MX2013002644A - Emulsiones comestibles. - Google Patents

Abstract

Se describen emulsiones comestibles que comprenden ácidos grasos poliinsaturados y métodos de preparación de ellos. Las emulsiones permanecen transparentes o semi-transparente tras la dilución. Las emulsiones comprenden uno o más ácidos grasos poliinsaturados o derivados de los mismos, uno o más emulsiones, uno o más solventes orgánicos, y uno o más polioles en una solución de agua. Las emulsiones son particularmente adecuadas para su incorporación en bebidas.

Description

EMULSIONES COMESTIBLES CAMPO DE LA INVENCIÓN La descripción se refiere a emulsiones comestibles que comprenden ácidos grasos poliinsaturados y sus métodos de preparación.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los ácidos grasos poliinsaturados (PUFA), que incluyen los ácidos grasos omega-3, omega-6 y omega-9, son vitales para la vida y la función diaria. Por ejemplo, los efectos beneficiosos de los ácidos grasos omega-3 como el ácido todo cis-5,8,1 1 , 14,17-eicosapentaenoico (EPA) y el ácido todo-cis-4,7,10,13,16,19-docosahexaenoico (DHA) en la reducción de los triacilgliceroles en el suero están bien establecidos. El ácido todo-cis-9,12,15-octadecatrienoico (ALA) es el ácido graso esencial precursor de EPA y DHA. El ácido todo-cis-5,8,1 1 ,14-eicosatetraenoico (AA) y sus precursores el ácido todo-cis-6,9,12-octadecatrienoico (GLA) y el ácido todo-cis-9,12-octadecadienoico (LA) se ha demostrado que son beneficiosos para los bebés.

Varios de estos compuestos se conocen además por otros beneficios cardioprotectores tales como la prevención de arritmias cardíacas, la estabilización de las placas ateroscleróticas, la reducción de la agregación plaquetaria, y la reducción de la presión arterial. Ver por ejemplo, Dyrberg y otros, en: Omega-3 Fatty Acids: Prevention and Treatment of Vascular Disease. Kristensen y otros, eds., Bi & Gi Publ, Verona- Springer- Verlag, London, págs. 217-26, 1995; O'Keefe y Harris, Am J Cardiology 2000, 85: 1239-41 ; Radack y otros, "The effects of low doses of omega-3 fatty acid supplementation on blood pressure in hypertensive subjects: a randomized controlled trial." Arch Intern Med 151 : 1 173-80, 1991 ; Harris, "Extending the cardiovascular benefits of omega-3 fatty acids." Curr Atheroscler Rep 7:375-80, 2005; Holüb, "Clinical nutrition: 4 omega-3 fatty acids in cardiovascular care," CMAJ 166(5):608-15, 2002. De hecho, la Asociación Americana del Corazón ha informado también que los ácidos grasos omega-3 pueden reducir el riesgo de enfermedad cardiovascular y del corazón. Otros beneficios de los PUFA son los relacionados con la prevención y/o tratamiento de la inflamación y las enfermedades neurodegenerativas, y para mejorar el desarrollo cognitivo. Ver, por ejemplo, Sugano y Michihiro, "Balanced intake of polyunsaturated fatty acids for health benefits". J Oleo Sci 50(5):305-l 1 , 2001.

Además de las fuentes de aceite de pescado, los PUFA pueden ser y son derivados de fuentes microbianas que incluyen, sin limitarse a, Mortiarella alpina para ARA y varias especies de Thraustochytridos para DHA y EPA. Las plantas ahora se han modificado genéticamente para incluir genes que producen varios PUFA en esfuerzos adicionales para reducir los costos asociados con la producción comercial de estos aceites.

A pesar de la fuerte evidencia por el beneficio de los PUFA en la prevención de la enfermedad cardiovascular, el consumo medio diario de estos ácidos grasos por los norteamericanos se estima que está entre 0.1 a 0.2 gramos, en comparación con la ingesta diaria recomendada de 0.65 gramos para conferir beneficios (Webb, "Alternative sources of omega- 3 fatty acids." Natural Foods Merchandiser 2005, XXVI (8):40-4). Dado que es difícil alterar los patrones dietéticos de las poblaciones, la suplementación de las dietas con PUFA es un instrumento importante para tratar este problema. Desafortunadamente, muchos PUFA son sensibles a la oxidación y pueden tener propiedades organolépticas desagradables. Además, el cumplimiento de los regímenes de suplementos dietéticos requiere disciplina, lo que es frecuentemente deseado. En vista de los beneficios de los PUFA para la salud se prefiere encontrar nuevas maneras para suministrar a un sujeto estos y otros materiales beneficiosos.

El suministro de PUFA mediante su formulación en composiciones comestibles, sería un método deseable de una aceptación por el consumidor y el punto de vista de conformidad. Sin embargo, las características de hidrofobicidad y estabilidad oxidativa asociada con muchos PUFA crea desafíos significativos para su incorporación en composiciones comestibles. Un enfoque implica el uso de emulsiones. Las emulsiones se han usado como vehículo de suministro para varias sustancias. Por ejemplo, las emulsiones se han usado en la cosmética, detergentes, cuidado personal, agricultura, y la industria de exploración del petróleo. Sin embargo, la mayoría de las emulsiones no son solubles en agua; esto es, la emulsión se vuelve turbia o blanca lechosa tras la dilución en agua. Como tal, ha habido un gran interés en la obtención de una emulsión que permanezca transparente tras la dilución y sea estable durante un largo período de tiempo. Para fines comerciales, ha sido un objetivo la creación de emulsiones que permanezcan transparentes tras la dilución y sean estables durante un largo período de tiempo. Es importante además que la emulsión tenga un factor de carga alto, para un suministro más eficiente, y sea suficientemente barato para ser rentable en el coste de las bebidas sensibles. El proceso para preparar una emulsión además debe ser comercialmente rentable. Una emulsión con estas propiedades se puede incorporar en aguas y otras bebidas transparentes o cercanas a la transparencia sin afectar la apariencia subyacente de la bebida y sin aumentar significativamente el coste de la bebida para el consumidor. Este objetivo aún no se ha alcanzado satisfactoriamente con PUFA, ésteres y glicéridos de los mismos.

La patente de Estados Unidos 5,798,333 describe un método de fabricación de una emulsión transparente de ciclosporina-en-agua, soluble en agua, por medio del uso del tocofersolan (vitamina E TPGS) como emulsionante. Esta patente describe el uso de un exceso (7.5 veces) de emulsionante para disolver la ciclosporina. La ciclosporina tiene un bajo peso molecular y mejor solubilidad que varios PUFA de cadena larga. El producto terminado es un gel semi-sólido no fluido contenido en una cápsula de gelatina de dos piezas.

La publicación internacional del documento WO 2009/1 17152 describe una nanoemulsión transparente no polar, soluble en agua que contiene vitamina E TPGS, triacilglicerol omega-3 de aceite de pescado, y agua. La relación de emulsionante a aceite de pescado es a partir de 1.6 : 1 (p/p) a 6 : 1 (p/p). Además, se usan componentes adicionales que incluyen alcohol bencílico, propilenglicol, glicerina, fosfolípidos, y estabilizadores de una emulsión a base de goma.

En otro ejemplo, de la patente de Estados Unidos 5,753,241 , una etapa de homogenización de presión muy alta en 108 Pa se usó para hacer la emulsión. Sin embargo, tal presión está generalmente más allá del intervalo de presión normal usado en las aplicaciones alimenticias, que normalmente es de 1500 psi a 6000 psi.

En vista de lo anterior, lo que se necesita en la materia son emulsiones de PUFA y otros materiales beneficiosos y métodos para su preparación, donde la emulsión no es discernible en el líquido en el que se incorpora, tiene un alto factor de carga, tiene propiedades organolépticas favorables, y es rentable. Las composiciones y métodos descritos en la presente cumplen con estas y otras necesidades.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN De acuerdo con los propósitos de los materiales, compuestos, composiciones, artículos, y métodos descritos, como se expresan y describen ampliamente en la presente, la materia descrita, en un aspecto, se refiere a composiciones y métodos para preparar y usar tales composiciones. En un aspecto adicional, la materia descrita se relaciona con las emulsiones. Además se describen los métodos de preparar y usar las emulsiones descritas.

