MXPA02006155A - Compuesto y metodo para el tratamiento del dolor. - Google Patents

Abstract

La presente invencion describe un compuesto, 7-cloro-4-hidroxi-2-(2-cloro~4~metilfenil)- 1,2,5,10-tetrahidropiridazino[4,5-b]quinolin-1,10~diona, sales farmaceuticamente aceptables del mismo, un metodo para el tratamiento del dolor que comprende la administracion de una cantidad efectiva que alivia el dolor del compuesto y composiciones farmaceuticas que contienen el compuesto.

Description

COMPUESTO Y MÉTODO PARA EL TRATAMIENTO DEL DOLOR Campo de la Invención Esta invención se refiere al tratamiento o prevención del dolor o nocicepción.

Técnica Relacionada El dolor es una experiencia sensorial distinta de las sensaciones de tacto, presión, calor y frió. Con frecuencia se describen las victimas de tales términos como inteligente, torpe, afligido, con remordimiento, sarcástico o vehemente y generalmente se considera que incluye tanto la sensación original como la reacción a la sensación. Este intervalo de sensaciones, asi como también la variación en la percepción del dolor por diferentes individuos, produce una definición precisa del dolor obstinado, sin embargo, muchos individuos sufren con el dolor severo y continuo. El dolor que se origina por el daño a las estructuras nerviosas con frecuencia se manifiesta como una hiperalgesia o supersensibilidad nerviosa y se llama dolor 'neuropático" . El dolor también se puede *originar" por la estimulación de receptores nociceptivos y transmitir sobre REF 139733 vias nerviosas intactas, tal dolor se llama dolor "nociceptivo" . El nivel de estimulación en el cual el dolor se llaga a notar se refiere como el 'umbral de dolor". Los analgésicos son agentes farmacéuticos los cuales alivian el dolor aumentando el umbral de dolor sin una pérdida de conocimiento. Después de la administración de un fármaco analgésico un estimulo de mayor intensidad o duración más larga se requiere antes de que se experimente el dolor. En un individuo que sufre de hiperalgesia un fármaco analgésico puede tener un efecto anti-hiperalgésico. En contraste a los analgésicos, los agentes tales como los anestésicos locales bloquean la transmisión en las fibras nerviosas periféricas por lo cual bloquean la conciencia de dolor. Los anestésicos generales, por otra parte, reducen la conciencia de dolor produciendo una pérdida de conocimiento. Se ha reportado que los antagonistas de taquicinina inducen la antinocicepción en animales, la cual se cree que es análoga a la analgesia en el hombre (Maggi et al, J. Auton. Pharmacol. (1993) 13, 23-93) . En particular, se ha mostrado que los antagonistas del receptor NK-1 sin péptido producen tal analgesia. Por ejemplo, el antagonista del receptor NK-1 RP 67,850 produce analgesia con potencia comparable a aquella de la morfina (Garret et al, Proc. Nati. Acad. Sci. USA (1993) 88, 10208-10212). Los analgésicos opioides son una clase bien establecida de agentes analgésicos con acciones similares a la morfina. Los analgésicos opioides sintéticos y semisintéticos son derivados de cinco clases químicas de compuestos: fenantrenos; fenilheptilaminas; fenilpiperidinas; orfinanos; y benzomorfanos . Estos compuestos farmacológicamente tienen diversas actividades, por consiguiente algunos son fuertes agonistas a los receptores opioides (por ejemplo, morfina); otros son moderados a los agonistas poco severos (por ejemplo, codeina) ; aún otros exhiben actividad agonista-antagonista mezclada (por ejemplo, nalbufina) ; y todavía otros son agonistas parciales (por ejemplo, nalorfina) . Mientras que un agonista parcial opioide tal como nalorfina, (el N-alquil análogo de morfina) antagonizará los efectos analgésicos de la morfina, cuando se da solo, puede ser un analgésico potente con su propio poder. De todos los analgésicos opioides, la morfina sigue siendo la más usada ampliamente, pero, además de sus propiedades terapéuticas, tiene un número de desventajas que incluyen depresión respiratoria, motilidad gastrointestinal disminuida (resultante de la constipación), náusea y vomito. La dependencia fisica y tolerancia también limitan los usos clínicos de los compuestos opioides. La aspirina y otros compuestos de salicilato frecuentemente se usan en el tratamiento para interrumpir la amplificación del proceso inflamatorio en artritis y enfermedades reumatoides y temporalmente alivian el dolor. Otros compuestos de fármaco, usados para estos propósitos incluyen derivados del ácido fenilpropionico tales como Ibuprofen y Naproxen, Sulindac, fenil butazona, corticoesteroides, antimaláricos tales como sulfato de cloroquina e hidroxicloroquina, y fene atos (J. Hosp. Pharm., 36:622 (Mayo 1979)). Estos compuestos, sin embargo, son ineficaces para el dolor neuropático. Las terapias para el dolor, disponibles también tienen desventajas. Algunos agentes terapéuticos requieren el uso prolongado antes de que se experimente un efecto por el paciente. Otros fármacos existentes tienen serios efectos laterales en ciertos pacientes, y los sujetos se deben monitorear cuidadosamente para asegurar que cualesquiera efectos laterales no son excesivamente amenazadores. La mayoria de los fármacos existentes proporcionan solamente el alivio temporal del dolor y se deben tomar consistentemente S ^<Ba tA.^a*^J»ttJLLfa:JS^i<id(L«fiAJ-. sobre una base diariamente o semanalmente. Con la progresión de la enfermedad la cantidad de medicación necesitada para aliviar el dolor con frecuencia incrementa, incrementando asi el potencial para los efectos laterales adversos. Los receptores NMDA se definen por el enlace de N- metil-D-aspartato (NMDA) que comprende un complejo de canal iónico/receptor con diversos campos de enlace identificados, diferentes. El NMDA por si mismo es una molécula estructuralmente similar al glutamato (Glu) , el cual enlaza el sitio de enlace de glutamato y es altamente selectivo y potente en la activación del receptor de NMDA (Watkins (1987); Olney (1989)). Se conoce que muchos compuestos que enlazan el sitio de enlace NMDA/Glu (por ejemplo CPP, DCPP-eno, CGP 40116, CGP 37849, CGS 19755, NPC 12626, NPC 17742, D-AP5, D- AP7, CGP 39551, CGP-43487, MDL-100,452, LY-274614, LY- 233536, y LY233053) . Otros compuestos, referidos como antagonistas del NMDA no competitivos, enlazan a otros sitios en el complejo del receptor NMDA (los ejemplos son fenciclidina, dizocilpma, cetamina, tiletamina, CNS 1102, dextrometorfano, memantina, ácido cinurénico, CNQX, DNQX, 6,7-DCQX, 6,7-DCHQC, R(+)-HA-966, ácido 7-cloro-cinurénico, 5,7-DCKA, ácido 5-yodo-7-cloro-cinurénico, MDL-28,469, MDL- 100,748, MDL-29,951, L-689, 560, L-687,414, ACPC, ACPCM, ACPCE, arcaina, dietilentriamina, 1, 10-diaminodecano, 1,12-diaminododecano, ifenprodilo, y SL-82.0715). Estos compuestos se han revisado extensamente por Rogawski (1992) y Massieu et. al., (1993), y artículos citados en esta. Además de su función fisiológica, el glutamato (Glu) puede ser neurotóxico. La neurotoxicidad del Glu es referida como 'excitotoxicidad" debido a que la acción neurotóxica del Glu, similar a sus acciones beneficiosas, es mediada por un proceso excitativo (Olney (1990) ; Choi (1992) ) . Normalmente, cuando el Glu se libera en un receptor sináptico, solamente se enlaza temporalmente y luego se remueve rápidamente del receptor por un proceso que lo transporta de nuevo en la célula. Bajo ciertas condiciones anormales, incluyendo apoplejía, epilepsia y trauma del SNC, la falla de absorción de Glu y el Glu acumulado en el receptor resulta en una excitación persistente de la actividad electroquímica que conduce a la muerte de las neuronas que tienen receptores Glu. Muchas neuronas en el SNC tienen receptores Glu, asi la excitotoxicidad puede originar una cantidad enorme de daño al SNC. El daño por excitotoxicidad aguda puede acontecer como un resultado de eventos isquémicos, eventos hipóxicos, LL i. ?y ..¿, ^ ^^^.-^^A^ ^¡^x^^M A trauma al cerebro o médula espinal, ciertos tipos de alimentos venenosos, los cuales involucran un veneno excitotóxico tal como ácido domoico, y degeneración neuronal mediada por ataque aplopético, la cual puede resultar de la actividad del ataque aplopético, epiléptico persistente (estado epiléptico) . Un cuerpo amplio de evidencia ha implicado al receptor NMDA como un subtipo de receptor a través del cual el Glu media una cantidad substancial del daño al SNC, y está bien establecido que los antagonistas NMDA son efectivos en la protección de las neuronas del SNC contra la degeneración excitotóxica en estos síndromes de daño agudo al SNC (Choi (1988); Olney (1990)). Además del daño nervioso originado por los agravios agudos, la activación excesiva de los receptores Glu también puede contribuir a procesos neurodegenerativos más graduales que conducen a la muerte celular en varias enfermedades neurodegenerativas crónicas, incluyendo mal de Alzheimer, esclerosis lateral amiotrófica, demencia por SIDA, mal de Parkinson y mal de Huntington (Olney (1990) ) . Generalmente se considera que los antagonistas NMDA pueden probar la utilidad en el control terapéutico de las enfermedades crónicas .

