MX2008013329A - Composiciones para el tratamiento de melanoma. - Google Patents

Abstract

La presente invención se relaciona con el campo de las composiciones farmacéuticas para el tratamiento del melanoma.

Description

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS PARA EL TRATAMIENTO DE MELANOMA Campo de la Invención La presente invención está relacionada con el campo del tratamiento del melanoma.

Antecedentes de la Invención La presente solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud de Patente Provisional de los Estados Unidos de América No. 60/793,243, PRESENTADA el 20 de Abril del 2006. El melanoma es un tumor maligno de melanocitos. Principalmente es un tumor de piel, pero también se puede ver, aunque en una menor frecuencia, en los melanocitos del ojo (melanoma coroideo). Aunque este representa una de las formas más raras de cáncer de piel, el melanoma subyace en la mayoría de muertes relacionadas con el cáncer de piel. A pesar de los muchos años de intensa investigación de laboratorio y clínica, la única cura efectiva actual es la resección quirúrgica del tumor primario antes de que este logre un grosor de más de 1 mm. El melanoma de piel llega al número de 160,000 casos nuevos a lo largo del mundo cada año, y es más frecuente en hombres blancos. Es particularmente común en poblaciones blancas que viven en climas soleados. De acuerdo con el reporte de la OMS aproximadamente 48,000 muertes a nivel mundial que se deben a melanomas malignos son registradas anualmente. [ El diagnostico del melanoma requiere de experiencia, ya que en las primeras etapas puede verse idéntico a lunares no dañinos o no tener ningún color en absoluto. Los lunares que son irregulares en color o forma son sospechosos de ser melanomas malignos o de una lesión premaligna. Los tratamientos actuales incluyen la remoción quirúrgica del tumor con tratamiento adyuvante; quimio y/o inmunoterapia, y/o terapia de radiación. Generalmente, el riesgo de un individuo de desarrollar melanoma depende de dos grupos de factores: el intrínseco y el del medio ambiente. Los factores "intrínsecos" son generalmente la historia familiar del individuo y el genotipo heredado, mientras que los factores del medio ambiente más relevantes son la exposición al sol. ! Los estudios epidemiológicos sugieren que la exposición a la radiación ultravioleta (UVA y UVB) es uno de los mayores contribuyentes al desarrollo del melanoma. La radiación UV causa daño al ADN de las células, las cuales cuando no son reparadas pueden crear mutaciones en los genes de las células. Cuando la célula se divide, estas mutaciones se propagan a las nuevas generaciones de células. Si las mutaciones ocurren en oncogenes o genes supresores de tumor, la velocidad de mitosis en las células portadoras de la mutación puede quedar fuera de control, conduciendo a la formación de un tumor. La exposición extrema a los rayos del sol de manera ocasional (resultante en "bronceado") está causalmente relacionada con el melanoma. Otros factores son las mutaciones en o la pérdida total de genes supresores del tumor. El uso de camas de bronceado (con rayos UVA de penetración profunda) ha sido ligado con el desarrollo de cánceres de piel, incluyendo el melanoma. Los elementos posiblemente importantes en la determinación del riesgo incluyen la intensidad y duración de la exposición al sol, la edad a la que ocurre la exposición al sol, y el grado de pigmentación de la piel. La exposición durante la niñez es un factor de riesgo más importante que la exposición en la vida adulta. Esto se ha ivisto en estudios de migración en Australia donde la gente tiende a retener un perfil de riesgo de su país de I origen si estos migran a Australia como un adulto. Los individuos' con bronceados con I ampollas o descamación (especialmente en los primeros veinticinco años de vida) tienen un I riesgo significativamente mayor de desarrollar melanoma. La gente blanca y de cabello rojizo, las personas con nevo múltiple atípico o nevo displástico y las personas nacidas con nevo melanocítico congénito gigante son las que tienen un riesgo aumentado. | Un historial familiar de melanoma aumenta de manera significativa el riesgo de una persona debido a mutaciones en CDKN2A, CDK4 y varios otros genes que han sido encontrados en familias propensas al melanoma. Los pacientes |con una historia de melanoma son los que tienen un riesgo aumentado de desarrollar un segundo tumor primario.

La incidencia del melanoma ha aumentado en años recientes, pero no está claro en qué grado están involucrados los cambios en cuanto a conducta, en el ¡medio ambiente, o en la detección temprana. El melanoma familiar es genéticamente heterogéneo, y el sitio para el melanoma familiar ha sido identificado en los brazos del cromosoma lp, 9p y 12q. Múltiples eventos genéticos han sido relacionados con la patogénesis del melanomal El gen supresor de tumores múltiples 1 (CDKN2A/MTS1) codifica para el pl6INK4ja - un inhibidor de proteína de peso molecular bajo de quinasas de proteína dependiente de ciclina (CDKs) - la cual ha sido localizada en la región p21 del cromosoma humano 9. j Aun existe una necesidad en la técnica de métodos de tratamiento para tratar, prevenir, inhibir o reducir el melanoma.

Compendio de la Invención De acuerdo con la presente invención, un método de tratamiento para tratar, prevenir, inhibir o reducir el melanoma o la metástasis de este, o jpara tratar, prevenir, inhibir o reducir el crecimiento de células de melanoma o la metástasis de estas, en un sujeto, comprende de la administración al sujeto de una cantidad efectiva para el tratamiento del melanoma de un compuesto inmunomodulador de la formula A.

(A) en donde, n es 1 o 2, R es hidrógeno, acilo, alquilo o un fragmento de péptido, y X es un aminoácido aromático o heterocíclico o un derivado de este, con el propósito de tratar, prevenir, inhibir o reducir dicho melanoma o la metástasis de este en el sujeto, o para tratar, prevenir, inhibir o reducir el crecimiento de dichas células de melanoma o la metástasis de estas en el sujeto. ¡ Breve Descripción de los Dibujos La Figura 1 describe gráficamente el crecimiento del tumor en un estudio de una modalidad a dosis diferentes. ¡ La Figura 2 describe gráficamente el peso del tumor en el estudio de una modalidad a dosis diferentes.