Las ventajas adicionales se expondrán en parte en la descripción que sigue, y en parte serán evidentes a partir de la descripción, o pueden aprenderse al llevar a la práctica los aspectos descritos más abajo. Las ventajas descritas más abajo se comprenderán y alcanzarán por medio de los elementos y combinaciones particularmente destacadas en las reivindicaciones anexas. Se entiende que tanto la descripción general anterior y la siguiente descripción detallada son sólo ilustrativas y explicativas y no restrictivas.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los materiales, compuestos, composiciones y métodos descritos en la presente se pueden entender más fácilmente como referencia a la siguiente descripción detallada de aspectos específicos de la materia descrita y los ejemplos incluidos en la misma.

Antes de que los presentes materiales, compuestos, composiciones y métodos se divulguen y se describan, se debe entender que los aspectos descritos más abajo no están limitados a métodos sintéticos específicos o reactivos específicos, puesto que tales, por supuesto, pueden variar. También se entenderá que la terminología que se usa en la presente es con el sólo propósito de describir los aspectos particulares y no está destinada a ser limitante.

Además, durante toda esta descripción se hará referencia a varias publicaciones. Las descripciones de estas publicaciones se incorporan de este modo en su totalidad como referencia en esta solicitud para describir de manera más completa el estado de la materia a la cual pertenece la materia descrita. Las referencias descritas además se incorporan individualmente y específicamente como referencia en la presente para el material contenido en ellas que se discute en la frase en la que se basó la referencia.

Definiciones generales En esta descripción y en las reivindicaciones que siguen se hará referencia a un número de términos los cuales se definirán para tener los siguientes significados: En toda la descripción y las reivindicaciones de esta descripción la palabra "comprender" y otras formas de la palabra, tales como "que comprende" y "comprende," significan que incluyen pero sin limitarse a, y no están destinadas a excluir, por ejemplo, otros aditivos, componentes, enteros, o etapas.

Como se usa en esta descripción y en las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares "un", "una", y "el/la" incluyen referentes plurales a menos que el contexto lo indique claramente de cualquier otra forma. Así, por ejemplo, la referencia a "un compuesto" incluye mezclas de dos o más de tales compuestos, la referencia a "un emulsionante" incluye de dos o más de tales emulsionantes, la referencia a "el¦ cosolvente" incluye de dos o más de tales cosolventes, y similares.

Opcional" u "opcionalmente" significan que el suceso o circunstancia descrito posteriormente puede o no ocurrir, y que la descripción incluye casos donde el evento o circunstancia ocurre y casos en los. que no.

Los intervalos se pueden expresar en la presente como "de aproximadamente" un valor particular, y/o "a aproximadamente " otro valor particular. Cuando se expresa tal intervalo, otro aspecto incluye desde un valor particular y/o hasta otro valor particular. De igual manera, cuando los valores se expresan como aproximaciones, mediante el uso del antecedente "aproximadamente", se entenderá que el valor particular forma otro aspecto. Se entenderá adicionalmente que los puntos extremos de cada uno de los intervalos son significativos tanto en relación con el otro punto extremo, e independientemente del otro punto extremo. Además se entiende que hay un número de valores descritos en la presente, y que cada valor además se describe en la presente como "aproximadamente" ese valor particular además del propio valor. Por ejemplo, si se describe el valor "10", entonces "aproximadamente 10" también se describe. Además se entiende que cuando se describe un valor "menor que o igual al" valor, "mayor que o igual al valor," y los intervalos posibles entre los valores además se describen, como apropiadamente entendido por el técnico con experiéncia. Por ejemplo, si el valor "10" se describe, entonces "menor que o igual a 10" así como "mayor que o igual a 10" se describen también. Además se entiende que los datos de toda la solicitud se proporcionan en un número de formatos diferentes y que estos datos representan puntos extremos y puntos de partida e intervalos para cualquier combinación de los puntos de datos. Por ejemplo, si se describen un punto de datos particular "10" y un punto de datos particular "15", se entiende que mayor que, mayor que o igual a, menor que, menor que o igual a, e igual a 10 y 15 se consideran descritos así como entre 10 y 15. Se entiende además que cada unidad entre dos unidades particulares también está descrita. Por ejemplo, si se describen 10 y 15, entonces 11 , 12, 13, y 14 también se describen.

Las referencias en la descripción y las reivindicaciones finales a partes en peso de un componente particular en una composición denotan la relación de peso entre el componente y cualquier otro componente en la composición para la que se expresa una parte en peso. Así, en un compuesto que contiene 2 partes en peso del componente X y 5 partes en peso del componente Y, X y Y están presentes en una relación de peso de 2:5, y están presentes en dicha relación independientemente de si los componentes adicionales están contenidos en el compuesto.

Un por ciento en peso (%p) de un componente, a menos que se indique específicamente lo contrario, se basa en el peso total de la formulación o composición en la que está incluido el componente.

"Sujeto," como se usa en la presente, significa un animal. En un aspecto, el sujeto es un mamífero tal como un primate, y, en otro aspecto, el sujeto es un ser humano. El término "sujeto" además incluye animales domesticados (por ejemplo, gatos, perros, etc.), y ganado (por ejemplo, vacuno, caballos, cerdos, ovejas, cabras, etc.).

Por "aceite" se entiende una composición que contiene uno o más PUFA, por ejemplo, ácidos grasos omega-3, ácidos grasos omega-6, y/o ácidos grasos omega-9, o derivados de los mismos como se describe en otra parte de la presente. Los PUFA pueden estar en su forma de ácido libre, en forma de sal, forma de éster de triacilglicerol, éster de fitosterol, y/o en forma de éster de metilo o etilo y el término "aceite" puede incluir una cualquiera o más de estas formas. A menos que se indique específicamente, el término "aceite" se usa generalmente en la presente y no significa que implica cualquier nivel específico de pureza, cualquier nivel específico de hidrofobicidad, cualquier forma física o propiedad específica, o cualquier fuente específica. "Aceite" a menos que se indique de cualquier otra forma, incluye las composiciones derivadas a partir de fuentes de animales marinos, por ejemplo, pescado, fuentes microbianas, y/o fuentes de plantas. El término "aceite" se puede usar como sinónimo con el término "fase dispersa".

"Emulsión" se usa en la presente para referirse a cualquier sistema heterogéneo que ' contiene una fase dispersa y fase continua. El término no está destinado a estar limitado por el tamaño particular de las gotitas o partículas de la fase dispersa. El término "emulsión" usado en la presente incluye microemulsiones y nanoemulsiones.

Una microemulsión es una emulsión termodinámicamente estable que se forma espontáneamente.

Una nanoemulsión se usa para referirse a un tipo específico de emulsión donde el tamaño de las partículas o gotitas en la fase dispersa es típicamente menor que 0.1 µG?.

"Transparente" se usa en la presente para referirse a una característica de las emulsiones descritas. La transparencia de una emulsión se puede medir mediante varios métodos. Sin embargo, a menos que se indique de cualquier otra forma, una emulsión que tiene una absorbancia menor que aproximadamente 0.1 A de una muestra de 1.3 cm de espesor a 400 nm se considera transparente. Una emulsión semi transparente tiene una absorbancia de 0.3A a aproximadamente 0.1 A cuando se mide a 400 nm en una muestra de 1.3 cm. Por "emulsión transparente soluble" se quiere decir que después de la dilución en agua en cualquier relación, que incluye diluir en agua indefinidamente, la absorbancia de luz de la emulsión no llega a ser mayor que aproximadamente 1 % de su valor antes la dilución.

Ahora se hará referencia en detalle a aspectos específicos de los materiales, compuestos, composiciones, artículos, y métodos descritos, ejemplos de los cuales se ilustran en los Ejemplos adjuntos.

