MX2013001533A - Forma cristalina de compuesto pirimido [6, 1-a] isoquinolin-4-ona. - Google Patents

Abstract

La presente invención está dirigida hacia un polimorfo de N-{2-[(2E)-2-(mesitilimino)-9, 10-dimetoxi-4-oxo-6 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a]-isoquinolin-3(4H)-il] etilo}urea, en la forma de un sólido cristalino que consiste de más de 99% por peso de N-{2-[(2E)-2-(mesitilimino)-9,10-dimetoxi-4-oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a]-isoquinolin-3(4H)-il]etilo}urea, por lo menos 95 en la forma polimórfica de un polimorfo (1) termodinámicamente estable de N-{2-[(2E)-2-(mesitilimino) -9,10-dimetoxi-4-oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a]-isoquinolin-3(4H)-il] etilo}urea, en donde el polimorfo es determinado por el análisis estructural de Rayos X del monocristal y patrón de difracción de polvo de rayos X.

Description

FORMA CRISTALINA DE COMPUESTO PIRIMIDIO [6,1-A] ISOQUINOLIN- 4-ONA Antecedentes de la invención El comportamiento polimórfico de fármacos puede ser de importancia crucial en farmacia y farmacología . Los polimorfos son, por definición, cristales de la misma molécula que tienen diferentes propiedades físicas como resultado del orden de las moléculas en la red cristalina. Las diferencias en las propiedades físicas exhibidas por los polimorfos afectan parámetros farmacéuticos tales como estabilidad, compresibilidad y densidad de almacenamiento (importantes en la formulación y la fabricación del producto) , e índices de disolución (un factor importante en la determinación de biodisponibilidad) . Las diferencias en estabilidad pueden resultar de los cambios en reactividad química (por ejemplo oxidación diferencial', de manera que una forma de dosificación se decolora más rápidamente cuando está comprendida de . un polimorfo que cuando está comprendida de otro polimorfo) o cambios mecánicos (por ejemplo las tabletas se desintegran en almacenamiento mientras que un polimorfo favorecido cinéticamente convierte al polimorfo más estable termodinámicamente) o a ambos (por ejemplo las tabletas de un polimorfo son más susceptibles a romperse en humedad alta) . Como un resultado de diferencias de solubilidad/disolución, Ref. 238794 en el caso extremo, algunas transiciones polimórficas pueden resultar en la carencia de potencia o, en el otro extremo, toxicidad. Además, las propiedades físicas del cristal pueden ser importantes en el proceso: por ejemplo, un polimorfo puede ser más probable de formar solvatos o puede ser difícil de filtrarse y lavarse libre de impurezas (en este caso la forma de la partícula y la distribución del tamaño puede ser diferente entre un polimorfo en relación al otro) .

Cada compuesto farmacéutico tiene una concentración de sangre terapéutica óptima y una concentración letal. La biodisponibilidad del compuesto determina . la fuerza de la dosificación en la formulación del fármaco necesaria para obtener el nivel de sangre ideal. Si el fármaco puede cristalizarse como dos o más polimorfos que difieren en biodisponibilidad, la dosis óptima dependerá del polimorfo presente en la' formulación. Algunos fármacos muestran un margen estrecho entre las concentraciones terapéuticas y letales. Cloramfenicol-3 -palmitato (CAPP) , por ejemplo, es un antibiótico de amplio espectro conocido por cristalizarse en por lo menos tres formas polimórficas y una forma amorfa. La forma más estable, A, es comercializada. La diferencia en bioactividad entre este polimorfo y otra forma B, es un factor de ocho- que crea la posibilidad de sobredosis fatales del compuesto si es administrada involuntariamente como forma B debido a alteraciones durante el proceso y/o almacenamiento. Por lo tanto, las agencias reguladoras, tales como la Administración de Alimentos y Fármacos de los E.E.U.U., han comenzado a poner controles rigurosos en el contenido polimórfico del componente activo en formas de dosificación sólidas. En general para los fármacos que existen en formas 'polimórficas , si cualquiera además del polimorfo puro, termodinámicamente preferido va a ser comercializado, la agencia reguladora requerirá la supervisión lote-por-lote. Así, llega a ser importante por razones médicas y comerciales para producir y comercializar el fármaco puro en su polimorfo lo más termodinámicamente estable, substancialmente libre de otros polimorfos cinéticamente favorecidos.

Las Patentes Estadounidenses Nos. 6,794,391, 7,378,424, y 7,105,663, que son cada una incorporada aquí por referencia, describe el compuesto RPL-554 (N- {2- [ (2E) -2-(mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-34H) -il] etil}urea) .

Sería beneficioso proporcionar una composición de un polimorfo estable de RPL-554, que tiene las ventajas sobre polimorfos o formas amorfas menos estables, incluyendo estabilidad, compresibilidad, densidad, índices de disolución, potencia incrementada o carencia de toxicidad.

Sumario de la invención En un aspecto, la invención proporciona una forma polimórfica de N- {2- [ (2E) -2 (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo- 6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] - isoquinolin- 3 (4H) -il]etil]urea (RPL-554) . Como resultado de sus propiedades de estabilidad únicas, este polimorfo proporciona una N-{2- [ (2E) -2- (mesitilimino) - 9 , 10 -dimetoxi-4 -oxo-6 , 7 -dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilojurea altamente pura en su forma polimórfica más termodinámicamente posible estable .

En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilojurea, en la forma de un sólido cristalino que consiste de más de 99% por peso de N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9 , 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilojurea, por lo menos 95% en la forma polimórfica de un polimorfo (I) termodinámicamente estable de N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9 , 10 -dimetoxi-4 -oxo-6 , 7 -dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilojurea, el polimorfo (I) tiene los siguientes parámetros estructurales obtenidos por análisis de monocristal: Longitud de onda 0.71073 Á Sistema cristalino triclínico grupo espacial P-l Dimensiones de la célula unitaria a=8.1246(4)Á = 91.583(4)°. b = 11.4573 (5)Á ß= 90.299(4) °. c =13.2398(6)Á ?=99.628 (4) ° .

Volumen 1214.56 (10)Á3 Z 2.

En otro aspecto, la invención proporciona un polimorfo cristalino (I) de la N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] - isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea, que tiene un patrón de difracción de Rayos X en polvo que comprende picos característicos, en términos de 2T, a aproximadamente 10.1° y aproximadamente 12.9° .

En ciertas modalidades, el patrón de difracción de Rayos X en polvo además comprende picos característicos, en términos de 2T, aproximadamente 15.3° y aproximadamente 17.6°.

En otra modalidad, el patrón de difracción de Rayos X en polvo comprende por lo menos 5 picos característicos, en términos de 2T, seleccionado desde aproximadamente 6.4°, aproximadamente 10.1°, aproximadamente 12.6°, aproximadamente 12.9°, aproximadamente 13.6°, aproximadamente 14.2°, aproximadamente 14.7o , aproximadamente 15.3°, aproximadamente 15.4°, aproximadamente 15.8°, aproximadamente 17.0o, aproximadamente 17.6°, aproximadamente 18.9°, aproximadamente 20.9°, aproximadamente 22.4o, aproximadamente 22.8o, y aproximadamente 28.7°.

En ciertas modalidades, el polimorfo tiene un patrón de difracción de Rayos X en polvo substancialmente como se muestra en la Figura 1.

En otras modalidades, el polimorfo tiene una curva de calorimetría de exploración diferencial que muestra un máximo a aproximadamente 248 °C.

En varias modalidades, el polimorfo tiene una curva de calorimetría de exploración diferencial de acuerdo con las indicaciones de la Figura 4.

En otro aspecto, la invención proporciona una composición sólida que comprende el polimorfo como es descrito aquí .

En una modalidad, la invención proporciona una composición en donde por lo menos aproximadamente 50% en peso de la N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9 , 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] - isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea total en la composición está presente como el polimorfo.

En otras modalidades, la invención proporciona una composición en donde por lo menos aproximadamente 70% en peso de N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9 , 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea total en la composición está presente como el polimorfo.

En otras modalidades, la invención proporciona una composición en donde por lo menos aproximadamente 90% en peso de N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilojurea total en la composición est presente como el polimorfo.

En otras modalidades, la invención proporciona una composición en donde por lo menos aproximadamente 97% en peso de N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea total en la composición está presente como el polimorfo.

En otra modalidad, la invención proporciona una composición sólida que comprende el polimorfo como se describió anteriormente y, un portador farmacéuticamente aceptable .

En ciertas modalidades, la composición sólida comprende el polimorfo y uno o más compuestos adicionales.

En una modalidad adicional, el compuesto adicional es un terapéutico conocido.

En ciertas modalidades, el terapéutico se utiliza para tratar asma, asma alérgica, fiebre de heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructora crónica (COPD, por sus siglas en inglés) , síndrome de distrés respiratorio del adulto (ARDS, por sus siglas en inglés) , fibrosis quística, trastornos de la piel, dermatitis atópica, psoriasis, inflamación ocular, isquemia cerebral o enfermedades autoinmunes.

En otras modalidades, la invención proporciona una composición sólida en donde el terapéutico se utiliza para tratar asma o COPD.

En ciertos aspectos, la invención proporciona un proceso para preparar el polimorfo de la invención que comprende: (a) combinar N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-OXO-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea con un solvente para formar una mezcla, y (b) calentar a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50°C por un tiempo y bajo condiciones apropiadas para formar el polimorfo.

En ciertos aspectos, la invención proporciona un proceso para preparar el polimorfo de la invención que comprende: (a) combinar N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9 , 10-dimetoxi-4-0x0-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea con un solvente para formar una mezcla, (b) filtración de la mezcla, (c) calentar a o arriba de una temperatura de aproximadamente 55 °C por un tiempo y bajo condiciones apropiadas para formar el polimorfo; y (d) filtración y secado.

En ciertas modalidades, el solvente es DMSO, etanol, metanol, isopropanol, hexanos, pentano, acetato de etilo, diclorometano, o cloroformo. En una modalidad adicional, el solvente es DMSO o etanol.

En otra modalidad, la mezcla es mantenida a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50 °C por aproximadamente 24 a 96 horas. En una modalidad adicional, la mezcla es mantenida a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50°C por aproximadamente 72 horas. En otras modalidades, la mezcla se mantiene a o arriba de una temperatura de aproximadamente 55°C por aproximadamente 24 a 96 horas. En varias modalidades, la mezcla es mantenida a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50°C por aproximadamente 72 horas .

En otras modalidades, la mezcla se seca in vacuo a entre 25 y 50°C. En una modalidad adicional, la mezcla se seca in vacuo a 40°C.

En otra modalidad, la invención proporciona un polimorfo como se describió anteriormente, preparado por el método que comprende (a) combinar N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi- 4-0x0-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea con un solvente para formar una mezcla, y (b) calentar a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50 °C por un tiempo y bajo condiciones apropiadas para formar el polimorfo.

En otra modalidad, la invención proporciona un polimorfo como se describió anteriormente preparado por el método que comprende (a) combinar N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-???-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] - isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea con un solvente para formar una mezcla, (b) filtración de la mezcla, (c) calentar en o arriba de una temperatura de aproximadamente 55 °C por un tiempo y bajo condiciones apropiadas para formar el polimorfo; y (d) filtración y secado.

En otro aspecto, la invención proporciona un método para tratar asma, asma alérgica, fiebre de heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructora crónica (COPD) , síndrome de distrés respiratorio del adulto (ARDS) , fibrosis quística, trastornos de la piel, dermatitis atópica, psoriasis, inflamación ocular, isquemia cerebral, o enfermedades autoinmunes, en un mamífero en la necesidad del mismo, el método comprende administrar al mamífero la cantidad eficaz de un polimorfo cristalino de N- {2- [ (2E) -2-(mesitilimino) -9 , 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilojurea.

En una modalidad, el mamífero es un ser humano.

La forma amorfa de RPL554 es menos estable puesto que puede transformarse en grados que varían a varias formas polimorfas bajo ciertas condiciones y puede transformarse en almacenamiento. También sería más demandante producir en una escala grande la forma amorfa constantemente dentro de las especificaciones de cGMP requeridas en términos de pureza así como el perfil de impureza. La forma amorfa por lo tanto presenta desafíos en el desarrollo de un polvo sólido seco micronizado uniforme reproducible de RPL554 para ciertas aplicaciones de formulación. Mientras que la forma polimorfa cristalina puede ser más fácilmente manufacturada en una escala de cGMP grande para proporcionar RPL554 sólido como un ingrediente farmacéutico activo (API, por sus siglas en inglés) en un proceso más constante y reproducible. Lo procesos de purificación y aislamiento para el producto de la forma polimorfa cristalina I son más favorables para la producción de cGMP a gran escala. Las ventajas anteriores resultan en proporcionar lotes de producto que están constantemente dentro de las especificaciones de cGMP requeridas. Como se muestra en un aspecto de esta invención, la forma poliforma cristalina I es la forma polimórfica más termodinámicamente estable de RPL554 también se espera que tenga la vida útil más larga en almacenamiento. Esta ventaja debe extender además la vida útil potencial de cualquier producto de fármaco RPL554 comercial que contiene la forma poliforma cristalina estable I como un API. Además la forma poliforma cristalina I es más favorable para el desarrollo de un polvo sólido seco micronizado uniforme reproducible de RPL554 para ciertas aplicaciones de formulación farmacéutica.

