se le agrega clorhidrato de hidroxilamina (0.238 g, 3.42 mmoles) y Et3N (0.48 mi, 3.44 mmoles). Después de agitar a temperatura ambiente durante 14 h, el solvente se separa y el residuo se disuelve en EtOAc . La fase orgánica se lava con salmuera y ¾0 y se seca sobre Na2S04. El producto crudo se purifica por cromatografía líquida en fase inversa preparativa con CH3CN: HOAc 0.1M como eluyente, lo que proporciona el Compuesto del título como un polvo amorfo (0.429 g, 72%) después de liofilizar. RMN H (400 MHz, CD3OD) rotámeros : d 7.35-7.1 (m, 5H) , 6.90 (t, 1H, rotámero mayor), 6.85 (t( 1H, rotámero menor), 5.15 (s, 1H, rotámero mayor), 5.12 (m, 1H, rotámero menor), 5.08 (s, 1H, rotámero menor), 4.72 (m, 1H, rotámero mayor), 4.6-4.4 (m, 2H) , 4.30 (m, 1H, rotámero mayor), 4.12 (m, 1H, rotámero mayor), 4.04 (m, 1H, rotámero menor), 3.94 (m,l H, rotámero menor), 2.62 (m, 1H, rotámero menor), 2.48 (m, 1H, rotámero mayor), 2.22 (m, 1H, rotámero mayor), 2.10 (m, 1H, rotámero menor) RMN 13C (100 MHz CD30D) : (carbonos carbonilo o amidina, rotámeros) d 172.4, 171.9, 171.0, 152.3, 151.5 EM (m/z) 517.1, 519.0 (M - 1)", 519.1, 521.0 (M + - 67 - D + .
Preparación del Compuesto J Ph. (3 -Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (Z) Se disuelve Boc-Aze-Pab (Z) (véase solicitud de patente internacional WO 97/02284, 92 mg, 0.197 mmoles) en 10 mi de EtOAc saturado con HCl gaseoso y se permite que reaccione durante 10 min. El solvente se evapora y el residuo se mezcla con Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (O) OH (50 mg, 0.188 mmoles; véase la Preparación C (v) anterior), PyBOP (109 mg, 0.209 mmoles) y finalmente con diisopropiletilamina (96 mg, 0.75 mmoles) en 2 mi de DMF. La mezcla se agita durante 2 h y después se vierte en 50 mi de agua y se extrae tres veces con EtOAc . La fase orgánica combinada se lava con agua, se seca con Na2S04 y se evapora. El producto crudo se somete a cromatografía instantánea sobre gel de sílice con EtOAc:MeOH (9:1). Rendimiento: 100 mg (87%) . R N a? (300 MHz, CD30D, mezcla de rotámeros) d 7.85-7.75 (m, 2H) , 7.45-7.25 (m, 7H) , 7.11 (m, 1H, rotámero mayor), 7.08 (m, 1H, rotámero menor), 7.05-6.9 (m, 2H) , 6.13 (t amplio, 1H) , 5.25-5.05 (m, 3H) , 4.77 (m, 1H, parcialmente oculto por la señal CD3OH) , 4.5-3.9 (m, 7H) , 2.64 (m, 1H, rotámero menor), 2.47 (m, 1H, rotámero mayor), 2.25 (m, 1H, rotámero mayor), 2.13 (m, 1H, rotámero menor). - 68 - (ii) Ph(3-Cl) (5-OCH2CHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab(OH) Se mezclan clorhidrato de hidroxilamina (65 mg, 0.94 mmoles) y trietilamina (0.319 g, 3.16 mmoles) en 8 mi de THF y se somete a sonicado durante 1 h a 40°C. Se agrega Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab(Z) (96 mg, 0.156 mmoles; véase la etapa (i) anterior) con 8 mi adicionales de THF. La mezcla se agita a 40°C durante 4.5 días. El solvente se evapora y el producto crudo se purifica por cromatografía líquida en fase inversa preparativa con CH3CN:NH4OAc 0.1M (40:60) . Rendimiento: 30 mg (38%) . Pureza: 99%. R N 1H (300 Hz, CD30D, mezcla de rotámeros) d 7.6-7.55 (m, 2H) , 7.35-7.3 (m, 2H) , 7.12 (m, 1H, rotámero mayor) , 7.09 (m, 1H, rotámero menor) , 7.05-6.9 (m, 2H) , 6.15 (triplete de multipletes, 1H) , 5.15 (m, 1H, rotámero menor), 5.13 (s, 1H, rotámero mayor), 5.08 (s, 1H, rotámero menor), 4.77 (m, 1H, rotámero mayor), 4.5-4.2 (m, 5H) , 4.08 (m, 1H, rotámero mayor), 3.97 (m, 1H, rotámero menor), 2.66 (m, 1H, rotámero menor), 2.50 (m, 1H rotámero mayor), 2.27 (m, 1H, rotámero mayor), 2.14 (m, 1H, rotámero menor) . RMN 13C (100 MHz, CD3OD) : (carbonos carbonilo o amidina, mezcla de rotámeros) d 172.8, 172.2, 171.4, 159.1, 158.9, 154.2. APCI-EM (M + 1) = 497/499 m/z - 69 - Método 1 y 2 : Preparaciones de sales del Compuesto A Método 1 : Método general para preparación de sal Se utiliza el siguiente método genérico para preparar sales del Compuesto A: se disuelven 200 mg del Compuesto A (véase la preparación A anterior) en 5 mi de MeOH. A esta solución se le agrega una solución del ácido pertinente (1.0 equivalente molar) disuelto en 5 mi de MeOH. Después de agitar durante 10 minutos a temperatura ambiente, el solvente se separa por medio de un evaporador giratorio. El material sólido restante se vuelve a disolver en 8 mi de acetonitrilo:H20 (1:1). En cada caso la liofilización proporciona material amorfo incoloro. Ácidos utilizados (1S) - (+) -10-camforsulfónico málico ciclohexilsulfámico fosfórico dimetilfosfórico p-toluensulfónico L-lisina clorhidrato de L-lisina sacarínico metansulfónico clorhídrico .
- - En la Tabla 1 se muestran los datos caracterizantes apropiados. Tabla 1 Sal Peso Peso Espectro d ppm (MeOH) molecular molecular de masas H18, H19, H24 del ácido de la sal de ba a (véase resolución estructura al final del método 9 en lo siguiente (1S) - (+) -10-camfor- 232.20 729.20 230.9 7.57, 7.68, 3.97 sulfonato 495.1 497.0 727.3 maleato 116.07 612.97 114.8 7.45, 7.64 3.89 495.1 497.0 ciclohexilsulfamato 179.24 676.14 177.9 7.44, 7.64, 3.89 495.1 496.9 674.3 676.1 fosfato 97.99 594.89 495.1 7.37, 7.61, 3.84 - - 497.0 593.1 dimetilfosfato 126 05 622 95 124.9 7 50, 7 66, 3 92 495.1 497.0 - 621.2 623.0 -toluensulfonato 172 20 669 10 170.9 7 54, 7 71, 3 95 495.1 497.0 L-lisina 146 19 643 09 145.0 7 36, 7 60, 3 83 495.1 497.0 Clorhidrato de L- 182 65 679 55 495.1 7 36, 7 60, 3 83 lisina 497.0 531.1 (HC1) sacarinato 183 19 680 09 181.9 7 44, 7 64, 3 89 495.1 497.0 - - metansulfonato 96 11 593 01 495 .1 7.57, 7.68, 3.97 497 0 591 2 593 1 clorhidrato 36 6 533 36 95 1 7.55, 7.67, 3.95 496 9 531 1 532 5 535 2 Todas las sales que se forman en este método son amorfas.
Método 2 Se elaboran sales amorfas adicionales del Compuesto A utilizando técnicas análogas a las descritas en el Método 1 anterior, a partir de los siguientes ácidos: ácidro bromhídrico (sal 1:1) ácido clorhídrico (sal 1:1) ácido sulfúrico (sal 1:0.5) ácido 1, 2 -etandisulfónico (sal 1:0.5) ácido lS-camrforsulfónico (sal 1:1) - - ácido (+/- ) -camforsulfónico (sal 1:1) ácido etansulfónico (sal 1:1) ácido nítrico (sal 1:1) ácido toluensulfónico (sal 1:1) ácido metansulfónico (sal 1:1) ácido p-xilensulfónico (sal 1:1) ácido 2 -mesitilensulfónico (sal 1:1) ácido 1 , 5-naftalensulfonico (sal 1:05) ácido naf alensulfonico (sal 1:1) ácido bencensulfónico (sal 1:1) ácido sacarínico (sal 1:1) ácido maleico (sal 1:1) ácido fosfórico (sal 1:1) ácido D-glutámico (sal 1:1) ácido L-glutámico (sal 1:1) ácido D, L-glutámico (sal 1:1) L-arginina (sal 1:1) L-lisina (sal 1:1) clorhidrato L-lisina (sal 1:1) glicina (sal 1:1) ácido salicílico (sal 1:1) ácido tartárico (sal 1:1) ácido fumárico (sal 1:1) ácido cítrico (sal 1:1) ácido L-(-)-málico (sal 1:1) - - ácido D,L-málico (sal 1:1) ácido D-glucónico (sal 1:1) Método 3: Preparación de Compuesto A amorfo, sal de ácido etansulfónico Se disuelve el Compuesto A (203 mg, véase preparación A anterior) en 3 mi de etanol y se agrega a la solución ácido etansulfónico (1 equivalente, 95%, 35 µ?) . La mezcla se agita durante unos minutos y después se evapora el solvente. El aceite resultante se suspende en isooctano y se evapora a sequedad hasta que se obtiene un material sólido. Finalmente, la sustancia se vuelve a disolver en isooctano y el solvente se evapora nuevamente, lo que resulta en un sólido amorfo seco blanco. La sustancia se seca al vacío, a 40°C durante la noche.
Métodos 4 a 9: Preparación de Compuesto A cristalino, sal de ácido etansulfónico Método 4: Cristalización de material amorfo Se suspende el Compuesto A amorfo, la sal del ácido etansulfónico (17.8 mg; véase el Método 3 anterior) en 600 µ? de metilisobutilcetona . Después de 1 semana se observan agujas cristalinas las cuales se separan por filtración y se secan al aire. - 75 - Métodos 5 a 7: Reacciones de cristalización (sin antisolvente) Método 5 Se disuelve el Compuesto A (277 mg; véase la preparación A anterior) en 3.1 mi de metilisobutilcetona. Se agrega ácido etansulfónico (1 equivalente, 95%, 48 µ?) . La precipitación de la sal de etansulfonato amorfo se produce inmediatamente . Se agregan 6 mi adicionales de metilisobutilcetona y la suspensión se trata con ultrasonido. Finalmente se agregan 3.6 mi en una tercera porción de metilisobutilcetona y después la suspensión se deja durante la noche con agitación (agitador magnético) . El siguiente día, la sustancia se ha transformado en agujas cristalinas. La suspensión se separa por filtración, se lava con 0.5 mi de metilisobutilcetona y se seca al aire.
