MX2013009695A - Germoplasma de canola que exhibe atributos de composicion de semilla que suministran valor nutricional a la harina de canola mejorada. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a germoplasma de canola que comprende por lo menos 45% de proteína cruda y no más de 18% de contenido de fibra detergente ácida en una base de materia seca, libre de aceite. Algunas modalidades también comprenden uno o más rasgos que se seleccionan a partir del grupo que consiste de contenido polifenólico reducido y contenido incrementado de fósforo. En modalidades particulares, la invención se refiere a plantas de canola que comprenden dicho germoplasma y a productos de materia prima vegetal (por ejemplo semillas) producidos a partir de las mismas. Las plantas de canola que comprenden un germoplasma de la invención pueden exhibir características de composición de semilla favorables que las hacen particularmente valiosas como una fuente para harina de canola, y a métodos para introducir por lo menos un rasgo que se selecciona a partir del grupo que consiste de contenido alto de proteína, contenido polifenólico reducido y contenido incrementado de fósforo, en una variedad de canola en una manera independiente del color de la cubierta de la semilla.

Description

GERMOPLASMA DE CAÑOLA QUE EXHIBE ATRIBUTOS DE COMPOSICION DE SEMILLA QUE SUMINISTRAN VALOR NUTRICIONAL A LA HARINA DE CAÑOLA MEJORADA RECLAMO DE PRIORIDAD La presente solicitud reclama el beneficio conforme a 35 USC § 119(e) de la solicitud provisional E.U.A. No. 61/445,426, presentada el 22 de febrero de 2011, para "GERMOPLASMA DE CAÑOLA QUE EXHIBE ATRIBUTOS DE COMPOSICION DE SEMILLA QUE SUMINISTRAN VALOR NUTRICIONAL A LA HARINA DE CAÑOLA MEJORADA".

CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a germoplasma y cultivares de cañóla. En algunas modalidades, la invención se refiere a germoplasma de cañóla que tiene atributos de composición de harina (por ejemplo, niveles reducidos de factores anti-nutricionales y niveles incrementados de proteína) que están modificados de manera independiente del color del tegumento de la semilla. Las modalidades particulares se refieren a germoplasma de cañóla que demuestra niveles reducidos de factores anti-nutricionales (por ejemplo, fibra detergente ácida (ADF) y compuestos polifenólicos) y niveles incrementados de proteína y fósforo.

ANTECE DENTES DE LA INVENC IÓN "Cañóla" se refiere a semilla de colza (Brassica spp. ) que tiene un contenido de ácido erúcico (C22: 1 ) de cuando mucho 2 por ciento en peso (en comparación con el contenido de ácido graso total de una semilla) , y que produce (después de triturar) una harina secada al aire que contiene menos de 30 micromoles (prnol) de glucosinolatos por gramo de harina desgrasada (libre de aceite) . Estos tipos de semilla de colza se distinguen por su comestibilidad en comparación con variedades más tradicionales de la especie. Se considera que el aceite de cañóla es un aceite comestible superior debido a sus niveles bajos de ácidos grasos saturados.

Aunq ue la harina de semilla de colza es relativamente alta en proteínas, su alto contenido de fibra dismin uye su digestibilidad y su valor como un pienso para animales. En comparación con la harina de soya , la harina de cañóla y de colza oleaginosa contiene valores más altos de fibra dietética y un porcentaje más bajo de proteína . Debido a su alto contenido de fibra dietética, la harina de cañóla tiene aproximadamente 20% menos energ ía metabolizable que la hari na de soya. Como resultado, el valor de la harina ha permanecido bajo con relación a otras harinas de oleag inosas tal como la harina de soya, particularmente en raciones para cerdos y aves de corral. Rakow (2004a) Cañóla meal quality improvement through the breeding of yellow-seeded varieties - an histórica! perspective, en AAFC Sustainable Production Systems Bulletin . De manera adicional , la presencia de glucosinolatos en algunas harinas de cañóla también disminuye su valor, debido a los efectos perjudiciales que estos compuestos tienen sobre el crecimiento y reproducción del ganado.

Las variedades de cañóla se distinguen en parte por el color de sus tegumentos. El color del tegumento generalmente se divide en dos clases principales: amarillo y neg ro (o café oscuro) . También se observan tonos variables de estos colores, tales como café rojizo y café amarillento. Se ha observado ampliamente que las variedades de cañóla con color de tegumento más claro tienen cascarillas más delgadas, y por lo tanto menos fibra y más aceite y proteína que las variedades con tegumentos de color oscuro. Stringam ef al. (1974) Chemical and morphological characteristics associated with seed coat color in rapeseed , en Proceedings of the 4th I nternational Rapeseed Congress, Giessen , Alemania, pp. 99-1 08; Bell y Shires (1 982) Can . J . Animal Science 62 :557-65; Shirzadegan y Róbbelen ( 1985) Gótingen Fette Seifen Anstrichmittel 87:235-7; Simbaya ef al. ( 1 995) J . Agr. Food Chem. 43:2062-6; Rakow (2004b) Yellow-seeded Brassica napus cañóla for the Canadian cañóla Industry, en AAFC Sustainable Production Systems Bu lletin . U na posible explicación para esto es que la planta de cañóla podría gastar más energía en la producción de proteínas y aceites si ésta no req uiriera dicha energ ía para la producción de los componentes de fibra del tegumento. También se ha reportado que las líneas de cañóla de semilla amarilla tienen contenido más bajo de glucosinolato que las líneas de cañóla de semilla negra . Rakow ef al. (1 999b) Proc. 10th I nt. Rapeseed Cong ress, Canberra , Australia , Sep. 26-29, 1 999, Poster #9. Por lo tanto, históricamente se ha perseguido el desarrollo de variedades de cañóla de semilla amarilla como una manera potencial para incrementar el valor de alimento de la harina de cañóla. Bell ( 1 995) Meal and by-product utilization in animal nutrition, en Brassica oilseeds. production and utilization . Eds . Kimber y McGregor, Cab I nternational , Wallingford , Oxon , OX 1 08DE , RU , pp. 301 -37; Rakow (2004b), supra; Rakow & Raney (2003) .

Algunas formas de semilla amarilla de especies de Brassica cercanamente relacionadas a B. napus (por ejemplo, B. rapa y B. júncea) han demostrado tener niveles más bajos de fibra en sus semillas y harinas subsiguientes. El desarrollo de germoplasma de B. napus de semilla amarilla demostró q ue la fibra se puede reducir en B. napus a través de la integración de genes que controlan la pigmentación de la semilla provenientes de especies de Brassica relacionadas. Sin embargo, la integración de genes que controlan la pigmentación de la semilla provenientes de especies de Brassica relacionadas en variedades de Brassica oleaginosas valiosas, tal como las variedades de cañóla, es complicada por el hecho de que múltiples alelos recesivos están implicados en la herencia de tegumentos amarillos en las líneas de semilla amarilla disponibles hoy en d ía . Asimismo, el "enchinamiento de la vaina" también es un problema comúnmente encontrado durante la integración del color de tegumento amarillo proveniente de otras especies de Brassica, tales como júncea y carinata.

Se dispone de muy poca información en cuanto a qué tanta variabilidad existe para la fibra dentro del germoplasma de B. napus de semilla oscura y no se han hecho reportes de q ue se hayan desarrollado líneas de cañóla de semilla oscura que contengan niveles reducidos de factores anti-nutricionales (por ejemplo, fibra y compuestos polifenólicos), y niveles incrementados de proteína.

B REVE DESCRI PC ION DE LA INVENC IO N En la presente solicitud se describen cultivares polinizados abiertos de cañóla (Brassica napus) (CL044864, CL065620) e híbridos (CL1 661 02H , CL1 21460H y CL121466H) que comprenden germoplasma que provee una combinación novedosa de cambios en la composición de harina de cañóla que han demostrado impactar el valor nutricional . En algunas modalidades, las plantas de cañóla que comprenden el germoplasma de la invención pueden producir semillas con , por ejemplo, combinaciones novedosas de niveles de proteína, fibra y fósforo, de modo tal q ue estos componentes de semilla sean independientes del color del tegumento. En modalidades particulares, dichas plantas pueden producir semilla con contenido más alto de proteína y contenido más bajo de fibra q ue los tipos de cañóla estándar, así como niveles de fósforo que sean similares a, o más altos que, los niveles de fósforo en los tipos estándar de cañóla. Las líneas endogámicas y los híbridos de cañóla que comprenden el germoplasma de la invención pueden en algu nas modalidades su min istrar propiedades de harina incrementadas desde el punto de vista n utricional cuando se utilizan directamente como un alimento o ingrediente alimenticio, y/o cuando se utilizan como mezcla de licor madre (feed stock) para procesar aislados y concentrados de proteína. Dichas semillas pueden ser de color oscuro (por ejemplo, negras, oscuras , y moteadas) o de color claro.

Por lo tanto, en la presente solicitud se describe un germoplasma de Brassica que se pod ría utilizar para obtener plantas de cañóla que tengan rasgos de componentes de semilla deseables en una manera independiente del color de la semilla. En algunas modalidades, las plantas que comprenden dicho germoplasma se pueden utilizar para producir una harina de cañóla con cualidades nutricionales deseables. En modalidades particulares, se proveen líneas de cañóla endogámicas (y las plantas de las mismas) que comprenden un germoplasma de la invención . En modalidades adicionales, se proveen líneas de cañóla h íbridas (y las plantas de las mismas) que tienen u na planta de cañóla endogámica que comprende un germoplasma de la invención como u n progenitor. Las variedades de cañóla de la invención incluyen , por ejemplo, y sin limitación : CL044864; CL065620; CL1 661 02H ; CL1 21460H; y CL1 21466H .

En la presente solicitud también se describen productos de bienes de consumo vegetales obtenidos a partir de plantas de cañóla endogámicas o híbridas que comprenden un germoplasma de la invención. Las modalidades particulares incluyen una harina o semilla de cañóla obtenida a partir de dicha planta de cañóla endogámica o híbrida.

También se describen métodos para mejorar el valor nutricional de una harina de cañóla. Por ejemplo, se describen métodos para introgresión de una combinación de características de composición de harina de cañóla dentro de un germoplasma de Brassica en una manera independiente del color de la semilla. En modalidades particulares, un germoplasma de la invención se puede combinar con un germoplasma de cañóla que está caracterizado por un tegumento de color amarillo para producir un germoplasma que es capaz de suministrar harina de cañóla mejorada con características deseadas impartidas por cada uno de los germoplasmas.

Las características anteriores y otras características se harán más evidentes a partir de la siguiente descripción detallada de varias modalidades, lo cual procede con referencia a las figuras anexas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 incluye imágenes de varias variedades de cañóla que tienen color de tegumento oscuro.

La Figura 2 incluye datos provenientes del análisis de composición de semilla de ciertas líneas endogámicas e híbridas de B. napus. Las muestras de semillas provienen de pruebas replicadas a través de Canadá Occidental . Los datos de composición de semilla se predicen tomando como base análisis de infrarrojo cercano (N I R) , y posteriormente se verifican utilizando métodos de química de referencia.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN I . Generalidades de varias modalidades La harina de cañóla es la fracción de semilla de cañóla que queda después de los procedimientos de extracción de aceite. La harina de cañóla es una fuente de proteína, y por lo tanto se utiliza en varias aplicaciones, incluyendo form ulación de alimento para animales y aislamiento de concentrados y aislados proteínicos de valor elevado. La fibra dentro del tegumento, cotiledones y embrión que termina en la harina limita las tasas de inclusión de la harina de cañóla en especies animales monogástricas, y por lo tanto las harinas de cañóla típicamente no proveen el mismo valor nutricional que el de las harinas preparadas a partir de otras fuentes (por ejemplo, soya) . Las formas de semilla amarilla en las especies cercanamente relacionadas a B. napus (por ejemplo, B. rapa y ß. júncea) han demostrado tener niveles más bajos de fibra en sus semillas y harina subsiguientes. Esta observación ha motivado intentos para introducir el rasgo de bajo contenido de fibra de semilla en B. napus en u na manera dependiente del color de semilla amarillo . El desarrollo de germoplasma de B. napus de semilla amarilla g resultante ha demostrado que la fibra se puede reducir en B. napus a través de esta estrategia.

Antes de esta invención , no se creía que las variedades de cañóla de semilla oscura pudieran exh ibir contenido de fibra de semilla que fuera tan bajo como el que ha sido observado en las variedades de semilla amarilla. Asimismo, no se han descrito l íneas de cañóla de semilla oscura que contengan niveles reducidos de factores anti-nutricionales (por ejemplo, fibra y compuestos polifenólicos) , y niveles de proteína y fósforo incrementados q ue pudieran representar fuentes para harina de cañóla mejorada. En algunas modalidades, los germoplasmas de cañóla descritos en la presente solicitud proveen combinaciones de varios atributos clave de composición de harina incrementados que son expresados de manera independiente del color del teg umento. En modalidades particulares, las harinas de cañóla preparadas a partir de semillas de cañóla que comprenden un germoplasma de la invención pueden lograr tasas de inclusión dietética más altas, por ejemplo, en dietas porcinas y avícolas.

Los germoplasmas de la invención se pueden utilizar (por ejemplo, a través de mejoramiento genético selectivo) para desarrollar cañóla que tenga rasgos de componente de semilla deseados con uno o más rasgos deseados adicionales (por ejemplo, composición de aceite mejorada , producción de aceite mejorada, composición de proteína modificada, contenido de proteína incrementado, resistencia a enfermedades, parásitos, resistencia a herbicidas, etc.). Los germoplasmas de la i nvención se pueden utilizar como un germoplasma de partida sobre el cual se pueden introducir cambios adicionales en la composición de semilla, de modo tal que se puedan desarrollar líneas e híbridos de cañóla que provean harinas de cañóla que tengan mejoras incrementadas del tipo descrito en la presente solicitud .

I I. Abreviaturas ADF fibra detergente ácida ADL lignina detergente ácida AI D digestibilidad il íaca aparente AM E energ ía metabolizable aparente BSC cañóla de semilla negra CP porcentaje de proteína cruda DM concentración de materia seca EC M harina de cañóla mejorada de la presente invención FAM E ácido g raso/ésteres metílicos de ácido g raso G E energía bruta HT procesamiento a "temperatura elevada" LT procesamiento a "baja temperatura" NDF fibra detergente neutra RM N resonancia magnética nuclear N I R espectroscopia en infrarrojo cercano SAE éster de ácido sinápico SBM harina de soya SER recibido extraído soluble SI D digestibilidad il íaca normalizada TAAA disponibilidad real de aminoácido TDF fibra dietética total TM E energ ía metabolizable real WF hojuela blanca I I I . Términos Retrocruza : Los métodos de retrocruza se pueden utilizar para introducir u na secuencia de ácido nucleico en las plantas. La técnica de retrocruza ha sido ampliamente utilizada durante décadas para introducir nuevos rasgos en las plantas. Jensen , N . , Ed. Plant Breeding Methodology, John Wiley & Sons, I nc. , 1988. En un protocolo de retrocruza típico, la variedad original de interés (progenitor recurrente) se cruza con una segunda variedad (progenitor no recurrente) que porta un gen de interés a ser transferido. La progenie resultante de esta cruza después se cruza nuevamente con el progenitor recu rrente, y el procedimiento se repite hasta que se obtiene una planta en la cual esencialmente todas las características morfológicas y fisiológicas deseadas de la planta recurrente se recuperan en la planta convertida, además del gen transferido proveniente del progenitor no recurrente.

