MX2008013110A

MX2008013110A - 4-5-dihidro-[1,2,4]triazolo[4,3-f]pteridinas como inhibidores de la proteina-cinasa plk1 para el tratamiento de trastornos proliferativos.

Info

Publication number: MX2008013110A
Application number: MX2008013110A
Authority: MX
Inventors: Jean-Damien Charrier; David Kay; Ronald Knegtel
Original assignee: Vertex Pharma
Priority date: 2006-04-12
Filing date: 2007-04-12
Publication date: 2009-03-06
Also published as: KR20080109919A; AU2007238690B2; US8067417B2; JP5313875B2; ES2381212T3; JP2009536155A; US8524902B2; US20120277425A1; NO20084747L; US7763629B2; US20110021519A1; RU2008144584A; HK1134486A1; AR060432A1; RU2441006C2; CA2649324A1; NZ571969A; TW200808805A; US20090062292A1; EP2010542B1

Abstract

La presente invención se refiere a un compuesto de la fórmula (I) útiles como inhibidores de proteína-cinasa. La invención también proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprende estos compuestos y métodos para usar las composiciones en el tratamiento de varias enfermedades, condiciones o trastornos. La invención también proporciona procesos para preparar compuestos de la invención.

Description

4-5-DIHIDRO-[l,2,4]TRIAZOLO[4,3-F]PTERIDINAS COMO INHIBIDORES DE LA PROTEINA-CINASA PLKl PARA EL TRATAMIENTO DE TRASTORNOS PROLIFERATIVOS Campo de la Invención La presente invención se refiere a compuestos útiles como inhibidores de proteina-cinasas . La invención también proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden los compuestos de la invención y métodos para usar las composiciones en el tratamiento de varios trastornos. La invención también proporciona procesos para preparar los compuestos de la invención.