Método 6 Se disuelve el Compuesto A (236 mg; véase preparación A anterior) a temperatura ambiente en 7 mi de metilisobutilcetona. Se mezcla ácido etansulfónico (1 equivalente, 41 µ?) con 2 mi de metilisobutilcetona en un frasco. La solución del Compuesto A se siembra con Compuesto A cristalino, sal de ácido etansulfónico (véanse Métodos 4 y 5 anteriores) . Después se agrega en porciones durante 45 minutos 250 µ? de solución de - - metilisobutilcetona de ácido etansulfónico . La solución se siembra nuevamente y se incrementa la temperatura a 30°C. Después se agregan 500 µ? de solución de metilisobutilcetona durante aproximadamente 1 hora. La suspensión resultante se deja durante la noche antes de que se agregue durante 20 minutos una cantidad final de metilisobutilcetona/solución de ácido. El frasco se enjuaga con 1.5 mi de metilisobutilcetona, lo cual se agrega a la suspensión. Después de 6 horas adicionales, los cristales se separan por filtración, se lavan con 2 mi de metilisobutilcetona y se secan bajo presión reducida a 40 °C. Se obtiene un total de 258 mg de sal" cristalina que corresponde a un rendimiento de aproximadamente 87%.
Método 7 Se disuelve el Compuesto A (2.36 g; véase la Preparación A anterior) en 90 mi de metilisobutilcetona. Se agregan a la solución 10 mg de cristales de siembra del Compuesto A, sal de ácido etansulfónico (véanse métodos 4 a 6 anteriores) y después se agregan en dos porciones 40 µ? de ácido etansulfónico . Posteriormente se agregan 12 mg adicionales de cristales de siembra y dos porciones de ácido etansulfónico (2 x 6 µ?) . La suspensión se diluye con 15 mi de metilisobutilcetona antes de que continúe la adición de ácido etansulfónico. Se agrega una cantidad - - total de 330 µ? de ácido etansulfónico en porciones, durante 1 hora. Se agrega una cantidad pequeña de cristales de siembra y finalmente la suspensión se deja durante la noche con agitación. El siguiente día los cristales se separan por filtración, se lavan con metilisobutilcetona (2 x 6 mi) y se secan bajo presión reducida a 40°C. Después del secado se obtiene un total de 2.57 g de producto cristalino blanco que corresponde a un rendimiento de 89%.
Métodos 8 y 9; Reacciones de cristalización (con antisolvente) Método 8 Se disuelve el Compuesto A (1S3 mg; véase la preparación A anterior) en 1.2 mi de isopropanol. La solución se calienta a 35°C. Se agregan 28 µ? de ácido etansulfónico . Después se agregan 4.8 mi de acetato de etilo y la solución se siembra con Compuesto A cristalino, sal de ácido etansulf nico (véanse los métodos 4 a 7 anteriores) . La cristalización se inicia casi de inmediato. La suspensión se deja reposar durante aproximadamente 80 minutos a 35 °C antes de que se permita que se enfríe a temperatura ambiente (21 °C) . Dos horas después los cristales se separan por filtración, se lavan tres veces con acetato de etilo (3 x 0.4 mi) y se secan bajo presión reducida a 40 °C. Se obtiene un total de 170 mg de producto - - del título cristalino el cual corresponde a un rendimiento de aproximadamente 82%.
Método 9 Se disuelve el Compuesto A (20.0 g; véase preparación A anterior) y se agregan a la solución 146.6 mi de isopropanol a 40°C y ácido etansulfónico (3.46 mi, 95%, 1 equivalente) . A la solución transparente resultante, se agregan cristales de siembra de Compuesto A, sal de ácido etansulfónico (50 mg; véanse Métodos 4 a 8 anteriores) . Después se agregan durante 10 minutos 234 mi de acetato de etilo. La solución ligeramente opaca resultante se siembra una vez más (70 mg) y se deja reposar durante 1 hora a 40°C con agitación para permitir que se inicie la cristalización. Después de esto, se agrega un total de 352 mi de acetato de etilo a una velocidad constante durante 1 hora. Cuando se ha agregado la totalidad del acetato de etilo, la suspensión se deja durante 1 hora, antes de que se enfríe a 21°C durante 2 horas. Se permite que la cristalización continúe durante 1 hora a 21 °C antes de que los cristales se separen por filtración, se lavan una vez con acetato de etilo (50 mi + 60 mi) y finalmente se secan bajo presión reducida a 40 °C durante la noche. Se obtiene un total de 21.6 g de sal cristalina blanca, que corresponde a un rendimiento de aproximadamente 90%.
- - El Compuesto A, sal de ácido etansulfónico se caracteriza por RMN como sigue: se disuelven 23 mg de la sal en 0.7 mi de metanol deuterado troscopía. Se utiliza en los experimentos de RMN una combinación de ID (1H, 13C y NOE selectivo) y 2D (gCOSY, gHSQC y gHMBC) . Todos los datos concuerdan con la estructura teórica de la sal , que se muestra a continuación. La molécula existe en dos conformaciones en metanol . En base en la integral del pico asignado a H5 (confórmero dominante) , y el pico asignado a H51 (otro confórmero), se encontró que la proporción entre los dos confórmeros es de 70:30. No se puede observar H22 dado que estos protones están en intercalo rápido con el solvente CD30D.
Las resonancias tanto del protón como del carbono corresponden a la posición 1 y están divididas debido al - - acoplamiento de spin con los dos núcleos de flúor en dicha posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF=73 HZ y ^JCF=263 Hz . En la Tabla 2 se muestran la asignación de desplazamiento químico de RMN ¾ y 13C así como las correlaciones de protón-protón.
Tabla 2 - - C 144.5 ' 145.3 CH 117.3 7.20 (s) ' 117.2 7.15 (S) CH 72.0 5.20 (s) ' 74.0 5.12 (s) CO 173.1 ' 173.8 CH2 51.6 a:4.38 (m) b:4.21 (m) 1 49.0 a:4.06 (m) b:3.99 (m) CH2 21.7 a:2.55 (m) b:2.29 (m) 23.2 a:2.70 (m) b:2.15 (m) CH 63.1 4.80 (m) ' 66.2 5.22 (m) CO 172.9 ' 173.6 - - NH 8.76 (t, amplio) 5.2 ¦ 8.79 (t, amplio) 5.2 CH2 43.5 4.59 (patrón AB) 15.9 4.46 (patrón AB) 15.9 1 43.6 4.53 (patrón AB) 15.9 4.49 (patrón AB) 15.9 C 146.9 1 147.0 CH 129.1 7.56 (d) 7.8 ' 129.1 7.57 (d) 7.8 CH 129.2 7.67 (d) 7.8 ' 129.4 7.70 (d) 7.8 C 124.9 ' 124.9 C 162.4 1 162.3 NH2 No observado CH3 64.8 3.96 (s) CH3 1.28 (t) 7.4 CH2 2.77 (m) 7.4 - - aEn relación a la resonancia del solvente a 49.0 ppm. bEn relación a la resonancia del solvente a 3.30 ppm. s = singulete, t = triplete, m = multiplete, br = amplio, d = doblete d Obtenida en el experimento gCOSY. *La resonancia es un triplete debido al acoplamiento con los dos núcleos de flúor. 1JCF=263 Hz . El espectro de masas de alta resolución calculado para C24H29CI F2N4O8S (M-H) " 605.1284, encontrado 605.1296. Los cristales del Compuesto A, sal de ácido etansul fónico (obtenido por medio de uno o más de los Ejemplos 4 a 9 anteriores) se analizan por XRPD y los resultados se presentan a continuación (Tabla 3) y se muestran en la figura 1.
Tabla 3 valor d (Á) Intensidad (%) Intensidad 16.5 10 m 12.2 74 VS 11.0 4 W 9.0 33 S - 84 - - 85 - 15 25 - - DSC muestra endotermia con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 131°C. TGA muestra una disminución en la masa de aproximadamente 0.2% (p/p) aproximadamente en el punto de fusión. El análisis de DSC se repite con una muestra de un contenido de solvente inferior que muestra una temperatura de inicio de fusión de aproximadamente 144 °C.
Método 10; Preparación del Compuesto A amorfo, sal de ácido bencensulfónico Se disuelve el Compuesto A (199 mg; véase Preparación A anterior) en 2 mi de etanol . Se disuelve ácido bencensulfónico (1 equivalente, 90%, 70 mg) en 1 mi de etanol, en un frasco. La solución etanólica del ácido se agrega a la solución del Compuesto A y el frasco se enjuaga con 1 mi de etanol, el cual se después se agrega a la - - mezcla. La mezcla se agita durante algunos minutos y después el etanol se evapora hasta que se forma un aceite. Se agregan 3 mi de acetato de etilo y el solvente se evapora nuevamente a sequedad. Se forma un sólido amorfo.
Métodos 11 a 13: Preparación de un Compuesto ? cristalino, sal de ácido bencensulfónico Método 11: Cristalización del material amorfo La sal del ácido bencensulfónico del Compuesto A amorfo (20.7 mg; véase Método 10 anterior) se suspende en 600 TL de acetato de etilo. Después de 5 días, se observan agujas cristalinas en la suspensión.
Métodos 12 y 13: Reacciones de cristalización Método 12 Se disuelve el Compuesto A (128 mg; véase la preparación A anterior) en 3 mi de acetato de etilo. La solución se siembra con la suspensión del Método 11 anterior. Después se agrega ácido bencensulfónico (1 equivalente, 90%, 45 mg) . La precipitación de la sal de ácido bencensulfónico se produce de inmediato. Se agrega isopropanol a la suspensión (0.8 mi) y la mezcla se siembra nuevamente. Dos días después, la sustancia se ha transformado en agujas cristalinas. La suspensión se separa por filtración, se lava con acetato de etilo (3 x 0.2 mi) y - 88 - se seca durante un período breve bajo vacío a 40°C. Se obtiene un total de aproximadamente 140 mg de un sólido blanco.
Método 13 Se disuelve el Compuesto A (246 mg; véase la preparación A anterior) en 1.52 mi de isopropanol. Se agrega ácido bencensulfónico (88 mg, 90%) . A la solución transparente se le agregan 3 mi de acetato de etilo y después la mezcla se siembra para iniciar la cristalización. Después de 1 hora, se agregan 2.77 mi adicionales de acetato de etilo. Finalmente, se permite que la suspensión cristalice durante la noche antes de que los cristales se separen por filtración, se lavan con acetato de etilo (3 x 0.3 mi) y se secan a 40°C bajo vacío. Se obtiene un total de 279 mg de sal, lo que corresponde a un rendimiento de aproximadamente 86%. El Compuesto A, sal de ácido bencensulfónico se caracteriza por RM , como sigue: se disuelven 20 mg de la sal en 0.7 mi de metanol deuterado. Se utiliza una combinación de experimentos de RMN ID (¾, 13C y NOE selectivo) y 2D (gCOSY, gHSQC y gHMBC) . Todos los datos concuerdan con la estructura teórica de la sal, que se muestra a continuación. La molécula existe en dos conformaciones en metanol. En base en la integral de pico - - asignado a H12 (confórmero dominante) y el pico asignado a H12 ' (otro confórmero), se encuentra que la proporción entre los dos confórméros es de 70:30. No se pudo observar H22 dado que estos protones están en intercambio rápido con el so Las resonancias tanto del protón como del carbono corresponden a la posición 1 y están divididas debido al acoplamiento de spin con los dos núcleos de flúor en dicha posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF=74 HZ y 1JCF=260 Hz. En la Tabla 4 se muestran las correlaciones de asignación de desplazamiento químico de RMN XH y 13C así como de protón-protón.