Descripción Detallada de las Modalidades Preferidas de la Invención De acuerdo con una modalidad, la presente invención se relaciona con un método de tratamiento para tratar, prevenir, inhibir o reducir el melanorría por medio de la administración de un compuesto inmunomodulador a un sujeto mamífero, preferiblemente i un paciente humano. j En una modalidad, la enfermedad es melanoma o una metástasis de este. La invención puede ser utilizada para tratar, prevenir, inhibir o reducir ¡el crecimiento de las células de melanoma o la metástasis de estas en un sujeto. Preferiblemente, el melanoma primario es removido por medio de la cirugía antes, durante o después del tratamiento con un compuesto de la invención. : Los compuestos inmunomoduladores de acuerdo con la| presente invención i comprenden de los inmunomoduladores de la formula A: En la Formula A, n es 1 o 2, R es hidrógeno, acilo, alquilo o un fragmento péptido y X es un aminoácido aromático o heterocíclico o un derivado de estos. > Preferiblemente, X es L-triptófano o D-triptófano, más preferiblemente L-triptófano. Derivados apropiados de los aminoácidos aromáticos o heterocíclicos para "X" son: amidas, amidas mono-o-di-alquil (Ci-C6) sustituidas, arilamidas, y esteres de o alquilo (d-C6). Las fracciones acilo o alquilo apropiadas para "R" son: grupos alquilo ramificados o no ramificados de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbonos, ¡grupos acilo de 2 a aproximadamente 10 átomos de carbono, y grupos de bloqueo tales como el carbobenciloxi y t-butiloxicarbonilo. Preferiblemente el carbono del grupo CH mostrado en la Formula A tiene una estéreo configuración, cuando n es 2, que es diferente de la estéreo configuración de X. Las modalidades preferidas utilizan compuestos tales como ?-D-glutamil-L- triptófano, ?-L-glutamil-L-triptófano, ?-L-glutamil-Njn-formil-L-triptófano, N-metil-y-L- glutamil-L-triptófano, N-acetil-y-L-glutamil-L-triptófano, ?-L-glutamil-D-triptófano, ß-L- aspartil-L-triptófano, y ß-D-aspartil-L-triptófano. Las modalidades preferidas de manera particular utilizan ?-D-glutamil-L-triptófano, algunas veces referido como SCV-07. Estos compuestos, métodos para preparar estos compuestos, sales farmacéuticamente aceptables de estos compuestos y formulaciones farmacéuticas de estos se describen en la solicitud de patente de los Estados Unidos de América No. 5,916,878, la cual se, incorpora aquí como referencia. El SCV-07, ?-D-glutamil-L-triptófano, es un miembro de una clase de medicinas inmunomoduladoras que poseen fracciones de ?-glutamil o ß-aspartil, las cuales fueron descubiertas por científicos rusos y están siendo examinadas en cuanto a su eficacia en varias indicaciones en los Estados Unidos de América por SciClone Pharmaceuticals, Inc. El SCV-07 posee un número de actividades inmunomoduladoras in vivo e in vitro. El SCV- 07 aumenta la proliferación de linfocitos y timocitos inducida con Con-A, aumenta la producción de interleucina-2 (IL-2) inducida con Con-A y la expresión del receptor de IL-2 por medio de los linfocitos del bazo, y estimula la expresión de Thy-1.2 en células de médula ósea. In vivo, el SCV-07 tiene un fuerte efecto inmunoestimulador en animales con ' la inmunidad suprimida por 5-FU y en un modelo de inmunización con células de glóbulos rojos de oveja. Los compuestos de la formula A pueden ser administrados en cualquier dosis efectiva, por ejemplo, en dosis dentro del intervalo de aproximadamente 0.001-1000 mg, preferiblemente aproximadamente 0.1-100 mg y más preferiblemente aproximadamente 10 mg. Las dosis pueden ser administradas una o más veces por semana, por ejemplo, en una base diaria, con dosis administradas una o más veces por día. La administración puede ser por medio de cualquier método adecuado, incluyendo el oral, ¡ nasal, transdérmico, sublingual, por medio de inyección, infusión periódica, infusión continua, y similares. Las dosis pueden ser administradas por medio de inyecciones intramusculares, aunque otras formas de inyección e infusión pueden ser utilizadas, y otras formas de administración tales como la inhalación nasal u oral o la ingestión oral pueden ser empleadas. Los aerosoles, soluciones, suspensiones, dispersiones, tabletas, cápsulas, jarabes, etc., pueden ser utilizados. Las dosis también pueden ser medidas en miligramos por kilogramo, con dosis en el intervalo de aproximadamente 0.00001-100 mg/kg, más preferiblemente dentro del rango de aproximadamente 0.01-10 mg/kg. Están incluidos los análogos biológicamente activos que tienen porciones que han sido sustituidas, eliminadas, alargados, reemplazados, o modificadas de alguna otra forma y las cuales tienen bioactividad sustancialmente similar a aquella del SCV-07, por ejemplo, un péptido derivado de SCV-07 que tiene una homología suficiente con el SCV-07 de forma tal que funcione sustancialmente de la misma manera con sustancialmente la misma actividad que el SCV-07. De acuerdo con una modalidad, un compuesto de Formula A puede ser administrado a un sujeto de forma que este mantenga sustancialmente de forma continua una cantidad efectiva del compuesto de la formula A en el sistema circulatorio del sujeto durante un periodo de tratamiento o de prevención. Aunque periodos de tratamiento mucho más largos son contemplados de acuerdo con la presente invención, las modalidades de la invención incluyen el mantener sustancialmente de manera continua una cantidad efectiva del compuesto de la Formula A en el sistema circulatorio del paciente durante periodos de tratamiento de cuando menos aproximadamente 6, 10, 12 horas o más. En otras modalidades, los periodos de tratamiento son de cuando menos aproximadamente un día, e incluso por una pluralidad de días, por ejemplo, una semana o más. Sin embargo, se contempla que estos tratamientos, tal como se definieron anteriormente, en los cuales las cantidades efectivas del compuesto de la Formula A son mantenidas sustancialmente de manera continua en el sistema circulatorio del sujeto, pueden estar separados por periodos sin tratamiento de duraciones similares o diferentes. De acuerdo con una modalidad, el compuesto de la Formula A es infundido de manera continua a un sujeto, por ejemplo, por medio de infusión intravenosa, durante el periodo de tratamiento, de forma que mantenga sustancialmente de manera continua una cantidad efectiva del compuesto de la Formula A en el sistema circulatorio del sujeto. La infusión puede ser llevada a cabo por cualquier medio adecuado, tal cómo una mini bomba.

Alternativamente, un régimen de inyección del compuesto de la formula A puede ser mantenido de forma que se mantenga sustancialmente de manera continua una cantidad efectiva del compuesto de la Formula A en el sistema circulatorio del sujeto. Los regímenes de inyección adecuados pueden incluir una inyección cada 1, 2, 4, ¡ 6, etcétera horas, de forma que se mantenga sustancialmente de manera continua la cantidad efectiva del péptido del compuesto inmunomodulador en el sistema circulatorio del sujeto durante el periodo de tratamiento. Si bien se contempla que durante la infusión continua del compuesto de la Formula A, la administración será por una duración sustancialmente mayor,! de acuerdo con una modalidad la infusión continua del compuesto de la formula A es para un periodo de i tratamiento de cuando menos aproximadamente una hora. Más preferiblemente, la infusión I continua es llevada a cabo por periodos mayores, tales como periodos de cuando menos aproximadamente 6, 8, 10, 12 horas o más. En otras modalidades, la infusión continua es de i por cuando menos aproximadamente un día, e incluso por una pluralidad de días tales como por una semana o más. En algunas modalidades, el compuesto de la formula A está presente en un portador líquido farmacéuticamente aceptable, tal como agua para inyección, solución salina fisiológica, o similares, en concentraciones dentro del rango de aproximadamente 0.001- 1000 µg/ml, más preferiblemente aproximadamente 0.1-100 µg/ml. ; ! Las cantidades efectivas del compuesto de la Formula A pueden ser determinadas por medio de experimentos de determinaciones de titulación de dosis rutinarias. . , i El compuesto de la Formula A también puede ser administrado con otros agentes.