En la década de los 80 se descubrió que el PCP (también conocido como 'polvo de ángel") actúa como un 'sitio de reconocimiento de PCP" dentro del canal iónico del receptor NMDA Glu. El PCP actúa como un antagonista competitivo que bloquea el flujo de iones a través del canal iónico de NMDA. Más recientemente, ha llegado a ser evidente que los fármacos los cuales actúan en el sitio de PCP como antagonistas de NMDA no competitivos son probablemente los que tienen efectos laterales sicotomiméticos . Además, ahora se reconoce que ciertos antagonistas NMDA competitivos y no competitivos pueden originar efectos patomorfológicos similares en el cerebro de rata (Olney et. al., (1991); Hargreaves et. al., (1993)). Tales compuestos también tienen efectos sicotomiméticos en humanos (Kristensen et. al., (1992); Herrling (1994); Grotta (1994)). El sitio de enlace de la glicina del complejo receptor NMDA es distinguible de los sitios de enlace del Glu y PCP. Además, se ha descubierto recientemente que los receptores NMD acontecen como varios subtipos los cuales se caracterizan por las propiedades diferenciales del sitio de enlace de la glicina del receptor. Muchos compuestos de enlace del sitio de glicina del receptor NMDA, útiles para el tratamiento de condiciones neurodegenerativas y ,.^'í. L*^**» A-*AA.~~?Á.Á*.iAjkJ apoplejía, se han descrito en las patentes Norteamericanas 5,604,227; 5,733,910; 5,599,814; 5,593,133; 5,744,471; 5,837,705 y 6,103,721.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Ahora se ha descubierto que un cierto compuesto el cual exhibe la propiedad de enlace al sitio de glicina del receptor NMDA, tiene una utilidad para el alivio del dolor y particularmente para el alivio del dolor neuropático. Por lo tanto, en un aspecto, la invención proporciona un compuesto, 7-cloro-4-hidroxi-2- (2-cloro-4-metilfenil) -1,2,5, 10-tetrahidropiridazino [4, 5-b] quinolin-1,10-diona, de acuerdo con el esquema estructural I; I.