- - Tabla 4 No . de Tipo desplazamiento desplazamiento JHH/HZ tomo 13C/ppma ppm* y multiplicidad17 1 CH 117.5e 6.89 (t) 74 (2JHF) 1' 117.5e 6.87 (t) 2 C 153.5 2 ' 153.5 3 CH 120.1 7.15 (s) 3 ' 119.7 7.12 (s) 4 C 136.2 4 ' 135.9 5 CH 125.1 7.35 (s) 5 ' 124.9 7.31 (s) 6 C 144.5 6' 145.3 7 CH 117.3 7.20 (s) 7 ' 117.2 7.14 (s) 8 CH 72.8 5.20 (s) 8 ' 74.0 5.12 (s) - - CO 173.1 ' 173.8 CO 51.6 a 4.37 (m) b 4.20 (m) · 49.0 a 4.05 (m) b 3.98 (m) CH2 21.7 a 2.53 (m) b 2.28 (m) ¦ 23.2 a 2.69 (m) b 2.14 (m) CH 63.1 4 79 (m) ' 66.2 5 22 (m) CO 172.9 ' 173.6 NH 8 75 (t, amplio) 5.2 ' 8 78 (t, amplio) 5.3 CH2 43.5 4 59 (patrón AB) 16.0 y 5.2 4 44 (patrón AB) 16.0 y 4.8 ' 43.6 4 51 (patrón AB) 16.0 4 46 (patrón AB) 16.0 - - aEn relación a la resonancia del solvente a 49.0 ppm. bEn relación a la resonancia del solvente a 3.30 ppm. cs = singulete, t = triplete, m = multiplete, br = amplio, - 93 - d = doblete d Obtenida en el experimento gCOSY. eLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento con los dos núcleos de flúor. 1JCF=260 Hz . fconectividad difícil de determinar debido a las superposiciones de la resonancia 102 y 103. El espectro de masas de alta resolución calculado para C24H29C1F2N408S (M-H) " 653.1284, encontrado 653.1312. Los cristales del Compuesto A, sal de ácido bencensul fónico (obtenido por medio de uno o más de los Ejemplos 11 a 13 anteriores) se analizan por XRPD y los resultados se presentan a continuación (Tabla 5) y se muestran en la figura 2.
Tabla 5 valor d (Á) Intensidad (%) Intensidad 14.2 12 m 12.6 55 s 10.2 49 s 7.5 8 m 6.4 5 w - 94 - 15 25 - - 15 25 - 96 - DSC muestra una endotertnia con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 152 °C. TGA muestra una disminución en la masa de aproximadamente 0.1% (p/p) aproximadamente en el punto de fusión.
Método 14 : Preparación de la sal de ácido n-propansulfónico del Compuesto A Se disuelve el Compuesto A (186 mg; véase la preparación A anterior) en 1.39 mi de isopropanol y se agrega ácido n-propansulfónico (1 equivalente, 95%, 39 TL) .
Se agregan 5.6 1 de acetato de etilo y el solvente se evapora hasta que se forma un sólido amorfo seco.
Métodos 15 y 16: Preparación del Compuesto A cristalino, - - sal de ácido n-propansulfónico Método 15: Cristalización de material amorfo El Compuesto A amorfo, sal de ácido n-propansulfónico (20 mg; véase Método 14 anterior) se disuelve en 60 TL de isopropanol y se agregan 180 TL de acetato de isopropilo. Después de tres días se observan agujas cristalinas.
Método 16: Cristalización de reacción Se disuelve el Compuesto A (229 mg; véase la preparación A anterior) en 1.43 mi de isopropanol, se agrega ácido n-propansulfónico (1 equivalente, 95%, 48 TL) . Se agregan 2 mi de acetato de etilo y después la solución se siembra con sal cristalina del método 15 anterior. Se agregan 5 mi adicionales de acetato de etilo y la suspensión se deja durante la noche para que cristalice. Los cristales se separan por filtración, se lavan con acetato de etilo (3 x 0.3 mi) y se secan bajo vacío a 40 °C. El Compuesto A, sal del ácido n-propansulfónico se caracteriza por RMN como sigue: se disuelven 13 mg de la sal en 0.7 mi de metanol deuterado troscopía. Se utiliza una combinación de experimentos de RMN ID (¾, 13C) y 2D (gCOSY) . Todos los datos concuerdan con la estructura teórica de la sal, que se muestra adelante. La molécula existe en dos conformaciones en metanol. En base en la - 98 - integral del pico asignado a H12 (confórmero dominante) y el pico asignado a H121 (el otro confórmero) , se encuentra que la relación entre los dos confórmeros es de 65:35. No se puede observar H22 dado que estos protones están en intercambio rápido con el solvente CD3OD.
Las resonancias tanto del protón como del carbono corresponden a la posición 1 están divididas debido al acoplamiento de spin con los dos núcleos de flúor en dicha posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF=74 HZ y 1JCF=260' Hz . En la Tabla 6 se muestran las correlaciones de asignación de desplazamiento químico de RMN XH y 13C así como de protón-protón.
- - Tabla 6 No . de Tipo desplazamiento desplazamiento JHH/HZ átomo 13C/ppma ^ ppm13 y multiplicidadc 1 CH 117.5e 6.89 (t) 74 (2JHF) 1' 117.5e 6.88 (t) 2 C 153.5 2 ' 153.5 3 CH 120.0 7.16 (s) 3 ' 119.7 7.13 (s) 4 C 136.2 4 ' 135.9 5 CH 125.1 7.36 (s) 51 124.9 7.31 (s) 6 C 144.5 6 ' 145.3 7 CH 117.3 7.20 (s) 7 ' 117.2 7.16 (s) 8 CH 72.9 5.20 (s) 81 74.1 5.12 (s) - 100 9 CO 173.1 9' 173.8 11 CH2 51.6 a :4.37 (m) b :4.20 (m) 11 ' 49.0 a 4.06 (m) b 3.98 (m) 12 CH2 21.7 a 2.53 (m) b 2.28 (m) 12 ' 23.2 a 2.69 (m) b 2.15 (m) 13 CH 63.1 4 80 (m) 13 ' 66.2 5 22 (m) 14 CO 172.9 14 ' 173.8 15 H 8 75 (t, amplio) 5.5 15' 8 79 (t, amplio) 5.5 16 CH2 43.5 4 59 (patrón AB) 16.0 y 6 6 4 45 (patrón AB) 16.0 y 5 3 16' 43.6 4 51 4 46 - - aEn relación a la resonancia del solvente a 49.0 ppm. bEn relación a la resonancia del solvente a 3.30 ppm. °s = singulete, t = triplete, m = multiplete, br = amplio, - - d = doblete d Obtenida en el experimento gCOSY. eLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento con los dos núcleos de flúor. 1JCF=260 HZ. El espectro de masas de alta resolución calculado para (M-H) " 619.1441, encontrado 619.1436. Los cristales del Compuesto A, sal de ácido n-propansulfónico (obtenido por medio de uno o más de los Ejemplos 15 y 16 anteriores) se analizan por X PD y los resultados se presentan a continuación (Tabla 7) y se muestran en la figura 3.
Tabla 7 valor d (Á) Intensidad (%) Intensidad 14.0 4 w 12.4 87 s 10.0 30 s 8.0 3 vw 7.5 7 m 7.0 0.6 w 6.7 1 vw - - - - 10 25 - - DSC muestra una endotermia con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 135°C. TGA no muestra una disminución en la masa alrededor del punto de fusión.
- - Método 17 Método 17-A: Preparación del Compuesto A amorfo, sal de ácido n-butansulfónico Se disuelven 277 mg del Compuesto A amorfo en 1.77 mi de IPA y se agrega ácido butansulfónico (aproximadamente 1 equivalente, 70 µ?) . Se agregan 6 mi de acetato de etilo y el solvente se evapora hasta que se forma un sólido amorfo seco.
Métodos 17-B: Preparación del Compuesto A cristalino, sal de ácido butansulfónico El Compuesto A amorfo, sal de ácido butansulfónico (71.5 mg; véase la preparación anterior) se suspende en 500 µ? de acetato de etilo durante la noche. Los cristales se separan por filtración y se secan al aire. El Compuesto A, sal del ácido butansulfónico se caracteriza por RMN como sigue: se disuelven 21.6 mg de la sal en 0.7 mi de sulfóxido de dimetilo deuterado y se investiga con espectroscopia de RMN ¾ y 13C. Los espectros son muy similares a los de otras sales del mismo Compuesto y concuerdan con la estructura que se muestra en lo siguiente. La mayor parte de las resonancias en los espectros están presentes como grupos de dos picos debido a la poca rotación alrededor del enlace C9-N10, lo que resulta en dos atropisómeros que existen en - 1 - solución simultáneamente. Esto se muestra para otras sales del mismo Compuesto.
Los dos núcleos de flúor en la posición 1 da lugar a resonancias divididas para el protón y el carbono en dicha posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF=73 Hz y ^^=258 Hz . En la Tabla 1 se presentan los desplazamientos químicos de protones y carbonos . Los protones en las posiciones 22 y 24 no se detectan debido al intercambio químico. Existe una cresta muy amplia entre 8 y 9 ppm en el espectro de protón que corresponde a estos protones .
Tabla 8 Asignación de desplazamiento químico de RMN """H y 13C del Compuesto A, sal de n-butansulfonato en sulfóxido de - - dimetilo deuterado, a 25°C.
No . de Tipo desplazamiento desplazamiento JHH/HZ átomo C/ppma Vppm15 y multiplicidad0 1 CH 116.3 7.29 (t) 73 (2JHF) 1' 2 116.3E 7.28 (t) 73 (2JHF) 2 C 151.5 na na 2 ' 151.3 na na 3 CH 118.0 7.25 (t)e nd 3 ' 117.6 7.21 (t)e nd 4 C 133.8 na na 4 ' 133.4 na na 5 CH 123.8 7.34 (t)e nd 5 ' 123.6 7.25 (t)e nd 6 C 144.5 na na 6' 145.2 na na 7 CH 116.3 7.19 (t)e nd 7 ' 116.1 7.12 (t)e nd 8 CH 70.9 5.13 (s) na 8 ¦ 71.2 4.99 (s) na - 109 - 9 co 170.6 na na 91 171.1 na na 11 CH2 50.0 a:4.24 (m)b 4 12 (m) nd 11' 46.9 3.85 (m) nd 12 CH2 20.5 a:2.41 (m)b 2 10 (m) nd 12 ' 21.7 a:2.60 (m)b 2 02 (m) nd 13 CH 61.2 4.65 (dd) 5.6 y 8.9 13 ' 63.9 5.12 (m) nd 14 CO 170.2 na na 14 ¦ 171.0 na na 16 CH2 41.8 4.38 (m) nd 16' 42.0 4.38 (m) nd 17 C 144.7 na na 18 CH 127.5 7.44 (d) 8.2 127.6 7.44 nd 19 CH 127.8 7.66 (d) 8.2 20 C 125.1 na na 21 C 157.9 na na - - aEn relación a la resonancia del solvente a 49.0 ppm. bEn relación a la resonancia del solvente a 3.30 ppm. cs = singulete, d = doblete, dd = doblete de doblete, t = triplete, m = multiplete. dLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento con los dos núcleos de flúor Fl . 1JCF=258 Hz . eEl acoplamiento JHH con los protones meta no se separan completamente, na = no aplicable, nd = no determinado. El espectro de masas de alta resolución calculado para C26H32C1F2 403S (M-H) " 633.1597, encontrado 633.1600. Los cristales del Compuesto A, sal de ácido n-butansulfónico (obtenido como se describe en lo anterior en el Método 17-B) se analizan por XRPD y los resultados se presentan a continuación (Tabla 9) y se muestran en la figura 4.