El estudio de N-{2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-0x0-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea (RPL554) , presentada en una forma cristalina (designada Forma I) , mostró que el material era muy resistente a cambiar y que la forma I estaba, dentro de los límites del estudio realizado, la forma polimórfica más estable del material conocido (ver experimento) .

Un intervalo de experimentación fue aplicado para descubrir la existencia de polimorfos puros, nuevos del compuesto, éstos son: adición de antisolvente ; solución saturada de trabajo; Maduración de la mezcla; Recristalización formal; Estudios de solvente mezclado; y cristalización del sistema acuoso.

La generación de la fase amorfa fue lograda y esta también fue . utilizada en algunos de los estudios con resultados concluyentes similares, en que la forma I predominó con excepción solamente de algunos experimentos en donde el cambio fue inducido. En los casos en donde el cambio fue inducido en una escala pequeña, se hicieron intentos de escalar las cristalizaciones para caracterizar completamente las formas (puras y mezcladas), para determinar si este cambio era debido a la solvatación o a una entidad no solvatada. En la mayoría de los casos, debido a la naturaleza delicada de las variables de proceso requeridas para repetir tales cristalizaciones y las estabilidades totales de los sistemas, la forma I fue regresada. La excepción principal fue DMSO, en donde una fase de fusión más alta potencial fue observada como una mezcla con la forma I, después de la fusión principal dentro del ciclo de descomposición para el material . También fue notable que DMSO regreso otras dos fases alteradas antes de este escalamiento, cada uno diferente, pero finalmente representativo del que fue más probablemente una forma y/o un solvato menos estables .

Los reportes anteriores sugirieron que el material amorfo podría ser generado por enfriamiento repentino de una fusión. La evaporación rápida de DCM proporcionó un método robusto, mientras que el por enfriamiento repentino de una fusión resultó simplemente en descomposición (amorfo por XRPD, pero < 20% del producto por análisis de HPLC) .

Puesto que no era sabido históricamente si el material derivado del proceso producido interno era amorfo o cristalino, ensayos de solubilidad fueron repetidos para ambos de estos materiales para actuar como una guía, con la fase amorfa demostrando ser más soluble.

Por último, la forma I fue mostrada como la fase termodinámicamente favorecida y además, esa manipulación del material cristalino o amorfo se podría lograr exitosamente con referencia a la presentación física alterada de los materiales aislados por ejemplo polvo contra un aspecto cristalino más grande.

Fue significativo durante la progresión de este material que la presión aplicada resultó en la generación de qué fue presumida que era material amorfo, como es indicado por XRPD y DSC. El perfil térmico para este material mostró una cristalización exotérmica conocida y una endotermia de fusión subsecuente que estaba muy cerca de esa forma I. Esto podría ser verificado repitiendo con más material y aislando el producto después del evento exotérmico y comprobando por XRPD y HPLC.

Breve descripción de las figuras Figura 1: Comparación de datos medidos de RPL554 (arriba) contra los datos de monocristal simulados (abajo) .

Figura 2: Comparación de expansión del intervalo de dos theta (5 - 13° 2T) .

Figura 3: Transmisión del Perfil XRPD para RPL554.

Figura 4: Curva de DSC/TGA para RPL554.

Figura 5: Comparaciones de XRPD de adiciones antisolvente de DMSO/heptano de las (CG1099) Figura 6: Comparación de XRPD de RPL554 y cristales de la solución saturada derivada de DMSO (JN376A4) .

Figura 7: Recubrimiento de DSC de la entrada de RPL554 y de la nueva forma de la solución de DMSO saturada (JN376A4) .

Figura 8. Maduración del suspensión seleccionado de los resultados que muestran la Forma 1 para todas las series.

Figura 9. Perfiles de XRPD para cristalizaciones mezcladas acuosas (experimento PF86) .

Figura 10. Fusión enfriada repentinamente de la forma I de RPL554 a partir de 245°C (realizado como PF84) .

Figura 11. Perfil de DSC para RPL554 enfriado repentinamente (a partir de 245°C, PF84).

Figura 12. Perfil de DSC para la forma I de RPL554 molida.

Figura 13. Comparación de XRPD de la muestra comprimida contra el material original RPL554 (CG1099 F) .

Figura 14. Comparación de DSC de material amorfo vía presión contra DSC de RPL554.

Figura 15. Comparación de DSC de RPL554 y un lote de RPL554 amorfo del DCM (JN376) .

Figura 16. Análisis de XRPD de RPL554 (CG1099 SM) y material amorfo (JN376F) .

Figura 17. Comparación de XRPD para PF89A4 (DMSO) con la forma I de RPL554.

• Figura 18. DSC/TGA combinados para aumentar . la cristalización de DMSO PF90.

Figura 19. Comparación de XRPD de la forma I de RPL554 con la forma de la fase mezclada DMSO (PF90) .

Figura 20. Conformación que resulta para RPL554 analizado por la difracción de Rayos X.

Figura 21. Unión de hidrógeno implicado en el marco de RPL554.

Figura 22. Diseño de empaque para RPL554.

Descripción detallada de la invención El estudio de N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi- 4-0x0-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea (RPL554), presentado en una forma cristalina (designada forma I) , mostró que el material era muy resistente a cambios y que la forma I estaba, dentro de los límites del estudio realizado, la forma polimórfica más estable del material conocido. Un intervalo de experimentación fue aplicado para probar esto, incluyendo dentro de tales estudios el uso de material amorfo. Ambas fases, durante la producción, mostraron que la forma I predominó con la excepción solamente de algunos experimentos eri donde el cambio fue inducido. En los casos en donde el cambio fue inducido en una escala pequeña, se hicieron intentos de aumentar las cristalizaciones para caracterizar completamente las formas (puras y mezcladas) , para determinar si el cambio fue debido a la solvatación o una entidad no solvatada. En la mayoría de los casos, debido a la naturaleza delicada de las variables del proceso requeridas para repetir tales cristalizaciones y las estabilidades totales de los sistemas, la forma I regresó. La excepción principal fue DMSO, en donde una fase de fusión más alta potencial fue observada como una mezcla con la forma I, después de la fusión principal dentro del ciclo de descomposición para el material .

Los reportes anteriores sugirieron que el material amorfo podría ser generado mediante el enfriamiento acelerado de una fusión. La evaporación rápida de DCM proporcionó un método robusto, mientras que el enfriamiento acelerado de una fusión simplemente resultó en descomposición (amorfo por XRPD, pero < 20% del producto por el análisis de HPLC) .

Puesto que históricamente no era conocido si el material derivado de proceso producido interno era amorfo o cristalino, los ensayos de solubilidad fueron repetidos para ambos de estos materiales a actuar como una guía.

Por último, la forma I mostrada como la fase termodinámicamente favorecida y esa manipulación del material cristalino o amorfo se podría lograr exitosamente con referencia a la presentación física alterada de los materiales aislados por ejemplo polvo contra aspecto cristalino más grande. Sobre esta base 3 cristalizaciones de ensayo fueron iniciadas con el objetivo de aumentar material apropiado para el análisis de un monocristal y complementar la indexación y el refinamiento de la celda unitaria realizado con los datos de polvo de la alta calidad obtenidos .

La difracción de polvo de rayos X es la herramienta ideal para obtener una huella digital del producto farmacéutico de interés.' Idealmente, los datos de polvo se relacionarán con una forma cristalina única con un XRPD único. Debido al colapso de la información cristalográfica de 3D a 2D, una XRPD típica verá el traslape de los picos de difracción en valores de dos teta altos. Debido a este hecho, indexar un patrón de polvo (que relaciona los datos con los parámetros de celda unitaria) sigue siendo un paso desafiante, aunque se ha logrado progreso amplio durante los años recientes .

Los datos presentados aquí potencialmente se relacionan con los parámetros de celda unitaria correctos de RPL554. El algoritmo en el software permite la salida de configuraciones de celda unitaria con las figuras de mérito. Cuanto más altos son estos valores, más altas son las oportunidades en la obtención de la celda unitaria correcta.

Difracción de polvo de Rayos X (XRPD, por sus siglas en inglés) PANalytical X'Pert PRO: Los patrones de difracción de polvo de Rayos X fueron recogidos en un difractómetro PANalytical usando la radiación Cu Ka (45kV, 40mA) , goniómetro T-T, espejo de enfoque, rendija de divergencia (1.27 cm) (1/2"), rendijas paralelas soller en ambos el haz incidente y divergente (4mm) y un detector de PIXcel . El software usado para la colección de datos fue Colector de Datos de X'Pert, versión 2.2f y los datos fueron presentados usando el visor de datos de X'Pert, versión 1.2d.

Las muestras fueron corridas bajo condiciones ambiente y analizadas mediante XRPD con lámina de transmisión, usando el polvo como es recibido. Aproximadamente 2-5 mg de la muestra fueron montados sobre una placa de muestra de 96 posiciones soportada en una película de poliimida (Kapton, 12.7 m de espesor) . Los datos fueron recogidos en el intervalo 3-40 °? con una exploración continua (velocidad de 0.146 29/s) .

Calorimetría de exploración diferencial (DSC, por sus siglas en inglés) : Los datos de DSC fueron recogidos en un PerkinElmer Pyris 4000 DSC. El instrumento fue verificado para la calibración de la energía y temperatura usando indio certificado. Una cantidad predefinida en mg miligramos de la muestra fue colocada en una cacerola de aluminio perforada y calentada típicamente a 20°C.min~1 de 30°C a 350°C, o variada como dictó la experimentación. El análisis de control de instrumentos y datos fue el software Pyris v9.0.1.0174.

Análisis Termo-gravimétrico (TGA, por sus siglas en inglés) : Los datos de TGA fueron recogidos en un Pyris 1 de TGA equipado con un* automuestreador de 20 posiciones. El instrumento fue calibrado usando indio certificado. Una cantidad predefinida en miligramos de la muestra fue cargada sobre un crisol de aluminio pre-pesado y calentado a 40°C minuto"1 desde temperatura ambiente hasta 400°C. Una purga de nitrógeno en 20 mi minuto"1 fue mantenida sobre la muestra. El control de instrumento y los análisis de datos fueron el software Pyris v9.0.1.0174.

Absorción de Vapor gravimétrica: Se obtienen isotermas de absorción usando un analizador de absorción de humedad de Hiden Isochema (modelo IGAsorp) , controlado por el software del sistema de IGAsorp V6.50.48. La muestra fue mantenida a una temperatura constante (25°C) por los controles del instrumento. La humedad fue controlada mezclando corrientes de nitrógeno seco y húmedo, con un flujo total de 250 mi min" 1. El instrumento fue verificado para el contenido de humedad relativa midiendo tres soluciones de sal de Rotronic calibradas (10-50-88%) . El cambio del peso de la muestra fue monitoreado como una función de humedad por una microbalanza (exactitud +/- 0.005 mg) . Una cantidad definida de muestra fue colocada en un cesto de acero inoxidable de malla tarado bajo condiciones ambiente. Un ciclo experimental completo consistió de dos exploraciones (absorción y desorción) a una temperatura constante (25°C) y los intervalos de 10% de RH sobre un intervalo de 10 - 90% (90 minutos para cada nivel de humedad) . Este tipo de experimento debe demostrar la capacidad de las muestras estudiadas para absorber humedad (o no) sobre un conjunto de intervalos de humedad bien determinados .

Resonancia Magnética Nuclear (NMR, por sus siglas en inglés) 1H: Los espectros NMR fueron recogidos en un instrumento de Bruker 270MHz equipado con un auto-muestreador y controlado por una consola DRX400. Los experimentos automatizados fueron adquiridos usando Software de procesamiento y control Delta MR versión 4.3. Las muestras fueron preparadas en d6-DMSO, a menos que se indique lo contrario. El análisis fue realizado usando (ACD/Specmanager 7.11) .

Solubilidad Acuosa Termodinámica por HPLC: La solubilidad acuosa fue determinada suspendiendo suficiente compuesto en agua grado HPLC para dar una concentración final máxima de = 20 mg mi"1 del compuesto concentrado. La suspensión fue equilibrada a 25°C por 24 horas. La suspensión entonces fue filtrada a través de un filtro en un vial de HPLC. El filtrado entonces fue diluido por un factor apropiado. La cuantificación fue ejecutada por HPLC con referencia a una solución estándar de aproximadamente 0.5 mg mi"1 en Acetonitrilo : Agua: (1:1). Diferentes volúmenes de las soluciones de la muestra estándar, diluida y no diluida fueron inyectados. La solubilidad fue calculada usando las áreas pico determinadas por la integración del pico encontrado en el mismo tiempo de retención que el pico principal en la inyección estándar.

El análisis fue realizado en un Sistema de cromatografía líquida Agilent serie 1100, equipado con un detector UV (DAD o V D) @254nm y usando el Software Chemst'ation Rev.B.01.03 para procesamiento de datos. Determinación de pureza química por HPLC.