Materiales y composiciones En la presente se describen materiales, compuestos, composiciones, y componentes que se pueden usar para, se pueden usar junto con, se pueden usar en la preparación de, o son productos de los métodos y las composiciones descritos. Estos y otros materiales se describen en la presente, y se entiende que cuando las combinaciones, subconjuntos, interacciones, grupos, etc. de estos materiales se describen aunque la referencia específica de cada uno de los varios compuestos individuales y combinaciones colectivas y permutaciones de estos compuestos pueda no estar explícitamente descrita, cada uno se contempla específicamente y se describe en la presente. Por ejemplo, si un compuesto se describe y un número de modificaciones que se pueden hacer a un número de componentes o residuos del compuesto se discuten, todas y cada combinación y permutación que sea posible se contempla específicamente a menos que ¦ específicamente se indique lo contrario. Así, si una clase de componentes A, B, y C se describen así como una clase de componentes D, E, y F y un ejemplo de una composición de combinación A-D se describe, después aun si cada uno no se enumera individualmente, cada uno se contempla individual y colectivamente. Así, en este ejemplo, cada una de las combinaciones A-E, A-F, B-D, B-E, B-F, C-D, C-E, y C-F se contemplan específicamente y se deben considerar descritas a partir de la descripción de A, B, y C; D, E, y F; y la combinación de ejemplo A-D. Del mismo modo, cualquier subconjunto o combinación de éstos además se contempla y se describe específicamente. Así, por ejemplo, el sub-grupo de A-E, B-F, y C-E se contemplan específicamente y se deben considerar descritos a partir de la descripción de A, B, y C; D, E, y F; y la combinación de ejemplo A-D. Este concepto se aplica a todos los aspectos de esta descripción que incluyen, pero sin limitarse a, las etapas en los métodos de hacer y usar las composiciones descritas. Así, si hay una diversidad de etapas adicionales que se pueden realizar se entiende que cada una de estas etapas adicionales se puede realizar con cualquier aspecto específico o la combinación de aspectos de los métodos descritos, y que cada una de tal combinación se contempla específicamente y se debe considerar descrita.

Emulsiones Se describen en la presente las emulsiones que comprenden una fase dispersa (por ejemplo, aceite) y una fase continua. La fase dispersa puede comprender uno o más PUFA y/o derivados de los mismos. Además, está presente en las emulsiones descritas uno o más emulsionantes, uno o más cosolventes, y uno o más mono y/o disacáridos.

En las emulsiones descritas, la relación del emulsionante a la fase dispersa se calcula al dividir el por ciento en peso del emulsionante en la emulsión por el por ciento en peso de la fase dispersa. Las emulsiones descritas tienen una relación del emulsionante a la fase dispersa de aproximadamente 1 .5 o menos. Esto es, la cantidad de emulsionante usado en las emulsiones descritas está ligeramente por encima, pero en la mayoría de los casos aproximadamente igual o menor que la cantidad de la fase dispersa. En algunos ejemplos específicos, la relación de emulsionante a la fase dispersa es aproximadamente 1.5, 1.4, 1.3, 1.2, 1 .1 , 1.0, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, o 0.5, donde cualquiera de los valores indicados puede formar un punto extremo superior o inferior de un intervalo, por ejemplo, de aproximadamente 1.5 a aproximadamente 0.1 , de aproximadamente 1 .2 a aproximadamente 0.3, de aproximadamente 1 a aproximadamente 0.5, o de aproximadamente 1 a aproximadamente 0.7.

Tamaño Las emulsiones descritas pueden tener gotitas o partículas de varios tamaños. Por ejemplo, la emulsión descrita puede ser de hasta aproximadamente 200 nm, en particular menos de aproximadamente 100 nm. Los ejemplos específicos incluyen, pero sin limitarse a, las emulsiones que tienen un tamaño medio de gotita menor que aproximadamente 5, 10, 1 1 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31 , 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 , 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 1 10, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, o 200 nm, donde cualquiera de los valores indicados puede formar un punto extremo superior o inferior.

El tamaño de las gotitas se puede determinar mediante métodos conocidos en la materia, tales como dispersión de la luz, microscopía, espectroscópicamente, y similares.

Transparencia Hay varios métodos mediante los cuales se puede medir o caracterizar la transparencia de una emulsión. En algunos casos se puede usar un medidor de turbidez. Otro método, que se usa en la presente, es la medición espectroscopia de absorbancia. Específicamente, la transparencia de las emulsiones descritas se determina mediante la dilución de la emulsión con agua desionizada para tener 50 mg de la fase dispersa por 250 g de fase continua. Un ultroespectrómetro, Ultrospec 2000 de Pharmacia Biotech (Cambridge, Reino Unido), se usa para medir la absorbancia de luz de la muestra de emulsión diluida a 400 nm. El agua desionizada pura se usa como referencia. La dimensión de las cubetas es 4.5 cm por 1.3 cm por 1.3 cm. Las ' emulsiones transparentes descritas en la presente tienen una absorbancia a 400 nm menor que aproximadamente 0.3, 0.2, o 0.1 A.

Fase dispersa La fase dispersa de las emulsiones descntas pueden comprender uno, dos, o aun más componentes. Por ejemplo, la fase dispersa puede comprender uno o más PUFA y/o derivados de los mismos. Los derivados de los PUFA pueden incluir ésteres de alquilo (por ejemplo, ésteres de etilo), ésteres de glicéridos (por ejemplo, mono, di, y triacilglicerol), ésteres de esteróles (por ejemplo, ésteres de fitosterol), y sales de los PUFA. Las mezclas y combinaciones de PUFA y derivados de los mismos son además adecuados para uso en las fases dispersas en la presente.

Los ejemplos específicos de PUFA incluyen, pero sin limitarse a, ácido a-linolénico (18:3co3)(ALA), ácido octadecatetraenoico (18:4u)3)(ácido estearidónico), ácido eicosapentaenoico (20:5?3) (EPA), ácido docosahexaenoico (22:6?3) (DHA), ácido docosapentaenoico (22:5?3) (DP A), ácido eicosatetraenoico (24:4?3), 16:3?3, 24:5?3, y/o ácido nisinico (24:6?3), ácido araquidónico (20:4oo6)(ARA) naturales y sintéticos; otros se señalan en otra parte en la descripción. Estos y otros PUFA, ya sea en sus formas libre, esterificada, o de sales se pueden encontrar en y obtener a partir de aceites marinos (por ejemplo, aceite de pescado, aceite de foca, aceite de camarón antártico), aceites microbianos (incluidos los microbios naturales, así como los modificados ya sea por medio de mutagénesis clásica o alteración genética) tales como el aceite de algas (por ejemplo, aceite de microalgas), aceite fúngico, aceite de perilla, así como el aceite de planta (ya sea derivado a partir de plantas de origen natural o plantas genéticamente modificadas), entre otros. Los precursores de los PUFA, por ejemplo, ALA y GLA y los derivados tales como los derivados poliglicolizados o los derivados de polioxietileno se pueden presentar además en la fase dispersa. En otros ejemplos específicos, la fase dispersa puede comprender DHA y/o EPA, un éster de alquilo C^-C6 del mismo, un éster de triacilglicerol del mismo, un éster fitosterol del mismo, una sal del mismo, y/o una mezcla del mismo.

En ejemplos específicos, la fase dispersa puede comprender un aceite microbiano, por ejemplo, y aceite de algas (por ejemplo, aceite a partir de un dinoflageládo tal como Crypthecodinium cohnii) o aceite fúngico (por ejemplo, aceite de Mortiarella Alpina, Thraustochytrium, Schizochytrium, o una mezcla de estos), y/o aceite de planta, se incluyen mezclas de los mismos.

En ejemplos específicos, la fase dispersa puede comprender un aceite marino, tal como aceite de pescado natural y refinado y concentrado. Ejemplos de aceites de pescado adecuados incluyen, pero sin limitarse a, aceite de pescado del Atlántico, aceite de pescado del Pacífico, aceite de pescado del Mediterráneo, aceite de pescado prensado ligero, aceite de pescado con tratamiento alcalino, aceite de pescado tratado con calor, aceite de pescado marrón ligero y pesado, aceite de bonito, aceite de arenque, aceite de tilapia, aceite de atún, aceite de lubina de mar, aceite de halibut, aceite de marlín, aceite de barracuda, aceite de bacalao, aceite de menhaden, aceite de sardinas, aceite de anchoa, aceite de capelán, aceite de bacalao del Atlántico, aceite de arenque del Atlántico, aceite de caballa del Atlántico, aceite de menhaden del Atlántico, aceite de salmónidos, aceite de atún y aceite de tiburón, que incluyen mezclas y combinaciones de los mismos. El aceite de pescado sin tratamiento alcalino es además una sustancia de carga adecuada. Otros aceites marinos adecuados para uso en la presente incluyen, pero sin limitarse a, aceite de calamar, aceite de pulpo, aceite de camarón antártico, aceite de foca, aceite de ballena, y similares, que incluyen mezclas y combinaciones de los mismos. Cualquier aceite de PUFA y combinación de aceites de PUFA se pueden usar en las composiciones descritas y en los métodos descritos para prepararlos.