- - Tabla 9 - 112 - 10 15 20 25 - - DSC muestra una endotermia con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 118 °C y TGA muestra una disminución en la masa de 0.04%.
- - Método 18: Preparación de sales del Compuesto B Método 18-A: Método general para preparación de sal Se utiliza el siguiente método genérico para preparar sales del Compuesto B: se disuelven 200 mg del Compuesto B (véase preparación B anterior) en 5 mi de MIBK (metilisobutilcetona) . A esta solución se le agrega una solución del ácido pertinente (1.0 o 0.5 equivalentes molares, como se indica en la Tabla 10) disuelto en 1.0 mi de MIBK. Después de agitar durante 10 minutos a temperatura ambiente, el solvente se separa por medio de un evaporador giratorio. El material sólido remanente se vuelve a disolver en aproximadamente 8 mi de acetonitrilo : H20 (1:1). El liofilizado proporciona material amorfo incoloro en cada caso. Ácido utilizado: Esilato (ácido etansulfónico) Besilato (ácido bencensulfónico) Ciclohexilsulfamato Sulfato Bromuro p-toluensulfonato 2-naftalensulfonato Hemisulfato Metansulfonato - - Nitrato Clorhidrato Los datos caracterizantes apropiados se muestran en la Tabla 10.
Tabla 10 Sal Peso molecular Peso molecular Espectro de del ácido de la sal masas ES Esilato 110.13 643.01 108.8 531.1 641.0 Besilato 158.18 691.06 156.8 531.1 689.2 Ciclohexilsulfamato 179.24 712.12 177.9 531.2 710.4 Sulfato 98.08 630.96 531.1 Bromuro 80.91 613.79 531.2 613.1 - 116 - Todas las sales formadas en este Ejemplo son amorfas .
- - Método 18-B Se elaboran sales amorfas adicionales del Compuesto B utilizando técnicas análogas a las descritas en el Método 18-A anterior para los siguientes ácidos: 1 , 2 -etandisulfónico (sal 0.5) lS-camforsulfónico (+/-) -camforsulfónico p-xilensulfónico 2 -mesitilensulfónico Sacarina Maleico Fosfórico D-glutámico L-arginina L-lisina L-lisina *HC1 Método 18-C: Preparación del Compuesto amorfo B, sal del ácido hemi-1 , 5-na talendisulfónico Se disuelven 110.9 mg del Compuesto amorfo B en 2.5 mi de 2 -propanol y se agregan 0.5 equivalentes del ácido 1 , 5-naftalendisulfónico tetrahidratado (disuelto en 1 mi de 2-propanol) . La muestra se agita durante la noche. Únicamente se observan al microscopio partículas pequeñas (amorfas) o gotitas de aceite. La muestra se evapora a sequedad.
- - Método 18-D: Preparación del Compuesto cristalino B, sal del ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico El experimento de cristalización se lleva a cabo a temperatura ambiente . Se disuelven 0.4 g del Compuesto amorfo B en 1.5 mi de etanol y se agregan 0.5 equivalentes de ácido 1 , 5-naftalendisulfónico tetrahidratado (1.35 g, 10% en etanol) . Después se agregan 0.7 mi de heptano hasta que la solución se vuelve ligeramente opalescente. Después de aproximadamente 15 minutos la solución se vuelve turbia. Después de aproximadamente 30 minutos se obtiene una suspensión delgada y se agregan 1.3 mi adicionales de heptano. La suspensión después se deja en reposo durante la noche para maduración. Para diluir la suspensión espesa, se agrega una mezcla de etanol y heptano (1.5 mi y 1.0 mi, respectivamente) . Después de aproximadamente 1 hora, la suspensión se filtra y los cristales se lavan con una mezcla de etanol y heptano (1.5:1) y finalmente con heptano puro. Los cristales se secan a temperatura ambiente durante 1 dia. Los cristales secos se pesan, 0.395 g. Método 18-E: Preparación del Compuesto cristalino B, sal del ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico Se disuelven 1.009 g del Compuesto amorfo B en 20 mi de 2-propanol + 20 mi de acetato de etilo. Se agregan gota a gota 351.7 mg de ácido 1 , 5-naftalendisulfónico tetrahidratado, disuelto en 20 mi de 2 -propanol. La - 1 - precipitación se produce en aproximadamente 5 minutos. La suspensión se agita durante la noche y después se filtra.
Método 18-F: Preparación del Compuesto cristalino B, sal del ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico Se disuelven 430.7 mg de la sal del ácido 1,5-naftalendisulfónico en 30 mi de 1 -propanol. La solución se calienta a ebullición con el fin de disolver la sustancia.
La solución se deja durante la noche a temperatura ambiente para cristalización y después los cristales se separan por filtración. Método 18-G: Preparación del Compuesto cristalino B, sal de ácido hemi-1 , 5-naftalendisulfónico Las aguas madres del Método 18-F se evaporan y se disuelven 61.2 mg del sólido en reposo, en 6 mi de acetonitrilo/l-propanol, proporción 2:1. La solución se deja en reposo durante la noche a temperatura ambiente para cristalizar y después los cristales se separan por filtración. Método 18-H: Preparación del Compuesto cristalino B, sal del ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico La muestra del Método 18-C se disuelve en aproximadamente 2 mi de metanol . Se agregan aproximadamente 3 mi de etanol como antisolvente a temperatura ambiente y se agregan cristales de siembra. No se produce cristalización, de manera que los solventes se evaporan - - (aproximadamente a la mitad de la cantidad) y se agregan una porción nueva de etanol (aproximadamente 2 mi) y cristales de siembra. Las partículas cristalinas se forman cuando se agitan a temperatura ambiente durante la noche. Método 18-1: Preparación del Compuesto cristalino B, sal del ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico Se disuelven 104.1 mg del Compuesto amorfo B en 2 -propanol y se agrega 1 equivalente de ácido 1,5-naftalendisulfónico tetrahidratado disuelto en 2 -propanol. En total, la cantidad de 2-propanol es de aproximadamente 2.5 mi. La solución se agita a 44°C durante aproximadamente 80 minutos y se forma un precipitado. Las partículas son cristalinas de acuerdo con microscopía de luz polarizada. La muestra se filtra. Método 18 -J: Preparación del Compuesto cristalino B, sal del ácido hemi-1 , 5-naftalendisulfónico Se disuelven 56.4 mg del Compuesto B, sal del ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico en 1.5 mi de metanol . Se agregan 3 mi de metiletilcetona . Se agregan cristales de siembra a la solución y se inicia la cristalización. Los cristales se separan por filtración, se lavan con metiletilcetona y se secan al aire. Método 18-K; Preparación del Compuesto cristalino B, sal del ácido hemi-1, 5-naf alendisulfónico Se disuelven 161.0 mg del Compuesto amorfo B en - 121 - 3.5 mi de 1-butanol y la solución se calienta a 40 °C. En otro vaso de precipitados, se disuelven 57.4 mg del ácido naftalendisulfónico tetrahidratado en 3 mi de 1-butanol. Se agregan a la solución del Compuesto B un par de gotas de la solución ácida. Se agregan los cristales de siembra a la solución y después de 2 horas de reposo de la solución ácida se agrega lentamente a 40 °C. Después la temperatura se disminuye lentamente hasta la temperatura ambiente y el experimento se de a bajo agitación durante la noche. La suspensión se filtra, se lava con 1-butanol y se seca bajo vacío a 44 "C durante 2 horas. El rendimiento es de 83%. Caracterización Los cristales del Compuesto B, sal del ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico obtenido por medio del Método 18-D anterior se caracteriza por RMN como sigue: Se disuelven 21.3 mg de la sal en metanol deuterado, se investigan 0.7 mi con espectroscopia de RMN. Se utiliza una combinación de experimentos de RMN ID ("""H, 13C y NOE selectivo) y 2D (gCOSY, gHSQ y gHMBC) . Todos los datos concuerdan con la estructura propuesta que se presenta a continuación. Todos los carbonos y los protones unidos a la estructura propuesta que se presenta a continuación. Todos los carbonos y los protones unidos a carbonos están asignados. Los protones unidos a heteroátomos se intercambian por deuterio a partir del - - solvente y no se detectan. La mayor parte de las resonancias en los espectros de RMN 1H y 13C están presentes como conjuntos de dos picos. La razón para esto es una ligera rotación alrededor de la unión C9-N10, lo que resulta en 2 atropisómeros que existen simultáneamente en la solución. El experimento NOE ID es una evidencia de esto. Cuando se irradia una resonancia de un atropisómero, la saturación se transfiere al pico correspondiente del otro atropisómero. Las resonancias que corresponden al contraión de 1 , 5-naftalendisulfonato no muestran atr - - Existen cuatro átomos de flúor en la molécula. Esto da lugar a resonancias divididas para algunos protones y carbonos. La resonancia tanto del protón como del carbono que corresponden a la posición 1 está divida debido al acoplamiento de espin con los dos núcleos de flúor en dicha posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF= 73 HZ y 1JCF=2 63HZ. Además, la resonancia del protón que corresponde a H1 9 es un doblete distorsionado con 3JHF=6 · 9 Hz, debido al acoplamiento de espin con los núcleos de flúor en la posición 18 . Las resonancias de carbono que corresponden a C17 , C1 8 , C19 y C2 0 también muestran acoplamientos con estos núcleos de flúor. Las resonancias de C17 y C2 0 son tripletes con 2JHF=19 Hz y 3JHF=H HZ, respectivamente. La resonancia C18 es un doblete de dobletes con constantes de acoplamiento. 1JCF=2 51 Hz y 3JCF=8 Hz . La resonancia C1 9 es un multiplete. Al comparar las magnitudes de las integrales para las resonancias que corresponden al contraión de 1 , 5 -naftalendisulfonato .y el Compuesto original proporciona la relación estequiométrica de un contraión 1 , 5 -naftalendisulfonato único cristalizado con dos moléculas del Compuesto original . La asignación del desplazamiento químico de RMN y 13C así como las correlaciones protón-protón se muestran en la Tabla 11 .
- - Tabla 11 No . de Tipo Desplazamiento desplazamiento JHH/HZ Correlación y átomo de 13C/ppma de 1H/ppmb y unión pasante multiplicidad 1 CHF 117.5e 6.91 (t) 73 (2J„F) nd 1' 2 117.5e 6.87 (t) 73 (2J„F) nd 2 C 153.5 na na na 2' 153.3 na na na 3 CH 120.0 7.14 (t)n nd 5, 7 3 ' 119.6 7.11 (t)n nd 5 ' , 7 ' 4 C 136.1 na na na 4' 135.8 na na na 5 CH 125.0 7.31 (t)n nd 3, 7 5" 124.9 7.28 (t)n nd 3 ' , 7 · 6 C 144.4 na na na 6' 145.3 na na na 7 CH 117.2 7.16 (t)n nd 3, 5 7 ' 117.1 7.12 (t)n nd 3 ' , 5 ' 8 CH 72.9 5.15 (s) na nd 8' 73.6 5.07 (s) na nd 9 CO 173.0 na na na 9' 173.5 na na na - - - 12 - aEn relación a la resonancia del solvente a 49.0 ppm. bEn relación a la resonancia del solvente a 3.30 ppm. cs = singulete, d = doblete, dd = doblete de dobletes, t = triplete, m = multiplete. dObtenida en el experimento gCOSY. eLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento con los dos núcleos de flúor Fl . 1FCP=263 HZ. fLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento con los dos núcleos de fluór F18. 9La resonancia es un doblete de dobletes debido al acoplamiento de los dos núcleos de flúor F18. xLa resonancia es un multiplete debido al acoplamiento de los dos núcleos de flúor F18. kLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento de los - - dos núcleos de flúor F18, 1JCF=H Hz . nEl acoplamiento 4JHH con los protones meta no se separan completamente. na = no aplicable, nd = no determinado. Los cristales del Compuesto B, sal de ácido hemi-1 , 5-naftalendisulfónico (obtenido por medio del Método 18-1 anterior, se analizan por XRPD y los resultados se presentan a continuación (Tabla 12) y se muestran en la figura 5.