Antecedentes de la Invención La búsqueda de nuevos agentes terapéuticos se ha auxiliado en su mayor parte, en años recientes, por un mejor entendimiento de la estructura de las enzimas y otras biomoléculas asociadas con las enfermedades. Una clase importante de enzimas que han sido el sujeto de estudio intensivo son las proteinas-cinasas . Las proteinas-cinasas constituyen una gran familia de enzimas estructurales relacionadas las cuales son responsables del control de una variedad de procesos de transducción de señales dentro de la célula (ver Hardie, G y Hanks, S. The Protein Kinase Facts Book, I and II, Academic REF.: 197331 Press, San Diego, CA: 1995) . Se piensa que las proteinas-cinasas han evolucionado de un gen ancestral común debido a la conservación de su estructura y función catalítica. Todas las cinasas contienen un dominio catalítico similar de 250-300 aminoácidos. Las cinasas se pueden categorizar por familias por los sustratos que fosforilan (por ejemplo, proteína-tirosina , proteína-serina/treonina , lípidos, etc.). Se han identificado motivos de secuencia que corresponden en general a cada una de estas familias de cinasas (ver, por ejemplo, Hanks, S.K., Hunter, T., FASEB J. 1995, 9, 576-596; Knighton et al., Science 1991, 253, 407-414; Hiles et al, Cell 1992, 70, 419-429, Kunz et al, Cell 1993, 73, 585-596; Garcia-Bustos et al, EMBO J 1994, 13, 2352-2361) . En general, las proteínas-cinasas median la señalización intracelular al efectuar una transferencia fosforílica desde un nucleósido-trifosfato a un aceptador de proteína que esta comprendido en la ruta de señalización. Estos eventos de fosforilación actúan como interruptores de activación/desactivación molecular que puede modular o regular la función biológica de la proteína objetivo. Estos eventos de fosforilación se activan finalmente en respuesta a una variedad de estímulos extracelulares y otros. Los ejemplos de estos estímulos incluyen señales de estrés químico y ambiental (por ejemplo, estrés o choque térmico, radiación ultravioleta, endotoxina bacteriana, y H202) , citocinas (por ejemplo, interleucina-1 (IL-1) y factor alfa de necrosis tumoral (TNF-a) , y factores de crecimiento (por ejemplo, factor estimulador de colonia de macrófagos de granulocitos (GM-CSF) , y factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) ) . Un estimulo extracelular puede afectar una o más respuestas celulares relacionadas al crecimiento, migración y diferenciación celular, a la secreción de hormonas, a la activación de factores de transcripción, la contracción muscular, al metabolismo de glucosa, al control de síntesis de proteína, a la supervivencia y regulación del ciclo celular. Muchas enfermedades están asociadas con respuestas celulares anormales activadas por eventos mediados por proteína-cinasas , como se describe anteriormente. Estas enfermedades incluyen, pero no se limitan a, cáncer, enfermedades autoinmunitarias , enfermedades inflamatorias, enfermedades óseas, enfermedades metabólicas, enfermedades neurológicas y neurodegenerativas, enfermedades cardiovasculares, alergias y asma, enfermedad de Alzheimer y enfermedades relacionadas a hormonas. Por consiguiente, ha habido un esfuerzo sustancial en la química medicinal para encontrar inhibidores de proteína-cinasas que sean efectivos como agentes terapéuticos. Las cinasas tipo Polo (Plk, por sus siglas en inglés) corresponden a una familia de serina/treonina/cinasas que están altamente conservadas a través de las especies, que varían desde levadura a hombre (revisado en Lowery DM et al., Oncogene 2005, 2 ; 248-259) . Las cinasas plk tienen múltiples papeles en el ciclo celular, incluyendo el control de la entrada en, y progreso a través de, la mitosis. La Plkl es la mejor caracterizada de los miembros de la familia de Plk. Plkl se expresa ampliamente y es más abundante en tejidos con un alto índice mitótico. Los niveles de proteína de Plkl aumentan y llegan a su máximo en la mitosis (Hamanaka, R et al., J Biol Chem 1995, 270, 21086-21091). Los sustratos reportados de Plkl son todas las moléculas que se conoce que regulan la entrada y progreso a través de la mitosis, e incluyen CDC25C, ciclina