KR101860968B1

KR101860968B1 - 피리미도[6,1-ａ]이소퀴놀린-4-원 화합물의 결정 형태

Info

Publication number: KR101860968B1
Application number: KR1020137003934A
Authority: KR
Inventors: 마이클 제이. 에이. 워커; 베르트랑 엠. 씨. 플루비에; 줄리안 에스. 노던; 필립 페르난데스
Original assignee: 베로나 파마 피엘씨
Priority date: 2010-08-09
Filing date: 2011-08-09
Publication date: 2018-05-24
Also published as: SI2603509T1; JP2017002048A; CA2807082C; KR20140009112A; JP6038788B2; MX2013001533A; CN103313985B; BR112013003087A2; DK2603509T3; CN103313985A; RU2013110225A; MX345802B; PL2603509T3; JP2013533301A; MY157432A; TW201213325A; US9062047B2; EP2603509A1; AR082601A1; IL224450B

Abstract

본 발명은 99 중량% 이상의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소로 구성되는 결정성 고체의 형태이고, 다형체 형태의 적어도 95%는 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소의 열역학적으로 안정한 다형체(I)인 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소의 다형체에 대한 것이며, 상기 다형체는 단결정 X-선 구조 분 및 X-선 분말 회절 패턴에 의해 결정된다.

Description

피리미도[6,1-Ａ]이소퀴놀린-4-원 화합물의 결정 형태{CRYSTALLINE FORM OF PYRIMIDO[6,1-A]ISOQUINOLIN-4-ONE COMPOUND}

본 발명은 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노(mesitylimino))-9,10-디메톡시(dimethoxy)-4-옥소(oxo)-6,7-디하이드로(dihydro)-2H-피리미도(pyrimido)[6,1-a]-이소퀴놀린(isoquinolin)-3(4H)-일(yl)]에틸(ethyl)}요소(urea)의 다형체 형태(polymorphic form)에 관한 것이다.

일반적으로 약물들의 다형성 행동들은 약학 및 약리학에서 결정적으로 중요해질 수 있다. 다형체들은 정의에 의하면 결정격자 내의 분자들의 순서의 결과로서 다른 물리적 성질들을 갖는 동일한 분자의 결정들이다. 다형체들에 의해 나타나는 물리적인 성질들의 차이들은 저장 안정성, 압축성과 밀도(제형 내에서와 제품 생산에 중요한) 및 분해 속도들(생물학적 이용 가능성의 결정에 중요한 인자)과 같은 약학적 모수들(pharmaceutical parameters)에 영향을 미친다. 안정성의 차이는 화학적 반응성(예를 들면. 시차 산화(differential oxidation)의 변화로부터 초래될 수 있으므로 복용 형태가 또 다른 다형체로 구성될 때 보다 하나의 다형체로 구성될 때에 보다 빠르게 변색, 기계적 변화들(예를 들면. 동력학적으로 바람직한 다형체가 열역학적으로 보다 안정한 다형체로 전환되면서 저장되는 바스러진 정제들) 혹은 이들 모두(예를 들면, 하나의 다형체의 정제들이 높은 습도에서 파쇄에 보다 민감하다)로 된다. 용해도/분해 차이들의 결과로서, 극한의 경우에 있어서, 일부 다형체 전이들은 효능의 결핍을 가져오거나 다른 극한에서 독성을 초래한다. 또한, 상기 결정의 물리적인 성질들은 처리에 중요할 수 있다. 예를 들면, 하나의 다형체는 용매 화합물들(solvates)을 형성하기가 보다 쉽거나 여과 및 불순물들을 제거하는 데 어려울 수 있다(즉, 입자 형태 및 크기 분포가 다른 것에 대해 하나의 다형체가 다를 수 있다).

각각의 제약 화합물은 최적의 치료 혈액 농도 및 치명적인 농도를 가진다. 상기 화합물의 생물학적 이용 가능성은 이상적인 혈액 레벨을 수득하는 데 필요한 약물 제형 내의 복용 강도를 결정한다. 상기 약물이 생물 활성이 다른 둘 또는 그 이상의 다형체들로서 결정화될 수 있을 경우, 최적의 용량은 상기 제형 내에 존재하는 다형체에 의존하게 될 것이다. 일부 약물들은 치료적 및 치명적 농도들 사이의 좁은 마진을 나타낸다. 클로르암페니콜(chloramphenicol)-3-팔미테이트(palmitate)(CAPP)는, 예를 들면, 적어도 3개의 다형체 형태들과 하나의 비정질 형태에서 결정화되는 것으로 알려진 넓은 스펙트럼 항생 물질이다. 가장 안정한 A형은 시판되고 있다. 이러한 다형체와 다른 B형 사이의 생물 활성의 차이는, 처리 및/또는 저장 동안의 변형들로 인하여 자신도 모르게 형태 B형으로서 투여하였을 경우에 화합물의 치명적인 과량 투여의 가능성을 발생시키는 여덟의 인자이다. 이에 따라, 미국 식품 의약국(FDA)과 같은 관리 기관들은 고체 투약 형태들 내의 활성 화합물의 다형체 함량에 대해 엄격한 관리를 시작하였다. 일반적으로, 다형체 형태들 내에 존재하는 약물들을 위하여, 순수하고 열역학적으로 바람직한 다형체 이외에 어떤 것이 시판될 경우, 관리 기관은 배치(batch)마다의 모니터링을 요구할 것이다. 따라서, 의료적 및 상업적인 이유들 모두를 위하여 실질적으로 다른 동력학적으로 바람직한 다형체들이 없는 그의 가장 열역학적으로 안정한 다형체 내에 순수한 약물을 생산하고 판매하는 것이 중요해진다.

여기에 참조로 포함된 미국 특허 제6,794,391호, 미국 특허 제7,378,424호 및 미국 특허 제7,105,663호에는 다음 화학식과 같은 화합물 RPL-554(N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노(mesitylimino))-9,10-디메톡시(dimethoxy)-4-옥소(oxo)-6,7-디하이드로(dihydro)-2H-피리미도(pyrimido)[6,1-a]-이소퀴놀린(isoquinolin)-3(4H)-일(yl)]에틸(ethyl)}요소(urea)가 개시되어 있다.

(Ⅰ) RPL-554

덜 안정한 다형체들이나 비정질 형태들에 대하여 안정성, 압축률, 밀도, 용해 속도, 향상된 효능이나 독성 효과의 결여를 포함하는 이점들을 가지는, RPL-554의 안정한 다형체의 조성물을 제공하는 것이 유익할 것이다.

일 측면에 있어서, 본 발명은 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노(mesitylimino))-9,10-디메톡시(dimethoxy)-4-옥소(oxo)-6,7-디하이드로(dihydro)-2H-피리미도(pyrimido)[6,1-a]-이소퀴놀린(isoquinolin)-3(4H)-일(yl)]에틸(ethyl)}요소(urea)(RPL-554)의 다형체 형태(polymorphic form)를 제공한다. 이의 특유한 안정성 성질들의 결과로서, 이러한 다형체(polymorph)는 높은 순도의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노(mesitylimino))-9,10-디메톡시(dimethoxy)-4-옥소(oxo)-6,7-디하이드로(dihydro)-2H-피리미도(pyrimido)[6,1-a]-이소퀴놀린(isoquinolin)-3(4H)-일(yl)]에틸(ethyl)}요소(urea)를 이의 가장 열역학적으로 안정한 다형체 형태로 제공한다.

다른 측면에 있어서, 본 발명은 99 중량% 이상의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소로 구성되는 결정성 고체의 형태이고, 다형체 형태에서 적어도 95%가 열역학적으로 안정한 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소의 다형체 (I)이며, 상기 다형체 (I)이 단결정 해석에 의해 얻어지는 다음의 구조 모수들(structural parameter)을 가지는 화합물 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소를 제공한다.

파장(wavelength) 0.71073Å

결정계(crystal system) 삼사정계(Triclinic)

공간군(space group) P-1

단위 셀 치수들(Unit cell dimensions) a＝8.1246(4)Å α＝91.583(4)°.

b＝11.4573(5)Å β＝90.299(4)°.

c＝13.2398(6)Å γ＝99.628(4)°.

부피(volume) 1214.56(10)Å³

Z 2.

다른 측면에 있어서, 본 발명은 2θ에 대하여 약 10.1° 및 약 12.9°에서 특성 피크들들 포함하는 분말 X-선 회절 패턴(powder X-ray diffraction pattern)을 갖는 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소의 결정성 다형체 (I)을 제공한다.

어떤 실시예들에 있어서, 상기 분말 X-선 회절 패턴은, 2θ에 대하여, 약 15.3° 및 약 17.6°에서 특성 피크들을 더 포함할 수 있다. 다른 실시예에 있어서, 상기 분말 X-선 회절 패턴은, 2θ에 대하여, 약 6.4°, 약 10.1°, 약 12.6°, 약 12.9°, 약 13.6°, 약 14.2°, 약 14.7°, 약 15.3°, 약 15.4°, 약 15.8°, 약 17.0°, 약 17.6°, 약 18.9°, 약 20.9°, 약 22.4°, 약 22.8° 및 약 28.7°에서로부터 선택되는 적어도 5개의 특성 피크들을 포함한다. 어떤 실시예들에 있어서, 상기 다형체는 실질적으로 도 1에 도시한 바와 같은 분말 X-선 회절 패턴을 가진다. 다른 실시예들에 있어서, 상기 다형체는 약 248℃에서 최대를 나타내는 시차주사 열량법 트레이스(differential scanning calorimetry trace)를 가진다.

다양한 실시예들에 있어서, 상기 다형체는 실질적으로 도 2에 도시한 바와 같은 시차주사 열량법 트레이스를 가진다. 다른 측면에 있어서, 본 발명은 여기서 설명하는 상기 다형체를 포함하는 고체 조성물을 제공한다. 일 실시예에 있어서, 본 발명은 상기 조성물 내에 적어도 전체로 약 50 중량%의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소가 상기 다형체로서 존재하는 조성물을 제공한다. 다른 실시예들에 있어서, 본 발명은 상기 조성물 내에 전체로 적어도 약 70 중량%의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소가 상기 다형체로서 존재하는 조성물을 제공한다. 다른 실시예들에 있어서, 본 발명은 상기 조성물 내에 전체로 적어도 약 90 중량%의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소가 상기 다형체로서 존재하는 조성물을 제공한다. 다른 실시예들에 있어서, 본 발명은 상기 조성물 내에 전체로 적어도 약 97 중량%의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소가 상기 다형체로서 존재하는 조성물을 제공한다. 다른 실시예에 있어서, 본 발명은 여기서 설명하는 상기 다형체 및 약학적으로 허용 가능한 운반체(carrier)를 포함하는 고체 조성물을 제공한다. 어떤 실시예들에 있어서, 상기 고체 조성물은 상기 다형체 및 하나 또는 그 이상의 추가적인 화합물들을 포함한다.

다른 실시예에 있어서, 상기 추가적인 화합물은 알려진 치료제(therapeutic)이다.

어떤 실시예들에 있어서, 상기 치료제는 천식(asthma), 알레르기 천식(allergic asthma), 고초열(hay fever), 알레르기 비염(allergic rhinitis), 기관지염(bronchitis), 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease: COPD), 성인 호흡곤란 증후군(adult respiratory distress syndrome: ARDS), 낭포성 섬유증(cystic fibrosis), 피부 질환들(skin disorders), 아토피 피부염(atopic dermatitis), 건선(psoriasis), 안구 염증(ocular inflammation), 뇌 허혈증(cerebral ischaemia) 또는 자가면역성 질병들(auto-immune diseases)의 치료에 사용된다.

다른 실시예들에 있어서, 본 발명은 상기 치료제가 천식 또는 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)의 차료에 사용되는 고체 조성물을 제공한다. 어떤 측면들에 있어서, 본 발명은,

(a) N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소를 용매와 결합하여 혼합물을 형성하는 단계; 및

(b) 약 50℃ 또는 그 이상의 온도에서 잠시 동안 상기 다형체를 형성하기 위한 적합한 조건들 하에서 가열하는 단계를 포함하는 본 발명의 다형체를 제조하기 위한 공정을 제공한다.

어떤 측면들에 있어서, 본 발명은,

(a) N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소를 용매와 결합하여 혼합물을 형성하는 단계;

(b) 상기 혼합물의 여과 단계;

(c) 약 55℃ 또는 그 이상의 온도에서 잠시 동안 상기 다형체를 형성하기 위한 적합한 조건들 하에서 가열하는 단계; 및

(d) 여과 및 건조하는 단계를 포함하는 본 발명의 다형체를 제조하기 위한 공정을 제공한다.

어떤 실시예들에 있어서, 상기 용매는 디메틸설폭사이드(DMSO), 에탄올(ethanol), 메탄올(methanol), 이소프로판올(isopropanol), 헥산(hexanes), 펜탄(pentane), 아세트산 에틸(ethyl acetate), 디클로로메탄(dichloromethane) 또는 클로로포름(chloroform)이다. 다른 실시예에 있어서, 상기 용매는 디메틸설폭사이드(DMSO) 또는 에탄올이다.

다른 실시예에 있어서, 상기 혼합물은 약 50℃ 또는 그 이상의 온도에서 약 24 시간 내지 약 96 시간 동안 유지된다. 다른 실시예에 있어서, 상기 혼합물은 약 50℃ 또는 그 이상의 온도에서 약 72 시간 동안 유지된다. 다른 실시예들에 있어서, 상기 혼합물은 약 55℃ 또는 그 이상의 온도에서 약 24 시간 내지 96 시간 동안 유지된다. 다양한 실시예들에 있어서, 상기 혼합물은 약 55℃ 또는 그 이상의 온도에서 약 72 시간 동안 유지된다.

다른 실시예들에 있어서, 상기 혼합물은 진공 내에서(in vacuo) 25℃ 내지 50℃ 사이에서 건조된다. 다른 실시예에 있어서, 상기 혼합물은 진공 내에서 40℃에서 건조된다.

다른 실시예에 있어서, 본 발명은,

(b) 약 50℃ 또는 그 이상의 온도에서 잠시 동안 상기 다형체를 형성하기 위한 적절한 조건들 하에서 가열하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조되는 상술한 바와 같은 다형체를 제공한다.

다른 실시예에 있어서, 본 발명은,

(b) 상기 혼합물의 여과 단계;

(c) 약 55℃ 또는 그 이상의 온도에서 잠시 동안 상기 다형체를 형성하기 위한 적절한 조건들 하에서 가열하는 단계; 및

(d) 여과 및 건조하는 단계를 포함하는 방법에 의해 제조되는 상술한 바와 같은 다형체를 제공한다.

다른 측면에 있어서, 본 발명은 천식(asthma), 알레르기 천식(allergic asthma), 고초열(hay fever), 알레르기 비염(allergic rhinitis), 기관지염(bronchitis), 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease: COPD), 성인 호흡곤란 증후군(adult respiratory distress syndrome: ARDS), 낭포성 섬유증(cystic fibrosis), 피부 질환들(skin disorders), 아토피 피부염(atopic dermatitis), 건선(psoriasis), 안구 염증(ocular inflammation), 뇌 허혈증(cerebral ischaemia), 또는 자가면역성 질병들(auto-immune diseases)을 겪는 포유동물에서 치료의 방법을 제공하며, 상기 방법은 결정성 다형체 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소의 결정성 다형체의 효과적인 양을 상기 포유동물에 투여하는 단계를 포함한다. 일 실시예에 있어서, 상기 포유동물은 인간이다.

RPL554의 비정질 형태(amorphous form)는 어떤 조건들 하에서 다양한 정도로 다양한 다형체 형태들로 변형될 수 있으며 저장 공간상에서 변형될 수 있기 때문에 덜 안정하다. 또한 순도뿐만 아니라 불순물 프로파일에 관하여 요구되는 cGMP 설계 명세 내에서 지속적으로 상기 비정질 형태를 대규모로 생산하는 점은 보다 많은 것이 요구된다. 상기 비정질 형태는 이에 따라 어떤 제형 응용들을 위하여 RPL554의 재생산 가능한 균일한 미세화된 건조 고체 분말의 개발에 도전 기회들을 제공한다. 반면에 결정성 다형체 Ⅰ형(crystalline polymorph Form I)은 활성 약학 성분(active pharmaceutical ingredient: API)으로서 보다 일관성 있고 재생산 가능한 공정으로 고체 RPL554를 제공하도록 큰 cGMP 규모로 보다 빠르게 제조될 수 있다. 결정성 다형체 Ⅰ형 제품을 위한 정제 및 분리 공정들은 대규모 cGMP 생산을 위해 보다 수정 가능하다. 전술한 이점들은 요구되는 cGMP 설계 명세들 내에서 일정한 제품 배치들을 제공하게 한다. 본 발명의 일 측면에서 나타낸 바와 같이, 결정성 다형체 Ⅰ형은 RPL554의 가장 열역학적으로 안정한 다형체 형태이며, 또한 저장 동안에 가장 긴 유통 기한을 가지는 것으로 예측된다. 이러한 이점은 API로서 안정한 V을 함유하는 임의의 상업적인 RPL554 약물 제품의 잠재적인 유통 기한까지 보다 확장되어야 한다. 또한, 결정성 다형체 Ⅰ형은 어떤 제약학적 제형 응용들을 위하여 재생산 가능하고 균일하게 미세화된 RPL554의 고체 분말의 개발을 위해 더 수정 가능하다.