Tabla 12 valor d (Á) Intensidad (%) Intensidad 18.3 99 s 12.5 22 s 9.9 22 s 9.1 67 s 8.0 18 m 7.5 17 m 6.8 37 s 6.7 59 s 6.1 39 s - 128 - 15 25 - 129 - DSC muestra una endotermia con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 183 °C y TGA muestra una pérdida de peso de 0.3% entre 25-110°C.
Abreviaturas Ac = acetilo APCI = ionización química a presión atmosférica (en relación a EM) API = ionización a presión atmosférica (en relación a EM) aq = acuoso Aze (& (S) -Aze) = (S) -acetidin-2 -carboxilato (a menos que se especifique de otra manera) Boc = terbutoxicarbonilo br = amplio (en relación a RM ) CI = ionización química (en relación a EM) d = días d = doblete (en relación a RMN) DCC = diciclohexilcarbodiimida dd = doblete de dobletes (en relación a RMN) DIBAL-H = hidruro de diisobutilaluminio DIPEA = diisopropiletilamina DMAP = 4- (?,?-dimetilamino) piridina DMF = N,N-dimetilformamida DMSO = sulfóxido de dimetilo - - DSC = calorimetría de exploración diferencial DVT = trombosis venosa profunda EDC = clorhidrato de 1' (3-dimetilaminopropil) -3- etilcarbodiimida eq = equivalente ES = electroaspersión ESI = interfase de electroaspersión Et = etilo éter = dietiléter EtOAc = acetato de etilo EtOH = etanol Et20 = dietiléter HATU = hexafluorofosfato de O- (azabenzotriazol-1- il) -?,?,?' ,?' -tetrametiluronio HBTU = [hexafluorofosfato de ?,?,?' ,?' -tetrametil- O- (benzotriazol-l-il) uronio HCl = ácido clorhídrico, cloruro de hidrógeno gaseoso o sal clorhidrato (dependiendo del contexto) Hex = hexanos HCAc = ácido acético CLAR = cromatografía líquida de alta resolución CL = cromatografía líquida m = multiplete (en relación a RMN) Me = metilo - 131 - MeOH = metanol min = minutos EM = espectrometría de masas MTBE = metilterbutiléter RMN = resonancia magnética nuclear OAc = acetato Pab = para-amidinobencilamino H-Pab = para-amidinobencilamina Pd/C = paladio en carbono Ph = fenilo PyBOP = hexafluorofosfato de (benzotriazol-l-iloxi) - tripirrolidinofosfonio c = cuartete (en relación a RMN) QF = fluoruro de tetrabutilamonio rt/RT = temperatura ambiente s = singulete (en relación a RMN) solutol = PEG 660 12-hidroxiestearato (un tensioactivo no iónico) t = triplete (en relación a RMN) TBTU = [tetrafluoroborato de ?,?,?' ,?' -tetrametil- O- (benzotriazol-l-il) uronio TEA = trietilamina Teoc = 2 - (trimetilsilil) etoxicarbonilo TEMPO = radical libre de 2 , 2 , 6 , 6-tetrametil-l- piperidiniloxi - 132 - TFA = ácido trifluoroacético TGA = análisis termogravimétrico THF = tetrahidrofurano CCD = cromatografía en capa delgada XJV = ultravioleta Los prefijos n, s, i, t y ter tienen los significados habituales: norm l, secundario, iso y terciario. La invención se ilustra, por medio de los siguientes Ejemplos.
Ejemplo 1 Compuesto A 30 µp???ßß PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % seguido por agitación ligera. Esta composición se administra a los. perros oralmente por sonda una vez al día durante 5 días .
La dosis de 150 mol/kg proporciona las concentraciones plasmáticas máximas en el intervalo de 118-254 µ? (118-254 µp??1/1) después de la primera dosis y de 186-286 µ? (186- 286 µt???/?) después de la quinta dosis.
Ejemplo 2 Compuesto A 40 µt????? - 133 - PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % hasta 1 ml Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % seguido por agitación ligera. Esta composición se administra a ratas por vía oral mediante sonda una vez al día durante 5 días. La dosis de 400 pmol/kg proporciona las concentraciones plasmáticas máximas en el intervalo de 3.17-6.91 µ? (3. Olio.5 umol/l) después de la primera dosis y de 3.01-10.5 µ? (3.01-10.5 umol/l) después de la quinta dosis.
Ejemplo 3 Compuesto A 80 µt????ß PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % hasta 1 ml Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % seguido por agitación ligera. Esta composición se administra a ratas por vía oral mediante sonda una vez al día durante 5 días . La dosis de 800 µp???/kg proporciona las concentraciones plasmáticas máximas en el intervalo de 7.00-23.9 µ? (7.00-23.9 µt???/?) después de la primera dosis y de 10.3-32.8 µ? (10.3-32.8 µt???/?) después de la quinta dosis.
Ejemplo Compuesto A 250 µ?t???ß? PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) hasta 1 ml - 134 - Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 1000 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ej emplo 5 Compuesto A 21 ymoles PEG 400/etanol/agua 20/10/70 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 20/10/70 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 1000 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 6 Compuesto A 51 pmoles PEG 400/etanol/agua 20/10/70 (p/p) % hasta 1 mi El agua contiene 50 µt???/p?? de ácido tartárico Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua acidificada 20/10/70 (p/p) % seguido por agitación ligera. El pH de esta solución es de 3.6. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 250 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola . - 135 - Ej emplo 7 Compuesto A 44 umoles PEG 400/etanol/agua 30/5/65 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 30/5/65 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 200 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ej emplo 8 Compuesto A 88 pmoles PEG 400/etanol/agua 20/10/70 (p/p) % hasta 1 mi El agua contiene 50 µt???/ml de ácido tartárico HC1 hasta 3.6 es. Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua acidificada 30/5/65 (p/p) % seguido por agitación ligera. El pH de esta solución se ajusta a 3.6 por adición de HC1. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 400 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ej emplo 9 Compuesto A 120 pmoles PEG 400/etanol/agua 20/10/70 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto - 136 - A en PEG 400/etanol/agua 40/5/55 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 600 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 10 Compuesto A 198 µp???ßß PEG 400/etanol/agua 20/10/70 (p/p) % hasta 1 mi El agua contiene 50 µp???/ml de ácido tartárico HC1 hasta pH 3.8 es. Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua acidificada 40/5/55 (p/p) % seguido por agitación ligera. El pH de esta solución se ajusta a 3.8 por adición de HCl . La solubilidad del compuesto A es por lo menos 1000 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola. Las formulaciones del compuesto A en este vehículo son estables durante por lo menos 3 meses a <-15°C.
Ejemplo 11 Compuesto A 136 moles hidroxipropil- -ciclodextrina/agua 40/60 (p/p) % hasta 1 mi HCl hasta pH 3.7 es. Se prepara una formulación al disolver compuesto A en hidroxipropil-p-ciclodextrina/agua 40/60 (p/p) % - 137 - seguido por agitación ligera. El pH de esta solución se ajusta a 4.7 por adición de HC1. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 700 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 12 Compuesto A 77 moles hidroxipropil- -ciclodextrina/agua 28/72 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en hidroxipropil - ß-ciclodextrina/agua 28/72 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 400 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 13 Compuesto A 40 µ??????ß PEG 400/etanol/SolutolMR/agua 50/5/5/40 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/SolutolMR/agua 50/5/5/40 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 80 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 14 Compuesto A 40 µ?t???e - 138 - PEG 400/agua 40/60 (p/p) % hasta 1 ml Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400 seguido por agitación ligera durante por lo menos 1 hora, posteriormente se agrega agua hasta el volumen final . La solubilidad del compuesto A es por lo menos 200 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 15 Compuesto A 52 moles PEG 400/agua 35/65 (p/p) % hasta 1 ml El agua contiene 50 µp???eß/??? de ácido tartárico Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400 seguido por agitación ligera durante por lo menos 1 hora, posteriormente se agrega agua al volumen final. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 250 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola .
Ejemplo 16 Compuesto A 58 µp????? PEG 400/agua 50/50 (p/p) % hasta 1 ml Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400 seguido por agitación ligera durante por lo menos 1 hora, posteriormente se agrega agua al volumen - 139 - final. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 300 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 17 Compuesto A 88 pmoles PEG 400/agua 67/33 (p/p) . % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400 seguido por agitación ligera durante por lo menos 1 hora, posteriormente se agrega agua al volumen final. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 400 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola .
Ejemplo 18 Compuesto A 92 moles PEG 400/etanol/agua 45/1/54 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 45/1/54 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 450 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 19 Compuesto A 159 ymoles - 140 - PEG 400/etanol/agua 45/1/54 (p/p) % hasta 1 mi El agua contiene 50 umoles/ml de ácido tartárico HC1 hasta pH 4.2 c.s. Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua acidificada 45/1/54 (p/p) % seguido por agitación ligera. El pH de esta solución se ajusta en 4.2 con HCl . La solubilidad del compuesto A es por lo menos 800 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 20 Compuesto A 101 µp????e PEG 400/etanol/agua 45/2/53 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 45/2/53 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 500 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola. , 1 Ejemplo 21 Compuesto A 167 moles PEG 400/etanol/agua 45/2/53 (p/p) % hasta 1 mi El agua contiene 50 µpt???ß/p?? de ácido tartárico HCl hasta pH 4.3 c.s. Se prepara una formulación al disolver compuesto - - A en PEG 400/etanol/agua acidificada 45/2/53 (p/p) % seguido por agitación ligera. El pH de esta solución se establece en 4.3 por adición de HCl . La solubilidad del compuesto A es por lo menos 800 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 22 Compuesto A 46 pmoles DMA/agua 50/50 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en el vehículo seguido por agitación ligera durante por lo menos 1 hora. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 230 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 23 Compuesto A 29 µ?t????ß DMA/agua 25/75 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en el vehículo seguido por agitación ligera durante por lo menos 1 hora. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 150 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola. Ejemplo, 24 Compuesto A 5 µp???ee - 142 - HCl 10 pmoles Agua hasta 1 mi HCl/NaOH hasta pH 3.6 es. Se prepara una formulación al disolver compuesto A en un volumen inferior de la cantidad equimolar doble de HCl seguido por agitación ligera y dilución hasta 1 mi. Se ajusta el pH de la solución final a 3.6. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 20 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 25 Compuesto A 10 moles Agua hasta 1 mi HCl hasta pH 1.0 es. NaOH hasta pH 3.0 c . s . Se prepara una formulación al disolver compuesto A, se agregan agua y HCl para proporcionar pH 1, posteriormente la solución se agita ligeramente. Se ajusta el pH de la solución final a 3.0 con NaOH. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 40 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola. Esta formulación se administra p.o. en ratas, en un estudio comparativo cinético. Ejemplo 26 Compuesto A 100 ymoles - 143 - Miglyol 0.25 g/g Compuesto A DMA hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en 1 mi de DMA/miglyol seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 4000 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 27 Compuesto A 100 µp????d Miglyol 0.25 g/g Compuesto A Etanol hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en 1 mi de etanol/miglyol seguido por agitación ligera.