B, p53, APC, BRCA2 y el proteosoma. El Plkl se favorece en la expresión en múltiples tipos de cánceres y los niveles de expresión correlacionan con la severidad de la enfermedad (Macmillan, JC et al., Ann Surg Oncol 2001, 8, 729-740). Plkl es un oncogen que puede transformar células NIH-3T3 (Smith, MR et al., Biochem Biophys Res Commun 1997, 234, 397-405). El agotamiento e inhibición de Plkl por ARNsi, antisentido, microinyección de anticuerpos, o transfección de una construcción negativa dominante de Plkl en células, reduce la proliferación y viabilidad en células tumorales in vitro (Guan, R et al., Cáncer Res 2005, 65, 2698-2704; Liu, X et al., Proc Nati Acad Sci U S A 2003, 100, 5789-5794, Fan, Y et al., World J. Gastroenterol 2005, 11, 4596-4599; Lañe, HA et al., J. Cell Biol 1996, 135, 1701-1713). Las células tumorales que se han agotado de Plkl han activado puntos de verificación de husillo y defectos en la formación de husillo, alineación y separación de cromosomas y citocinesis. Se ha reportado pérdida en la viabilidad como que es el resultado de una inducción de apoptosis. En contraste se ha reportado que las células normales mantienen la viabilidad en el agotamiento de Plkl. La supresión ín vivo de Plkl por ARNsi o el uso de construcciones negativas dominantes conduce a inhibición de crecimiento o regresión de tumores en modelos de xenoinjerto. Plk2 se expresa principalmente durante la fase Gl del ciclo celular y se localiza en el centrosoma en las células de interfase. Los ratones con supresión de Plk2 se desarrollan normalmente, son fértiles y tienen proporciones normales de supervivencia, pero son aproximadamente 20 % más pequeños que los ratones tipo silvestre. Las células de los animales con la supresión progresan a través del ciclo celular más lentamente que en los ratones normales (Ma, S et al., Mol Cell Biol 2003, 23, 6936-6943). El agotamiento de Plk2 por ARNsi o la transfección de mutantes inactivos de cinasa en células bloquea la duplicación del centriolo. La reducción de la expresión de Plk2 también sensibiliza las células tumorales a taxol y promueve la catástrofe mitótica, en parte por supresión de la respuesta de p53 (Burns TF et al., Mol Cell Biol 2003, 23, 5556-5571). Plk3 se expresa a todo lo largo del ciclo celular y se incrementa desde Gl a la mitosis. La expresión se favorece en tumores ováricos altamente proliferativos y cáncer de mama y está asociada con una prognosis muy mala ( eichert, W et al., Br J Cáncer 2004, 90, 815-821; Weichert, W et al., Virchows Arch 2005, 446, 442-450) . Además de la regulación de la mitosis, se cree que Plk3 esta comprendido en la fragmentación de Golgi durante el ciclo celular y en la respuesta al daño de ADN. La inhibición de Plk3 por expresión negativa dominante se reporta que promueve la apoptosis independiente de p53 después del daño a ADN y suprime la formación de colonias por células tumorales (Li, Z et al., J Biol Chem 2005, 280, 16843-16850) . Plk4 es estructuralmente más diverso que los otros miembros de la familia de Plk. El agotamiento de esta cinasa provoca apoptosis en células tumorales (Li, J et al., Neoplasia 2005, 7, 312-323). Ratones con supresión de Plk4 se detienen en E7.5 con una alta fracción de células en mitosis y cromosomas parcialmente segregados (Hudson, JW et al., Current Biology 2001, 11, 441-446) . Las moléculas de la familia de proteina-cinasas se han implicado en crecimiento, proliferación y supervivencia en células tumorales. Por consiguiente, existe una gran necesidad de desarrollar compuestos útiles como inhibidores de proteina-cinasas. Es fuerte la evidencia que implica las cinasas Plk como esenciales para la división celular. El bloqueo del ciclo celular es un planteamiento clínicamente validado para inhibir la proliferación y viabilidad de células tumorales. Por lo tanto, sería deseable desarrollar compuestos que son útiles como inhibidores de la familia Plk de proteina-cinasas (por ejemplo Plkl, Plk2, Plk3 y Plk4), que inhibiría la proliferación y reduciría la viabilidad de células tumorales, particularmente puesto que hay una fuerte necesidad médica de desarrollar nuevos tratamientos para el cáncer .