결정 형태(Ⅰ형으로 표기된) 내에 존재하는 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소(RPL554)의 연구는, 상기 물질이 변화에 매우 탄력적이었으며, Ⅰ형이, 수행된 연구의 한계들 내에서 알려진 물질의 가장 안정한 다형체 형태였던 점을 나타내었다(실험 참조).

실험의 범위는 화합물의 새롭고 순수한 다형체들의 존재를 발견하기 위하여 적용되었다. 이들은 반용매(anti-solvent) 첨가; 포화 용액 작업; 슬러리 숙성; 정형적인 재결정화; 혼합 용매 연구들; 및 수중 시스템 결정화이다.

비정질 상(phase)의 발생이 이루어졌으며, 이는 또한 변화가 유도되었던 몇몇의 실험들만을 제외하고는 Ⅰ형이 우세하였던 바와 같이 유사한 결론적인 결과들을 갖는 연구들의 일부에 이용되었다. 변화가 작은 규모로 유도되었던 경우들에 있어서, 이러한 변화가 용매화(solvation)나 용매화되지 않은(non-solvated) 실체로 인한 것인지를 결정하도록 상기 형태들(순수하고 혼합된)을 완전히 특징짓기 위하여 결정화 규모를 크게 하는 시도들이 이루어졌다. 대부분의 경우들에 있어서, 이러한 결정화들과 전체적인 시스템들의 안정성들을 반복하는 데 요구되는 공정 변수들의 섬세한 성질로 인하여, Ⅰ형이 회귀되었다. 주요한 예외는 디메틸설폭사이드(DMSO)였고, 여기서 잠재적으로 높은 용융 상이 Ⅰ형과 상기 물질의 분해 순환 내에서 후속하는 주요 용융을 갖는 혼합물로서 관찰되었다. 이러한 규모가 확대되고 각기 다르지만 결국은 가장 그럴듯한 덜 안정한 형태 및/또는 용매 화합물을 나타내는 2개의 다른 변경된 상들로 디메틸설폭사이드(DMSO)가 회귀시켰던 점은 주목할만하다.

이전의 보고들은 비정질 물질이 용융물의 크래쉬 냉각(crash cooling)에 의해 발생될 수 있는 점을 제시하였다. DCM으로부터의 빠른 증발이 탄탄한 방법을 제공하였던 반면, 용융물의 크래쉬 냉각은 단순한 분해를 초래하였다(XRPD로 비정질이지만, HPLC 분석으로는 ＜20% 제품).

역사적으로는 공정으로 수득된 내부에서 생산된 물질이 비정질이거나 결정형인지가 알려져 있지 않기 때문에, 용해도 시도들이 보다 안정한 점을 제공하는 비정질 상을 갖는 가이드로서 작용하는 이들 물질들 모두를 위해 반복되었다.

결국, Ⅰ형은 열역학적으로 바람직한 상으로서와 분리된 물질의 변경된 물리적인 존재, 예를 들면 분말에 대한 보다 큰 결정성 측면을 참조하여 상기 결정형 또는 비정질 물질이 성공적으로 구현되었는지에 대한 조작의 해석으로서 나타났었다.

이러한 물질의 진전 동안의 유의점은 인가되는 압력이 XRPD 및 DSC에 의해 표시되는 바와 같이 비정질 물질이 되는 것으로 가정된 발생을 초래하였던 점이다. 이러한 물질을 위한 열적 프로파일은 얻어진 Ⅰ형의 경우에 매우 근접하는 발열성(exothermic) 결정화와 후속하는 흡열 용융(melting endotherm)을 나타내었다. 이는 보다 많은 물질로서 반복하며 발열성 사건 후의 제품을 분리하고 XRPD 및 HPLC에 의해 점검함으로써 증명될 수 있었다.

도 1：RPL554 측정된 데이터(상부)에 대한 시뮬레이션된 단결정 데이터(하부)의 비교.
도 2：두 세타 범위(5-13 2θ)의 확장 비교.
도 3：RPL554를 위한 투과 XRPD 프로파일.
도 4：RPL554를 위한 DSC/TGA 트레이스.
도 5：DMSO/헵탄 반용매 첨가들(CG1099)의 XRPD 비교들.
도 6：RPL554와 포화 용액 결정들로부터 얻어진 디메틸설폭사이드(DMSO)의 XRPD 비교(JN376A4).
도 7：RPL554 입력과 포화 DMSO 용액으로부터의 새로운 형태의 DSC 오버레이(JN376A4).
도 8：모든 시리즈들을 위해 Ⅰ형을 나타내는 슬러리 숙성의 선택된 결과들.
도 9：수용성 혼합된 결정들을 위한 XRPD 프로파일들(실험 PF86).
도 10：245℃로부터의 RPL554 Ⅰ형의 크래쉬(Crash) 냉각된 용융(PF84로서 수행됨).
도 11：크래쉬 냉각된 RPL554를 위한 DSC 프로파일(245℃로부터, PF84).
도 12：연마된 RPL554 Ⅰ형을 위한 DSC 프로파일.
도 13：압축된 샘플과 최초 물질 RPL554의 XRPD 비교(CG1099 F).
도 14：가압을 통한 비정질 물질과 RPL554 DSC의 DSC 비교.
도 15：RPL554와 DCM으로부터의 비정질 RPL554의 배치의 DSC 비교(JN376).
도 16：RPL554(CG1099 SM)와 비정질 물질의 XRPD 분석(JN376F).
도 17: RPL554 Ⅰ형을 갖는 PF89A4(DMSO)를 위한 XRPD 비교.
도 18：DMSO 규모가 확대된 결정화 PF90을 위한 결합된 DSC/TGA.
도 19：RPL554 Ⅰ형에 대한 혼합된 상 형태 DMSO의 XRPD 비교(PF90).
도 20：X-선 회절에 의해 분석된 RPL554를 위한 결과적인 형태.
도 21：RPL554 체계(framework)에 수반되는 수소 결합.
도 22：RPL554를 위한 패킹모티브(packing motif).

결정 형태(Ⅰ형으로 지정된) 내에 존재하는, N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노(mesitylimino))-9,10-디메톡시(dimethoxy)-4-옥소(oxo)-6,7-디하이드로(dihydro)-2H-피리미도(pyrimido)[6,1-a]-이소퀴놀린(isoquinolin)-3(4H)-일(yl)]에틸(ethyl)}요소(urea)(RPL554)의 연구는 상기 물질이 변화에 매우 탄력적이며 Ⅰ형이 수행된 연구의 한계 내에서 알려진 물질의 가장 안정한 다형체(polymorphic form)였던 점을 보여주었다. 실험의 범위는 이러한 연구들 내에서 비정질 물질의 사용을 포함하여 이를 시험하기 위하여 적용되었다. 생산에 따른 양자의 상들은 변화가 유도되었던 몇몇의 실험들만을 제외하고는 Ⅰ형이 우세하였던 점을 보여준다. 변화가 작은 규모로 유도되었던 경우에, 변화가 용매화나 용매화되지 않은 존재로 인한 것인지를 결정하도록 상기 형태들(순수하고 혼합된)을 완전히 특징짓기 위하여 결정화 규모를 크게 하는 시도들이 이루어졌다. 대부분의 경우들에 있어서, 이러한 결정화들과 전체적인 시스템들의 안정성들을 반복하는 데 요구되는 공정 변수들의 섬세한 특성으로 인하여, Ⅰ형이 복귀되었다. 주요한 예외는 디메틸설폭사이드(DMSO)였고, 여기서 잠재적으로 높은 용융 상이 Ⅰ형과 상기 물질의 분해 순환 내에서 후속하는 주요 용융을 갖는 혼합물로서 관찰되었다.

이전의 보고들은 비정질 물질이 용융물의 크래쉬(crash) 냉각에 의해 발생될 수 있는 점을 제시하였다. DCM으로부터의 신속한 증발이 강건한 방법을 제공하였던 반면, 용융물의 크래쉬 냉각은 단순한 분해를 초래하였다(XRPD로 비정질이지만, HPLC 분석으로는 ＜20% 제품).

결국, Ⅰ형은 열역학적으로 바람직한 상으로서와 분리된 물질의 변경된 물리적인 존재, 예를 들면 분말에 대한 보다 큰 결정성 측면을 참조하여 상기 결정형 또는 비정질 물질이 성공적으로 구현되었는지에 대한 조작의 해석으로서 나타났었다. 이러한 점을 바탕으로 하여, 3의 시험적인 결정화들이 단결정 분석을 위해 적합한 물질을 성장시키고 고품질의 분말 데이터를 수득함과 함께 수행되는 색인(indexing)과 단위 셀 개선을 보충하려는 목적으로 시작되었다.

X-선 분말 회절(X-ray powder diffraction: XRPD)은 관심이 있는 제약학적 제품의 흔적(fingerprint)을 얻기 위한 이상적인 도구이다. 이상적으로는, 상기 분말 데이터는 특유의 XRPD를 갖는 독특한 결정 형태에 연관될 것이다. 3차원(3D)으로부터 2차원(2D)까지의 결정학적 정보의 붕괴로 인하여, 통상적인 XRPD는 높은 두 세타 값들에서 회절되는 피크들의 중첩을 보여줄 것이다. 이러한 사실로 인하여, 비록 최근 몇 년에 방대한 진전들이 이루어졌지만, 분말 패턴의 색인화(단위 셀 변수들에 대해 데이터를 연관시키는 것)는 도전적인 단계로 남아 있다.

여기서 제시되는 데이터는 RPL554의 정확한 단위 셀 변수들 에 잠재적으로 연관된다. 소프트웨어 내의 알고리즘은 이점을 갖는 도면들과 함께 단위 셀 설정들의 출력을 가능하게 한다. 이러한 값들이 보다 높아질수록, 정확한 단위 셀을 수득하는 기회들도 높아진다.

X-선 분말 회절(XRPD) PANalytical X'Pert PRO: X-선 분말 회절 패턴들이, Cu Kα 방사(45㎸, 40㎃), θ-θ 고니오미터(goniometer), 포커싱 거울, 발산 슬릿(1/2''), 입사 및 발산 빔(4㎜) 모두에서의 솔러(soller) 슬릿들 그리고 PIXcel 검출기(detector)를 이용하여 PANalytical 회절기(diffractometer) 상에 수집되었다. 데이터 수집에 사용된 소프트웨어는 X'Pert 데이터 수집기(Data Collector), 2.2f 버전이었고, 상기 데이터는 X'Pert 데이터 뷰어(Data Viewer), 1.2d 버전을 이용하여 제시되었다.

샘플들은 주위 조건들 하에서 시험되었고 수용된 바와 같은 분말로서 투과 포일 XRPD에 의해 분석되었다. 대략 2㎎-5㎎의 샘플이 폴리이미드(polyimide)(카프론(Kapton), 12.7㎛ 두께) 필름 상에 지지되는 96의 위치 샘플 플레이트 상에 장착되었다. 데이터는 계속적인 스캔(0.146° 2θ/s의 속도)으로 3°-40° 2θ의 범위에서 수집되었다.

시차주사 열량법(Differential Scanning Calorimetry: DSC): DSC 데이터는 PerkinElmer Pyris 4000 DSC 상에 수집되었다. 이러한 기구는 보증된 인듐을 사용하여 에너지 및 온도 눈금이 입증되었다. 상기 샘플의 밀리그램(㎎) 단위의 미리 정의된 양을 알루미늄 팬(pan)으로 천공되고 통상적으로 30℃로부터 350℃까지 20℃.min^-1로 가열되거나 기술된 실험에 따라 변화된 핀 내에 위치시켰다. 상기 기구 제어와 데이터 분석은 Pyris 소프트웨어(Software) v9.0.1.0174이었다.

열-중량 분석(Thermo-Gravimetric Analysis: TGA): TGA 데이터는 20의 위치 오토샘플러(autosampler)를 구비하는 Pyris 1 TGA 상에서 수집되었다. 상기 기구는 보증된 인듐을 이용하여 눈금이 매겨졌다. 상기 샘플의 밀리그램 단위의 미리 정해진 양이 미리 무게를 측정한 알루미늄 도자기 상에 로드되었고 주위 온도로부터 400℃까지 40℃min^-1로 가열되었다. 상기 샘플에 대해 20ml min^-1로 질소 퍼지(purge)가 유지되었다. 상기 기구 제어 및 데이터 분석은 Pyris Software v9.0.1.0174로 수행되었다.

중량 증기 수착(Gravimetric Vapour Sorption: 수착 등온선들은 Hiden Isochema 수분 수착 분석기(analyser)(모델 IGAsorp)를 이용하여 얻어지고, IGAsorp Systems Software V6.50.48을 이용하여 제어된다. 상기 샘플은 상기 기구 제어에 의해 일정한 온도(25℃)에서 유지되었다. 습도는 건조 및 습윤 질소의 흐름들을 250ml min^-1의 전체적인 흐름과 혼합하여 조절되었다. 상기 기구는 3개의 눈금이 매겨진 로트로닉 염(Rotronic salt) 용액들(10%-50%-88%)을 측정함에 의해 대 습도 함량을 위해 입증되었다. 상기 샘플의 중량 변화는 미량 천칭(microbalance)(+/- 0.005㎎의 정확도)에 의해 습도의 함수로서 모니터되었다. 샘플의 정의된 양이 주위 조건들 하에서 중량이 측정된 그물 스테인리스 바스켓 내에 놓여졌다. 일정한 온도(25℃)와 10%-90% 범위(각 습도 레벨들 위하여 90분)에 대해 10% RH 간격들에서 2 스캔들(수착 및 탈착)로 구성된 완전한 실험 사이클. 이러한 유형의 실험은 연구된 잘 결정된 습도 범위들의 세트에 대해 수분을 흡수하는(혹은 그렇지 않은) 샘플들의 능력을 입증하여야 한다.

핵자기 공명(Nuclear Magnetic Resonance: NMR)¹H: NMR 스펙트럼들은 오토-샘플러(auto-sampler)를 구비하고 DRX400에 의해 제어되는 Bruker 270㎒ 기구상에서 수집되었다. 자동화된 실험들은 Delta NMR Processing ＆ Control Software version 4.3을 이용하여 획득되었다. 다르게 설명하지 않는 한, 샘플들은 d6-디메틸설폭사이드(DMSO) 내에서 제조되었다. 분석은 ACD/Specmanager 7.11을 이용하여 수행되었다.

HPLC에 의한 열역학적 수중 용해도(Thermodynamic Aqueous Solubility): 수중 용해도는 모(parent) 화합물의 ≥20㎎ml^-1의 최대의 최종적인 농도를 얻도록 HPLC 등급 물 내에 충분한 화합물을 현탁시킴에 의해 결정되었다. 상기 현탁액은 25℃에서 24시간 동안 평형이 되었다. 상기 현탁액은 이후에 필터를 통해 HPLC 유리병으로 여과되었다. 상기 여과물은 이후에 적절한 요소에 의해 희석되었다. 정량화는 아세토니트릴(acetonitrile): 물(1:1) 내의 대략 0.5㎎.ml^-1의 표준 용액을 참조하여 HPLC에 의해 수행되었다. 표준의 희석되고 희석되지 않은 샘플 용액들의 다른 부피들이 주입되었다. 용해도는 표준 주입 내의 주요 피크로서 동일한 유지 시간 동안 발견된 피크의 통합에 의해 결정되는 피크 영역들을 이용하여 계산되었다.

분석은 데이터 처리를 위해 Chemstation Rev.B.01.03 소프트웨어를 이용하여 UV 검출기(DAD 또는 VWD)@254㎚를 구비하는 Agilent 1100 시리즈 액체 크로마토그래피(chromatography) 상에서 수행되었다. 화학적 순도는 HPLC에 의해 결정되었다.