La solubilidad del compuesto A es por lo menos 4000 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 28 Compuesto A 130 pmoles Etanol hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en 1 mi de etanol seguido por agitación ligera. La sustancia es estable en esta formulación durante más de 1 semana .
Ejemplo 29 - 144 - Para preparar nanopartículas se utiliza una solución concentrada de compuesto A de aproximadamente 100 mM en etanol . También se incluye miglyol 25% (p/p) , calculado en la cantidad de la sustancia. Las soluciones se diluyen 1/10 con la solución estabilizadora, que contiene PVP 0.2% (p/p) y.SDS 0.25 mM en agua. El mezclado, el cual se considera como un parámetro crítico durante la preparación de nanopartículas, es rápido e instantáneo. La solución de medicamentos se inyecta rápidamente en la solución estabilizante durante el proceso de ultrasonicado . Después se realiza una dilución 1/10 en la solución acuosa, y se obtienen nanopartículas de aproximadamente 150 nm. Después de 6 horas a temperatura ambiente, los tamaños de las partículas permanecen sin cambios.
Ejemplo 30 Compuesto A 4 µp???eß solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solución se administra oralmente a ratas y la concentración plasmática del compuesto D es de 0.56 µp??1ß3/1 después de 1 hora. La solución se administra por vía subcutánea a ratas y las concentraciones plasmáticas del compuesto D y A son de 0.24 µt???/? y 0.6 - 145 - µt???/?, respectivamente, después de 1 hora.
Ejemplo 31 Compuesto B 4 moles solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto B en solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solución se administra oralmente a ratas y la concentración plasmática del compuesto B y compuesto E son respectivamente 0.7 µ????/? y 0.65 µ?t???/? después de 1 hora. La solución se administra por vía subcutánea a ratas y las concentraciones plasmáticas del compuesto B y E son de 0.4 µp???/? y 0.3 µp???/?, respectivamente, después de 1 hora.
Ejemplo 32 Compuesto C 4 µp???ßß solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto C en solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solución se administra oralmente a ratas y las concentraciones plasmáticas de los compuestos C y F fueron respectivamente 0.2 µ?t???/? y 0.5 µp????ß/? después de 1 hora. La solución se administra por vía subcutánea a ratas y las concentraciones plasmáticas del - 146 - compuesto C y F fueron de 0.35 µt???/? y 0.5 µ????/?, respectivamente, después de 1 hora.
Ejemplo 33 Compuesto D (sal trifluoroacetato) 5 pmoles solución salina 9 mg/ml hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver la sal del compuesto D en 1 mi de solución salina seguido por agitación ligera.
Ejemplo 34 Compuesto D (sal trifluoroacetato) 75 pmoles EtOH 0.05 mi solución salina (9 mg/ml) hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver la sal del compuesto D en 1 mi de solución salina/etanol seguido por agitación ligera.
Ejemplo 35 Compuesto D (sal trifluoroacetato) 4 µp???eß EtOH 0.02 mi solución salina hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver la sal del compuesto D en 1 mi de solución salina/etanol seguido por agitación ligera. La solución se administra subcutáneamente - 147 - a ratas y la concentración plasmática del compuesto D es de 0.55 umoles/l después de 1 hora.
Ejemplo 36 Compuesto E (sal acetato) 4 µ?????ß EtOH 0.02 mi solución salina . hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver la sal del compuesto E en 1 mi de solución salina/etanol seguido por agitación ligera. La solución se administra subcutáneamente a ratas y la concentración plasmática del compuesto E es de 0.75 µp????ß/? después de 1 hora.
Ejemplo 37 Compuesto F (sal trifluoroacetato) 4 µp???ßß EtOH 0.02 mi solución salina hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver la sal del compuesto F en 1 mi de solución salina/etanol seguido por agitación ligera. La solución se administra subcutáneamente a ratas y la concentración plasmática del compuesto F es de 0.92 moles/l después de 1 hora.
Ejemplo 38 Compuesto E (sal acetato) 22 mg - 148 - solución salina 9 mg/ml hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver la sal del compuesto E en 1 mi de solución salina seguido por agitación ligera.
Ejemplo 39 Compuesto F (sal trifluoroacetato) 22 mg solución salina 9 mg/ml hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver la sal del compuesto F en 1 mi de solución salina seguido por agitación ligera.
Ejemplo 40 Compuesto A (como sal esilato) 14 mg agua hasta 1 mi Se prepara una solución al disolver el exceso de compuesto A como sal esilato en 3 mi de agua, seguido por agitación ligera durante la noche. Una concentración final de la solución después de filtración se monitorea a 14 mg/ml a un pH de 2.7.
Ejemplo 41 Compuesto A (como sal esilato) 33 mg Amortiguador de fosfato de sodio pH=3.1 1=0.1 hasta 1 mi Se prepara una solución al disolver 112 mg del - 149 - compuesto A como sal esilato en 3 mi de amortiguador de fosfato de sodio seguido por agitación ligera durante la noche. Una concentración final de la solución después de filtración se monitorea a 33 mg/ml a un pH de 2.7.
Ejemplo 42 Compuesto A (como sal esilato) 1.6 mg Amortiguador de fosfato de sodio pH=6.9 1=0.1 hasta 1 mi Se prepara una solución al disolver 20 mg del compuesto A como sal esilato en 3 mi de amortiguador de fosfato de sodio seguido por agitación ligera durante la noche. Una concentración final de la solución después de filtración se monitorea a 1.6 mg/ml a un pH de 6.5.
Ejemplo 43 Se pueden producir las siguientes formulaciones liofilizadas de acuerdo con técnicas descritas en uno o más de los ejemplos 1-29 anteriores: a . Compuesto A 10 µt??? Manitol 10 mg Agua hasta 1 mi HC1 a pH 1.0 es. NaOH a pH 3.0 es. - 150 - Compuesto D 10 µp??? Manitol 10 mg Agua hasta 1 mi HCl a pH 1.0 c.s. NaOH a pH 3.0 c . s . c . Compuesto E 10 µ?t??? Manitol 10 mg Agua hasta 1 mi HCl a pH 1.0 c . s . NaOH a pH 3.0 c.s. d. Compuesto F 10 µ???? Manitol 10 mg Agua hasta 1 mi HCl a pH 1.0 c.s. NaOH a pH 3.0 c.s. e . Compuesto B 10 umol Manitol 10 mg Agua hasta 1 mi HCl a pH 1.0 c.s. NaOH a pH 3.0 c.s. - 151 - Compuesto C 10 µp??? anitol 10 mg Agua hasta 1 mi HC1 a pH 1.0 es. NaOH a pH 3.0 c . s . g- Compuesto A (como la sal esilato) 14 mg Manitol 10 mg Agua hasta 1 mi HC1 a pH 1.0 c.s. NaOH a pH 3.0 c.s. h. Compuesto A (como la sal besilato) 14 mg Manitol 10 mg Agua hasta 1 mi HC1 a pH 1.0 c.s. NaOH a pH 3.0 c.s.
Las soluciones opcionalmente se esterilizan por filtración, por ejemplo a través de un filtro de membrana de 0.22 pm. Las soluciones (estériles o de otra manera) se suministran como relleno en recipientes apropiados (por ejemplo frascos) y las formulaciones se liofilizan utilizando equipo estándar. Los frascos se pueden sellar en equipo de liofilización bajo un atmósfera de nitrógeno. - 152 Los excipientes y el medicamento se mezclan y granulan con polivinilpirrolidona K90 disuelta en agua. Los gránulos después se secan en un horno de secado. El granulado se lubrica con estearilfumarato de sodio y se comprime en tabletas utilizando una prensa excéntrica. Se prueban tres tabletas individuales para determinar la liberación del medicamento en 900 mi de medio utilizando el aparato 2 de disolución de USP - 153 - (paleta+canasta1) a 50 rpm y 37°C. El medio de disolución utilizado es ácido clorhídrico 0.1 ( H 1) y amortiguador de fosfato de sodio 0.1 M (pH 5.8) . La cuantificación en línea se realiza utilizando el sistema de fibra óptica de C Technologies con 220 nm como la longitud de onda analítica cuando se utiliza HCl 0.1 M como el medio de disolución y con 260 nm como la longitud de onda analítica cuando se utiliza amortiguador fosfato pH 6.8 como el medio de disolución. Se utiliza 350 nm como la longitud de onda de referencia con ambos medios. Durante las primeras dos horas del análisis se mide el valor de liberación cada 15 minutos, y después cada hora durante el resto del análisis. Los resultados se presentan en la tabla siguiente. [lUna canasta cuadrangular elaborada para el propósito, de alambre de malla, soldada en su extremo superior, con lados estrechos en el extremo de una varilla de acero. La varilla se coloca a través de la cubierta del recipiente de disolución y se fija por medio de dos tuercas de Teflon de 3.2 era del centro del recipiente. El borde inferior de la parte inferior de la canasta se ajusta para estar 1 cm por encima de la paleta. La canasta se dirige a lo largo de la corriente de flujo con la tableta bajo prueba colocada sobre su borde] . - 5 - Ejemplo 45 Los excipientes y el medicamento se mezclan y granulan con polivinilpirrolidona 90 disuelta en agua. Los gránulos después se secan en un horno de secado. El granulado se lubrica con estearilfumarato de sodio y se comprime en tabletas utilizando una prensa excéntrica. Ejemplo 46 Peso Cantidad Compuesto B 48 mg 17% Polivinilpirrolidona K90 8 mg 3% Manitol 21 mg 7% Celulosa microcristalina 187 mg 65% Glicolato de almidón de sodio 21 mg 7% Estearilfumarato de sodio 3 mg 1% - 156 - Los excipientes y el medicamento se mezclan y granulan con polivinilpirrolidona K90 disuelta en agua. Los gránulos después se secan en un horno de secado. El granulado se lubrica con estearilfumarato de sodio y se comprime en tabletas utilizando una prensa excéntrica. Ejemplo 47 Los excipientes y el medicamento se mezclan y granulan con polivinilpirrolidona K90 disuelta en agua. Los gránulos después se secan en un horno de secado. El granulado se lubrica con estearilfumarato de sodio y se comprime en tabletas utilizando una prensa excéntrica.
Ejemplo 48 Compuesto A 16 µt??? PEG 414 hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el 157 compuesto A en PEG414 acidificado seguido por agitación ligera .
Ejemplo 49 Compuesto A 16 µt??? PEG 300 hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto A en PEG300 acidificado seguido por agitación ligera.
Ejemplo 50 Compuesto A 16 µp??? PEG 200 hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto A en PEG200 acidificado seguido por agitación ligera.
Ejemplo 51 Compuesto G 4 µtt??? solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto G en solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % seguido por agitación ligera.