Breve Descripción de la Invención Esta invención se refiere a compuestos de la fórmula I en donde: el anillo A es un anillo de heteroarilo de 5 miembros en donde el anillo esta opcionalmente sustituido con Ci_6haloalquilo, halo, N02, -OH, -CN o un Ci-6alquilo opcionalmente sustituido; X1 es un enlace, -O-, -NR8-, -S-, -S(O)-, ó -S(0)2-; R1 es H, Ci-ioalifático, C3_iocicloalifático, C6_ loarilo, heteroarilo de 5-10 miembros, o heterociclilo de 3-10 miembros, en donde el R1 esta opcionalmente sustituido con 0-5 de J1; cada R2 y R3 es independientemente H, Ci_i0alifático, ó C3-iocicloalifático, en donde cada R2 y R3 esta opcional e independientemente sustituido con 0-5 de J2 y J3, respectivamente, o R2 y R3, junto con el átomo de carbono al cual están unidos, forman un anillo monociclico saturado o parcialmente insaturado de 3-8 miembros que contiene 0-4 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, en donde el anillo monociclico formado por R2 y R3 esta opcionalmente sustituido con 0-4 de J23; R4 es H, -C(0)R, -C(0)OR, -C(0)NRR', Ci_i0alifático, C3_iocicloalifático, C6-ioarilo, Cs-ioheteroarilo, heterociclilo de 3-10 miembros, (Ci-6alifático) - (C3-i0cicloalifático) , (Ci_ 6alifático) - (C6-ioarilo) , ó (Ci_6alifático) - (heteroarilo de 5-10 miembros), en donde el R4 esta opcionalmente sustituido con 0-5 de J4; R8 es H, Ci_6alifático, C3-8cicloalifático, -C (O) R, -C (O) OR, ó -C (O) NRR' ; cada J1 es independiente Ci_6haloalquilo, halo, N02, CN, Q, ó -Z-Q, o dos J1 tomadas conjuntamente pueden formar opcionalmente =; cada Z es independientemente Ci-6alifático en el cual 0-3 unidades -CH2- en el Ci_6alifático se reemplazan opcionalmente con -NR-, -O-, -S-, -C(O)-, -C(=NR)-, -C(=NOR)-, -S(O)-, ó -S(0) 2-, en donde cualquiera de las unidades -CH2-no reemplazadas en el Ci^alifático están opcionalmente sustituidas con 0-2 J2; cada Q es independientemente H, Ci-6 alifático, un anillo monociclico aromático o no aromático de 3-8 miembros que tienen 0-3 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S o un sistema de anillo biciclico aromático o no aromático de 8-12 miembros que tiene 0-5 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, en donde cada Q esta opcionalmente sustituido con 0-5 de JQ; cada J2 y J3 es independientemente Ci-6alifático, C3- 6cicloalifático, o - (Ci-4alquil ) n- V1, en donde n es 0 ó 1, cada V1 es independientemente halo (Ci-4alifático) , -O (haloCi_4alifático) , halo, N02, CN, OH, OR" SH, SR",_ NH2, NHR" , N(R")2, COH, COR", C02R", CONH2, CONHR", CONR"2, OCOR", OCONH2, OCONHR", OCON(R")2, NHCOR", NR"COR", NHC02R", NR"C02E", NHC02H, NR"C02H, NHCONH2, NHCONHR" , NHCON(R")2, S02NH2, S02NHE", S02N(R")2, NHS02R", NR"S02R", o V1 es un grupo cíclico seleccionado de C3_6 cicloalifático, fenilo, heteroarilo de 5-6 miembros, o heterociclilo de 3-6 miembros, en donde el grupo cíclico esta opcionalmente sustituido con C3_6 de Jv; cada R" es independientemente Ci-4alifático insustituido, o dos de los mismos J2 y J3 unidos al mismo átomo, conjuntamente pueden formar opcionalmente =0; cada Jz y Jv es independientemente halo, Ci_ 6alifático, C3-6cicloalifático, N02, CN, OH, NH2, NH(Ci_ 4alifático) , N (Ci-4alifático) 2, -0 (Ci_4alifático) , -C02H, C02 (Ci_4alifático) , -0 (haloCi-4alifático) , o halo(Ci_ 4alifático) ; cada JQ, J4 y J23 es independientemente -M o -Y-M; cada Y es independientemente un Ci_6alifático insustituido en el cual 0-3 unidades -CH2- en el Ci_6alifático se reemplazan opcionalmente con -NR-, -0-, -S-, -C(0)-, S(0)-, o -S(0)2-; cada M es independientemente H, Ci-6alifático, C3_ 6cicloalifático, halo (Ci_4alifático) , 0 (haloCi_4alifático) , heterociclilo de 3-6 miembros, halo, N02, CN, OH, 0R' SH, SR' , NH2, NHR' , N(R')2, COH, COR', C02R' , C0NH2, CONHR' , C0NR'2, 0C0R' , 0C0NH2, 0C0NHR' , 0C0N(R')2, NHC0R' , NR' COR' , NHC02R' , NR'C02R', NHC02H, NR'C02H, NHCONH2, NHCONHR' , NHC0N(R')2, S02NH2, S02NHR' , S02N(R')2, NHS02R' , o NR' S02R' ; cada R es independientemente H ó Ci_6alifático insustituido; y cada R' es Ci_6alifático insustituido, o dos grupos R' , conjuntamente con el átomo al cual están unidos, forman un anillo monociclico saturado o parcialmente insaturado de 3-8 miembros, insustituido que tiene 0-1 heteroátomos independientemente seleccionados de O- N y S. Los compuestos de esta invención, y composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos, son efectivos como inhibidores de proteina-cinasas . En algunas modalidades, estos compuestos son efectivos como inhibidores de proteina-cinasas PLK; en algunas modalidades, como inhibidores de proteina-cinasas PLKl . Estos compuestos tienen la fórmula I, como se define en la presente, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Estos compuestos y composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos son útiles para tratar o prevenir una variedad de enfermedades, trastornos o condiciones, incluyendo, pero no limitándose a, una enfermedad autoinmunitaria, inflamatoria, proliferativa o hiperproliferativa , una enfermedad neurodegenerativa, o una enfermedad inmunológicamente mediada. Los compuestos proporcionados por esta invención también son útiles para el estudio de cinasas en fenómenos biológicos y patológicos; el estudio de rutas de transducción y señales intracelulares mediadas por estas cinasas; y la evaluación comparativa de nuevos inhibidores de cinasas. Los compuestos de esta