En otro aspecto, la invención proporciona un método para el tratamiento de dolor usando un compuesto de acuerdo con el esquema estructural I, el método comprende ..a.L..¿J^^.jjtfa^->-.^-.^A-^fe-«- -AJAAÍ A¿ la administración de una cantidad efectiva del compuesto que alivia el dolor. En otra modalidad, el método comprende la administración de una cantidad efectiva que alivia el dolor, del compuesto de acuerdo con el esquema estructural I en la forma de una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con el esquema estructural I como un ingrediente activo conjuntamente con uno o más aditivos farmacéuticamente aceptables. En una modalidad adicional, el método comprende enlazar el compuesto de la invención al sitio de glicina del receptor NMDA de un animal de sangre caliente, tal como un ser humano, para inhibir de forma beneficiosa la actividad del receptor NMDA. Otro aspecto de la invención es un método para producir el compuesto de acuerdo con el diagrama estructural I. Todavía otros aspectos de la invención son las composiciones farmacéuticas las cuales contienen el compuesto de acuerdo con el esquema estructural I, y el uso del compuesto de acuerdo con el esquema estructural I para la preparación de los medicamentos y composiciones farmacéuticas . •* 1 i tolftfil ? ifli.i Descripción Detallada de la Invención La invención proporciona un compuesto, 7-cloro-4- hidroxi-2- (2-cloro-4-metilfenil) -1, 2, 5, 10-tetrahidropiri- dazino [4, 5-b] quinolin-1, 10-diona, sales farmacéuticamente 5 aceptables del mismo, métodos de producción del compuesto y sus sales, composiciones farmacéuticas que contienen el compuesto o sales del mismo y métodos para usar el compuesto, las sales y las composiciones farmacéuticas. Las sales farmacéuticamente aceptables, adecuadas 10 de los compuestos de la invención incluyen sales de adición del ácido tales como metansulfonato, fumarato, clorhidrato, bromhidrato, citrato, tris (hidroximetil) aminometano, maleato y sales formadas con ácido fosfórico y sulfúrico. En otras modalidades, las sales adecuadas son sales de base tales 15 como unas sales de metal álcali por ejemplo, sodio, sales de metal alcalino terreo por ejemplo calcio o magnesio, sales de amina orgánica por ejemplo trietilamina, morfolina, N- metilpiperidina, N-etilpiperidina, procaina, dibencilamina, colina, N,N-dibenciletilamina o amino ácidos tal como 20 lisina. Para usar el compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el tratamiento terapéutico, el cual puede incluir tratamiento profiláctico, ~,£¡, 4. i^^j ***.?.X* . *»- * ^.*x* *~*?m*~A*. A »iáM de dolor en mamíferos, los cuales pueden ser humanos, el compuesto se puede formular de conformidad con la práctica farmacéutica estándar como una composición farmacéutica. Las composiciones farmacéuticas adecuadas que contienen un compuesto de la invención se pueden administrar de formas convencionales, por ejemplo por administración oral, tópica, parenteral, bucal, nasal, vaginal o rectal o por inhalación. Para estos propósitos un compuesto de la invención se puede formular por medios conocidos en la técnica en la forma de, por ejemplo, tabletas, cápsulas, soluciones acuosas o aceitosas, suspensiones, emulsiones, cremas, ungüentos, geles, nebulizadores nasales, supositorios, polvos finamente divididos o aerosoles para inhalación, y para el uso parenteral (incluyendo intravenoso, intramuscular o infusión) emulsiones estériles o suspensiones o soluciones aceitosas o acuosas estériles. Una ruta de administración preferida es oralmente por medio de tableta o cápsula. Además de un compuesto de la presente invención una composición farmacéutica de esta invención también puede contener uno o más agentes farmacológicamente activos, o tal composición farmacéutica se puede co-administrar simultáneamente o consecutivamente con uno o más agentes farmacológicamente activos. Las composiciones farmacéuticas de esta invención normalmente se administrarán de modo que una dosis diariamente efectiva que alivia el dolor es recibida por el sujeto. La dosis diaria se puede dar en dosis divididas como sea necesario, la cantidad precisa recibida del compuesto y la ruta de administración dependen del peso, edad y sexo del paciente a ser tratado y en la condición de la enfermedad particular tratada de acuerdo con los principios conocidos en la técnica. Un régimen de dosificación preferido es una vez diaria. Una modalidad adicional de la invención proporciona una composición farmacéutica la cual contiene un compuesto de la invención como se define en este o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en asociación con un aditivo farmacéuticamente aceptable tal como un excipiente o portador. Una modalidad todavía adicional de la invención proporciona el uso de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento útil para enlazar el sitio de glicina del receptor NMDA en un animal de sangre caliente tal como un ser humano . Aún otra modalidad de la invención proporciona un método de enlace del compuesto de la invención al sitio de glicina del receptor NMDA de un animal de sangre caliente, tal como un ser humano, en necesidad del tratamiento para el dolor, el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de un compuesto del esquema estructural I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Definiciones : Generalmente en los métodos, procesos y ejemplos se describen en estos: concentraciones realizadas por evaporación rotatoria in vacuo; operaciones realizadas a temperatura ambiente, que está en el intervalo de 18-26°C y bajo una atmósfera de nitrógeno; cromatografia de columna (por el procedimiento instantáneo) realizada en silice de Merck Kieselgel (Art. 9385) a menos que se establezca de otra manera; rendimientos dados para la ilustración solamente y necesariamente no son los máximos alcanzables; la estructura de los productos finales de la fórmula I generalmente confirmados por técnicas de espectro de masa y RMN, espectros de resonancia magnética de protón determinados en DMSO-dß a menos que se establezca de otra forma usando un espectrómetro Varian Gemini 2000 que opera a una intensidad de campo de 300 MHz; cambios químicos reportados en partes por millón de campo descendente de tetrametilsilano como un estándar interno (escala d) y multiplicidades de pico mostradas asi: s, singlete; bs, singlete amplio; d, doblete; AB o dd, doblete de dobletes; t, triplete, dt, doble de tripletes, m, multiplete; bm, multiplete amplio; bombardeo rápido de átomos (por sus siglas en inglés, FAB) , datos de espectro de masa obtenidos usando un espectrómetro de Plataforma (suministrado por Micromass) corrido en electrorrocio y, donde sea apropiado, ya sea datos de iones positivos o datos de iones negativos colectados, en esta aplicación, (M+H)+ se cita; intermediarios generalmente no caracterizados completamente y pureza en análisis de RMN o espectro de masa (por sus siglas en inglés, EM) de valoración general. Las siguientes abreviaturas y definiciones cuando se usan, tienen los significados, como sigue: CDC13 es cloroformo deuterizado; ,,„.»«mtt«k ^??^M?^i Mk?^tS?»í.^¡t&?. ^S SiS&gJj^j^a- CMC es meto-p-toluensulfonato de 1- ciclohexil-3- (2-morfolinoetil) - carbodiimida DCM es diclorometano; DCU es diciclohexil urea; DHC es 1, 3-diciclohexilcarbodiimida; DMAP es 4- (dimetilamino) piridina; DMF es N, N-dimetilformamida; DMSO es dimetilsulfóxido; m/s es espectroscopia de masa; NMP es N-metilpirrolidinona; RMN es resonancia magnética nuclear; p.o. es per os; THF es tetrahidrofurano, y t.i.d. es tres veces diariamente. Los ejemplos y pruebas descritas en esta se proponen para ilustrar pero no limitar la invención.

