MX2010006125A - Utilizacion de alfa-1-antitripsina para la preparacion de medicamentos para el tratamiento del sindrome de fatiga cronica. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a la utilización de Alfa-1-antitripsina para la preparación de medicamentos eficaces para el tratamiento del Síndrome de Fatiga Crónica. Además, la presente invención se refiere a la utilización de plasma u otras formas terapéuticas con un contenido de Alfa-1-antitripsina suficiente para conseguir una dosis superior o igual a 6 mg de Alfa-1-antitripsina por Kg de peso corporal con una periodicidad entre 1 y 31 días.

Description

UTILIZACIÓN DE ALFA-1-AN ITRIPSINA PARA LA PREPARACIÓN DE MEDICAMENTOS PARA TRATAMIENTO DEL SÍNDROME DE FATIGA CRÓNICA DESCRIPCIÓN La presente invención se refiere á la uti la Alfa-l-antitripsina para la preparación de medi caces para el tratamiento del Síndrome de Fatiga C ECEDENTES El Síndrome de Fatiga Crónica {SFC) ermedad compleja, definida por los c ernacionales de Fukuda (Fukuda K, et al. The igue syndrome: a comprehensive approach to its de study. Ann Intern Med. 1994; 121: 953-959) ervisión del Centro de Enfermedades de Atlant ocasiona una reducción considerable de los vios de actividad cotidiana del paciente, llegan uperable para el paciente. 2. Exclusión de otras enfermedades potenc santes de fatiga crónica, como enfermedades en ecciosas, neoplásicas y/o psiquiátricas, terios menores De forma concurrente, deben estar presentes los siguientes criterios menores, todos ellos pers ante 6 ó más meses y posteriores a la presentaci iga : Trastornos de concentración o íente .

Odinofagia.

Adenopatías cervicales o axilares dolo SFC se encuentra la Fibromialgia (FM) , que es un acterizado por un cuadro de dolor culoesquelético generalizado de origen no articula criterios de clasificación del American Col umatology (The American College of Rheumatolo teria for the Classification of Fibromyalgia . R Multicenter Criteria Committee. Arthritis Rhe 2): 160-172) las dos características fundamentales gnóstico de la FM son: 1) la presencia de dolor generalizado de es de duración; 2) una sensibilidad anormal a la presión una fuerza aproximada de 4 kg, en al menos 1 tos específicos, denominados "tender points". Ad or, las personas con FM experimentan algunos La FM y el SFC son dos enfermedades diferen una forma de presentación y síntomas muy simil confunde muchas veces al no experto. Pese a ello xistir en muchos pacientes. Casi un 80% de enfe f cumplen los criterios para la clasificación de que solo entre un 7 y un 10% de pacientes con F de SFC. El diagnóstico diferencial entre amb cartar otras posibles causas de dolor y fat damental para un correcto enfoque diagnóstico, pr erapéutico .

El SFC afecta predominantemente a adultos un pico de inicio entre los 20 y los 40 años, es más común en mujeres que en hombres (Lloyd AR valence of chronic fatigue syndrome in an Au ulation. Med J Aug 1990; 153: 522-528), aun nclarciised specialist medical care alone for patie chronic fatigue syndrome/myalgic encephalomyel ephalopathy. BMC Neurol 2007, 7: 6). En Estados Reino Unido, cuatro estudios proporcionaron una es 0,2% a 0,7%, es decir, de 200 a 700 casos por sonas. En Japón, se registró una prevalencia de eral, en los centros de atención primari imaciones de prevalencia de SFC fueron de entre %, en función de la intensidad de la evaluación quiátrica y de laboratorio (The Royal Austr lege of Physicians. Chronic Fatigue Syndrome. ctice Guidelines 2002) .

El pronóstico de recuperación del remadamente pobre y en la actualidad no se dispo tamiento universal que haya demostrado ser opción re otros medicamentos) y los suplementos alimenti tante, estas intervenciones, con frecuencia, no c beneficio mínimo deseable en muchos pacientes ari N, et al. Chronic fatigue syndrome: a revi chiatry. 2003; 160(2): 221-236. / Rimes KA, atments for Chronic Fatigue Syndrome. Occu icine 2005: 5(1); 32-39). Así pues, es evidente qu necesidad de encontrar medicamentos eficaces tamiento del SFC.

El SFC es una afección multisistémi ología o factor desencadenante se desconoce, sten diversas hipótesis sobre sus agentes c ectos genéticos, anormalidades del sistema tral, alteraciones neuromusculares y metabólicas, cológicos, agentes tóxicos, infecciones y deseq 2002) .