약학 조성물들(Pharmaceutical Compositions)

본 발명의 약학 조성물들은 하나 또는 그 이상의 약학적으로 허용 가능한 운반체들과 함께 조제된 본 발명의 다형체를 치료적으로 효과적인 양으로 포함한다. 여기서 사용되는 바와 같이, "약학적으로 하용 가능한 운반체(pharmaceutically acceptable carrier)"라는 용어는 비독성, 비활성 고체, 반고체 또는 액체 충진제(filler), 희석제(diluent), 캡슐화하는 물질 혹은 임의의 유형의 제형 보조제를 의미한다. 본 발명의 약학 조성물들은 인간들과 다른 동물들에게 경구로(orally), 직장으로(rectally), 비경구적으로(parenterally), 낭내로(intracisternally), 질내로(intravaginally), 복막으로(intraperitoneally), 국소적으로(topically)(분말들, 연고들 또는 액적들에 의하는 바와 같은), 구강으로(buccally), 또는 구강이나 비강 분무로서 투여될 수 있다. 약물 투여의 다른 루트들은 정량식 흡입기(metered dose inhaler: MDI)나 분무기로 본 발명의 약학 조성물들의 용액이나 현탁액으로부터의 약제의 흡입, 또는 건조 분말 흡입기(DPI)로부터 부형제(excipient) 또는 본 발명의 약학 조성물들과 일반적으로 혼합된 본 발명의 다형체의 치료적으로 효과적인 양을 포함하는 분말화된 약물의 흡입을 포함한다.

경구 투여를 위한 액상 복용 형태들은 약학적으로 허용 가능한 에멀젼들(emulsions), 마이크로에멀젼들, 용액들, 현탁액들(suspensions), 시럽들, 그리고 엘렉시르제(elixirs)를 포함한다. 상기 활성 화합물들에 추가적으로, 상기 액상 복용 형태들은, 예를 들면, 물, 알코올이나 다른 용매들과 같은 비활성 희석제들, 용매화제들(solubilizing agents) 그리고 에틸 알코올(ethyl alcohol), 이소프로필 알코올(isopropyl alcohol), 에틸 카보네이트(ethyl carbonate), 아세트산 에틸(ethyl acetate), 벤질 알코올(benzyl alcohol), 벤질 벤조에이트(benzyl benzoate), 프포필렌 글리콜(propylene glycol), 1,3-부틸렌 글리콜(butylene glycol), 폴리소르베이트(polysorbate), 디메틸포름아미드(dimethylformamide), 오일들(특히, 목화씨, 땅콩, 옥수수, 미생물(germ), 올리브, 아주까리(castor) 및 참깨 오일들), 모노- 혹은 디-글리세리드(di-glycerides), 글리세롤(glycerol), 테트라하이드로푸르푸릴 알코올(tetrahydrofurfuryl alcohol), 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycols) 및 소르비탄(sorbitan)의 지방산 에스테르(fatty acid esters) 및 이들의 혼합물들과 같은 유화제들(emulsifiers)과 같은 해당 기술 분야에서 이용되는 비활성 희석제들을 함유할 수 있다. 비활성 희석제들 이외에도, 상기 경구 조성물들은 또한 습윤제들(wetting agents), 유화 및 현탁화제들, 항산화제들(antioxidants), 감미(sweetening), 착향(flavoring) 및 방향(perfuming)제들과 같은 보조제들(adjuvants)을 포함할 수 있다. 상기 액상 복용 형태는 또한 젤라틴 캡슐 내에 캡슐화될 수 있으며, 여기서 본 발명의 화합물이, 예를 들면, 하나 또는 그 이상의 용매화제들(예를 들면, 폴리소르베이트(polysorbate) 80과 모노 및 디글레세리드들)을 함유하는 약학적으로 허용 가능한 운반체들과 다른 적절한 부형제들(예를 들면, 아스코르빌 팔미테이트(ascorbyl palmitate)와 같은 항산화제들, 또는 감미 혹은 착향제) 내에 용해될 수 있다.

주사 가능한 제조들, 예를 들면, 살균된 주사 가능한 수용성이나 지용성 현탁액들이 적절한 분산이나 습윤제들과 현탁화제들을 이용하는 해당 기술 분야에서 알려진 바에 따라 제형될 수 있다. 상기 살균된 주사 가능한 제조는 또한 비독성의 비격구적으로 수용 가능한 희석제나 예를 들면 1,3-부타니디올(butanediol)과 같은 용액으로서 용매 내의 살균된 주사 가능한 용액, 현탁액 또는 에멀젼이 될 수 있다. 허용 가능한 운반체들과 용매들 중에서 적용될 수 있는 것은 물, 링거액(Ringer's solution), U.S.P 및 등장성의 염화나트륨 용액이다. 또한, 살균되고 고정된 오일들이 용매나 현탁화 매체로서 통상적으로 적용된다. 이러한 목적을 위하여, 합성 모노- 또는 디글리세리드들을 포함하는 임의의 혼합되고 고정된 오일이 적용될 수 있다. 또한, 올레산(oleic acid)과 같은 지방산들이 주사 가능한 것의 제조에 사용된다.

약물의 효과를 연장시키기 위하여, 피하의(subcutaneous) 또는 근육 내의(intramuscular) 주사로부터 약물의 흡수를 늦추는 것이 자주 바람직하다. 이는 낮은 수중 용해도를 갖는 결정성이나 비정질 물질의 액상 현탁액의 사용에 의해 구현될 수 있다. 약물의 흡수 속도는 이후에 그의 분해 속도에 의존하며, 달리 말하면, 결정 크기와 결정 형태에 의존할 수 있다. 선택적으로는, 비경구적으로 투여된 약물 형태의 지연된 흡수는 상기 약물을 오일 운반체 내에 용해시키거나 현탁시킴에 의해 이루어진다. 즉각적인 방출도 본 발명에서 고려된다.

직장의(rectal) 또는 질의(vaginal) 투약을 위한 조성물들은 바람직하게는 본 발명의 화합물들과 코코아 버터와 같은 적절한 비자극성 부형체들이나 운반체들을 혼합하여 제조될 수 있는 좌약들(suppositories), 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol) 또는 주위 온도에서는 고체이지만 체온에서는 액체이여 이에 따라 직장이나 질내 공동에서 용해되고 활성 화합물 다형체를 방출하는 좌약 왁스이다.

유사한 유형의 고체 조성물들이 또한 젖당이나 유당뿐만 아니라 고분자 폴리에틸렌 글리콜들 및 이와 유사한 것들로서 이러한 부형체들을 사용하여 부드럽고 및 딱딱하게 충진된 젤라틴 캡슐들 내의 충진제들로서 적용될 수 있다.

상기 활성 다형체들은 또한 전술한 바와 같은 하나 또는 그 이상의 부형제들과 함께 미세 캡슐화된 형태가 될 수 있다.

정제들, 당과들(dragees), 캡슐들, 알약들 및 입자들의 고체 복용 형태들은 장의 코팅, 방출 제어 코팅들 및 약학 제형 분야에서 잘 알려져 있는 다른 코팅들 들과 같은 코팅들과 쉘(shell)들과 함께 제조될 수 있다. 이러한 고체 복용 형태들에 있어서, 상기 활성 화합물은 설탕, 젖당 또는 전분과 같은 적어도 하나의 비활성 희석제과 혼합될 수 있다. 이와 같은 복용 형태들은 또한 정상적인 과정으로서 비활성 희석제들 이외에도 추가적인 물질들, 예를 들면, 정제화된 윤활제들(lubricants)과 마그네슘 스테아레이트(magnesium stearate) 및 미세결정성 셀룰로오스(cellulose)와 같은 다른 정제화된 보조제들을 포함할 수 있다. 캡슐들, 정제들 및 알약들의 경우에 있어서, 상기 복용 형태들은 또한 완충제들(buffering agents)을 포함할 수 있다.

바람직하게는, 본 발명의 다형체는 고체 분산으로 제형되며, 여기서 상기 다형체는 약학적으로 허용 가능한 친수성 폴리머를 포함하는 매트릭스 내에 분자로 분산될 수 있다. 상기 매트릭스는 또한 약학적으로 허용 가능한 계면 활성제(surfactant)를 함유할 수 있다. 본 발명의 다형체를 제형하기 위한 적절한 고체 분산 기술은, 이에 제한되는 것은 아니지만, 용융 압출, 분무 건조 또는 용매 증발을 포함한다.

본 발명의 다형체의 국소적이거나 경피를 통한 투여를 위한 복용 형태들은 include 연고들(ointments), 페이스트들(pastes), 크림들(creams), 로션들(lotions), 겔들(gels), 분말들, 용액들, 분무들, 흡입들 또는 패치들을 포함한다. 활성 성분은 살균된 조건들 하에서 약학적으로 허용 가능한 운반체와 혼합되며, 임의의 필요한 보존제들이나 완충제들이 요구될 수 있다. 안과의 제형, 귀 액적들, 눈 연고들, 분말들 및 용액들이 또한 본 발명의 범주 내에 고려된다.

상기 연고들, 페이스트들, 크림들 및 겔들은 본 발명의 다형체들 이외에도 동물 및 식물 지방들, 오일들, 왁스들, 파라핀들, 전분, 트리거캔스(tragacanth), 셀룰로오스 유도체들, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트(bentonite), 규산(silicic acid), 탈크(talc) 및 아연 산화물, 또는 이들의 혼합물들과 같은 부형제들을 함유할 수 있다.

분말들과 분무들은 본 발명의 다형체들 이외에도 젖당, 탈크, 규산, 수산화 알루미늄(aluminum hydroxide), 규산 칼슘(calcium silicates) 및 폴리아미드(polyamide) 분말, 또는 이들 물질들의 혼합물들과 같은 부형제들을 함유할 수 있다. 분무들은 추가적으로 클로로플루오로 하이드로카본(chlorofluoro hydrocarbons)과 같은 관례적인 촉진제들을 함유할 수 있다.

경피 흡수성 패치들은 몸체에 대한 다형체의 조절된 전달을 제공하는 추가적인 이점을 가진다. 이러한 복용 형태들은 적절한 매체 내에 다형체를 용해시키거나 분산시켜 만들어질 수 있다. 흡수 증폭제들(absorption enhancers)이 또한 피부를 가로지르는 다형체의 유동을 증가시키도록 사용될 수 있다. 속도는 속도 조절막을 제공함에 의하거나 상기 화합물을 폴리머 매트릭스 또는 겔 내에 분산시킴에 의해 제어될 수 있다.

생리적 활성(Biological Activity)

다른 측면에 있어서, 본 발명은 본 발명의 다형체와 수의학적으로 또는 약학적으로 허용 가능한 운반체 혹은 희석제를 포함하는 다형체 조성물을 제공한다. 바람직하게는, 상기 조성물은 인간 치료를 위한 약학 조성물이다. 다른 측면에 있어서, 본 발명의 조성물은 수의학적 치료를 위한 조성물이다.

본 발명의 다형체 화합물들은 PDE 억제제들(inhibitors)이며 이에 따라 실험 대상의 분리된 기관(trachea)의 필드-자극된(field-stimulated) 수축의 억제에 의해 입증된 기관지 확장제(bronchodilator) 활성 및 PHA(피토헤마글루티닌(phytohaemagglutinin))에 의해 자극된 인간 단핵 세포들에 대한 연구에서 예시된 항-염증 활성과 같은 귀중한 약학적 성질들을 소유한다. 생체 외의 및 생체 내의 데이터는 상기 화합물들이 건조 분말로서 폐로 직접 흡입될 때에 실험 대상 내의 히스타민 유도 기관지 경련(bronchospasm)에 대한 이들의 끊임없이 지속되는 보호적 효과들에 의해 입증되는 바와 같이 작용의 긴 지속을 가지는 것을 나타낸다. 이에 따라 본 발명은 또한, 특히, 천식(asthma), 알레르기 천식(allergic asthma), 고초열(hay fever), 알레르기 비염(allergic rhinitis), 기관지염(bronchitis), 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease: COPD), 성인 호흡곤란 증후군(adult respiratory distress syndrome: ARDS), 그리고 낭포성 섬유증(cystic fibrosis)을 포함하는 호흡기 질환들로 고통 받는 환자들의 급성의, 만성의 또는 예방적 치료에 관련된다. 이들은 또한 아토피 피부염(atopic dermatitis) 및 건선(psoriasis)과 같은 피부 질환들, 또는 안구 염증(ocular inflammation) 혹은 뇌 허혈증(cerebral ischaemia) 또는 자가면역성 질병들(auto-immune diseases)을 포함하는 cAMP의 세포 내의 농도들을 증가시키는 것이 유익한 것으로 간주되는 임의의 다른 질병들에 국소적으로 사용될 수 있다.

하나 또는 그 이상의 화합물 다형체들이 하나 또는 그 이상의 비독성인 약학적으로 및/또는 수의학적으로 허용 가능한 운반체들 및/또는 희석제들 및/또는 보조제들(djuvants) 및/또는 촉진제들(propellants), 그리고 원하는 경우에는 다른 활성 성분들과 관련되어 존재할 수 있다. 적합한 운반체들 또는 희석제들은 해당 기술 분야에서 알려져 있다(예를 들면, "Handbook of Pharmaceutical Excipients"[(1994) 2nd Edition, Eds. A. Wade/PJ Weller, the Pharmaceutical Press, American Pharmaceutical Association]).

다른 측면에 따르면, 본 발명은 치료에 사용되기 위한 화합물 다형체를 제공한다. 본 발명의 다형체 화합물들은 포스포디에스테라제 동질 효소들(phosphodiesterase isoenzymes)의 억제제들로서 유용하다. 본 발명의 화합물들 또는 조성물들의 다형체들은 상기 화합물들 또는 조성물들이 유용한 임의의 질병, 그러나 특히 cAMP의 세포 내의 농도를 향상시키는 것이 바람직한 질병을 방지하거나 치료하는데 사용될 수 있다. 화합물들이 유용한 질병들의 예들은, 특히 천식, 기관지염, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 성인 호흡곤란 증후군(ARDS), 알레르기 천식, 고초열, 알레르기 비염, 그리고 낭포성 섬유증을 포함하는 호흡기 질환들이다. 이들은 또한 아토피 피부염이나 건선과 같은 피부 질환들, 안구 염증, 또는 뇌 허혈증이나 자가면역성 질병들을 포함하는 cAMP의 세포 내의 농도를 증가시키는 것이 유익한 임의의 다른 질병에 국소적으로 사용될 수 있다.

본 발명의 이러한 측면은 인간들의 치료에 특히 관련되지만, 또한 일반적인 수의학 산업, 특히 개들 및 고양이들과 같은 가정의 동물들과 말들, 돼지들, 소들, 양들 등과 같은 농장 동물들에 적용 가능하다.

매일 3회까지 섭취하는 약 0.02㎎ 내지 약 200㎎ 정도의 용량 레벨들이 전술한 조건들의 치료에 유용하다. 보다 구체적으로는, 매일 3회까지 섭취하는 약 0.2㎎ 내지 약 20㎎의 용량 범위가 효과적이다. 그러나 특정한 용량 요법은 의사를 참여시켜 궁극적으로 결정될 것이며, 연령, 체중, 증상의 강도에 사용되는 투약 및/또는 적용되거나 적용될 것인 치료의 강도, 치료의 투약 방법, 불리한 작용들 및/또는 사용 금지 사유들과 같은 인자들이 고려될 것이다.

본 발명의 이러한 측면에 따른 투약은, 예를 들면, 본 발명의 다른 화합물이나 다형체 또는 다른 화합물이 될 수 있는 다른 활성제들과 함께 환자에게 주어질 수 있다. 예들은 β2-아드레날린 수용체 작용 물질들(adrenoceptor agonists), 국소적 글루코코르티코이드 스테로이드들(glucocorticoid steroids), 잔틴(xanthine) 유도체들, 항히스타민(antihistamine) 화합물들, 류코트리엔(leukotriene) 대항제들, 류코트리엔 합성 및/또는 이들의 결합의 억제제들을 포함한다.

다른 측면에 따르면, 본 발명은 III/IV형 포스포디에스테라제 동질 효소들(PDE3/4)의 억제제의 제조에서 본 발명의 다형체의 이용을 제공한다. 본 발명은 기관지 확장제 및/또는 항-천식 약물 및/또는 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)의 방지나 치료를 위한 약제의 제조에서 본 발명의 다형체의 이용을 포괄한다.

본 발명은 또한 포스포디에스테라제 동질 효소 억제제 및/또는 기관지 확장제가 유익할 수 있을 것으로 기대되는 포유동물의 질병의 치료나 방지를 위한 방법과 관련되며, 상기 방법은 상기 포유동물에 본 발명의 다형체의 비독성 양을 효과적인 양으로 투여하는 과정을 포함한다. 본 발명은 포유동물의 천식 및/또는 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)을 치료하거나 방지하는 방법을 포괄한다.

여기서 사용되는 바와 같은 "대상(subject)"이라는 용어는 포유동물을 언급한다. 그러므로 대상은, 예를 들면, 개들, 고양이들, 말들, 소들, 돼지들, 기니피그들 및 이와 유사한 것들을 언급한다. 바람직하게는, 상기 대상은 인간이다. 상기 대상이 인간일 때, 상기 대상은 환자 또는 건강한 사람일 수 있다.