Aceite de cañóla: Aceite de cañóla se refiere al aceite que se extrae a parti r de variedades comerciales de semilla de colza . Para producir aceite de cañóla, la semilla típicamente se g radúa y se mezcla en elevadores de grano para producir un producto aceptablemente uniforme. La semilla mezclada después se tritura, y el aceite típicamente se extrae con hexano y se refina en forma subsiguiente. El aceite resultante después se puede vender para uso . El contenido de aceite típicamente se mide como un porcentaje de la semilla seca entera, y los contenidos del aceite particular son característicos de variedades diferentes de cañóla . El contenido de aceite se puede determinar en forma fácil y rutinaria utilizando varias técnicas anal íticas , por ejemplo y sin limitación : RM N ; N I R; extracción Soxhlet, o mediante otros métodos ampliamente disponibles para los expertos en la técnica . Véase Bailey, I ndustrial Oil & Fat Products (1 996) , 5a ed . Wiley I nterscience Publication , N ueva York, Nueva York. La composición en por ciento de ácidos grasos totales típicamente se determina extrayendo una muestra de aceite a partir de la semilla, produciendo los ésteres metílicos de los ácidos g rasos presentes en la muestra de aceite, y analizando las proporciones de los diversos ácidos grasos en la muestra utilizando cromatografía de gas. La composición de ácido g raso también puede ser una característica distintiva de variedades particulares.

Comercialmente útil : Tal como se utiliza en la presente solicitud , el término "comercialmente útil" se refiere a l íneas e híbridos vegetales que tienen suficiente vigor y fertilidad vegetal, tal que un cultivo de la línea o híbrido vegetal pueda ser prod ucido por los agricultores utilizando equipo agrícola convencional. En modalidades particulares, los prod uctos de bien de consumo vegetales con los componentes y/o cualidades descritas se pueden extraer a partir de las plantas o materiales de la planta de la variedad comercialmente útil . Por ejemplo, el aceite q ue comprende los componentes de aceite deseados se puede extraer a partir de la semilla de u na línea o h íbrido vegetal comercialmente útil utilizando equipo de tritu ración y extracción convencionales . En algunas modalidades, una l ínea de planta comercialmente útil es una línea endogámica o una línea híbrida. Las líneas e híbridos "agronómicamente de élite" típicamente tienen características agronómicas deseadas; por ejemplo y sin limitación : rendimiento mejorado de por lo menos un producto de bien de consumo vegetal ; madu rez; resistencia a la enfermedad ; y capacidad de cultivo en plantación .

Línea de élite: Cualquier línea vegetal que haya resultado de mejoramiento genético y selección respecto a desempeño agronómico superior. U na planta de élite es cualquier planta proveniente de una línea de élite.

Harina de cañóla mejorada: Tal como se utiliza en la presente solicitud , el término "harina de cañóla mejorada" significa una harina de cañóla con una composición mejorada derivada del procesamiento de semillas de cañóla las cuales tienen niveles incrementados de proteína y niveles reducidos de por lo menos algún componente anti-n utricional. La harina de cañóla mejorada de la presente invención la cual puede ser referida diversamente en la presente solicitud como "ECM" , "ECM de cañóla de semilla neg ra", "BSC EC M" , o "DAS BSC ECM". Sin embargo, la presente invención no pretende estar limitada a solamente germoplasma de ECM de cañóla de semilla negra.

Esencialmente derivada: En alg unas modalidades, las manipulaciones de plantas, semillas, o partes de la misma puede llevar a la creación de variedades esencialmente derivadas. Tal como se utiliza en la presente solicitud , el término "esencialmente derivada" sigue la convención establecida por la U nión I nternacional para la Protección de N uevas Variedades de Plantas (UPOV por sus siglas en inglés) : [A] la variedad deberá ser considerada como esencialmente derivada a partir de otra variedad ("la variedad inicial") cuando (i) ésta se derive predominantemente a partir de la variedad inicial, o a partir de una variedad que por sí misma sea derivada predominantemente a partir de la variedad inicial , al tiempo que retiene la expresión de las características esenciales que resultan del genotipo o combinación de genotipos de la variedad inicial; (ii) ésta sea claramente disting uible de la variedad inicial; y (iii) excepto por las diferencias que resulten del acto de derivación , ésta se conforma a la variedad inicial en la expresión de las características esenciales que resultan del genotipo o combinación de genotipos de la variedad inicial .

U POV, Sixth Meeting with I nternational Organizations. Génova, 30 de octubre de 1 992 (documento preparado por la Oficina de la Unión) .

Producto de bien de consumo vegetal : Tal como se utiliza en la presente solicitud, el término "producto de bien de consumo vegetal" se refiere a bienes de consumo producidos a partir de una planta o parte vegetal particular (por ejemplo, u na planta que comprende un germoplasma de la invención , y una parte vegetal obtenida a partir de una planta que comprende un germoplasma de la invención) . Un prod ucto de bien de consumo puede ser, por ejemplo y sin limitación : grano; harina (meal); forraje ; proteína; proteína aislada; harina (flour); aceite; g ranos o semillas enteras o tritu radas; cualquier prod ucto alimenticio que comprende cualquier harina, aceite, o grano entero o triturado; o ensilaje.

Línea vegetal : Tal como se utiliza en la presente solicitud , un "línea" se refiere a un grupo de plantas que despliegan poca variación genética (por ejemplo, sin variación genética) entre individ uos para por lo menos u n rasgo. Las l íneas endogámicas pueden ser creadas mediante varias generaciones de auto-polinización y selección o, de manera alternativa , mediante propagación vegetativa a partir de un progenitor individ ual utilizando técnicas de cultivo de tejido o de célula. Tal como se utiliza en la presente solicitud , los términos "cu ltivar" , "variedad", y "tipo" son sinónimos, y estos términos se refieren a una l ínea que se utiliza para producción comercial .

Material vegetal : Tal como se utiliza en la presente solicitud , el término "material vegetal" se refiere a cualquier material procesado o no procesado derivado, como un todo o en parte, a partir de una planta . Por ejemplo y sin limitación, un material vegetal puede ser una parte de la planta, una semilla, u n fruto, una hoja, una raíz, un cultivo vegetal, un cultivo de tejido vegetal, un explante vegetal , o una célula vegetal.

Estabilidad : Tal como se utiliza en la presente solicitud , el término "estabilidad", o "estable" se refiere a un componente o rasgo vegetal dado que es heredable y es mantenido sustancialmente al mismo nivel a través de generaciones múltiples de semillas. Por ejemplo, un componente estable puede ser mantenido por al menos tres generaciones sustancialmente al mismo nivel. En este contexto , el término "sustancialmente el mismo" se puede referir en algu nas modalidades a un componente mantenido hasta dentro de 25% entre dos generaciones diferentes; dentro de 20%; dentro de 1 5% ; dentro de 1 0% ; dentro de 5% ; dentro de 3% ; dentro de 2% ; y/o dentro de 1 % , así como un componente que es mantenido perfectamente entre dos generaciones diferentes . En algunas modalidades, un componente vegetal estable puede ser, por ejemplo y sin limitación , un componente de aceite; un componente de proteína; un componente de fibra; u n componente de pigmento; un componente de glucosinolato ; y un componente de lignina . La estabilidad de un componente puede ser afectada por uno o más factores ambientales. Por ejemplo , la estabilidad de un componente de aceite puede ser afectada por, por ejemplo y sin limitación : temperatura ; ubicación ; estrés; y el tiempo de siembra . Se esperaría q ue las generaciones subsiguientes de una planta que tiene un componente estable bajo condiciones de campo produzcan el componente de la planta en una manera similar, por ejemplo, como se indicó anteriormente.

Rasgo o fenotipo: Los términos "rasgo" y "fenotipo" se utilizan de manera intercambiable en la presente solicitud .

Variedad o cultivar: Los términos "variedad" o "cultivar" se refieren en la presente solicitud a una línea vegetal que se utiliza para producción comercial la cual es distinta , estable y uniforme en sus características cuando se propaga. En el caso de una variedad o cultivar h íbrido, las líneas progenitoras son distintas, estables, y uniformes en sus características .

A menos q ue se indique de otra manera, los términos "un" y "uno(a)" tal como se utilizan en la presente solicitud se refieren a por lo menos u no.

IV. Germoplasma de cañóla que provee rasgos de componente de semilla deseables en una manera independiente del color de la semilla En una modalidad preferida, la invención provee un germoplasma de Brassica que se puede utilizar para obtener plantas de cañóla q ue tienen rasgos de componente de semilla deseables en una manera independiente del color de la semilla. También se proveen l íneas endogámicas e h íbridos de cañóla ejemplares particulares que comprenden este germoplasma.

El aceite de cañóla ha sido reconocido en térmi nos generales como un aceite muy saludable, para consumo tanto humano como animal. Sin embargo, el componente de harina de la semilla de cañóla, que q ueda después de extraer el componente de aceite, es inferior a la harina de soya, debido a su alto contenido de fibra y valor nutricional disminuido. En algunas modalidades, las plantas de cañóla que comprenden u n germoplasma de la invención pueden mitigar o superar estas deficiencias, y podrían proveer harinas de cañóla como una fuente altamente n utritiva y económica de alimento para animales. La harina de cañóla es u n subproducto de la producción de aceite de cañóla, y por lo tanto las harinas de cañóla provistas por esta invención ahorran recursos valiosos permitiendo que este subproducto se pueda utilizar competitivamente con otras harinas.

Previamente se pensó que el color de semilla de cañóla amarillo per se era significativo, debido a que se creyó que correspond ía a características nutricionales mejoradas del componente de harina obtenido después de la extracción del aceite. Algunas modalidades pueden proveer, por primera vez, un germoplasma para cañóla de semilla oscura (por ejemplo de semilla oscura, neg ra , y moteada) con bajo contenido de fibra q ue también provee un aceite superior con alto contenido de oleico y bajo contenido de linolénico, cuyo germoplasma también provee harina de cañóla con características nutricionales mejoradas (por ejemplo, componentes de semilla mejorados) . En algunas modalidades, una planta que comprende un germoplasma de la invención podría proveer también de manera sorpresiva estos rasgos en combinación con otros rasgos valiosos (por ejemplo y sin limitación , rendimiento excelente, contenido alto de proteína, contenido alto de aceite , y calidad alta del aceite). Las semillas con tegumento oscuro en modalidades particulares pueden tener un tegumento considerablemente más delgado que las semillas producidas por variedades de cañóla de semilla oscura estándar. El teg umento más delgado puede dar como resultado u n contenido reducido de fibra en la harina, y u n incremento en el contenido de aceite y proteína de la semilla, en comparación con los niveles de aceite y proteína en una variedad de semilla oscura estándar. Las semillas oscuras producidas por plantas q ue comprenden un germoplasma de la invención pueden por lo tanto tener concentraciones más altas de aceite y proteína en sus semillas que las observadas en semillas producidas por una planta de cañóla de semilla oscura estándar.

En modalidades, una planta que comprende un germoplasma de la invención no exhibe limitaciones agronómicas y/o de semilla sustanciales. Por ejemplo, dicha planta puede exhibir cualidades ag ronómicas y/o de semilla (por ejemplo; germinación ; vigor estacional temprano; efecto de tratamientos de semilla; cosecha y capacidad de almacenamiento de la semilla) que sean por lo menos tan favorables como aq uellas exhibidas por variedades estándar de cañóla. En modalidades particulares, una planta que comprende un germoplasma de la invención también puede comprender uno o más rasgos favorables adicionales exhibidos por una l ínea endogámica de cañóla pre-existente, por ejemplo y sin limitación , un perfil de ácido graso favorable.

En modalidades, una planta que comprende un germoplasma de la invención puede producir semillas que comprenden por lo menos una de varias características nutricionales. En modalidades particulares, una semilla producida por d icha planta de cañóla puede comprender por lo menos una característica nutricional que se selecciona a partir del grupo que consiste de: perfil de aceite favorable; contenido alto de proteína; contenido bajo de fibra (por ejemplo, AD F y N DF (incluyendo bajo contenido de polifenólicos)) ; (el contenido bajo de fibra y conten ido alto de proteína confieren energía metabolizable más alta) ; contenido alto de fósforo; y contenido bajo de éster de ácido sinápico (SAE) . En algunas modalidades, contenido "alto" o "bajo" de componente se refiere a una comparación entre una semilla producida por una planta de referencia que comprende un germoplasma de la invención y una semilla producida por variedades estándar de cañóla . Por lo tanto, una planta que produce una semilla con contenido "bajo" de fibra puede producir una semilla con un contenido más bajo de fibra que el que se observa en una semilla producida por variedades estándar de cañóla . Y, u na planta q ue produce una semilla con contenido "alto" de proteína puede producir una semilla con u n conten ido más alto de proteína que el q ue se observa en una semilla producida por variedades estándar de cañóla.

En algunas modalidades, se puede producir un ensamblaje sustancialmente uniforme de u na semilla de colza producida por una planta de cañóla que comprende por lo menos una característica nutricional que se selecciona a partir del grupo antes mencionado. Dicha semilla se puede utilizar para producir un campo sustancialmente uniforme de plantas de colza. Modalidades particulares proveen semillas de cañóla que comprenden identificar combinaciones de las características antes mencionadas. Por ejemplo, el contenido total combinado de aceite y proteína de una semilla puede ser u na medida útil y característica única de la semilla.

Algunas modalidades proveen una cañóla (por ejemplo, una cañóla de semilla oscura) que comprende un germoplasma de la invención q ue es capaz de producir aceite de cañóla que tenga un perfil de aceite tipo NAT EON . Un perfil de aceite "tipo NATREON", o "similar a NATREO N" puede significar un conten ido de ácido oleico en un intervalo de, por ejemplo, 68-80% ; 70-78% ; 71 -77% ; y 72-75% , con un contenido de alfa-linolénico debajo de, por ejemplo, 3%. En modalidades particulares, una semilla obten ida a partir de una planta de cañóla que comprende u n germoplasma de la invención puede producir aceite q ue tenga más de 70% , más de 71 % , más de 71 .5% , y/o más de 72% (por ejemplo, 72.4% o 72.7%) de ácido oleico, al tiempo que tiene un contenido de ácido linolénico de menos de 2.4% , menos de 2% , menos de 1 .9% , y/o menos de 1 .8% (por ejemplo, 1 .7%) . En modalidades particulares , sin embargo , una cañóla que comprende un germoplasma de la invención puede producir aceites que tengan , por ejemplo, un contenido de ácido oleico mayor de 80%) . En algunas modalidades, un aceite de cañóla producido a partir de una cañóla que comprende un germopíasma de la invención puede ser natu ralmente estable (por ejemplo, no hidrogenado artificialmente). El conten ido de ácido graso del aceite de cañóla puede ser determinado fácilmente y de manera rutinaria de conformidad con métodos conocidos.

Por lo tanto, algu nas modalidades proveen una semilla de cañóla (por ejemplo, una semilla de cañóla oscura) que comprende una fracción de aceite y una fracción de harina, en la cual la fracción de aceite puede tener un contenido de ácido a-linolénico de, por ejemplo, 3% o menos (con relación al conten ido de ácido graso total de la semilla) , y un contenido de ácido oleico de, por ejemplo, 68% o más (con relación al contenido de ácido g raso total de la semilla) . Por definición , el contenido de ácido erúcico (C22 : 1 ) de dicha semilla también puede ser menor de 2% en peso (en comparación con el contenido de ácido graso total de la semilla) . En los ejemplos particulares, el contenido de aceite de una semilla de cañóla puede comprender 48%-50% del peso de la semilla.