Los PUFA descritos en la presente además pueden ser aceites crudos, semi-refinados (además denominados refinados con álcali), o aceites refinados a partir de las fuentes descritas en la presente. Más aún, las emulsiones descritas pueden usar aceites que comprenden triacilgliceroles re-esterificados.

Adicionalmente, la fase dispersada puede estar presente en una cantidad de aproximadamente 1 % a aproximadamente 15% en peso de la emulsión. En ejemplos específicos, la fase dispersa puede presentarse en una cantidad de aproximadamente 1 % a aproximadamente 15%, de aproximadamente 3% a aproximadamente 12%, de aproximadamente 5% a aproximadamente 10%, de aproximadamente 7% a aproximadamente 10%, o de aproximadamente 8% a aproximadamente 9% basado en el peso total de la emulsión. En un aspecto preferido, la fase dispersa es aproximadamente 8.5% en peso de la emulsión.

Emulsionantes Las emulsiones descritas comprenden uno o más emulsionantes. Además de estar presente con la fase dispersa en una relación particular, los emulsionantes que son adecuados para uso en la presente tienen un valor de HLB de aproximadamente 10 a aproximadamente 40. Típicamente, el emulsionante tiene un valor de HLB de aproximadamente 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31 , 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, o 40, donde cualquiera de los valores indicados pueden formar un punto extremo superior o inferior de un intervalo. En ejemplos específicos, el emulsionante tiene un HLB de aproximadamente 12 a aproximadamente 16, más específicamente aproximadamente 12 a 14, o aproximadamente 13. Los valores de HLB se pueden calcular mediante el método de Griffin (Griffin, W.C., Journal of t e Society of Cosmetic Chemists 1 , 311 (1949)) u otro método empírico como el método de la solubilidad (Little R.C., Journal of Colloid and Interface Science, 65(3): 587, 978).

Derivados de la vitamina E En varios ejemplos en la presente, el emulsionante es un derivado polialquileno glicol-vitamina E, tal como los emulsionantes derivados del tocoferol y tocotrienol en el que la porción de vitamina E representa la región hidrófoba del emulsionante y está unido a través de un enlazador a un polialquileno glicol. Estos emulsionantes se pueden formar mediante la esterificación de un éster de tocoferol con un polialquileno de glicol. El éster de tocoferol se hace mediante la esterificación de tocoferol con un enlazador. El término tocoferol se refiere a cualquier forma sintética o de origen natural de la vitamina E, y puede referirse a un solo compuesto o una mezcla. Los ejemplos de tocoferoles incluyen, por ejemplo, a-tocoferol, D-a-tocóferol, ß-tocoferol, y-tocoferol, y d-tocoferol. El enlazador es un ácido dicarboxílico (un ácido carboxílico que tiene dos grupos carboxi, por ejemplo, ácido succínico), tal como el ácido succínico. Los ácidos dicarboxílicos ilustrativos que se pueden usar como enlazadores en estos emulsionantes tocoferol y tocotrienol diéster PEG son ácido succínico, ácido sebácico, ácido dodecanodióico, ácido subérico, o ácido acelaico, ácido citracónico, ácido metilcitracónico, ácido itacónico, ácido maleico, ácido glutárico, ácido glutacónico, ácidos fumáricos, y ácidos itálicos.

Los ejemplos adecuados de emulsionantes derivados de la vitamina-E incluyen, pero sin limitarse a, polietilenglicol (PEG) derivados de tocoferol, tales como polietilenglicol diésteres de tocoferol (TPGD). Un emulsionante preferido es polietilenglicol succinato de tocoferol (TPGS). Los análogos de TPGS, homólogos de TPGS, y derivados de TPGS son además adecuados. Otros ejemplos de emulsionantes incluyen polietilenglicol sebacato de tocoferol, polietilenglicol dodecanodioato de tocoferol, polietilenglicol suberato de tocoferol, polietilenglicol azelate de tocoferol, polietilenglicol citraconato de tocoferol, polietilenglicol metil citraconato de tocoferol, polietilenglicol itaconato de tocoferol, polietilenglicol maleato de tocoferol,- polietilenglicol glutarato de tocoferol, polietilenglicol glutaconato de tocoferol, y polietilenglicol ftalato de tocoferol, entre otros.

Los emulsionantes adecuados pueden además incluir otros derivados de PEG que tienen propiedades similares, por ejemplo, esteróles derivados de PEG, por ejemplo, un colesterol o un sitosterol, y derivados de PEG de otras vitaminas solubles en grasa, por ejemplo, algunas formas de vitamina A (por ejemplo, retinol) o vitamina D (por ejemplo, vitamina D1 -D5).

En un aspecto preferido, el emulsionante comprende polietilenglicol succinato de tocoferol (TPGS), tal como un TPGS-1000 y/o un d- TPGS. En otro ejemplo, el emulsionante es un análogo de TPGS. Los análogos de TPGS se refieren a compuestos, que no sean TPGS, que son similares á un compuesto TPGS parental, pero difieren ligeramente en la composición, por ejemplo, por la variación, adición o eliminación de un átomo, una o más unidades (por ejemplo, unidad de metileno (s)-(CH2)n) o uno o más grupos funcionales. Los análogos de TPGS incluyen surfactantes derivados de la vitamina E, que incluyen PEG derivados de vitamina E, que incluyen PEG diésteres de vitamina E, tales como, pero sin limitarse a, polietilenglicol sebacato de tocoferol (PTS), polietilenglicol dodecanodioato de tocoferol (PTD), polietilenglicol suberato de tocoferol (PTSR), polietilenglicol azelato de tocoferol (PTAz), y polioxietanil tocotrienilo sebacato (PTrienS) así como otros PEG derivados de vitamina E.

Las porciones PEG en el emulsionante derivado de PEG, incluyen las porciones PEG en los PEG derivados de vitamina E, incluye las porciones de PEG seleccionadas entre uno cualquiera o más de PEG-OH, PEG-NHS, PEG-CHO, PEG-SH, PEG-NH2, PEG- C02H, PEG metilados (m-PEG) y PEG ramificados, e incluye porciones de PEG que tienen un peso molecular de aproximadamente 200 kDa a aproximadamente 20,000 kDa, de aproximadamente 200 kDa a aproximadamente 6,000 kDa, de aproximadamente 600 kDa a aproximadamente 6,000 kDa, de aproximadamente 200 kDa a aproximadamente 2,000 kDa, de aproximadamente 600 kDa a aproximadamente 1 ,500 kDa, o de aproximadamente 600 kDa a aproximadamente 1 ,000 kDa.

Los ejemplos preferidos de emulsionantes adecuados son emulsionantes derivados de vitamina E polielilenglicol (PEG), tales como polietilenglicol succinato de tocoferol (TPGS) con un HLB de aproximadamente 12 a aproximadamente 14 (por ejemplo, aproximadamente 13).

Deseablemente, los emulsionantes son aceptables por las autoridades reguladoras de alimentos en su nivel particular de uso. Por ejemplo, TPGS-1000, que tiene una porción PEG de 1000 kDa, se considera de calidad alimentaria y se vende bajo el nombre de Eastman Vitamin E TPGS™, por Eastman Chemical Company, Kingsport, TN, Estados Unidos. Este TPGS es una forma soluble en agua de la vitamina E de fuente natural, que se prepara mediante la esterificación del grupo carboxilo del succinato ácido de d-alfa tocoferilo cristalino con polietilenglicol 1000 (PEG 1000), y contienen entre 260 y 300 mg/g de tocoferol total. Un compuesto similar se puede hacer mediante la esterificación del grupo carboxilo de la forma d,l de la vitamina E sintética con PEG 1000. Este tocoferilo polietilenglicol es una preparación soluble en agua de una vitamina (vitamina E) soluble en grasa, por ejemplo, como se describe en las patentes de Estados Unidos núms. 3,102,078, 2,680,749 y las solicitudes publicadas en Estados Unidos núms. 2007/01841 17 y 2007/0141203. Además ilustrativo del surfactante TPGS que se puede usar en las composiciones que se proporcionan es la vitamina E natural soluble en agua (TPGS), que vende ZMC-USA, The Woodlands, TX, Estados Unidos.