Por ejemplo, con tratamientos del cáncer, tales agentes incluyen agentes de quimioterapia y/o radiación. ' i Ejemplo 1 j Introducción i El SCV-07 (?-D-glutamil-l-triptófano) es un dipéptido sintético que ha demostrado actividad inmunomoduladora por medio del aumento de la diferenciación de células T y de la función, procesos biológicos que son necesarios para controlar el crecimiento del tumor in vivo. Uno de los avances significativos en la última década es que la polarización de la respuesta inmune a partir del TH (células CD4+ T) tipo uno (THl) hacia el fenotipo del tipo dos (TH2) contribuye a una inmunidad celular disminuida en contra del cáncer, y que las citocinas juegan un rol crucial en el desarrollo de tumores mediante la regulación de la expansión de las células THl y TH2. j Estudios previos con SCV-07 muestran que este compuesto inmunomodulador estimula un cambio de células T auxiliadoras hacia una respuesta inmune similar a THl, y que la producción de IFN-? tanto por células tímicas como del bazo,l así como también su nivel de circulación en suero, es aumentado por medio del tratamiento^ con SCV-07. El melanoma es el prototipo de un tumor inmunógeno, al | cual varios tipos de inmunoterapia le han sido aplicados. En el presente estudio investigamos la actividad biológica in vitro e in vivo del SCV-07 usando un modelo de melanoma de murino B16. : Métodos Se indujeron tumores mediante la inyección de 1 x 106 células de melanoma B16 de manera subcutánea en la pierna posterior de ratones singénicos C57/BI6. Los ratones fueron mezclados aleatoriamente en 5 grupos de 10 animales y fueron tratados con SCV-07 i en dosificaciones de 0.001, 0.01, o 0.10 mg/kg administrados diariamente de manera intra peritoneal por 3 días consecutivos durante 2 semanas, comenzando ¡ 3 días después de la implantación del tumor. Los grupos de control fueron tratados con solución salina o dacarbazina (DTIC) con una dosis de 50 mg/kg i.p. por 3 días. El crecimiento del tumor fue evaluado cada 3 días por medio de un compás y el peso del tumor fuei medido después de la muerte. , Los estudios de sensitividad de células in vitro fueron llevados a cabo sobre una línea de células B 16. I Las células del melanoma subconfluente fueron cosechadas, suspendidas en un medio completo y sembradas en placas de 24 pozos (105 células en un volumen final de 2 ml/pozo). Las células fueron tratadas en pozos por triplicado por 24, 48 o 72 horas de cultivo con concentraciones graduadas de SCV-07 que varían de jO.l a 100 µg/ml. La Í i proliferación de células y la viabilidad fueron determinadas por medio del método de exclusión de tintura azul de tripan mediante el conteo manual dé las células con un hemocitómetro. La apoptosis fue evaluada por medio de un análisis citométrico de flujo de ADN. En cada concentración de SCV-07, las células adherentes fueron removidas de las placas por medio de tripsinación, mezcladas con las células de flotación y fijadas con 50% de acetona:metanol 1 :4 en PBS. Las células fueron suspendidas (1 x 106 /mi) en PBS que contiene 50 µg/ml de yoduro de propidio (PI) y 100KU/ml de RNáse e incubadas en la oscuridad a temperatura de ambiente por 30 minutos. El contenido dé ADN por célula fue evaluado por medio de fluorescencia PI medida en una escala lineal usando un citómetro de i flujo FACScan (Becton & Dickinson, San José, CA). Las células apoptóticas mostraron un teñido reducido, en el canal de fluorescencia roja, debajo de la población G0/G1 de células diploides normales, y son representadas por medio de un amplio pico hipodiploide debido a la fragmentación del ADN que sigue a los eventos apoptóticos; Esto es fácilmente i distinguible de los picos angostos de células con un contenido de ADN diploide. La fracción de las células apoptóticas fue de este modo calculado por medio de la integración del pico pre-Gl .

Resultados In vivo ' Ratones fueron inyectados con células de melanoma B 16 y divididos en 5 grupos de ratones cada uno. A los ratones de control se les dieron inyecciones de solución salina o dacarbazina (DTIC). Los efectos de dosis diferentes de SCV-07 fueron examinadas con respecto a la velocidad de crecimiento del tumor y el tiempo de sobre vivencia. Los resultados muestran que el SCV-07 inhibió el crecimiento del tumor de una manera dependiente a la dosis, tal como se ilustra en la Tabla A. Después de 24 días, la inhibición en el crecimiento del tumor fue de 6%, 22.6%, y 42.7% pata los tratamientos de 0.001, 0.01 y 0.1 mg/kg respectivamente, vs. el control (tratamiento con DTIC que condujo í a una inhibición de 19%). ! I Tabla A El peso medio de tumor fue 35% menor en los animales tratados con la dosis más alta de SCV-07, comparado con 20% para las dosis menores y 15% para el DTIC. El tiempo de sobre vivencia de los ratones en los diferentes grupos de tratamiento fue monitoreado hasta 30 días después de la inyección del tumor. Después de 26 días, 21% de los animales tratados con SCV-07 en las dosis mayores sobrevivieron en buenas condiciones, aunque con tumores. No hubo ningún animal sobreviviente en los grupos tratados con dosis menores o con DTIC. ' In Vitro [ La actividad antiproliferativa del SCV-07 fue evaluada sobre el crecimiento de melanoma B16 por medio de conteos de células directos después de 24 y 48 horas de cultivo. Los resultados de un experimento representativo, muestran que el SCV-07 indujo un efecto inhibidor dependiente de la dosis en el crecimiento de! células en B16. En concentraciones menores el efecto del SCV fue sustancialmente citóestático mientras que en concentraciones mayores (100 µg/ml) el SCV-07 mostró efectos tóxicos con una disminución dramática en el número de células viables. Sin embargo, el análisis de flujo citométrico por medio del yoduro de propidio no dio evidencia de ningún efecto significativo del SCV-07 sobre el porcentaje de la muerte celular apoptótica.