Composiciones Farmacéuticas Las composiciones farmacéuticas de la presente invención comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de un polimorfo de la presente invención formulado junto con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables . Como es utilizado aquí, el término "portador farmacéuticamente aceptable" significa un rellenador, diluyente, material de encapsulamiento, . auxiliar de formulación de cualquier tipo, sólido, semisólido o líquido no tóxico, inerte. Las composiciones, farmacéuticas de esta invención se pueden administrar a los seres humanos u otros animales oralmente, parenteralmente , rectalmente, intracisternamente, intravaginalmente, intraperitonealmenté, tópicamente (como mediante polvos, ungüentos, o gotas) , bucalmente, o como aerosol oral o nasal. Otras rutas de administración de fármaco incluyen la inhalación de medicamento de una solución o suspensión de las composiciones farmacéuticas de la presente invención en un inhalador de dosis medida (MDI, por sus siglas en inglés) o un nebulizador, o inhalación del fármaco pulverizado que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un polimorfo de la presente invención mezclada generalmente con un excipiente o las composiciones farmacéuticas de la presente invención, de un inhalador de polvo seco (DPI, por sus siglas en inglés) .

Las formas de dosificación líquidas para administración oral incluyen emulsiones, microemulsiones , soluciones, suspensiones, jarabes, y elixires farmacéuticamente aceptables. Además de los compuestos activos, las formas de dosificación líquidas pueden contener diluyentes inertes comúnmente utilizados en el arte previo, tal como, por ejemplo, agua, alcohol u otros solventes, agentes de solubilización y emulsionantes tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilen glicol, 1,3-butilen glicol, polisorbato, dimetilformamida, aceites (en particular, semilla de algodón, cacahuate, maíz, germen, oliva, ricino, y aceites de ajonjolí), mono o di-glicéridos . glicerol, tetrahidrofurfuril alcohol, polietilen glicoles y ésteres de ácido graso de sorbitán, y mezclas de los mismos. Además de diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir coadyuvantes tales como agentes de humectación, agentes de emulsión y suspensión, antioxidantes, endulzantes, saborizantes , y agentes aromatizantes. La forma de dosificación líquida también puede ser encapsulada en una cápsula de gelatina, en donde un compuesto de la presente invención se puede disolver en un portador farmacéuticamente aceptable que contiene, por ejemplo, uno o más agentes solubilizantes (por ejemplo, polisorbato 80 y mono y diglicéridos) , y otros excipientes apropiados (por ejemplo, antioxidantes tales como ascorbil palmitato, o un agente endulzante o aromático) .

Las preparaciones inyectables, por ejemplo, las suspensiones acuosas u oleaginosas inyectables estériles se pueden formular de acuerdo con el arte conocido usando agentes de dispersión o humectación apropiados y agentes de suspensión. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución, suspensión o emulsión inyectable estéril, en un diluyente o solvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo, como una solución en 1, 3-butanodiol . Entre los vehículos y solventes aceptables . que pueden ser empleados están agua, solución de Ringer, U.S.P. y solución de cloruro de sodio isotónica. Además, los aceites estériles, fijos se emplean convencionalmente como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito cualquier aceite fijo suave se puede emplear incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tales como ácido oleico se utilizan en la preparación de inyectables.

Para prolongar el efecto de un fármaco, es frecuentemente deseable retardar la absorción del fármaco de la inyección intramuscular o subcutánea. Esto se puede lograr por el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo con solubilidad en agua pobre. El índice de absorción del fármaco entonces depende de su índice de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño del cristal y de la forma cristalina. Alternativamente, la absorción retrasada de una forma de fármaco parenteralmente administrada se logra disolviendo o suspendiendo el fármaco en un vehículo de aceite. Las formas de liberación inmediatas también son contempladas por la presente invención.

Las composiciones para administración rectal o vaginal son preferiblemente supositorios que pueden ser preparados mezclando los compuestos de esta invención con excipientes o portadores no irritantes apropiados tales como manteca de cacao, polietilen glicol o una cera de supositorio que son sólidos a temperatura ambiente pero líquidos a la temperatura del cuerpo y por lo tanto se funden en el recto o la cavidad vaginal y libera el polimorfo del compuesto activo.

Las composiciones sólidas de un tipo similar también se pueden emplear como rellenadores en cápsulas de gelatina llenadas suaves y duras usando tales excipientes tales como lactosa o azúcar de leche así como polietilen glicoles de peso molecular elevado y similares.

Los polimorfos activos también pueden estar en forma microcapsulada con uno o más excipientes como es observado arriba .

Las formas de dosificación sólidas de tabletas, grageas, cápsulas, pildoras, y gránulos pueden ser preparadas con revestimientos y cubiertas tales como revestimientos entéricos, revestimientos de liberación controlada y otros revestimientos bien conocidos en el arte de formulación farmacéutica. En tales formas de dosificación sólidas el compuesto activo se puede mezclar con por lo menos un diluyente inerte tal como sucrosa, lactosa o almidón. Tales formas de dosificación también pueden comprender, como es práctica normal, sustancias adicionales diferentes de diluyentes inertes, por ejemplo lubricantes de tableteado y otros adyuvantes de tableteado tales como estearato de magnesio y celulosa microcristalina . En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes amortiguadores.

Preferiblemente, un polimorfo de la invención es formulado en una dispersión sólida, en donde el polimorfo puede ser dispersado de forma molecular en una matriz que comprende un polímero hidrofílico farmacéuticamente aceptable. La matriz también puede contener un surfactante farmacéuticamente aceptable. La tecnología de dispersión sólida apropiada para formular un polimorfo de la invención incluye, pero no se limita a, extrusión por fusión, secado por pulverización, o evaporización del solvente.

Las formas de dosificación para administración tópica o transdérmica de un polimorfo de esta invención incluyen ungüentos, pastas, cremas, lociones, geles, polvos, soluciones, aerosoles, inhalantes o parches. El componente activo se mezcla bajo condiciones estériles con un portador farmacéuticamente aceptable y cualquier conservador o soluciones amortiguadoras necesarias como puede ser requerido. Formulaciones oftálmicas, gotas de oído, ungüentos, polvos y soluciones de ojos, también se contemplan como que están dentro del alcance de esta invención.

Los ungüentos, pastas, cremas y geles pueden contener, además de un polimorfo de esta invención, excipientes tales como grasas animales y vegetales, aceites, ceras, parafinas, almidón, tragacanto, derivados de celulosa, polietilen glicoles, silicones, bentonitas, ácido silícico, óxido de talco y cinc, o mezclas de los mismos.

Los polvos y aerosoles pueden contener, además de los polimorfos de esta invención, excipientes tales como lactosa, talco, ácido silícico, hidróxido de aluminio, silicatos de calcio y polvo de poliamida, o mezclas de estas sustancias. Los aerosoles adicionalmente pueden contener propulsores comunes tales como clorofluorohidrocarburos .

Los parches transdérmicos tienen la ventaja agregada de proporcionar la liberación controlada de un polimorfo al cuerpo. Tales formas de dosificación se pueden hacer disolviendo o suministrando el polimorfo en el medio apropiado. Los mejoradores de absorción también se pueden utilizar para aumentar el flujo del polimorfo a través de la piel . La velocidad puede ser controlada proporcionando una membrana que controla la velocidad o dispersando el compuesto en una matriz de polímero o gel.

Actividad biológica En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición de polimorfo que comprende un polimorfo de la invención y un portador o diluyente veterinariamente o farmacéuticamente aceptable.. Preferiblemente, la composición es una composición farmacéutica para medicina humana. En otro aspecto, la composición de la presente invención es una composición para medicina veterinaria.

Los compuestos polimorfos de la presente invención son inhibidores de PDE y así poseen propiedades farmacológicas valiosas, tales como actividad broncodilatadora como es demostrado por la inhibición de la contracción estimulada por el campo de la tráquea aislada del conejillo de Indias, y actividad antiinflamatoria como es ilustrado en estudios en las células mononucleares humanas estimuladas por PHA {fitohamaglutinina) . Los datos in vitro e in vivo indican que los compuestos tienen una duración de acción prolongada, como es demostrado por sus efectos protectores persistentes contra broncoespasmos inducidos por histamina en el conejillo de Indias cuando son inhalados directamente en los pulmones como un polvo seco. La invención por lo tanto también se relaciona con el tratamiento agudo, crónico o profiláctico de los pacientes que sufren de trastornos respiratorios incluyendo, en particular, asma, asma alérgica, fiebre de heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructora crónica (COPD) , síndrome de distrés respiratorio del adulto (ARDS) , y fibrosis quística. También pueden ser utilizados tópicamente en trastornos de la piel tales como dermatitis atópica y psoriasis, o en inflamación ocular o cualquier otra enfermedad incluyendo isquemia cerebral o enfermedades autoinmunes en las cuales el aumento de concentraciones intracelulares de cAMP se considera beneficiosa.

Uno o más compuestos polimorfos pueden estar presentes en asociación con uno o más portadores y/o diluyentes y/o coadyuvantes y/o propulsores veterinariamente y/o farmacéuticamente aceptables, no tóxicos y, si se desea, otros ingredientes activos. Los portadores o diluyentes apropiados son conocidos en el arte previo (por ejemplo Handbook of pharmaceutical Excipiente (1994) 2da edición, Eds. A, Wade/PJ Weller, The Pharmaceutical Press, American, Pharmaceutical Association) .

De acuerdo con otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto polimorfo para uso en medicina. Los compuestos poliformos de la presente invención son útiles como inhibidores de las isoenzimas de fosfodiesterasa . Los polimorfos de los compuestos o composiciones de la presente invención se pueden utilizar para prevenir o tratar cualquier enfermedad en la cual los compuestos o composiciones son útiles, pero particularmente una enfermedad en la cual elevar la concentración intracelular de cAMP es deseable. Ejemplos de enfermedades contra las cuales los compuestos son útiles incluyen trastornos respiratorios incluyendo, particularmente, asma, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructora crónica (COPD) , síndrome de diestrés respiratorio del adulto (ARDS) , asma alérgica, fiebre de heno, rinitis alérgica, y fibrosis quística. También pueden ser utilizados tópicamente en trastornos de la piel tales como dermatitis atópica o psoriasis, inflamación ocular, o cualquier otra enfermedad incluyendo isquemia cerebral o enfermedades autoinmunes en las cuales el aumento de concentraciones intracelulares de cAMP se considera beneficioso.

Este aspecto de la invención es particularmente relevante al tratamiento de seres humanos, pero también es aplicable a la industria veterinaria general, en particular animales domésticos tales como perros y gatos y animales de granja tales como caballos, cerdos, reses, ovejas, etc.

Los niveles de la dosificación del orden ' de aproximadamente 0.02 mg hasta aproximadamente 200 mg se tomarán hasta tres veces diariamente, son útiles en el tratamiento de las condiciones mencionadas anteriormente. Más particularmente, un intervalo de dosificación de aproximadamente 0.2 mg hasta aproximadamente 20 mg, tomada hasta tres veces diario, es eficaz. El régimen de dosificación particular sin embargo será determinado en última instancia por el médico responsable y tomará en consideración tales factores que la medicación que es utilizada, edad, peso, severidad de síntomas y/o severidad de tratamiento que es o será aplicado, método de administración de la medicación, reacciones adversas y/u otras contraindicaciones.

La medicación de acuerdo con este aspecto de la invención se puede dar a un paciente junto con otros agentes activos, que pueden por ejemplo ser un compuesto diferente o polimorfo de la presente invención, u otros compuestos. Ejemplos incluyen agonistas del adrenoceptor ß2, esteroides glucocorticoides tópicos, derivados de xantina, compuestos de antihistamina, antagonistas de leucotrieno, inhibidores de la síntesis de leucotrieno y/o combinaciones de los mismos .

De acuerdo con otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de un polimorfo de la invención en la fabricación de un inhibidor de una isoenzima de fosfodiesterasa tipo III/IV (PDE3/4) . La invención abarca el uso de un polimorfo de la invención en la fabricación de un broncodilatador y/o una medicación antiasmática y/o un medicamento para la prevención o tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) .

La invención también se relaciona con un método para el tratamiento o prevención de una enfermedad en un mamífero en donde un inhibidor de isoenzima de fosfodiesterasa y/o un broncodilatador se esperaría que fuera de beneficio, el método comprende administrar al mamífero una cantidad de una cantidad no tóxica, eficaz de un polimorfo de la invención. La invención abarca un método de tratar o prevenir asma y/o la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) en un mamífero.

El término "sujeto" como es utilizado aquí se refiere a un mamífero. Un sujeto por lo tanto se refiere a, por ejemplo, perros, gatos, caballos, vacas, cerdos, conejillos de Indias, y similares. El sujeto es preferiblemente un ser humano. Cuando el sujeto es un ser humano, el sujeto puede ser un ser paciente o un humano sano.