Polisorbatos En otros ejemplos, los emulsionantes pueden ser polisorbatos. Los polisorbatos son líquidos aceitosos derivados de sorbitán PEG-ilado (un derivado de sorbitol) esterificado con ácidos grasos. Los ejemplos de polisorbatos adecuados son el polisorbato 20 (Tween 20 o polioxietileno (20) monolaurato de sorbitán), polisorbato 40 (Tween 40 o polioxietileno (20) monopalmitato de sorbitán), polisorbato 60 (Tween 60 o 'polioxietileno (20) monoestearato de sorbitán), y polisorbato 80 (Tween 80 o polioxietileno (20) monooleato de sorbitán). El número que sigue a la parte de polioxietileno se refiere al número total de grupos oxietileno-(CH2CH20) encontrados en la molécula. El número que sigue a la parte de polisorbato está relacionado con el tipo de ácido graso asociado con la parte sorbitán de polioxietileno de la molécula. El monolaurato se indica por 20, monopalmitato se indica por 40, monoestearato por 60 y monooleato por 80.

En ciertos ejemplos el emulsionante no es lecitina.

Solventes La fase continua de las emulsiones descritas comprende agua. Sin embargo, los solventes adicionales (es decir, cosolventes) pueden además estar presentes en la fase continua y en algunos casos se prefieren. Por ejemplo, puede usarse un solvente polar tal como propilenglicol, glicerol, y glicerina. Estos cosolventes pueden estar presentes en una cantidad de aproximadamente 1 % a aproximadamente 45 % en peso de la emulsión. En ejemplos específicos, el cosolvente está presente de aproximadamente 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31 , 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 , 42, 43, 44, y 45 % en peso de la composición donde cualquiera de los valores puede formar un punto extremo inferior o superior de un intervalo, por ejemplo, de aproximadamente 5% a aproximadamente 20%, de aproximadamente 9% a aproximadamente 18%, de aproximadamente 13% a aproximadamente 17%, de aproximadamente 13% a aproximadamente 17%, de aproximadamente 14% a aproximadamente 16%, de aproximadamente 20% a aproximadamente 45%, o aproximadamente 15% en peso de la emulsión.

En las emulsiones descritas, la cantidad de agua es de aproximadamente 13 a aproximadamente 25% en peso de la emulsión, por ejemplo, aproximadamente 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 , 22, 23, 24, y 25% en peso de la emulsión, donde cualquiera de los valores establecidos puede formar un punto extremo inferior o superior de un intervalo, por ejemplo, de aproximadamente 14% a aproximadamente 22 %, de aproximadamente 17% a aproximadamente 20%, de aproximadamente 17% a aproximadamente 25%, de aproximadamente 20% a aproximadamente 23%, de aproximadamente 21 % a aproximadamente 24%, y de aproximadamente 22% a aproximadamente 25% en peso de la emulsión.

Generalmente, la cantidad total del solvente (tanto agua y cualquier cosolvente) es menor que aproximadamente 50% en peso de la emulsión total. En varios ejemplos, la cantidad total de solvente en las emulsiones descritas es menor que aproximadamente 45%. Más aún, la cantidad total del solvente en la emulsión es aproximadamente 30, 31 , 32, 33, 34, 35, 36, 37,38, 39, 40, 41 , 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, o 50% en peso de la emulsión, donde cualquiera de los valores establecidos puede formar un punto extremo inferior o superior de un intervalo, por ejemplo, de aproximadamente 30% a aproximadamente 50%, de aproximadamente 32% a aproximadamente 45%, de aproximadamente 34% a aproximadamente 42%, de aproximadamente 36% a aproximadamente 40%, o de aproximadamente 37 a aproximadamente 38% en peso de la emulsión.

En ciertos ejemplos la emulsión está prácticamente libre de alcohol bencílico, por ejemplo, menor que aproximadamente 5, 4, 3, 2, o 1 % de alcohol bencílico, o aproximadamente 0 % alcohol bencílico en peso de la emulsión.

Mono y disacáridos La fase continua de las emulsiones descritas además comprende uno o más mono-y/o di-disacáridos. Los ejemplos de monosacáridos incluyen glucosa, fructosa, galactosa, arabinosa, ribosa, ribulosa, xilosa, mañosa, y xilulosa. Los ejemplos de disacáridos incluyen sacarosa, lactosa, celobiosa, sorbosa, trehalosa, maltosa, y rafinosa y similares. Varios derivados de sacáridos tales como xilitol, sorbitol, e isomalta además son adecuados para su uso en las emulsiones descritas.

Generalmente, la cantidad total del mono- y o disacárido es mayor que aproximadamente 40% en peso de la emulsión total. En varios ejemplos, la cantidad total de estos azúcares en las emulsiones descritas es de aproximadamente 30% a aproximadamente 66% en peso de la emulsión. Más aún, la cantidad total del solvente en la emulsión puede ser aproximadamente 30, 31 , 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 , 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51 , 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 , 62, 63, 64, 65, y 66% en peso de la emulsión, donde cualquiera de los valores establecidos puede formar un punto extremo inferior o superior de un intervalo, por ejemplo, de aproximadamente 40 a aproximadamente 66%, de aproximadamente 45% a aproximadamente 50%, de aproximadamente 46% a aproximadamente 48%, de aproximadamente 48% a aproximadamente 50%, de aproximadamente 47% a aproximadamente 49%, o de aproximadamente 45 a aproximadamente 47% en peso de la emulsión.

Las composiciones descritas además están prácticamente libres de polisacáridos, tales como gomas, por ejemplo, menor que aproximadamente 5, 4, 3, 2, o 1 % del polisacárido, o aproximadamente 0 % del polisacárido en peso de la emulsión. Las emulsiones descritas pueden, en algunos casos, estar prácticamente libres de fructosa de jarabe de maíz.

Antioxidantes Las emulsiones descritas en la presente pueden contener además un antioxidante. El antioxidante puede estar presente en la fase continua y/o la fase dispersa. Los ejemplos adecuados de antioxidantes incluyen, pero sin limitarse a, ün compuesto fenólico, un extracto de planta, o un compuesto que contiene azufre. En ciertos ejemplos descritos en la presente el antioxidante puede ser ácido ascórbico o una sal del mismo, por ejemplo, ascorbato de sodio. En otros ejemplos, el antioxidante puede ser vitamina E, CoQ10, tocoferoles, derivados solubles en lípidos de antioxidantes más polares tales como ásteres de ácido graso de ascorbilo (por ejemplo, palmitato de ascorbilo), extractos de plantas (por ejemplo, aceites de romero, salvia orégano, extracto de té verde), extractos de algas, y antioxidantes sintéticos (por ejemplo, BHT, TBHQ, etoxiquina, galatos de alquilo, hidroquinonas, tocotrienoles).

Método para preparar las emulsiones Los métodos para preparar las emulsiones descritas se describen además en la presente. Generalmente, las emulsiones descritas se pueden preparar mediante la emulsificación de una mezcla del emulsionante, la fase dispersa (por ejemplo, el aceite), el. solvente, y el mono- y/o disacárido. Como un ejemplo más específico, el emulsionante se funde en primer tugar si es necesario y después se mezcla con' los componentes de la fase dispersa y cosolvente(s). La relación del emulsionante a la fase dispersa es aproximadamente 1 .5 o menos. La concentración del emulsionante en esta primera mezcla está por encima de la concentración micelar crítica de los emulsionantes (CMC), de este modo se forma la fase dispersada que contienen las micelas del emulsionante a nano escala. El cosolvente ayuda a dispersar las micelas de emulsionante y evitar la gelificación de algunos de los emulsionantes cuando que están en contacto con. agua.

La mezcla después se puede combinar con una solución de mono- y/o disacárido en agua. Si bien no se desea estar limitado por la teoría, esta solución de azúcar tiene dos funciones: primera, la solución de azúcar aumenta la viscosidad y facilita la reducción del tamaño de partícula por homogeneización en la etapa siguiente; segundo, el azúcar actúa como un estabilizador de la emulsión y evita la formación de cristales líquidos que provocan la agregación de las gotitas y la turbidez en la emulsión.