Conclusión ! Los resultados mostraron la inhibición del crecimiento de células de melanoma, tanto in vitro como in vivo, y mostraron que el tratamiento con SCV-07 puede ser una estrategia terapéutica potencial como consecuencia de la modulación de la respuesta anti tumor del huésped y de la eliminación directa de células de tumor. ¡ Ejemplo 2 Efecto anti tumor de SCV-07 en el Modelo de Melanoma de Murino B16 Abreviaturas ¡ ¡ DTIC Dacarbazina F Hembra g Gramo IR Proporción de Inhibición kg Kilogramo L Longitud M Macho mL Mililitro SD Desviación Estándar W Ancho Resumen El efecto antitumor del SCV-07 en el modelo de melanoma B16 de murino fue evaluado en este estudio. A un total de 60 ratones C57/BL6, 30 machos y 30 hembras, les fueron implantados subcutáneamente células de melanoma de murino B16 seguido de un tratamiento por 14 días consecutivos. El SCV-07 fue administrado por medio de inyección subcutánea a 5 grupos de ratones C57/BL6 respectivamente en dosis de 0 (Grupo 1 : grupo de control de vehículo), 0.01 (Grupo 3), 0.1 (Grupo 4), 1.0 (Grupo 5) y 5.0 mg/kg/día (Grupo 6), por 14 días consecutivos (Día 1 a Día 14). La dac'arbazina (DTIC), 50 mg/kg/día, fue administrada subsecuentemente al Grupo 2 (grupo de control positivo) desde el día 1 hasta el día 14. El peso del tumor fue registrado en el día 17 después de la eutanasia. j No se encontró ninguna muerte en ninguno de los grupos de dosis durante el estudio. Los resultados estadísticos del peso del cuerpo mostraron j que no hay ninguna diferencia significativa entre los grupos tratados con SCV-07 y el , grupo de control de vehículo, indicando que el SCV-07 no tiene ningún efecto en la ganancia de peso corporal. Sin embargo, los resultados mostraron una inhibición significativa |de ganancia en peso corporal (P<0.01) en el grupo de tratamiento con DTIC, el cual ¡es probablemente el resultado de la toxicidad del DTIC. 1 En el Día 3 y Día 6, los tamaños del tumor de todos los grupos no eran medibles.

Los tamaños de tumor medios de los grupos de tratamiento con SCV-07 en el día 9 no mostraron diferencies estadísticas cuando se compararon con el grupo de control de vehículo. En el Día 12, los tamaños medios de tumor del Grupo 3] Grupo 5 y Grupo 6 fueron significativamente más pequeños que los del Grupo 1. Aunque el tamaño de tumor medio del Grupo 4 en el Día 12 fue menor que el del Grupo 1, los resultaos no mostraron una importancia estadística. En el Día 15, los tamaños medios del tumór del grupo 3, Grupo 4, Grupo 5 y Grupo 6 fueron menores que los del Grupo 1, pero sólo los resultados del Grupo 5 y del Grupo 6 mostraron una importancia estadística. La proporción de inhibición de crecimiento del tumor del SCV-07 del Grupo 6 (nivel de dosificación mayor) en el Día 15 fue de 30.2%, indicando una inhibición del crecimiento del tumor importante (p=0.01) cuando se compara con el grupo de control de vehículo. El Grupo 5 ¡(nivel de dosis de 1.0 mg/kg de SCV-07) también mostró una inhibición de crecimiento ¡de tumor importante (16.5%) al final del tratamiento en el Día 15. Las curvas de crecimiento del tumor también mostraron que los tumores crecían de manera más lenta en los animales tratados con SCV- ¡ 07 cuando se comparó con el grupo de control de vehículo. Los animales en el grupo de control positivo tienen una disminución significativa de los tamaños medios del tumor. Sus proporciones de inhibición de crecimiento del tumor fueron de 96.9%· 98.8% y 95.1% en el Día 9, Día 12 y Día 15, respectivamente. Esto prueba que el modelo de tumor usado en este I estudio es valido. 1 En el día 17, los pesos medios del tumor de todos los grupos de tratamiento con SCV-07 fueron menores que en el grupo de control de vehículo. Sin embargo, solo los i resultados del Grupo 3, Grupo 5 y Grupo 6 mostraron una importancia estadística. La proporción de inhibición de crecimiento del tumor del Grupo 6 fue de 30.8% (p=0.015) cuando se comparó con el Grupo 1 , Grupo 3 y Grupo 5 también mostró una inhibición del crecimiento del tumor importante de 27.5% y 23.5%, respectivamente. Los animales en el grupo de control positivo tienen una disminución importante del pesó de tumor medio. Su proporción de inhibición de peso del tumor fue de 85.0% en el Día 17; En conclusión, el modelo de tumor utilizado en este estudio es valido. La administración de SCV-07 una vez al día por 14 días consecutivos por medio de la ruta subcutánea es efectiva en contra del crecimiento del tumor del melarioma B16 de murino. Los pesos de tumor en tres grupos tratados con tres pruebas-artículo fueron significativamente reducidos en comparación con aquellos del grupo de control de vehículo. Los pesos corporales medios de animal de todos los grupos! tratados con SCV-07 no fueron significativamente diferentes de aquellos del grupo de' control de vehículo después del tratamiento con SCV-07, soportando la falta de toxicidad del artículo de prueba. Sin embargo, aunque el tratamiento con el control de quimioterapia positiva, DTIC, disminuyó los tamaños del tumor y los pesos del tumor de manera importante cuando se compara con el grupo de control de vehículo, éste condujo a una inhibición importante de la ganancia de peso corporal. La información de este estudio indica que el SCV-07 a niveles de dosis de 0.01, 1.0 y 5.0 mg/kg/día por 14 días redujo de manera importante el crecimiento del tumor de melanoma B16 sin ningún efecto tóxico sobre la ganancia de peso corporal. : Introducción Este estudio fue iniciado mediante el uso de un modelo de melanoma B16 de murino susceptible de trasplante para evaluar la efectividad del SCV-07 como un agente anti tumor potencial.

Objetivo i i El objetivo de este estudio es el de evaluar el potencial efecto anti tumor del SCV-07 en un modelo de melanoma B16 de murino cuando se administra cié manera subcutánea a niveles de dosificación de 0, 0.01 , 0.1 , 1.0 y 5.0 mg/kg respectivamente por 14 días i consecutivos. ; Materiales y Métodos j Artículos de Prueba y Control 1 Formulación del Artículo de Prueba El artículo de prueba del SCV-07 fue obtenido a partir de Sponsor, se disolvió en una solución salina regulada con fosfato (PBS, NaCl: 137 mM, KC1: 2.7 mM; K2HP04: 1.4 mM; Na2HP04: 10.1 mM, pH 7.0) para lograr los niveles de dosis adecuados tal como se indica en la tabla de diseño del estudio. La formulación fue mantenida en hielo, protegida de la luz, y usada dentro de una semana. Este estudio de dos semanas requirió de dos preparaciones frescas. ¡ I Artículo de Control Positivo j i La dacarbazina (DTIC) fue usada como el artículo de control positivo. Fue comprada en Sigma-Aldrich (número de código: D2359) y se formaron alícuotas de 10 mg/frasco. Antes de su uso, un frasco fue disuelto en PBS para lograr el nivel de dosis I apropiado tal como se indica en la tabla de diseño del estudio. ! La formulación fue mantenida en hielo, protegida de la luz, y usada dentro de una semana. Este estudio de dos semanas requirió de dos preparaciones frescas. ! Sistema de Pruebas y Cría de Animales Células de Melanoma Las células de melanoma B16 de murino fueron obtenidas a partir del Centro de Cultivo de Células (Cell Culture Center) de la Academia China de Ciencias Médicas (CAMS; Beijing, P.R. China). 1 Sistema de Pruebas ! Se recibieron treinta machos y treinta hembras, naive, de ratones C57BL/6 del Instituto del Laboratorio de Ciencia Animal, CAMS, Beijing, P.R. j China. Los animales tenían seis semanas de vida y pesaban entre 18 y 22 gramos en el inicio del estudio.

