MXPA02001753A - Analogos de nucleosido de pirrolo [2,3-d]pirimidina. - Google Patents

Abstract

Se presentan composiciones y metodos para analogos de nucleosido de pirrolo[2,3- dlpirimidina que tienen sustituyentes en las posiciones C4' y C5' de la porcion ribofuranosa. Las composiciones contempladas muestran, entre otras cosas, efectos anticancerigenos e inmunomoduladores a citotoxicidad reducida.

Description

ANÁLOGOS DE NÚCLEOSIDO DE PIRRÓLO [2 , 3-d] PIRIMIDINA CAMPO DE LA INVENCIÓN El campo de la invención son los análogos de nucleósido.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los análogos de nucleósido se han utilizado durante mucho tiempo como antimetabolitos para el tratamiento de canceres e infecciones virales. Después de entrar a la célula, los análogos de nucleósido con frecuencia son fosforilados por las vías de aprovechamiento de nucleósidos en las cuales los análogos habitualmente se fosforilan a monofosfatos, difosfatos y trifosfatos correspondientes. Entre otros destinos intracelulares, los análogos de nucleósido trifosforilados con frecuencia se utilizan como un sustrato para ADN o ARN polimerasas y en consecuencia se incorporan en el ADN o ARN. Cuando los análogos de nucleósido trifosforilados son inhibidores fuertes de polimerasa, pueden inducir finalización prematura de una molécula naciente de ácido nucleico. Cuando los análogos de nucleósido trifosforilados se incorporan en replicados o transcritos de ácido nucleico, pueden resultar en expresión de genes o interrupción de funciones. A nivel más celular, los análogos de nucleósido también pueden interferir con el ciclo celular, y especialmente los efectos deseables de los análogos de nucleósido incluyen inducción de apoptosis de células cancerosas. Además, también se sabe que los análogos de nucleósido modulan ciertas respuestas inmunes. Se conocen en la técnica diversos análogos de nucleósido con actividad anticancerígena relativamente potente. Por ejemplo, los medicamentos conocidos incluyen inhibidores de timidilato sintasa tales como 5'-fluorouridina, inhibidores de adenosina desaminasa que incluyen a 2-cloroadenosina y neplanocina A, el cual es un inhibidor de S-adenosilhomocisteina hidrolasa. Sin embargo, todos o casi todos los análogos de nucleósido conocidos también implican un riesgo para células normales de mamífero debido principalmente a que estos análogos de nucleósido carecen de selectividad adecuada entre células normales y células tumorales. Desafortunadamente, la carencia de una selectividad adecuada con frecuencia se asocia con efectos colaterales graves, y por lo tanto con frecuencia limita el potencial terapéutico de tal análogo. Aunque existen diversos análogos de nucleósidos conocidos en la técnica, todos o casi todos ellos adolecen de una o más desventajas. Por lo tanto, aún existe la * <<*.. && - necesidad de proporcionar métodos y composiciones mejoradas para análogos de nucleósido.

DESCRIPCIÓN BREVE DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con análogos de nucleósido con modificaciones en las porciones azúcar de los análogos de nucleósido de pirrólo [2, 3-d]pirimídina, los cuales pueden reducir significativamente la toxicidad de los análogos de nucleósido a las células de mamífero y al mismo tiempo proporcionan citotoxicidad importante a las células cancerosas. Estas modificaciones incluyen, pero no se limitan a sustituciones en las posiciones C4 ' y C5 ' de las porciones de ribofuranosa. La presente invención también demuestra que algunos análogos de nucleósido de pirrólo [2,3-djpirimidina tienen efectos de inmunomodulación deseados, que incluyen mejoramiento de las citocinas tipo 1 tales como IL-2 y supresión de las citocinas tipo 2, tales como IL-4. Estas propiedades de inmunomodulación pueden ser útiles como anticancerígenos, antivirales y en enfermedades autoinmunes, en el tratamiento de inflamación para evitar el rechazo de injerto. En un aspecto de la materia objeto de la invención, el análogo de nucleósido es un nucleósido de pirrólo [2, 3-d] pirimidina que tiene una estructura de acuerdo - con la fórmula (I) en donde A es O, S o CH2; X es H, NH2 u OH; Y es H, halógeno o NH2; Z se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NR2, CN, C(0)NH2, COOH, COOR, CH2NH2, C(=NOH)NH2 y C(=NH)NH2, en donde R es alquilo, alquenilo, alquinilo o aralquilo; R2 y R3 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de H, F y OH; R4 se selecciona del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R4 opcionalmente tiene por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional; R5 es H, OH, OP(0)(OH)2, P(0)(OH)2, OP(0)(OR')2 o P(0)(OR')2, en donde R' es un grupo de enmascaramiento; y R5. se selecciona del grupo que consiste de un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R5< tiene por lo menos dos átomos de carbono, y opcionalmente por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional . En otro aspecto de la materia objeto de la invención, el análogo de nucleósido es un nucleósido de pirrólo [2, 3-d] pirimidina que tiene una estructura de acuerdo con ía fórmula (II) : en donde Z es CN, C(0)NH2, C(=NH)NH2 o C(=N0H)NH2 y R4 y R5. se seleccionan independientemente del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R4 y R5. de manera independiente y opcional contienen por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional; con la condición de que R4 y R5. no son juntos hidrógeno. En un aspecto adicional de la materia objeto de la invención, los compuestos contemplados se utilizan para - inhibir el crecimiento tumoral o modular la producción de citocina tipo 1 y tipo 2 o la de quimiocina. Diversos objetivos, características, aspectos y ventajas de la presente invención se volverán más evidentes a partir de la siguiente descripción detallada de las modalidades preferidas de la invención, junto con los dibuj os anexos .

DESCRIPCIÓN BREVE DEL DIBUJO La figura 1 es un primer esquema de síntesis ejemplar de las reacciones incluidas en la producción de compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención. La figura 2 es un segundo esquema de síntesis ejemplar de las reacciones incluidas en la producción de compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención. La figura 3 es un tercer esquema de síntesis ejemplar de las reacciones incluidas en la producción de compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención. La figura 4 es un cuarto esquema de síntesis ejemplar de las reacciones incluidas en la producción de compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención. La figura 5 es un quinto esquema de síntesis ejemplar de las reacciones incluidas en la producción de compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención.

La figura 6 es un sexto esquema de síntesis ejemplar de las reacciones incluidas en la producción de compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención. La figura 7 muestra compuestos ejemplares, de acuerdo con la materia objeto de la invención. Las figuras 8A y 8B son gráficas que representan el efecto de los compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención en la expresión de citocinas tipo 1 y tipo 2, respectivamente. La figura 9 es una gráfica que muestra la inhibición de la liberación de VEGF de células de cáncer de próstata humana cuando se tratan con compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención. La figura 10 es una gráfica que muestra la inhibición de liberación de IL-8 de células de cáncer de próstata humana cuando se tratan con compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención. La tabla 1 es una tabla que indica la citotoxicidad de diversos compuestos, de acuerdo con la materia objeto de la invención.

- - La tabla 2 es una tabla que indica las tasas de síntesis de ADN en células tratadas con los diversos compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención.