Ejemplos: Ejemplo 1: El compuesto de la invención, 7-cloro-4-hidroxi-2-(2-cloro-4-metilfenil) -1,2,5, 10-tetrahidropiridazmo [4,5- -a*iÍÉÉ.^. faa^ b] quinolin-1, 10-diona, se puede preparar por el siguiente procedimiento : clorhidrato de 2-cloro-4-metil fenilhidrazina Una suspensión de 2-cloro-4-metil anilina (10.1 mL, 11.63 g, 82.1 mmol) en 64 L de agua y 60 mL de HCl 12 N a -5°C (temperatura interna) y se agitó con una agitador mecánico. Una solución de nitrito de sodio (8.26 g, 119.7 mmol) en 56 mL de agua se adicionó durante 30 minutos. La solución llegó a ser más clara pero permanece algo sólida. La mezcla se agitó a -5°C por 20 minutos y luego se enfrio a -10°C. Una solución de dihidrato de cloruro de estaño (II) (53.60 g, 237.6 mmol) en 36 mL de HCl 12N se adicionó por goteo durante 30 minutos mientras se mantenía a una temperatura interna de -5 a -10°C. La mezcla café rosácea resultante se agitó a -5 a -10°C por 2 horas y luego se filtró fria a través de un embudo de vidrio poroso pre-enfriado. Los sólidos colectados se lavaron con etanol frió al 1% en éter (100 mL) seguido por éter frió (500 L) y se secaron con aire por 30 minutos. Después del secado in vacuo, el producto deseado se obtuvo como un sólido cristalino amarillo casi pálido (7.76 g, 49%). A RMN d (300 MHz, CDC13) d 10.09 (bs, 2H) , 7.89 (s, 1H) , 7.25 (d, 1H, Jm = |ft Aa¿fc.»i..fc -*J¡)g¡W?* hl ¡,1í ¡ámÍ 8.4 Hz, Jm = 1.2 Hz) , 7.02 (d, 1H, J0 = 8.4 Hz), 2.24 (s, 3H) ; EM (Cl) m/z 157/159. (terc-butoxi) -N- [ (2-cloro-4-metilfenil) amino] carboxamida Una suspensión de clorhidrato de 2-cloro-4- metilfenilhidrazina (7.74 g, 40.09 mmol) en 95 mL de NaHC03 acuoso, saturado se agitó por 10 minutos y luego se trató con K2C03 sólido (9.45 g, 68.37 mmol). La suspensión de color amarillo claro fina, resultante se agitó por 10 minutos. Una solución de di-t-butildicarbonato (12.97 g, 46.12 mmol) en 195 L de THF se adicionó durante 5 minutos y la mezcla bifásica resultante se agitó vigorosamente por 3 horas. La mezcla de reacción se dividió y la capa acuosa se extrajo con éter (5 x 25 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua destilada (2 x 75 mL) , se secaron sobre MgS04, y se concentraron bajo presión reducida. El secado in vacuo produjo un aceite de color naranja claro (14.07 g) . El material se purificó por cromatografia instantánea sobre gel de silice usando 10:90 éter: hexanos como el eluyente. El producto se obtuvo como un aceite amarillo claro el cual se solidificó hasta el asentamiento (9.92 g, 96%). A RMN (300 MHz, CDC13) d 8.88 (s, 1H) , 7.15 (s, 1H) , 7.09 (d, 1H, Jra = , -a- , - • i * ¡a& 1.2 Hz), 6.97 (d, 1H, J0 = 8.1 Hz) , 6.64 (d, 1H, Js = 8.1 Hz), 2.18 (s, 3H) , 1.41 (s, 9H) ; EM (Cl) m/z 279/281. 7-cloro-4-hidroxiquinolin-2, 3-dicarboxilato de dimetilo Una mezcla agitada de 2-amino-4-clorobenzoato de metilo (2.50 g, 13.5 mmol) y acetilendicarboxilato de dimetilo (2.05 g, 14.4 mmol) en terc-butanol (22 ml) se sometió a reflujo por 7 horas bajo una atmósfera de nitrógeno. Después de la adición de acetilendicarboxilato de dimetilo adicional (1.16 g, 8.13 mmol) y reflujo otras 2.5 horas, la mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y terc-butóxido de potasio (1.56 g, 13.9 mmol) se adicionó en una porción. Se formó un precipitado y la mezcla resultante se sometió a reflujo por 1.5 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró para separar los sólidos, los cuales se lavaron con terc-butanol y éter. Los sólidos se disolvieron en agua y se acidificaron con ácido sulfúrico 1 N para formar un precipitado. La mezcla resultante se extrajo con cloruro de metileno y los extractos combinados se lavaron con salmuera y agua, se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron para producir un sólido verde. La recristalización de este ^..M?S^y'?M. material a partir de metanol proporcionó el compuesto del titulo (1.15 g, 47%) como un sólido blancuzco, p.f. 232-233°C; EM (CI):296 (M+H). Análisis para C?3H?0ClNO5: Calculado: C, 52.81; H, 3.41; N, 4.74; Encontrado: C, 52.75; H, 3.47; N, 4.69.