La fibra es un componente de las paredes de la célula vegetal, e incluye pol ímeros de carbohidrato (por ejemplo, celulosa (cadenas poliméricas de glucosa lineal)) ; hemicelulosa (cadenas ramificadas de heteropolímeros de, por ejemplo, galactosa, xilosa, arabinosa, ramnosa, con moléculas fenólicas unidas); y pectinas (pol ímeros solubles en agua de ácido galactu rónico, xilosa, arabinosa, con grados diferentes de metilación). La fibra también incluye polímeros polifenólicos (por ejemplo, polímeros tipo lignina y taninos condensados). En teoría, la fibra ADF consiste de celulosa y lignina. Los taninos condensados típicamente están incluidos en una fracción de la ADF, pero el contenido de tanino condensado varía independientemente de la ADF. En contraste, la TDF es harina a partir de la cual se han retirado la proteína, solubles, y almidón, y está constituida por componentes insolubles de la pared celular (por ejemplo, celulosa, hemicelulosa, polifenólicos, y lignina).

En modalidades particulares, una semilla de una planta de cañóla (por ejemplo, una planta de cañóla de semilla oscura) que comprende un germoplasma de la invención puede tener una ADF disminuida, en comparación con una variedad de cañóla. En ejemplos particulares, el contenido de fibra de la harina de cañóla (semilla entera, aceite retirado, en una base de materia seca) puede comprender, por ejemplo y sin limitación: menos de aproximadamente 18% de ADF (por ejemplo, aproximadamente 18% de ADF, aproximadamente 17% de ADF, aproximadamente 16% de ADF, aproximadamente 15% de ADF, aproximadamente 14% de ADF, aproximadamente 13% de ADF, aproximadamente 12% de ADF, aproximadamente 11% de ADF, y aproximadamente 10% de ADF y/o menos de aproximadamente 22% de NDF (por ejemplo, aproximadamente 22.0% de NDF, aproximadamente 21% de NDF, aproximadamente 20% de NDF, aproximadamente 19% de NDF, aproximadamente 18% de NDF, y aproximadamente 17% de NDF).

En modalidades particulares, una semilla de una planta de cañóla que comprende u n germoplasma de la invención puede tener contenido de proteína incrementado, en comparación con una variedad de cañóla de semilla oscura estándar. En ejemplos particulares, el contenido de proteína de la harina de cañóla (semilla entera , aceite retirado, en una base de materia seca) puede comprender, por ejemplo y sin limitación, más de aproximadamente 45% (por ejemplo, aproximadamente 45% , aproximadamente 46% , aproximadamente 47% , aproximadamente 48% , aproximadamente 49%, aproximadamente 50% , aproximadamente 51 % , aproximadamente 52% , aproximadamente 53% , aproximadamente 54%, aproximadamente 55% , aproximadamente 56% , aproximadamente 57% , y aproximadamente 58%) de proteína cruda. Las diferentes variedades de cañóla están caracterizadas por contenidos particulares de proteína. El contenido de proteína (% de nitrógeno x 6.25) se puede determinar utilizando varias técnicas analíticas bien conocidas y de rutina, por ejemplo, infrarrojo cercano (N I R) y Kjeldahl.

El contenido de fósforo también se puede utilizar para definir las semillas, plantas, y líneas de las variedades de cañóla en algunas modalidades. Dichas variedades de cañóla pueden prod ucir harina de cañóla (semilla entera, aceite retirado, en una base de materia seca) q ue tiene contenido incrementado de fósforo cuando se compara con la harina producida a partir de variedades de cañóla estándar. Por ejemplo, la harina de cañóla de la invención puede comprender un contenido de fósforo de más de 1 .2% ; más de 1 .3% ; más de 1 .4%; más de 1 .5%; más de 1 .6%, más de 1 .7% , y/o más de 1 .8% .

Varias combinaciones de los rasgos antes mencionados también se pueden identificar en , y se ejemplifican mediante, las l íneas endogámicas e híbridos de cañóla provistas en los diversos ejemplos. Estas l íneas ilustran que el germoplasma de la invención se puede utilizar para proveer y obtener varias combinaciones novedosas de una amplia variedad de características y/o rasgos de cañóla convenientes. Por ejemplo, una línea de cañóla endogámica que comprende un germoplasma de la invención se puede cruzar con otra línea de cañóla que comprenda una característica y/o rasgo deseado para introducir las características de componente de semilla deseables de la línea de cañóla endogámica que comprende un germoplasma de la invención . Los cálculos de componentes de semilla (por ejemplo, contenido de fibra, contenido de glucosinolato, contenido de aceite , etc.) y otros rasgos vegetales se pueden obtener utilizando técnicas que son conocidas en el arte y aceptadas en la industria . Seleccionando y propagando las plantas de progenie provenientes de la cruza q ue comprende las características y/o rasgos deseados de las variedades progenitoras, se pueden crear nuevas variedades que comprendan la combinación deseada de características y/o rasgos.

V. Harinas de cañóla que tienen características nutricionales mejoradas Algunas modalidades proveen harinas que comprenden semilla de cañóla , en las cuales la semilla de cañóla tiene características de aceite y harina como se discutió anteriormente. Por ejemplo, algunas modalidades incluyen una harina de cañóla, secada al aire, extraída con hexano (Hojuela Blanca, o WF) q ue comprende una combinación novedosa de características (por ejemplo, componentes de semilla) como se discutió anteriormente. Las modalidades particulares incluyen harina que comprende semilla de cañóla producida a partir de una planta que comprende un germoplasma de la invención , y harina que comprende semillas de la progenie de una planta que comprende un germoplasma de la invención .

Las líneas endogámicas e híbridos de cañóla que comprenden germoplasma de la invención pueden en alg unas modalidades suministrar propiedades de harina incrementadas desde el punto de vista nutricional cuando se utilizan d irectamente como un alimento o ing rediente alimenticio, y/o cuando se utilizan as mezcla de licor madre para procesar aislados y concentrados de proteína. Por ejemplo, dichas l íneas endogámicas e h íbridos de cañóla pueden suministrar desempeño de forraje animal superior harina de cañóla estándar. En algunas modalidades, los componentes de harina de cañóla (y los forrajes animales q ue los comprenden) se pueden utilizar para proveer buena nutrición para u n animal monogástrico (por ejemplo, cerdos y aves de corral) .

En algunas modalidades, los componentes de harina de cañóla (y los forrajes animales que los comprenden) también se pueden utilizar para proveer buena nutrición para un animal rumiante (por ejemplo, animales bovinos, ovejas, cabras, y otros animales del suborden Ruminantia) . La alimentación de rumiantes presenta problemas especiales y oportunidades especiales. Las oportunidades especiales surgen de la capacidad de los rumiantes para utilizar fibras celulósicas insolubles, las cuales pueden ser deg radadas por ciertos microorganismos en el rumen de estos animales, pero generalmente no es d igerible por mamíferos monogástricos tal como los cerdos. Los problemas especiales surgen de la tendencia de ciertos forrajes a inhibir la digestión de fibra en el rumen, y de la tendencia del rumen para limitar la utilización de algu nos de los componentes de ciertos forrajes, tales como grasa y proteína.

Las semillas de Brassica a las que se les ha extraído el aceite son una fuente potencial de proteína de alta calidad para ser utilizada en alimentos para animales. Después de la extracción de aceite, la harina de cañóla de mercadería comprende aproximadamente 37% de proteína , en comparación con aproximadamente 44-48% en la harina de soya , la cual actualmente es ampliamente preferida para propósitos de forrajes y alimentos. Las proteínas contenidas en la cañóla son ricas en metionina y contienen cantidades adecuadas de Usina, de las cuales ambas son aminoácidos limitantes en la mayoría de proteínas de cereales y de oleaginosas. Sin embargo, el uso de la harina de cañóla como una fuente de proteína ha estado algo limitada en ciertos alimentos para animales, ya que ésta contiene constituyentes indeseados tales como fibra, glucosinolatos, y fenólicos.

Un aspecto nutricional de la semilla de colza, a partir de la cual se obtiene la cañóla, es su alto nivel (30-55 Mmoles/g) de glucosinolatos, un compuesto basado en azufre. Cuando se tritura el follaje o semilla de cañóla, se producen ésteres de isotiocianato por la acción de la mirosinasa sobre los glucosinolatos. Estos productos inhiben la síntesis de tiroxina por parte de la tiroides y tienen otros efectos anti-metabólicos. Paul et al. (1986) Theor. Appl. Genet. 72:706-9. Por lo tanto, para uso en alimentos para humanos, se debe reducir o eliminar el contenido de glucosinolato de, por ejemplo, las proteínas derivadas de la harina de semilla de colza para proveer seguridad del producto.

Una semilla de cañóla mejorada con, por ejemplo, perfil y contenido de aceite favorable y contenido bajo de glucosinolato en la semilla podría reducir significativamente la necesidad de hidrogenación. Por ejemplo, el contenido más alto de ácido oleico y más bajo de ácido a-linolénico de dicho aceite podría impartir estabilidad oxidativa incrementada, con lo cual se reduce el requerimiento de hidrogenación y la producción de ácidos grasos trans. La reducción de los glucosinolatos de la semilla podría reducir de manera significativa el contenido de azufre residual en el aceite. El azufre envenena al catalizador de níquel comúnmente utilizado para la h idrogenación . Koseoglu et al . , Capítulo 8, en Cañóla and Rapeseed : Production . Chemistry, Nutrition , and Processing Tech nology. Ed . Shahidi , Van Nostrand Reinhold , N .Y. , 1 990, pp. 123-48. De manera adicional , el aceite proveniente de una variedad de cañóla con contenido bajo de glucosinolatos de semilla sería menos costoso de h idrogenar.

Los compuestos fenólicos en la harina de cañóla imparten un sabor amargo , y se cree que están necesariamente asociados con un color oscuro en los productos proteínicos finales. Las cascarillas de las semillas, las cuales están presentes en cantidades grandes en las harinas de cañóla estándar, no son digeribles para humanos y otros animales monogástricos, y también proveen un producto heterogéneo antiestético.

El componente de harina de u na semilla producida por una planta de cañóla que comprende u n germoplasma de la invención puede tener, por ejemplo y sin limitación : proteína alta; fibra baja; o fósforo más alto; y/o SAEs bajos. La fibra insoluble y los polifenólicos, son anti-n utricionales y dificultan la digestión de proteína y aminoácido. Por lo tanto, en algunas aplicaciones podrían ser deseables las harinas de cañóla y los forrajes animales que comprenden harinas de cañóla q ue tienen por lo menos una característica de componente de semilla que se seleccionan a partir del g rupo que consiste de contenido reducido de fibra , contenido incrementado de proteína, contenido red ucido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo.

En ejemplos particulares, una harina de cañóla (sin aceite, base de materia seca) puede comprender un contenido de proteína de por lo menos aproximadamente 45% (por ejemplo, aproximadamente 45% , aproximadamente 46% , aproximadamente 47%, aproximadamente 48% o, aproximadamente 49% , aproximadamente 50% , aproximadamente 51 % , aproximadamente 52%, aproximadamente 53% , aproximadamente 54% , aproximadamente 55% , aproximadamente 56% , aproximadamente 57% , y aproximadamente 58%).

Las variedades de cañóla que comprenden un germoplasma de la invención pueden tener buenos rendimientos y producir semillas que tengan fibra detergente ácida (ADF) mucho más baja, en comparación con una línea de cañóla de referencia. En algunas modalidades se pueden utilizar cualesq uiera valores empíricos determinados para un componente de u na semilla producida por u na variedad de planta que comprende un germoplasma de la invención para definir plantas, semillas, y el aceite de la variedad vegetal . En algunos de dichos ejemplos, se pueden utilizar n úmeros particulares como puntos finales para defini r intervalos por encima de, por debajo de, o de cualquiera de los valores determinados. Los intervalos de ejemplo para las características de aceite y otros componentes de semilla se indicaron anteriormente. Las líneas y las semillas de plantas de las mismas también se pueden definir mediante combi naciones de dichos intervalos. Por ejemplo , las características de aceite discutidas anteriormente junto con los niveles de fibra, niveles de polifenólicos, niveles de glucosinolato, niveles de proteína, y niveles de fósforo característicos, por ejemplo, se pueden utilizar para definir líneas particulares y semillas de las mismas.

No todas las características antes mencionadas (por ejemplo, características del componente de semilla) son necesarias para definir líneas y semillas de algunas modalidades, pero se pueden utilizar características adicionales para definir dichas líneas y semillas (por ejemplo y sin limitación, energía metabolizable, energía digerible, energía biológica, y energía neta).

VI. Plantas que comprenden un germoplasma que confiere rasgos de componente de semilla deseables en Lina manera independiente del color de la semilla Los rasgos deseables de líneas endogámicas e híbridos particulares de cañóla que comprenden un germoplasma de la invención pueden ser transferidos a otros tipos de Brassica (a través de mejoramiento genético convencional y similares), por ejemplo, ß. rapa, y B. júncea, en el que las plantas resultantes producen semillas con las características deseadas (por ejemplo, características de componente de semilla) expresadas independientemente del color de la semilla. Por lo tanto, una variedad de Brassica en la cual se han transferido uno o más rasgos deseables de una línea endogámica o híbrido particular de cañóla que comprende un germoplasma de la invención puede producir semillas con características deseadas que sean de semilla amarilla o de semilla oscura. Las harinas y semillas de dichas variedades de Brassica nuevas o modificadas pueden tener un nivel disminuido de fibra de semilla, nivel incrementado de proteína y nivel incrementado de fósforo, y/o un nivel disminuido de polifenólicos.

Algunas modalidades incluyen no solamente semillas de cañóla amarillas y oscuras que comprenden un germoplasma como se describe y ejemplifica en la presente solicitud , sino también plantas cultivadas o de algún otro modo prod ucidas a partir de dichas semillas, y cultivos de tejido de células susceptibles de regeneración de las presentes plantas de cañóla. Las líneas e híbridos ejemplificados se obtienen sin man ipulación genética y sin mutagénesis, con lo cual se demuestra la utilidad del germoplasma para producir variedades de cañóla n uevas y modificadas.

En algunas modalidades específicas, se proveen l íneas endogámicas e h íbridos de cañóla específicos de ejemplo. Como parte de esta descripción , se depositaron por lo menos 2500 semillas de cada u no de CL065620, C L044864, C L1 21460H , CL1661 02H y CL1 21466H y están disponibles al público, sujeto a derechos de patente, pero por lo demás sin restricción (excepto aquellas restricciones expresamente permitidas por 37 C . F . R . § 1 .808(b)), en el Depósito Americano de Cultivos Tipo (ATCC) , Rockville, Md . 20852. Los depósitos han sido designados como Depósitos ATCC Nos. PTA-1 1 697, PTA-1 1 696, PTA-1 1 698, PTA- , y PTA-1 1 699_, respectivamente, con una fecha de depósito de 22 de febrero de 201 1 para PTA1 1 696 hasta PTA1 1 699 y 21 de febrero de 201 2 para PTA . Los depósitos se mantendrán como se indicó anteriormente en el almacén en el ATCC, el cual es un almacén público, durante u n periodo de 30 años, o de cinco años después de la petición más reciente, o du rante la vida efectiva de la patente, lo que sea más largo, y un depósito será reemplazado si éste se vuelve no viable durante dicho periodo.