여기서 사용되는 바와 같이, "약학적으로 허용 가능한 염(pharmaceutically acceptable salt)"이라는 용어는, 청진 의료 판단의 범주 내에서 독성, 자극, 알레르기 반응 및 이와 유사한 것이 없이 인간들과 하등 동물들의 조직들에 접촉되어 사용되기에 유용하며, 합리적인 유익/위험 비율에 어울리는 본 발명의 공정에 의해 형성되는 화합물들의 염들을 언급한다. 약학적으로 허용 가능한 염들은 해당 기술 분야에서 잘 알려져 있다. 예를 들면, S. M. Berge 등은 "J. Pharmaceutical Sciences"[66: 1-19 (1977)]에서 약학적으로 허용 가능한 염들을 상세하게 기술하고 있다. 상기 염들은 본 발명의 화합물들의 최종 분리 및 정제 동안 인-시튜(in-situ)로 제조되거나, 유리 염기 작용기를 적절한 유기산과 반응시켜 분리될 수 있다. 약학적으로 허용되는 염들의 예들은, 이에 제한되는 것은 아니지만, 비독성산 추가 염들, 또는 염산(hydrochloric acid), 브롬화수소산(hydrobromic acid), 인산(phosphoric acid), 황산(sulfuric acid) 및 과염소산(perchloric acid)과 같은 무기산들 또는 아세트산(acetic acid), 말레산(maleic acid), 타타르산(tartaric acid), 시트르산(citric acid), 숙신산(succinic acid)이나 말론산(malonic acid)과 같은 유기산들과 함께 형성되거나 이온 교환과 같은 해당 기술 분야에서 이용되는 다른 방법들을 이용하여 형성되는 아미노기의 염들을 포함한다. 다른 약학적으로 허용되는 염들은, 이에 제한되는 것은 아니지만, 아디핀산염(adipate), 알긴산염(alginate), 아스코르브산염(ascorbate), 아스파르트산염(aspartate), 벤젠술폰산염(benzenesulfonate), 벤조산염(benzoate), 중황산염(bisulfate), 붕산염(borate), 부티르산염(butyrate), 장뇌산염(camphorate), 캄파술폰산염(camphorsulfonate), 시트르산염(citrate), 시클로펜탄프로피오네이트(cyclopentanepropionate), 디글루코네이트(digluconate), 도데실술페이트(dodecylsulfate), 에탄술포네이트(ethanesulfonate), 포름산염(formate), 푸마르산염(fumarate), 클루코헵톤산염(glucoheptonate), 글리세로인산염(glycerophosphate), 글루콘산염(gluconate), 헤미술페이트(hemisulfate), 헵타노에이트(heptanoate), 헥사논산염(hexanoate), 하이드로이오디드(hydroiodide), 2-하이드록시(hydroxy)-에탄술포네이트(ethanesulfonate), 락토바이오네이트(lactobionate), 젖산염(lactate), 라우린산염(laurate), 라우릴 술페이트(lauryl sulfate), 사과산염(malate), 말레인산염(maleate), 말론산염(malonate), 메탄술포네이트(methanesulfonate), 2-나프탈렌술포네이트(naphthalenesulfonate), 니코네이트(nicotinate), 질산염(nitrate), 올레산염(oleate), 옥살산염(oxalate), 팔미테이트(palmitate), 파모에이트(pamoate), 펙티네이트(pectinate), 과산화황산염(persulfate), 3-페닐프로피오네이트(phenylpropionate), 인산염(phosphate), 피크르산염(picrate), 피발레이트(pivalate), 프로피오네이트(propionate), 스테아레이트(stearate), 숙시네이트(succinate), 술페이트(sulfate), 타르트레이트(tartrate), 티오시아네이트(thiocyanate), p-톨루엔술포네이트(toluenesulfonate), 운데카노에이트(undecanoate), 발레르산 염들(valerate salts), 그리고 이와 유사한 것들을 포함한다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리토 금속 염들은 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘 또는 마그네슘 염들과 이와 유사한 것들을 포함한다. 또 다른 약학적으로 허용 가능한 염들은, 적절한 경우에 비독성 암모늄, 4기(quaternary) 암모늄 그리고 할로겐화물(halide), 수산화물(hydroxide), 카르복실산염(carboxylate), 황산염(sulfate), 인산염(phosphate), 질산염(nitrate), 1로부터 6까지의 탄소 원자들을 갖는 알칼리, 술폰산염(sulfonate) 및 아릴 술포네이트(aryl sulfonate)와 같은 반대 이온들을 사용하여 형성된 아민 양이온들을 포함한다.

본 발명에 의해 가시화되는 치환기들과 변수들의 결합들은 단지 안정한 화합물을 야기하는 것들이다. 여기서 사용되는 바와 같은 "안정한(stable)"이라는 용어는, 제조가 가능하도록 충분한 안정성을 소유하며 여기서 상세하게 설명하는 목적들(예를 들면, 대상에 대한 치료적이거나 예방적인 투여)을 위하여 유용한 충분한 기간 동안 화합물의 온전함을 유지하는 화합물들을 언급한다.

여기서 설명하는 화합물들은 하나 또는 그 이상의 비대칭 중심들을 함유하며 이에 따라 거울상 이성질체들(enantiomers), 부분 입체 이성질체들(diastereomers) 및 절대 입체 화학(stereochemistry)에 관하여 아미노산들을 위한 (R)- 또는 (S)- 로서, 혹은 (D)- 또는 (L)- 로서 정의될 수 있는 다른 입체 이성체의 형태들(stereoisomeric forms)을 생기게 한다. 본 발명은 모든 이와 같은 가능한 이성질체들뿐만 아니라 이들의 라세미산의(racemic) 및 광학적인 순수한 형태들을 포함하는 것을 의미한다. 광학 이성질체들은 전술한 과정들에 의하거나 라세미산의 혼합물들을 분해시켜 이들 각각의 광학적으로 활성인 전구체들로부터 제조될 수 있다. 상기 분해는 분해제의 존재에서 크로마토그래피에 의하거나 반복되는 결정화에 의하거나 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 알려진 이들 기술들의 결합에 의해 수행될 수 있다. 분해들에 대한 다른 세부 사항들은 Jacques 등의 "Enantiomers, Racemates, and Resolutions"(John Wiley ＆ Sons, 1981)에서 찾아볼 수 있다. 여기서 설명하는 화합물들이 올레핀의 이중 결합들이나 기하학 비대칭의 다른 중심들을 함유할 때, 다르게 특정하지 않는 한, 상기 화합물들이 E 및 Z 기하 이성질체들을 모두 포함하는 것을 의도한다. 마찬가지로, 모든 호변이성(tautomeric) 형태들 또한 포함되는 것으로 의도된다. 여기서 나타나는 임의의 탄소-탄소 이중 결합의 구성은 편의를 위해 선택되고, 본문에서 그렇게 기술하지 않는 한 특정한 구성을 지정하려는 의도는 아니며, 이에 따라 여기서 임의적으로 트랜스(trans)로서 묘사된 탄소-탄소 이중 결합은 시스(cis), 트랜스(trans) 또는 임의의 비율의 둘의 혼합물이 될 수 있다.

합성된 화합물들은 반응 혼합물로부터 분리될 수 있고, 칼럼 크로마토그래피, 고압 액상 크로마토그래피 또는 재결정화와 같은 방법으로 더 정제될 수 있다. 통상의 지식을 가진 자에게 인식될 수 있는 바와 같이, 여기서의 공식들의 화합물 들을 합성하는 다른 방법들은 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명할 것이다. 또한, 다양한 합성 단계들은 원하는 화합물들을 수득하도록 교호적인 배열이나 순서로 수행될 수 있다. 또한, 여기서 상세하게 기술하는 용매들, 온도들, 반응 기간들 등은 단지 예시적인 목적들을 위한 것이며, 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 반응 조건들의 변화가 본 발명의 원하는 가교된 장세대형(macrocyclic) 제품들을 생산할 수 있음을 인식할 수 있을 것이다. 여기서 설명하는 화합물들의 합성하는 데 유용한 합성 화학 변형들과 보호기 방법론들(보호 및 탈보호(deprotection))은 해당 기술 분야에서 알려져 있으며, 예를 들면, R. Larock의 "Comprehensive Organic Transformations"[VCH Publishers (1989)]; T.W. Greene 및 P.G.M. Wuts의 "Protective Groups in Organic Synthesis"[2d. Ed., John Wiley and Sons (1991)]; L. Fieser 및 M. Fieser의 "Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis"[John Wiley and Sons (1994)]; 그리고 L. Paquette의 "Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis"[John Wiley and Sons (1995)]와 이의 후속 판들에 기재된 바와 같은 것들을 포함한다.

본 발명의 화합물들은 선택적인 생리적 성질들을 향상시키도록 여기서 상세히 기술한 임의의 합성 수단을 통해 다양한 기능들을 첨부함으로써 변형될 수 있다. 이러한 변형들은 해당 기술 분야에서 알려져 있으며 주어진 생물학적 시스템(예를 들면, 혈액, 림프 계통, 중앙 신경 계통) 내로의 생리적 투과를 증가시키는 것, 경구 효용성을 증가시키는 것, 주사, 물질 대사의 변경 및 배출 속도의 변경에 의한 투여를 가능하게 하도록 용해도를 증가시키는 것들을 포함한다.

여기에서 변수의 임의의 정의로 화학 기들의 리스트를 설명하는 것은 임의의 당일 기 또는 열거된 기들의 결합으로서 상기 변수를 정의하는 것을 포함한다. 여기서 변수를 위한 실시예들의 설명은 임의의 단일 실시예 또는 임의의 다른 실시예들의 결합 혹은 그 일부들로서의 이러한 실시예를 포함한다.

실험예들

본 발명의 화합물들과 공정들은 다음 실험예들과 관련하여 보다 잘 이해될 수 있을 것이며, 하기 실험예들은 예시적으로서만 의도된 것이고 본 발명의 범주를 제한하는 것은 아니다. 개시된 실시예들에 대한 다양한 변경들과 변형들은 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게는 자명할 것이며, 제한되는 것은 아니지만 화학적 구조물들, 치환기들, 유도체들, 제형들에 관련된 변경들과 변형들 및/또는 본 발명의 방법들을 포함하는 이러한 변경들과 변형들은 본 발명의 사상과 첨부된 특허 청구 범위의 범주를 벗어나지 않고 수행될 수 있을 것이다.

실험예 1

대략 50㎎의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소(RPL554)를 70℃에서 0.5ml의 DMF에 용해시켰다. 질소 분기와 함께 깨끗한 황색 용액을 대략 30℃까지 4일 이상 매우 서서히 냉각되도록 하였다. 결정성 성질의 액체들(대략 0.4ml) 내에서 물질의 초기 배치(batch)를 관찰하였다. 이러한 공정은 2회 반복되었으며, 대략 0.2ml의 액체 부피 내에서 단결정 해석을 위하여 적절한 물질을 전달하였다. 샘플은 상기 모액(mother liquor) 내에서 변하지 않은 분석을 위해 제출되었다.

단결정 데이터는 낮은 온도(123K) 및 다른 파장(0.71073Å)에서 측정되었다. 직접적인 비교가 될 수 있는 도면을 제공하기 위하여, 파장 값들에 대한 수동적인 조정들이 요구되었다. 다양한 조정들 후에, 도 1이 수득되었고 XRPD(상부)를 통한 RPL554 070638를 위한 측정된 데이터 및 단결정 데이터(Copy of onyx2010a)(하부)로부터 얻어진 시뮬레이션된 XRPD 사이의 분리된 연관(split overlay)을 나타낸다.

두개의 세타 범위(5-13˚ 2θ) 내의 정밀한 검사는 관찰된 데이터와 시뮬레이션된 분말 패턴 사이의 유사성들을 분명하게 보여준다.

소프트웨어 내의 알고리즘은 투과 XRPD에 의해 측정된 상기 관찰된 데이터(RPL554 070638)와 상기 단결정 분석으로부터 얻어진 수치 값들을 수치적으로 비교한다. 단결정 분석으로부터 얻어진 키 데이터(key data)를 다음에 열거한다.

온도 123(2)K

파장 0.71073Å

결정계(crystal system) 삼사정계(triclinic)

공간군(space group) P-1

단위 셀 치수들 a＝8.1246(4)Å α＝91.583(4)°

b＝11.4573(5)Å β＝90.299(4)°

c＝13.2398(6)Å γ＝99.628(4)°

부피 1214.56(10)Å³

Z 2

상기 비교를 위해 적용된 소프트웨어가 측정된 파일(RPL554 070638)을 독취하였고 상기 단결정 데이터로부터 추출된 상기 단위 셀 변수들의 입력(entry)을 신속하게 수행하였다. 폴리 리파인먼트(Pawley refinement)(알고리즘)가 이후에 수치 값들을 회귀시켰으나, 상기 소프트웨어도 그 결과의 그래프적인 표시에 의해 이러한 수치 값을 예시한다. RPL554를 위한 측정되고 이론적인 값들 사이의 적합도를 위한 수치 값은 2.9였다. 이러한 값은 데이터 품질을 나타낸다. 상기 값이 낮을수록 데이터가 우수해질 수 있으며 10 보다 작은 통상적인 값이 긍정 적중(positive hit)으로서 고려된다.

RPL554를 위한 수치 값들은 123K에서 측정된 상기 단결정 데이터로부터 얻어진 하나와 우수하게 일치하였다. 따라서, 상기 단결정 데이터가 RPL554를 위해 수집된 분말 데이터와 내부에서 우수한 부합을 제공하며, 이에 따라 알려진 열역학적으로 바람직한 다형체(Ⅰ형)를 위한 결정학 상의 프로파일을 나타낸다.

실험예 2: 출발 물질(Starting material)

RPL554(070638-9)의 9.0g의 ex-GMP 스톡(stock)의 샘플이 취해졌고 현재의 기준 데이터세트로서의 이용을 위하여 XRPD(도 3 및 표 1) 및 DSC(도 4)에 의해 분석되었다.

Pos. [°2 Th.]	높이 [계산]
6.3827	2406.64
10.1448	3293.52
12.6314	2495.28
12.8753	3362.54
13.6461	1682.38
14.2043	1714.62
14.7078	1191.12
15.2706	2566.43
15.4230	1230.41
15.8229	1877.13
16.9786	1303.49
17.6393	3211.22
18.8932	938.79
20.9592	1298.36
22.4382	1587.30
22.8201	1112.59
28.6947	876.91

이러한 시점에서 양성자 NMR 및 HPLC와 같은 다른 연구들은 결과들이 이전에 수집되었으므로 개시를 계획하는 데 중요하지 않았다. 보통의 유기 물질들의 범위를 이용하는 상기 물질에 대한 용해도 연구들의 수행은 이전의 연구들이 상기 물질 행동의 강한 암시를 주었으므로 마찬가지로 불필요하였다. RPL554의 다른 형태들의 존재에 대한 조사의 개시가 우선 사항이었다.

알려진 바와 같이 상기 물질은 단일 흡열을 위해 246℃의 용융 시작점을 가지며 열분해이외에 후속하는 알려진 결정화 또는 전이가 없는 결정성이다. 융점 흡열(melting endotherm)에 대응되고 관련된 용매(전체적인 분열의 앞선 암모니아 손실과 같은)가 아닌 대략 4.2%의 초기 무게 손실이 TGA에 의해 알려졌다. 얻어진 상기 기준 데이터를 가지고, 물질에 관한 실험이 비정질 물질이 후속하여 생성될 수 있다는 목적으로 개시되었다. 이러한 관점으로부터, 전술한 데이터가 Ⅰ형으로서 언급될 것이다.

RPL554를 생성하는 공정이 상기 물질을 현재의 형태로 전달하며 그 순도를 개선하는 데 사용되는 알코올로부터의 슬러리들이 그 결정도를 향상시키거나, 보다 중요하게는 비정질 물질을 결정성 형태로 전환시키는 점이 추정된다.

실험예 3: 반용매 첨가(Anti-solvent addition)

반용매 첨가는 비정질 물질, 새로운 다형체들과 혼합된 상들(phases)을 수득하는 잘 알려진 방법이다. 이러한 점에 유의하여, 디메틸설폭사이드(DMSO) 내의 RLP554의 저장 용액(stock solution)을 생성하였다. DMSO는 이와 같은 용매 내에 합당한 용해도를 가지며 또한 폭넓은 혼합성인 물질이므로 선택되었다.

실험 조건들(CG1099):

300㎎의 RPL554가 뜨거운 DMSO(2ml 저장 용액) 내에 용해되었고, 실온에서 다양한 용매들(1.0ml)을 함유하는 12개의 차가운 튜브들까지 0.15ml의 이러한 용액이 격렬하게 교반하면서 일부씩 첨가되었다. 모든 경우들의 대부분에 있어서, 즉각적인 침전들이 관찰되었다. 여과에 의해 분리가 수행되었고 40℃에서 진공 중에서 건조되었다. 다음 표 2에 결과들을 상세하게 나타낸다.