DESCRIPCIÓN DETALLADA Los análogos de nucleósido de pirrólo [2,3-d] pirimidina de acuerdo con las fórmulas generales (I) y (II) se encuentra que tienen diversos efectos biológicos en células normales e hiperproliferativas. en donde A es O, S o CH2; X es H, NH2 u OH; Y es H, halógeno o NH2; Z se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NR2, CN, C(0)NH2, COOH, COOR, CH2NH2, C(=NOH)NH2 y C(=NH)NH2, en donde R es alquilo, alquenilo, alquinilo o aralquilo; R2 y R3 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de H, F y OH; R se selecciona del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R opcionalmente tiene por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional; R5 es H, OH, 0P(0) (0H) , P(0) (0H)2, OP(0)(OR')2 o P(0)(OR')2/ en donde R' es un grupo de enmascaramiento; y R5. se selecciona del grupo que consiste de un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R5- tiene por lo menos dos átomos de carbono, y opcionalmente por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional . Se apreciará especialmente que los términos "alquilo", "alquenilo", "alquinilo" y "aralquilo", como se utilizan en la presente, se refieren a especies lineales y • ramificadas. Con respecto a los sustituyentes R2 y R3, se debe apreciar que tanto R2 como R3 se pueden dirigir independientemente a la cara a o ß. Además, cuando los sustituyentes de C5- no son idénticos, la sustitución en C5 puede resultar en un centro quiral R o S. El término "heteroátomo" como se utiliza en la presente, se refiere a átomos que no son de carbono en una molécula orgánica, y los heteroátomos contemplados particularmente incluyen halógenos, nitrógeno, oxígeno y azufre. El término "grupo funcional" como se utiliza en la presente, se refiere a un enlace reactivo (por ejemplo un enlace doble o triple) o un grupo reactivo (por ejemplo -OH, -SH, -NH2, -N3, -CN, COOH. -CHO, -C0NH2, etc.) . Los análogos de nucleósido de pirrólo [2, 3- - 1 d] irimidina contemplados particularmente son aquellos de acuerdo con la fórmula (I) en donde Z es CN, C(0)NH2 o C(=NH)NH2, y en donde R5. tiene por lo menos dos átomos de carbono y se selecciona del grupo que consiste de un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo. El análogo de nucleósido de pirrólo [2,3-d] pirimidina de acuerdo con la fórmula (II) tiene la siguiente estructura: en donde Z es CN, C(0)NH2, C(=NH)NH2 o C(=N0H)NH2 y R4 y R5-se seleccionan independientemente del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R4 y R5-# de manera independiente y opcional contienen por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional; con la condición de que R y R5- no .son juntos hidrógeno; y en donde los sustituyentes remanentes - son como se definen en la fórmula (I) . Sin embargo, se debe apreciar que los compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención también pueden estar en formas y formulaciones diferentes a las descritas previamente, y las formas contempladas especialmente incluyen formas de precursores o formas modificadas de alguna otra manera en las cuales las moléculas contempladas se modifican química o enzimáticamente, o de ambas maneras, para mejorar las propiedades farmacológicas o farmacodinámicas, o ambas, y que incluyen una mayor especificidad hacia los órganos objetivo, células o compartimientos celulares y un tiempo de vida media aumentado en el organismo. Por ejemplo, se pueden formar aductos de colesterol para incrementar la especificidad dirigida hacia el hígado, o se pueden formar aductos de apolipoproteína para mejorar la penetración del medicamento modificado a través de la barrera hematoencefálica al cerebro. En otro ejemplo, los complejos de ligando y receptor se pueden sintetizar para dirigir el medicamento modificado a una célula particular que exprese un receptor específico para el ligando. Alternativamente, se pueden formar anticuerpos o complejos de fragmento de anticuerpo para mejorar el suministro selectivo del medicamento modificado a un lugar subcelular. Existen muchos precursores y formas modificadas conocidas en la técnica, y se contemplan particularmente formas de precursores que incluyen los precursores descritos en la solicitud provisional de E.U.A. 60/216418, presentada el 04/17/00, e incorporada en la presente como referencia. En ejemplos adicionales, se pueden agregar grupos cargados o sin carga, lipofílicos o polares a moléculas contempladas para mejorar el tiempo de vida media en suero o en otros órganos o células objetivo. En ejemplos adicionales, se debe apreciar que los compuestos contemplados, cuando se fosforilan en el átomo C5 también pueden estar difosforilados o trifosforilados, o bien incorporar un trifosfato. Aunque generalmente se prefiere que los compuestos contemplados tengan una porción azúcar en la configuración D, también se contempla que los compuestos pueden tener una porción azúcar en la configuración L. Los aspectos estereoquímicos adicionales especialmente incluyen las configuraciones R y S en el átomo de C5 cuando sea apropiado, y se debe apreciar que los sustituyentes en los compuestos contemplados se pueden dirigir a la fase o ß. También se debe apreciar que los compuestos contemplados se pueden formular en diversas formulaciones que incluyen formas líquidas, de jarabe o de gel (por ejemplo, para inyección, ingestión o administración tópica) y formas sólidas (por ejemplo para ingestión, inyección o deposición en una cavidad corporal) . Por ejemplo, cuando se - considera que los compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención son inestables en el ambiente gástrico, se contempla particularmente la inyección de una solución preferiblemente isotónica. Alternativamente, puede ser apropiada la aplicación intranasal o la inhalación de una forma líquida para evitar la degradación por ácido. Por otra parte, cuando se sabe que los compuestos contemplados son resistentes a la degradación digestiva, las formas contempladas se pueden administrar en forma de un jarabe o tableta. En base en el uso particular, los compuestos contemplados también se pueden formular para aplicaciones tópica o transdérmica. Existen muchas más formulaciones conocidas en la técnica, todas las cuales también se contemplan como adecuadas junto con la materia objeto de la invención que se presenta aquí, y se contemplan particularmente formulaciones como se describen en "Drug Products for Clinical Triáis: An Intl. Guide to Formulation. Production. Quality Control" por Donald C. Monkhouse and Christopher T. Rhodes (Editores); ISBN: 082479852X. Se apreciará además que los compuestos y formulaciones contempladas pueden incluir aditivos funcionales y no funcionales. Por ejemplo, cuando se desea el suministro transcutáneo del medicamento, se deben agregar mejoradores de penetración cutánea. Alternativamente, se pueden agregar sustancias farmacéuticas que incluyen agentes citostáticos, antivirales o inmunomoduladores para mejorar sinergística o aditivamente la función de los compuestos contemplados. Los ejemplos de aditivos no funcionales incluyen materiales de relleno, antioxidantes, agentes de sabor o de color para mejorar la calidad particular de los compuestos contemplados. Con respecto a la concentración de los compuestos contemplados, se prefiere que la concentración este en el intervalo de aproximadamente 1 µM a aproximadamente 100 µ cuando se mide en el sitio de acción. Sin embargo, y particularmente cuando la afinidad de los compuestos contemplados es inferior 1 µM, las concentraciones apropiadas también pueden estar en el intervalo de 999 nM a 10 nM, y menores. Por otra parte, cuando los compuestos contemplados muestran tiempos de vida media relativamente cortos, o tiene un recambio alto, las concentraciones contempladas pueden ser de 0.1 mM y 100 mM y mayores. En consecuencia, la dosificación de los compuestos contemplados puede variar significativamente, pero se pueden determinar fácilmente las dosificaciones apropiadas en experimentos in vi tro o en animales. Entre los diversos efectos biológicos de los análogos de nucleósido de pirrolopirimidina modificados en las posiciones 5 ' y 4 ' , los efectos biológicos particularmente importantes incluyen la modulación de la producción de citocina tipo 1 y tipo 2, el control de condiciones neoplásicas (es decir, reducción de la síntesis de ADN o reducción del crecimiento celular) , y reducción de quimiocina y liberación de factor de crecimiento, como se describe en lo siguiente. En consecuencia, un método contemplado para cambiar la secreción de una citocina de una célula puede comprender una etapa en la cual se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) y que tiene además una etapa en la cual la célula se presenta con el compuesto de acuerdo con la fórmula (I) a una concentración efectiva para cambiar - la secreción de la citocina. Aunque generalmente se contemplan todas las combinaciones posibles de sustituyentes en la fórmula (I) , los compuestos particularmente contemplados son los compuestos de acuerdo con la fórmula (I) en donde R y R5. se seleccionan independientemente del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, y en donde R4 y R5-, de manera independiente y opcional contienen por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional y los sustituyentes remanentes son como se definen en lo anterior en la fórmula (I) .En un aspecto alternativo, el compuesto utilizado para cambiar la secreción de una citocina de una célula también puede ser un compuesto de acuerdo con la siguiente estructura: en donde Z es CN, C(0)NH2, C(=NH)NH2, C(=NNH2)NH2 o -C(=NOH)NH2, y en donde R5 es H, OH, OP(O) (OH)2, P(0) (0H)2, OP(O) (OR')2 o P(O) (OR')2, con R1 constituyendo un grupo de enmascaramiento. Las citocinas contempladas particularmente incluyen citocinas tipo 1 (por ejemplo IFN?) y tipo 2 (por ejemplo IL-4) . Con respecto a las células, se contempla que todas las células conocidas produzcan o secreten, o ambas cosas, "citocinas y se consideran como apropiadas, sin embargo, las células contempladas especialmente incluyen linfocitos y células cancerígenas (por ejemplo células de cáncer de próstata, infra) . En un aspecto adicional de la materia objeto de la invención, un método para reducir el crecimiento de una - célula hiperproliferativa puede comprender una etapa en la cual se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) , y otra etapa en la cual se presenta la célula hiperproliferativa con el compuesto a una concentración efectiva para reducir el crecimiento de la célula hiperproliferativa. Los compuestos particularmente preferidos incluyen compuestos de acuerdo con la fórmula (I) en donde R se selecciona del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R4 opcionalmente contiene por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional, y en donde R5. se selecciona del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R5i tiene por lo menos dos átomos de carbono, y opcionalmente contiene por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional, con la condición de que R y R5. no son juntos hidrógeno, y con los sustituyentes remanentes como se definen en lo anterior en la fórmula (I) . Las células hiperproliferativas contempladas particularmente incluyen células cancerosas, y las células cancerosas contempladas especialmente son células de cáncer de próstata. Aunque no se desea unirse a una teoría en particular, se considera que la reducción del crecimiento comprende reducción en la síntesis de ADN. En un aspecto adicional de la materia objeto de la - invención, se contempla que un método para reducir la liberación de un factor de crecimiento de una célula, tiene una etapa en la cual se proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) , y otra etapa en la cual la célula se presenta con el compuesto a una concentración efectiva para reducir la liberación del factor de crecimiento. Se contempla que la liberación de los diversos factores de crecimiento se puede reducir por el método que se presenta aquí, sin embargo, se contempla especialmente la reducción en la liberación de VEGF. Similarmente, aunque se sabe que todas las células secretan factores de crecimiento y se contemplan junto con el método que se presenta aquí, las células contempladas particularmente incluyen células de cáncer, y especialmente células de cáncer de próstata. Con respecto a la síntesis de los compuestos contemplados, se debe apreciar que los análogos de nucleósido de pirrólo [2, 3-d] pirimidina de acuerdo con la materia objeto de la invención se pueden sintetizar vía diversas rutas de síntesis, y los siguientes procedimientos se proporcionan únicamente a modo de ejemplo.