Algunas modalidades incluyen una semilla de cualquiera de las variedades de Brassica napus descritas en la presente solicitud . Algunas modalidades también incluyen plantas de Brassica napus producidas por dicha semilla, así como cultivos de tejido de células susceptibles de regeneración de dichas plantas. También se incluye u na planta de Brassica napus regenerada a partir de dicho cultivo de tejido. En modalidades particulares, dicha planta puede ser capaz de expresar todas las propiedades morfológicas y fisiológicas de una variedad ejemplificada. Las plantas de Brassica napus de las modalidades particulares pueden tener características fisiológicas y/o morfológicas distintivas de una planta cultivada a partir de la semilla depositada.

También se proveen procedimientos para hacer cruzas utilizando un germoplasma de la invención (por ejemplo, como se encuentra en las líneas endogámicas e h íbridos de cañóla de ejemplo provistos en la presente solicitud) en por lo menos u n progenitor de la progenie de las semillas descritas anteriormente. Por ejemplo , algunas modalidades incluyen una planta de B. napus híbrida F que tiene como uno o ambos progenitores cualesquiera de las plantas ejemplificadas en la presente solicitud. Las modalidades adicionales incluyen una semilla de B. napus producida por dicho híbrido En modalidades particulares, un método para prod ucir una semilla de B. napus híbrida comprende cruzar una planta ejemplificada con u na planta de cañóla progenitora endogámica diferente , y cosechar la semilla h íbrida resu ltante. Las plantas de cañóla de la invención (por ejemplo, una planta de cañóla progenitora, y una planta de cañóla producida por dicho método para producir u n h íbrido F^ puede ser una planta ya sea femenina o masculina.

Las características de las plantas de cañóla en alg unas modalidades (por ejemplo, niveles y/o perfiles de aceite y proteína) se pueden modificar y/o mejorar adicionalmente cruzando u na planta de la invención con otra línea q ue tenga una característica modificada (por ejemplo, niveles elevados de aceite y proteína). De igual manera, se pueden mejorar otras características mediante consideración cuidadosa de la planta progen itora . Las líneas de cañóla q ue comprenden un germoplasma de la invención pueden ser benéficas para cruzar sus características de componente de semilla deseables en otras l íneas de colza o cañóla en u na manera independiente del color de la semilla . Los germoplasmas de la invención permiten que estos rasgos se transfieran en otras plantas dentro de la misma especie mediante técnicas de fitomejoramiento convencionales , incluyendo polinización cruzada y selección de la progenie. En algunas modalidades, los rasgos deseados se pueden transferir entre especies utilizando técnicas de fitomejoramiento convencionales que implican transferencia de polen y selección. Véase, por ejemplo, Brassica crops and wild allies biology and breeding. Eds. Tsunada et al, Japan Scientific Press, Tokio (1980); Physiological Potentials for Yield Improvement of Annual Oil and Protein Crops, Eds. Diepenbrock y Becker, Blackwell Wissenschafts-Verlag Berlín, Viena (1995); Cañóla and Rapeseed, Ed. Shahidi, Van Nostrand Reinhold, N.Y. (1990); y Breeding Oilseed Brassicas. Eds. Labana et al., Narosa Publishing House, New Dehli (1993).

En algunas modalidades, un método para transferir por lo menos una característica de componente de semilla deseable en una manera independiente del color de la semilla comprende seguir la cruza inter-específica, auto-polinizar miembros de la generación Fi para producir semilla F2. Después se puede efectuar la retrocruza para obtener líneas que exhiban la(s) característica(s) de componente de semilla deseada(s). De manera adicional, se pueden utilizar métodos de fusión de protoplasto y transplante de núcleo para transferir un rasgo de una especie a otra. Véase, por ejemplo, Ruesink, "Fusión of Higher Plant Protoplasts," ethods in Enzvmologv, Vol. LVIII, Eds. Jakoby y Pastan, Academic Press, Inc., New York, N.Y. (1979), y las referencias citadas en el mismo; y Carlson et al. (1972) Proc. Nati. Acad Sci. USA 69:2292.

Habiendo obtenido y producido líneas de cañóla de ejemplo que comprenden un germoplasma de la invención, ahora se puede transferir fácilmente un color de tegumento oscuro con las características del componente de semilla deseables a otras especies de Brassica, mediante técnicas de fitomejoramiento convencionales como se indicó anteriormente. Por ejemplo, actualmente se puede transferir fácilmente un color de tegumento oscuro con características de componente de semilla deseables en variedades comercialmente disponibles de B. rapa, por ejemplo y sin limitación , Tobin , Horizon , y Colt. Se entiende que el color de semilla oscuro no tiene que ser transferido junto con otras características de la semilla.

Dada una de las variedades de ejemplo como un punto de partida, los beneficios particulares logrados por la variedad pueden ser manipulados en una cantidad de maneras por el practicante calificado sin alejarse del alcance de la presente invención . Por ejemplo, el perfil de aceite de semilla presente en u na variedad de ejemplo pueden ser transferido a otra variedad de B. napus agronómicamente deseable mediante técnicas de fitomejoramiento convencionales que implican polinización cruzada y selección de la progenie, por ejemplo, en las cuales el germoplasma de la variedad de ejemplo se incorpora en la otra variedad ag ronómicamente deseable.

Las modalidades particulares pueden incluir variedades de ejemplo de B. napus, así como variedades esencialmente derivadas que han sido esencialmente derivadas de por lo menos u na de las variedades ejemplificadas. Además , las modalidades de la invención pueden incluir una planta de por lo menos una de las variedades ejemplificadas, una planta de dicha variedad esencialmente derivada, y/o una planta de colza regenerada a partir de plantas o tejido (incluyendo polen, semillas, y células) producidas a partir de la misma.

Se pueden seleccionar materiales vegetales que sean capaces de regeneración, por ejemplo, semillas, microesporas, óvulos, polen, partes vegetativas, y microesporas. En general, dichas células vegetales se pueden seleccionar a partir de cualquier variedad de Brassica, incluyendo aquellas que tienen los rasgos agronómicos deseados.

Las técnicas de regeneración son conocidas en el arte.

Inicialmente se pueden seleccionar células capaces de regeneración (por ejemplo, semillas, microesporas, óvulos, polen, y partes vegetativas) a partir de una planta o variedad seleccionada. Estas células se pueden someter opcionalmente a mutagénesis. Después se puede desarrollar una planta a partir de las células utilizando técnicas de regeneración, fertilización, y/o crecimiento basadas en el tipo de células (y si éstas están o no mutagenizadas). Las manipulaciones de plantas o semillas, o partes de las mismas, pueden llevar a la creación de variedades esencialmente derivadas.

En algunas modalidades, las características de componente de semilla deseadas exhibidas por plantas que comprenden un germoplasma de la invención se pueden introducir en una planta que comprenda una pluralidad de rasgos deseables adicionales en una manera independiente del color de la semilla, con el fin de producir una planta tanto con las características de componente de semilla deseadas así como la pluralidad de rasgos deseables. El procedimiento de introducir las características de componente de semilla deseadas en una planta que comprende uno o más rasgos deseables en una manera independiente del color de la semilla es referido como "apilamiento" de dichos rasgos. En algunos ejemplos, el apilamiento de las características de componente de semilla deseadas con u na pluralidad de rasgos deseables puede dar como resultado mejoras adicionales en las características de componente de semilla. En algunos ejemplos, el apilamiento de las características de componente de semilla deseadas con una pluralidad de rasgos deseables puede dar como resultado una planta de cañóla que tenga las características de componente de semilla deseadas además de u no o más (por ejemplo, todos) de la pluralidad de rasgos deseables.

Los ejemplos de rasgos que podrían ser deseables para combinación con las características de componente de semilla deseadas incluyen , por ejemplo y sin limitación : genes de resistencia a enfermedad vegetal (véase, por ejemplo, Jones et al. (1 994) Science 266:789 (gen Cf-9 de jitomate para resistencia a Cladosporium fulvum); Martin et al . (1 993) Science 262 : 1432 (gen Pto de jitomate para resistencia a Pseudomonas syringae) ; y Mindrinos et al . (1 994) Cell 78 : 1 089 (gen RSP2 para resistencia a Pseudomonas syringae)); un gen que confiera resistencia a una plaga ; u na proteína de Bacillus thuringiensis, un derivado de la misma, o un polipéptido sintético modelado sobre la misma (Véase, por ejemplo, Geiser et al . (1986) Gene 48:109 (gen de endotoxina d de Bt; las moléculas de ADN que codifican para los genes de endotoxina d se pueden adquirir a partir del Depósito Americano de Cultivos Tipo (Manassas, VA), por ejemplo, bajo los números de acceso ATCC 40098; 67136; 31995; y 31998)); una lectina (Véase, por ejemplo, Van Damme et al. (1994) Plant Molec. Biol. 24:25 (genes de lectina de unión a mañosa de Clivia miniata)); una proteína de unión a vitamina, por ejemplo, avidina (Véase Publicación Internacional del PCT US93/06487 (uso de avidina y homólogos de avidina como larvicidas contra plagas de insectos)); un inhibidor de enzima; un inhibidor de proteasa o proteinasa (Véase, por ejemplo, Abe et al. (1987) J. Biol. Chem. 262:16793 (inhibidor de cisteína proteinasa de arroz); Huub et al. (1993) Plant Molec. Biol.21:985 (inhibidor I de proteinasa de tabaco; y patente E.U.A. No. 5,494,813); un inhibidor de amilasa (Véase Sumitani et al. (1993) Biosci. Biotech. Biochem.57:1243 (inhibidor de alfa-amilasa de Streptomyces nitrosporeus)); una hormona o feromona específica de insecto, por ejemplo, un ecdiesteroide u hormona juvenil, una variante de la misma, un imitador basado en la misma, o un antagonista o agonista de la misma (Véase, por ejemplo, Hammock et al. (1990) Nature 344:458 (inactivador de hormona juvenil)); un péptido o neuropéptido específico de insecto que altere la fisiología de la plaga afectada (Véase, por ejemplo, Regan (1994) J. Biol. Chem. 269:9 (receptor de la hormona diurética de insecto); Pratt et al. (1989) Biochem. Biophys. Res. Comm. 163:1243 (alostatina de Diploptera puntata); patente E.U.A. No. 5,266,317 (neurotoxinas paralíticas específicas de insecto)); un veneno específico de insecto producido en la Naturaleza por una víbora, una avispa, u otro organismo (Véase, por ejemplo, Pang et al. (1992) Gene 116:165 (un péptido insecto-tóxico de escorpión)); una enzima responsable de una híper-acumulación de un monoterpeno, un sesquiterpeno, un esteroide, sido hidroxámico, un derivado feilpropanoide u otra molécula no proteínica con actividad insecticida; una enzima implicada en la modificación, incluyendo la modificación posterior a la traducción, de una molécula biológicamente activa, por ejemplo, una enzima glucolítica; una enzima proteolítica; una enzima lipolítica; una nucleasa; una ciclasa; una transaminasa; una esterasa; una hidrolasa; una fosfatasa; una cinasa; una fosforilasa; una polimerasa; una elastasa; una quitinasa; o una glucanasa, ya sean naturales o sintéticas (Véase Publicación Internacional del PCT WO 93/02197 (un gen de calasa); moléculas de ADN que contiene secuencias codificadoras de quiitinasa (por ejemplo, del ATCC, bao los números de acceso 39637 y 67152); Kramer et al. (1993) Insect Biochem. Molec. Biol. 23:691 (quitinasa de Manduca sexta); y Kawalleck et al. (1993) Plant Molec. Biol. 21:673 (gen de poliubiquitina ubi4-2 de perejil); una molécula que estimule la transducción de señal (Véase, por ejemplo, Botella et al. (1994) Plant Molec. Biol. 24:757 (calmodulina); y Griess et al. (1994) Plant Physiol. 104:1467 (calmodulina de maíz); un péptido de momento hidrofóbico (Véase, por ejemplo, Publicación Internacional del PCT WO 95/16776 (derivados peptídicos de Taquiplesina los cuales inhiben patógenos vegetales fúngicos); y Publicación I nternacional del PCT WO 95/1 8855 (péptidos antimicrobianos sintéticos que confieren resistencia a enfermedad)) ; una permeasa de membrana , un formador de canal, o un bloqueador de canal (Véase, por ejemplo, Jaynes et al. (1993) Plant Sci 89:43 (un análogo de péptido lítico de cecropina-ß para hacer a las plantas transgénicas resistentes a Pseudomonas solanacearum) ; una proteína viral invasiva o u na toxina compleja derivada de la misma (Véase, por ejemplo, Beachy et al. (1 990) Ann . rev. Phytopathol. 28:451 (resistencia mediada por proteína de cubierta contra el virus del mosaico de la alfalfa , virus del mosaico del pepino, virus de la estría del tabaco, virus X de la papa, virus Y de la papa , virus del jaspeado del tabaco, virus del cascabel del tabaco y virus del mosaico del tabaco)) ; un anticuerpo específico de i nsecto o una inmunotoxina derivada a partir del mismo (Véase, por ejemplo, Taylor et al. , Abstract #497, Seventh I nt'l Symposium on Molecular Plant-Microbe I nteractions (Edinburg h , Escocia) (1 994) (inactivación enzimática a través de la producción de fragmentos de anticuerpo de cadena individual) ; un anticuerpo específico de virus (Véase, por ejemplo, Tavladoraki et al . (1 993) Nature 366:469 (genes de anticuerpo recombinante para protección contra ataq ue viral)); una proteína que detenga el desarrollo producida en la Naturaleza por un patógeno o u n parásito (Véase, por ejemplo, Lamb et al. ( 1 992) Bio/Technology 1 0: 1436 (las endo a-1 ,4-D-poligalacturonasas fúngicas facilitan la colonización fú ngica y la liberación de nutrientes de la planta solubilizando la homo-a-1 ,4-D- galacturonasa de la pared de la célula vegetal; Toubart et al. (1992) Plant J. 2:367 (proteína inhibidora de endopoligalacturonasa)); y una proteína que detenga el desarrollo producida en la Naturaleza por una planta (Véase, por ejemplo, Logemann et al. (1992) Bio/Technology 10:305 (el gen desactivador de ribosoma de cebada que provee resistencia incrementada a la enfermedad fúngica)).

Los ejemplos adicionales de rasgos que podrían ser deseables para combinación con las características de componente de semilla deseadas incluyen, por ejemplo y sin limitación: genes que confieren resistencia a un herbicida (Lee et al. (1988) EMBO J. 7:1241 (enzima ALS muíante); Miki et al. (1990) Theor. Appl. Genet. 80:449 (enzima AHAS muíante); patentes E.U.A. Nos. 4,940,835 y 6,248,876 (genes de 5-enolpiruvilshikimato-3-fosfato sintetasa (EPSPs) mutante que proveen resistencia a glifosato); patente E.U.A. No.4,769,061 y número de acceso ATCC 39256 (genes aroA); genes de glifosato acetil-transferasa (resistencia glifosato); otros compuestos fosfono provenientes de especies de Streptomyces, incluyendo Streptomyces hygroscopicus y Streptomyces viridíchromogenes) tales como aquellos descritos en la solicitud de patente europea No. 0 242 246 y DeGreef et al. (1989) Bio/Technology 7:61 (genes de glufosinato fosfinotricina acetil-transferasa (PAT) que proveen resistencia a glifosato); ácidos piridinoxipropiónicos o fenoxipropiónicos y cyciohexonas (resistencia a glifosato); solicitud de patente europea No. 0 333 033 y patente E.U.A. No. 4,975,374 (genes de glutamina sintetasa que proveen resistencia a herbicidas tales como L-fosfinotricina); Marshall et al. (1992) Theor. Appl. Genet.83:435 (genes Acc1-S1, Acc1-S2, y Acc1-S3 que proveen resistencia a los ácidos fenoxipropiónicos y ciclohexonas, tales como setoxidim y haloxifop); WO 2005012515 (genes GAT que proveen resistencia a glifosato); WO 2005107437 (genes que confieren resistencia a los herbicidas auxínicos 2,4-D, fop y piridiioxi); y un herbicida que inhiba la fotosíntesis, tal como una triazina (genes psbA y gs+) o un benzonitrilo (gen de nitrilasa) (Véase, por ejemplo, Przibila et al. (1991) Plant Cell 3:169 (genes psbA mutantes); las secuencias de nucleótido para los genes de nitrilasa se describen en la patente E.U.A. No. 4,810,648, y las moléculas de ADN que contienen estos genes están disponibles bajo los números de acceso ATCC 53435, 67441, y 67442; y Hayes et al. (1992) Biochem. J.285:173 (glutatión S-transferasa)).