용매 리스트 및 반용매 첨가를 기초로 하는 DMSO를 위한 세부 사항들

용매	초기 결과	분리된 고체들
쿠멘(cumen)	solⁿ→ppt	F1
nBuOA	ppt	F1
다이옥산(dioxan)	solⁿ	건조 F1
물	ppt	F1
헵탄(heptan)	이중층/오일→ppt	F1
IPA	ppt	F1
CH₃CN	ppt	F1
MEK	ppt	F1
EtOH	ppt	F1
EtOAc	ppt	F1
TBME	ppt	F1
DCM	solⁿ	건조 F1

고체로 회귀하는 샘플들 모두는 45℃에서 진공 내에서 일단 건조되었으며 Ⅰ형이 회귀되었음을 나타내는 XRPD에 의해 분석되었다. 주목할만한 예외들은 다이옥산, DCM 및 헵탄이었다. 다이옥산과 DCM은 결국 Ⅰ형을 산출하는 남겨져 있고 증발되는 용액들을 산출하였다.

헵탄은 모두 색상을 갖는 용액들이고 흔들기와 방치 주기들이 길어짐에 따라 점차로 오일화되는(DMSO층) 2개 층들을 형성하는 점에서 흥미가 있었다. 대략 24 시간 후에, 고체들이 불투명한 오일 내에 형성되었고, 이에 따라 혼합물을 옮겨 붓고 45℃에서 진공 중에서 건조하였다. 유감스럽게도, 비정질 물질이 형성되는 점이 기대되었지만, Ⅰ형이 관찰되었다. 그러나, 상기 실험의 반복이 보장되었지만, 급격한 오일의 후속 형성에 시간이 덜 배당되는 점이 고려되었다. 이는 2개의 깨끗한 층들을 형성하였고 옮겨 부어지고 젖고 건조된 모든 상태(각기 CG1110Awet 및 CG1110A2)에서 분석되었던 점차로 급격히 DMSO층을 야기하였다. 상기 DMSO 액체는 또한 진공 내에서(CG1110B2) 건조되었던 고체를 감소하게 하였다. 상기 결과들은 모든 샘플들이 사실상 출발 물질이 동일한 점(CG1099SM)을 나타내는 도 5에 도시되어 있다.

실험예 4: 포화 용액들(Saturated solutions)

포화 용액들은 새로운 다형체들의 순수한 상들을 수득하는 훨씬 가장 좋은 방법이다. 이에 따라, RPL554 Ⅰ형의 알려진 양들이 임의의 형태 기억(시드)을 제거하는 연마 여과에 뒤이어 온도에서 포화 용액을 수득하도록 용해되었거나 시간에 따라 슬러리화되었다. 결정화를 증진시키도록 조절된 냉각이 이후에 사용되었다.

실험(JN376):

24개의 용액들이 초기 현탁액이 시작되도록 30㎎의 RPL554 Ⅰ형의 존재에서 45℃에서 교반되었다. 상기 현탁액들은 진공 내에서 45℃에서의 건조 및 분석에 앞서 서서히 증발시키도록 이후에 남겨지는 미리-데워진 튜브들 내로의 고온 여과 전에 4.5 시간의 기간 이상으로 45℃에서 가열되었다. 엔트리 A 및 B(표 3에서)는 24 시간 동안 증발이 방지되도록 질소 하에서 35℃ 에서 데워지는 점에 유의하기 바란다.

용매 리스트 및 포화 용액 실험들(JN376)을 위한 결과들

용매	그리드 엔트리 (Grid entr)	관찰	XRPD
테트랄린(tetralin)	A1	Solⁿ→껌(gum)/오일	n/a
NMP	A2	미세한 XT 성장	I 형
에틸렌 글리콜	A3	insol	n/a
DMSO	A4	두툼한(chunky) XT 성장	새로운 형태 DSC 수집됨
아니솔(anisole)	A5	insol/trace oil	n/a
DMF	A6	XT 플러스 오일, 오븐 건조됨	I 형
쿠멘(cumen)	B1	insol	n/a
3-Me-1-BuOH	B2	분말/껌. 오븐 건조됨	Insufficient
n-BuOAc	B3	insol/trace oil	n/a
톨루엔(toluene)	B4	insol/트레이스 오일	n/a
다이옥산(dioxane)	B5	trace glass, 오븐 건조됨	I 형
물	B6	insol	n/a
헵탄(heptane)	C1	insol	n/a
n-PrOH	C2	trace powder	Insufficient
IPA	C3	trace powder	I 형
CH₃CN	C4	미세한 XT	I 형
MEK	C5	trace powder	Insufficient
EtOH	C6	trace powder	I 형
EtOAc	D1	insol	n/a
THF	D2	insol	n/a
MeOH	D3	insol	n/a
아세톤(acetone)	D4	insol	n/a
TBME	D5	insol	n/a
DCM	D6	powder	I 형

* 설명: XT＝결정형, insol＝용해되지 않음/매우 작은 양의 물질, trace powder-insufficient＝분석들에 충분하지 않은 물질.

상기 표로부터, 많은 실험들이 분석을 하기 위한 물질의 충분한 양을 용해시키지 못하였고 건조 후에 튜브의 바닥에 오일 또는 분말 입자를 회귀시켰던 점을 볼 수 있다. 그러나, 이러한 점에도 불구하고 수많은 실험들이 물질을 수집되는 XRPD 분석을 가능케 하였던 분말의 형태로 회귀시켰다. 모액들로부터 성장되는 정형적인 결정들을 나타내었던 가장 성공적인 실험들이 수확되었고 단지 하나의 엔트리만이 임의의 적절한 형태 변화(DMSO)를 보여주었다.

상기 DMSO 엔트리를 위한 결과들은 다음(도 6 및 도 7)에 나타나 있으며, 상기 물질이 Ⅰ형에 대해 일부 유사성을 나타내지만, XRPD에 근거하여 바람직한 배향을 가능하게 하는 새로운 다형체가 존재하는 것으로 여겨진다. 상기 물질의 DSC 해석은 주요 흡열의 훨씬 낮은 개시와 함께 보다 분명한 형태 변화의 표시를 나타낸다. TGA 및 NMR 분석들을 위해서는 불충분하게 물질이 존재하였다. 본 발명자들은 이는 RPL554의 덜 안정한 형태로 이해한다.

실험예 5: 슬러리 숙성(Slurry maturations)

현재의 결정성 고체를 변형을 겪는 형태로 압박하려는 시도에서 24의 슬러리 숙성이 수행되었다. 이러한 작업의 가장 효과적인 방법은 RPL554 Ⅰ형으로 취급되는 바와 같은 연장된 가열/냉각 순환들이다.

실험(CG1100):

유리 튜브들 내에서 일부 20㎎의 물질이 대략 30 부피들의 용매 내에서 교반되었고 20℃ 및 50℃의 등온성 주기들(8 시간) 사이에서 순환되었다. 4 일의 순환 후에, 상기 고체들은 여과 제거되었고 XPRD로 분석되기 전에 45℃에서 진공 중에서 건조되었다. 모든 결과들은 출발 물질, RPL554(Ⅰ형)와 비교되었다. 표 4를 참조 바란다.

RPL554를 위한 슬러리 숙성 실험들(CG1100)

용매	그리드 엔트리	관찰	XRPD
테트랄린	A1	Solⁿ→서서히 증발	껌/오일
NMP	A2	Solⁿ→서서히 증발	껌/오일
에틸렌 글리콜	A3	끈끈한(gummy) 고체	n/a
DMSO	A4	분말	I 형
아니솔	A5	분말	I 형
DMF	A6	분말	I 형
쿠멘	B1	Solⁿ→서서히 증발	껌/오일
3-Me-1-BuOH	B2	분말	I 형
n-BuOAc	B3	분말	I 형
톨루엔	B4	분말	I 형
다이옥산	B5	분말	I 형
물	B6	분말	I 형
헵탄	C1	분말	I 형
n-PrOH	C2	분말	I 형
IPA	C3	분말	I 형
CH₃CN	C4	분말	I 형
MEK	C5	분말	I 형
EtOH	C6	분말	I 형
EtOAc	D1	분말	I 형
THF	D2	분말	I 형
MeOH	D3	분말	I 형
아세톤	D4	분말	I 형
TBME	D5	분말	I 형
DCM	D6	분말	I 형

출발 물질과 비교할 때에 모든 샘플들은 동일한 XRPD 프로파일을 나타내며, RPL554 Ⅰ형이 변화에 극히 탄력적이고 상기 화합물의 열역학적으로 가장 안정한 형태로 될 수 있는 점을 입증한다(도 8).

실험예 6: 혼합 용매 재결정화(Mixed solvent recrystallisations)

혼합 용매들 시스템들의 존재에 의해 용해도 프로파일들이 현저하게 변경될 수 있고 이러한 경향들이 예측하기 매우 어려울 수 있음에 따라, 다양한 시스템들을 이용하는 일련의 재결정화가 계획되었다. 이는 새로운 다형체들의 발견을 이끄는 형태 변화를 유도하는 다른 적절한 방식으로 간주되었다.

연구 동안에 다이옥산 및 쿠멘(통상적인 DMF, DMSO 및 테트랄린 이외에)이 RPL554를 용해시키는 데 효과적인 정도를 나타내었던 점에 유의하였다. 이들 용매들은 각 용매들과 RPL554의 연마 여과된 용액들을 취하였고 이후에 이들을 알려진 다양한 유형들의 반용매들의 범위에서 고온에서 혼합하였던 일부 초기 시도들을 기초로 하여 형성되었으며, 용액으로 유지되었고 이후에 서서히 냉각되게 하였다.

실험(PF87):

고체를 5ml의 주 용매 내에서 교반하여 100㎎의 RPL554를 포함하는 저장 용액들을 마련하였고 용해가 증진되도록 50℃에서 가열되게 하였다. 용해를 촉진시키고 최종 저장 혼합물을 형성하도록 추가적인 1ml(필요한 경우 그 이상)의 공-용매(co-solvent)가 첨가되었다. 샘플들을 50℃에서 30분 동안 교반되도록 하였다. 미리-가열된 따듯한 튜브(50℃)까지, 상기 저장 용액들이 표에 나타낸 2ml의 반용매에 뒤이어 첨가되었다. 샘플들을 교반 및 증발되게 하였다. 샘플들은 밤새 여과되었고 XRPD에 의한 분석 이전에 50℃에서 진공 오븐 내에서 건조되었다(표 5 참조).

반용매 첨가를 갖는 표시된 저장 공-용매들 혼합 용매 결정화(PF87)

PF87	반용매들	2-부타온	EtOAc	헵탄	IPA	MTBE
저장 용액 시스템들
다이옥산/DMSO(5/1)	I 형	I 형	I 형	I 형	I 형	I 형
다이옥산/DCM(5/2)	I 형	I 형	I 형	I 형	I 형	I 형
2MeTHF/DMSO(5/1)	I 형	I 형	I 형	I 형	I 형	I 형
DCM/다이옥산(5/1)	I 형	I 형	I 형	I 형	I 형	I 형

모든 실험들을 Ⅰ형으로 회귀된 실험 PF87 내에 나열하였으며, RPL554의 열역학적 안정성으로서의 다른 증거로서의 역할을 한다.

실험예 7: 혼합 수중 시스템들 내의 결정화 시도(Crystallisation trials in mixed aqueous systems )

수용성 염기를 갖는 일련의 혼합 용매 결정화들이 실험 PF86에서 조사되었다.

실험(PF86):

DMSO(1ml, 15㎎.ml^-1) 내의 RPL554(I 형)의 뜨거운 저장 용액이 용매의 뜨거운 용액에 첨가되었고, 표 6(50℃)에 나타낸 바와 같이 물과 혼합(1:1, v/v, 1ml)되었다. 상기 용액들을 48시간 동안 온도에서 교반되게 하였고, 냉각하였으며, 여과하였고, 이후에 오븐(40℃)에서 밤새 건조하였다. XRPD에 의한 분석이 수행되었고 상기 출발 물질과 비교되었다.

수중 혼합 결정화들(실험 PF86)을 위한 결과들의 요약

용매 시스템 (+ 물)	실험	XRPD
아세토니트릴(acetonitrile)	PF86A	I 형과 동일
다이옥산	PF86B	I 형과 동일
에탄올	PF86C	I 형과 동일
IPA	PF86D	I 형과 동일
MeOH	PF86E	I 형과 동일
THF	PF86F	I 형과 동일

이러한 일련의 실험들을 위한 결과들(도 9)은 Ⅰ형이 우세한 점을 다시 보여준다.

실험예 8: 비정질 물질의 발생(Generation of amorphous material)

RPL554 Ⅰ형을 245℃까지 가열하고 용융물을 급격히 냉각함에 의한 비정질 물질의 발생의 역사적인 실험 증거가 있기 때문에, 이러한 방법의 반복이 수행되었고(TGA 기초) 동일한 깨끗하고 황색인 유리질 같은 물질을 생성하였다. 이러한 시편을 XRPD에 의해 후속하여 분석하였고 비정질인 것을 나타내었다(도 10 참조).

이러한 물질은 이후에 유리 전이와 가능하면 어떤 재결정화들을 관찰하려는 시도에서 DSC 기구들에 대해 계속하였다. 결과들은 도 11에 도시되어 있다.

제시된 유리 전이는 정형적인 재결정화가 관찰됨이 없이 대략 120℃에서 관찰될 수 있다. 이러한 실험이 계속되는 동안, 온도에서 안정성이 잠재적인 문제(TGA의 관찰)로서 알려져 있으므로 샘플은 LC 분석을 위해 제출되었다. 크로마토그램(chromatogram)은 상기 출발 물질, RPL554의 단지 26%로 다중 피크들의 존재를 보여주었다. 이와 같은 결과는 보다 민감한 실험 마진들로 수행되기에 크래쉬 냉각(crash cool)이 필요하거나, 상기 방법이 무효한 점을 나타내었다. 상기 실험은 낮은 온도(24℃)에서 반복되었고, 이는 분해를 방지하고 이에 따라 순도 면에서 보다 나은 프로파일로 회귀하려는 시도였다. LC 분석은 매우 낮은 순도와 다양한 2차 생성물들의 유사한 프로파일로 복귀되었다. 따라서 비정질 물질이 이러한 방식으로 발생되지 않을 수 있음이 명백하였다.

비정질 상을 발생시키는 수많은 다른 시도들이 이후에 이루어졌고, 물리적인 조작(연마, 압력 인가)과 이후의 DCM 및 쿠멘과 같은 용매들로부터 희석된 용액의 신속한 증발로 시작되었다. 이러한 실험예에 있어서, 연마된 샘플(모르타르(mortar) 및 막자(pestle))은 매우 정전기성으로 증명되었고 XRPD 분석을 위한 카프톤 플레이트(Kapton plate)로 이송에 실패하였다. 그러나, 상기 샘플은 DSC 팬(pan)으로는 성공적으로 이송되었고, 용융점은 기준 물질 보다 낮은 것으로 관찰되었으며, 형태 변화의 가능성을 나타내었다. 이와 같은 실험의 반복은 다른 이러한 조사에 요구될 수 있었지만, 그러나, 상기 비정질 상은 이와 같은 접근으로부터 다가오지는 않았다(도 12).

인가된 압력(100KN): 10㎎의 RPL554가 0.1㎜ 이하의 두께를 갖는 미세하고 불균일한 디스크를 형성하도록 가압 디스크(disc) 시스템에 밤새 놓여졌다. 상기 디스크를 부드럽게 연마하였고 XRPD에 의해 분석하였다(도 13).

가압된 물질과 출발 형(CG1099F 참조가 사용된)의 XRPD 비교는 결정성 물질의 압축이 비정질 상을 발생시키는 점을 입증한다. 이러한 관찰들에 후속하여, 열분석(thermal analysis)(DSC)이 수행되었고 상기 물질이 비정질인 점이 입증되었다(도 14).

비정질 물질로부터의 전이는 75℃에서 Tg로 표시되고, 이는 이후에 242.6℃및 262.7℃에서 연속하여 용융되기 전에 약 131℃에서 재결정화한다. 첫 번째 발열은 상기 기준 물질 보다 약간 낮은 것으로 보이며, 다른 형태와 잠재적으로 관련될 수 있다(순도 비교들은 새로운 형태를 부여하기 이전에 수행되는 합리적인 연구가 될 수 있다). 두 번째 용융은 비록 이러한 것이 이와 같은 물질을 위한 분해 영역 내에 존재하는 것으로 강조되어야 하지만 또한 다른 결정성 실체로 간주될 수 있다.