La mezcla final después se puede homogenizar. La homogenización se usa para reducir el tamaño de las gotitas de la emulsión. Debido a que pequeñas cantidades de emulsionante se usan en la primera etapa y la concentración de emulsionante se diluye en la segunda etapa, la emulsión que sale de la segunda etapa no es una microemulsión y el tamaño de las gotitas está por encima de 100 nm. Para reducir el tamaño de las gotitas de emulsión, por ejemplo, a menor que 100 nm, y para tener una emulsión transparente se puede usar una homogenización a alta presión. El número de pases que pueden ser necesarios depende de la presión aplicada. Para 5000 psi, cinco a diez pasos normalmente será suficiente. Las presiones típicas que se pueden usar son de aproximadamente 1500 a aproximadamente 6000 psi. Las tecnologías basadas en el procesador microfluidizador además se pueden usar para preparar las emulsiones.

La etapa de emulsificación se puede realizar a una temperatura adecuada dado el punto de fusión del aceite y para reducir las posibilidades de oxidación. Por ejemplo, la emulsificación puede ser de aproximadamente -4 a aproximadamente 80°C, de aproximadamente 0 a aproximadamente 20 °C, de aproximadamente 30°C a aproximadamente 60°C, o de aproximadamente 40°C a aproximadamente 50°C.

Los antioxidantes como se señaló en la presente se pueden añadir ya sea en la fase continua o dispersa para proteger los aceites. Estos se pueden añadir en cualquier etapa durante el proceso de formación de la emulsión. En qué etapa se añade el antioxidante, y en qué cantidad, dependerá del antioxidante particular.

Métodos de uso Las emulsiones descritas se pueden usar para preparar composiciones comestibles con el fin de suministrar los aceites a un sujeto. En un ejemplo particular, las emulsiones descritas se pueden añadir a una bebida de modo que la bebida puede ser una fuente de PUFA y derivados de los mismos. En otro ejemplo particular, descritos en la presente están los métodos de complementar los PUFA y derivados de los mismos en un sujeto mediante la administración de una cantidad eficaz de una emulsión descrita en la presente. En otro ejemplo, descrito en la presente están los métodos de tratamiento de varias afecciones humanas que incluyen, pero sin limitarse a, reducción de los niveles de colesterol, los niveles de triacilgliceroles, o combinaciones de los mismos en un sujeto mediante la administración de una cantidad eficaz de una emulsión descrita en la presente.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos se exponen más abajo para ilustrar los métodos y los resultados de acuerdo con la materia descrita. Estos ejemplos no están destinados a que sean inclusivos de todos los aspectos de la materia descrita en la presente, sino más bien para ilustrar métodos y resultados representativos. Estos ejemplos no están destinados a excluir los equivalentes y las variaciones de la presente invención que son evidentes para una persona con experiencia en la materia.

Se han hecho esfuerzos para asegurar la precisión con respecto a los números (por ejemplo, cantidades, temperatura, pH, etc.), pero algunos errores y desviaciones deberían tenerse en cuenta. A menos que se indique de cualquier otra forma, las partes son partes en peso, la temperatura es en °C o es a temperatura ambiente, y la presión es la atmosférica o próxima. Hay numerosas variaciones y combinaciones de las condiciones, por ejemplo, concentraciones de componentes, temperaturas, presiones y otros intervalos y condiciones de reacción que se pueden usar para optimizar la pureza del producto y el rendimiento obtenido a partir del proceso descrito. Sólo la experimentación razonable y de rutina se requerirá para optimizar tales condiciones del proceso.

Ciertos materiales, compuestos, composiciones, y los componentes descritos en la presente se pueden obtener comercialmente o se sintetizan fácilmente por medio del uso de técnicas generalmente conocidas por aquellos con experiencia en la materia. Por ejemplo, los materiales de partida y reactivos usados en preparar las composiciones descritas se encuentran disponibles de suministradores comerciales tales como Ocean Nutrition Canadá Limited (Dartmouth, Canadá), Aldrich Chemical Co., (Milwaukee, Wis.), Acros Organics (Morris Plains, N.J.), Fisher Scientific (Pittsburgh, Pa.), o Sigma (St. Louis, Mo.) o se preparan mediante métodos conocidos por aquellos con experiencia en la materia siguiendo los procedimientos que se exponen en las referencias tales como Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, Volúmenes 1 -17 (John Wiley and Sons, 1991 ); Rodd's Chemistry of Carbón Compounds, Volúmenes 1 -5 y Supplemental (Elsevier Science Publishers, 1989); Organic Reactions, Volúmenes 1 -40 (John Wiley and Sons, 1991 ); March's Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons, 4th Edition); y Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989).

Ejemplos 1 -7: Micro- y nanoemulsiones transparentes basadas en vitamina E TPGS Se prepararon varios ejemplos por medio del uso de los ingredientes en las cantidades indicadas en la Tabla 1.

La vitamina E TPGS (Zhejiang Medicine Company, Xinchang, Zhejiang, China) se fundió por medio del uso de un baño de agua a 60°C. El TPGS fundido, propilenglicol, glicerol (Nealander International Inc., Mississauga, Canadá) y aceite de pescado (Ocean Nutrition Canadá Limited, Dartmouth, Canadá) después se mezclaron juntos. Ciertos ejemplos (como se indica en la Tabla 2) se añadieron lentamente a una solución acuosa de azúcar de 66.7%. La mezcla resultante se añadió después a agua DI con mezclado hasta que se formó una emulsión transparente. La homogenización a 5000 psi después se realizó por 10 pases. El tamaño de la gotita de las emulsiones fue aproximadamente 72 nm como se determinó en el Partióle Analyzer Beckman Coulter LS230. Las emulsiones permanecieron transparentes después de la dilución en agua en cualquier relación. El almacenamiento se realizó a 4°C.

La transparencia de la mayoría de las muestras de emulsión se probó mediante la absorbancia de luz de una solución 0.94% en agua DI (0.94 g de emulsión / 100 g de agua para dar 50 mg de EPA+DHA por ración de 250 g) a 400 nm - 0.068 (agua DI como una referencia). Tabla 1 . La fórmula de las emulsiones hechas con el emulsionante de vitamina E TPGS, diferentes aceites, y diferente relación de emulsionante/aceite.

Los Ejemplos 1 y 2 son ejemplos comparativos en que la relación del emulsionante a la fase dispersada (en estos casos aceite de pescado omega-3) es 2.1 y 2.3. No se usó azúcar en los Ejemplos 1 y 2 y la cantidad del cosolvente fue relativamente baja.

Ejemplos 8-12: Micro- y nanoemulsiones que usan varios emulsionantes El método descrito por los Ejemplos 1 -7 anteriores se siguió por medio del uso de varios otros emulsionantes. Los Ejemplos 8-12 usaron emulsionantes que tenían valores de HLB similares o diferentes. Se prepararon varios ejemplos usando los ingredientes en las cantidades indicadas en la Tabla 2.

El aceite se combinó con polisorbato, propilenglicol, lecitina de soya (Solae Company, St. Louis, Missouri, Estados Unidos), dodecil sulfato de sodio, y o monoglicérido (Abitech, Northampton, Reino Unido) como se indicó en la Tabla 2 para formar una mezcla homogénea. La mezcla después se añadió lentamente en una solución de azúcar 66.7% bajo mezclado. Se añadió glicerol como se indicó en la Tabla 2. La mezcla se agitó durante 5 minutos y después se homogenizó a 5000 psi por medio del uso de un microfluidizador durante 10 pases. El almacenamiento se realizó a 4°C.

La transparencia de la mayoría de las muestras de emulsión se probó mediante la absorbancia de luz de una solución 1.8% en agua DI (1.8 g de emulsión/100 g de agua para dar 50 mg of EPA+DHA por ración de 250 g) a 400 nm - 0.052 (agua DI como una referencia).

Tabla 2. Fórmula de las emulsiones con diferentes valores de HLB hechas con diferentes emulsionantes y diferentes aceites.

Estos ejemplos indican que los métodos descritos son relativamente independientes de un valor de HLB del emulsionante. Así, una amplia gama de emulsionantes con diferentes valores de HLB se pueden usar.

Evaluaciones organolépticas de emulsiones transparentes de aceite omega-3 en agua en las bebidas La emulsión en el Ejemplo comparativo 2 se probó en varias bebidas. Se pasteurizaron todas las bebidas. La emulsión se añadió antes de la pasteurización a un nivel de dosificación de 32 mg de EPA+DHA por ración de 500 gramos. La "aceptabilidad de sabor" se escaló de 1 a 7, 1 era el más aceptable y 7 era el más inaceptable. De cuatro a cinco panelistas participaron en la evaluación sensorial. Cualquier muestra con una puntuación de "aceptabilidad de sabor" mayor que 4 se rechazó. Los resultados se muestran en la Tabla 3.