Los interferones (IFNs) son proteínas pr uralmente por el sistema inmunitario en resp ntes externos como bacterias, virus y parásit ulas cancerígenas. Los dos productos más significa estimulación del IFN son la proteína quinasa R (P onucleasa L {RNasa L) . La PKR detiene la traduc A vírico mientras que la RNasa L corta el d etivo final de ambas proteínas es inducir a la a los agentes infecciosos.

El 1994 Suhadolnik, et al. (Upregulation A synthetase/RNase L antiviral pathway associa onic fatigue syndrome. Clin Infect Dis 1994; 18 S96-S104) descubrieron que los monocitos de iférica (PBMC) de pacientes con SFC presentaban u Los pacientes con SFC muestran muchos sint característicos de disfunciones del transporte de icos. El potencial de la interrupción de los icos en pacientes con SFC se tuvo en cuenta c erminó que el inhibidor de la RNasa L (RLI) pert superfamilia ABC de transportadores de canales ión inactiva la RNasa L mediante la unión a uirina presentes en la RNasa L. La eliminación del uirina durante la fragmentación de la RNasa L, ientes con SFC, sugirió que estos fragmentos de a rían ser capaces de interaccionar y interru cionamiento normal de los canales iónicos. La di estos transportadores explicaría muchos de los ontrados en pacientes con SFC: sudores no coidosis, hipersensibilidad química, disfunc drome . J Chronic Fatigue Syndrome 2001; 8 (3/4): 8 La elastasa, la catepsina-G y la m-calp imas capaces de realizar la proteólisis o fragment RNasa L (Englebienne P, et al. Interactions betwe ankyrin-like domain and ABC transporters as a gin of pain, ion transport, CNS and immune diso onic fatigue immune dysfunction syndrome. J igue Syndrome 2001; 8 (3/4) : 83-102 / Demetre E, onuclease L proteolysis in peripheral blood mo is of chronic fatigue syndrome patients. J Biol Ch 277(38): 35746-35751). Estas tres proteasa ilcadas en los mecanismos de defensa contra ógenos y en los procesos inflamatorios, de maner cuente encontrar su concentración anormalmente ante una respuesta inflamatoria. En el caso del S Demetre E, et al . demostraron que la elasta papel relevante en la degradación de la RNasa L, a un inhibidor especifico de la elastasa era c ibir, en gran parte, la proteólisis de la RNa tivo de PBMC de pacientes con SFC.

Ante la necesidad de encontrar medi caces para el tratamiento del SFC, los rendieron investigaciones y pruebas de gran am fundidad que han fructificado en la presente in se basa en la utilización de la Alfa-1 Antitripsi a la preparación de medicamentos para el tratami CRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La Alfa-1 Antitripsina (AAT) es una glico retada en los hepatocitos, normalmente present ibitoria de múltiples mediadores de inflamació icales oxidantes (Brantly M. Alphal-antitrypsin: antiprotease : extending the half-life of a natur lammatory molecule by conjugation with poly col. Am J Respir Cell Mol Biol 2002; 27(6): 652-65 La deficiencia de AAT es una enfermedad her ocasiona principalmente enfisema pulmonar en pranas de la vida adulta (30-40 años) . La ifestación más frecuente es la enfermedad del hig de afectar a recién nacidos, niños y adultos cuente es una enfermedad inflamatoria de ominada paniculitis necrotizante (American T iety/European Respiratory Society Statement: Stand diagnosis and management of individuáis with itrypsin deficiency. Am J Respir Crit Care Med 20 - ??? por encima de los niveles mínimos cons tectores (de 11 jimol/l) (We ers MD, et al. Rep rapy for alphal-antitrypsin deficiency associat hysema. New Eng J Med 1987; 316: 1055-1062). íos estudios clínicos sugieren que la ter mplazamiento con AAT es clínicamente eficaz por d progresión del enfisema pulmonar y reducir la mo ersholm N, et al. Does alpha-l-antitrypsin augm rapy slow the annual decline in FEV1 in patie eré" hereditary alpha-l-antitrypsin deficiency? Eu 1997; 10: 2260-2263 / The Alpha-l-Antitrypsin De istry Study Group. Survival and FEV1 dec ividuals with severe deficiency of alpha-l-antitry espir Crit Care Med 1998; 158: 49-59).

La extensa experiencia clínica en ter ir Crit Care Med 2003; 168: 818-900).