Los ejemplos adicionales de rasgos que podrían ser deseables para combinación con las características de componente de semilla deseadas incluyen, por ejemplo y sin limitación, genes que confieren o contribuyen a un rasgo de valor agregado, por ejemplo, metabolismo de ácido graso modificado (Véase, por ejemplo, Knultzon et al. (1992) Proc. Nati. Acad. Sci. U.S. A. 89:2624 (un gen antisentido de estearil-ACP des-saturasa para incrementar el contenido de ácido esteárico de la planta)); contenido disminuido de fitato (Véase, por ejemplo, Van Hartingsveldt et al. (1993) Gene 127:87 (un gen de fitasa de Aspergillus niger incrementa la degradación de fitato, agregando más fosfato libre a la planta transformada); y Raboy et al. (1990) Maydica 35:383 (clonación y reintroducción de ADN asociado con un alelo responsable de los mutantes de maíz que tienen niveles bajos de ácido fítico)) ; y composición de carbohidrato modificada efectuada, por ejemplo, transformando plantas con un gen que codifica para una enzima que altera el patrón de ramificación del almidón (Véase, por ejemplo, Shiroza et al. (1988) J. Bacteol. 170:810 (gen de fructosiltransferasa mutante de Streptococcus); Steinmetz et al. (1985) Mol. Gen. Genet. 20:220 (gen de levansacarasa); Pen et al. (1992) Bio/Technology 10:292 (a-amilasa); Elliot et al. (1993) Plant Molec. Biol. 21:515 (genes de invertasa de jitomate); Sogaard et al. (1993) J. Biol. Chem. 268:22480 (gen de a-amilasa de cebada); y Fisher et al. (1993) Plant Physiol. 102:1045 (enzima II de ramificación de almidón del endosperma de maíz)).

Todas las referencias, incluyendo publicaciones, patentes, y solicitudes de patente, citadas en la presente solicitud quedan incorporadas en la presente para referencia hasta el grado en que éstas no sean inconsistentes con los detalles explícitos de esta descripción, y por lo tanto quedan incorporadas hasta el mismo grado como si cada referencia fuera individual y específicamente indicada para ser incorporada para referencia y fuera indicada en su totalidad en la presente solicitud. Las referencias discutidas en la presente solicitud se proveen únicamente por sus descripciones antes de la fecha de presentación en la presente solicitud. Nada en la presente solicitud debe ser considerado como una admisión de que los inventores no tienen derecho a anteceder dicha descripción en virtud de la invención anterior.

Los siguientes ejemplos se proveen para ilustrar ciertas características y/o aspectos particulares de la invención reclamada. No se debe considerar que estos ejemplos limiten la descripción a las características o aspectos particulares descritos.

EJEMPLOS EJEMPLO 1 Composición de nutriente promedio v valor de harina de cañóla mejorada (ECM) v harina de cañóla convencional Se efectuaron varios estudios analíticos y funcionales entre 2009 y 2012 para evaluar la composición de nutriente y valor de las líneas e híbridos de ECM de la presente invención. El análisis se efectuó en semilla no procesada entera, harina parcialmente procesada y harina completamente procesada para explicar los posibles efectos del procesamiento sobre la composición y valor nutricional. Las muestras se analizaron en las Universidades de Illinois, Missouri, Georgia y Manitoba. Esta información de composición se utilizó para calcular el valor energético de la harina de cañóla mejorada contra harina de cañóla convencional utilizando ecuaciones de predicción estándar. La evaluación biológica de las muestras para energía y digestibilidad de aminoácido avícola se efectuó en las Universidades de I llinois y Georgia. La evaluación biológica de las muestras para energía y digestibilidad de aminoácido porcina se efectuó en la Universidad de I llinois. El resumen de las diferencias de composición de nutrientes entre las líneas de ECM (intervalos o promedio) y la harina de cañóla convencional se muestra en la Tabla 1 . Los detalles de los procedimientos y estudios relevantes se señalan en los ejemplos subsiguientes .

TABLA 1 Com posición de nutriente promedio de ECM y hari na de cañóla convencional TABLA 1 (cont.) * El número entre paréntesis es el promedio ** Pronosticado a parti r de la com posición de n utriente Las líneas de ECM muestran varias mejoras distintas en la composición de n utriente las cuales proveen valor en alimentos para animales. Como se ¡lustra en al Tabla 1 , ECM es aproximadamente 7% puntos más alta en proteína que la harina de cañóla convencional. Además, el equilibrio de aminoácidos esenciales (como un porcentaje de proteína) se mantiene a los niveles de proteína más altos. La digestibilidad de los aminoácidos en ECM por aves de corral y cerdos es por lo menos tan buena como en la harina de cañóla convencional , y el am inoácido clave lisina parece tener digestibilidad ligeramente más alta. Las líneas de ECM muestran niveles más bajos de componentes de fibra que son encontrados en las paredes celulares y cascarilla , de manera específica niveles aproximadamente 2 puntos porcentuales más bajos de lig nina/polifenoles, 1 pu nto porcentual más bajo de celulosa , 3 puntos porcentuales más bajos de ADF (3 puntos porcentuales), y niveles 5 puntos porcentuales más bajos de ADF.

Los niveles más altos de proteína y niveles más bajos de componentes de fibra se correlacionan con una energ ía biológica incrementada aproximadamente 1 0% en las l íneas de ECM . Estas líneas también muestran n iveles más altos de fósforo, el cual es un nutriente costoso para agregar a los alimentos para animales. Tabla 1 .

EJEMPLO 2 Procedimientos de harina de hojuela blanca (WF) POS. LT v HT Las semillas de ECM y las semillas de cañóla convencionales se procesan en la planta piloto POS en Saskatoon , Canadá de conformidad con los siguientes procedimientos : Materiales Se reciben aproximadamente 1 .5 MT de semilla de cañóla de la línea de prueba de ECM (CL44864) en POS el 2 de agosto de 201 1 . Se reciben aproximadamente 3.0 MT de semilla de cañóla de control de bien de consumo en POS el 3 de agosto de 201 1 . Las fuentes para los materiales importantes son las siguientes.

Hexano/iso-hexano: Univar, Saskatoon , SK.

Ayuda-filtros Hyflo Super-cel: Manville Products Corp. , Denver, CO .

Nitrógeno : Air Liquide, Saskatoon , SK.

Paño para filtro, monofilamento: Porritts and Spensor, Pointe Claire, PQ .

Papel filtro , estilo 1 1 38-55 color canela de 24.91 5 kg (55 libras): Porritts and Spensor, Pointe Claire, PQ .

Métodos - procesamiento en planta piloto Entre cada variedad de cañóla, todo el equipo en el procesamiento "primario" se limpia con succión o barrido. I nflamable, el extractor no se apaga entre las pruebas . Sin embargo, la cadena del extractor, Schnecken y los sistemas de recuperación de solventes se mantienen funcionando para vaciar el equ ipo entre variedades de cañóla . El vacío no se apaga por lo cual todos los vapores son extraídos hacia el condensador, se condensan y se descargan al tanque de tratamiento con solvente. Esto evita que el agua se condense en el Schnecken y obstruya el transportador. Las muestras de cañóla se prensan/extraen en el siguiente orden : 1 . Control HT 2. Control LT 3. Línea de prueba de ECM (C L44864) LT Formación de hojuela La formación de hojuela se efectúa para romper las celdas de aceite y preparar una hoj uela delgada con un área de superficie grande para cocimiento/pre-prensado haciendo pasar la semilla a través de u n conj unto de rodillos homogenizadores. El espesor y humedad de la hojuela se ajustan para reducir al mínimo la cantidad de finos producidos . Niveles altos de finos dan como resultado una torta de prensa con propiedades pobres de percolación de solvente.

La semilla de cañóla se convierte en hojuela utilizando el ajuste de espacio de rodillo mínimo. El intervalo de espesor de la hojuela para cada lote es como sigue: 1 . Control HT 0.21 - 0.23 mm 2. Control LT 0.1 9 - 0.23 mm 3. Línea de prueba de ECM (C L44864) LT 0.21 - 0.23 mm La velocidad de alimentación es controlada por la velocidad de prensado y es de aproximadamente 1 33-1 50 kg/hr.

Formador de hojuela: Molino formador de hojuela Lauhoff Flakmaster modelo S-28, no. de serie 7801 de 35.56 cm . de diámetro x 71 . 12 cm . de ancho, fabricado por Lauhoff Corporation .

Cocimiento (acondicionamiento) El cocimiento se efectúa para romper adicionalmente las celdas de aceite, hacer las hojuelas flexibles e incrementar la eficiencia del expulsor haciendo bajar la viscosidad del aceite contenido. El cocimiento también se efectúa para desactivar las enzimas en la semilla. El dispositivo de cocción se precalienta antes del inicio de cada corrida . Las presiones de vapor se ajustan mientras se está en operación para mantener las temperatu ras de hojuela deseadas.

Las temperaturas en las charolas para el lote Control HT son las siguientes: Charola superior 60 ± 5°C Charola inferior 97 ± 3°C Las temperaturas en las charolas para el lote Control LT más la línea de prueba de ECM (CL44864) LT son las siguientes: Charola superior 60 ± 5°C Charola inferior 97 ± 2°C Dispositivo de cocción : Se utilizan dos dispositivos de cocción Simon-Rosedown de dos charolas. Cada compartimiento es de 36 cm de alto (altura de trabajo de 21 cm) y 91 cm de diámetro, y está equipado con un brazo barredor para agitación del material . El vapor se utiliza en la camisa para calor seco así como también se puede agregar vapor directo a los contenidos del recipiente. El dispositivo de cocción se monta sobre la prensa de tornillo para alimentación directa.

Prensado El prensado retira aproximadamente 2/3 del aceite y produce una torta de prensa apropiada para extracción con solvente. La torta de prensa requiere resistencia a la tritu ración para que se mantenga en el extractor y porosidad para buena transferencia de masa y drenado. La semilla transformada en hojuela y cocida se prensa utilizando una pre-prensa Simon-Rosedown .

El aceite crudo de la prensa se recolecta en un tanque.

Pre-prensa: prensa de tornillo Simon-Rosedown de 9.5 cm de diámetro por 94 cm de largo. Se utiliza una velocidad de tornillo operativa de 1 7 rpm .

Extracción con solvente v eliminación del solvente La extracción con solvente es el poner en contacto la torta de prensa con hexano para retirar el aceite de la masa de la torta. Dos mecanismos están en operación : lixiviado del aceite hacia el solvente, y el lavado del orujo (hexano-sólidos) con miscelas progresivamente más débiles (hexanos-aceite). La extracción es normalmente un proceso a contracorriente continuo.

La torta de prensa de control HT de cañóla se extrae con iso-hexano/hexano utilizando un tiempo de residencia total de aproximadamente 90 minutos (desde que entra al circuito hasta que sale del mismo) (loop in to loop out) , una relación solvente a sólido de aproximadamente 2.5: 1 (p:p) y una temperatura de miscela de 52 ± 5°C . (La velocidad de alimentación de la torta de prensa de cañóla es de aproximadamente 90 kg/h r al tiempo de retención de 90 minutos y la velocidad de flujo de solvente es de 220 ± 1 0 kg/hr. ) .

Se retira una muestra de la hojuela blanca (WF) de cañóla de bien de consumo antes de la eliminación del solvente y se seca al aire.

El aceite crudo se somete a eliminación de solvente en un evaporador de película elevadora y destilador con vapor.

La eliminación de solvente del orujo (hexano-sólidos) se efectúa en un tornillo Schnecken con camisa de vapor y tostador-eliminador de solvente de 2 charolas. El vapor de purga se agrega a la charola superior del DT. Las temperaturas objetivo en las charolas fueron las siguientes: Salida del Schnecken : <60°C Charola con solvente eliminado: 1 02 ± 3°C Charola de tostado: 1 02 ± 3°C La torta de prensa de control LT de cañóla y de la l ínea de prueba de ECM (CL44864) LT se extraen con iso-hexano/hexano utilizando u n tiempo de residencia total de aproximadamente 1 1 0 minutos desde que entra al circuito hasta que sale del mismo) (loop in to loop out) , una relación solvente a sólido de aproximadamente 2.5: 1 (p:p) y una temperatura de miscela de 52 + 5°C . (La velocidad de alimentación de la torta de prensa de cañóla es de aproximadamente 80 kg/hr al tiempo de retención de 1 1 0 min utos y la velocidad de flujo de solvente es de 220 ± 1 0 kg/h r ) .

Se retira una muestra de la hojuela blanca (WF) de la línea de prueba de ECM antes de la eliminación del solvente, y se seca al aire.

El aceite crudo se somete a eliminación de solvente en u n evaporador de pel ícula elevadora y destilador con vapor.

La eliminación de solvente del orujo (hexano-sólidos) se efectúa en un torn illo Schnecken con camisa de vapor y tostador-eliminador de solvente de 2 charolas. El vapor de purga se agrega a la charola superior del DT. Las temperaturas objetivo en las charolas fueron las sig uientes: Salida del Schnecken : <60°C Charola con solvente eliminado: 93 ± 2°C Charola de tostado: 93 ± 2°C Extractor: Extractor de circuito (Tipo I I) Crown I ron Works todo de acero inoxidable. El lecho de extracción es de 20.3 cm de ancho por 1 2.7 cm de profundidad por 680 cm de long itud. Además, la unidad incluye eliminación de solvente de miscela utilizando un evaporador de pel ícula elevadora y destilador de vapor y eliminación de solvente del orujo (sólidos más solvente) utilizando un tornillo Schnecken con camisa de vapor y tostador-eliminador de solvente de 2 charolas. El solvente recuperado se recolecta y se recicla.

Secado al vacío El secado al vacío efectúa para secar la harina de cañóla LT desgrasada hasta < 1 2% de humedad .

El ú n ico lote de harina de cañóla desg rasada que requiere secado es el lote control LT. Se cargan aproximadamente 225 kg de harina desgrasada en la secadora Littleford Reactor. La harina después se calienta a 75 ± 2°C bajo un vacío de 254 mm - 381 mm de Hg . El muestreo de la harina para el análisis de h umedad comienza a ~60°C y ocu rre cada 1 5 minutos hasta que la humedad es de < 1 2% . La harina después se descarga en un saco para producto a granel. El procedimiento anterior se repite hasta que se seca toda la harina.

Secadora al vacío: Modelo FKM600-D (2Z) de 600 litros de Littleford Reactor, serie #51 32, Littleford Day, Florence, KY.

Molienda con molino de martillos La molienda con molino de martillos se lleva a cabo para producir un tamaño de partícula uniforme.

La harina seca se muele con molino de martillos utilizando un tamiz de 3.1 75 mm (8/64 pulgadas). El molino de martillos se limpia con succión entre cada lote de harina. La harina se empaca en tambores de fibra y se almacena a temperatu ra ambiente hasta que se embarca .