I Cría de Animales ¡ Un grupo de animales fue alojado en jaulas de caja de zapatos esterilizadas con aserrín esterilizado como el material de cama. La temperatura del cuarto de los animales i fue mantenida a 22 - 25 °C, y la humedad relativa fue mantenida entre 40 y 60%. Un ciclo de 12 horas de luz/ 12 horas de oscuridad fue mantenido excepto cuando se interrumpió por eventos relacionados con el estudio. Los animales fueron alimentado$ ad libitum con agua estéril y una Science Australia Unites Efforts Rodent Diet. Todos; los animales fueron aclimatados por 3 días antes de la inoculación del tumor.

Procedimientos Experimentales Preparación de la Célula del Tumor i En cuanto a los procedimientos de cultivo de tejido aséptico, un frasco de células de melanoma B16 (proveído por el Centro de Cultivo de Células de CAMS) fue descongelado y centrifugado a 1000 rpm, 20 - 25 °C por 5 minutos. Los granulos de célula fueron suspendidos en una solución salina normal (NS) de 0.1-0.5 mL e inyectados subcutáneamente en la axila derecha de cada ratón (aproximadamente 1 x 106 células/ratón). Cuando el diámetro del tumor fue de 1 cm aproximadamente (medido por calibrador vernier), los animales recibieron la eutanasia por medio de µna asfixia con C02 y el tumor fue tomado por escisión. Las células del tumor fueron suspendidas en una solución salina normal tal como se describió previamente y los ciclos de adaptación de la célula fueron repetidos una vez. ! i Inoculación de la Célula del Tumor ; En el día 0, 1 xlO6 células B16 en un volumen de 0.1 mL de solución salina normal fueron inyectadas de manera subcutánea en el área de la axila derecha; del ratón. El día de la I inoculación del tumor fue definido como día cero.

Diseño del Estudio y Régimen de Tratamiento j En el día 1 , los animales fueron repartidos de manera aleatoria en diferentes grupos basándose en sus pesos corporales de forma que los pesos corporales medios no fueran estadísticamente importantes entre grupos. La dosificación fue iniciada en el Día 1. El artículo de prueba fue administrado una vez diaria por 14 días consecutivos por medio de una administración por vía subcutánea (se) en un volumen de dosis de 0.1 mL/20 g de peso corporal. El vehículo también fue dosificado una vez diariamente por 14 días consecutivos por medio de la administración se en el mismo volumen de dosis. El control positivo, DTIC, fue administrado diariamente por medio de administración i.p. en el mismo volumen de dosis. Cada grupo de terapia recibió diferentes regímenes de tratamiento como se define en la siguiente tabla.

Tabla 1: Diseño del Estudio se = subcutánea Evaluación del Efecto Anti tumor Durante el periodo de observación, los tamaños del tumor y los pesos corporales fueron medidos una vez cada 3 días a lo largo de todo el estudio: el tamaño del tumor por medio de calibrador vernier y el peso corporal por una balanza de laboratorio. Las observaciones fueron registradas diariamente en cuanto a mortalidad y agonía. Los animales recibieron la eutanasia por medio de la asfixia con C02 en el Día 17. Los tumores fueron extirpados, separados y pesados. El volumen del tumor fue calculado usando la siguiente formula: Volumen de tumor = Longitud x Ancho x Ancho/2 La proporción de inhibición del volumen del tumor (IR) se calculó de acuerdo con la formula: i IR(TV) = (TVvehículo - TVtratado c/medicina)/ TV vehículo 100% TV es el volumen del tumor en el día de la medición. El efecto anti tumor del artículo de prueba fue también evaluado por medio del peso del tumor. El peso del tumor de cada ratón fue registrado después ; de la eutanasia, y la i proporción de inhibición del peso del tumor fue calculada de acuerdo óon la formula: i IR(TW) = (peso de tumorvehícuio - peso de tumortratado c/medic¡na)/ peso de tumorvehicuio x 100% Las desviaciones media y estándar fueron calculadas utilizando Excel, y la prueba Student's t fue usada para los cálculos estadísticos. j Análisis Estadístico i Para cada grupo (SCV-07 en cada dosis, el control de vehículo y el control DTIC), i se realizó la comparación entre grupo en el volumen del tumor, el peso del tumor y el peso corporal, usando una prueba Student's t. Los valores de P de menos de 0.05 fueron considerados como estadísticamente significativos. Almacenamiento de Registros y Archivo Todos los datos generados en el estudio fueron recolectados y registrados. Área de almacenamiento: Institute of Basic Medical Sciences, PUMC & CAMS Resultados y Discusión Mortalidad 1 No se encontraron muertes en ninguno de los grupos de dosis durante el estudio. Tamaño del Tumor ¡ Los resultados estadísticos de los tamaños del tumor son enlistados en las tablas.

Las curvas de crecimiento del tumor son presentadas en la Figura 1. i Como se muestra de la Tabla 2 a la Tabla 6, en el Día 3 y Día 6, los tamaños del tumor de todos los grupos no era medible. Los tamaños de tumor medios de los grupos de tratamiento de SCV-07 en el Día 9 no mostraron diferencias estadísticas cuando se compararon con el grupo de control de vehículo. En el día 12, los tamaños de tumor medios del Grupo 3, Grupo 5 y Grupo 6 fueron significativamente más pequeños que en el Grupo 1. Aunque el tamaño de tumor medio del Grupo 4 en el Día 12 fue menor que en el Grupo I 1, los resultados no mostraron alguna importancia estadística. En el Día 15, los tamaños de i tumor medios del Grupo 3, Grupo 4, Grupo 5 y Grupo 6 fueron menores que los del Grupo 1, pero solo los resultados del Grupo 5 y del Grupo 6 mostraron importancia estadística. La proporción de inhibición del crecimiento del tumor de SCV-07 del Grupo 6 (nivel de dosis mayor) en el Día 15 fue de 30.2%, indicando una inhibición importante del crecimiento del tumor (p=0.01) cuando se compara con el grupo de control de vehículo. El Grupo 5 (nivel de dosis de 1.0 mg/kg de SCV-07) también mostró una inhibición del ¡crecimiento de tumor significativa (16.5%) al final del tratamiento en el Día 15. Las curvas de crecimiento del tumor también mostraron que los tumores crecieron de manera más !lenta en los animales tratados con SCV-07 cuando se comparan con el grupo de control de vehículo. Los animales en el grupo de control positivo tienen una disminución significativa de los tamaños de tumor medios. Sus proporciones de inhibición de crecimiento del tumor fueron de 96.9%, 98.8% y 95.1% en el Día 9, día 12 y día 15, respectivamente. Esto prueba que el modelo de tumor usado en este estudio es valido. 1 La Figura 1 demuestra la disminución en el crecimiento de los tamaños del tumor ? con el paso del tiempo del estudio en los grupos tratados con SCV-07 cuando se compara con el grupo de control de vehículo. j Peso Corporal I Los resultados estadísticos de los pesos corporales son enlistados desde la Tabla 8 a la Tabla 14. Tal como se muestra en las tablas, no hay diferencias significativas entre los grupos tratados con SCV-07 y el grupo de control de vehículo. Sin embargo, los resultados mostraron una disminución significativa de peso corporal (P<0.'01) en el grupo de tratamiento de DTIC, el cual es probablemente el resultado de la toxicidad del DTIC. Peso del Tumor ¡ Tal como se muestra en la Tabla 7, en el Día 17, los pesos de rumor medios de todos los grupos tratados con SCV-07 fueron menores que el grupo de control de vehículo. Sin embargo, solo los resultados del Grupo 3, Grupo 5 y Grupo 6 mostraron una importancia estadística. La proporción de inhibición del crecimiento del tumor del Grupo 6 fue de 30.8% (p=0.015) cuando se comparó con el Grupo 1. El Grupo 3 ^ el Grupo 5 también mostraron una inhibición en el crecimiento del tumor importante \ de 27.5% y 23.5%, respectivamente. Los animales en el grupo de control positivo tuvieron una disminución significativa del peso medio del tumor de 85.0%.