Para comprobar si la inhibición de la elas AAT podría evitar la degradación de la RNasa entores -realizaron diversos estudios mediante el vitro de PBMC de pacientes con SFC junto con conc AAT. En base a estos estudios, los inventores com los extractos de PBMC de pacientes con SFC pre elevada actividad elastasa, muy superior a la ractos de PBMC de controles sanos. Los extractos 6 sujetos sanos mostraban una actividad elastasa i U/mg de extracto (CV= 38,9), con un mínimo-má 125 ü/mg de extracto, mientras que los extractos 8 pacientes con SFC exhibían una actividad elasta 322 U/mg de extracto (CV=30,5), con un mínimo-m -453 U/mg de extracto. 3 mg/ml, la actividad elastasa intracelular se media de -87,2 % (07=0,0 ), con un mínimo-máximo -95,4 %; para el cultivo con AAT 6 mg/ml, la a racelular se inhibió una media de -91,0 % (CV=0, mínimo-máximo de -76,1 a 97,4 %.

Por otra parte, los inventores comprobaro evitaba la degradación de la RNasa L de 83 k erar la forma hiperactiva de RNasa L de 37 tivos de PBMC de pacientes con SFC. Los PBMC de 2 os y los PBMC de 2 pacientes con SFC se cultivaron horas en ausencia y en presencia de AAT 3 g/1. tivos de PBMC de los 2 sujetos sanos, no se ob erencias importantes en el análisis de la degrad de la RNasa L entre ambos cultivos. Después del cu IC sin AAT, la relación RNasa L 83 kDa vs RNasa ación RNasa L 83 kDa vs RNasa L 37 kDa era de 1, ntras que después del cultivo con AAT, relación RN vs RNasa L 37 kDa era de 0,2 y 0,6, respectivamen Los presentes inventores hallaron que ivaba la expresión de genes implicados en la tetasa, de manera que la administración de AAT ría restablecer la actividad normal de la RNa venir su proteólisis en los PBMC de los pacientes PBMC de 6 pacientes con SFC se cultivaron en au presencia de AAT a dos concentraciones distintas: 3,0 g/1. A continuación, se extrajo el RNA lizado con el sistema Genechips Human Genome U133 fymetrix) . La expresión del gen codificador para goadenilato sintetasa, enzima responsable de la las moléculas 2-5A, y por lo tanto, activadore AAT exógena podría reducir la activación las v lamatorias de los PBMC de pacientes con SFC. Los P ientes con SFC se cultivaron en ausencia y en pres a dos concentraciones distintas: 0,5 g/1 y 3,0 tinuación, se extrajo el RNA que fue analizado tema Genechips Human Genome U133 Plus 2.0 (Affy resultados se presentaron como la relación e resión de genes en presencia de AAT respecto la , e genes en ausencia de AAT. La expresión de divers ificadores para metalotioninas disminuyó después tivos en presencia de AAT. Concretamente, la expr metalotionina 2A, la metalotionina IX, la metal la metalotionina 1F y la metalotionina 1E se redu veces de media en los cultivos con AAT 0,5 g/1 y pectivamente, en relación con los cultivos en aus alotioninas también juegan un papel muy importan ducción de óxido nítrico (NO) , mediador inmune pre vadas concentraciones en pacientes con SFC (Kuru Hypothalamic digoxin, cerebral chemical domina lgic encephalomyelitis . Int J Neurosci 2003; -701) . Un descenso en la producción de NO, debi minución de la expresión de las metalotioninas la AAT, podría ser otro mecanismo beneficioso teína en el contexto de pacientes con SFC.

Los inventores hallaron también que la AAT expresión del gen que codifica para la AAT, así inistración de AAT exógena podría promover su resión en los PBMC de pacientes con SFC. Los PB ientes con SFC se cultivaron en ausencia y en pres a dos concentraciones distintas: 0,5 g/1 y 3,0 . A pesar de que la AAT se sintetiza principalment atocitos, Perlmutter DH, et al. describieron tar resión en monocitos (The cellular defect in a teinase inhibitor (alpha 1-PI) deficiency is expr ian monocytes and in Xenopus oocytes injected wi er mRNA. Proc Nati Acad Sci U S A. 1985 8-6921) . Asi pues, AAT expresada intracelular ucida por la presencia de AAT, podría ejercer u ibidor de la elastasa de los cultivos de PBMC de p SFC. Además, no se puede descartar que la AAT i ectamente la elastasa intracelular tras internali células de PBMC, tal y como se ha descrito para o células {Zhang B, et al. Alphal-antitrypsin protec is from apoptosis. Diabetes 2007; 56(5): 1316-13 tanto, los dos mecanismos de inhibición de la ela icit natural que cursaba en forma de enfe monares (enfisema pulmonar) o de enfe lamatorias de las piel (paniculitis ) .