Como es utilizado aquí, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a esas sales de los compuestos formados por el proceso o la presente invención que están, dentro del alcance del criterio médico, apropiado para uso en contacto con los tej idos de seres humanos y animales inferiores sin toxicidad indebida, irritación, respuesta alérgica y similares, y son conmensuradas con una proporción de ventaja/riesgo razonable. Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas en el arte previo. Por ejemplo, S. M. Berge, et al. describe sales farmacéuticamente aceptables en detalle en J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977). Las sales se pueden preparar in situ durante el aislamiento y purificación final de los compuestos de la invención, o de forma separada reaccionando la función de base libre con un ácido orgánico apropiado. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de adición de ácido no tóxicas, o sales de un grupo amino formado con los ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico y ácido perclórico o con ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico o ácido malónico o mediante el uso de otros métodos usados en el arte previo tal como intercambio iónico. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no sé limitan a, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzenesulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, camforato, camforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosf to, gluconato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hidroyoduro, 2-hidroxi-etanosulfonato, lactobionato, lactato, laurato, lauril sulfato, malato, maleato, malonato, metanosulfonato, 2 -naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3 -fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluenosulfonato, undecanoato, sales de valerato, y similares. Las sales alcalinas o metálicas alcalino terreas representativas incluyen sales de sodio, litio, potasio, calcio, o magnesio, y similares. Además las sales f rmacéuticamente aceptables incluyen, cuando es apropiado, amonio no tóxico, amonio cuaternario, y cationes de amina formados usando contraiones tales como haluro, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, alquilo que tiene desde 1 hasta 6 átomos de carbono, sulfonato y sulfonato de arilo.

Las combinaciones de los sustituyentes y variables previstos por esta invención son solamente las que resultan en la formación de compuestos estables. El término "estable", como es utilizado aquí, se refiere a compuestos que poseen estabilidad suficiente para . permitir la fabricación y que mantiene la integridad del compuesto por un suficiente período de tiempo de ser útil para los propósitos detallados aquí (por ejemplo, administración terapéutica o profiláctica a un sujeto) .

Los compuestos descritos aquí contienen uno o más centros asimétricos y así dan lugar a enantiómeros , diastereómeros , y otras formas estereoisomericas que pueden ser definidos, en términos de estereoquímica absoluto, como (R) - o (S)-, o como (D) - o (L) - para aminoácidos. La presente invención significa que incluye todos tales isómeros posibles, así como sus formas racémicas y ópticamente puras. Los isómeros ópticos se pueden preparar de sus precursores ópticamente activos respectivos por los procedimientos descritos arriba, o resolviendo las mezclas racémicas. La resolución se puede realizar en la presencia de un agente de resolución, por cromatografía o por cristalización repetida o por una cierta combinación de estas técnicas que son conocidas por las personas experimentadas en la técnica. Detalles adicionales con respecto a las resoluciones se pueden encontrar en Jacques, et al., Enantiomers, Racemates, and Resolutions (Juan Wiley & Sons, 1981) . Cuando los. compuestos descritos aquí contienen enlaces dobles olefínicos u otros centros de asimetría geométrica, y a menos que se especifique lo contrario, está previsto que los compuestos incluyan ambos isómeros geométricos E y Z. Asimismo, todas las formas tautoméricas también están previstas que sean incluidas. La configuración de cualquier enlace doble carbono-carbono que aparece aquí es seleccionado para conveniencia solamente y no está previsto para señalar una configuración particular a menos que el texto lo indique así; así un enlace doble carbono-carbono representado arbitrariamente ' aquí como tr ns puede ser cis, trans, o una mezcla de los dos en cualquier proporción.

Los compuestos sintetizados se pueden separar de una mezcla de reacción y purificar además por un método tal como cromatografía de columna, cromatografía líquida de alta presión, o recristalización. Como puede ser apreciado por la persona experimentada en la técnica, métodos adicionales de sintetizar los compuestos de las fórmulas aquí serán evidentes para las personas experimentadas en la técnica. Adicionalmente, varios pasos sintéticos se pueden realizar en una secuencia o un orden alterno para dar los compuestos deseados. Además, los solventes, temperaturas, duraciones de reacción, etc. se definen aquí con objeto de ilustración solamente y una persona experimentada en la técnica reconocerá que la variación de las condiciones de reacción pueden producir los productos con enlace macrocíclicos deseados de la presente invención. Las transformaciones de química sintéticas y las metodologías del grupo de protección (protección y desprotección) útiles en la síntesis de los compuestos descritos aquí son conocidos en el arte previo e incluyen, por ejemplo, aquellos tales como los descritos en R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T. . Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Sybthesis, 2.a. Ed. , Juan Wiley and Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser's Reagents for Organic Synthesis, Jhon Wiley and Sons (1994); and L. Paquette, ed. , Enciclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995), y ediciones subsecuentes de los mismos.

Los compuestos de esta invención pueden ser modificados agregando varias funcionalidades vía cualquier medio sintético definido aquí para mejorar propiedades biológicas selectivas. Tales modificaciones son conocidas en el arte previo e incluyen aquellas que aumentan la penetración biológica en un sistema biológico dado (por ejemplo sangre, sistema linfático, sistema nervioso central) , aumentan disponibilidad oral, aumentan solubilidad para permitir administración por inyección, alteran metabolismo y alteran la velocidad de excreción.

La recitación de un listado de grupos químicos en cualquier definición de una variable aquí incluye definiciones de esa variable como cualquier grupo solo o la combinación de grupos mencionados. La recitación de una modalidad para una variable de una modalidad aquí como cualquier modalidad sola o en combinación con cualquier otra modalidad o porciones de la misma.

Ej em los Los compuestos y procesos de la presente invención serán entendidos mejor con respecto a los siguientes ejemplos, que están previstos como una ilustración solamente y no para limitar el alcance de la invención. Varios cambios y modificaciones a las modalidades descritas serán evidentes para las personas experimentadas en la técnica y tales cambios y modificaciones incluyen, sin limitación, aquellas referentes a las estructuras químicas, sustituyentes , derivados, formulaciones y/o métodos de la invención pueden ser hechos sin salir del espíritu de la invención y alcance de las reivindicaciones anexas.

Ejemplo 1 Aproximadamente 50 mg de N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) - 9, 10-dimetoxi-4-oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-34H) -il] etil}urea (RPL554) fue disuelta en 0.5 mi de DMF a 70 °C. La solución amarilla clara fue permitida enfriarse muy lentamente con nitrógeno ventilando a aproximadamente 30°C durante 4 días. Un lote inicial de material fue observado dentro de los licores (aproximadamente 0.4 mi) que era de una naturaleza cristalina. Este, proceso fue repetido dos veces y se liberó material apropiado para el análisis de un monocristal dentro de un volumen de licor de aproximadamente 0.2 mi . La muestra fue sometida para el análisis inalterado dentro del licor madre.

Los datos del monocristal fueron medidos a baja temperatura (123 K) y en diferentes longitudes de onda (0.71073 A) . Para proporcionar un cuadro que daría una comparación directa, ajustes manuales en el valor de longitud de onda fueron necesarios. Después de varios ajustes, la Figura 1 fue obtenida y muestra la superposición dividida entre los datos medidos para RPL554 070638 vía XRPD (superior) y el XRPD simulado derivado de los datos del monocristal (Copia de onyx2010a, inferior) .

Una inspección más cercana (Figura 2) en el intervalo de dos theta (5-13° 2T) demuestra claramente las semejanzas entre los datos observados y el patrón de polvo simulado.

El algoritmo en el software compara numéricamente los datos observados (RPL554 070638) medidos por transmisión de XRPD y los valores numéricos derivados del análisis del monocristal. Los datos clave derivados del análisis del monocristal se enumeran abajo: Temperatura 123 (2 )K Longitud de onda 0.71073 Á Sistema cristalino Triclínico Grupo espacial P-l Dimensiones de la celda unitaria a=8.1246(4)Á o¡= 91.583(4)° b=11.4573(5)Á ß=90.299(4)° c=13.2398 (6)Á ?=99.628(4)° Volumen 1214.56 (10) Á3 Z · ' 2 El software aplicado para la comparación leyó el archivo medido (RPL554 070638) y provocó la entrada de los parámetros de celda unitaria extraídos de los datos del monocristal. El refinamiento de Pawley (algoritmo) después regresó valores numéricos, pero el % software también ilustra este valor numérico mediante una exhibición gráfica del resultado. El valor numérico para la calidad del ajuste entre los valores medidos y teóricos para RPL554 era 2.9. Este valor expresa la calidad de los datos. Entre más bajo es el valor mejores serán los datos y generalmente un valor menor de 10 se considera como un acierto positivo.

Los valores numéricos para RPL554 estaban en buen acuerdo con los derivados del monocristal medido en 123K. Así, los datos del monocristal proporcionan una excelente equivalencia con los datos de polvo recogidos para RPL554 internos y son por lo tanto representativos del perfil cristalográfico para el polimorfo termodinámicamente favorecido conocido (Forma I) .

Ejemplo 2. Material de partida Una muestra de 9.0 g de concentrado de ex-GMP de RPL554 (070638-9) fue tomada y analizada por XRPD (Figura 3 y Tabla 1) y DSC (Figura 4) para el uso como conjunto de datos de referencia actual.

Tabla 1 Pos . Altura [°2Th. ] [conteos] 6. : 3827 2406.64 10 .1448 3293.52 12 .6314 2495.28 12 .8735 3362.54 13 .6461 1682.38 14 .2043 1714.62 14 .7078 1 191.12 15 .2706 2566.43 15 .4230 1230.41 15 .8229 1877.1 3 16 .9786 1303.49 17 .6393 321 1 .22 18 .8932 938.79 20 .9592 1 298.36 22 .4382 1587.30 22 .8201 1112.59 28 .6947 876.91 Otros estudios tales como RMN de protón y HPLC en esta disyuntiva no fueron críticos a la iniciación del proyecto puesto que los resultados habían sido recogidos previamente. La realización de estudios de solubilidad en el material que utiliza un intervalo de materiales orgánicos comunes fue de manera similar innecesaria puesto que estudios anteriores habían dado una indicación fuerte del comportamiento del material. El inicio de la investigación en la presencia de otras formas de RPL554 fue la prioridad.

El material es, como es sabido, cristalino con un inicio de fusión de 246°C para la única endotermia, sin ninguna cristalización subsecuente observada o transición, diferente de la descomposición térmica. Una pérdida de peso inicial de aproximadamente 4.2% es observada por TGA, que corresponde, a la endotermia de fusión, que no está relacionada con el solvente (probablemente pérdida de amoníaco delante de la fragmentación total) . La obtención de los datos de referencia, experimentación con el material fue iniciada con el objetivo que el material amorfo sería producido posteriormente. De esta unión, los datos anteriores serán referidos como forma 1.

Se asume que el proceso para producir RPL554 suministra el material en la forma actual y que los suspensiones de alcohol utilizados para mejorar su pureza, aumentan su cristalinidad, o más de forma más importante, convierte el material amorfo en una forma cristalina.

Ejemplo 3. Adición de antisolvente La adición de antisolvente es un método suficientemente conocido para obtener material amorfo, polimorfos nuevos y también fases mezcladas. Con esto en mente, fue producida una solución concentrada de RLP554 en DMSO. El DMSO fue elegido puesto que el material tiene una solubilidad razonable en este solvente, el cual también es ampliamente miscible.

Condiciones experimentales (CG1099) : 300 mg de RPL554 fueron disueltos en DMSO caliente (2 mi solución concentrada) y 0.15 mi de esta solución agregada con agitación vigorosa, en partes, hacia 12 tubos fríos que contienen varios solventes (1.0 mi) a temperatura ambiente.

En la mayoría de los casos fue observada una precipitación inmediata. El aislamiento fue realizado por filtración y se secó en vacío a 40°C. Los resultados se detallan en la Tabla 2 siguiente: Tabla 2. Lista y detalles de solventes para adiciones del antisolvente basadas en DMSO Todas las muestras que retornaron a un sólido, una vez secadas en vacío a 45°C y analizadas por XRPD mostraron que la Forma I había regresado. Las excepciones notables fueron el dioxano, DCM y heptano. El Dioxano y DCM proporcionaron soluciones que fueron dejadas reposar y evaporar, eventualmente proporcionaron la forma I.

El heptano fue más interesante en cuanto a que las dos capas formadas, ambas soluciones coloreadas, las cuales se vuelven aceitosas gradualmente en periodos extendidos de bamboleo y reposo (capa de DMSO) . Después de aproximadamente 24 horas, los sólidos se han formado én el aceite opaco y así la mezcla se decanta y se seca en vacío a 45 °C. Desafortunadamente, mientras que se espera que se hubiera formado el material amorfo, se observó la Forma I. No obstante, se 'consideró que una repetición del experimento era justificada, pero con menos tiempo asignado de formación posterior del aceite precipitado. Esto nuevamente formó dos capas claras y resultó gradualmente en una capa de DMSO precipitada que fue decantada y analizaba tanto en húmedo y seco (CG1110A húmedo y CG1110A2 respectivamente) . El licor de DMSO también fue dejado reducirse á un sólido que fue secado en vacío (CG1110B2) . Los resultados se exhiben en la Figura 5 mostraron que todas las muestras eran virtualmente idénticas al material de partida (CG 1099SM) .

Ejemplo 4. Soluciones saturadas Las soluciones saturadas son en gran medida el mejor método para obtener fases puras de polimorfos nuevos . Por lo tanto, las cantidades conocidas de Forma I RPL554 se disolvieron o se formaron en suspensión en el transcurso de un cierto plazo para obtener una solución saturada a un temperatura, seguida por una filtración de pulido para quitar cualquier memoria de forma (semilla) . Un enfriamiento controlado entonces fue utilizado para promover la cristalización.