Tabla 3. Resultados organolépticos de las bebidas enriquecidas con la emulsión de aceite de pescado-en-agua.

La emulsión transparente de aceite omega-3 en agua basada en vitamina E TPGS se • puede usar para enriquecer GATORADE™ de naranja a 32 mg de EPA+DHA por ración de 500 gramos. El sensorial del GATORADE™ enriquecido es aceptable después del almacenamiento de hasta 56 días. El GATORADE™ de limón-lima fue aceptable hasta 56 días.

Para evaluar dos fórmulas de emulsiones transparentes: 1 :1 y 2:1 a varios niveles de PUFA en el GATORADE™ de naranja que incluye 20 mg, 32 mg, y 50 mg por ración de 250 g. La fórmula de la muestra de emulsión transparente 1 :1 es la misma que la fórmula que se muestra en el Ejemplo 3, y la fórmula de la muestra de emulsión transparente 2:1 es la misma que la fórmula que se muestra en el Ejemplo comparativo 2. La aceptabilidad de sabor se determinó como se señaló anteriormente con una puntuación más abajo de 4 es aceptable. El sabor a pescado se basó en una escala de 0 a 6, con 0 que es completamente sin sabor a pescado y 6 que es totalmente con sabor a pescado. Una puntuación de sabor a pescado más abajo de 2.0 es aceptable. Los resultados se muestran en la Tabla 4.

Tabla 4. Resultados organolépticos del GATORADE™ de naranja enriquecido con emulsión de aceite de pescado-en-agua La emulsión transparente de aceite PUFA en agua basada en vitamina E TPGS se puede usar para enriquecer el GATORADE™ de naranja hasta 50 mg de EPA+DHA por ración de 250 gramos. El sensorial del GATORADE™ enriquecido es aceptable al inicio de la prueba.

La aceptabilidad organoléptica de GATORADE™ de limón-lima enriquecido por emulsiones de aceite PUFA en agua se evaluó mediante la preparación de muestras a un nivel de dosificación de 50 mg de EPA+DHA por ración de 250 gramos y con diferentes antioxidantes. La fórmula base de la emulsión transparente, antes de añadir diferentes antioxidantes, usó la misma relación emulsionante: aceite que la del Ejemplo 3: específicamente, vitamina E TPGS (4.38%); aceite de pescado Omega-3 30TG (4.38%); propilenglicol (4.38%); azúcar (55.8%); agua (27.9%); y glicerol (3.2%) (total 100%).

Diferentes antioxidantes que incluyen ácido cítrico, ácido ascórbico, extracto de té verde de Taiyo International Inc. (Minneapolis, MN) y 20M de extracto de té verde de Danisco Canadá Inc. (Scarborough, Canadá) se añadieron por separado para obtener la concentración de antioxidantes deseada especificada en la Tabla 5.

Se usó un estudio acelerado de vida en estante para estimar la vida en estante del GATORADE™ enriquecido. Todas las muestras se almacenaron a 35°C en la oscuridad y se probaron cada dos semanas. Los resultados se muestran en la Tabla 5.

Es posible usar la emulsión de aceite de pescado en agua basada en vitamina E TPGS para enriquecer GATORADE™ de limón-lima con PUFA. La bebida fortificada puede tener una vida en estante de 6-8 meses.

Tabla 5. Evaluación organoléptica del GATORADE de limón-lima con 50 mg de EPA+DHA a través de la emulsión de aceite de pescado en agua y con diferentes antioxidantes. a AP— palmato de ascorbilo HFCS— Jarabe de maíz de alta fructuosa Se señala que algunos aceites de pescado ya tienen añadido antioxidantes. Por ejemplo, los aceites de pescado pueden contener Duralox, que es una mezcla de ácido cítrico con tocoferol natural y extracto de romero mezclados. Así, los antioxidantes enumerados en la Tabla 6 son además de los ya presentes en los aceites.

Ejemplos comparativos 13-23: Microemulsión transparente basada en polisorbato Se prepararon varios ejemplos usando los ingredientes en las cantidades indicadas en la Tabla 6. El azúcar (Redpath Sugar Ltd., Toronto, Canadá) se disolvió en agua DI para hacer una solución de azúcar 50%. El polisorbato 80 (Sigma-Aldrich, Co., St. Louis, MO, Estados Unidos), propilenglicol (Fisher Scientific Inc. Ottawa, Canadá), polisorbato 85 (Sigma-Aldrich, Co., St. Louis, MO, Estados Unidos), y aceite omega-3 (Ocean Nutrition Canadá Limited, Dartmouth, Canadá) después se añadieron a la solución de azúcar. La mezcla se emulsificó después hasta que se hizo transparente por inspección visual. El almacenamiento se realizó a 4°C.

Todas las emulsiones permanecieron transparentes durante más de un año mediante comprobación visual. Ellas además permanecieron transparentes cuando se diluyeron en agua en cualquier relación. La transparencia se comprobó visualmente contra agua. Algunas se revisaron por métodos ' espectroscópicos como se describió anteriormente. Por ejemplo, la dilución de la emulsión del Ejemplo 16 en la Tabla 2 a la concentración de 0.9%, que da 50 mg de EPA+DHA por ración de 250 g, tuvo absorbencia de la luz de 0.024A a 400 nm. Algunos cristales de azúcar cristalizaron de la emulsión, pero esto no afectó la transparencia de la emulsión y la dilución de la emulsión.

Tabla 6. Fórmula de las emulsiones hechas con emulsionantes basados en polisorbato y diferentes PUFA.

Estos ejemplos ponen de manifiesto que las emulsiones transparentes con PUFA se pueden preparar con emulsionantes basados en polisorbato, pero se usa gran exceso de estos emulsionantes particulares al aceite.

Ejemplo comparativo 24: El procedimiento expuesto en el Ejemplo 1 de la patente de Estados Unidos 5,753,241 se siguió a excepción de que los emulsionantes descritos en ella se sustituyeron con la vitamina E TPGS (Zhejiang Medicine Company, Xinchang, Zhejiang, China), y el etanol se sustituyó por propilenglicol (Fisher Scientific Inc. Ottawa, Canadá). Los ingredientes y las cantidades se muestran en la Tabla 7. Adicionalmente la emulsión se homogenizó a 5000 psi por medio del uso del microfluidizador (Microfluidics, Newton, MA, Estados Unidos) durante 15 pases para hacerlo comparable al del Ejemplo 6 en la Tabla 1 anterior donde la relación emulsionante/aceite = 0.8.

Tabla 7.

La absorbancia de luz de la dilución (0.94 g de emulsión / 100 g de agua para dar 50 mg de EPA+DHA por ración de 250 g de agua a 400 nm es 0.419, que no es transparente o semitransparente. La muestra correspondiente en la Tabla 1 (es decir, Ejemplo 6) tiene una absorbancia de luz de 0.098. Así, la presencia de azúcar hizo una gran diferencia en la transparencia.

Ejemplo comparativo 25: El procedimiento expuesto en el Ejemplo 1 de la patente de Estados Unidos 5,798,333 se siguió a excepción de que la ciclosporina se sustituyó por aceite de pescado 30TG. Los ingredientes y las cantidades se muestran en la Tabla 8.

Tabla 8.

La absorbancia de luz de la dilución (0.23 g de emulsión / 100 g de agua para dar 50 mg EPA+DHA por ración de 250 g de agua) a 400 nm fue 1.237, que no es transparente o semitransparente. La muestra correspondiente en la Tabla 1 (es decir, Ejemplo 6) tiene una absorbancia de luz de 0.098.

Ejemplo comparativo 26: El procedimiento expuesto en el documento WO 2009/1 17 52, página 155 a 157, se siguió por medio del uso de la fórmula en la Tabla 2A (ix), pero una cantidad reducida de vitamina E TPGS se usó para hacerla comparable al Ejemplo 6 en la Tabla 1 en la presente, que tiene una relación emulsionante/aceite = 0.8. Los ingredientes y las cantidades se muestran en la Tabla 9. Además, la muestra se homogeneizó a7400 rpm por medio del uso del Polytron PT 6100 durante 10 min en lugar de 850 rpm a 1200 rpm por medio del uso de un hom'ogeneizador reversible CJ-4E (Arde Barinco, Inc.) Tabla 9.