Síntesis de análogos de nucleósidos de pirrólo [2, 3 -d] pirimidina modificados en la posición C5 ' Los análogos de nucleósido sustituidos en la - posición 5 ' se preparan a partir de la condensación de las bases de pirrólo [2, 3-d] pirimidina y las ribofuranosas sustituidas en la posición 5', protegidas apropiadamente. Como se muestra en la Figura 1, el compuesto 1, preparado de acuerdo con un procedimiento publicado (Jones et al. Methods in carbohydrate Chemistry (editado por histler and Moffat) , vol. VI, pp315-322, Academic Press, New York, (1972)), se i*' trata con diversos nucleófilos tales como reactivos de Grignard para proporcionar el compuesto 2, el cual es benzoilado y subsecuentemente se trata con ácido trifluoroacético para proporcionar el compuesto 4. La benzoilación y el tratamiento posterior con anhídrido acético/ácido acético en presencia de ácido sulfúrico proporciona el compuesto 6, el cual se utiliza para la condensación con bases de pirrólo [2, 3-d] pirimidina. El compuesto 7 (Jones et al . Methods in carbohydrate Chemistry (editado por Whistler and Moffat) , vol. VI, pp315-322, Academic Press, New York, (1972)), preparado de acuerdo con un procedimiento publicado, se convierte a un derivado de tosilato, el cual se reduce con hidruro de litio y aluminio para proporcionar el compuesto 8. Por procedimientos similares a los mostrados en la Figura 1, el compuesto 8 se convierte al compuesto 9. La condensación de 9 y de la pirrólo [2 , 3 -d] pirimidina 19 y las transformaciones subsecuentes como se muestran en el esquema de reacción 2 proporcionan los compuestos 10-15, como se ilustra en la Figura 2. Como se muestra en la Figura 3 , el compuesto 2 se convierte al sulfonato 16, el cual se somete a sustitución nucleofílica para proporcionar el compuesto 17 invertido en cuanto a configuración. La desprotección del isopropilideno y la acetilación subsecuente proporciona el tetraacetato 18. En la figura 4 se muestra la condensación de las ribofuranosas protegidas, sustituidas en 5-C, con bases de nucleósido. La 5-cianopirrolo [2, 3-d] pirimidina 19, preparada de acuerdo con un procedimiento publicado (Tolman et al. J. Org. Chem. 1969, 91 , 2102-2108), se convierte al derivado trimetilsililo y después se condensa con el compuesto 6 en presencia de triflato de trimetilsililo por un procedimiento similar al descrito para toyocamicina (Sharma et al. Nucleosides Nucleotides 1993, 12, 643-648) . El producto de acoplamiento resultante se somete a desbromación a través de hidrogenación para proporcionar el compuesto 20. El tratamiento de 20 con amoníaco en metanol anhidro proporciona los compuestos 21 y 23. El compuesto 21 se oxida para proporcionar el compuesto 22. El compuesto 23 se convierte al derivado carboxamida 24. Los compuestos 23 y 24 se oxidan para proporcionar el compuesto 25. El tratamiento del compuesto 25 con hidroxiamina proporciona el compuesto 26, el cual se hidrogena sobre níquel Rayen para - proporcionar 27. Alternativamente, el compuesto 27 también se prepara por calentamiento del compuesto 25 con amoníaco en una bomba presurizada.

Síntesis de análogos de nucleósido de pirrólo [2, 3 - d]pirimidina modificados en la posición C4 ' En la figura 5, el compuesto 1 se trata con formaldehído en hidróxido de sodio acuoso para proporcionar el derivado de 4 ' -hidroximetilo 28, el cual se protege selectivamente para proporcionar el compuesto 29. La • protección subsecuente con DMT y la remoción de TBS proporciona el compuesto 31, el cual se puede convertir a diversos sustituyentes. Los derivados sustituidos en la posición 4-C sometidos a transformaciones similares que las ribofuranosas sustituidas en la posición 5-C (esquema de reacción 1) se pueden convertir al compuesto 35, el cual se utiliza para condensación con bases de nucleósidos. De manera similar a los análogos de nucleósido de pirrolopirimidina sustituidos en la posición C5 ' , los análogos sustituidos en la posición 4' 36 se pueden obtener por condensación del compuesto 35 con el compuesto 19, como se muestra en la figura 6. Las transformaciones subsecuentes pueden proporcionar el nucleósido de pirrolopirimidina sustituido en la posición 4'-C 37-42.

- Síntesis de análogos de nucleósido de pirrólo [2, 3-d] pirimidina modificados en la posición 2 ' y de otros análogos Se preparan para pruebas biológicas los siguientes análogos de nucleósido de pirrolopirimidina, algunos de los cuales se han publicado (se indican como compuestos conocidos), y que se muestran en la Figura 7. Los compuestos conocidos 43, 44, 52-55 y 57 se preparan de acuerdo con un procedimiento publicado (Hinshaw et al. J. Org. Chem. 1970, 92, 236-241) . Se prepara el compuesto 56 por hidrogenación del compuesto 52. El compuesto conocido 49 (Krawczyk et al, Nucleosides Nucleotides 1989, 8, 97-115) se trata con nitrito de sodio para proporcionar el compuesto 50. Se preparan los compuestos conocidos 45 y 48, de acuerdo con un procedimiento publicado (Ramasamy et al. J. Heterocyclic Chem, 1988, 25, 1043-1046) . El compuesto 45 se trata con amoníaco-metanol para proporcionar el compuesto 46 y se hidrogena para proporcionar el compuesto 47. Se preparan los compuestos 58-63 a partir del compuesto 45 por procedimientos similares utilizados para los compuestos 52-57. El compuesto conocido 64 (Krawczyk et al., Nucleosides Nucleotides 1989, 8, 97-115) se convierte a los compuestos 65-67. El compuesto conocido 68 (Ramasamy et al. Tetrahedron 1986, 42, 5869-5878) se convierte a los compuestos 69 y 70. 5 - Preparación de linfocitos T humanos y activación in vi tro Las células mononucleares de sangre periférica se aislan de donadores sanos mediante centrifugación en gradiente de densidad seguido por enriquecimiento de linfocitos T utilizando Lymphokwik (One Lambda, Canoga Park CA) . Se separan los monocitos contaminantes por adherencia a plástico. Los linfocitos T purificados son >99% CD2+, <1% HLA-DR+ y <5% . CD25+, y se mantienen en RPMI-AP5 (medio RPM11640 que contiene plasma autólogo 5%, L-glutamina 1%, 1% de penicilina/estreptomicina y 2-mercaptoetanol 0.05%). Para determinación de las concentraciones de proteína de citocina, se activan linfocitos T (0.2 x 106 células en un volumen de 0.2 ml) por la adición de 2 ng de acetato de miristato de forbol más 0.1 mg de ionomicina (PMA-ION, ambos de Calbiochem, San Diego, CA) y se incuban en placas de 96 pozos, en presencia de 0 ó 10 µM de diversos nucleósidos de guanosiña, durante 48 h a 37°C. Después de la activación, los sobrenadantes se analizan para determinar la producción de citocina derivada de células. - 2 Análisis de citocina extracelular Se determinan las concentraciones de citocina humana en sobrenadantes de células, después de dilución apropiada, utilizando equipos de ELISA específicos para IFN? e IL-4 (Biosource, Camarillo, CA) , Todos los resultados de ELISA se expresan como pg/ml .