Experimental (JN376) : 24 Solventes fueron agitados a 45 °C en la presencia de 30 mg de la forma I RPL554 para dejar una suspensión inicial. Las suspensiones fueron calentadas a 45°C por un periodo de 4.5 horas antes de una filtración caliente en tubos pre-calentados que después fueron dejados evaporarse lentamente antes del secado en vacío a 45°C y el análisis. Observe que las entradas A y B (en la Tabla 3) fueron calentadas a 35°C bajo nitrógeno para ayudar a la evaporación por 24 horas.

Tabla 3. Lista de solventes y resultados para experimentos de solución saturada (JN376) Significado: XT = cristalino, insol = material insoluble/muy poco, rastros de polvo- insuficiente = material insuficiente para analizar De la Tabla se puede ver que muchos de los experimentos no disolvieron una cantidad suficiente de material para un análisis y que regresó ya sea a una mota de aceite o polvo en el fondo del tubo después del secado. Sin embargo, a pesar de esto un número de experimentos regresó material en forma de polvo que permitió que el análisis XRPD fuera colectado. Los experimentos más exitosos, han mostrado que cristales formales a ser desarrollados a partir de licores madre, fueron cosechados y solamente una entrada mostró cualquier cambio de forma relevante (DMSO) .

Los resultados para la entrada DMSO se muestran abajo (Figuras 6 y 7) , y mientras que el material exhibe una cierta semejanza a la forma I, se cree que un polimorfo nuevo está presente basado en XRPD y que permite la orientación preferida. El análisis DSC del material proporciona una indicación más clara del cambio de forma con un punto inicial mucho más bajo de la endotermia principal. Había material insuficiente para el análisis TGA y NMR. Es nuestra comprensión que ésta es una forma menos estable del RPL554.

Ejemplo 5. Maduraciones de suspensiones Maduraciones de suspensiones 24 x fueron realizadas en un intento por tensar el sólido cristalino actual en experimentar una transformación de forma. El método más eficaz para tal trabajo es utilizar ciclos de calor/enfriamiento prolongados, como fue sometido a la forma I del RPL554.

Experimento (CG1100) : Un poco de los 20 mg de material fue agitado en tubos de vidrio en aproximadamente 30 volúmenes del solvente y sometidos a ciclos entre períodos isotérmicos (8 horas) de 20°C y de 50°C. Después de 4 días de ciclos, los sólidos fueron filtrados y secados en vacío a 45°C antes de un análisis por XRPD. Todos los resultados fueron comparados con el material de partida, RPL554 (Forma I); ver Tabla 4.

Tabla 4 : Experimentación de maduración de suspensiones para RPL554 (CG1100) Todas las muestras exhibieron el mismo perfil de XRPD cuando se compararon con el material de partida, demostrando que la Forma I de RPL554 era extremadamente resiliente al cambio y muy probablemente sea la forma más estable termodinámicamente del compuesto (Figura 8) .

Ejemplo 6. Recristalizaciones de solventes mezclados Debido a que los perfiles de solubilidad se pueden alterar notablemente por la presencia de sistemas solventes mezclados y que estas tendencias pueden ser muy difíciles de predecir, se planeó una serie de recristalización utilizando una variedad de sistemas. Se consideró otra manera conveniente para inducir el cambio de forma conduciendo al descubrimiento de polimorfos nuevos.

Se había observado durante estudios que el dioxano y el eumeno (diferente al DMF, DMSO y Tetralina común) , habían mostrado un grado de eficacia en disolver el RPL554. Estos solventes formaron la base de algunos ensayos iniciales que tomaron soluciones filtradas de pulido de cada solvente y RPL554. y después se mezclaron calientes con un intervalo de antisolventes conocidos de varios tipos, manteniendo una solución y entonces dejándose enfriar lentamente.

Experimento (PF87) : Soluciones concentradas con 100 mg de RPL 554 fueron preparadas por agitación, el sólido en 5 mi del solvente principal y dejándose calentar a 50°C para mejorar la disolución. Un suplemento de 1 mi (más si es necesario) del co- solvente fue agregado para mejorar la disolución y para formar la mezcla concentrada final. Las muestras fueron dejadas en agitación a 50°C por 30 minutos. A un tubo caliente precalentado (50 °C) , se le agregó la solución concentrada seguido de 2 mi del antisolvente mostrado en la tabla; las muestras se dejaron en agitación y evaporarse. Las muestras fueron filtradas y secadas durante la noche en un horno de vacío a 50°C antes del análisis por XRPD (ver Tabla 5) .

Tabla 5. Cristalización de solventes mezclados de co-solventes concentrados indicados con adición de antisolvente (PF87) Todos los experimentos listados en el experimento PF87 regresaron a la Forma I, actuando como una prueba adicional de la estabilidad termodinámica de RPL55 .

Ejemplo 7. Ensayos de cristalización en sistemas acuosos mezclados.

Una serie de cristalizaciones de solventes mezclados que tenían una base acuosa fue investigada en el experimento PF86.

Experimento (PF86) : Una solución concentrada caliente de RPL554 (Forma I) en DMSO (1 mi, 15 mg.ml"1) fue agregada a una solución caliente del solvente, mezclada con agua (1:1, v/v, lml) como es indicado en la Tabla 6 (50°C) . Las soluciones se dejaron agitar en temperatura por 48 horas, se enfrió, filtró y después se secó en el horno durante la noche (40°C) . El análisis por XRPD fue realizado y comparado con el material de partida.

Tabla 6. Resumen de resultados para las cristalizaciones mezcladas acuosas (experimento PF86) Los resultados para esta serie de experimentos (Figura 9) mostraron nuevamente que la Forma I era dominante.

Ejemplo 8. Generación de material amorfo Puesto había una prueba experimental histórica para generar material amorfo al calentar la Forma I de RPL554 hasta 245°C y enfriar rápidamente el fundido, una repetición de este método fue realizada (base de TGA) y produjo el mismo material, claro, amarillo, parecido a vidrio. Este espécimen se analizó posteriormente por XRPD y se mostró que era amorfo (ver Figura 10) .

Este material después fue corrido en el instrumento DSC en un intento por observar la transición vitrea y si es posible cualquier recristalización. Los resultados se exhiben en la Figura 11.

Una transición vitrea propuesta se puede observar en aproximadamente 120 °C, sin la observación de una recristalización formal. Mientras que este' experimento era corrido, la muestra fue sometida a un análisis de LC, puesto que la estabilidad en temperaturas se sabe que es un problema potencial (observación de TGA) . El cromatógrama mostró la presencia de múltiples picos con solamente 26% del material siendo el material de partida, RP1.554. Este resultado indicó que ya sea el frío de choque necesario a ser desarrollado con márgenes experimentales más sensibles, o que el método fuera inválido. El experimento fue repetido a una temperatura más baja (240°C) , esto intentando evitar la descomposición y así regresar a un mejor perfil en términos de pureza. El análisis de LC regresó a un perfil similar de muy poca pureza y varios productos secundarios . Por lo tanto fue evidente que el material amorfo no sería generado de este modo.

Entonces se realizó un número de intentos diferentes para generar la fase amorfa, partiendo con la manipulación física (molido, presión aplicada) y entonces la evaporación rápida de una solución diluida de solventes tales como DCM y eumeno. En este experimento, la muestra molida (mortero y maja) , mostró ser muy electrostática y fallo en ser transferido a la placa de Kapton para el análisis de XRPD. La muestra, sin embargo, fue transferida con éxito a una bandeja de DSC; el punto de fusión observado fue más bajo que el del material de referencia, indicando la posibilidad de cambio de forma. Una repetición de este experimento sería requerida adicionalmente a esta investigación; sin embargo, la fase amorfa no estuvo próxima a partir de este acercamiento (Figura 12) .

Presión aplicada (100KN) : 10 mg de RPL554 se dejaron en un sistema de discos durante la noche, formando un disco fino y uniforme con un grueso de menos de 0.1 mm. El disco fue molido cuidadosamente y analizado por XRPD (Figura 13) .

La comparación de XRPD del material presurizado con la forma de partida (referencia usada CG1099F) , mostró que la compresión del material cristalino genera una fase amorfa. Después de estas observaciones, se realizó un análisis térmico (DSC) y se probó que el material era amorfo (Figura 14) .

La transición desde el material amorfo se mostró por la Tg a 75°C, la cual entonces recristaliza en ca. 131°C antes de fundirse a 242.6°C y 262.7°C consecutivamente. La primera endoterma parece ser ligeramente más baja que el material de referencia y se podría relacionar potencialmente con una forma diferente (las comparaciones de pureza serían un estudio sensible para realizarse antes de asignar una nueva forma) . La segunda fusión también se podría considerar como entidad cristalina diferente, aunque se debe enfatizar que éste está en la región de descomposición para este material.

Evaporación de solvente rápida: Un frasco que contiene RPL554- 070638 fue disuelto completamente en un gran volumen de DCM a temperatura ambiente (290 mi, 2.0 g) . El solvente entonces fue retirado rápidamente a temperatura, manteniendo el RPL554 -070638 disuelto completamente, evitando una precipitación lenta de la materia prima y la presencia de la Forma I. El análisis de HPLC mostró una alta pureza química y el NMR de protones indica un rastro de DCM residual.

El XRPD del lote inicial mostró una fase amorfa (JN376E,), el cual fue confirmado por DSC (Figura 15). El proceso de calefacción induce a un exoterma grande, ilustrando una cristalización a 152°C, seguido por una endoterma para fusión esperada de la Forma I, no obstante ligeramente suprimida. Observe diferencias sutiles entre este lote y el material amorfo derivado de la presión aplicada (diferencia principal en la temperatura de la exoterma y perfil iniciales posterior a la fusión principal) .

Habiendo aislado exitosamente una pequeña cantidad de material amorfo, la técnica fue escalada ascendentemente a gramos de material para usarse en una solución saturada y suspensión de trabajo. El perfil XRPD de referencia para este lote (JN376F) se muestra en la Figura 16.

Ejemplo 9. Soluciones saturadas con material amorfo Como se indicó, las soluciones saturadas son el mejor método para obtener fases puras de polimorfos nuevos. Con este fin, el material amorfo fue tomado y un estudio fue realizado usando soluciones saturadas, como en JN376, con el objetivo de obtener una concentración de partida total más alta.

Experimento (PF89) : 24 solventes fueron agitados a 45°C en la presencia de 30 mg de RPL554 (JN376F) para dejar una suspensión (más concentrada) inicial que con la fase cristalina. Las suspensiones fueron calentadas durante un periodo de 4.5 horas para incrementar la solubilidad. Cada tubo fue verificado para en cuanto a la disolución completa del material. Si permanecía sólido, un suplemento 1 mi del solvente conocido fue agregado hasta que se disolvió completamente. Cada tubo fue determinado antes de una filtración caliente en tubos pre-calentados que entonces fueron dejados para evaporarse lentamente. Observe que los tubos fueron colocados bajo nitrógeno para ayudar a la evaporación por 24 horas. Los resultados de este experimento se muestran en la Tabla siguiente (Tabla 7) : Tabla 7. Experimentos de solución saturada (entrada de fase amorfa, experimento PF89) De la tabla se puede ver que algunos de los experimentos disolvieron una cantidad insuficiente de material para permitir un análisis, o regresó ya sea a una mota de aceite o un polvo amorfo en el fondo del tubo posterior al secado. Sin embargo, a pesar de esto, un número de experimentos volvieron el material en forma del polvo lo que permitió que el análisis de XRPD fueran colectados. Los experimentos más exitosos, algunos que han mostrado cristales de forma I desarrollados a partir de licores madre, han sido cosechados y solamente una entrada mostró algún cambio de forma relevante (PF89A4, DMSO) . : Los resultados para la entrada de DMSO se muestran abajo, y mientras que el material exhibe una cierta semejanza a la Forma I, se considera que un polimorfo nuevo está presente con base en el XRPD y permitiendo una orientación preferida. El análisis de DSC del material proporciona una indicación más clara del cambio de forma con un inicio mucho más bajo de la endoterma principal. Había material insuficiente para un análisis de TGA y NMR. Este resultado fue escalado ascendentemente para una investigación adicional, aunque es notable que este material no presentó el mismo perfil, sino uno alterado en relación con el RPL554 como JN376A4 (solución saturada de DMSO, Figuras 6 y 7) . Se considera que esto sería debido al nivel relativo de disolución.

Para ayudar en la comprensión del análisis colectado, y debido al hecho de . que se ha obtenido una información de modelación de alta calidad a partir de los parámetros de células unitarias predichos (experimento de indexación) para RPL554, la nueva fase fue comparada con estos datos teóricos.

El análisis numérico mostró que la mayor parte del material es de Forma I con algunos picos que no están ajustados. Esto indica una fuerte evidencia de que la muestra era ya sea una mezcla de dos formas, una potencialmente un producto solucionado. Los resultados no se habían reportado por completo y era sencillo observar la Forma I en todos los casos en donde había material suficiente para la colección, excepto para DMSO, en donde un cambio menor fue observado en el perfil de XRPD.