La Figura 2 demuestra la disminución en el peso del tumor al ¡final del estudio (Día 17). 1 Conclusión En conclusión, el modelo de tumor utilizado en este es Itudio es valido. La administración de SCV-07 una vez diariamente por 14 días consecutivos por medio de la vía subcutánea es efectiva en contra del crecimiento del tumor de melanoma B16 de murino. Los pesos del tumor en grupos tratados con prueba de tres-artículo fueron reducidos significativamente en comparación con aquellos del grupo de control de vehículo. Los pesos corporales medios de los animales de todos los grupos de tratamiento SCV-07 no fueron significativamente diferentes de aquellos del grupo de control de vehículo después del tratamiento con SCV-07, soportando la falta de toxicidad del artículo de prueba. Sin embargo, aunque el tratamiento con el control de quimioterapia positivo, DTIC, disminuyó los tamaños del tumor y los pesos del tumor dej manera significativa cuando se compararon con el grupo de control de vehículo, esto condujo a una inhibición importante de ganancia en el peso corporal. Los datos de este estudio indican que el SCV- 07 en niveles de dosificación de 0.01, 1.0 y 5.0 mg/kg/día por 14 días redujeron significativamente el crecimiento del tumor de melanoma B 16 sin el efecto tóxico sobre la ganancia de peso corporal. Tabla 2: Resultados Estadísticos de los Tamaños del Tumor en el Día 3 a: e tamaño c e tumor no ue me i le y fue definido como 0. ] j Tabla 3: Resultados estadísticos de los tamaños del tumor én el Día 6 el tamaño del tumor no fue medible y fue definido como Tabla 4: Resultados Estadísticos de los tamaños del tumor en el Día 9 Tabla 5: Resultados estadísticos de los tamaños del tumor en el Día 12 Tabla 6: Resultados estadísticos de los tamaños del tumor en el Día 15 Tabla 7: Resultados estadísticos de los tamaños del tumor en el Día 17 Tabla 8: Resultados estadísticos de pesos corporales en el Día 0 Tabla 9: Resultados estadísticos de pesos corporales en el Día 3 i I Tabla 10: Resultados estadísticos de pesos corporales en el Día 6 Tabla 11: Resultados estadísticos de pesos corporales en el Día 9 Tabla 12: Resultados estadísticos de pesos corporales en el Día 12 I I Tabla 13: Resultados estadísticos de pesos corporales en el Día 15 Tabla 14: Resultados estadísticos de pesos corporales en el Día 17 i Apéndices Apéndice 1 : Medidas del tumor (cm) en el Día 3 - No medible Apéndice 2: Volumen* del tumor (cm3) en el Día 3 • Los volúmenes del tumor fueron calculados usando la fórmula "Volumen del Tumor = Longitud x Ancho x Ancho/2" de acuerdo con los datos enlistados en el Apéndice 1.

Apéndice 3: Medidas del tumor (cm) en el Día 6 - No medible Apéndice 4: Volumen* del tumor (cm3) en el Día 6 *Los volúmenes del tumor fueron calculados usando la fórmula "Volumen del Tumor = Longitud x Ancho x Ancho/2" de acuerdo con los datos enlistados en el Apéndice 3.