El orden en el cual se muele la harina de cañóla con molino de martillos es el siguiente: 1 . Control HT. 2. Línea de prueba de ECM (C L44864) LT. 3. Control LT.

Molino de martillos: Prater I nd ustries, Modelo G5HFSI , serie #5075 , Chicago, I L.

EJ EMPLO 3 Procedimiento Indianápolis para hojuela blanca La semilla de cañóla de la presente invención se puede procesar para producir hojuelas blancas de cañóla utilizando el procedimiento originalmente descrito en Bailey's I nd ustrial Oil & Fat Products (1 996) , 5a ed . , Capítulo 2, Wiley Interscience Publication , New York, New York.

Para extraer aceite a partir de la semilla de cañóla, la semilla de cañóla se convierte primero en hojuela mediante molido de café y se trata con calor en un horno a 85°C ± 1 0°C d u rante por lo menos 20 minutos . Después del tratamiento con calor, la semilla molida se prensa utilizando una prensa Taby Press Tipo-20A (Taby Skeppsta, Orebro, Suecia). La torta de prensa resultante proveniente de la prensa Taby se extrae con solvente para retirar cualquier aceite residual remanente.

La torta de prensa proveniente del paso de prensado de la oleag inosa se extrae después con solvente para retirar y recolectar cualquier aceite residual remanente. La torta de prensa se coloca en dedales de acero inoxidable los cuales se colocan en un extractor Soxhlet™ hecho a la medida de LaSalle Glassware (Guelph , ON) .Se puede utilizar hexano como el solvente de extracción y el sistema extractor Soxhlet™ se deja funcionar durante 9-1 0 horas. La torta de prensa extraída con solvente se retira después de los dedales y se disemina a través de una charola hasta un espesor de torta de menos de 2.54 cm. La torta extraída con solvente se deja al aire para eliminar el solvente durante 24 horas antes de la molienda. La hojuela blanca a la que se ha eliminado el solvente se muele después utilizando, por ejemplo, un dispositivo Robot Coupe R2N Ultra B (Jackson, MS).

EJEMPLO 4 Análisis de la muestra El análisis químico y de nutrientes de las muestras de ECM y de cañóla convencional se puede efectuar en diversas formas utilizando los métodos indicados más adelante. Las muestras de harina de cañóla se analizan para materia seca (método 930.15; AOAC International. 2007. Official Methods. Of Analysis of AOAC Int. 18a ed. Rev.2. W. Hortwitz y G. W. Latimer Jr., eds. Assoc. Off. Anal. Chem. Int., Gaithersburg. MD. (de aquí en adelante "AOAC Int., 2007")), cenizas (método 942.05; AOAC Int.), y GE mediante colorímetro de bomba (Modelo 6300, Parr Instruments, Moline, IL). AOAC International (2007) Official Methods of Analysis of AOAC Int., 18a ed. Rev.2., Hortwitz y Latimer, eds. Assoc. Off. Anal. Chem. Int., Gaithersburg. MD. El extracto etéreo hidrolizado con ácido (AEE) se determina mediante hidrólisis ácida utilizando HCI 3N (Sanderson) seguido por extracción de grasa cruda con éter de petróleo (método 954.02; AOAC Int.) en un analizador automatizado Soxtec 2050 (FOSS North America, Edén Prairie, MN). Sanderson (1986), "A new method of analysis of feeding stuffs for the determination of crude oils and fats," páginas 77-81, en Recent Advances in Animal Nutrition, Haresign y Colé, eds. Butterworths, Londres, R.U. La proteína cruda se mide mediante combustión (método 990.03; AOAC Int.) en un aparato para proteína/nitrógeno Elementar Rapid N-cube (Elementar Americas Inc., Mt. Laurel, NJ); los aminoácidos de conformidad con el método 982.30 E (A, B, y C) [AOAC Int.]; fibra cruda de conformidad con el método 978.10 (AOAC Int.); ADF y lignina de conformidad con el método 973.18 (AOAC Int.); y NDF de conformidad con Hoist (Hoist, D. O. 1973. Hoist filtration apparatus for Van Soest detergent fiber analysis. J. AOAC. 56:1352-1356). El perfil de azúcares (glucosa, fructosa, sacarosa, lactosa, maltosa) de conformidad con Churms (Churms, 1982, Carbohydrates en Handbook of Chromatography. Zweig y Sherma, eds. CRC Press, Boca Ratón, FL.), y Kakehi y Honda (1989. Silyl ethers of carbohydrates. página 43-85 en Analysis of Carbohydrates by GLC and MS. C. J. Biermann y G. D. McGinnis, eds. CRC Press, Boca Ratón, FL). Los oligosacáridos (rafinosa, estaquiosa, verbascosa) se analizan de conformidad con Churms; los minerales (Ca, P, Fe, Mg, Mn, Cu, Na, K, S, Mo, Zn, Se, Co, Cr) a través de espectroscopia de emisión óptica-plasma acoplado inductivo (ICP-OES) [método 985.01 (A, B, y C); AOAC Int.], y fitato de conformidad con Ellis et al (1977. Quantitative determination of phytate in the presence of high inorganic phosphate. Anal.Biochem.77:536-539.) EJEM PLO 5 Resultados analíticos de línea basal en m uestras de Hojuela Blanca I ndianápolis de ECM y hari na de cañóla convencional Composición de nutriente de ECM y harina de cañóla convencional tostadas preparadas en la planta piloto. Se procesan varias l íneas de ECM (44864, 1 21460, 1 21466, y 65620) en el laboratorio Dow AgroSciences en I ndianápolis utilizando un procedimiento similar al procesamiento de harina de cañóla comercial pero sin el paso final de eliminador de solvente/tostado después de extraer con solvente el aceite a partir de la semilla. Este procedimiento y las muestras resultantes son referidas como "hojuela blanca de I ndianápolis". Los parámetros de procesamiento se indicaron en el Ejemplo 3. Estas muestras de hojuela blanca de I ndianápolis de ECM fueron analizadas en las U niversidades de Illinois y Missouri y los resu ltados se muestran en las Tablas 2a , 2b, y 2c. El control de harina de cañóla es una harina de ca óla preparada comercialmente que está tostada. Los valores están expresados en base de materia seca, pero incluyendo el aceite.

Oí OI OI TABLA 2a Composición de n utriente de m uestras de harina de cañóla de hojuela blanca de Indianápolis de ECM comparadas con hari na de cañóla convencional Los resu ltados analíticos en las muestras de hojuela blanca de I ndianápolis de ECM proven ientes de las Universidades de I llinois y M issou ri fueron similares a los resultados en semilla entera provenientes de la Universidad de Manitoba. Los oligosacáridos fueron más bajos y los azúcares simples fueron más altos en la muestra 44864 (201 0) que en las otras muestras de EC M , incluyendo la 44864 cultivada en 201 1 . Parece ser que para la muestra de 201 0, la planta cultivada catabolizó algo de sacarosa y oligosacáridos hasta azúcares simples cerca del tiempo de cosecha.

La proteína más alta, ADF más baja y lignina y polifenoles más bajos observados en las l íneas de ECM en comparación con harina de cañóla convencional, utilizando el protocolo de hojuela blanca de I ndianápolis, son similares a los resultados observados con la semilla entera . El valor de 33% de N DF para la harina comercial está en el extremo más alto del intervalo típico. r ro en o oí TABLA 2b Composición de aminoácidos (% de proteína cruda) de muestras de hojuela blanca de Indianápolis de ECM comparadas con harina de cañóla convencional rv> (Si O CJl Oí TABLA 2b (cont.i * Considerados como los principales aminoácidos esenciales limitantes en alimentos para aves de corral y cerdos Como fue el caso con la semilla entera, los resultados en la Tabla 2b muestran que la composición de aminoácido (como un porcentaje de proteína cruda) es similar tanto para las muestras de hojuela blanca de I ndianápolis de ECM como para las de harina de cañóla comercial. Esto indica q ue debido a que la proteína se incrementó en las líneas de ECM , los aminoácidos importantes se incrementaron en forma proporcional.

Ni n O n en TABLA 2c Composición de minerales de muestras de hojuela blanca de ECM de Indianápolis comparadas con harina de cañóla convencional El contenido de minerales de las muestras de hojuela blanca de I ndianápolis de ECM es similar a la harina de cañóla convencional con dos excepciones: fósforo y sodio. Como fue el caso con los resultados de la U niversidad de Manitoba en semilla entera, el fósforo en las líneas de ECM parece ser consistentemente más alto que en la harina de cañóla convencional . El sodio adicional en la harina de cañóla convencional es sin duda debido al sod io agregado durante el procesamiento convencional de la cañóla.

EJEM PLO 6 Procesam iento de ECM en la planta piloto POS en Saskatoon.

Canadá para sim ular el procesamiento comercial En la preparación para la evaluación de ECM como alimento para animales, se determinó que las muestras de harina de cañóla se deben preparar bajo condiciones de procesamiento comercial , dado el efecto del procesamiento sobre el valor nutricional. Por consiguiente las muestras se procesaron en la planta piloto POS en Saskatoon . Se utilizaron dos condiciones de procesamiento: una temperatura regular (HT) en el eliminador de solvente/tostador y una temperatura más baja (LT) , con el fin de asegurar que las condiciones de procesamiento no ejerzan influencia anuladora sobre el valor nutricional. Las condiciones de procesamiento utilizadas en POS se indican en el Ejemplo 2.

TABLA 3 Composición de nutrientes de EC v hari na de cañóla convencional preparadas bajo condiciones sim uladas de procesamiento comercial en la planta piloto POS en Saskatoon. Canadá. (Análisis efectuados en las Universidades de Illi nois v M issouri) Las harinas procesadas en la planta piloto muestran una composición similar a la de la semilla entera y las muestras de hojuela blanca de I ndianápolis, y las diferencias entre la muestra de EC y la cañóla convencional son consistentes con el análisis descrito en las Tablas 2a y 2b: proteína 7 pu ntos porcentuales más alta , ADF 5 puntos porcentuales más baja, lig n ina y polifenoles 4 puntos porcentuales más bajos y fósforo 0.35 puntos porcentuales más alto.

EJ EMPLO 7 Análisis completo de sem illa de ECM y cañóla convencional no procesadas Composición de nutrientes de semilla de cañóla no procesada . Se analizaron cinco muestras de semilla entera de líneas de ECM de la producción de 201 0 y 201 1 en la U niversidad de Manitoba. Estas se compararon con la muestra de semilla mixta de la Comisión de G ranos Canadiense (CGC) oficial para la producción de 201 1 , la cual por definición es la calidad promed io de las variedades de cañóla comerciales actuales que fueron cultivadas en Canadá occidental en dicha temporada. Los resultados de la composición de nutrientes están expresados en una base de materia seca, libre de aceite y se muestran en las Tablas 4a y 4b. ) n o oí oí TABLA 4a Composición de nutriente de muestras de semilla de ECM comparadas con semilla de canoia convencional r o n 01 TABLA 4a (cont.) Los resultados muestran que la diferencia más grande entre ECM y la cañóla convencional es el contenido más alto de proteína. ECM es 7.2 pu ntos porcentuales más alta en contenido de proteína (51 .1 % contra 43.9%) en una base de materia seca sin aceite y 6.1 puntos porcentuales más alta (43.5% contra 37.4%) en una base de 88% de materia seca, 3% de aceite (especificación típica base para la harina de cañóla comercial). Véase Tablas 4a , 4b. La proteína más alta parece ser justificada por lig nina y polifenoles 2% más bajos en la ECM y residuo de ADF 3% más bajo (ADF -lignina/polifenoles -celulosa) . El residuo de ADF probablemente es una combinación de glucoproteína y componentes de hemicelulosa. Los componentes de fibra se encuentran principalmente en las paredes celulares y en la cascarilla. El contenido de fósforo de ECM es casi 30% más alto q ue en la cañóla convencional , y éste aparece distribuido uniformemente entre las formas de fitato y no fitato. El fósforo es un nutriente valioso en alimentos para animales y aunque el fósforo u n ido a fitato no es bien digerido por aves de corral y cerdos, el uso común de la enzima fitasa en alimentos para animales para que este fósforo esté disponible al animal. La Tabla 4b provee una comparación similar de composición de aminoácido en muestras de semilla entera .

OI O n oí TABLA 4b Composición de aminoácido (% de proteína cruda) de muestras de semilla de ECM comparadas con semilla de cañóla convencional OI O OI en TABLA 4b (cont.) * Considerados como los principales aminoácidos esenciales limitantes en alimentos para aves de corra! y cerdos Los resultados en la Tabla 4b muestran que la composición de aminoácido (como un porcentaje de proteína cruda) es similar entre ECM y la harina de cañóla comercial. Esto indica que debido a que la proteína se incrementó en las líneas de ECM, también lo hicieron los aminoácidos importantes.

EJEMPLO 8 TME y diqestibilidad de aminoácido en aves de corral Las pruebas para energía metabolizable verdadera (TME) y aminoácido disponible verdadero (TAAA) fueron desarrolladas en 1976 y 1981, respectivamente, por Dr. lan Sibbald de Agricultura de Canadá en Ottawa. Debido a la naturaleza directa y no destructiva de las pruebas, las pruebas se han convertido en los métodos de elección para determinar la disponibilidad de energía y aminoácidos en los ingredientes de alimento para aves de corral en gran parte del mundo, incluyendo los Estados Unidos de Norteamérica.

Se utilizaron gallitos maduros White Leghorn de cresta individual (SCWL por sus siglas en inglés) como el animal experimental de elección en estudios separados ácidos en la Universidad de Illinois y la Universidad de Georgia. Es bien sabido que las aves tienen un tiempo de vaciado de las tripas rápido. Retirando el alimento durante un periodo de 24 horas, es confiable suponer el tracto digestivo de los individuos de prueba están vacíos de residuos de alimento previamente consumido.

Cada ave (generalmente 8 individ uos por tratamiento) se alimentan con precisión con 35 g del alimento de prueba, colocado directamente en el buche mediante intubación . Los ingredientes que son altos en fibra usualmente se alimentan a 25 en lugar de 35 gramos, siendo similar el volumen espacial. Después de la intubación , a las aves se les provee acceso al ag ua, pero no a alimento adicional , durante un periodo de 40 horas, tiempo durante el cual se recolectan cuantitativamente las deyecciones. Después de la recolección , las deyecciones se secan en un horno de aire forzado, usualmente a 80°C. Estas después se pesan y se muelen para determinación de energ ía bruta (G E) en las pruebas de TM E, o para determinar el contenido de aminoácido. La G E y la composición de aminoácido de los ingredientes se determinan de manera similar. Una vez pesadas, las muestras de las deyecciones generalmente se combinan y se homogenizan para una determinación individual de GE o de aminoácido. La masa de las deyecciones por ave varía mucho más que la GE o la composición de aminoácido de las deyecciones específicas. Esta observación , y los costos y retraso de tiempo de las determinaciones de GE y de aminoácido, justifican el combinado.

La digestibilidad se calcula utilizando métodos bien conocidos en la técnica para energ ía o pa ra cada aminoácido individualmente. Los estimados de pérdida endógena de G E y de aminoácidos se utilizan para corregir por artefactos experimentales.