Efecto de los análogos de nucleósido de pirrólo- [2, 3- d] pirimidina sobre las concentraciones de citocina extracelular en linfocitos T humanos activados En las Figuras 8A y 8B se muestra el efecto de los análogos de nucleósido de pirrólo- [2, 3-d] pirimidina a 0 y 10 µM, en la expresión de linfocitos T estimulados con PMA/ionomicina de la citocina tipo 1, IFNy, y la citocina tipo 2, IL-4, para 5 donadores humanos individuales. Se determinan las concentraciones de citocina en sobrenadantes libres de células, por ELISA. El efecto más potente se observa con 7-b-D-ribofuranosil-4-oxopirrolo [2, 3-d] pirimidina-5-carboxamidina. Este compuesto incrementa la producción de IL-4 activado en 498% +83 y suprime IFN? en 43%+4 de las concentraciones control activadas de cada citocina. Los datos se muestran como porcentajes del control activado calculado como la relación de la concentración de - citocina de linfocitos T activados en presencia de nucleósidos de prueba sobre la concentración de citocina de linfocitos T activados que no han sido tratados x 100%. El efecto cero en las concentraciones de citocina por nucleósidos de prueba puede proporcionar un porcentaje de valor control activado de 100%. La concentración absoluta (pg/ml + desviación estándar) de la secreción de citocina inducida por PMA-ION para IFN?, 22954 + 3391; y para IL-4, 162 + 40. Las concentraciones en reposo son de <30 pg/ml para todas las citocinas probadas.

Ci totoxicidad de los análogos de nucleósido de pirrólo [2, 3 -d] pirimidina in vi tro Los análogos de nucleósido de pirrólo [2,3-d] pirimidina de la presente invención son bioactivos en la medida en que indican cierto nivel de citotoxicidad in vitro. En estos estudios, los compuestos probados de aplican a el cultivo de células de fibroblastos humanos normales, células 81 de cáncer de próstata humanas, células 140 de cáncer de melanoma humano, células 177 de cáncer de pulmón humano y células R y NR de cáncer de ovario humano (todas disponibles de ATCC) . En estos experimentos, las células se siembran en placas a una densidad de 2000 células por 200 µl de medio por pozo (placa de 96 pozos) . Los compuestos - - probados se aplican a los pozos una vez, a un intervalo de concentración de 0.78-100 µM, justo después del sembrado en placa de las células. El ensayo de citotoxicidad colorimétrica MTS se realiza después de 72 h de tratamiento. Se calcula la CE50 en base en las lecturas recolectadas y se presentan en la Tabla 1. Varios compuestos indican la carencia de citotoxicidad en concentraciones inferiores de 100 µM. En tales casos, la CE50 se marca como >100. En otros casos, la CE50 indica la concentración del compuesto probado necesario para dañar 50% de la población de células.

Los análogos de nucleósido de pirrólo [2, 3 -d] pirimidina inhiben la síntesis de ADN en células cul tivadas in vi tro, de una manera dependiente de la dosis Los análogos de nucleósido de pirrólo [2,3-d] pirimidina inhiben el crecimiento de células humanas cultivadas in vi tro, medido por la concentración de ADN. El ajuste experimental es el mismo al descrito antes. Los compuestos se administran una vez y se mide la concentración de ADN después de 72 h. En ese momento, se retira la mitad del medio de los pozos de cultivo y se sustituye por agua pura. Después de esto, se transfieren las células a -70°C durante por lo menos 12 h. En la siguiente etapa, las células se transfieren de regreso, de -70°C a temperatura ambiente y se suministra a cada pozo 1 µM de Hoechst 33342.

Después de 2 h de incubación, se mide la señal de fluorescencia (360-530 nm) . De acuerdo con este método, la intensidad de fluorescencia es proporcional a la cantidad de ADN, debido a la presencia del complejo ADN-Hoechst 33342 que se forma. Los resultados se presentan en la Tabla 2. Los números expresan los múltiplos de incremento en la cantidad de ADN en comparación con la cantidad de ADN al principio del experimento (2 h después del sembrado en placa de las células) . En las células de cáncer de próstata no tratadas y las células normales, la concentración de ADN se incrementa 5.78 y 4.47 veces, respectivamente, durante 72 h de cultivo.

Los compuestos 23a (5 ' -R) y 23a (5 ' -S) inhiben la secreción de VEGF de cáncer de próstata humana in vi tro Los compuestos 23a (5' -R) y 23a (5' S) son potentes para inhibir la secreción de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) de células de cáncer de próstata humanasT" HTB81. Se reconoce a VEGF como un marcador de angiogénesis dado que esta molécula es crucial para la migración y crecimiento de células endoteliales y formación de microvasos in vivo. Para demostrar esto, se siembran en placa 0.5 x 105 de las células en 5 ml de medio de cultivo, en cajas de petri de 10 cm de diámetro. Los compuestos se aplican justo después del sembrado en placa durante 72 h.

Después de esto, el medio se recolecta y se mide la concentración de VEGF utilizando un ensayo de ELISA para VEGF (R&D Systems) y se expresa como pg de VEGF por ml de medio. Los resultados se presentan en la figura 9. De acuerdo con estos resultados, ambos compuestos inhiben la secreción de VEGF de una manera dependiente de la dosis.

Los compuestos 23a (5 ' -R) y 23a (5 ' -S) inhiben la liberación de IL-8 de células de cáncer de próstata humana cul tivadas in vi tro Los compuestos 23a (5 ' -R) y 23a (5* -S) indican un efecto inhibidor en la secreción de interleucina-8 (IL-8) de células de cáncer de próstata humana, HTB81. IL-8 pertenece a la clase de quimocinas quimioatrayentes (tipo alfa) , las cuales están involucradas en procesos de inflamación debido a la atracción de neutrófilos. Se sabe en general que las quimiocinas son producidas por diversos tipos de cáncer. Se ha demostrado en varios estudios que la inhibición de producción de quimiocina por células cancerosas es benéfico para el huésped. Para demostrar la potencia de estos dos compuestos para inhibir la secreción de IL-8 de células de cáncer de próstata, se tratan in vitro a células de cáncer de próstata HTB81 con los compuestos 23a en ambas configuraciones, 5 ' -R y 5'-S, a concentraciones indicadas en la gráfica. El medio recolectado de cultivo se analiza para determinar la concentración de IL-8 utilizando un ensayo de ELISA para IL-8 DE R&D Systems. De acuerdo con los resultados que se obtienen, ambos compuestos son capaces de inhibir la secreción de IL-8 de una manera dependiente de la dosis, como se muestra en la Figura 10. Se debe apreciar, sin embargo, que los efectos biológicos de los compuestos contemplados no necesitan limitarse a los efectos particulares como se describe en lo anterior. En particular, se contempla que los compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención generalmente muestran efecto citostático en diversos desórdenes hiperproliferativos, que incluyen canceres localizados o metastásicos, o ambos (por ejemplo linfornas y carcinomas) , hiperplasia prostática benigna y queratosis. Aunque los inventores encuentran efectos biológicos sustanciales en IL-4 (una citocina tipo 2) e IFN? (una citocina tipo 1), generalmente se contempla que los compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención son biológicamente activos para la modulación de citocinas diferentes de IL-4 e IFN-?. Se contempla especialmente que los compuestos pueden aumentar o disminuir la expresión/secreción de una citocina o un conjunto de citocinas particular. Por lo tanto, se contempla que los compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención pueden modular el sistema inmune de un organismo de manera que se puede obtener una respuesta más pronunciada de tipo 1 o tipo 2. En consecuencia, se contempla que los compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención pueden ser efectivos para reducir el título de un virus en un sistema vivo ya sea por acción directa como inhibidor de una polimerasa viral, o bien indirectamente, o ambas alternativas, al activar el sistema inmune a una respuesta humoral o celular particular. Se contempla además que los compuestos de acuerdo con la materia objeto de la invención también pueden ser útiles para reducir una respuesta de un sistema inmune hacia un aloinjerto o xenoinjerto al reducir la gravedad de la respuesta celular hacia el aloinjerto o xenoinjerto.

EJEMPLOS Los siguientes protocolos describen una síntesis ejemplar de diversos compuestos de acuerdo con la materia objeto d la invención y se diseñan solo para ilustrar, pero no para limitar el concepto de la invención que se presenta aquí .

Preparación de 2, 3-0-isopropilideno-5 (R, S) -C-etinil-ß- ribofuranósido de metilo (2b) A una solución agitada de 4-C, 5-0-didehidro-2,3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo (Jones et al., Meth ds in Carbohydrate Chemistry, Vol 1, pp.315-322 (1972), 4.00 g, 19.78 mmoles) en 20 ml de THF anhidro a -42°C bajo argón se agrega a gotas bromuro de etinilmagnesio (0.5 M en THF 80 ml, 40 mmoles) . Cuando se agrega, la mezcla resultante se calienta lentamente hasta 0°C (-90 min) . La reacción se detiene al agregar 50 g de hielo/50 ml de agua y la mezcla se agita durante 30 min. Después de neutralización con ácido acético acuoso 10%, la mezcla se extrae dos veces con acetato de etilo. La capa orgánica combinada se seca con Na2S04 y se concentra. La cromatografía en sílice (acetato de etilo-hexanos, 1:4) proporciona 3.48 g del compuesto del título (relación R/S, 1:1) como un sólido blanco. Los siguientes compuestos se preparan de una manera similar: 2 , 3-0-isopropiliden-5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranósido de metilo T2a) se prepara a partir de 4-C, 5-0-dihehidro-2, 3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo y bromuro de etilmagnesio. El 2 , 3-0-isopropiliden-5 (R) -C-vinil-ß-D-ribofuranósido de metilo (2c) se prepara a partir de 4-C,5-O-didehidro-2 , 3^0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo y bromuro de vinilmagnesio. El 5 (R) -C-alil-2, 3-0- - - isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo (2d) se prepara a partir de 4-C, 5-0-didehidro-2, 3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo y bromuro de alilmagnesio.