Apéndice 5: Medidas del tumor (cm) en el Día 9 - No medible 00 Apéndice 6: Volumen* del tumor (cm3) en el Día 9 - No aplicable Apéndice 7: Medidas del tumor (cm) en el Día 12 No medible Apéndice 8: Volumen* del tumor (cm3) en el Día 12 Grupo Tratamiento G F1 F2 F3 F4 F5 M1 M2 M3 M4 M5 1 Control de Vehículo 1.69 1.69 0.67 0.67 0.60 0.50 0.50 0.36 0.36 0.50 2 DTIC 50 mg/kg 0.01 5E-04 0.01 5E-04 0.06 3 SCV-07 0.01 mg/kg 5E-04 0.25 5E-04 0.50 0.41 0.67 0.36 0.45 - 0.50 - 0.55 4 SCV-07 0.1 mg/kg 0.50 0.50 0.55 0.67 0.01 0.67 0.36 0.67 0.41 0.36 SCV-07 1.0 mg/kg 0.25 0.36 0.50 0.00 0.50 0.20 0.50 0.17 0.25 0.20 6 SCV-07 5.0 mg/kg 0.41 0.50 0.17 0.26 0.50 0.17 0.36 0.36 0.67 *Los volúmenes del tumor fueron calculados usando la fórmula "Volumen del Tumor = Longitud x Ancho x Ancho/2" de acuerdo con los datos enlistados en el Apéndice 7. - No aplicable Apéndice 9: Medidas del tumor (cm) en el Día 15 O Apéndice 10: Volumen* del tumor (cm3) en el Día 15 Grupo Tratamiento F1 F2 F3 F4 F5 M1 M2 3 M4 M5 1 Control de Vehículo 1.91 2.56 1.69 2.03 1.57 2.05 2.03 2.14 1.37 2.05 2 DTIC 50 mg/kg 0.36 0.15 0.11 0.01 0.03 0.17 0.01 0.03 0.06 3 SCV-07 0.01 mg/kg 1.37 1.69 1.69 1.69 1.47 3.18 1.47 2.05 1.57 1.69 4 SCV-07 0.1 mg/kg 1.18 1.69 " - 1.80 - 1.18 - -1.69 1.44 2:05 1.69 1.69 -1t77 SCV-07 1.0 mg/kg 1.10 1.37 1.80 1.35 1.57 1.47 2.30 1.10 1.47 - 6 SCV-07 5.0 mg/kg 1.91 2.56 1.69 2.03 1.57 2.05 2.03 2.14 1.37 2.05 *Los volúmenes del tumor fueron calculados usando la fórmula "Volumen del Tumor= Longitud x Ancho x Ancho/2" de acuerdo con los datos enlistados en el Apéndice 9. - No aplicable Apéndice 11 : Pesos del tumor (g) en el Día17 Grupo Tratamiento F1 F2 F3 F4 F5 M1 M2 M3 M4 M5 1 Control de Vehículo 4.15 3.66 2.6 4.75 3.47 4.6 3.27 4.85 2.90 3.90 2 DTIC 50 mg/kg 0.70 0.29 0.98 0.78 0.5 0.37 0.915 0.18 0.46 0.54 3 SCV-07 0.01 mg/kg 1.55 2.04 2.24 3.71 3.21 4.57 2.29 2.50 2.77 2.80 4 SCV-07 0.1 mg/kg 2.46 4.08 4.03 3.93 3.52 4.47 2.86 3.74 3.10 3.73 SCV-07 1.0 mg/kg 2.69 2.67 4.06 2.66 3.25 2.25 2.55 2.58 3.58 2.89 6 SCV-07 5.0 mg/kg 1.94 3.15 2.97 2.80 2.85 2.45 3.78 2.02 4.30 0.15 Apéndice 12: Pesos del cuerpo (g) en el Día 0 Grupo Tratamiento F1 F2 F3 F4 F5 M1 2 3 M4 M5 1 Control de Vehículo 18.7 19.3 18.5 20.5 19 23.1 21.7 23.5 24.8 22.8 2 DTIC 50 mg/kg 18.5 21.6 19.8 19.3 20 24.9 24.1 23.6 20.4 23.2 3 SCV-07 0.01 mg/kg 19.7 20.2 19.3 21.3 19.5 21.2 23.9 22.7 24.7 25.1 4 SCV-07 0.1 mg/kg 20.8 19.3 18.8 20.2 19 23.1 22.1 23.7 23.5 23.8 SCV-07 1.0 mg/kg 20.6 20.3 20 17.8 18.5 23.1 22.3 23.6 25.4 22.2 6 SCV-07 5.0 mg/kg 19.3 20.6 20.4 20.4 20.6 22.4 24.8 21.4 24.5 24.6 I Apéndice 13: Pesos del cuerpo (g) en el Día 3 Grupo Tratamiento F1 F2 F3 F4 F5 M1 M2 3 M4 M5 1 Control de Vehículo 20.1 20.1 18.8 20.5 19.5 23.2 21 23.5 24.8 22.7 2 DTIC 50 mg/kg 17.8 20.5 19.2 18.6 19.9 24.6 23.2 22.4 20.1 22.2 3 SCV-07 0.01 mg/kg 19.9 20.6 20 20.6 19.1 21.8 23.3 22.6 25.3 25 4 SCV-07 0.1 mg/kg 20.6 20.4 20 20.3 19.8 22 22.1 23.4 23.4 23.1 SCV-07 1.0 mg/kg 20.4 20 19.7 19.4 18.5 23.4 22.7 22.7 25 22.4 6 SCV-07 5.0 mg/kg 19.1 21 20.5 20.7 20.5 22.2 24.8 21 24.8 24.9 Apéndice 14: Pesos del cuerpo (g) en el Día 6 Grupo Tratamiento F1 F2 F3 F4 F5 M1 2 M3 M4 M5 1 Control de Vehículo 19.8 19.8 19.3 21.4 19.7 23.7 22.2 24.8 25.6 23.6 2 DTIC 50 mg/kg 18.3 20.3 20.7 19 20.5 24.8 23.9 22.8 20.5 22.7 3 SCV-07 0.01 mg/kg 21.1 21.2 20.3 21.6 20.2 22 24.2 23 25.8 25.6 4 SCV-07 0.1 mg/kg 20.8 20.6 19.9 20.8 19.8 23.3 23.4 24.4 24.5 25 SCV-07 1.0 mg/kg 20.8 20.4 20.1 19.7 19.2 24.8 23 23.9 26.2 22.8 6 SCV-07 5.0 mg/kg 20.3 21.5 21.3 21.4 21.2 22.6 26.1 21.1 25.6 25.9 Apéndice 15: Pesos del cuerpo (g) en el Día 9 Grupo Tratamiento F1 F2 F3 F4 F5 M1 M2 M3 4 M5 1 Control de Vehículo 19.8 20.2 19.3 21.2 19.5 23.9 21.7 24.8 25.3 23.5 2 DTIC 50 mg/kg 19 20.3 20.3 19 21.3 24.8 24.2 23.6 20.1 22.8 3 SCV-07 0.01 mg/kg 20.1 21 20 21.8 19.5 22.5 24.5 23.1 25.7 26 4 SCV-07 0.1 mg/kg 20.5 21.2 19.4 20.9 19.6 22.6 23.5 24 24 25 SCV-07 1.0 mg/kg 20.4 20.4 19.4 19.7 19.9 24.3 23 24.6 26.2 23.3 6 SCV-07 5.0 mg/kg 19.7 21.4 20.9 20.9 20.4 22.9 25.6 21.1 25.3 25.7 Apéndice 16: Pesos del cuerpo (g) en el Día 12 Grupo Tratamiento F1 e Vehículo 21.3 I F3 F 2 F12.9 I 4 F5 M1 M2 M3 M4 M5 1 Control d I 20.7 21.9 21.3 25.7 23.5 26.6 26 25.4 2 DTIC 50 mg/kg 19.4 20.7 20.4 19.4 21.3 26.1 25 24 21.2 23.7 3 SCV-07 0.01 mg/kg 21.1 21.3 20.9 23.1 20.4 24.6 25.9 24.3 27.6 28 4 SCV-07 0.1 mg/kg 21.5 21.7 21.6 21.7 20.5 24.9 25.3 26 25.8 26.9 SCV-07 1.0 mg/kg 22.4 21.5 21.1 20.8 20.8 26.3 24.7 26.4 27.9 24.3 6 - - SCV-07 5.0 mg/kg - - - -21.4- - - -22,1- - I-- - 22.1 -22,2 21,5 - - 23.6 - - 26.8 21.9 26.5- 26.3_ _ Apéndice 17: Pesos del cuerpo (g) en el Día 15 Grupo Tratamiento F1 F2 F3 F4 F5 G M1 M2 M3 M4 M5 1 Control de Vehículo 22.2 24.1 21.5 22.5 21.6 27.4 24.2 28.5 27.6 26.9 2 DTIC 50 mg/kg 19.6 20.3 20.9 19.7 21.6 25.6 24.7 24.3 21.2 24.2 3 SCV-07 0.01 mg/kg 21 20.9 21.2 24.5 21.1 25.2 26.2 26.1 28.5 29.2 4 SCV-07 0.1 mg/kg 22.2 23.4 22.3 23.1 21.3 27.7 26.7 26.4 26.8 28.6 SCV-07 1.0 mg/kg 22.2 23 22.2 22.3 21.9 27.2 26.5 27.6 29.6 25.5 6 SCV-07 5.0 mg/kg 21.5 23.2 23.1 22.9 21.5 24.5 29 23 27.8 26.6 Apéndice 18: Pesos del cuerpo (g) en el Día 17 Grupo Tratamiento F1 F2 F3 F4 F5 M1 M2 3 M4 M5 1 Control de Vehículo 23.2 26.6 23 23.7 22.8 29.1 25.3 31.2 28.2 28.1 2 DTIC 50 mg/kg 19.8 20.8 21.6 19.8 22.2 27 25.8 25.2 21.5 25.5 3 SCV-07 0.01 mg/kg 22.7 21.4 22.4 25.2 22.4 27.3 28 27.3 30.2 31 4 SCV-07 0.1 mg/kg 22.8 24.4 23.1 24.1 23.8 28 27.9 27.3 28.3 30.4 5-— - SCV-07 1.0 mg/kg " - 23:9 " 23T4— 24 -23:2- - 23.1 " "27.2 - - 28.2 - 29.6 31.6 27.2 - I 6 SCV-07 5.0 mg/kg 22.5 24.9 23.8 23.4 22.8 26.2 31.5 25.2 29.3 27.3