Ejemplo 10. El experimento automatizado (estudio ampliado de antisolvente) Un experimento fue iniciado para ampliar el intervalo de solventes de los que se usaran en el trabajo de adición de antisolvente y para realizar tal mezcla de solvente con temperatura, en lugar de un enfriamiento de choque mediante el uso de antisolvente (CG1099) .

Experimento (PF85) : Una cantidad definida de RPL554 (1.5g) y 20 mi de DMSO fue agregada a un tubo y calentada a 50°C para mejorar la disolución. 200µ1 de la solución concentrada fueron colocados en un pozo calentado (50°C) . 200 µ? del solvente listado (tabla siguiente) fueron agregados al pozo y se dejó agitar por 72 horas antes del aislamiento.

Las muestras entonces fueron transferidas sobre una placa de Kapton para un análisis de XRPD. Los resultados fueron procesados y comparados con el material de partida RPL554 (Tabla 8) .

En donde el XRPD era insuficiente para diferenciarse del material de partida, el análisis térmico fue realizado para definir los puntos de fusión (material permitidos) .

Tabla 8. Cristalizaciones de solventes mezclados calientes automatizadas (PF85) , que detallan los resultados iniciales por XRPD y DSC en donde sea posible Se puede observar a partir de los datos de la tabla, especialmente los que indican rastros de DSC colectados, que algunas fases potencialmente nuevas o mezcladas fueron aisladas de la biblioteca de antisolventes más amplia. Mientras que los patrones de XRPD pueden parecer inicialmente diferentes, debido a las intensidades pico, los efectos de orientación preferidos pueden estar presentes y así un análisis más profundo puede ser necesario (la orientación preferida fue considerada posible debido a la observación visual de los cristales transferidos del experimento automatizado) (resultados no mostrados) . Tal análisis también ha sido presentado por la comparación numérica de los nuevos patrones de XRPD con el patrón predicho de Forma I predicha de la indexación. La idea era ganar tantos datos de calidad sobre la presencia de una nueva fase verdadera o si el resultado era de hecho una mezcla de las muestras iniciales.

Para el experimento paralelo PF85, los resultados proporcionaron una cierta información relativamente interesante sobre la capacidad del RPL554 para exhibir diferentes formas cristalinas. Las herramientas analíticas combinadas (XRPD/DSC) revelaron que existían potencialmente por lo menos cinco formas cristalinas junto a la Forma I del RPL554, aunque la sensación era que éstas eran principalmente mezclas. Los experimentos que volvieron más probable a la evidencia de nuevas fases y que fueron seleccionados para escalarse ascendentemente (obsérvese que otros sistemas pudieron haber replicado estos resultados) : PF85A3 Clorobenceno/DMSO PF85A5 Cumeno/DMSO PF85B4 l-Metil-2-propanol/DMS0 PF85D10 Hexano/DMSO PF8512 acetato de etilo/DMSO Comparación numérica de la 5 formas anteriores con el patrón de Forma I de RPL554 calculada Los datos que se relacionan con los polimorfos nuevos potenciales del RPL554 y el perfil calculado (datos no mostrados) . Para este estudio, la referencia se realiza hacia los parámetros de célula unitaria encontrados mientras que se intenta indexar la Forma I de RPL554. El algoritmo en el programa computacional permite la entrada de parámetros de células unitarias, en este caso los relacionados con la Forma I. El programa computacional entonces calcula un perfil que de esa manera permite que el usuario realice una comparación visual con los datos medidos. Este acercamiento ayuda a la confirmación de la existencia de una nueva forma y/o de una nueva forma coexistente con la Forma I (mezcla) . En casi todos los casos anteriores, el resultado observado es que estaba presente la Forma I y principalmente las mezclas han presentado más que una fase nueva, pura con el potencial para el DIO que es la excepción. La totalidad de los candidatos anteriores fueron el objeto para escalarse ascendentemente. Ejemplo 11. Escalamiento de las nuevas formas potenciales Una serie de experimentos escalados se inició para generar más material de las formas nuevas y/o mezcladas. En esta manera un estudio más detallado podría ser realizado y cruces sobre los suspensiones tratados. Se debe observar que tal escalamiento puede no ser trivial, especialmente en donde formas menos estables se han inducido a una escala pequeña (sutilezas de proceso significan que la escale se puede probar) .

Experimento (PF90 y JN386) : Una solución concentrada de RPL554 fue preparada en DMSO caliente. La solución fue filtrada pulida y 1.75ml (aproximadamente 200 mg de contenido) agregado a un volumen (4 mi) del solvente caliente (55°C) .

Las muestras fueron dejadas agitar y evaporarse lentamente en un cierto tiempo para imitar las condiciones que generaron los polimorfos nuevos potenciales. Después de la precipitación, las muestras fueron filtradas y secadas en vacío a 40°C antes del análisis por XRPD. La Tabla siguiente (Tabla 9) resume los experimentos escalados para el RPL554.

Tabla 9. Resultados para el escalamiento ascendente de los polimorfos potenciales que muestran el predominio de la Forma I Con los materiales a disposición, el análisis tal como el TGA sería aplicable para determinar si la disolución es la causa de las diferencias en los perfiles de XRPD (por ejemplo, fase mezclada de la Forma I y de un solvato) , o si es debido a una mezcla de formas no disuelta. En el caso del acetato de etilo por ejemplo, se puede ver que el escalamiento del proceso ascendentemente ha regresado a la Forma I y así es más probablemente que las diferencias más marcadas en el perfil de XRPD original fueran debido a una mezcla de la Forma 1 y una forma menos estable que ha convertido al polimorfo más estable (la endoterma mp más baja presente en el DSC, no dentro de la fase descomposición es el soporte de esto) . El mismo comentario es verdadero para la totalidad de los otros solventes excepto el ácido acético, el cual regresó a una goma y DMSO, el cual regresó a una mezcla. En este caso material suficiente estaba disponible para confirmar la presencia de la Forma I y una forma menos estable, el cual con el tiempo se convertiría a la forma más estable. Se debe observar que esto no es idéntico a las formas menos estables identificadas del DMSO en PF98A4 y JN376A4, mostrando que este solvente ha proporcionado un número de cambios a la forma principal, pero que durante el escalamiento ascendente la Forma I aún era el componente principal .

El análisis (Figuras 18 y 19) se relaciona con el experimento escalado que involucra el DMSO.

Los datos de XRPD muestran claramente nuevamente .la presencia de picos que no pertenecen a la Forma I. Como se muestra en el análisis térmico. La Forma I está presente en la mayoría (inicio de fusión a 246.1°C) mientras coexiste la presencia de un compuesto de punto de fusión más alto (inicio en 261°C) . El análisis gravimétrico muestra la presencia de DMSO libre en la muestra el cual se evapora bajo la corriente de nitrógeno en el TGA cuando se calienta la muestra desde RT a 100 °C. Esto no se puede relacionar con la inclusión del solvente en el compuesto de punto de fusión más alto. Aunque todo el DMSO libre parece desaparecer por el calentamiento, la curva de TGA muestra una pérdida de peso lenta pero constante entre 100°C y 200°C que se pueden relacionar con el DMSO "incluido", aunque sin el aislamiento de una fase pura, estos supuestos son difíciles de realizar. El NMR de protones, como se esperaba mostró la presencia de DMSO en la muestra.

Como conclusión, los experimentos escalados para el RPL554 muestran que la Forma I sigue siendo la privilegiada y también cinéticamente favorecida. Es probable que la mayor parte de las fases mezcladas observadas se conviertan en última instancia a la forma I.

Ejemplo 12. Solubilidad acuosa En cuanto el material amorfo y .la Forma I estaban disponibles, ambas muestras fueron expuestas a un estudio de solubilidad acuoso directo en agua purificada a 25 °C. Este experimento fue realizado puesto que se desconocía si el material cristalino o amorfo era aislado inicialmente en el local durante una campaña de síntesis anterior.

Experimento : Una suspensión de 20 mg del candidato fue mezclada en agua purificada (1 mi, pH 7) . La suspensión fue equilibrada a 25 °C por 24 horas. La suspensión entonces fue filtrada en un frasco de HPLC y el filtrado entonces fue diluido por un factor apropiado con una cuantificación que es ejecutada por HPLC con referencia a una solución estándar.

Resultado: JN376F amorfo 0.03 mg/ml RPL554 Forma I 0.001 mg/ml Como se esperaba, la fase amorfa probó, aunque bastante insoluble, ser más soluble que la Forma I bajo esta prueba básica. Desafortunadamente, ambas muestras eran demasiado finas para ser filtradas y aisladas eficientemente por reanálisis por XRPD, aunque es conocido que la Forma I resulta de tales suspensiones.

Ejemplo 13. Datos de rayos-X: Los parámetros relevantes relacionados con el cristal solo de RPL554 Datos de rayos-X para RPL554 se pueden encontrar en Tablas 10-15, y Figuras 20-22.

Tabla 10. Datos de cristales y refinamiento de estructura para el RPL554 (onyx2010a) Código de . , . , . . , ¦ onyx2010a 5 identificación Fórmula empírica C26 H31 N5 04 Peso de fórmula 477.56 Temperatura 123(2) K Longitud de onda 0.71073 Á 10 Sistema de cristales Triclínico Grupo de espacio P-l Dimensiones de célula a = 8.1246(4) Á a= unitaria 91.583(4)°. b = 11.4573(5) Á ß= 90.299(4t- c = 13.2398(6) Á Y = 99.628(4)°. 15 Volumen 1214.56 (10) Densidad (calculada) 1.306 Mg/m3 Coeficiente 0.090 mm"1 absorción F(000) 508 0.32 x 0.22 x 0.08 Tamaño del cristal . mm3 Intervalo Theta para 2.86 a 30.72°. la colección de datos -1 <=h<=ll, -t? Intervalos de índice n _ , " 16<=k<=16, -17<=1<=17 Tabla 11. Coordenadas atómicas (x 104) y parámetros de desplazamiento isotrópico equivalentes (ÁxlO3) para onyx2010a. U (eq) es definido como un tercio de la curva del tensor Ulj ortogonalizado.