Ejemplo 52 - 158 - Compuesto J 4 µt??? solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto J en solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % seguido por agitación ligera.
Ejemplo 53 Compuesto H 4 µt??? solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto H en solución salina/etanol/solutol 90/5/5 (p/p) % seguido por agitación ligera.
Ejemplo 54 La formulación se puede preparar de acuerdo con ejemplo 47 anterior. - 159 - Ejemplo 55 La formulación se puede preparar de acuerdo con ejemplo 47 anterior. Ejemplo 56 Peso Cantidad Sal de besilato del compuesto A 20 mg 8% Hidroxipropilcelulosa 15 mg 6% Celulosa microcristalina 200 mg 79% CMC de sodio reticulado 15 mg 6% Estearilfumarato de sodio 3 mg 1% - 160 - La formulación se puede preparar de acuerdo con el ejemplo 47 anterior.
Ejemplo 57 Compuesto A 24 µ?????d PEG 400/etanol/agua 25/10/65 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 25/10/65 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 100 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola. La formulación es estable en un congelador durante por lo menos 2 meses.
Ejemplo 58 Compuesto A 800 pmoles PEG 400/etanol/agua 50/10/40 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 50/10/40 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 2000 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 59 Compuesto A 500 ymoles Ácido cítrico 200 ymoles - 161 - HC1 a H 3.6 c.s. PEG 400/etanol/NaCl/9 mg/ml 40/10/50 (p/p) % hasta 1 ml Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 40/10/50 (p/p) % seguido por agitación ligera. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 1500 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola.
Ejemplo 60 Compuesto A 24 moles Ácido cítrico 5 moles HC1 a pH 3.2 c.s. etanol/egua 12/88 (p/p) % hasta 1 ml Se prepara una formulación al disolver compuesto A en etanol seguido por agitación ligera, posteriormente se agregan ácido cítrico y agua a un volumen final y se ajusta el pH a 3.2. La solubilidad del compuesto A es por lo menos 100 veces superior en este vehículo en comparación con el agua sola. La formulación es estable en un congelador durante por lo menos 1 mes .
Ejemplo 61 Compuesto A 2 µp????ß Ácido cítrico 5 µp???eß HC1 a pH 3.6 c.s. - 162 - 9 mg/ml de NaCl hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en ácido cítrico en solución salina fisiológica seguido por agitación ligera. El pH se ajusta a 3.6. La formulación es estable en un congelador de por lo menos 3 meses.
Ejemplo 62 Compuesto A (como sal besilato) 140 moles Ácido cítrico 5 umoles HC1 a pH 3.6 es. PEG 400/etanol/agua 40/5/55 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 40/5/55 (p/p) % que contiene ácido cítrico seguido por agitación ligera y al ajustar el pH a 3.6. La formulación es estable en un congelador durante por lo menos 1 mes .
Ejemplo 63 Compuesto A (como sal besilato) 65 µ??????? Ácido cítrico 5 µp???ße HC1 a pH 3.3 c.s. PEG 400/etanol/agua 20/5/75 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A en PEG 400/etanol/agua 20/5/75 (p/p) % que contiene ácido cítrico seguido por agitación ligera y al ajustar el pH a - 163 - 3.2.
Ejemplo 64 Compuesto D (como sal acetato) 25 moles PEG 400/etanol/agua 40/5/55 (p/p) % hasta 1 mi Ácido tartárico: Componente A (sal acetato de D) cantidades equimolares más un exceso 5 m HC1 a pH 3.6 c . s . Se prepara una formulación al disolver compuesto D en PEG 400/etanol/agua acidificado 40/5/55 (p/p) % seguido por agitación ligera. El pH de esta solución se ajusta a 3.6 por adición de HC1. Las formulaciones de D en este vehículo son estables durante por lo menos 2 meses a <-15°C.
Ejemplo 65 Compuesto A 50 mg HPMC (15000 Cps) 5 mg Solutol HS15 20 mg Agua hasta 1 mi Se suspende el HPMC en agua caliente y se agrega Solutol fundido con agitación vigorosa. Esta solución se enfría y se agrega el compuesto A bajo agitación vigorosa para formar una suspensión bien dispersada. - 164 - Ejemplo 66 Compuesto A (como sal besilato) 50 mg HPMC (15000 Cps) 5 mg Solutol HS15 20 mg Agua hasta 1 mi Se suspende el HPMC en agua caliente y se agrega Solutol fundido durante agitación vigorosa. Esta solución se enfría y se agrega el compuesto A (besilato) bajo agitación vigorosa para formar una suspensión bien dispersada .
Ejemplo 67 Compuesto D (como sal acetato) 2 moles Ácido cítrico 5 pmoles HC1 a pH 3.6 es. NaCl 9 mg/ml hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto A y ácido cítrico en solución salina fisiológica y agitar ligeramente. El pH se ajusta a 3.6. La formulación es estable en un congelador durante por lo menos 3 meses.
Ejemplo 68 Para preparar nanopartículas se utiliza una solución concentrada de compuesto B de aproximadamente 100 mM en etanol . También se incluye Miglyol 25% (p/p) , - 165 - calculado en la cantidad de sustancia. Las soluciones se diluyen 1/10 con una solución estabilizante que consiste de PVP 0.2% (p/p) y SDS 0.25 raM en agua. La etapa de mezclado crítica es rápida e instantánea: La solución de medicamento se inyecta rápidamente en la solución estabilizante durante el ultrasonicado . Después de una dilución. 1/10 en la solución acuosa, se obtienen nanopartículas de aproximadamente 110 nm. Después de 6 horas a temperatura ambiente, los tamaños de las partículas permanecen sin cambios. Opcionalmente se puede utilizar DMA en lugar de etanol, se puede excluir el Miglyol y la dilución puede ser más grande (1/20) . Se pueden obtener por diferentes combinaciones partículas en un intervalo de tamaño de 100 a 300 nm.
Ejemplo 69 Compuesto B 200 pmoles PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto B en PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % seguido por agitación ligera. Las formulaciones de B (a 0.5 mg/ml) en este vehículo son estables durante por lo menos 1 mes a <-15°C.
- - Ejemplo 70 Compuesto B 230 ymoles PEG 400/etanol/agua 60/5/35 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver compuesto B en PEG 400/etanol/60/5/35 (p/p) % seguido por agitación ligera.
Ejemplo 71 Compuesto B 50 mg HPMC (15000 Cps) 5 mg Solutol HS15 20 mg Agua hasta Se suspende el HPMC en agua caliente y se agrega Solutol fundido durante agitación vigorosa. Esta solución se enfría y se agrega el compuesto B bajo agitación vigorosa para formar una suspensión bien dispersada.
Ejemplo 72 Compuesto E (como sal acetato) 39 moles NaCl 9 mg/ml hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto E en NaCl 9 mg/ml mediante agitación ligera. El pH obtenido en esta formulación es 8-9.
Ejemplo 73 - 167 - Compuesto C 400 µ?-noles PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto C en PEG 400/etanol/agua 50/5/45 (p/p) % seguido por agitación ligera. Las formulaciones de C (a 0.5 mg/ml) en este vehículo son estables durante por lo menos 1 mes a temperatura ambiente e inferiores .
Ejemplo 74 Compuesto C 16 ymoles Hidroxipropil-ß-ciclodextrina/agua 20/80 (p/p) % hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto C en hidroxipropil^-ciclodextrina/agua 20/80 (p/p) % seguido por agitación ligera. Las formulaciones de C en este vehículo son estables durante por lo menos 2 semanas a <8°C.
Ejemplo 75 Compuesto F (como sal trifluoroacetato) 38 pmoles NaCl 9 mg/ml hasta 1 mi Se prepara una formulación al disolver el compuesto F en NaCl 9 mg/ml mediante agitación ligera. El pH obtenido en esta formulación es 3-4. Las formulaciones de F en este vehículo son estables durante por lo menos 2 semanas a temperatura ambiente e inferiores. - 168 - Ejemplo 76 Se prepara una tableta de acuerdo con el método general del ejemplo 44.
Ejemplo 76 Datos de Liberación Se mide de acuerdo con el método general del ejemplo 44 pero utilizando 500 mi de media y 75 rpm.
Tiempo (min) % liberado en amortiguador pH 6.8 0 0 5 90 10 94 15 96 - 169 - Ejemplo 77 Se prepara una tableta de acuerdo con el método general del ejemplo 44.
Se pueden preparar otras formulaciones en las cuales la cantidad de la sal de besilato del compuesto A está en el intervalo de 50-300 mg; la proporción de los otros componentes es similar a los del ejemplo 77. - 170 - Ejemplo 78 Se prepara una tableta de acuerdo con el método general del ejemplo 44.
También se pueden preparar otras formulaciones en las cuales se utilizan 100 mg o 200 mg de la sal del ácido heminaftalen-1 , 5-disulfonico; la proporción de los otros componentes es similar a aquella del ejemplo 78. Los aspectos particulares de la invención se proporcionan como sigue: 1. Una formulación farmacéutica de liberación inmediata que comprende, como ingrediente activo, un compuesto de fórmula (I) : - 171 - en donde R1 representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono sustituido por uno o más sustituyentes fluoro; R2 representa hidrógeno, hidroxi, metoxi o etoxi; y n representa 0 , 1 ó 2 ; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable; con la condición de que la formulación no contenga solamente: • una solución de un ingrediente activo y agua ; • una solución de un ingrediente activo y sulfóxido de dimetilo; o • una solución de un ingrediente activo en una mezcla de etanol : 12 -hidroxiestearato de PEG 660: agua 5:5:90. 2. Una formulación farmacéutica de liberación inmediata, como se describe en el aspecto 1, en donde el - 172 - ingrediente activo es: Ph(3-Cl) (5-OCHF2 ) - (R) CH (OH) C (O) Aze-Pab (OMe) ; Ph(3-Cl) (5-OCHF2 ) - (R)CH(OH)C(0)Aze-Pab{2, 6-diF) (OMe) ; Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH(OH) C (O) - (S) Aze-Pab (OMe) ; Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab; Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (OH) ; Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab (2 , 6-diF) ; Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH (OH) C (O)- (S) Aze-Pab (2, 6-diF) (OH) ; Ph (3 -Cl) ( 5 -OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab ; o Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab (OH) . 3. Una formulación farmacéutica de liberación inmediata, sólida, como se describe en el aspecto 1, en donde el ingrediente activo es: Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) Aze-Pab (OMe) ; Ph(3-Cl) (5-OCHF2 ) - (R) CH (OH) C (O) Aze-Pab (2 , 6-diF) (OMe) ; o Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (OMe) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 4. Una formulación farmacéutica de liberación inmediata, sólida, como se describe en el aspecto 1, en donde el ingrediente activo es Ph (3-Cl) (5-OCHF2) -(R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab (OMe) o un ácido alcansulfónico de 1 a 6 átomos de carbono o una sal de ácido arilsulfónico opcionalmente sustituido del mismo. 5. Una formulación farmacéutica de liberación inmediata inyectable como se describe en el aspecto 1, en - - donde el ingrediente activo es: Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S)Aze-Pab; Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab (2 , 6-diF) ; o Ph(3-Cl) (5-0CH2CH2F) - (R) CH (OH) C (O) - (S)Aze-Pab. 6. El uso de una formulación como se describe en el aspecto 1, como un medicamento. 7. El uso de una formulación como se describe en el aspecto 1, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un desorden cardiovascular. 8. Un método para tratar un desorden cardiovascular en un paciente que padece de, o que se encuentra en riesgo de dicho desorden, el cual comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una formulación farmacéutica como se describe en el aspecto 1. 9. Un procedimiento para producir una formulación de liberación inmediata como se describe en el aspecto 1. 10. El compuesto Ph (3 -Cl) (5-OCHF2) -(R)CH(0H)C(0) - (S) Aze-Pab (2 , 6-diP) (OH) . También se proporciona una formulación que se puede obtener por cualquiera de los métodos o ejemplos descritos en la presente.