빠른 용매 증발: RPL554-070638을 함유하는 플라스크(flask)가 실온(290ml, 2.0g)에서 큰 부피의 DCM 내에 완전히 용해되었다. 상기 용매는 RPL554-070638을 완전히 용해된 상태로 유지하고, 원료 물질의 느린 침전과 Ⅰ형의 존재를 방지하도록 이후에 실온에서 빠르게 제거되었다. HPLC 분석은 높은 화학적 순도를 보여주었고 양성자 NMR은 잔류 DCM의 트레이스(trace)를 나타내었다.

초기 배치의 XRPD는 비정질 상(JN376E)을 보여주었고, 이는 DSC에 의해 확인되었다(도 15). 가열 공정은 비록 약간 억제될지라도 Ⅰ형의 예측되는 용융을 위한 흡열에 뒤이어 152℃에서의 결정화를 예시하는 큰 발열(exotherm)을 유도한다. 이러한 배치와 상기 비정질 물질의 미묘한 차이는 인가된 압력(초기의 발열의 온도 내의 주된 차이와 주된 용융 이후의 프로파일)으로부터 얻어지는 점에 유의 바란다.

성공적으로 분리된 작은 양의 비정질 물질로서, 포화 용액 및 슬러리 작업에의 사용을 위하여 수 그램의 물질을 상기 기술이 대규모화 되었다. 이러한 배치(JN376F)를 위한 기준 XRPD 프로파일은 도 16에 도시되어 있다.

실험예 9: 비정질 물질을 갖는 포화 용액들(Saturated solutions with amorphous material)

표시한 바와 같이, 포화 용액들은 새로운 다형체들의 순수한 상들을 수득하는 가장 좋은 방법이다. 이를 위하여, 상기 비정질 물질이 취해졌으며, JN376에서와 같이 포화 용액들을 이용하여 보다 높은 전체적인 출발 농도를 얻기 위한 목적으로 연구가 수행되었다.

실험(PF89):

24개의 용매들이 결정형 상으로서 보다 초기(보다 농축된) 현탁액이 되도록 30㎎의 RPL554(JN376F) 존재에서 45℃에서 교반되었다. 상기 현탁액들은 용해도를 증가시키도록 4.5시간의 기간 이상 가열되었다. 각각의 튜브는 상기 물질의 완전한 용해를 위해 점검되었다. 고체가 남아 있을 경우, 추가적인 1ml의 알려진 용매가 완전히 용해될 때까지 첨가되었다. 각 튜브는 이후에 서서히 증발하도록 하는 미리-데워진 튜브 내로의 고온 여과 전에 평가되었다. 24시간 동안 증발을 방지하도록 질소 하에서 튜브들을 두는 점에 유의 바란다. 이러한 실험의 결과를 다음 표(표 7)에 나타낸다.

포화 용액 실험들(비정질 상 유입, 실험 PF89)

용매	그리드 엔트리	관찰	XRPD
테트랄린	A1	오일	N/A
NMP	A2	건조하지 않음	젖었지만 I 형
에틸렌 글리콜	A3	침전이 관찰되지 않음	N/A
DMSO	A4	액체 + 결정들	혼합된 형태(젖은 것으로 측정됨)
아니솔	A5	껌/오일	N/A
DMF	A6	액체 + 결정들	I 형
쿠멘	B1	액체	불충분한 물질
3-Me-1-BuOH	B2	결정들	I 형
n-BuOAc	B3	결정들	I 형
톨루엔	B4	결정들	I 형
다이옥산	B5	결정들	I 형
물	B6	용해되지 않음	N/A
헵탄	C1	고체	I 형
n-PrOH	C2	고체	I 형
IPA	C3	고체	I 형
CH₃CN	C4	추가적인 피크들	I 형
MEK	C5	추가적인 피크들	I 형
EtOH	C6	고체	I 형
EtOAc	D1	고체	I 형
THF	D2	추가적인 피크들	I 형
MeOH	D3	분리된 첫 번째 피크	I 형
아세톤	D4	-	불충분한 물질
TBME	D5	비정질	N/A
DCM	D6	비정질	N/A

상기 표로부터, 상기 실험들의 일부가 분석을 가능하게 하기에 물질을 불충분한 양으로 용해시켰거나, 건조 후에 상기 튜브의 바닥에서 오일 입자나 비정질 분말로 복귀시켰던 점을 볼 수 있다. 그러나, 이러한 점에도 불구하고, 수많은 실험들이 물질을 수집되는 XRPD 분석을 가능하게 하는 분말의 형태로 회귀시켰다. 모액들로부터 성장되는 나타난 정형적인 결정들을 갖는 가장 성공적인 실험들이 수확되었고 단지 하나의 엔트리만이 어떤 적절한 형태 변화(PF89A4, DMSO)를 나타내었다.

상기 DMSO 엔트리를 위한 결과들은 다음에 나타내며, 상기 물질이 Ⅰ형에 대해 일부 유사성을 나타내는 동안에, 상기 XRPD에 근거하여 새로운 다형체가 존재하고 바람직한 배향을 가능하게 하는 점으로 여겨진다. 상기 물질의 DSC 분석은 훨씬 낮은 주요 흡열의 개시를 갖는 형태 변화의 보다 분명한 표시를 나타낸다. TGA 및 NMR 분석을 위해서는 불충분한 물질이 있었다. 비록 이러한 물질이 동일하게 존재하지 않고 JN376A4(DMSO로부터 포화된 용액, 도 6 및 도 7)로서 RPL554에 대해 프로파일을 변경하였지만, 이러한 결과는 다른 조사를 위하여 규모가 증가되었다. 이러한 점은 용매화의 상대적인 레벨 때문이 될 수 있는 것으로 고려되었다.

수집된 분석을 이해하려는 목적을 위하여, 그리고 고품질의 모델링 정보가 RPL554를 위하여 예측된 단위 셀 변수들(색인(indexing) 실험)로부터 수득되었던 사실로 인하여, 새로운 상이 이론적인 데이터와 비교되었다.

상기 수치적인 분석은 상기 물질의 대부분이 적합하지 않은 일부 피크들을 갖는 Ⅰ형임을 증명한다. 이는 상기 샘플이 두 형태들의 혼합이거나 하나의 잠재적으로 용매화된 산출물이었던 강한 증거를 나타낸다. 결과들은 완전히 보고되지 않았으며, XRPD 프로파일에서 미소한 변화가 얻어졌던 DMSO를 제외하고 Ⅰ형의 수집을 위하여 잔류된 출분한 물질이 있는 모든 경우들에서 관찰되었던 점은 정확하였다.

실험예 10: 자동화된 실험(Automated experiment)(확장된 반용매 연구)

반용매 첨가 작업에 이용되었던 바로부터 상기 용매 범위를 반용매의 사용을 통한 크래쉬 냉각 대신에 온도에서 이러한 용매의 혼합이 수행되도록 실험이 개시되었다(CG1099).

실험(PF85):

정의된 양의 RPL554(1.5g) 및 20ml의 DMSO가 튜브에 첨가되었고 용해를 증진시키도록 50℃로 가열되었다. 200μl의 저장 용액을 가열된 웰(well)(50℃) 내에 두었다. 200μl의 열거된 용매(다음 표)가 상기 웰에 첨가되었고 분리 이전에 72시간 이상 교반되도록 두어졌다. 샘플들은 이후에 XRPD 분석을 위해 카프톤 플레이트 상으로 이송되었다. 결과들은 처리되었고 출발 물질 RPL554(표 8)와 비교되었다. XRPD가 상기 출발 물질로부터 차별되기에 불충분한 경우, 용융점들(물질이 허여하는)을 정의하기 위하여 열분석이 수행되었다.

가능한 경우에 XRPD 및 DSC에 의한 초기 결과들을 구체화하는 자동화된 고온의 혼합된 용매 결정화들(PF85)

용매	그리드 엔트리	DSC(개시/피크) I 형 기준=(246/248)	XRPD 결론	전체적인 결론 (DSC/XPRD)
포름아미드(formamide)	A12	젖은 샘플	I 형	I 형
N-메틸(methyl)-2-피롤리디논(pyrrolidinone)(NMP)	A11	241℃/247℃	빈약한 회절 (아마도 I 형)	I 형
에틸렌 글리콜	A10	껌	I 형	I 형
디메틸 설폭사이드(DMSO)	A9	243℃/248℃	I 형 + 추가 피크들	I 형
N,N-디메틸아세트아미드(dimethylacetamide)	A8		I 형 + 추가 피크들	I 형
아니솔	A7		I 형 + 추가 피크들	I 형
N,N-디메틸포름아미드(dimethylformamide)	A6		I 형 + 추가 피크들	I 형
쿠멘	A5	껌 240℃/246.2℃	출발 물질과 다름	II 형
1-펜탄올	A4		빈약한 회절 (아마도 I 형)	I 형
클로로벤젠(chlorobenzene)	A3	241℃/246.7℃	약간 다름	II 형
3-메틸-1-부탄올	A2		I 형	I 형
메틸부틸 케톤(methylbutyl ketone)=2-헥사논(hexanone)	A1		I 형	I 형
아세트산 부틸(Butyl acetate)	B12	껌	I 형	I 형
2-메톡시에탄올	B11		I 형	I 형
아세트산	B10	241.6℃/247.4℃	강한 바람직한 배향	II 형
1-부탄올	B9	껌	젖은 샘플이지만 I 형	I 형
메틸이소부틸 케톤=4 메틸 2 펜타논	B8		I 형	I 형
아세트산 이소부틸(isobutyl acetate)	B7		I 형	I 형
피리딘(pyridine)	B6		I 형	I 형
톨루엔	B5	239.5℃/246℃	바람직한 배향(대부분 I 형일 것 같음)	II 형
2-메틸-1-프로판올	B4	233℃/243℃	바람직한 배향	III 형
아세트산 프로필(propyl acetate)	B3		I 형 + 추가 피크들	I 형
니트로메탄(nitromethane)	B2		I 형 + 추가 피크들	I 형
다이옥산	B1	243℃/248℃	바람직한 배향으로 불명확함	I 형
메틸시클로헥산(methylcyclohexane)	C12		I 형	I 형
포름산(formic acid)	C11		I 형	I 형
물	C10	243℃/247℃		I 형
2-부탄올	C9		I 형	I 형
헵탄	C8		I 형	I 형
1-프로탄올	C7	242℃/247℃	I 형	I 형
아세트산 이소프로필(isopropyl acetate)	C6			I 형
1,2-디메톡시-에탄(글림(glyme), DME)	C5	242.3℃/248℃		I 형
2-프로판올	C4		I 형	I 형
아세토니트릴(acetonitrile)	C3		I 형	I 형
시클로헥산(cyclohexane)	C2		I 형	I 형
에탄올	C1		I 형	I 형
아세트산 에틸(ethyl acetate)	D12	껌. 2개의 흡열들 226℃/268℃	PO 또는 다름	2개의 흡열들, 잠재적으로 IV 및 V 형
1,1,2-트리클로로에텐(trichloroethene)	D11		I 형 + 추가 피크들	I 형
헥산	D10	223.6℃	바람직한 배향	순수한 IV 형
테트라하이드로푸란(tetrahydrofuran: THF)	D9	껌	I 형을 위한 바람직한 배향	I 형
메탄올	D8	242℃/247℃	다르거나 I 형(PO?)	I 형
클로로포름(chloroform)	D7		I 형 + 추가 피크들	I 형
아세트산 메틸(methyl acetate)	D6		I 형	I 형
아세톤	D5		I 형	I 형
4차-부틸메틸 에테르(tert-butylmethyl ether: MTBE)	D4		I 형 + 추가 피크들	I 형
에틸 포르메이트(Ethyl format)	D3		I 형	I 형
디클로로메탄(dichloromethane)	D2		I 형	I 형
1,2-디클로로에텐(dichloroethene)	D1		I 형 + 추가 피크들	I 형

상기 표로 만들어진 결과들, 특히 수집된 DSC 트레이스들에 의해 나타낸 것들로부터 일부 잠재적인 새롭거나 혼합된 상들이 폭넓은 반용매 라이브러리(library)로부터 분리되었음을 알 수 있다. XRPD 패턴들이 초기에는 다르게 보일 수 있는 반면, 피크 강도들로 인하여, 바람직한 배향의 영향들이 존재할 수 있으며 이에 따라 보다 깊은 분석이 필요할 수 있다(바람직한 배향이 상기 자동화된 실험으로부터 이송된 결정들의 시각적인 관찰로 인하여 가능한 것으로 간주되었다)(결과들은 도시되지 않음). 이와 같은 분석은 또한 이미 색인으로부터 Ⅰ형 패턴과 새로운 XRPD 패턴들의 수치적인 비교에 의해 제시되었다. 이러한 생각으로 진실한 새로운 상의 존재에 대한 보다 양질의 데이터 또는 상기 결과가 사실상 초기 샘플들로부터의 혼합물일 수 있는 점을 획득하였다.

병행 실험 PF85를 위하여, 상기 결과들이 다른 결정 형태들을 나타내는 RPL554의 능력에 대한 일부 상대적으로 흥미있는 정보를 제공하였다. 결합된 분석 도구들(XRPD/DSC)은 비록 이들이 대부분 혼합물들 이었던 것으로 느껴졌지만 적어도 다섯의 결정 형태들이 잠재적으로 RPL554 Ⅰ형과 동시에 존재하였던 점을 드러내었다. 새로운 상들의 가장 그럴듯한 증거를 회귀시켰으며 확대된 규모를 위하여 선택되었던 상기 실험들은 다음과 같다(다른 시스템들이 이러한 결과들을 복제할 수 있었던 점에 유의 바란다).

PF85A3 클로로벤젠/DMSO

PF85A5 쿠멘/DMSO

PF85B4 1-메틸-2-프로판올/DMSO

PF85D10 헥산/DMSO

PF8512 아세트산 에틸/DMSO

전술한 5개 형태들과 계산된 RPL554 Ⅰ형 패턴의 수치적인 비교.

RPL554의 잠재적으로 새로운 다형체들 및 Ⅰ형의 계산된 프로파일에 관련된 데이터(데이터는 도시되지 않음). 이러한 연구를 위하여, RPL554 Ⅰ형에 대해 색인화를 시도하면서 발견된 단위 셀 변수들에 대해 위탁이 이루어졌다. 소프트웨어 내의 알고리즘은 단위 셀 변수들의 입력을 가능하게 하고, 이러한 경우에서 이들은 Ⅰ형과 연관된다. 상기 소프트웨어는 이후에 프로파일을 계산하며 이에 따라 사용자가 측정된 데이터를 가시적으로 비교할 수 있게 한다. 이러한 접근은 새로운 형태 및/또는 Ⅰ형과 공존하는 새로운 형태(혼합물)의 존재의 확인에 도움이 된다. 전술한 모든 경우들의 대부분에 있어서, 얻어진 결과들은 Ⅰ형이 존재하였고 새롭고 순수한 상 보다는 주로 혼합물들이 예외가 되는 D10을 위한 잠재성과 함께 제시되었던 점이다. 전술한 후보물들의 모두가 규모의 확대를 위하여 표적화되었다.

실험예 11: 잠재적인 새로운 형태들의 규모의 확대(Scale-up of the potential new forms)

일련의 규모가 확대된 실험들이 새로운 및/또는 혼합된 형태들의 보다 많은 물질을 발생시키기 위하여 개시되었다. 이러한 방식에 있어서, 보다 상세한 연구가 수행될 수 있었고 시도된 슬러리들과 크로스 오버(cross over)되었다. 이러한 규모의 확대가 자명하지 않을 수 있으며, 특히 덜 안정한 형태들이 작은 규모로 되었던 경우에 유의하여야 한다(공정 민감성들은 규모의 확대가 시험적일 수 있는 것을 의미한다).

실험(PF90 및 JN386):

RPL554의 저장 용액이 뜨거운 DMSO 내에 마련되었다. 상기 용액은 연마되어 여과되었으며 부피(4ml)의 뜨거운 용매(55℃)에 1.75ml(대략 200㎎의 함량)이 첨가되었다. 샘플들을 교반되게 하였고 상기 잠재적으로 새로운 다형체들을 발생시켰던 조건들을 모방하기 위해 시간이 지나며 서서히 증발되었다. 침전 후에, 상기 샘플들은 여과되었고 XRPD에 의한 분석 전에 진공 내에서 40℃에서 건조되었다. 다음 표(표 9)는 RPL554를 위한 규모가 확대된 실험들을 요약한 것이다.