EJEMPLO 9 Energía digeri ble (DE), energía metabolizable (ME) en cerdos DE y M E . Cuarenta y ocho cerdos macho castrados en crecimiento (peso corporal inicial: 20 kg) son asignados a un estudio de diseño por bloques completo aleatorizado en la U niversidad de Illinois. A los cerdos se les asigna 1 de 6 dietas, con 8 cerdos de repetición por dieta . Los cerdos se colocan en jaulas de metabolismo que están eq uipadas con un comedero y bebedero de pezón, pisos completamente entablillados, un piso con malla, y charolas para orina. Esto permitirá la recolección total , pero separada , de la orina y los materiales fecales de cada cerdo.

La cantidad de alimento provisto diariamente por cerdo se calcula que es de 3 veces el requerimiento estimado para energ ía de mantenimiento (es decir, 106 kcal de ME por kg 0 75; N RC, 1 998) para el cerdo más pequeño en cada repetición y se divide en dos alimentos iguales. N RC 1 998 , Nutrient requirements of swine, décima edición revisada. National Academy Press. Washington , DC . El agua está disponible en todo momento. El experimento du ra 14 días. Los 5 días iniciales son considerados un periodo de adaptación a la dieta , con la orina y los materiales fecales siendo recolectados durante los siguientes 5 d ías de conformidad con procedimientos estándar utilizando el método de marcador a marcador (Adeola , O . 2001 , Digestión and balance techniques in pigs, páginas 903-91 6 en Swine Nutrition . 2a ed. A. J . Lewis y L. L. Southern , ed . CRC Press, New York, NY. N RC . 1 998. N utrient Requirements of Swine. 1 0a edición revisada , Nati. Acad . Press, Washington DC) . Las muestras de orina se recolectan en cubetas para orina sobre un conservador de 50 mi de ácido clorhídrico. Las muestras fecales y 1 0% de la orina recolectada se almacenan a -20°C inmediatamente después de la recolección . Al finalizar el experimento, las muestras de orina se descongelan y se mezclan dentro del animal y dieta, y se toma una sub-muestra para análisis químico.

Las muestras fecales se secan en un horno de aire forzado y se muelen finamente antes del análisis. Las muestras fecales, de orina y de alimento se analizan por duplicado para DM y energ ía bruta utilizando calorimetría de bomba (Parr I nstruments, Moline, I L). Después del análisis qu ímico, se calcula los valores de digestibilidad en tracto totales para energ ía en que la dieta utilizando procedimientos previamente descritos (Widmer, M . R. , L. M . McGinnis, y H . H . Stein . 2007. Energy, phosphorus, and amino acid digestibility of high-protein distillers d ried grains and corn germ fed to growing pigs. J . Anim. Sci. 85:2994-3003.). Se calcula la cantidad de energ ía perdida en las heces y en la orina, respectivamente, y se calculan las cantidades de DE y ME en cada una de las 24 dietas (Widmer et al . , 2007) . La DE y M E en maíz se calculan dividiendo los valores de DE y M E para la dieta de maíz entre la tasa de inclusión de maíz en esta dieta. Estos valores se utilizan después para calcular la contribución del maíz a la DE y M E en las dietas de maíz-harina de cañóla y en la dieta de maíz-harina de soya, y después se calculan la DE y M E en cada fuente de harina de cañóla y en la muestra de harina de soya mediante diferencia como se describió previamente (Widmer et al. , 2007).

Los datos se analizan utilizando el procedimiento Proc Mixed en SAS (SAS I nstitute I nc. , Cary, NC) . Los datos obtenidos para cada dieta y para cada ingrediente se comparan utilizando un ANOVA. La homogeneidad de las varianzas se confirma utilizando el procedimiento U N IVARIATE en Proc Mixed. La d ieta o el ingrediente será el efecto fijo y el cerdo y su repetición serán los efectos aleatorios. Las medias de los m ínimos cuad rados se calculan utilizando una prueba LSD y las medias se separan utilizando la afirmación pdiff en Proc Mixed. El cerdo será la unidad experimental para todos los cálculos y se utiliza un nivel alfa de 0.05 para evaluar la significancia entre las medias.

EJEM PLO 1 0 Digestibil idad de am i noácido (AID y SID) en cerdos Se analizan AI D y SI D en cerdos en un estudio en la Universidad de I llinois. Doce cerdos macho capados en crecimiento (peso corporal inicial: 34.0 ± 1 .41 kg) se equipan con una cánula en T cerca del íleo distal y se asignan a u n diseño de cuadrado latino de 6 x 6 repetido con 6 dietas y 6 periodos en cada cuadrado. Los cerdos se alojan individualmente en corrales de 1 .2 x 1 .5 m en un cuarto ambientalmente controlado. Los corrales tienen lados sólidos, pisos completamente entablillados, y se instalan u n comedero y un bebedero de pezón en cada uno de los corrales.

Se preparan seis dietas. Cinco dietas están basadas en almidón de maíz, azúcar, y harina de soya (SBM) o harina de cañóla, y la SBM o la harina de cañóla son las únicas fuentes de aminoácido en estas dietas. La última dieta es una dieta sin nitrógeno que se utiliza para estimar las pérdidas endógenas básales en íleo de proteína cruda (CP) y aminoácido. Las vitaminas y minerales se incluyen en todas las dietas de modo tal que satisfagan o excedan los estimados de requerimiento actuales para cerdos en crecimiento (N RC , 1 998). Todas las dietas también contienen 0.4% de óxido crómico como u n marcador no digerible.

Los pesos de los cerdos se registran al inicio y al final de cada periodo, y también se registra la cantidad de alimento suministrado cada d ía. Todos los cerdos se alimentan a un nivel de 2.5 veces el req uerimiento de energ ía de mantenimiento diario, y el agua está disponible en todo momento a través del experimento. Los 5 d ías iniciales de cada pedido son considerados un periodo de adaptación a la dieta . Las muestras del digerido del íleo se recolectan du rante 8 horas en los d ías 6 y 7 utilizando procedimientos estándar. Se une una bolsa de plástico al barril de la cánula utilizando u n amarre de cable, y se recolectan los digeridos que fluyen hacia la bolsa. Las bolsas se retiran cada vez que éstas se llenan con digerido, o por lo menos cada 30 min utos, y se congelan inmed iatamente -20°C para evitar la degradación bacteriana del aminoácido en el digerido. Al término de un período experimental, los animales se privan de alimento durante la noche y la mañana siguiente, y se ofrece una nueva dieta experimental.

Al término del experimento, las muestras del íleo se descongelan , se combinan dentro del animal y la dieta , y se recolecta una sub-muestra para análisis qu ímico. También se recolecta una muestra de cada dieta y de cada una de las muestras de harina de cañóla y de harina de soya. Las muestras de digerido se liofilizan y se muelen finamente antes del análisis químico. Todas las muestras de dietas y digeridos se analizan para DM , cromo, proteína cruda , y aminoácido y la harina de cañóla y la harina de soya se analizan para proteína cruda y aminoácido.

Los valores para digestibilidad aparente en el íleo (AI D) de aminoácido en cada dieta se calculan utilizando la ecuación [1 ]: AI D, (%) = [1 -(AAd/AAf) x (Crf/Crd)] x 100, [1 ] en la cual AI D es el valor de digestibilidad en íleo aparente de un aminoácido (%) , AAd es la concentración de dicho aminoácido en la DM del digerido de íleo, AAf es la concentración de aminoácido de dicho aminoácido en la DM del alimento, Crf es la concentración de cromo en la DM del alimento, y Crd es la concentración de cromo en la DM del digerido del íleo. La AI D para proteína cruda también se calcula utilizando esta ecuación .

El flujo endógeno basal hacia el íleo distal de cada aminoácido se determina tomando como base el flujo obtenido después de alimentar la dieta libre de nitrógeno utilizando la ecuación [2] : lAAend = AAd x (Crf/Crd) [2] en la cual lAAend es la pérdida endógena basal de un aminoácido (mg por kg de DM I) . La pérdida endógena basal de proteína cruda se determina utilizando la misma ecuación.

Corrigiendo la AI D para la lAAend de cada aminoácido, se calculan los valores de digestibilidad de aminoácido en íleo normalizados utilizando la ecuación [3]: SI D, (%) = AI D + [(IAAend/AAf) x 1 00] [3] en la cual SI D es el valor de digestibilidad en íleo normalizada (%) .

Los datos se analizan utilizando el procedimiento Proc GLM de SAS (SAS I nst. I nc. , Cary, NC) . Las 5 d ietas que contienen harina de cañóla o harina de soya se comparan utilizando un ANOVA con fuente de harina de cañóla, cerdos, y periodo como los efectos principales. Se utiliza una prueba LSD para separar las medias. Se utiliza un nivel alfa de 0.05 para evaluar la significancia entre medias. El cerdo individual es la unidad experimental para todos los análisis.

EJEMPLO 1 1 Dearadabílidad de aminoácido en animales productores de leche La degradabilidad de aminoácido de ECM se evalúa mediante incubación ¡n-situ de muestras de harina ECM en animales con cánula en el rumen , tal como ganado lechero, para estimar los contenidos de proteína soluble y degradable y determinar la velocidad de deg radación (Kd) de la fracción degradable.

Al ganado se da como alimento u na dieta mixta como una ración mixta total (TM R) que contiene 28.1 % de ensilaje de maíz, 13.0% de ensilaje de alfalfa , 7.4% de heno de alfalfa , 20.4% de ma íz molido, 14.8% de g ranos de destilería húmedos, 5.6% de semilla de algodón entera , 3.7% de cascarillas de soya , y 7.0% de suplemento (proteína, minerales, vitaminas). Bolsas de poliéster estándar in situ (R51 0, 5 cm x 1 0 cm, tamaño de poro de 50 mieras) que contienen aproximadamente 6 g de materia seca (DM) de harina de soya (S BM) , harina de cañóla convencional (CM), o harina de cañóla mejorada (ECM) se incuban en el rumen durante 0, 2 , 4, 8 , 1 2 , 16, 20 , 24, 32 , 40, 48, y 64 horas. Las bolsas duplicadas se retiran en cada punto de tiempo y se lavan con ag ua de la llave hasta que el flujo de salida está claro. Las bolsas se secan a 55°C durante 3 d ías y el residuo se retira después y se pesa para determinar la desaparición de materia seca (DM) . Los residuos se analizan para contenido de nitrógeno utilizando el método de combustión de Leco. Las muestras del tiempo cero no se incuban en el rumen , pero se lavan y procesan en la misma manera que la de las muestras incubadas en el rumen.

Las muestras del residuo en el tiempo cero y el residuo remanente después de 1 6 horas de incubación en el rumen se analizan para constituyentes aproximados (DM , grasa cruda, fibra cruda, y cenizas) y composición de aminoácido (AA) (sin triptófano). Estos parámetros se pueden utilizar para generar estimados de proteína degradable en rumen (RDP) y proteína no degradable en rumen (RU P), como se utiliza en los lineamientos Consejo Nacional de Investigación (2001 ) para los requerimientos de nutrientes de ganado lechero.

Se puede calcular el porcentaje de nitrógeno de muestra original remanente en cada punto de tiempo, y promediar los valores de réplica para cada pu nto de tiempo dentro de las vacas. Los valores provenientes de las tres vacas se ajustan a la ecuación no lineal descrita por Orskov y McDonald (1 979) . En esta estrategia, se hace la suposición de que la desaparición de proteína cruda en el rumen sigue una cinética de primer orden como es definido por la ecuación , desaparición de CP = A + B x (1 - e"Kd x '), en la cual A es la fracción de proteína cruda soluble (% de CP) , B es la fracción de proteína cruda potencialmente degradable (% de CP) , Kd es la constante de velocidad de degradación (h 1) , y t es él tiempo de incubación en rumen (horas) . La fracción C (no degradable en el rumen) se calcula como fracción A menos fracción B . Las ecuaciones se ajustan utilizando PROC N LI N de SAS (versión 9.2 ; SAS I nstitute I nc. , Cary, NC) , con el método de cálculo de Marquardt.

Las ecuaciones para calcular los valores de RDP y RU P (como porcentajes de CP) son: RDP = A + B[Kd/(Kd + Kp)], y RU P = B[Kp/(Kd + Kp)] + C, en las cuales Kp es la velocidad de pase desde el rumen . Debido a que la velocidad de pase no se puede calcular directamente a partir de estos datos (en el q ue los substratos están contenidos en el rumen y se evita q ue pasen al tracto inferior), se debe suponer una velocidad para Kp. En este estudio, se utiliza u n valor de 0.07 para Kp, el cual es similar al valor calculado de conformidad con las ecuaciones en N RC (2001 ) para una vaca lechera altamente productora que consume u na dieta de lactación típica . Debido a que el objetivo de este proyecto es comparar las fuentes de proteína y los estimados de deg radabilidad en rumen bajo las mismas condiciones, la elección de la velocidad de pase para determinar RDP y RU P es arbitraria .

La ecuación final para cada muestra se genera utilizando muestras incubadas du rante 0, 2, 4, 8, 1 6, 24, y 48 horas de conformidad con las reivindicaciones del N RC (2001 ) . Los datos para los puntos de tiempo incubados adicionales en este estudio (es decir, 1 2 , 20, 32, 40, y 64 horas) se pueden utilizar para verificar la cinética del sistema y para asegurar que la harina de cañóla modificada se ajusta a las suposiciones en las especificaciones del N RC (2001 ) .

EJEM PLO 1 2 TME y TAAA en aves de corral incluyendo comparaciones de TM E real con TME pronosticada tomando como base los resultados analíticos provenientes de las Universidades de Illinois. Missouri y Manitoba Las evaluaciones de energía metabolizable verdadera (TME) en aves de corral en muestras de ECM se efectúan tanto en la Universidad de Illinois como en la Universidad de Georgia. Los protocolos se describieron en el Ejemplo 8.

TABLA 5 Contenido de TME de ECM y harina de cañóla convencional en estudios en la Universidad de Illinois v la Universidad de Georgia TABLA 5 (cont.) * Las medias dentro de una columna y grupo con diferentes letras son significativamente diferentes (p<0.05) ** (SE) *** (diferencia en por ciento) En el caso de las muestras de ECM y de harina de cañóla preparadas en POS, la comparación apropiada es entre las dos harinas LT, con el fin de eliminar los efectos de co-procesamiento. Los resultados son comparables tanto en el estudio de la Universidad de Illinois como en el estudio de la Universidad de Georgia. La TME para aves de corral es significativamente más alta para la ECM (LT) que para la harina de cañóla convencional (LT) - 9% más alto en el estudio de la Universidad de Illinois y 14% más alta en el estudio de la Universidad de Georgia. Estos resultados confirman los resultados de la ecuación de predicción siguiente. Tabla 4.

También se toman muestras de hojuela blanca de ECM y de harinas de cañóla convencionales en POS inmediatamente después de la etapa de extractor de solvente y antes de la etapa de DT. La TME para aves de corral para estas harinas de WF se compara en un estudio separado en la Universidad de Georgia y, al igual que con las muestras LT, la WF de ECM tiene TM E significativamente más alta que la WF de harina de cañóla convencional. Tabla 4.

Se procesan de manera independiente cuatro variedades de ECM en los laboratorios de Dow AgroSciences en I ndianápolis utilizando los métodos del procedimiento de hojuela blanca descritos en el Ejemplo 3. Estas muestras después se someten a análisis de TM E para aves de corral en las dos u niversidades. No hay diferencia significativa en la TME entre las líneas de EC M analizadas, con excepción de que la línea 121460 parece tener TM E más baja que la de las líneas 1 21466 ó 65620.