Acido 3-carbometoxi-7-cloro-4-hidroxiquinoIin-2-carboxilico A una suspensión agitada de 7-cloro-4-hidroxiquinolin-2, 3-dicarboxilato de dimetilo (1.0 g, 3.38 mmol) en agua (20 mL) se adicionó una solución acuosa de hidróxido de sodio (0.27 g, 6.75 mmol) . Hasta la adición, la suspensión se disolvió. La mezcla de reacción se calentó a 60°C por 1 hora. Después de este tiempo la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se acidificó con ácido clorhídrico concentrado. El producto luego se extrajo en éter dietilico y acetato de etilo. Los extractos orgánicos se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron in vacuo para proporcionar el compuesto del titulo como un sólido (900 mg) . Este material se purificó por recristalización empleando un sistema co-solvente de acetato de etilo/hexano para proporcionar el compuesto del titulo (571 mg, 60%) como un sólido blanco, p.f. 296°C (dec); EM (CI):238 (M+H). Análisis para C?2H8N05Cl. 0.45 CH3C02CH2CH3. 0.10 H20: Calculado: C, 51.30; H, 3.68; N, 4.34; Encontrado: C, 51.28; H, 3.62; N, 3.97. XH RMN 8.22 (d, J = 8.7 Hz, 1H) , 7.92 (d, J = 1.8 Hz, 1H) , 7.28 (dd, J = 8.7, 1.8 Hz, 1H) , 3.90 (s, 3H) . 3-carbometoxi-2-pirrolidincarbamida-7-cloro- -hidroxiquinolina : A una suspensión de ácido 3-carbometoxi-7-cloro-4-hidroxiquinolin-2-carboxilico (2.25 g, 8.0 mmol) en THF (20 mL) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de N2 se adicionó diciclohexilcarbodiimida (1.65 g, 8.0 mmol) y pirrolidina (0.596 g, 8.4 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por 15 horas, después de este tiempo el sub-producto urea se removió via filtración. El producto deseado se purificó via cromatografia de columna instantánea empleando metanol al 5% en cloroformo para proporcionar el compuesto del titulo (2.52 g, 94.3%) como un sólido color canela, p.f. = 215°C; EM (CI):335 (M+H). 300 MHz XH RMN (DMSO-de): d 8.12 (d, J = 8.7 Hz, 1H) , 7.60 (d, 1H, J = 1.8 Hz), 7.47 (dd, 1H, J = 8.8, 2.0 Hz) , 3.69 (s, 3H) , 3.40-3.49 (m, 2H) , 3.27-3.33 (m, 2H) , 1.80-1.96 (m, 4H) . >hii--t.J«. i «tt- Acido 7-cloro-4-oxo-2- (pirrolidinilcarbonil) - hidroquinolin-3-carboxilico A una suspensión de 3-carbometox?-2- pirrolidincarbamida-7-cloro-4-hidroxiquinolina (2.52 g, 7.5 mmol) en agua des-ionizada (40 mL) se adicionó por goteo una solución (20 mL) de un hidróxido de potasio acuoso (882 mg, 15.75 mmol). Hasta la terminación de la adición, la reacción se calentó a 60°C. Después de 3 horas, la reacción se filtró para remover una pequeña cantidad de material insoluble. El filtrado luego se acidificó a pH = 1 el cual produjo un precipitado blanco. El sólido se aisló por filtración a vacio, se lavó con agua, y se secó a 30°C in vacuo por 16 horas. Esto proporcionó el compuesto del titulo (1.5 g, 64%) como un sólido blanco, pf = 225-8°C; EM (Cl) : 321 (M+H) . 300 MHz A RMN (DMSO-de): d 8.28 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 7.77 (s, 1H), 7.64 (d, 1H, J = 8.7), 3.52-3.57 (m, 2H) , 3.17-3.19 (m, 2H) , 1.83-1.98 (m, 4H) .