La absorbancia de luz de la dilución (0.8 g de emulsión / 100 g de agua para dar 50 mg de EPA+DHA por ración de 250 g de agua a 400 nm es 2.162, que no es transparente o semitransparente. La muestra correspondiente en la Tabla 1 , es decir, el Ejemplo 6, tiene una absorbancia de luz de 0.098.

Será evidente para aquellos con experiencia en la materia que se pueden hacer varias modificaciones y variaciones en la presente invención sin salirse del espíritu y alcance de la invención. Otras modalidades de la invención serán evidentes para aquellos con experiencia en la materia a partir de la consideración de la descripción y la práctica de la invención descrita en la presente. Está destinado a que la descripción y los ejemplos se consideren solo ilustrativos, con un alcance y espíritu verdadero de la invención que está indicado por las siguientes reivindicaciones.

Claims (49)

REIVINDICACIONES

1 . Una emulsión, que comprende: a. de aproximadamente 4 a aproximadamente 15 % en peso de un emulsionante; b. de aproximadamente 5 a aproximadamente 10 % p de una fase dispersa, en donde la fase dispersa comprende uno o más ácidos grasos poliinsaturados o derivados de los mismos; c. de aproximadamente 20 a aproximadamente 25 % en peso de agua; d. de aproximadamente 5 a aproximadamente 18 % en peso de un cosolvente; y e. de aproximadamente 40 a aproximadamente 55 % p de un mono-sacárido, un disacárido o ambos, en donde la relación del emulsionante a la fase dispersa es aproximadamente 1.5 o menos, y en donde la cantidad combinada de agua y cosolvente es 50 % p o menos.

2. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde el emulsionante es de aproximadamente 5.4 a aproximadamente 8.5 % p.

3. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la fase dispersa es de aproximadamente 8 a aproximadamente 9 % p

4. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde el agua es de aproximadamente 22 a aproximadamente 24 % p.

5. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde el cosolvente es de aproximadamente 14 a aproximadamente 16 % p.

6. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde el mono-sacárido y/o disacárido es de aproximadamente 44 a aproximadamente 49 % p.

7. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la relación del emulsionante a lá fase dispersa es de aproximadamente 1 a aproximadamente 0.5.

8. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la relación del emulsionante a la fase dispersa es de aproximadamente 1 a aproximadamente 0.7.

9. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la cantidad combinada de agua y cosolvente es de aproximadamente 30 a aproximadamente 50 % p.

10. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la cantidad total de agua y cosolvente es de aproximadamente 36 a aproximadamente 40 % p.

11. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde el emulsionante comprende polietilenglicol succinato de tocoferol (TPGS) o un análogo del mismo.

12. La emulsión de la reivindicación 1 ,. en donde el emulsionante comprende un polisorbato.

13. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la fase dispersa comprende aceite marino.

14. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la fase dispersa comprende un aceite microbiano.

15. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la fase dispersa comprende un aceite derivado de una planta.

16. La emulsión de las reivindicaciones 14 o 15, en donde el microbio o la planta se ha modificado genéticamente.

17. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la fase dispersa comprende ácido eicosapentaenoico (EPA), ácido docosahexaenoico (DHA), ácido eicosatetraenoico (AA), ácido octadecatrienoico (GLA), ácido octadecadienoico (LA) y/o ácido docosapéntaenoico (DPA), ésteres de alquilo de los mismos, ésteres de glicéridos de los mismos, sales de los mismos, o cualquier combinación de los mismos.

18. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde el cosolvente comprende propilenglicol, glicerol, o una mezcla de los mismos.

19. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde el disacárido está presente y comprende sacarosa.

20. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la emulsión está prácticamente libre de una goma.

21. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la emulsión está prácticamente libre de alcohol bencílico.

22. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la emulsión está prácticamente libre de fosfatidilcolina.

23. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la emulsión tiene una absorbancia a 400 nm menor que aproximadamente 0.3A.

24. La emulsión de la reivindicación 1 , en donde la emulsión tiene una absorbancia a 400 nm menor que aproximadamente 0.1 A. .

25. La emulsión de la reivindicación 1 , en. donde la emulsión tiene el tamaño de gotita de aproximadamente 100 nm o menos.

26. Una bebida que comprende cualquiera de las emulsiones de las reivindicaciones 1-25.

27. Un método para producir una emulsión que comprende: a. emulsionar una mezcla, que comprende: i. de aproximadamente 4 a aproximadamente 15 % p de un emulsionante; ii. de aproximadamente 5 a aproximadamente 10 % p de una fase dispersa; y iii. de aproximadamente 5 a aproximadamente 18 % p de un cosolvente; y en donde la relación del emulsionante a la fase dispersa es aproximadamente 1.5 o menos; b. combinar la emulsión de la etapa a con una solución que comprende: i. de aproximadamente 20 a aproximadamente 25 % p de agua; ii. de aproximadamente 40 a aproximadamente 55 % p de un mono-sacárido, un disacárido o ambos; en donde la cantidad combinada de agua y cosolvente es 50 % p o menos; y c. homogeneizar la mezcla de la etapa b mediante la homogenización de alta presión.

28. El método de la reivindicación 27, en donde la etapa de homogenización se lleva a cabo de 1500 a aproximadamente 6000 psi.

29. El método de la reivindicación 27, en donde el emulsionante es de aproximadamente 5.4 a aproximadamente 8.5 % p.

30. El método de la reivindicación 27, en donde la fase dispersa es de aproximadamente 8 a aproximadamente 9 % p.

31. El método de la reivindicación 27, en donde el agua es de aproximadamente 22 a aproximadamente 24 %p.

32. El método de la reivindicación 27, en donde el cosolvente es de aproximadamente 14 a aproximadamente 16 % p.

33. El método de la reivindicación 27, en donde el mono-sacárido y/o disacárido es de aproximadamente 44 a aproximadamente 49 % p.

34. El método de la reivindicación 27, en donde la relación del emulsionante a la fase dispersa es de aproximadamente 1 a aproximadamente 0.5.

35. El método de la reivindicación 27, en donde la relación del emulsionante a la fase dispersa es de aproximadamente 1 a aproximadamente 0.7.

36. El método de la reivindicación 27, en donde la cantidad combinada de agua y cosolvente es de aproximadamente 30 a aproximadamente 50 % p.

37. El método de la reivindicación 27, en donde la cantidad total de agua y cosolvente es de aproximadamente 36 a aproximadamente 40 % p.

38. El método de la reivindicación 27, en donde el emulsionante comprende polietilenglicol succinato de tocoferol (TPGS) o un análogo del mismo.

39. El método de la reivindicación 27, en donde el emulsionante comprende polisorbato.

40. El método de la reivindicación 27, en donde la fase dispersa comprende un aceite marino, aceite microbiano, o aceite de algas.

41. El método de la reivindicación 27, en donde la fase dispersa comprende ácido eicosapentaenoico (EPA), ácido docosahexaenoico (DHA), ácido eicosatetraenoico (AA), ácido octadecatrienoico (GLA), ácido octadecadienoico (LA) y/o ácido docosapentaenoico (DPA), ésteres de alquilo de los mismos, ésteres de glicéridos de los mismos, sales de los mismos, o cualquier combinación de los mismos.

42. El método de la reivindicación 27, en donde el cosolvente comprende propilenglicol, glicerol, o una mezcla de los mismos.

43. El método de la reivindicación 27, en donde el disacárido está presente y comprende sacarosa.

44. El método de la reivindicación 27, en donde la emulsión está prácticamente libre de una goma.

45. El método de la reivindicación 27, en donde la emulsión está prácticamente libre de alcohol bencílico.

46. El método de la reivindicación 27, en donde la emulsión está prácticamente libre de fosfatidilcolina.

47. El método de la reivindicación 27, en donde la emulsión tiene una absorbancia a 400 nm menor que aproximadamente 0.3A.

48. El método de la reivindicación 27, en donde la emulsión tiene una absorbancia a 400 nm menor que aproximadamente 0.1 A.

49. El método de la reivindicación 27, en donde la emulsión tiene el tamaño de la gotita de aproximadamente 100 nm o menos.