Los valores de TM E observados provenientes de estos estudios son consistentes con los siguientes contenidos de energ ía metabolizable pronosticados. Los requerimientos de n utriente de aves de corral del Consejo Nacional de I nvestigación (NRC, 1 984, Nutrient req uirements of poultry. Novena edición revisada. National Academy Press. Washington, DC)) tiene una ecuación de predicción para M E en harina de cañóla (harina de semilla de colza doble cero): M E kcal/kg = (32.76 x CP%) + (64.96 x EE%) + ( 1 3.24 x N FE%) Por cálculo una CP 7% más alta debe estar desplazada por una NFE 7% más baja, de modo tal que el coeficiente neto para CP debe ser: 32.76 - 13.24 = 19.52. Esto da como resultado 137 kcal/kg más de ME en ECM que en la harina de cañóla (7% x 19.52 = 137). El problema con esta ecuación es que NFE es un estimado pobre del valor energético del azúcar y almidón.

Una ecuación alternativa es la ecuación de predicción de EEC para ME en aves de corral (adultas). (Fisher, C y J.M. McNab. 1987. Techniques for determining the ME contení of poultry feeds. En: Haresign y D.J.A. Colé (Eds), Recent Advances in Animal Nutrition - 1987. Butterworths, Londres. P.3-17): ME, kcal/kg = (81.97 x EE%) + (37.05 x CP%) + (39.87 x % de almidón) + (31.08 x % de azúcares) La ecuación de EEC es una ecuación de "contribución positiva" que da valor a los nutrientes digeribles en la harina de cañóla, tales como proteína, grasa, almidón y azúcares libres. Debido a que la única diferencia analítica entre ECM y la harina de cañóla es la proteína, se puede utilizar el coeficiente 37.05 para calcular la energía adicional: 37.05 x 7% = 259 kcal/kg. La ecuación de EEC está diseñada para alimentos completos, los cuales por lo general tienen una digestibilidad más alta que la harina de cañóla. Por lo tanto, el coeficiente 37.05 es muy alto.

Una estrategia alternativa es utilizar los primeros principios para el valor energético de la proteína . Un estimado burdo es 4 calorías de energ ía bruta por gramo de proteína x 80% de digestibilidad de proteína x 5% de pérdida por excreción de nitrógeno = aproximadamente 75% de calorías brutas por g ramo (3 calorías de energ ía metabolizable por gramo ó 30 x % de proteína. Esto produce una energ ía metabolizable de: 30 x 7% = 210 kcal/kg de M E adicionales en ECM .

En resumen , se espera que la harina ECM pueda tener entre 140-260 kcal/kg más de M E para aves de corral q ue la harina de cañóla convencional. El valor de 140 kcal/kg probablemente esté subestimado rústicamente y el de 260 kcal/kg puede estar en el lado alto. Es probable un incremento de 200 - 220 kcal/kg más de ME para aves de corral. Al expresar esto en una base "como está" (Tabla 1 ), la ECM comercial probablemente tend rá una M E para aves de corral de 2200 kcal/kg contra 2000 kcal/kg para la harina de cañóla convencional. Esto es u n incremento de 1 0% en energía .

La digestibilidad verdadera de aminoácido (TAAA) para aves de corral también se mide tanto en la Un iversidad de I llinois como en la U niversidad de Georgia . En este caso, solamente se analizan muestras de harina preparadas en POS debido a que la digestibilidad de aminoácido mucho más alta de la harina de cañóla en hojuela blanca contra la de harina de cañóla tostada no se consideró comercialmente relevante. Tabla 6. en oí en TABLA 6 Disponibilidad real de aminoácido (TAAA) en aves de corral de los aminoácidos clave en harinas de ECM v cañóla convencional preparadas en POS en los estudios No hay diferencias estad ísticamente significativas en la disponibilidad verdadera de aminoácido para aves de corral entre las diferentes muestras de harina de cañóla. Tabla 6.

EJEM PLO 1 3 Diqestibilidad de aminoácido (AI D y SI D v NE pronosticada para cerdos Los estudios de digestibilidad de aminoácido en el íleo para cerdos se efectúan en la Universidad de I llinois. Se utilizaron las harinas preparadas en la planta piloto POS para la comparación .

TABLA 7 Diqestibilidad de aminoácido (AID) aparente en íleo para cerdos y diqestibi lidad de ami noácido normalizada (SID) en íleo para cerdos de proteína y aminoácidos clave en ECM y harinas de cañóla convencionales preparadas en POS en un estudio en la Universidad de I llinois TABLA 7 (con * Las medias dentro de una hilera y grupo con letras diferentes son significativamente diferentes (p<0.05) Se observaron algunas diferencias estadísticamente significativas en digestibilidad de proteína y aminoácido entre las muestras de ECM y harina de cañóla. La ECM tiene una AID de proteína cruda más alta que la harina de cañóla pero la diferencia SID de proteína no es significativa. Tanto para AID como para SID, la Usina es más digerible en la ECM que en la harina de cañóla convencional que ha experimentado el mismo tratamiento con calor. Tabla 7.

Para cerdos, las ecuaciones generalmente aceptadas para predecir DE, ME, y NE en cerdos son las ecuaciones de Noblet como se indica en EvaPig (2008, Versión 1.0. INRA, AFZ, Ajinomoto Eurolysine) y los requerimientos de nutrientes para cerdos del NRC (NRC, 1998, Nutrient requirements of swine; décima edición revisada; National Academy Press. Washington, DC): Ecuación 1-4. DE, kcal/kg = 4151 - (122 x % de ceniza) + (23 x % de CP) + (38 x % de EE) - (64 x % de CF) Ecuación 1 -14. N E, kcal/kg = 2790 + (41 .22 x % de EE) +( 8.1 x % de almidón) - (66.5 x % de ceniza) - (47.2 x % de ADF) Las ecuaciones de Noblet son u n híbrido de factores de contribución tanto positivos como negativos: grasa, proteína y almidón tienen coeficientes positivos, mientras que ceniza, CF y ADF tienen coeficientes negativos. La proteína no se utiliza en la ecuación para energ ía neta (N E) , pero las diferencias entre ECM y la harina de cañóla pueden ser capturadas por las diferencias en ADF . Debido a que el almidón y cenizas son los mismos en ECM y harina de cañóla, entonces la diferencia clave es ADF. Una ADF 5 puntos porcentuales más baja da como resultado 47.2 x 5% = 236 kcal/kg más de NE en ECM . Este n úmero pronosticado es similar al número de ME para aves de corral , por lo que de nuevo es probable un incremento en la energ ía neta para cerdos de 200 kcal/kg para ECM en una base "como está" (Tabla 1 ) . Esto debe resultar en u n incremento en energ ía de aproximadamente 12% .

EJEM PLO 14 Híbridos de ECM adicionales Un h íbrido de cañóla nuevo C L1 661 02H también exhibe las propiedades de harina mejorada (ECM). Los rasgos de desempeño y calidad medidos en la semilla de este h íbrido, cosechado a partir de pruebas en parcela pequeña de 201 1 , incluyen aceite, proteína de harina, ADF , y glucosinolatos totales (Tgluc) . Véase Tabla 8.

Los resultados en la Tabla 8 claramente indican que está nueva línea DAS de ECM es superior a la variedad comercial con respecto a los atributos de harina.

TABLA 8b Desempeño agronómico de líneas de ECM (pruebas C3B03)

Claims (9)

REIVINDICACIONES

1 - Un germoplasma de cañóla que confiere a una semilla de cañóla por lo menos aproximadamente 45% de contenido de proteína cruda y no más de aproximadamente 18% de fibra detergente ácida como se determina mediante química de referencia en una base de materia seca libre de aceite.

2.- La semilla de cañóla de conformidad con la reivindicación 1, que comprende también por lo menos aproximadamente 45% de contenido de proteína cruda en una base de materia seca, libre de aceite.

3 - La semilla de cañóla de conformidad con la reivindicación 1, que comprende también no más de aproximadamente 18% de contenido de fibra detergente ácida en una base de materia seca, libre de aceite.

4. - La semilla de cañóla de conformidad con la reivindicación 1, que comprende también por lo menos un rasgo adicional que se selecciona a partir del grupo que consiste de contenido reducido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo.

5. - La semilla de cañóla de conformidad con la reivindicación 1, que comprende también por lo menos dos rasgos adicionales que se seleccionan a partir del grupo que consiste de contenido reducido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo.

6 - Una planta de cañóla que comprende el germoplasma de cañóla de conformidad con la reivindicación 1 .

7.- La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, que comprende también por lo menos un rasgo adicional que se selecciona a partir del g rupo q ue consiste de contenido reducido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo .

8 - La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, que comprende también por lo menos dos rasgos adicionales que se seleccionan a partir del grupo q ue consiste de contenido reducido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo.

9 - La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde la planta de cañóla prod uce una semilla que comprende por lo menos 43% de aceite. 1 0. - La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde la planta de cañóla produce una semilla que comprende componentes anti-nutricionales reducidos. 1 1 . - U n campo que comprende las plantas de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde las plantas de cañóla producen un promedio de por lo menos 1 700 kilogramos de semilla por hectárea . 1 2. - La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde la planta de cañóla se selecciona a partir del g rupo q ue consiste de CL065620, CL044864, CL1 21460H , CL166102H, y CL121466H. 13. - La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde la planta es CL044864. 14. - La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde la planta es producida sin manipulación genética o mutagénesis. 15. - La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde la planta de cañóla produce una semilla que comprende un contenido de fósforo de más de 1.3% en una base de materia seca, libre de aceite. 16. - Una semilla producida por la planta de cañóla de conformidad con las reivindicaciones 6 a 15. 17. - Una planta de progenie cultivada a partir de la semilla de conformidad con la reivindicación 16. 18.- Una semilla producida por la planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde la semilla está disponible bajo los números de un depósito ATCC que se seleccionan a partir de PTA11696, PTA11697, PTA11698, PTA11699 o PTA . 19. - Harina de cañóla producida a partir de una o más de las semillas de conformidad con la reivindicación 16. 20. - La harina de cañóla de conformidad con la reivindicación 19, en donde la harina de cañóla tiene una media de energía metabolizable verdadera para aves de corral de por lo menos 2200 kcal/kg. 21.- La harina de cañóla de conformidad con la reivindicación 19, en donde la harina de cañóla tiene una media de energ ía neta para cerdos de por lo menos 1 800 kcal/kg . 22. - La harina de cañóla de conformidad con la reivindicación 19, en donde la harina de cañóla tiene un perfil de digestibilidad de aminoácido favorable en cerdos. 23. - La harina de cañóla de conformidad con la reivindicación 19 , en donde la harina de cañóla tiene un perfil de digestibilidad de aminoácido favorable en aves de corral . 24. - La harina de cañóla de conformidad con la reivindicación 1 9, en donde dicha harina de cañóla comprende una digestibilidad de aminoácido por lo menos aproximadamente 90% de la de la harina de soya (1 0% de conten ido de h umedad) . 25. - La harina de cañóla de conformidad con la reivindicación 19, en donde dicha harina de cañóla comprende un contenido de energ ía digerible o un contenido de energ ía metabolizable por lo menos aproximadamente 80% del de la harina de soya . 26. - U na semilla de cañóla la cual es genéticamente estable para producir harina que comprende por lo menos aproximadamente 45% de contenido de proteína cruda , y no más de aproximadamente 1 8% de fibra detergente ácida como se determina mediante qu ímica de referencia en una base de masa seca , libre de aceite , en donde la semilla de cañóla es producida a partir de u n cultivar de cañóla de élite. 27.- La semilla de cañóla de conformidad con la reivindicación 26, que comprende también por lo menos aproximadamente 45% de contenido de proteína cruda en una base de materia seca, libre de aceite. 28. - La semilla de cañóla de conformidad con la reivindicación 26, q ue comprende también no más de aproximadamente 1 8% de contenido de fibra detergente acida. 29. - La semilla de cañóla de conformidad con la reivindicación 26 , en donde la semilla de cañóla es genéticamente estable para comprender por lo menos un rasgo adicional que se selecciona a partir del grupo que consiste de contenido reducido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo. 30. - La semilla de cañóla de conformidad con la reivindicación 27, en donde la semilla de cañóla es genéticamente estable para comprender por lo menos dos rasgos adicionales que se seleccionan a partir del g rupo q ue consiste de contenido reducido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo. 31 . - Harina de cañóla producida a partir de las semillas de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 26 a la 30. 32. - Un método para introd ucir dentro de un cultivar de cañóla por lo menos un rasgo deseado que se selecciona a partir del grupo que consiste de contenido alto de proteína, conten ido bajo de ADF, contenido alto de fósforo , y contenido bajo de polifenólicos, en una manera independiente del color del tegumento, en donde el método comprende: cruzar la planta de conformidad con la reivindicación 7 con u na planta de un segu ndo cultivar, diferente de cañóla para producir plantas de la progenie seleccionar una o más de las plantas de progenie que tengan el rasgo o rasgos deseados para producir plantas de progenie seleccionadas; retrocruzar las plantas de progenie seleccionadas con las planta de conformidad con la reivindicación 7 para producir plantas de progenie de retrocruza; seleccionar respecto a plantas de progenie de retrocruza que tengan el rasgo o rasgos deseados y características fisiológicas y morfológicas del segundo cultivar, diferente, de cañóla para producir plantas de progenie de retrocruza seleccionadas; y repetir los pasos de retrocruza y selección tres o más veces para producir las cuartas, o superiores, plantas de progenie de retrocruza seleccionadas endogámicas que comprendan el rasgo o rasgos deseados. 33. - El método de conformidad con la reivindicación 32, en donde los rasgos deseados comprenden contenido alto de proteína , contenido bajo de ADF, contenido alto de fósforo, y contenido bajo de polifenólicos. 34. - Una planta producida mediante el método de conformidad con la reivindicación 32. 35. - U n prod ucto comercial vegetal obtenido a partir de la planta de cañóla de conformidad con las reivindicaciones 6 a 10, 1 3 a 1 5, 1 7, ó 34. 36. - Una harina de cañóla mejorada que se puede obtener directamente a partir de una semilla de cañóla que comprende, por lo menos aproximadamente 45% de contenido de proteína cruda y no más de aproximadamente 1 8% de fibra detergente ácida como se determina mediante qu ímica de referencia en u na base de materia seca, libre de aceite. 37. - La harina de cañóla mejorada de conformidad con la reivindicación 36, que comprende también por lo menos aproximadamente 45% de contenido de prote ína cruda. 38.- La harina de cañóla mejorada de conformidad con la reivindicación 36, que comprende también no más de aproximadamente 1 8% de contenido de fibra detergente ácida. 39. - La harina de cañóla mejorada de conformidad con la reivindicación 36, en donde la semilla de cañóla es genéticamente estable para comprender por lo menos un rasgo adicional q ue se selecciona a partir del grupo que consiste de contenido reducido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo. 40. - La harina de cañóla mejorada de conformidad con la reivindicación 36, en donde la semilla de cañóla es genéticamente estable para comprender por lo menos dos rasgos adicionales que se seleccionan a partir del g rupo que consiste de contenido reducido de polifenólicos y contenido incrementado de fósforo. 41 . - La harina de cañóla mejorada de conformidad con la reivindicación 36, en donde dicha semilla de cañóla comprende también niveles reducidos de factoras anti-nutricionales . 42. - La harina de cañóla mejorada de conformidad con la reivindicación 36, en donde dicha harina de cañóla mejorada puede remplazar otra harina de cañóla convencional, diferente o harina de soya como un suplemento de proteína o energía en la dieta de aves de corral, cerdos, o rumiantes. 43. - La planta de cañóla de conformidad con la reivindicación 6, en donde la planta es CL166102H. 44. - Una planta de cañóla que se selecciona a partir del grupo que consiste de CL065620, CL044864, CL121460H, CL166102H, y CL121466H.