X y Z U (eq) 0(1) 2377 (1) 8343(1 ) 861 (1) 21(1) 0(2) -7077 (1) 8128 (1) 3364 (1) 22 (1) 0(3) -7605(1) 5925 (1) 2796 (1) 22 (1) 0 (4) 3558 (1) 13706 (1) 485 (1) 24(1 ) N(l) -69 (J) 8094 (J) 1717 (1) 16 ( 1) N(2) 1803 (1) 9907 (1) 1810 (1) 16(1 ) N(3) 1201 (1) 11536 (1) 2713 (1) 18 (1) N(4) 4497 (2) 11982 (1) 120 (1) 21(1) N(5) 6214 (2) 13771 (1) -66(1) 21(1) C(l) 1430 (2) 8757 (1) 1440 (1) 16(1) C(2) 742 (2) 10441 (1) 2447 (1) 16(1) C(3) -772 (2) 9687 (1) 2707(1) 17 (J) C(4) -1 198(2) 8572 (1) 2327 (1) 15(1) C(5) -2840 (2) 7838 (1) 2490 (1) 15(1) C(6) -3091 (2) 6628 (1) 2273 (1) 16(1) C(7) -1613 (2) 6080 (1) 1962 (1) 20 (1) C(8) -487 (2) 6879 (1) 1271 (1) 20 (1) X y z U (eq) C(9) -4174 (2) 8364 (1) 2861 (1) 17 (1) C(10) -5720 (2) 7695 (1) 2993 (1) 17 (1) C(ll) -6002 (2) 6483 (1) 2709 (1) 17(1) C(12) -4684 (2) 5960 (1) 2371 (1) 18 (1) C(13) -6739 (2) 9152 (1) 4018 (1) 26 (1) C(14) -7922 (2) 4669 (1) 2626 (1) 27 (1) C(15) 16(2) 12112 (1) 3230 (1) 17(1) C(16) 318 (2) . 12495 (1) 4241(1) 20(1) C(17) -752 (2) 13173 (1) 4697 (1) 23 (1) C(18) _ -2120 (2) 13474 (1) 4191 (1) 23(1) C(19) -2386 (2) 13077 (1) 3191 (1) 22 (1) C(20) -1340 (2) 12405 (1) 2698 (1) 19(1) C(21) 1802 (2) 12195 (1) 4804 (1) 31(1) C(22) -3260 (2) 14224 (1) 4688 (1) 34 (1) C(23) -1614 (2) 12080 (1) 1592 (1) 29 (1) C(24) 3339(2) 10637 (1) 1453(1 ) 18(1) C(25) 3023 (2) 11218 (1) 464 (1) 20 (1) C(26) 4689 (2) 13185 (1) 189 (1) 17(1) Tabla 12. longitudes de enlace [Á] para onys2 od)-c(i) 1. 2296 (13) 0(2) -C(10) 1. 3707 (14) 0(2) -C(13) 1. 4268 (15) 0(3) -C(ll) 1. 3583 (15) 0(3) -C(14) 1. 4299 (16) 0(4) -C(26) 1. 2363 (14) N(l) -C(l) 1. 3803 (16) N(l) -C(4) 1. 3948 (14) N(l) -C(8) 1. 4812 (16) N(2) -C(l) 1. 3779 (16) N(2) -C(2) 1. 4084 (15) N(2) -C(24) 1. 4686 (16) N(3) -C(2) 1. 2858 (16) N(3) -C(15) 1. 4240 (15) N(4) -C(26) 1. 3610 (17) N(4) -C(25) 1. 4436 (17) N(4) -H(1N) 0 .847 (14) N(5) -C(26) 1. 3558 (17) N(5) -H(3N) 0 .897 (16) N(5) -H(2N) 0 .876 (15) C(2)-C(3) 1. 4300 (18) C(3) -C(4) 1. 3488 (17) C(3) -H(3) 0.9500 ¦ C(4)-C(5) 1. 4735 (17) C(5) -C(6) 1. 3896 (17) C(5) -C(9) 1. 4093 (16) C(6) -C(12) 1. 3971 (18) C(6) -C(7) 1. 4998 (17) C(7)-C(8) 1. 5121 (18) C(7)-H(7 0.9900 C(7) -H(7B) 0.9900 C(8) -H(8A) 0.9900 C(8) -H(8B) 0.9900 C(9) -C(10) 1. 3725 (18) C(9) -H(9) 0.9500 C(10) - 1. 4099 (18) C(ll) - 1. 3826 (17) C(12) - 0.9500 C(13)- 0.9800 C(13)- 0.9800 C(13) - 0.9800 C(14) -H(14A) 0.9800 C(14) -H(14B) 0.9800 C(14) -H(14C) 0.9800 C(15) -C(20) 1.3972 (18) C(15) -C(16) 1.4038 (17) C(16) -C(17) 1.3884 (17) C(16) -C(21) 1.5074 (19) C(17) -C(18) 1.3923 (19) C(17) -H(17) 0.9500 C(18) -C(19) 1.3918 (18) C(18) -C(22) 1.5072 (17) C(19) -C(20) 1.3914 (17) C(19) -H(19) 0.9500 C(20) -C(23) 1.5068 (18) C(21 ) -H(21A) 0.9800 C(21) -H(21B) 0.9800 C(21) -H(21C) 0.9800 C (22) -H (22A) 0.9800 C(22) -H(22B) 0.9800 C(22) -H(22C) 0.9800 C (23) -H (23A)¦ 0.9800 C(23) -H(23B) 0.9800 C(23) -H(23C) 0.9800 C(24) -C(25) 1.5258 (18) C(24) -H(24A) 0.9900 C(24) -H(24B) 0.9900 C(25) -H(25A) 0.9900 C(25) -H(25B) 0.9900 C(10) -0(2) -C(13) 116.55 (10) C(ll) -0(3) -C(14) 117.16 (10) C(l) -N(l) -C(4) 121.65 (11) C(l) -N(l) -C(8) 116.95 (10) C(4) -N(l) -C(8) 121.24 (11) C(l) -N(2) -C(2) 123.78 (11) C(l) -N(2) -G(24) 117.51(10) C(2) -N(2) -C(24) 118.54 (11) C(2) -N(3) -C(15) 117.37 (11) C(26) -N(4) -C(25) 122.90 (11) C(26) -N(4) -H(1N) 118.4 (11) C(25) -N( 4) -H(1N) 118.7 (10) C(26) -N(5) -H(3N) 116.1(10) C(26) -N(5) -H(2N) 118.0 (10) H(3N) -N(5) -H(2N) 117.6 (14) 0(1) -C(l) -N(2) 121.24 (12) 0(1) -C(l) -N(l) 121.00 (12) N(2) -C(I) -N(l) 117.73 (10) N(3) -C(2) -N(2) 118.03 (12) N(3) -C(2) -C(3) 127.18 (11) N(2) -C(2) -C(3) 114.78(11) C(4) -C(3) -C(2) 122.70 (11) C(4) -C(3) -H(3) 118.7 C(2) -C(3) -H(3) 118.7 C(3) -C(4) -N(l) 119.19 (12) C(3) -C(4) -C(5) 123.14 (11) N(l) -C(4) -C(5) 117.61 (11) C(6) -C(5) -C(9) 119.51 (12) C(6) -C(5) -C(4) 120.45 (11) C(9) -C(5) -C(4) 120.04(11 ) C(5) -C(6) - C(12) 119.59(11) C(5) -C (6) -C(7) 118.11 (12) C(12) -C( 6)-C(7) 122.29 (12) C(6) -C(7) -C(8) 111.05 (11) C(6) -C(7)- H(7A) 109.4 C(8) -C(7) --H(7A) 109.4 C(6) -C(7) -•H(7B) 109.4 C(8) -C(7) - H(7B) 109.4 H(7 A) -C(7) -H(7B) 108.0 N(l ) -C(8) -C(7) 110.91 (10) N(l) -C(8)- H(8A) 109.5 C(7) -C(8) - H(8A) 109.5 N(l) -C(8) - H(8B) 109.5 C(7) -C(8) - H(8B) 109.5 H(8A) -C(8) -H(8B) 108.0 C(10 ) -C(9) -C(5) 120.58 (12) C(10) -C(9) -H(9) 119.7 C(5) -C(9) - M(9) 119.7 0(2) -C(10) -C(9) 124.53 (12) 0(2) -C(10) -C(ll) 115.61 (12) C(9) - C(10) -C(ll) 119.83 (11) 0(3) - C(ll) -C(12) 125.46 (12) 0(3) -C(ll) -C(10) 115.06 (11) C(12) -C(ll) -C(10) 119.48 (12) C(ll) -C(12) -C(6) 120.80 (12) C(ll) -C(12) -H(12) 119.6 C(6) -C(12) -H(12) 119.6 0(2) -C(13) -H(13A) 109.5 0(2) -C(13) -H(13B) 109.5 H(13A) -C(13) -H(13B) 109.5 0(2) -C(13) -H(13C) 109.5 H(13A) -C(13) -H(13C) 109.5 H(13B) -C(13) -H(13C) 109.5 0(3) -C(14) -H(14A) 109.5 0(3) -C(14) -H(14B) 109.5 H(14A) -C(14) -H(14B) 109.5 0(3) -C(14) -H(14C) 109.5 H(14A) -C(14) -H(14C) 109.5 H(14B) -C(14) -H(14C) 109.5 C(20) -C(15) -C(16) 120.45 (11) C(20) -C(15) -N(3) 119.62 (11) C(16) -C(15) -N(3) 119.56 (12) C(17) -C( 16) -C(15) 118.75 (12) C(17) -C( 16)-C(21) 121.09 (12) C(15) -C(16) -C(21) 120.15(11) C(16) -C(17) -C(18) 122.27 (12) C(16) -C(17) -H(17) 118.9 C(18) -C(17) -H(17) 118.9 C(19) -C(18) -C(17) 117.49(12) C(19) -C(18) -C(22) 120.62 (13) C(17) -C(18) -C(22) 121.87 (12) C(20) -C(19) -C(18) 122.35 (13) C(20) -C(19) -H(19) 118.8 C(18) -C(19) -H(19) 118.8 C(19) -C(20) -C(15) 118.69 (12) C(19) -C(20) -C(23) 119.92(12) C(15) -C(20) -C(23) 121.26 (11) C(16) -C(21) -H(21A) 109.5 C(16) -C(21) -H(21B) 109.5 H(21A) -C(21) -H (21B) 109.5 C(16) -C(21) -H(21C) 109.5 H(21A) -C(21) -H(21C) 109.5 H(21B) -C(21) -H(21C) 109.5 C(18) -C(22) -H(22A) 109.5 C(18) -C(22) -H(22B) 109.5 H(22A) -C(22) -H(22B) 109'.5 C(18) -C(22) -H(22C) 109.5 H(22A) -C(22) -H(22C) 109.5 H(22B) -C(22) -H(22C) 109.5 C(20) -C(23) -H(23A) 109.5 C(20) -C(23) -H(23B) 109.5 H(23A) -C(23) -H(23B) 109.5 C(20) -C(23) -H(23C) 109.5 H(23A) -C(23) -H(23C) 109.5 H(23B) -C(23) -H(23C) 109.5 N(2) -C(24) -C(25) 110.92 (11) N(2) -C(24) -H(24A) 109.5 C(25) -C(24) -H(24A) 109.5 N(2) -C(24) -H(24B) 109.5 C(25) -C(24) -H(24B) 109.5 H(24A) -C(24)H(24B) 108.0 N(4) -C(25) -C(24) 111.97 (11) N(4) -C(25) -H(25A) 109.2 C(24) -C(25) -H(25A) 109.2 N(4) -C(25) -H(25B) 109.2 C(24) -C(25) -H(25B) 109.2 H(25A) -C(25) -H(25B) 107.9 0(4) -C(26) -N(5) 122.27 (13) 0(4) -C(26) -N(4) 122.15 (13) N(5) -C(26) -N(4) 115.55 (12) Tabla 13 Parámetros de desplazamiento Anisotrópico (Á2xl03)para onyx2010a. El exponente del factor de desplazamiento anisotrópico toma la forma -2n2 [h2a*2Ui:L+ · ... + 2 h k a* b* U12] u11 u22 u33 u23 U13 u12 0(1) 19 (1) 20(1) 24 (1) -1(1) 6(1) 4 (1) 0(2) 16 (1) 20(1) 28 (1) -4 (1) 4(1) 3 (1) 0(3) 16 (1) 16(1) 32(1) -1(1) 2(1) -2(1) 0(4) 23 (1) 20(1) 30(1) KD 8(1) 7(1) N(l) 15(1) 14(1) 19(1) -1(1) 2(1 ) 2(1) N(2) 14 (1) 14(1) 19(1) KD 4(1) 0 (1) N(3) 17 (1) 16(1) 19(1) -KD 1 (1) KD N(4) 20 (1) 16(1) 28(1) 3(1) 10(1 ) 3 (1) N(5) 20 (1) 15(1) 28 (1) 3(1) 6(1) 2(1) C(l) 16 (1) 16(1) 17(1) 2(1) 0(1) 3 (1) C(2) 16 (1) 16(1) . 16(1) 2(1) 0(1) 3 (1) C(3) 15 (1) 16(1) 19 (1) 0(1) 3(1) 2 (1) C(4) 14 (1) 16(1) 16(1) 3(1) 1 (1) 3 (1) C(5) 15 (1) 15(1) 14 (1) KD -KD 1(1 ) C(6) 16 (1) 15(1) 17(1) 1 (1)' 0(1) 2 (1) C(7) 19 (1) 14(1) 27 (1) -KD KD 2(1) C(8) 19 (1) 14 ( 1) 25(1) -4 (1) 3 (1) KD C(9) 18 (1) 14(1) 19 (1) 0(1) 1 (1) KD U11 U22 U33 u23 U13 u12 C(10) 17 (1) 19(1) 16(1) 2(1) 1(1) 5(1) C(ll) 14 (1) 18(1) 19(1) 3(1) -1(1) -1(1) C(12) 20 (1) 13 (1) 20(1) 0(1) 0(1) 0(1) C(13) 24 (1) 24 (1) 32(1) -6(1) 4(1) 6(1) C(14) 22 (1) 17 (1) 39(1) -Ki) 7 (1) -5(1 ) C(15) 16 (1) 12(1) 21 (1) 0(1) 3 (1) -2(1) C(16) 23 (1) 16 ( 1) 21(1) 2(1) 1 (1) 1 (1) C(17) 31(1) 21 (1) 17(1 ) o.(D 3 (1) 3 (1) C(18) 26(1) 19 ( 1) 24 ( 1) 2(1) 8(1) 4 (1) C(19) 20 (1 ) 20 (1) 26 (1) 3(1) 0(1 ) 3 (1) C(20) 20 (1) 14 (1) 21(1) 0(1) 0(1) -1(1) C(21) 37(1) 34 (1) 22(1) -3(1) -7(1 ) 11(1) C(22) 38 (1 ) 38 (1) 30(1) -2(1 ) 7 (1) 16 ( 1) C(23) 33 (1) 34(1 ) 23 (1) -4 (1) -7 (1) 13(1 ) C (24) 13 (1 ) 16(1 ) 23 (1) 1(1) 3 (1) 0(1) C(25) 17 (1) 18(1 ) 24(1) 3(1) 3 (1) 0(1) C(26) 20 (1) 17(1) 15(1) 1(1) 1 (1) 2(1) Tabla 14 Coordenadas de Hidrógeno (x 104) y parámetros desplazamiento isotrópico (Á2xl03) para onyx2010a. x y z U(eq) H(3)' -1508 9983 3166 20 H(7A) -2003 5309 1609 24 H (7B) -974 5932 2570 24 H(8A) 552 6554 1154 24 H (8B) -1053 6906 610 24 H(9) -4000 9189 3022 20 H(12) -4863 5137 2202 21 H(13A) -5908 9037 4528 40 H(13B) -7771 9279 4352 40 H(13C) -6305 9845 3621 40 H (14A) -7656 4481 1925 40 H(14B) • -9101 4366 2750 40 H(14C) -7224 4300 3085 40 H(17) -542 13440 5379 28 H(19) -3315 13270 2832 26 H(21A) 1975 12671 5434 46 H(21B) 2798 12366 4385 46 H(21C) 1596 11352 4961 46 H(22A) -4074 13725 5103 51 H (22B) -3849 14592 4168 51 H(22C) -2599 14843 5117 51 H(23A) -2496 12476 1324 44 H (23B) -1945 11221 1508 44 H(23C) -577 12334 1225 44 H(24A) 4208 10135 1350 21 H(24B) 3754 11257 1972 21 H(25A) 2653 10595 -60 24 H(25B) 2114 11687 560 24 H(1N) 5292 (18) 11670 (13) -118 (11) 31(4) H(3N) 6273 (19) 14542 (14) -193 (11) 31(4) H(2N) 6881 (19) 13378 (14) -400 (12) 36(5) Tabla 15 Ángulos de Torsión [|] para onyx2010a. c .2) - N{2) - C(l) - 0(1) 177.74 (12) c 24) -N(2) -C(l) -0(1) 2.58 (17) c i2) - N(2) - C(l) - N(l) -0.33 (17) c k24) -N(2) -C(l) -N(l) -175.49(11 ) c [4) - N(l) - c(D- 0(1) -176.36 (11) c 18) - N(l) - C(D- 0(1) -1.08 (18) c (4) - N(l) - C(l) - N(2) 1.72 (17) c 18) - N(l) - C(l) - N(2) 177.00 (11) c [15) -N(3) -C(2) -N(2) 170.96 (11) c (15) -N(3) -C(2) -C(3) -7.54 (19) c (i) - N(2) - C(2) - N(3) -177.51 (12) c [24) -N(2) -C(2) -N(3) -2.40 (17) c [D - N(2) - C(2)- C(3) 1.18 (17) c [24) -N(2) -C(2) -C(3) 176.30 (11) N (3) - C(2) - C(3) - C(4) 174.92 (13) N (2) - C(2) - C(3) - C(4) -3.63 (18) c (2) - C(3) - C{4) - N(l) 5.10 (19) c (2) - C(3) - C(4) - C(5) -172.25 (12) c (i) - N(l) - C(4)- C(3) -4.08 (18) c (8) - N (1) - C(4) - C(3) -179.16 (12) c (i) - N(l) - C(4) - C(5) 173.41 (Jl) c (8) - N(l) - C(4)- C(5) -1.67 (17) c (3)- C(4)- C(5)- C<6) -166.10 (12) N (1) - C(4) - C(5) - C(6) 16.51 (17) C (3)- C(4) - C(5)- C(9) 14.28 (19) N (1) - C(4) - C(5) - C(9) -163.11 (11) C [9) - C(5) - C(6)- C(12) 3.69(18) C (4)- C(5)- C(6)- C(12) -175.93 (11) C [9) - C(5) - C(6)- C(7) -174.98 (11) C (4) - C(5) - C(6)- C{7) 5 ÷40 (18) C (5)- C(6) - C(7)- C(8) -39.51 (16) C 12) -C(6) -C(7) -C(8) 141.86 (13) c 1) - N(l) - C(8)- C(7) 152.41 (11) C(4) - N(l) -C(8) -C(7) -32.29 (16) C(6) - C(7) -C(8) -N(l) 51.19 (15) C(6)- C(5) -C(9) -C(10) -1.21 (19) C(4) - C(5) -C(9) -C(10) 178.41 (12) C(13) -0(2) -C(10) -C(9) -26.55 (18) C(13) -0(2) -C(10) -C(ll) 155.32 (12) C(5) - C(9) -C(10) -0(2) 178.92 (11) C(5) - C(9) -C(10) -C(ll) -3.02 (19) C(14) -0(3) -C(II)-C(12) 7.02 (18) C(14) -0 (3) -C(ll) -C(10) -173.21 (11 ; 0(2) - C(10) -C(ll) -0(3) 3.21 (16) C(9) - C(10) -C(ll) -0(3) -175.02 (11) 0(2) - C(10) -C(II) -C(12) -177.01 (11) C(9) - C(10) -C(ll) -C(12) 4.76(19) 0(3) - C(ll) -C(12) -C(6) 177.47 (12) C(10) -C (11) -C (12) -C (6) -2.28 (19) C(5) - C(6) -C(12) -C(ll) -1.9 (19) C(7)- C(6) -C(12) -C(ll) 176.67(12) C(2) - N(3 ) -C( 15)-C(20) -72.70 (16) C(2) - N(3) -C(15) -C(16) 114.22 (14) C(20) -C(15) -C(16) -C(17) -0.3 (2) N(3) - C(15) -C(16) -C(17) 172.76 (12) C(20) -C(15) -C(16) -C(21) -178.86(13 ) N(3)- C(15) -C(16) -C(21) -5.84 (19) C(15) -C(16) -C(17) -C(18) 0.7 (2) C(21) -C (16) -C (17) -C(18) 179.27 (14) C(16) -C(17) -C(18) -C(19) -0.5(2) C(16) -C(17) -C(18) -C(22) -179.15 (14) C(17) -C(18) -C(19) -C(20) -0.2 (2) C(22) -C(18) -C(19) -C(20) 178.52 (14) C(18) -C(19) -C(20) -C(15) 0.6 (2) C(18) -C(19) -C(20) -C(23) -175.26 (14) C(16) -C(15) -C(20) -C(19) -0.4 (2) N(3)- C(15) -G(20) -C(19) -173.37 (12) C(16) -C(15) -C(20) -C(23) 175.44(13) N(3) - C(15) -C(20) -C(23) 2.4(2) C(l) -N(2) -C(24) -C(25) 85.94 (13) C(2) -N(2) -C(24) -C(25) -89.49 (13) C(26) -N(4) -C(25) -C(24) -105.34 (14) N(2) -C(24) -C(25) -N(4) 177.45 (10) C (25) -N(4) -C(26) -0(4) -5.4 (2) C(25) -N(4) -C(26) -N(5) 173.13 (12) Los contenidos de todas las referencias (incluyendo referencias de literatura, patentes expedidas, y solicitudes de patente co-pendientes) citadas a través de esta solicitud son de este modo expresamente incorporadas aquí en su totalidad por referencia. A menos que se defina lo contrario, todos los términos técnicos y científicos utilizados aquí son de acuerdo con el significado conocido comúnmente por una persona experimentada en la técnica.