Preparación de 2, 3 -0-isopropiliden-5-0-metansulfonil -5 (R) -C- metil -ß-D-ribofuranósido de metilo (16) A una solución agitada de 2, 3-0-isopropiliden-5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranósido de metilo (2a, 7.24 g, 33.17 mmoles) en 50 ml de piridina anhidra a 0°C se agrega cloruro de metansulfonilo (3.1 ml, 39.92 mmoles). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 1 h, se enfría a 0°C, se detiene al agregar 1.0 ml de agua y se agita a temperatura ambiente durante 30 min. El solvente se evapora y el residuo se disuelve en acetato de etilo, se lava con salmuera tres veces, se seca con Na2S04 y se concentra. La cromatografía en sílice (EtOAc 30% en hexanos) proporciona 8.62 g del compuesto del título 16 como un jarabe incoloro. ~" ~ Preparación de 2 , 3 -0-isopropiliden-5-0-acetil -5 (S) -C-metil - ß-D-ribofuranósido de metilo (17) Una suspensión agitada de 2, 3-0-isopropiliden-5-0-metansulfonil-5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranósido de metilo (16, 8.62 g, 29.1 mmoles) y NaOAc (anhidro, 3.5 g, 42.5 mmoles) en 350 ml de DMF anhidro se calienta a 125°C bajo argón durante 4 días . El solvente se evapora y el residuo se somete a cromatografía en sílice (EtOAc 25% en hexanos) para proporcionar 4.0 g del compuesto del título 17 como un sólido blanco.

Preparación de 2, 3 -0-isopropiliden-4 -C-hidroximetil -ß-D- ribofuranósido de metilo (28) A una solución agitada de 4-C, 5-0-didehidro-2, 3-0- • isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo 1 (20.22 g, 100 mmoles) en 380 ml de dioxano a 0°C se agrega a gotas formaldehído (solución 37%, 76 ml) y después 188 ml de NaOH 2 M. La mezcla de reacción resultante se agita a temperatura ambiente durante 20 h, se enfría a 0°C, se neutraliza con ácido acético 10%, se concentra (-50%) y se extrae con cloruro de metileno dos veces. La capa orgánica combinada se seca con Na2S04 y se concentra a sequedad. La cromatografía en sílice (metanol 4% en cloroformo) proporciona 20.2 g del compuesto del título 28 como un sólido blanco.

- Preparación de 2, 3-0-isopropiliden-5-desoxi-ß-D- ribofuranósido de metilo (8) A una solución agitada de 2, 3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo (14.2 g, 70.0 mmoles) en 250 ml de piridina anhidra a 10°C se agrega en porciones (durante 30 min) cloruro de p-toluensulfonilo (19.1 g, 100 mmoles). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 18 h, se enfría a 0°C, se detiene por la adición de 5.0 ml de agua y se agita a temperatura ambiente durante 30 min. El solvente se evapora. El residuo se disuelve en acetato de etilo, se lava con salmuera tres veces, se seca con Na2S04 y se concentra a sequedad. La cromatografía sobre sílice (acetato de etilo-hexanos 1:3) proporciona 24.1 g del compuesto del título como un sólido blanco. A una suspensión agitada de LiAlH (4.58 g, 120.5 mmoles) en 120 ml de éter dietílico anhidro se agrega 2,3-0-isopropiliden-5-O-p-toluensulfonil-ß-D-ribofuranósido de metilo (13.1 g, 36.55 mmoles) en éter dietílico-tolueno (2.5:1,""140 ml) . La mezcla resultante se somete a reflujo durante 22 h, se enfría a temperatura ambiente, se diluye con 25 ml de acetato de etilo, se detiene al agregar 5.0 ml de agua. El solvente se evapora, el residuo se disuelve en acetato de etilo, se lava con salmuera tres veces, se seca con Na2S0 y se concentra a sequedad. La cromatografía en sílice (acetato de etilo hexanos 1:3) proporciona 3.58 g del compuesto del título como un líquido incoloro.

Preparación de 5 (R) -C-alil -5-0-benzoil -2, 3 -0-isopropiliden- ß-D- ribofuranósido de metilo (3d) A una solución agitada de 5 (R) -C-alil-2, 3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo (4.49 g, 18.38 mmoles) en 40 ml de piridina anhidra a 0°C se agrega cloruro de benzoilo (2.7 ml, 23.0 mmoles). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 18 h, se enfría con hielo, se detiene al agregar 1 ml de agua y se agita a temperatura ambiente durante 30 min. Se evapora el solvente y el residuo se disuelve en acetato de etilo, se lava con salmuera tres veces, se seca con Na2S0 y se concentra. La cromatografía en sílice (acetato de etilo 12% en hexanos) proporciona 6.26 g del compuesto del título 3d como un jarabe incoloro. Se preparan los siguientes compuestos de una manera similar: 5-0-benzoil-5 (R, S) -C-etinil-2, 3-0-isoprop?liden-ß-D-ribofuranósido de metilo (3b, relación R/S: 1:1) a partir de 5 (R, S) -C-etinil-2 , 3-O-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo (2b) . 4-C-benzoiloximetil-5-0-benzoil-2, 3-O-isopropiliden-ß-D-ríbofuranósido de metilo a partir de 2, 3-0-isopropiliden-4-C-hidroximetil-ß-D-ribofuranósido de metilo.

- Preparación de 5 (R) -C-alil -5-O-benzoil-ß-D-ribofuranósido de metilo (4d) A una solución de 5 (R) -C-alil-5-0-benzoil-2, 3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo (3d, 6.2 g, 17.8 mmolés) en una mezcla de TFA-H20 (9:1) se agita a 0°C durante 90 min y se concentra a sequedad a 0°C. El residuo se disuelve en una mezcla de metanol-tolueno (20 ml, 1:1) y se concentra a sequedad. La cromatografía sobre sílice (acetato de etilo-hexanos 1:1) proporciona 3.70 g del compuesto del título 4d como un sólido blanco. Se preparan los siguientes compuestos de una manera similar: 5-0-benzoil-5 (R, S) -C-etinil--ß-D-ribofuranósido de metilo (4b, relación R/S: 1:1) a partir de 5-0-benzoil-5 (R, S) -C-etinil-2, 3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo (3b) . 5-0-benzoil-4-C-benzoiloximetil-ß-D-ribofuranósido de metilo a partir de 5-0-benzoil-4-C-benzoiloximetil-2, 3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo.

Preparación de 5 (R) -C-alil -2 , 3 , 5-tri -O-benzoil -ß-D- ribofuranósido de metilo (5d) A una solución agitada de 5 (R) -C-alil-5-O-benzoil-ß-D-ribofuranósido de metilo (4d, 3.60 mg, 11.68 mmoles) en 80 ml de piridina anhidra a 0°C se agrega cloruro de - benzoilo (3.0 ml, 25.84 mmoles). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 18 h, se enfría con hielo, se detiene al agregar 1 ml de agua, y después se agita a temperatura ambiente durante 30 min. Se concentra la mezcla, se diluye con acetato de etilo, se lava con salmuera tres veces, se seca con Na2S04 y se concentra a sequedad. La cromatografía sobre sílice (acetato de etilo 15% en hexanos) proporciona 5.3 g del compuesto del título 5d como un jarabe incoloro. Se preparan los siguientes compuestos de una manera similar 5 (R, S) -C-etinil-2, 3, 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranósido de metilo (5b, relación R/S: 1:1) a partir de 5-0-benzoil-5 (R, S) -C-etinil--ß-D-ribofuranósido de metilo (4b) . 4-C-benzoiloximetil-2, 3, 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranósido de metilo a partir de 4-C-benzoiloximetil-5-O-benzoil-ß-D-ribofuranósido de metilo.