N- [ (terc-butoxi) carbonilamino] [7-cloro-4-oxo-2- (pirrolidinilcarbonil) (3-hidroquinolil) ] -N- (2-cloro-4- metilfenil) carboxamida A una suspensión agitada de ácido 7-cloro-4-oxo-2- (pirrolidinilcarbonil) hidroquinolin-3-carboxilico (14.57 g, 45.43 mmol) y THF anhidro (300 mL) bajo nitrógeno se adicionó meto-p-toluensulfonato de l-ciclohexil-3- (2-morfolinoetil) carbodimida (CMC, 34.89 g, 82.37 mmol). La suspensión blanca inmediatamente llegó a ser amarilla clara. La (terc-butoxi) -N- [ (2-cloro-4-metilfenil) amino] carboxamida (13.89, 54.10 mmol) se adicionó como un sólido seguido por 50 mL de THF anhidro. La mezcla de reacción amarilla clara se agitó a temperatura ambiente por 22 horas. Una segunda porción de CMC (16.77 g, 39.59 mmol) se adicionó a la mezcla de reacción. Después de 2.5 horas a temperatura ambiente, la reacción se calentó a 60°C por 5.5 horas. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró y los sólidos colectados se lavaron con THF. El filtrado y los lavados se concentraron y secaron in vacuo para producir una espuma amarilla clara. El material se disolvió en cloruro de metileno (400 mL) , se lavó con agua destilada (2 x 150 mL) , y se extrajo con NaHC03 al 10% (2 x 500 mL) . La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se concentró y se secó in vacuo para producir una espuma de color canela claro. El material se purificó por cromatografia instantánea sobre gel de silice usando un gradiente de 95:5 a 85:15 cloroformo :metanol como eluyente para producir 15.42 g (61%) del producto deseado como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, -,^A¿8íxik?*eA«im.

DMSO-de) d 13.03 (bs, 1H) , 9.19 (bs, 1H) , 8.25 (d, H, JD = 8.7 Hz), 7.68 (d, 1H, Jm = 1.8 Hz) , 7.54 (dd, 1H, J0 = 8.7 Hz, Jm = 1.8 Hz), 7.50 (d, 1H, Jm = 1.8 Hz) , 7.45 (d, 1H, JQ = 7.8 Hz), 6.81 (d, 1H, J0 = 7.8 Hz) , 3.47 (m, 4H) , 2.34 (s, 3H), 1.90 (m, 4H) , 1.40 (s, 9H) ; EM (-CI) m/z 559/561. 7-cloro-4-hidroxi-2- (2-cloro-4-metilfenil) - 1,2,5, 10-tetrahidropiridazino [4, 5-b] quinolin-1, 10-diona A una suspensión agitada de N-[ (tercbutoxi) carbonilamino] [7-cloro-4-oxo-2- (pirrolidinilcarbonil) (3-hidroquinolil) ] -N- (2-cloro-4-metilfenil) carboxamida (21.16 g, 37.82 mmol) en 900 mL de THF anhidro, bajo nitrógeno se adicionó lentamente ácido metansulfónico (120.0 mL, 184.9 mmol). La solución amarilla obscura resultante se agitó a temperatura ambiente por 18 horas. La solución se vertió en 7 L de agua, se agitó 3 horas, y se filtró para producir un sólido amarillo claro. El sólido se sometió a tratamiento sónico en metanol, se aisló por filtración, y se secó in vacuo (30 mm) a 40°C para producir el producto como un sólido blanco (12.93 g, 88%). A RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 12.90 (bs, 1H) , 12.10 (bs, 1H) , 8.16 (d, 1H, J0 = 8.7 Hz) , 8.07 (d, 1H, Jm = 1.8 Hz), 7.47 (dd, 1H, J0 = 8.7 Hz, Jm = 1.8 Hz), 7.47 (d, 1H, Jra = 12. Hz) , 7.42 (d, 1H, J0 = 8.1 Hz), 7.29 (dd, 1H, J0 = 8.1 Hz, Jm = 1.2 Hz), 2.38 (s, 3H) ; EM (Cl) m/z 388/390/392. Calculado para C?8HnCl2N303: C, 55.69; H, 2.86; N, 10.82; Encontrado: C, 55.78; H, 2.89; N, 10.79.

Ejemplo 2: Sal de colina de 7-cloro-4-hidroxi-2- (2-cloro-4-metilfenil) -1,2,5, 10-tetrahidropiridazino [4, 5-b] quinolin- 1, 10-diona Una suspensión de 7-cloro-4-hidroxi-2- (2-cloro-4-metilfenil) -1,2,5, 10-tetrahidropiridazin [4, 5-b] quinolin-1,10-diona (753 mg, 1.94 mmol) en metanol (50 mL) se trató con hidróxido de colina (550 mL de una solución al 45% en metanol, 1.94 mmol). La mayoria de los sólidos se disolvió inmediatamente y la mezcla se sometió a tratamiento sónico por 10 min para disolver el resto. La solución se filtró a través de un filtro de jeringa de nylón de 0.2 mieras. La solución se redujo por evaporación rotatoria a 1.01 g (>100%) del sólido amarillo. El sólido se recristalizó a partir de etanol de reflujo (25 L) , y la solución se dejó cristalizar lentamente y sin agitación. Después de alrededor de 2 h, los cristales se colectaron por filtración a vacio. El sólido amarillo se secó con aire para producir (696 mg, 73%) del compuesto del título, el cual se recristalizó a partir de etanol de reflujo (20 mL) . Los sólidos se dejaron formar durante 16 h, y se desecharon suavemente del matraz y se colectaron por filtración a vacío y se lavaron con etanol (2 x 3 mL) para producir 500 mg del compuesto del título, lo cual hasta el secado a 100 mTorr a 30°C por tres días proporcionó 480 mg del compuesto del título (50%). Pf 239.5-240.5°C (descomp.); 4í RMN (300 MHz, DMSO-de) d (8.12-8.09 (2H, m) ; 7.34-7.17 (4H, m) ; 3.86-3.80 (2H, m) ; 3.39 (2H, t, J = 5.25 Hz); 3.09 (9H, s) ; 2.35 (3H, s) ; Calculado para Ci8H?oN303Cl2»1.0 C5H?4NO»0.6 H20: C, 55.01; H, 5.06; N, 11.16; Encontrado: C, 55.04, 54.75; H, 4.86, 4.86; N, 11.05, 11.07.