Las personas experimentadas en la técnica reconocen, o pueden comprobar con la experimentación no más que rutinaria, muchos equivalentes de las modalidades específicas de la invención descrita aquí. Tales equivalentes están previstos que son comprendidos por las reivindicaciones siguientes.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por el solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (31)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Un compuesto N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9 , 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea, caracterizado porque está en la forma de un sólido cristalino que consiste de más de 99% por peso de N-{2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea, por lo menos 95% en la forma polimórfica de un polimorfo (I) termodinámicamente estable de N- { 2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilojurea, el polimorfo (I) tiene los siguientes parámetros estructurales obtenidos por análisis de monocristal: Longitud de onda 0.71073 Á Sistema cristalino triclínico grupo espacial P-l Dimensiones de la célula unitaria a=8.1246(4)Á = 91.583(4)°. b = 11.4573(5)Á ß= 90.299(4)°. c =13.2398(6)Á ?=99.628 (4 ) 0. Volumen 1214.56 (10) Á3 Z 2.

2. Un polimorfo cristalino (I) de N- {2- [ (2E) -2-(mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] - isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea caracterizado porque tiene un patrón de difracción de Rayos X en polvo que comprende picos característicos, en términos de 2T, a aproximadamente 10.1° y aproximadamente 12.9°.

3. El polimorfo de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el patrón de difracción de Rayos X en polvo además comprende picos característicos, en términos de 2T, aproximadamente 15.3° y aproximadamente 17.6°.

4. El polimorfo de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el patrón de difracción de Rayos X en polvo comprende por lo menos 5 picos característicos, en términos de 2T, seleccionado desde aproximadamente 6.4°, aproximadamente 10.1°, aproximadamente 12.6o, aproximadamente 12.9°, aproximadamente 13.6°, aproximadamente 14.2°, aproximadamente 14.7o, aproximadamente 15.3°, aproximadamente 15.4°, aproximadamente 15.8o, aproximadamente 17.0°, aproximadamente 17.6°, aproximadamente 18.9°, aproximadamente 20.9°, aproximadamente .22.4°, aproximadamente 22.8°, y aproximadamente 28.7°.

5. El polimorfo de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque tiene un patrón de difracción de Rayos X en polvo substancialmente como se muestra en la Figura 1.

6. El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque tiene una curva de calorimetría de exploración diferencial que muestra un máximo a aproximadamente 248°C.

7. El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque tiene una curva de calorimetría de exploración diferencial de acuerdo con la Figura 4.

8. Una composición sólida caracterizada porque comprende el polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2.

9. La composición de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque por lo menos aproximadamente 50% en peso de la N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, lO-dimetoxi-4 -oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea total en la composición está presente como el polimorfo.

10. La composición de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque por lo menos aproximadamente 70% en peso de N- { 2- [ (2E) -2- (mesitilimino) - 9 , 10-dimetoxi-4 -oxo-6 , 7 -dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea total en la composición' está presente como el polimorfo.

11. La composición de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque por lo menos aproximadamente 90% en peso de N-{2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea total en la composición está presente como el polimorfo.

12. La composición de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque por lo menos aproximadamente 97% en peso de N-{2-[(2E)-2- (mesitilimino) - 9 , 10-dimetoxi-4 -oxo- 6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea total en la composición está presente como el polimorfo.

13. Una composición sólida caracterizada porque comprende el polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2 y, un portador farmacéuticamente aceptable.

14. Una composición sólida caracterizada porque comprende el polimorfo y uno o más compuestos adicionales.

15. La composición sólida de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque el- compuesto adicional es un terapéutico conocido.

16. La composición sólida de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada porque el terapéutico se utiliza para tratar asma, asma alérgica, fiebre de heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructora crónica (COPD) , síndrome de distrés respiratorio del adulto (ARDS) , fibrosis quística, trastornos de la piel, dermatitis atópica, psoriasis, inflamación ocular, isquemia cerebral o enfermedades autoinmunes .

17. La composición sólida de conformidad con la reivindicación 16, caracterizada porque el terapéutico se utiliza para tratar asma o COPD.

18. Un proceso para preparar el polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones l o 2, caracterizado porque comprende : (a) combinar N-{2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi- 4-OXO-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea con un solvente para formar una mezcla, y (b) calentar a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50°C por un tiempo y bajo condiciones apropiadas para formar el polimorfo.

19. Un proceso para preparar el polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque comprende: (a) combinar N- { 2- [ (2E) -2- (mesitilimino) - 9 , 10-dimetoxi-4-OXO-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea con un solvente para formar una mezcla, (b) filtración de la mezcla, (c) calentar a o arriba de una temperatura de aproximadamente 55 °C por un tiempo y bajo condiciones apropiadas para formar el polimorfo; y (d) filtración y secado.

20. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18 o 19, caracterizado porque el solvente es DIVISO, etanol, metanol, isopropanol, hexanos, pentano, acetato de etilo, diclorometano, o cloroformo.

21. El proceso de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el solvente es DMSO o etanol.

22. El proceso de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la mezcla es mantenida a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50 °C por aproximadamente 24 a 96 horas.

23. El proceso de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque la mezcla es mantenida a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50 °C por aproximadamente 72 horas .

24. El proceso de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la mezcla se mantiene a o arriba de una temperatura de aproximadamente 55 °C por aproximadamente 24 a 96 horas.

25. El proceso de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque la mezcla es mantenida a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50 °C por aproximadamente 72 horas .

26. El proceso de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la mezcla se seca in vacuo a entre 25 y 50°C.

27. El proceso de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque la mezcla se seca in vacuo a 40°C.

28. El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 b 2, caracterizado porque es preparado por el método que comprende (a) combinar N-{2-[(2E)-2- (mesitilimino) -9 , 10-dimetoxi-4-0x0-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea con un solvente para formar una mezcla, y (b) calentar a o arriba de una temperatura de aproximadamente 50°C por un tiempo y bajo condiciones apropiadas para formar el polimorfo.

29. El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque es preparado por el método que comprende (a) combinar N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4 -oxo- 6 , 7-dihidro-2H-pirimido [6 , 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea con un solvente para formar una mezcla, (b) filtración de la mezcla, (c) calentar en o arriba de una temperatura de aproximadamente 55°C por un tiempo y bajo condiciones apropiadas para formar el polimorfo; y (d) filtración y secado.

30. Un método para tratar asma, asma alérgica, fiebre de heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructora crónica (COPD) , síndrome de distrés respiratorio del adulto (ARDS) , fibrosis quística, trastornos de la piel, dermatitis atópica, psoriasis, inflamación ocular, isquemia cerebral, o enfermedades autoinmunes, en un mamífero en la necesidad del mismo, caracterizado porque comprende administrar al mamífero la cantidad eficaz de un polimorfo cristalino de N- {2- [ (2E) -2- (mesitilimino) -9, 10-dimetoxi-4-oxo-6, 7-dihidro-2H-pirimido [6, 1-a] -isoquinolin-3 (4H) -il] etilo}urea .

31. El método de conformidad con la reivindicación 3.0, caracterizado porque el mamífero es un ser humano.