Preparación de l -0-metil -2, 3, 5 - tri -O-benzoil -5 (R) -C-vinil-ß- D-ribof uranosa de metilo (5c) Una solución de 2, 3-0-isopropiliden-5 (R) -C-vinil-ß-D-ribofuranósido de metilo (2c, 1.0 g, 4.3 mmoles) en una mezcla de ácido trifluoroacético y agua (9:1, v/v, 11 ml) se agita a 0°C durante 30 min y se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en metanol y se concentra a sequedad (3 veces) , después se disuelve en piridina y se evapora, y finalmente se disuelve en 11 ml de piridina anhidra. A esta solución se le agrega cloruro de benzoilo (1.9 ml, 16 mmoles) . La mezcla de reacción se agita a 25°C durante 16 h y se vierte en 20 ml de agua con hielo. La mezcla se extrae con 20 ml de diclorometano y la capa orgánica se seca sobre sulfato de sodio y se concentra a sequedad. El residuo se somete a cromatografía sobre sílice (acetato de etilo 0-5% en diclorometano) para proporcionar 1.0 g del compuesto del título 5c como un jarabe.

Preparación de l-O-acetil -2, 3, 5-tri -0-benzoil -5 (R) -C-alil -D- ribof uranosa (6d) A una solución agitada de 5 (R) -C-alil-2, 3, 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranósido de metilo (5d, 4.0 g, 7.74 mmoles) en 14 ml de ácido acético y anhídrido acético (1.75 ml, 18.36 mmoles) a 0°C se agrega ácido sulfúrico concentrado (200 µl, 3.79 mmoles en 4.0 ml de ácido acético) . La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 20 h, se enfría a 0°C, se diluye con acetato de etilo frío, y se lava con agua, NaHC03 acuoso 5% y después salmuera, se seca con Na2S04 y se concentra. La cromatografía sobre sílice (acetato de etilo-hexanos 1:4) para proporcionar 2.82 g del compuesto del título 6d (relación a/ß: 1:2) como una espuma incolora. Se preparan los siguientes compuestos de una manera similar: 1-0-acetil- 5 (R,S) -C-etinil-2,3,5-tri-0-benzoil-ß-D-ribofuranosa (6b, relación R/S: 1:1 y a/ß relación 1:2) a partir de 5(R,S)-C- etinil-2, 3, 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranósido de metilo (5b). l-0-acetil-4-C-benzoiloximetil-2,3, 5-tri-O-benzoil-D- ribo'furanosa (a/ß relación: 1:3) a partir de 4-C- benzoiloximetil-2 , 3 , 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranósido de metilo. 5 (R) -C-metil-1, 2 , 3, 5-tetra-O-acetil-ß-D-ribofuranosa a partir de 2, 3-0-isopropiliden-5 (R) -C-metil-ß-D- ribofuranósido de metilo. 1, 2, 3 , 5-tetra-0-acetil-5 (S) -C- metil-D-ribofuranosa 6a a partir de 5-0-acetil-2, 3-0- • isopropiliden-5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranósido de metilo. 5- desoxi-1, 2, 3-tri-O-acetil-D-ribofuranosa 9 a partir de 5-0- acetil-2, 3-0-isopropiliden-ß-D-ribofuranósido de metilo. 1- 0-acetil-2 , 3 , 5-tri-0-benzoil-5 (R) -C-vinil-ß-D-ribofuranosa 6c a partir de 2, 3, 5-tri-0-benzoil-5 (R) -C-vinil-ß-D- ribofuranósido de metilo.

Preparación de 4 -amino-6-bromo-5-ciano-7- (2, 3 , 5-tri -0- béñzoil -5 (R) -C-alil -ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3- d] pirimidina Una suspensión de 4-amino-6-bromo-5- cianopirrolo [2,3 -d] pirimidina (Tolman et al. J. Org. Chem. 1969, 91 , 2102-2108, 1.05 g, 4.41 mmoles) y 50 mg de sulfato de amonio en 75 ml de HMDS en 25 ml de m-xileno anhidro se somete a reflujo bajo argón durante 18 h. Se evaporan los solventes y el residuo se seca bajo vació. Se disuelve el residuo en 80 ml de 1,2-dicloroetano anhidro y se mezcla con l-O-acetil-2,3, 5-tri-0-benzoil-5 (R) -C-alil-D-ribofuranosa (2.00 g, 3.67 mmoles). Bajo enfriamiento con hielo, se agrega TMSOTf (1.3 ml, 7.30 mmoles en 5 ml de 1,2-dicloroetano anhidro) . La mezcla bajo argón se agita a temperatura ambiente durante 30 min, después se somete a reflujo durante 90 h, se suspende al verterla (fría) sobre 50 ml de hielo/NaHC03, y se filtra. La capa orgánica se separa, se seca con Na2S04 y se concentran. La cromatografía en sílice EtOAc-hexanos 2:3) proporciona 1.81 g del compuesto del título como un sólido incoloro. Se preparan los siguientes compuestos de una manera similar:4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (2, 3, 5-tri-O-benzoil-5 (R,S) -C-etinil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina (relación R/S: 1:1) se prepara a partir de l-O-acetil-2, 3 , 5-tri-O-benzoil-5 (R,S) -C-etinil-D-ribofuranosa y 4-amino-6-bromo-5-cianopirrolo [2, 3-d] pirimidina, 4-amino-6-bromo-5-ciano-7-(benzoiloximetil-2 , 3 , 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina preparada a partir de l-0-acetil-4-benzoiloximetil-2, 3, 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranosa y 4-amino-6-bromo-5-cianopirrolo [2, 3-d]pirimidina. 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (1, 2 , 3 , 5-tetra-O-acetil-5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranosil)pirrolo [2,3-d] pirimidina se prepara a partir de 1, 2, 3, 5-tetra-O-acetil-5 (R) -C-metil-D-ribofuranosa y 4-amino-6-bromo-5-cianopirrolo [2, 3 -d] pirimidina. 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (1,2,3, 5-tetra-0-acetil-5 (S) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d] pirimidina preparada a partir de 1,2, 3, 5-tetra-0-acetil-5 (S) -C-metil-D-ribofuranosa y 4-amino-6-bromo-5-cianopirrolo [2 , 3-d] pirimidina . 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (2, 3-di-0-acetil-5-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina preparada a partir de 1,2, 3-tri-0-acetil-5-desoxi-D-ribofuranosa y 4-amino-6-bromo-5-cianopirrolo [2, 3-d] pirimidina. 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (2 , 3 , 5-tri-O-benzoil-5 (R) -C-vinil-ß-D-ribofuranosil)pirrólo [2, 3 -d]pirimidina se prepara a partir de l-0-acetil-2,3,5-tri-0-benzoil-5 (R) -C-vinil-ß-D-ribofuranosa y 4-amino-6-bromo-5-cianopirrolo [2, 3-d] pirimidina.

Preparación de 4 -amino-5-ciano-7- (2, 3, 5- tri -0-benzoil -5 (R) - C-al?l -ß-D-ribofuranosil)~pirrolo [2, 3-d] pirimidina (20e) A una solución de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7-(2,3,5-tri-0-benzoil-5 (R) -C-alil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina (738 mg, 1.0 mmoles) en 25 ml de ácido acético se agrega polvo de zinc (1.04 g, 16.0 mmoles) en dos porciones (separadas por una hora). La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 20 h y se filtra. El filtrado se evapora a sequedad y el residuo se somete a cromatografía sobre sílice (acetato de etilo-hexanos, 1:1) para proporcionar 450 mg del compuesto del título 20e como una espuma incolora. Se preparan los siguientes compuestos de una manera similar: 4-amino-5-ciano-7- (2,3, 5-tri-O-benzoil-5 (R,S) -C-etinil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina (relación R/S: 1:1) 20b a partir de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (2, 3, 5-tri-O-benzoil-5 (R, S) -C-etinil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (2,3, 5-tri-O-benzoil-5 (R) -C-vinil- ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina 20c a partir de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (2, 3, 5-tri-O-benzoil-5 (R) -C-vinil- ß-D-ribofuranosil)pirrólo [2 , 3-d] pirimidina.