Sin que los inventores deseen sentirse lim guna hipótesis, de la forma en la que los icamentos que contienen AAT se manifiestan tamiento del SFC, de forma no limitativa, han est hipótesis de que la AAT tiene un papel importan trol de las células inmunológicas , responsables tomas asociados al SFC, asi como en la regulaci resión de genes relacionados con el sistema inmuno El tratamiento del SFC puede realiza centrados terapéuticos de AAT, purificados a p sma humano o producidos por tecnología recomb nsgénica. Asimismo, es posible el tratamiento con éculas pueden ser obtenidas a partir de plasma ducidas por métodos sintéticos o por te ombinante o transgénica.

La presente invención además prevé un mét tratamiento del SFC que comprende la administrac íente que sufra o tenga riesgo de desarrollar el cantidad terapéuticamente efectiva de AAT en com uno o más portadores farmacéuticamente inertes o El régimen de tratamiento de la invención administración periódica repetida de AAT a ef minuir o eliminar los síntomas del SFC. tamiento del SFC, se estima que una dosis igual o g de AAT por kilogramo (kg) .de peso corporal- in una periodicidad entre 1 y 31 días sería suficie ificación preferente de AAT situaría entre los 15 el de AAT en suero deseado, hasta 8 veces por e niveles básales a las 24 horas siguiente inistración .

Según la realización de la invención, la A inistrarse por inyección parenteral, y de acuerdo lización preferente, la administración se efect intravenosa, aunque también puede administrarse intramuscular o intradérmic . Alternativamente, ría ser administrada por via inhalada. En funció de administración, la preparación de AAT se comp solución o suspensión en un vehículo o macéuticamente aceptable. Como ejemplos apropi hos vehículos se incluyen: agua para inyecció éril para inyección, y otros vehículos acuos mplo, cloruro sódico inyectable, Ringer' s iny expertos ordinarios y dependerá de varios f luyendo el sistema y la via de administración, l deseada, y las condiciones de almacenam nsporte .

PLO: Atendiendo a los resultados obtenidos in vi entores, mediante una autorización de uso co cedieron a la administración de un preparado a bas un paciente diagnosticado de SFC.

Una paciente fue diagnosticada de SFC en cumplir los criterios diagnósticos de Fukuda cartados otros procesos médicos inductores de nica tales como enfermedades endocrinas, infe plásica y/o psiquiátricas. Antes de iniciar el tra concentrado de AAT, la paciente present nitivo muy grave. La paciente fue sometida a una infusiones intravenosas del preparado a base de kg peso corporal semanalmente ) durante un perio anas. Tras la finalizar el tratamiento, la sentaba una concentración de elastasa en PB C de idades de actividad por miligramo de extracto de P prueba de evaluación de la reserva funcional, la traba un consumo máximo de oxigeno de 16,4 ml/kg/m espeto al teórico) , una potencia máxima de 85 vati espeto al teórico) , una frecuencia cardiaca máxim saciones (88,8 % respeto al teórico); y en el es disfunción neurocognitiva, evidenciaba un d nitivo grave. Como conclusión general, desp tamiento con el preparado a base de AAT, la stató una mejoría clínica franca, se incorporó de ención, la AAT inhibiría la elastasa y, por l taría la degradación de la RNasa L, impidiéndose regulación de los canales iónicos, que supuestamen ponsable de sintomatología asociada al SFC. Adem erdo con los resultados obtenidos in vitro, la AA uiar la expresión de determinados genes relacion sistema inmunológico para reestablecer el funcio nal de sistema inmunológico y reducir la activ s proinflamatorias .

Si bien la invención se ha descrito con re mpios de realizaciones preferentes, éstos no S siderar limitativos de la invención, que se defi interpretación más amplia de las si vindicaciones .

Claims (4)

REIVINDICACIONES

1. - Utilización de Alfa-1 antitripsina paración de medicamentos para el tratamiento del Fatiga Crónica, que comprende formas terapéuticas ntitripsina o derivados, administrables a humanos.

2. - Utilización, según la reivindicación prende la utilización de plasma u otras apéuticas con un contenido de Alfa-1 anti iciente para conseguir una dosis superior o igual Alfa-1 antitripsina por kg de peso corporal iodicidad entre 1 y 31 dias.

3. - Utilización, según la reivindicación 1 la Alfa-1 antitripsina es purificada a partir d iano .

4. - Utilización, según la reivindicación 1 la Alfa-1 antitri sina o las moléculas ue conti