우세한 형태를 나타내는 잠재적 다형체들의 규모 확대의 결과들

용매(DMSO 및 ...)	관찰들	XRPD
에틸 아세테이트 (JN384A)	분말로서 침전됨, 24 시간 이내	I 형
2-Me-1-프로판올 PF90	미세한 결정들	I 형
아세트산 PF90	껌	N/A
클로로벤젠 PF90	젖은 샘플의 작은 부분이 XRD 상에 위치함	I 형
쿠멘 PF90	매우 미세한 분말	I 형
DMSO PF90	적절한 크기의 결정들과 함께 형성된 고체	약간 다른 XPRD(하기 참조)
헥산 PF90	샘플을 교반없이 서서히 증발되게 함	I 형

상기 물질들을 다루면서, TGA와 같은 분석이 용매화가 XRPD 프로파일들 내의 차이(예를 들면, Ⅰ형과 용매 화합물의 혼합된 상)의 원인이 되는 지, 또는 이것이 형태들의 용매화되지 않은 혼합물에 기인하는 것인지를 결정하는 데 적당할 수 있었다. 아세트산 에틸(ethyl acetate)의 경우에 있어서, 예를 들면, 상기 공정의 규모의 확대가 Ⅰ형을 회귀시켰고, 이에 따라 최초의 XPRD 프로파일 내의 보다 많은 뚜렷한 차이들이 Ⅰ형과 가장 안정한 다형체들로 전환되었던 덜 안정한 형태(분해 상이 이를 지지하는 범위가 아닌 DSC 내에 존재하는 보다 낮은 용융점 흡열)로 인한 것이 가장 그럴듯한 점을 알 수 있다. 동일한 해석이 아세트산을 제외한 껌과 DMSO를 회귀시켰고 혼합물을 복귀시켰던 모든 다른 용매들에도 사실이다. 이 경우에 있어서, 충분한 물질이 Ⅰ형과 시간에 따라 가장 안정한 형태로 전환될 수 있었던 덜 안정한 형태의 존재를 확인하도록 얻어질 수 있었다. 이러한 용매가 주요 형태들로의 수많은 변화들을 제공하였던 것을 나타내지만 규모가 확대된 Ⅰ형에 의존하는 것은 여전히 다수 성분인 이와 같은 점은 PF98A4 및 JN376A4 내의 DMSO로부터 확인된 덜 안정한 형태들이 아닌 점에 유의하여야 한다.

상기 분석(도 18 및 도 19)은 DMSO를 수반하는 규모가 확대된 실험과 연관된다.

XRPD 데이터는 다시 Ⅰ형에 속하지 않는 피트들의 존재를 분명하게 보여준다. 열분석에서 입증된 바와 같이, 보다 높은 용융 화합물(261℃에서 개시)이 공존하는 반면 Ⅰ형은 다수(246.1℃에서 용융 개시) 내에 존재한다. 중량 분석(gravimetric analysis)은 상기 샘플을 실온(RT)으로부터 100℃까지 가열할 때에 TGA에서 질소 흐름 하에서 증발되는 상기 샘플 내의 유리(free) DMSO의 존재를 증명한다. 이는 보다 높은 용융 화합물 내의 상기 용매의 함유에 관련되지 않을 수 있다. 비록 모든 유리 DMSO가 가열에 의해 사라지는 것으로 보이지만, 상기 TGA 곡선은 '포함된' DMSO와 관련될 수 있는 100℃ 내지 200℃ 사이의 느리지만 꾸준한 중량 손실을 보여주며, 비록 순수한 상의 분리가 없어도, 이러한 가정들이 이루어지기 어렵다. 양성자 NMR은 예기되는 바와 같이 상기 샘플 내의 DMSO의 존재를 보여준다.

결론으로서, RPL554를 위한 규모가 확대된 실험들은 Ⅰ형이 특권적인 것으로 잔류하고 또한 동력학적으로 보다 바람직하였던 점을 입증한다. 관찰된 상기 혼합된 상들의 대부분이 궁극적으로 Ⅰ형으로 전환될 수 있었던 점이 가능하다.

실험예 12: 수중 용해도(Aqueous solubility)

비정질 물질과 Ⅰ형이 다루어졌으며, 양 샘플들은 25℃에서의 정제된 물 속에서 직송적인 수중 용해도 연구에 노출되었다. 이러한 실험은 이전의 합성 행동 동안 결정성 또는 비정질 물질이 초기에 내부에서 분리되었던 지가 알려지지 않은 것으로서 수행되었다.

실험:

20㎎의 후보물의 현탁액이 정제된 물(1ml, pH 7) 내에서 혼합되었다. 상기 현탁액은 25℃에서 24시간 동안 평형이 유지되었다. 상기 현탁액은 이후에 HPLC 유리병 내로 여과되었고 여과물은 이후에 표준 용액을 참조하여 HPLC에 의해 수행된 정량화를 갖는 적절한 요소에 의해 희석되었다.

결과:

JN376F 비정형 0.03㎎/ml

RPL554 Ⅰ형 0.001㎎/ml

예상된 바와 같이, 비록 상당해 불용성이지만 상기 비정질 상이 이러한 기본 테스트 하에서 Ⅰ형 보다 용해성인 것이 입증되었다. 유감스럽게도, 비록 Ⅰ형이 이러한 슬러리들로부터 야기되는 점이 알려져 있지만 양 샘플들은 너무 미세하여 XRPD에 의한 재분석을 위해 효과적으로 여과될 수 없었고 분리될 수 없었다.

실험예 13: X-선 데이터; RPL554 단결정과 연관된 관련 변수들( Relevant parameters related to RPL554 single crystal )

RPL554를 위한X-선 데이터는 표 10-표 15 및 도 20-도22에서 찾아볼 수 있다.

[표 10]

RPL554(onyx2010a)를 위한 결정 데이터 및 구조 분석

확인 코드(identification code) onyx2010a

실험식(empirical formula) C26 H31 N5 O4

화학식량(formula weight) 477.56

온도 123(2)K

파장 0.71073Å

결정계 삼사정계

공간군 P-1

단위 셀 치수들 a＝8.1246(4)Å α＝91.583(4)°.

b＝11.4573(5)Å β＝90.299(4)°.

c＝13.2398(6)Å γ＝99.628(4)°.

부피 1214.56(10)Å³

Z 2

밀도(계산됨) 1.306㎎/m³

흡수계수(absorption coefficient) 0.090㎜^-1

F(000) 508

결정 크기 0.32 x 0.22 x 0.08㎜³

데이터 보정을 위한 세타 범위 2.86° 내지 30.72°.

지수 범위들(index ranges) -11<=h<=11, -16<=k<=16, -17<=l<=17

수집된 상들(reflections collected) 13256

독립적인 상들 6619 [R(int)＝0.0281]

세타＝27.50°에 대한 완성도 99.9 %

흡수보정(absorption correction) 등가들로부터 준경험적

최대 및 최소 투과(transmission) 1.00000 및 0.94889

해석 방법(refinement method) F²에 대한 풀-매트릭스 최소 제곱들

데이터/제한들/변수들 6619/0/ 333

F²에 대한 적합도 0.854

최종 R 지수들[I>2시그마(I)] R1＝0.0420, wR2＝0.0852

R 지수들(모든 데이터) R1＝0.0802, wR2＝0.0913

최대로 다른 피크 및 홀 0.309 및 -0.240e.Å ^-3

[표 11]

onyx2010a를 위한 원자 좌표들(x10 ⁴ ) 및 등가 등방성 변위 변수들(Å ² x10 ³ )

U(eq)는 직교시킨 U^ij 텐서(tensor)의 트레이스의 1/3으로 정의된다.

x y z U(eq)

O(1) 2377(1) 8343(1) 861(1) 21(1)

O(2) -7077(1) 8128(1) 3364(1) 22(1)

O(3) -7605(1) 5925(1) 2796(1) 22(1)

O(4) 3558(1) 13706(1) 485(1) 24(1)

N(1) -69(1) 8094(1) 1717(1) 16(1)

N(2) 1803(1) 9907(1) 1810(1) 16(1)

N(3) 1201(1) 11536(1) 2713(1) 18(1)

N(4) 4497(2) 11982(1) 120(1) 21(1)

N(5) 6214(2) 13771(1) -66(1) 21(1)

C(1) 1430(2) 8757(1) 1440(1) 16(1)

C(2) 742(2) 10441(1) 2447(1) 16(1)

C(3) -772(2) 9687(1) 2707(1) 17(1)

C(4) -1198(2) 8572(1) 2327(1) 15(1)

C(5) -2840(2) 7838(1) 2490(1) 15(1)

C(6) -3091(2) 6628(1) 2273(1) 16(1)

C(7) -1613(2) 6080(1) 1962(1) 20(1)

C(8) -487(2) 6879(1) 1271(1) 20(1)

C(9) -4174(2) 8364(1) 2861(1) 17(1)

C(10) -5720(2) 7695(1) 2993(1) 17(1)

C(11) -6002(2) 6483(1) 2709(1) 17(1)

C(12) -4684(2) 5960(1) 2371(1) 18(1)

C(13) -6739(2) 9152(1) 4018(1) 26(1)

C(14) -7922(2) 4669(1) 2626(1) 27(1)

C(15) 16(2) 12112(1) 3230(1) 17(1)

C(16) 318(2) 12495(1) 4241(1) 20(1)

C(17) -752(2) 13173(1) 4697(1) 23(1)

C(18) -2120(2) 13474(1) 4191(1) 23(1)

C(19) -2386(2) 13077(1) 3191(1) 22(1)

C(20) -1340(2) 12405(1) 2698(1) 19(1)

C(21) 1802(2) 12195(1) 4804(1) 31(1)

C(22) -3260(2) 14224(1) 4688(1) 34(1)

C(23) -1614(2) 12080(1) 1592(1) 29(1)

C(24) 3339(2) 10637(1) 1453(1) 18(1)

C(25) 3023(2) 11218(1) 464(1) 20(1)

C(26) 4689(2) 13185(1) 189(1) 17(1)

[표 12]

onyx2010a를 위한 결합 길이들[Å] 및 각도들[°]

O(1)-C(1) 1.2296(13)

O(2)-C(10) 1.3707(14)

O(2)-C(13) 1.4268(15)

O(3)-C(11) 1.3583(15)

O(3)-C(14) 1.4299(16)

O(4)-C(26) 1.2363(14)

N(1)-C(1) 1.3803(16)

N(1)-C(4) 1.3948(14)

N(1)-C(8) 1.4812(16)

N(2)-C(1) 1.3779(16)

N(2)-C(2) 1.4084(15)

N(2)-C(24) 1.4686(16)

N(3)-C(2) 1.2858(16)

N(3)-C(15) 1.4240(15)

N(4)-C(26) 1.3610(17)

N(4)-C(25) 1.4436(17)

N(4)-H(1N) 0.847(14)

N(5)-C(26) 1.3558(17)

N(5)-H(3N) 0.897(16)

N(5)-H(2N) 0.876(15)

C(2)-C(3) 1.4300(18)

C(3)-C(4) 1.3488(17)

C(3)-H(3) 0.9500

C(4)-C(5) 1.4735(17)

C(5)-C(6) 1.3896(17)

C(5)-C(9) 1.4093(16)

C(6)-C(12) 1.3971(18)

C(6)-C(7) 1.4998(17)

C(7)-C(8) 1.5121(18)

C(7)-H(7A) 0.9900

C(7)-H(7B) 0.9900

C(8)-H(8A) 0.9900

C(8)-H(8B) 0.9900

C(9)-C(10) 1.3725(18)

C(9)-H(9) 0.9500

C(10)-C(11) 1.4099(18)

C(11)-C(12) 1.3826(17)

C(12)-H(12) 0.9500

C(13)-H(13A) 0.9800

C(13)-H(13B) 0.9800

C(13)-H(13C) 0.9800

C(14)-H(14A) 0.9800

C(14)-H(14B) 0.9800

C(14)-H(14C) 0.9800

C(15)-C(20) 1.3972(18)

C(15)-C(16) 1.4038(17)

C(16)-C(17) 1.3884(17)

C(16)-C(21) 1.5074(19)

C(17)-C(18) 1.3923(19)

C(17)-H(17) 0.9500

C(18)-C(19) 1.3918(18)

C(18)-C(22) 1.5072(17)

C(19)-C(20) 1.3914(17)

C(19)-H(19) 0.9500

C(20)-C(23) 1.5068(18)

C(21)-H(21A) 0.9800

C(21)-H(21B) 0.9800

C(21)-H(21C) 0.9800

C(22)-H(22A) 0.9800

C(22)-H(22B) 0.9800

C(22)-H(22C) 0.9800

C(23)-H(23A) 0.9800

C(23)-H(23B) 0.9800

C(23)-H(23C) 0.9800

C(24)-C(25) 1.5258(18)

C(24)-H(24A) 0.9900

C(24)-H(24B) 0.9900

C(25)-H(25A) 0.9900

C(25)-H(25B) 0.9900

C(10)-O(2)-C(13) 116.55(10)

C(11)-O(3)-C(14) 117.16(10)

C(1)-N(1)-C(4) 121.65(11)

C(1)-N(1)-C(8) 116.95(10)

C(4)-N(1)-C(8) 121.24(11)

C(1)-N(2)-C(2) 123.78(11)

C(1)-N(2)-C(24) 117.51(10)

C(2)-N(2)-C(24) 118.54(11)

C(2)-N(3)-C(15) 117.37(11)

C(26)-N(4)-C(25) 122.90(11)

C(26)-N(4)-H(1N) 118.4(11)

C(25)-N(4)-H(1N) 118.7(10)

C(26)-N(5)-H(3N) 116.1(10)

C(26)-N(5)-H(2N) 118.0(10)

H(3N)-N(5)-H(2N) 117.6(14)

O(1)-C(1)-N(2) 121.24(12)

O(1)-C(1)-N(1) 121.00(12)

N(2)-C(1)-N(1) 117.73(10)

N(3)-C(2)-N(2) 118.03(12)

N(3)-C(2)-C(3) 127.18(11)

N(2)-C(2)-C(3) 114.78(11)

C(4)-C(3)-C(2) 122.70(11)

C(4)-C(3)-H(3) 118.7

C(2)-C(3)-H(3) 118.7

C(3)-C(4)-N(1) 119.19(12)

C(3)-C(4)-C(5) 123.14(11)

N(1)-C(4)-C(5) 117.61(11)

C(6)-C(5)-C(9) 119.51(12)

C(6)-C(5)-C(4) 120.45(11)

C(9)-C(5)-C(4) 120.04(11)

C(5)-C(6)-C(12) 119.59(11)

C(5)-C(6)-C(7) 118.11(12)

C(12)-C(6)-C(7) 122.29(12)

C(6)-C(7)-C(8) 111.05(11)

C(6)-C(7)-H(7A) 109.4

C(8)-C(7)-H(7A) 109.4

C(6)-C(7)-H(7B) 109.4

C(8)-C(7)-H(7B) 109.4

H(7A)-C(7)-H(7B) 108.0

N(1)-C(8)-C(7) 110.91(10)

N(1)-C(8)-H(8A) 109.5

C(7)-C(8)-H(8A) 109.5

N(1)-C(8)-H(8B) 109.5

C(7)-C(8)-H(8B) 109.5

H(8A)-C(8)-H(8B) 108.0

C(10)-C(9)-C(5) 120.58(12)

C(10)-C(9)-H(9) 119.7

C(5)-C(9)-H(9) 119.7

O(2)-C(10)-C(9) 124.53(12)

O(2)-C(10)-C(11) 115.61(12)

C(9)-C(10)-C(11) 119.83(11)

O(3)-C(11)-C(12) 125.46(12)

O(3)-C(11)-C(10) 115.06(11)

C(12)-C(11)-C(10) 119.48(12)

C(11)-C(12)-C(6) 120.80(12)

C(11)-C(12)-H(12) 119.6

C(6)-C(12)-H(12) 119.6

O(2)-C(13)-H(13A) 109.5

O(2)-C(13)-H(13B) 109.5

H(13A)-C(13)-H(13B) 109.5

O(2)-C(13)-H(13C) 109.5

H(13A)-C(13)-H(13C) 109.5

H(13B)-C(13)-H(13C) 109.5

O(3)-C(14)-H(14A) 109.5

O(3)-C(14)-H(14B) 109.5

H(14A)-C(14)-H(14B) 109.5

O(3)-C(14)-H(14C) 109.5

H(14A)-C(14)-H(14C) 109.5

H(14B)-C(14)-H(14C) 109.5

C(20)-C(15)-C(16) 120.45(11)

C(20)-C(15)-N(3) 119.62(11)

C(16)-C(15)-N(3) 119.56(12)

C(17)-C(16)-C(15) 118.75(12)

C(17)-C(16)-C(21) 121.09(12)

C(15)-C(16)-C(21) 120.15(11)

C(16)-C(17)-C(18) 122.27(12)

C(16)-C(17)-H(17) 118.9

C(18)-C(17)-H(17) 118.9

C(19)-C(18)-C(17) 117.49(12)

C(19)-C(18)-C(22) 120.62(13)

C(17)-C(18)-C(22) 121.87(12)

C(20)-C(19)-C(18) 122.35(13)

C(20)-C(19)-H(19) 118.8

C(18)-C(19)-H(19) 118.8

C(19)-C(20)-C(15) 118.69(12)

C(19)-C(20)-C(23) 119.92(12)

C(15)-C(20)-C(23) 121.26(11)

C(16)-C(21)-H(21A) 109.5

C(16)-C(21)-H(21B) 109.5

H(21A)-C(21)-H(21B) 109.5

C(16)-C(21)-H(21C) 109.5

H(21A)-C(21)-H(21C) 109.5

H(21B)-C(21)-H(21C) 109.5

C(18)-C(22)-H(22A) 109.5

C(18)-C(22)-H(22B) 109.5

H(22A)-C(22)-H(22B) 109.5

C(18)-C(22)-H(22C) 109.5

H(22A)-C(22)-H(22C) 109.5

H(22B)-C(22)-H(22C) 109.5

C(20)-C(23)-H(23A) 109.5

C(20)-C(23)-H(23B) 109.5

H(23A)-C(23)-H(23B) 109.5

C(20)-C(23)-H(23C) 109.5

H(23A)-C(23)-H(23C) 109.5

H(23B)-C(23)-H(23C) 109.5

N(2)-C(24)-C(25) 110.92(11)

N(2)-C(24)-H(24A) 109.5

C(25)-C(24)-H(24A) 109.5

N(2)-C(24)-H(24B) 109.5

C(25)-C(24)-H(24B) 109.5

H(24A)-C(24)-H(24B) 108.0

N(4)-C(25)-C(24) 111.97(11)

N(4)-C(25)-H(25A) 109.2

C(24)-C(25)-H(25A) 109.2

N(4)-C(25)-H(25B) 109.2

C(24)-C(25)-H(25B) 109.2

H(25A)-C(25)-H(25B) 107.9

O(4)-C(26)-N(5) 122.27(13)

O(4)-C(26)-N(4) 122.15(13)

N(5)-C(26)-N(4) 115.55(12)

[표 13]

onyx2010a를 위한 비등방성 변위 변수들(Å ² x10 ³ )

상기 비등방성 변위 인자 지수부는 -2π²[h²a*²U¹¹＋...＋2 h k a* b* U¹²]의 형태를 취한다.