Preparación de 4 -amino-5-ciano-7- (2, 3, 5, - tri -O-benzoil -5 (R) - C-propil -ß-D-ribof uranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina (20 f) Una suspensión de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (2,3, 5-tri-0-benzoil-5 (R) -C-alil-ß-D-ribofuranosil) pirrolo- [2, 3-d] pirimidina (400 mg, 0.54 mmoles) y 10% de Pd/C (100 mg, -50% en agua) en 50 ml de dioxano y 0.5 ml de trietilamina se agita en un aparato de hidrogenación (H2, 138 kPa (20 psi) ) durante 4 h. El catalizador se filtra y se lava con dioxano. El filtrado combinado se concentra y el residuo se somete a cromatografía en sílice (acetato de etilo-hexanos, 1:1) para proporcionar 340 mg del compuesto del título 20f como una espuma incolora. Se preparan los siguientes compuestos de una manera similar: 4-amino-5-ciano-7- (2, 3, 5-tri-O-benzoil-5 (R,S) -C-etil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d]pirimidina (relación R/S: 1:1) ¿ 20d a partir de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (2/3, 5-tri-0-benzoil-5 (R, S) -C-etinil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina, 4-amino-5-ciano-7- (4-benzoiloximetil-2, 3, 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina a partir de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (4-benzoiloximetil-2,3, 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (1,2,3, 5-tetra-O-acetil-5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina 20a a partir de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (1, 2, 3, 5-tetra-O-acetil-5 (R) -C-metil- ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (1,2,3, 5-tetra-0-acetil-5 (S) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] pirimidina 20a a partir de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (1,2,3, 5-tetra-0-acetil-5 (S) -C-metil- ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (1, 2 , 3 -tri-O-acetil-5-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] pirimidina a partir de 4-amino-6-bromo-5-ciano-7- (1,2, 3-tri-0-acetil-5-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- - (2, 3 -didesoxi-ß-D-glicero-pentofuranosil) pirrólo [2,3-d]pirimidina se prepara a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2, 3-didesoxi-ß-D-pent-2-enofuranosil)pirrólo [2, 3-d] pirimidina.

Preparación de 4-amino-5-ciano-7- (5- (R) -C-alil --ß-D- ribof uranosil) pirrólo [2 , 3 -d] pirimidina (23 e) Una solución de 4-amino-5-ciano-7- (2, 3 , 5-tri-0-benzoil-5 (R) -C-alil-ß-D-ribofuranosil)pirrolo [2, 3-d] pirimidina (300 mg, 0.454 mmoles) en 40 ml de metanol a 0°C se satura con amoníaco. La solución se deja reposar a temperatura ambiente durante 2 días . El solvente se evapora y el residuo junto con NaOAc (anhidro, 20 mg) se suspende en 20 ml de DMF. La mezcla se agita bajo argón a 120°C durante 5 h. El solvente se evapora. El residuo se adsorbe sobre gel de sílice y se eluye de una columna de gel de sílice (metanol-acetato de etilo, 1:25) para proporcionar 145 mg del compuesto del título como un sólido incoloro. Antes de calentar en DMF, el producto contiene dos compuestos principales 21 y 23, los cuales se pueden separar por cromatografía en gel de sílice. El compuesto 21 se prepara a través de este procedimiento. Se preparan compuestos similares de una manera parecida: 4-amino-5-ciano-7- (5 (R) -C-propil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d] pirimidina 23f a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2, 3 , 5-tri-O-benzoil-5 (R) -C-propil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d]pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (5 (R,S) -C-etinil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d]pirimidina (relación R-S: 1:1) 23b a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2, 3, 5-tri-0-benzoil-5 (R, S) -C-etinil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (5 (R,S) -C-etil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina (relación R-S: 1:1) 23d a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2,3, 5-tri-0-benzoil-5 (R,S) -C-etil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (4-hidroximetil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] pirimidina 33d a partir de 4-amino-5-ciano-7- (4-benzoiloximetil-2 , 3 , 5-tri-O-benzoil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina 23a(5'R) a partir de 4-amino-5-ciano-7- (1, 2, 3, 5-tetra-O-acetil-5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (5 (S) -C-metil-ß-D-ribofuranosil)pirrólo [2 , 3-d] pirimidina 23a(5* S) a partir de 4-aminor_5-ciano-7- (1,2,3, 5-tetra-O-acetil-5 (S) -C-metil-ß-D-ribofuranosil)pirrólo [2, 3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-ribofuranosil)pirrolo [2, 3-d]pirimidina 10 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (1, 2, 3-tri-0-acetil-5-desoxi-ß-D-ribofuranosil)pirrólo [2, 3-d] pirimidina. 4-amino-5-ciano-7- (5 (R) -C-vinil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina 23c 4 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2,3, 5-tri-0-benzoil-5 (R) -C-vinil-ß-D-ribofuranosil)pirrólo [2, 3-d]pirimidina.

Preparación de -amino- 5 -ciano -7- (2, 3-di -0-metansulfonil -5- O-ter-butildif enilsilil -ß-D-ribof uranosil) pirrólo [2 , 3 - d] pirimidina A una solución agitada de toyocamicina 43 (5.83 g, 20.0 mmoles) en 100 ml de piridina anhidra a 0°C se agrega clorodifenilsilano de terbutilo (6.2 ml, 24.0 mmoles). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 18 h y después se enfría a 0°C y se agrega cloruro de metansulfonilo (3.4 ml, 44.0 mmoles). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 2 h, se enfría con hielo, se suspende al agregar 2 ml de agua y se agita a temperatura ambiente durante 30 min. El solvente se evapora. El residuo se disuelve en acetato de etilo, se lava con salmuera tres veces, se seca con Na2S0 y se concentra. La cromatografía en sílice (acetato de etilo-hexanos, 3:2) proporciona 8.41 g del compuesto del título como un sólido incoloro.

- Preparación de 4 -amino -5 -ciano -7- (5-0-ter-butildifenilsilil - 2, 3 -di dehi dro -2, 3 -di desoxi -ß-D- ribofuranosi Dpi rrol o [2, 3 - d] pirimidina Se sella polvo de telurio (malla 200, 640 mg, 5.0 mmoles) bajo argón, se mezcla con trietilborohidrato de litio (1.0 M en THF, 11.25 ml, 11.25 mmoles). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 6 h y después se enfría a 5°C, y se agrega 4-amino-5-ciano-7- (2 , 3-di-0-metansulfonil-5-O-ter-butildifenilsilil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina (1.40 g, 2.09 mmoles) en 12 ml de THF. La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 18 h, se enfría con hielo, se suspende al agregar agua (0°C, 5 ml) , y se agita a temperatura ambiente durante 30 min, El solvente se evapora y el residuo se extrae con acetato de etilo. Los extractos se concentran y el residuo se somete a cromatografía sobre sílice (acetato de etilo 15% en hexanos) para proporcionar 640 mg del compuesto del título como una espuma incolora.

Preparación de 4 -amino-5-ciano-7 - (2 , 3 -didehidro-2 , 3- didesoxi -ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3 -d] pirimidina (49) A una solución agitada de 4-amino-5-ciano-7- (5-0-ter-butildifenilsilil-2,3-didehidro-2, 3-didesoxi-ß-D-ribofuranosil)pirrólo [2, 3-d]pirimidina (2.55 g, 5.32 mmoles) en 100 ml de THF anhidro a 5°C se agrega fluoruro de tetrabutilamonio (1.0 M en THF, 6.6 ml) . La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 3 h y se concentra. La cromatografía sobre sílice (metanol 6% en acetato de etilo) proporciona 1.09 g del compuesto del título 49 como un sólido incoloro.

Preparación de 5-ciano-7- (5 (R) -C-metil -ß-D- ribof uranosil ) pi rrol o [2, 3 -d] -4 -pi rimi dona (25a ) A una solución agitada de 4-amino-5-ciano-7- (5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina (306 mg, 1.0 mmoles) en 30 ml de agua y 2.0 ml de ácido acético a 55°C se agrega en porciones nitrito de sodio (590 mg, 8.55 mmoles) . La mezcla resultante se agita a 70°C durante 3 h y se agrega más nitrito de sodio (300 mg, 4.30 mmoles). La mezcla se agita a la misma temperatura durante 18 h adicionales. Se evapora el solvente y el residuo se somete a cromatografía sobre sílice (metanol 12% en cloruro de metileno) para proporcionar 210 mg del compuesto del título 25a(5'-R) como un sólido incoloro. De manera similar, se preparan los siguientes compuestos: 4-amino-5-ciano-7- (5 (S) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] -4-pirimidona 25a(5'S) a partir de 4-amino-5-ciano-7- (5 (S) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d]pirimidina, 4-amino-5-ciano-7- (ß-D-arabinofuranosil) pirrólo [2,3-d] -4-pirimidona 58 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-arabinofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] pirimidina, 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-ribofuranosil)pirrolo [2,3-d] -4-pirimidona 11 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] pirimidina, 4-amino-5-ciano-7- (2, 3 -didesoxi-2, 3-didehidro-ß-D-glicero-pento-furanosil) pirrólo [2, 3-d] -4-pirimidona 50 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2, 3-didesoxi-ß-D-pent-2-enofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] pirimidina, 4-amino-5-ciano-7- (2, 3 -didesoxi-ß-D-glicero-pentofuranosil) pirrólo [2, 3-d] -4-pirimidona 65 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2, 3-didesoxi-ß-D-glicero-pentofuranosil) pirrólo [2, 3-d] pirimidina, 4-amino-5-ciano-7- (2 -desoxi-ß-D-furanosil) pirrólo [2,3-d] -4-pirimidona 69 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2-desoxi-ß-D-eritropentofuranosil) pirrólo [2,3-d] pirimidina . _ Preparación de J- (5 (R) -C-metil -ß-D- ribof uranos i Dpi rrol o [2, 3 -d] -4 -pi rimi dona - 5- carboxami doxima (24a) Una suspensión agitada de 5-ciano-7- (5- (R) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] -4-pirimidona (240 mg, - 0.784 mmoles), clorhidrato de hidroxilamina (163 mg, 2.352 mmoles) y carbonato de potasio (162 mg, 1.176 mmoles) en 50 ml de etanol se somete a reflujo bajo argón durante 18 h. El precipitado se filtra y se lava con etanol tibio. El filtrado se concentra y el residuo se somete a cromatografía sobre sílice (metanol 20% en cloruro de metileno) para proporcionar 170 mg del compuesto del título 26a(5'-R) como un sólido incoloro. De manera similar, se preparan los siguientes compuestos: 4-amino-5-ciano-7- (ß-D-arabinofuranosil) pirrólo [2, 3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidoxima 60 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-arabinofuranosil) -pirrólo [2 , 3-d] -4-pirimidonma 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidoxima 13 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] -4-pirimidona, 4-amino-5-ciano-7- (2, 3-didehidro-2, 3 -didesoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidoxima 51 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2, 3-didehidro-2 , 3-didesoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2, 3-d] -4-pirimidona, 4-amino-5-ciano-7- (2-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidoxima a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2,3-d] -4-pirimidona .