Pruebas para la Función Biológica: Prueba A: Inhibición del enlace de [3Hj -MDL105, 519: Membranas del Cerebro de Ratas: Las membranas del cerebro de ratas usadas en los experimentos se obtuvieron de Analytical Biological Services Inc., y se prepararon substancialmente de acuerdo con el método de B.M. Barón et al . , J. Pharmacol . Exp. Ther. 250, 162 (1989). Brevemente, el tejido del cerebro fresco incluyendo la corteza cerebral y el hipocampo de las ratas macho Sprague Dawley se homogeneizó en sucrosa 0.32 M y se centrifugó a baja tfrfci jL Aa fAf(Hy.* .*e*á**»?Í velocidad para separar las membranas celulares de los otros componentes celulares. Las membranas luego se lavaron 3 veces usando agua desionizada, seguido por el tratamiento con Tritón X-100 al 0.04%. Finalmente, las membranas se lavaron seis veces en solución amortiguadora de Tris citrato 50 mM, pH 7.4, y se congelaron a -80°C hasta el uso. El [3H]MDL105,519 (72 Ci/mmol) se adquirió de Amersham. El MDL105,519 frió se adquirió de Sigma/RBI. Los ensayos de enlace se realizaron substancialmente de acuerdo con el protocolo de B.M. Barón et al . , J. Pharmacol . Exp. Ther. 279, 62 (1996), como sigue. El dia del experimento, las membranas del cerebro se descongelaron a temperatura ambiente y se suspendieron en solución amortiguadora de tris acetato 50 mM, pH 7.4 ('TAB"). Setenta y cinco micro gramos por mililitros de proteina (usando el tinte BioRad) se usaron para el enlace de competición. Los experimentos se realizaron usando placas de 96 pocilios. Las membranas se incubaron con 20 µL de compuestos de varias concentraciones y [3H]MDL105, 519 1.2 nM por 30 minutos a temperatura ambiente en un volumen total de 250 µl . Ningún enlace especifico se determinó usando 100 µM de MDL105,519 no etiquetado. El MDL105,519 no etiquetado y los compuestos se disolvieron como soluciones madre de 12.5 mM en DMSO. La concentración final de DMSO en cada pocilio se mantuvo por debajo de 1%, se encontró que la concentración no altera los resultados de enlace. Después de la incubación, el [3H]MDL105, 519 no ligado se removió por filtración sobre placas GF/B Unifilter usando una segadora Packard. Los filtros se lavaron cuatro veces con TAB enfriado con hielo (total de solución amortiguadora de 1.2 mL) . Las placas se secaron durante la noche a temperatura ambiente y la radioactividad de enlace se midió sobre un Packard TopCount después de la adición de 45 µL por pocilio del MICROSCINT 0. La potencia de un compuesto se expresa como el Ki y los resultados se calcularon usando software GraphPad Prizm y hoja de cálculo de Microsoft Excel .

Membranas del Cerebro Humano: Las membranas del cerebro humano se obtuvieron de Analytical Biological Services Inc., y los ensayos se realizaron como se describe para las membranas de ratas.

Prueba B: Prueba de Formalina: La prueba de Formalina valora los efectos inhibidores de los compuestos administrados oralmente en las reacciones nociceptivas inducidas por formalina en las ratas (D. Dubuisson, et al . , Pain 4, 161-174 (1977); H. Wheeler- Aceto et al . , Psychopharmacology 104, 35-44 (1991); T.J. Coderre, et al . , Pain 54, 43-50 (1993)). En esta prueba, dos fases distintivas de reacciones inducidas por formalina se observaron. Una primera respuesta de fase, originada por la nocicepción aguda al químico nocivo (formalina) inyectado en la pata, ocurre entre los minutos cero y cinco. Siguió un período inmóvil de 5 a 15 min de la postinyección. Después del período inmóvil una segunda respuesta de fase, originada por la activación de las neuronas centrales en el cuerno dorsal, ocurre después de 15 minutos y duró hasta 60 minutos. La activación central aumenta una entrada aferente nociva y origina una barrera fuerte de dolor para ser transmitida al cerebro. La inhibición de la segunda respuesta de fase indica un mecanismo central de la acción del fármaco.

El procedimiento para la prueba de formalina es como sigue: las ratas macho se colocaron en una cámara acrílica y se observaron por 30-45 min para observar su actividad de línea de base. Los múltiples grupos de animales se pre-trataron ya sea con vehículos o dosis diferentes de un compuesto de prueba. Los animales se dosificaron 3 horas previo a la inyección de formalina en una garra posterior (bajo la piel dorsal) con 0.05 L de formalina al 1% estéril. El número de garras contraídas (respuestas) durante la primera fase (0-5 min) y la segunda fase (20-35 min) se registra y graba. La respuesta de contracción se calcula como el porcentaje de inhibición comparada con el registro medio de un grupo de control salino. El ED5 es la dosis del compuesto el cual produce 50% de inhibición de la respuesta nociceptiva. % de inhibición de la respuesta nociceptiva - 100 x (rutera ce respuestas a el grupo fe ^IÍ?IIO - rutero fe a=s ?=s¡fcas en el grupo ce ptpjes D) (rúrerD ce xenp, estas en éL grupo efe ^ íaiLo) La prueba t de Student se uso para el análisis estadístico para determinar el significado de los efectos del compuesto. Los datos se consideran activos basados en su capacidad para inhibir las respuestas de contracción.