U¹¹ U²² U³³ U²³ U¹³ U¹²

O(1) 19(1) 20(1) 24(1) -1(1) 6(1) 4(1)

O(2) 16(1) 20(1) 28(1) -4(1) 4(1) 3(1)

O(3) 16(1) 16(1) 32(1) -1(1) 2(1) -2(1)

O(4) 23(1) 20(1) 30(1) 1(1) 8(1) 7(1)

N(1) 15(1) 14(1) 19(1) -1(1) 2(1) 2(1)

N(2) 14(1) 14(1) 19(1) 1(1) 4(1) 0(1)

N(3) 17(1) 16(1) 19(1) -1(1) 1(1) 1(1)

N(4) 20(1) 16(1) 28(1) 3(1) 10(1) 3(1)

N(5) 20(1) 15(1) 28(1) 3(1) 6(1) 2(1)

C(1) 16(1) 16(1) 17(1) 2(1) 0(1) 3(1)

C(2) 16(1) 16(1) 16(1) 2(1) 0(1) 3(1)

C(3) 15(1) 16(1) 19(1) 0(1) 3(1) 2(1)

C(4) 14(1) 16(1) 16(1) 3(1) 1(1) 3(1)

C(5) 15(1) 15(1) 14(1) 1(1) -1(1) 1(1)

C(6) 16(1) 15(1) 17(1) 1(1) 0(1) 2(1)

C(7) 19(1) 14(1) 27(1) -1(1) 1(1) 2(1)

C(8) 19(1) 14(1) 25(1) -4(1) 3(1) 1(1)

C(9) 18(1) 14(1) 19(1) 0(1) 1(1) 1(1)

C(10) 17(1) 19(1) 16(1) 2(1) 1(1) 5(1)

C(11) 14(1) 18(1) 19(1) 3(1) -1(1) -1(1)

C(12) 20(1) 13(1) 20(1) 0(1) 0(1) 0(1)

C(13) 24(1) 24(1) 32(1) -6(1) 4(1) 6(1)

C(14) 22(1) 17(1) 39(1) -1(1) 7(1) -5(1)

C(15) 16(1) 12(1) 21(1) 0(1) 3(1) -2(1)

C(16) 23(1) 16(1) 21(1) 2(1) 1(1) 1(1)

C(17) 31(1) 21(1) 17(1) 0(1) 3(1) 3(1)

C(18) 26(1) 19(1) 24(1) 2(1) 8(1) 4(1)

C(19) 20(1) 20(1) 26(1) 3(1) 0(1) 3(1)

C(20) 20(1) 14(1) 21(1) 0(1) 0(1) -1(1)

C(21) 37(1) 34(1) 22(1) -3(1) -7(1) 11(1)

C(22) 38(1) 38(1) 30(1) -2(1) 7(1) 16(1)

C(23) 33(1) 34(1) 23(1) -4(1) -7(1) 13(1)

C(24) 13(1) 16(1) 23(1) 1(1) 3(1) 0(1)

C(25) 17(1) 18(1) 24(1) 3(1) 3(1) 0(1)

C(26) 20(1) 17(1) 15(1) 1(1) 1(1) 2(1)

[표 14]

onyx2010a를 위한 수소 좌표들(x10 ⁴ ) 및 등방성 변위 변수들(Å ² x10 ³ )

x y z U(eq)

H(3) -1508 9983 3166 20

H(7A) -2003 5309 1609 24

H(7B) -974 5932 2570 24

H(8A) 552 6554 1154 24

H(8B) -1053 6906 610 24

H(9) -4000 9189 3022 20

H(12) -4863 5137 2202 21

H(13A) -5908 9037 4528 40

H(13B) -7771 9279 4352 40

H(13C) -6305 9845 3621 40

H(14A) -7656 4481 1925 40

H(14B) -9101 4366 2750 40

H(14C) -7224 4300 3085 40

H(17) -542 13440 5379 28

H(19) -3315 13270 2832 26

H(21A) 1975 12671 5434 46

H(21B) 2798 12366 4385 46

H(21C) 1596 11352 4961 46

H(22A) -4074 13725 5103 51

H(22B) -3849 14592 4168 51

H(22C) -2599 14843 5117 51

H(23A) -2496 12476 1324 44

H(23B) -1945 11221 1508 44

H(23C) -577 12334 1225 44

H(24A) 4208 10135 1350 21

H(24B) 3754 11257 1972 21

H(25A) 2653 10595 -60 24

H(25B) 2114 11687 560 24

H(1N) 5292(18) 11670(13) -118(11) 31(4)

H(3N) 6273(19) 14542(14) -193(11) 31(4)

H(2N) 6881(19) 13378(14) -400(12) 36(5)

[표 15]

onyx2010a를 위한 비틀림 각들[°]

C(2)-N(2)-C(1)-O(1) 177.74(12)

C(24)-N(2)-C(1)-O(1) 2.58(17)

C(2)-N(2)-C(1)-N(1) -0.33(17)

C(24)-N(2)-C(1)-N(1) -175.49(11)

C(4)-N(1)-C(1)-O(1) -176.36(11)

C(8)-N(1)-C(1)-O(1) -1.08(18)

C(4)-N(1)-C(1)-N(2) 1.72(17)

C(8)-N(1)-C(1)-N(2) 177.00(11)

C(15)-N(3)-C(2)-N(2) 170.96(11)

C(15)-N(3)-C(2)-C(3) -7.54(19)

C(1)-N(2)-C(2)-N(3) -177.51(12)

C(24)-N(2)-C(2)-N(3) -2.40(17)

C(1)-N(2)-C(2)-C(3) 1.18(17)

C(24)-N(2)-C(2)-C(3) 176.30(11)

N(3)-C(2)-C(3)-C(4) 174.92(13)

N(2)-C(2)-C(3)-C(4) -3.63(18)

C(2)-C(3)-C(4)-N(1) 5.10(19)

C(2)-C(3)-C(4)-C(5) -172.25(12)

C(1)-N(1)-C(4)-C(3) -4.08(18)

C(8)-N(1)-C(4)-C(3) -179.16(12)

C(1)-N(1)-C(4)-C(5) 173.41(11)

C(8)-N(1)-C(4)-C(5) -1.67(17)

C(3)-C(4)-C(5)-C(6) -166.10(12)

N(1)-C(4)-C(5)-C(6) 16.51(17)

C(3)-C(4)-C(5)-C(9) 14.28(19)

N(1)-C(4)-C(5)-C(9) -163.11(11)

C(9)-C(5)-C(6)-C(12) 3.69(18)

C(4)-C(5)-C(6)-C(12) -175.93(11)

C(9)-C(5)-C(6)-C(7) -174.98(11)

C(4)-C(5)-C(6)-C(7) 5.40(18)

C(5)-C(6)-C(7)-C(8) -39.51(16)

C(12)-C(6)-C(7)-C(8) 141.86(13)

C(1)-N(1)-C(8)-C(7) 152.41(11)

C(4)-N(1)-C(8)-C(7) -32.29(16)

C(6)-C(7)-C(8)-N(1) 51.19(15)

C(6)-C(5)-C(9)-C(10) -1.21(19)

C(4)-C(5)-C(9)-C(10) 178.41(12)

C(13)-O(2)-C(10)-C(9) -26.55(18)

C(13)-O(2)-C(10)-C(11) 155.32(12)

C(5)-C(9)-C(10)-O(2) 178.92(11)

C(5)-C(9)-C(10)-C(11) -3.02(19)

C(14)-O(3)-C(11)-C(12) 7.02(18)

C(14)-O(3)-C(11)-C(10) -173.21(11)

O(2)-C(10)-C(11)-O(3) 3.21(16)

C(9)-C(10)-C(11)-O(3) -175.02(11)

O(2)-C(10)-C(11)-C(12) -177.01(11)

C(9)-C(10)-C(11)-C(12) 4.76(19)

O(3)-C(11)-C(12)-C(6) 177.47(12)

C(10)-C(11)-C(12)-C(6) -2.28(19)

C(5)-C(6)-C(12)-C(11) -1.94(19)

C(7)-C(6)-C(12)-C(11) 176.67(12)

C(2)-N(3)-C(15)-C(20) -72.70(16)

C(2)-N(3)-C(15)-C(16) 114.22(14)

C(20)-C(15)-C(16)-C(17) -0.3(2)

N(3)-C(15)-C(16)-C(17) 172.76(12)

C(20)-C(15)-C(16)-C(21) -178.86(13)

N(3)-C(15)-C(16)-C(21) -5.84(19)

C(15)-C(16)-C(17)-C(18) 0.7(2)

C(21)-C(16)-C(17)-C(18) 179.27(14)

C(16)-C(17)-C(18)-C(19) -0.5(2)

C(16)-C(17)-C(18)-C(22) -179.15(14)

C(17)-C(18)-C(19)-C(20) -0.2(2)

C(22)-C(18)-C(19)-C(20) 178.52(14)

C(18)-C(19)-C(20)-C(15) 0.6(2)

C(18)-C(19)-C(20)-C(23) -175.26(14)

C(16)-C(15)-C(20)-C(19) -0.4(2)

N(3)-C(15)-C(20)-C(19) -173.37(12)

C(16)-C(15)-C(20)-C(23) 175.44(13)

N(3)-C(15)-C(20)-C(23) 2.4(2)

C(1)-N(2)-C(24)-C(25) 85.94(13)

C(2)-N(2)-C(24)-C(25) -89.49(13)

C(26)-N(4)-C(25)-C(24) -105.34(14)

N(2)-C(24)-C(25)-N(4) 177.45(10)

C(25)-N(4)-C(26)-O(4) -5.4(2)

C(25)-N(4)-C(26)-N(5) 173.13(12)

본 출원을 통해 언급된 모든 참조 문헌들(문헌 참조들, 발행된 특허들, 공개된 특허 출원들 및 함께 계류 중인 특허 출원들을 포함하여)은 이들의 내용들이 명백하게 참조로서 여기에 포함된다. 다르게 정의되지 않는 한, 여기서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어들은 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 보편적으로 알려진 의미에 부합한다.

해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 여기서 설명하는 본 발명의 특정한 실시예들의 많은 균등물들이 통상적인 실험을 이용함에 지나지 않을 뿐임을 인지할 수 있거나 알 수 있을 것이다. 이러한 균등물들은 첨부된 특허 청구 범위에 의해 보호되도록 의도된 것이다.

Claims

2θ에 대하여 10.1° 및 12.9°에서 특성 피크들(characteristic peaks)을 포함하는 분말 X-선 회절 패턴(powder X-ray diffraction pattern)을 갖는, N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노(mesitylimino))-9,10-디메톡시(dimethoxy)-4-옥소(oxo)-6,7-디하이드로(dihydro)-2H-피리미도(pyrimido)[6,1-a]-이소퀴놀린(isoquinolin)-3(4H)-일(yl)]에틸(ethyl)}요소(urea)의 결정성 다형체 (I)로서,
단결정 분석에 의하여 수득된 하기의 구조 파라미터(structural parameter)를 갖는, 결정성 다형체 (I):
온도 123(2)K
파장 0.71073Å
결정계 삼사정계(Triclinic)
공간군 P-1
단위 셀 치수들
a＝8.1246(4)Å α＝91.583(4)°.
b＝11.4573(5)Å β＝90.299(4)°.
c = 13.2398(6)°Å γ＝99.628(4)°.
부피 1214.56(10)Å³
Z 2.
제1항에 있어서,
상기 분말 X-선 회절 패턴은 2θ에 대하여 15.3° 및 17.6°에서 특성 피크들을 더 포함하는, 결정성 다형체 (I).
제1항에 있어서,
상기 분말 X-선 회절 패턴은 2θ에 대하여 6.4°, 12.6°, 13.6°, 14.2°, 14.7°, 15.3°, 15.4°, 15.8°, 17.0°, 17.6°, 18.9°, 20.9°, 22.4°, 22.8° 및 28.7°로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 3 개의 특성 피크들을 더 포함하는, 결정성 다형체 (I).
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
248℃에서 최대를 나타내는 시차주사 열량법 트레이스(differential scanning calorimetry trace)를 가지는, 결정성 다형체 (I).
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제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 결정성 다형체 (I) 및 약학적으로 허용 가능한 운반체(carrier)를 포함하는, 천식(asthma), 알레르기 천식(allergic asthma), 고초열(hay fever), 알레르기 비염(allergic rhinitis), 기관지염(bronchitis), 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease: COPD), 성인 호흡곤란 증후군(adult respiratory distress syndrome: ARDS), 낭포성 섬유증(cystic fibrosis), 피부 질환(skin disorders), 아토피 피부염(atopic dermatitis), 건선(psoriasis), 안구 염증(ocular inflammation), 뇌 허혈증(cerebral ischaemia), 또는 자가면역성 질병(auto-immune disease) 치료용 고체 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 결정성 다형체 (I) 및 공지된 치료제를 포함하고,
상기 치료제는 천식, 알레르기 천식, 고초열, 알레르기 비염, 기관지염, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 성인 호흡곤란 증후군(ARDS), 낭포성 섬유증, 피부 질환, 아토피 피부염, 건선, 안구 염증, 뇌 허혈증, 또는 자가면역성 질병의 치료에 사용되는 것인,
천식, 알레르기 천식, 고초열, 알레르기 비염, 기관지염, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 성인 호흡곤란 증후군(ARDS), 낭포성 섬유증, 피부 질환, 아토피 피부염, 건선, 안구 염증, 뇌 허혈증, 또는 자가면역성 질병 치료용 고체 조성물.
제10항에 있어서,
상기 치료제는 천식 또는 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)의 치료에 사용되는 것인, 천식, 알레르기 천식, 고초열, 알레르기 비염, 기관지염, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 성인 호흡곤란 증후군(ARDS), 낭포성 섬유증, 피부 질환, 아토피 피부염, 건선, 안구 염증, 뇌 허혈증, 또는 자가면역성 질병 치료용 고체 조성물.
천식, 알레르기 천식, 고초열, 알레르기 비염, 기관지염, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 성인 호흡곤란 증후군(ARDS), 낭포성 섬유증, 피부 질환들, 아토피 피부염, 건선, 안구 염증, 뇌 허혈증 또는 자가면역성 질병들에 대하여, 포유동물에서의 치료를 위한 의약으로서,
상기 의약은 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 결정성 다형체 (I)를 포함하는, 의약.
제12항에 있어서,
상기 포유동물은 인간인, 의약.
99 중량% 이상의 N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소 로 구성되는 결정성 고체의 형태이고,
다형체 형태(polymorphic form)에서 적어도 95%가 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 결정성 다형체 (I)인,
N-{2-[(2E)-2-(메시틸리미노)-9,10-디메톡시-4-옥소-6,7-디하이드로-2H-피리미도[6,1-a]-이소퀴놀린-3(4H)-일]에틸}요소 화합물.
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