- Preparación de clorhidrato de 7- (5 (R) -C-metil -ß-D- ribofuranosi Dpi rrol o [2, 3-d] -4 -pi ri i dona-5- carboxami dina (27a) Una suspensión de 7- (5 (R) -C-metil-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidoxima (110 mg, 0.324 mmoles), cloruro de amonio (20 mg, 0.374 mmoles) y níquel Raney (suspensión 50% en agua, 200 mg) en 75 ml de agua se agita en un aparato de hidrogenación H2, 345 kPa (50 psi) ) a temperatura ambiente durante 18 h. El catalizador se filtra y se lava (agua tibia) . El filtrado combinado se concentra y el producto se recristaliza a partir de metanol para proporcionar 100 mg del compuesto del título 27a(5* -R) como un sólido incoloro. Se preparan los siguientes compuestos de una manera similar: clorhidrato de 4-amino-5-ciano-7- (ß-D-arabinofuranosil) pirrólo [2, 3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidina 63 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-arabinofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidoxima, clorhidrato de 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D -ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidina 15 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (5-desoxi-ß-D-ribofuranosil) pirrólo [2 , 3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidoxima, clorhidrato de 4-amino-5-ciano-7- (2-desoxi-ß-D-riboíuranosil) pirrólo [2, 3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidina 70 a partir de 4-amino-5-ciano-7- (2-desoxi-ß-D-ri ofuranosil)pirrolo[2,3-d] -4-pirimidona-5-carboxamidoxima. De este modo, se han descrito modalidades específicas y aplicaciones de análogos de nucleósido de pirrólo [2, 3-d] pirimidina. Sin embargo, será evidente para aquellos expertos en la técnica que son posibles muchas más modificaciones además de las ya descritas, sin apartarse de los conceptos de la invención de la presente Por lo tanto, la materia objeto de la invención no se restringe, excepto en el espíritu de las reivindicaciones anexas. Además, al interpretar la especificación y las reivindicaciones, todos los términos se deben de interpretar de la manera más amplia posible, consistente con el contexto. En particular, los términos "comprenden" y "que comprende" se deben interpretar con referencia a elementos, componentes o etapas de una manera no excluyente, lo que indica que los elementos, componentes o etapas a las que se hace referencia pueden estar presentes, o se pueden utilizar, o bien se pueden combinar con otros elementos, componentes o etapas a las que no se haga referencia expresa. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (20)

5 REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Un análogo de nucleósido, de conformidad con la fórmula (I) : caracterizado porque A es O, S o CH2; X es H, NH2 u OH; Y es

H, halógeno o NH2; Z se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, R,

OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NR2, CN, C(0)NH2/ COOH, COOR,

CH2NH2, C(=NOH)NH2 y C(=NH)NH2, en donde R es alquilo, alquenilo, alquinilo o aralquilo; R2 y R3 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de H, F y OH; 5 -

R4 se selecciona del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde

R4 opcionalmente tiene por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional ; R5 es OH, OP(O) (OH)2, P(O)(0H)2, OP(0)(OR')2 o P(0)(0R')2, en donde R1 es un grupo de enmascaramiento; y R5. se selecciona del grupo que consiste de un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R5. tiene por lo menos dos átomos de carbono, y opcionalmente por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional . 2. El análogo de nucleósido, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque Z es CN, C(0)NH2 o -C(=NH)NH2, y en donde R5. tiene por lo menos dos átomos de carbono y se selecciona del grupo que consiste de un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo. 3. El análogo de nucleósido, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque tiene la estructura - en donde Z es CN, C(0)NH2, C(=NH)NH2 o C(=NOH)NH2, y R4 y R5. se seleccionan independientemente del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R4 y R5- de manera independiente y opcional contienen por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional; con la condición de que R4 y R5. no son juntos hidrógeno. 4. Un método para cambiar la secreción de una citocina de una célula, caracterizado porque comprende: proporcionar un compuesto de conformidad con la fórmula (II) ; y en donde A es O, S o CH2; X es H, NH2 u OH; Y es H, halógeno o NH2; Z se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NR2, CN, C(0)NH2, COOH, COOR, CH2NH2, C(=NOH)NH2 y C(=NH)NH2, en donde R es alquilo, alquenilo, alquinilo o aralquilo; R2 y R3 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de H, F y OH; 5 R4 y R5. se seleccionan independientemente del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, y en donde R4 y R5., de manera independiente y opcional contienen por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional ; 10 R5 es H, OH, OP(0) (OH)2, P(0(0H)2, OP(0) (OR')2 o P(0) (OR')2 en donde R' es un grupo de enmascaramiento; y presentar la célula con el compuesto a una concentración efectiva para cambiar la secreción de la citocina. 5. El método de conformidad con la 15 reivindicación 4, caracterizado porque la citocina es una citocina tipo 1. 6. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la citocina tipo 1 es IFN?. 20

7. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque la citocina es una citocina tipo 2.

8. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque la citocina tipo 2 es 25 IL-4. mil^mmámt m - -

9. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque la célula es un linfocito.

10. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque la célula es una célula cancerosa.

11. El método de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque la célula cancerosa es una célula de cáncer de próstata.

12. Un método para cambiar la secreción de una citocina de una célula, caracterizado porque comprende: proporcionar un compuesto de conformidad con la fórmula (III) en donde Z es CN, C(0)NH2, C(=NH)NH2, C(=NNH2)NH2 o -C(=N0H)NH2, en donde R5 es H, OH, 0P(0) (OH)2, P(O) (OH)2, OP(0)(OR')2 o P(0)(0R')2, en donde R' es un grupo de - enmascaramiento; y presentar a la célula con el compuesto a una concentración efectiva para cambiar la secreción de la citocina.

13. Un método para reducir el crecimiento de una célula hiperproliferativa, caracterizado porque comprende: proporcionar un compuesto de conformidad con la fórmula (IV) 1; en donde" A es O, S o CH2; X es H, NH2 u OH; Y es H, halógeno o NH2; Z se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NR2, CN, C(0)NH2, COOH, COOR, CH2NH2, C(=NOH)NH2 y C(=NH)NH2, en donde R es alquilo, alquenilo, alquinilo o aralquilo; R2 y R3 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de H, F y OH; R4 se selecciona del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R4 opcionalmente contiene de por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional; R5. se selecciona del grupo que consiste de un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, un alquinilo y un aralquilo, en donde R5. tiene por lo menos dos átomos de carbono, y opcionalmente contienen por lo menos uno de un heteroátomo y un grupo funcional ; R5 es H, OH, OP(O) (OH)2, P(0)(OH)2, OP(0)(OR')2 o P(0)(OR')2, en donde R' es un grupo de enmascaramiento, con la condición de que R4 y R5. no sean juntos hidrógeno; y presentar la célula hiperproliferativa con el compuesto a una concentración efectiva para reducir el crecimiento de la célula hiperproliferativa.

14. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la célula hiperpróliferativa es una célula cancerosa.

15. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque la célula cancerosa es una célula de cáncer de próstata.

16. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la reducción de crecimiento comprende reducción de la síntesis de ADN.

17. Un método para reducir la liberación de un factor de crecimiento de una célula, que comprende: proporcionar un compuesto de conformidad con la reivindicación 1; y presentar a la célula con el compuesto a una concentración efectiva para reducir la liberación del factor de crecimiento.

18. El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque el factor de crecimiento es VEGF.

19. El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque la célula es una célula cancerosa.

20. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la célula cancerosa es una célula de cáncer de próstata.