Claims (42)

1. I 35
2. Reivindicaciones 1. Una composición farmacéutica para tratar, prevenir, inhibir o reducir el melanoma o la metástasis de este, o el crecimiento de células de melanoma o la metástasis de estas, en un sujeto, la cual comprende una cantidad efectiya de un compuesto inmunomodulador de formula A.
3. NH CH (CH^TT
4. COOH O (A) en donde, n es 1 o 2, R es hidrógeno, acilo, alquilo o un fragmento dé péptido, y X es una aminoácido aromático o heterocíclico o un derivado de este; y una portador farmacéuticamente aceptable. 2. La composición de la reivindicación 1, en donde X 'es L-triptófano o D-triptófano. 3. La composición de la reivindicación 1 en donde dicho compuesto es SCV- 07. 4. La composición de la reivindicación 1 en donde dichá composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.001 - 1000 mg.
5. 5. La composición de la reivindicación 1 en donde dicha composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.01 - 100 mg.
6. 6. La composición de la reivindicación 1 en donde dicha composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de I aproximadamente 0.00001 - 100 mg/kg de peso corporal del sujeto. !
7. 7. La composición de la reivindicación 1 en donde dicha composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.01 - 10 mg/kg de peso corporal del sujeto. ¡
8. 8. La composición de la reivindicación 1 en donde dicho compuesto es SCV-07, y dicha composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.001 - 1000 mg.
9. 9. La composición de la reivindicación 1 en donde dicho compuesto es SCV-07, y dicha composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.00001 - 1000 mg/kg de peso corporal del sujeto.
10. 10. La composición de la reivindicación 3 en donde dicho tratamiento es para melanoma primario.
11. 11. La composición de la reivindicación 10 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.001 - 1000 mg.
12. 12. La composición de la reivindicación 10 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.1 - 100 mg.
13. 13. La composición de la reivindicación 10 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.00001 - 100 mg/kg de peso corporal del sujeto.
14. 14. La composición de la reivindicación 10 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.01 - 10 mg/kg de peso corporal del sujeto.
15. 15. La composición de la reivindicación 3 en donde dicho tratamiento es para metástasis de melanoma.
16. 16. La composición de la reivindicación 15 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.001 - 1000 mg.
17. 17. La composición de la reivindicación 15 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.1 - 100 mg.
18. 18. La composición de la reivindicación 15 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.00001 - 100 mg/kg de peso corporal del sujeto.
19. 19. La composición de la reivindicación 15 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.01 - 10 mg/kg de peso corporal del sujeto.
20. 20. La composición de la reivindicación 12 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A de aproximadamente 10 mg.
21. 21. La composición de la reivindicación 17 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A de aproximadamente 10 mg.
22. 22. El uso de un compuesto inmunomodulador de formula A: (A) en donde, n es 1 o 2, R es hidrógeno, acilo, alquilo o un fragmento de péptido, y X es una aminoácido aromático o heterocíclico o un derivado de este; en la manufactura de un médicamente útil para tratar, prevenir, inhibir o reducir melanoma o l metástasis de este, o el crecimiento de células de melanoma o la metástasis de estas, en un sujeto.
23. 23. El uso de la reivindicación 22, en donde X es L-triptófano o D-triptófano.
24. 24. El uso de la reivindicación 22 en donde dicho compuesto es SCV-07.
25. 25. El uso de la reivindicación 22 en donde dicho medicamento aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.001 - 1000 mg. '
26. 26. El uso de la reivindicación 22 en donde dicho medicamento aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente i 0.01 - 100 mg.
27. 27. El uso de la reivindicación 22 en donde dicho medicamento aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.00001 - 100 mg/kg de peso corporal del sujeto.
28. 28. El uso de la reivindicación 22 en donde dicho medicamento aporta una i cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.01 - 10 mg/kg de peso corporal del sujeto.
29. 29. El uso de la reivindicación 22 en donde dicho compuesto es SCV-07, y dicho medicamento aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.001 - 1000 mg. ¡
30. 30. El uso de la reivindicación 22 en donde dicho compuesto es SCV-07, y dicho medicamento aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.00001 - 1000 mg/kg de peso corporal del sujeto.
31. 31. El uso de la reivindicación 24 en donde dicho tratamiento es para melanoma primario. '
32. 32. El uso de la reivindicación 31 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.001 -1000 mg. !
33. 33. El uso de la reivindicación 31 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.1 - 100 mg.
34. 34. El uso de la reivindicación 31 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.00001 - 100 mg/kg de peso corporal del sujeto.
35. 35. El uso de la reivindicación 31 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.01 - 10 mg/kg de peso corporal del sujeto.
36. 36. El uso de la reivindicación 24 en donde dicho tratamiento es para metástasis de melanoma.
37. 37. El uso de la reivindicación 36 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.001 -1000 mg. ¡
38. 38. El uso de la reivindicación 36 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.1 - 100 mg.
39. 39. El uso de la reivindicación 36 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.00001 - 100 mg/kg de peso corporal del sujeto.
40. 40. El uso de la reivindicación 36 en donde composición aporta una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A dentro de un intervalo de aproximadamente 0.01 - 10 mg/kg de peso corporal del sujeto. i
41. 41. El uso composición de la reivindicación 33 en donde composición aporta i una cantidad efectiva del compuesto de Fórmula A de aproximadamente 10 mg.
42. 42. El uso de la reivindicación 38 en donde composición aporta una cantidad I efectiva del compuesto de Fórmula A de aproximadamente 10 mg. ¡