Prueba C: modelo del dolor neuropático (Daño de Constricción Crónico) : La prueba del Daño de Constricción Crónico (por sus siglas en inglés, 'CCI") modela el dolor asociado con los daños nerviosos que pueden surgir directamente de trauma y compresión, o indirectamente de un amplio intervalo de enfermedades tales como infección, cáncer, condiciones metabólicas, toxinas, deficiencias nutricionales, disfunción immunológica, y cambios musculoesquelétícos . En el modelo una hiperalgesia periférica unilateral se produce en las ratas por la ligadura de nervios (G.J. Bennett, et al . , Pain 33, 87-107 (1988)). De manera procesal, las ratas Sprague-Dawley (250- 350 g) se anestesiaron con pentobarbital de sodio y el nervio ciático común se expuso al nivel del muslo medio mediante la disección roma a través de los bíceps femorales. Una sección del nervio (alrededor de 7 mm) , próximo a la trifurcación ciática, se liberó del tejido y se ligó a cuatro posiciones con suturas crómicas de intestinos. La sutura se une con alrededor de 1 mm espaciada entre las ligaduras. La incisión se cerró en las capas y los animales se dejaron recuperar. La hiperalgesia termal se midió usando una prueba de retiro de garra (K. Hargreaves, et al . , Pain 32, 77-88 (1988) ) . Para realizar la prueba, los animales se habituaron en un piso de cristal elevado. Una fuente de calor radiante se apuntó a la garra posterior plantar media (territorio del nervio ciático) a través del piso de cristal con un corte de 20 segundos usado para prevenir el daño a la piel. Las latencias para el reflejo de retiro en ambas garras posteriores se registraron. Las garras dañadas con nervios ligados muestran las latencias de retiro de garra más cortas comparadas con las garras substitutas operadas o no dañadas. Las respuestas a los compuestos de prueba se evalúan a diferentes tiempos después de la adminis'tración oral para determinar el comienzo y duración del efecto del compuesto. Los estudios de la respuesta de dosis se condujeron con múltiples grupos de ratas CCI dosificadas oralmente con ya sea el vehículo o el compuesto de prueba tres veces diariamente con ya sea el vehículo o el compuesto de prueba por 5 días. Las latencias de retiro de garras se miden cada día 10 min antes y 2 ó 3 horas después de la primera dosis diaria. La eficacia se calcula como el porcentaje de disminución promedio de hiperalgesia durante 5 días de dosificación comparada con el grupo tratado con vehículo. Las potencias del compuesto se expresan como la dosis minima efectiva (MED) en mg/kg/día que los rendimientos de una disminución % en hiperalgesia que es estadísticamente significativa, donde el efecto anti-hiperalgésico se determina como sigue: % de anti-hiperalgesia = (Pranedio del grupo de vehículo - Pranedio del grupo de catpuesto)xl00 (PraiBdio del grupo de vehículo) Los análisis de datos se realizaron por comparación de promedio múltiple (prueba de Dunnett) . La Tabla 1 muestra los resultados de las Pruebas A, B y C para el compuesto de la invención.

Tabla 1 En el modelo del dolor por formalina la dosis efectiva del compuesto de la invención que origina una disminución de 50% en la sensibilidad para un estimulo doloroso es aproximadamente 100 mg/kg la dosis es comparable a la dosis de la gabapentina requerida para lograr un resultado similar. En el modelo CCI del dolor neuropático, la dosis mínima efectiva del compuesto de la invención es menor que 2 mg/kg/día para lograr 65% de anti-hiperalgesia. En comparación, alrededor de 90 mg/kg/día de gabapentina se requiere para lograr alrededor de 46% de anti-hiperalgesia. Cuando se administra por inyección intra-renal, el compuesto de la invención inhibe el desarrollo de la reacción/ataque aplopético inducido por NMDA con un ED50 de 110 nmol. El compuesto de la invención también se sometió a prueba para el enlace a un grupo de más de 80 receptores sin NMDA. El compuesto mostró interacción no significativa con cualquier receptor probado diferente del receptor NMDA. Se hace constar que con relación a esta fecha el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención. ?É,.??¡.f. y,.*UALy y .M.t&?AÍ

Claims (6)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. 7-cloro-4-hidroxi-2- (2-cloro-4-metilfenil) - 1,2,5, 10-tetrahidropiridazino [4, 5-b] quinolin-1, 10-diona o sales farmacéuticamente aceptables de la misma.

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la sal farmacéuticamente aceptable del mismo es una sal de colina.

3. Un método para el tratamiento del dolor, caracterizado porque el método comprende la administración de una cantidad efectiva que alivia el dolor del compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

4. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, como un ingrediente activo conjuntamente con uno o más aditivos farmacéuticamente aceptables.

5. Un método para el tratamiento del dolor, caracterizado porque el método comprende la administración de una cantidad efectiva que alivia el dolor del compuesto de conformidad con la reivindicación 2.

6. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 2 como un ingrediente activo conjuntamente, con uno o más aditivos farmacéuticamente aceptables. RESUHEN DE LA INVENCIÓN La presente invención describe un compuesto, 7-cloro-4-hidroxi-2- (2-cloro-4-metilfenil) -1,2,5, 10-tetrahidropiridazino [4, 5-b] quinolin-1, 10-diona, sales farmacéuticamente aceptables del mismo, un método para el tratamiento del dolor que comprende la administración de una cantidad efectiva que alivia el dolor del compuesto y composiciones farmacéuticas que contienen el compuesto. oi b tSS