Claims (11)

- 174 - REIVINDICACIONES
1. Una formulación farmacéutica de liberación inmediata que comprende, como ingrediente activo, un compuesto de fórmula (I) : en donde : R1 representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono sustituido por uno o más sustituyentes fluoro; R2 representa hidrógeno, hidroxi, metoxi o etoxi; y n representa 0, 1 ó 2 ; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable; con la condición de que cuando el ingrediente activo sea diferente de la forma de una sal, la formulación no contiene únicamente: • una solución de un ingrediente activo y agua; · una solución de un ingrediente activo y - 175 - sulfóxido de dimetilo; o • una solución de un ingrediente activo en una mezcla de etanol : 12 -hidroxiestearato de PEG 660: agua 5:5:90.
2. La formulación farmacéutica de liberación inmediata, como se describe en la reivindicación 1, que comprende una sal de adición de ácido de un compuesto de fórmula (I) y un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable .
3. Una formulación farmacéutica de liberación inmediata, como se describe en la reivindicación 1 ó 2, en donde el ingrediente activo es: Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH (OH) C(0) Aze-Pab (OMe) ; Ph(3-Cl) (5-OCHFz) -(R)CH(OH)C(0)Aze-Pab(2,6-diF) (OMe); Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (0) - (S) Aze-Pab (OMe) ; Ph(3-Cl) (5-OCHFz) - (R)CH (OH) C(0) - (S) Aze-Pab; Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (OH) ; Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(0H)C(0) - (S) Aze-Pab (2 , 6-diF) ; Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(2,6-diF) (OH); Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R)CH (OH) C (0) - (S) Aze-Pab; o Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R)CH(OH)C(0) - (S) Aze-Pab (OH) .
4. Una formulación como se describe en la reivindicación 1, 2 ó 3, en donde el ingrediente activo es una sal cristalina de: Ph(3-Cl) ( 5 -0CHF2)- (R) CH (OH) C(0) Aze-Pab (OMe) ; - 176 - Ph(3-Cl) (5-OCHFi) - (R)CH(OH)C(0)Aze-Pab(2,5-diF) (OMe); o Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab (OMe) .
5. Una formulación como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde el ingrediente activo es un ácido etansulfónico, ácido n-propansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido 1,5-naftalendisulfónico o sal de adición de ácido de n-butanosulfónico de Ph (3-C1) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S) Aze-Pab(OMe) o Ph(3-Cl) (5-0CHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S) Aze-Pab (2 , 6-diF) (OMe) .
6. La formulación como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde el ingrediente activo es Ph (3-Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S) Aze-Pab (OMe) , sal de ácido bencensulfónico, caracterizado por un patrón de difracción en polvo de rayos X caracterizado por picos con valores d en 5.9, 4.73, 4.09 y 4.08Á.
7. Una formulación como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde el ingrediente activo es Ph (3 -Cl) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -(S)Aze-Pab (2 , 6-diF) (OMe) , sal de ácido hemi-1,5-naftalendisulfónico, caracterizada por un patrón de difracción de polvo de rayos X definido por picos con valores d en 18.3, 9.1, 5.6, 5.5, 4.13, 4.02, 3.86, 3.69 y 3.63Á. - 177 -
8. Una formulación como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde la composición es una formulación farmacéutica de liberación inmediata sólida, una formulación farmacéutica de liberación inmediata inyectable o una formulación farmacéutica oral de liberación inmediata líquida.
9. El uso de una formulación como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, como un medicamento.
10. El uso de una formulación como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un desorden cardiovascular.
11. Un método para tratar un desorden cardiovascular en un paciente que padece de, o que se encuentra en riesgo de dicho desorden, el cual comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una formulación farmacéutica como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8. - 178 - RESUMEN De acuerdo con la presente invención, se proporciona una formulación farmacéutica de liberación inmediata que comprende como ingrediente activo un compuesto de fórmula (I) en donde Ri representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono sustituido por uno o más sustituyentes fluoro; R2 representa hidrógeno, hidroxi, metoxi o etoxi; y n representa 0, 1 6 2; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un diluyente o portador farmacéu icamente aceptable; con la condición de que cuando el ingrediente activo es diferente de aquel en forma de una sal, la formulación no contiene únicamente: · una solución de un ingrediente activo y agua; · una solución de un ingrediente activo y sulfóxido de dimetilo; o · una solución de un ingrediente activo en una mezcla de etanol : 12-hidroxiestearato de PEG 660: agua 5:5:90; tales formulaciones son de uso para el tratamiento de un desorden cardiovascular .
MXPA04011943A 2002-05-31 2003-05-27 Formulacion farmaceutica de liberacion inmediata. MXPA04011943A (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE0201658A SE0201658D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Immediate release pharmaceutical formulation
PCT/SE2003/000857 WO2003101423A1 (en) 2002-05-31 2003-05-27 Immediate release pharmaceutical formulation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MXPA04011943A true MXPA04011943A (es) 2005-03-31

Family

ID=20288036

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MXPA04011943A MXPA04011943A (es) 2002-05-31 2003-05-27 Formulacion farmaceutica de liberacion inmediata.

Country Status (24)

Country Link
US (1) US20060014734A1 (es)
EP (1) EP1513496A1 (es)
JP (2) JP4537197B2 (es)
KR (1) KR20050010016A (es)
CN (1) CN1655760A (es)
AR (1) AR039935A1 (es)
AU (2) AU2003241239B2 (es)
BR (1) BR0311363A (es)
CA (1) CA2485533A1 (es)
CL (1) CL2008003324A1 (es)
IL (1) IL165069A0 (es)
IS (1) IS7582A (es)
MX (1) MXPA04011943A (es)
NO (1) NO20044810L (es)
NZ (1) NZ536739A (es)
PL (1) PL373908A1 (es)
RU (2) RU2351314C2 (es)
SA (1) SA03240403B1 (es)
SE (1) SE0201658D0 (es)
SG (1) SG172473A1 (es)
TW (2) TW200735864A (es)
UA (1) UA82191C2 (es)
WO (1) WO2003101423A1 (es)
ZA (1) ZA200409237B (es)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR035216A1 (es) * 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
AR034517A1 (es) 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
US7781424B2 (en) * 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
CN101528215B (zh) * 2006-10-20 2011-10-19 艾科斯有限公司 Chk1抑制剂和环糊精的组合物
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
TW200900033A (en) * 2007-06-21 2009-01-01 Wen-Qing Li Automatic brewing machine
US20090061000A1 (en) * 2007-08-31 2009-03-05 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation use 030
US8977382B2 (en) * 2012-05-11 2015-03-10 D.P. Technology Corp. Automatic method for milling complex channel-shaped cavities
US9927801B2 (en) 2012-05-11 2018-03-27 D.P. Technology Corp. Automatic method for milling complex channel-shaped cavities via coupling flank-milling positions
CN102827053A (zh) * 2012-09-20 2012-12-19 天津嘉宏科技有限公司 芳族脒衍生物，其制备方法及作为药物的用途
TR201816624T4 (tr) 2014-06-03 2018-11-21 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Pirazol bileşikleri ve t tipi kalsiyum kanalı bloke edicileri olarak kullanımları.
SG11201701998XA (en) 2014-09-15 2017-04-27 Actelion Pharmaceuticals Ltd Triazole compounds as t-type calcium channel blockers
BR112019011208A2 (pt) 2016-12-16 2019-10-15 Idorsia Pharmaceuticals Ltd combinação farmacêutica, composição farmacêutica, e, kit de partes.
CN110234622B (zh) 2017-02-06 2023-07-04 爱杜西亚药品有限公司 用于合成1-芳基-1-三氟甲基环丙烷的新颖方法

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5252566A (en) * 1991-11-12 1993-10-12 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
SA96170106A (ar) * 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
SE9601556D0 (sv) * 1996-04-24 1996-04-24 Astra Ab New pharmaceutical formulation of a thrombin inhibitor for parenteral use
WO1997049404A1 (en) * 1996-06-25 1997-12-31 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9704401D0 (sv) * 1997-11-28 1997-11-28 Astra Ab Matrix pellets for greasy, oily or sticky drug substances
SE9802973D0 (sv) * 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
CA2345641A1 (en) * 1998-09-28 2000-04-06 Merck & Co., Inc. A method for treating inflammatory diseases by administering a thrombin inhibitor
TR200102037T2 (tr) * 1999-01-13 2001-10-22 Astrazeneca Ab Yeni amidinobenzilamin türevleri ve trombin engelleyiciler olarak kullanılmaları.
JP2004506039A (ja) * 2000-08-16 2004-02-26 アストラゼネカ　アクチボラグ 新規なアミジノ誘導体と、トロンビン阻害剤としてのそれらの使用
AR035216A1 (es) * 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
SE0201659D0 (sv) * 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation

Also Published As

Publication number Publication date
RU2351314C2 (ru) 2009-04-10
CL2008003324A1 (es) 2009-03-06
TW200735864A (en) 2007-10-01
RU2008141850A (ru) 2010-04-27
AU2010200821A1 (en) 2010-03-25
SA03240403B1 (ar) 2008-12-23
RU2004133387A (ru) 2005-07-10
EP1513496A1 (en) 2005-03-16
SG172473A1 (en) 2011-07-28
BR0311363A (pt) 2005-03-01
KR20050010016A (ko) 2005-01-26
JP2005536471A (ja) 2005-12-02
SE0201658D0 (sv) 2002-05-31
AU2003241239B2 (en) 2010-03-18
ZA200409237B (en) 2005-07-14
CN1655760A (zh) 2005-08-17
IS7582A (is) 2004-12-03
AR039935A1 (es) 2005-03-09
JP4537197B2 (ja) 2010-09-01
IL165069A0 (en) 2005-12-18
US20060014734A1 (en) 2006-01-19
NO20044810L (no) 2005-02-24
NZ536739A (en) 2006-10-27
UA82191C2 (uk) 2008-03-25
WO2003101423A1 (en) 2003-12-11
TW200400940A (en) 2004-01-16
JP2010209090A (ja) 2010-09-24
AU2003241239A1 (en) 2003-12-19
CA2485533A1 (en) 2003-12-11
PL373908A1 (en) 2005-09-19
TWI311555B (en) 2009-07-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2010209090A (ja) 即時放出性医薬製剤
TWI788702B (zh) {[5-(3-氯苯基)-3-羥基吡啶-2-羰基]胺基}乙酸之固體型式，其組合物及用途
JP4603353B2 (ja) 調節放出型の医薬配合物
US7763597B2 (en) Salts
US7781424B2 (en) Modified release pharmaceutical formulation
NZ549273A (en) Immediate release pharmaceutical formulation
NZ549176A (en) Modified release pharmaceutical formulation

Legal Events

Date Code Title Description
FG Grant or registration