invención incluyen aquellos descritos en la presente, y además se ilustran por las clases, subclases, y especies descritas en la presente (por ejemplo ver modalidades 1-22). Como se usa en la presente, las siguientes definiciones deben aplicar a menos que se indique de otro modo. Para los propósitos de esta invención, los elementos químicos se identifican de acuerdo con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed. Adicionalmente , los principios generales de química orgánica se describen en "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, y "March' s Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed. : Smith, M.B. y March, J. , John Wiley & Sons, New York: 2001, los contenidos completos de los cuales se incorporan de este modo como referencia. Como se describe en la presente, un intervalo de números especificados de átomos incluye cualquier número entero en el mismo. Por ejemplo, un grupo que tiene de 1-4 átomos puede tener 1, 2, 3 ó 4 átomos. Como se describe en la presente, los compuestos de la invención se pueden sustituir opcionalmente con uno o más sustituyentes , tal como se ilustran en general anteriormente, o como se ejemplifican por clases, subclases y especies particulares de la invención. Se apreciará que la frase "opcionalmente sustituido" se use de manera indistinta con la frase "sustituido o insustituido" . En general, el término "sustituido", ya sea precedido por el término "opcionalmente" o no, se refiere al reemplazo de radicales de hidrógeno en una estructura determinada con el radical de un sustituyente especificado. A menos que se indique de otro modo, un grupo opcionalmente sustituido puede tener un sustituyente en cada posición sustituible del grupo, y cuando se puedan sustituir más de una posición en alguna estructura determinada con más de un sustituyente seleccionado de un grupo especificado, el sustituyente ya sea puede ser el mismo o diferente en cada posición. Las combinaciones de sustituyentes contemplados por esta invención son preferentemente aquellas que dan por resultado la formación de compuestos estables y químicamente factibles . El término "estable" como se usa en la presente, se refiere a compuestos que no se alteran sustancialmente cuando se someten a condiciones para permitir su producción, detección, recuperación, purificación, y uso para uno o más de los propósitos descritos en la presente. En algunas modalidades, un compuesto estable o compuesto químicamente factible es uno que no se altera sustancialmente cuando se mantiene una temperatura de 40°C o menos, en la ausencia de humedad u otras condiciones químicamente reactivas, durante al menos una semana. El término "alifático" o "grupo alifático", como se usa en la presente, significa una cadena de hidrocarburo sustituida o insustituida , recta (es decir, no ramificada) o ramificada que esta completamente saturada o que contiene una o más unidades de insaturación que tiene un punto individual de unión al resto de la molécula. A menos que se especifique de otro modo, los grupos alifáticos contienen 1-20 átomos de carbono alifáticos. En algunas modalidades, los grupos alifáticos contienen 1-10 átomos de carbono alifáticos. En otras modalidades, los grupos alifáticos contienen 1-8 átomos de carbono alifáticos. En aún otras modalidades, los grupos alifáticos contienen 1-6 átomos de carbono alifáticos, y en aún otras modalidades los grupos alifáticos contienen 1-4 átomos de carbono alifáticos. Los grupos alifáticos adecuados incluyen, pero no se limitan a, grupos alquilo, alquenilo o alquinilo lineales o ramificados, sustituidos o insustituidos . Los ejemplos específicos incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, isopropilo, n-propilo, sec-butilo, vinilo, n-butenilo, etinilo y ter-butilo. El término "cicloalifático" (o "carbociclo" o "carbocíclilo" o "cicloalquilo" ) se refiere a un hidrocarburo de C3-C8 monocíclico o hidrocarburo de C8-C12 bicíclico que esta completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero que no es aromático, que tiene un punto único de unión al resto de la molécula en donde cualquier anillo individual en el sistema de anillo bicíclico tiene 3-7 miembros. Los grupos cicloalifáticos adecuados incluyen, pero no se limitan a, grupos cicloalquilo y cicloalquenilo . Los ejemplos específicos incluyen, pero no se limitan a, ciclohexilo, ciclopentenilo y ciclobutilo. El término "heterociclo" , heterociclilo" o "heterocíclico" como se usa en la presente significa sistemas de anillo no aromáticos, monocíclicos , bicíclicos o tricíclicos, en los cuales uno o más miembros de anillo son un heteroátomo independientemente seleccionado. En algunas modalidades, el grupo "heterociclo" , "heterociclilo", o "heterocíclico" tiene tres o catorce miembros de anillo en el cual uno o más miembros de anillo es un heteroátomo independientemente seleccionado de oxígeno, azufre, nitrógeno o fósforo, y cada anillo en el sistema contiene de 3 a 7 miembros de anillo. Los heterociclos adecuados incluyen, pero no se limitan a, 3-lH-bencimidazol-2-ona; 3- ( 1-alquil ) -bencimidazol-2-ona, 2-tetrahidrofuranilo, 3-tetrahidrofuranilo, 2-tetrahidrotiofenilo, 3-tetrahidrotiofenilo, 2-morfolino, 3-morfolino, 4-morfolino, 2-tiomorfolino, 3-tiomorfolino, 4-tiomorfolino, 1-pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo, 3-pirrolidinilo, 1-tetrahidropiperacinilo, 2-tetrahidropiperacinilo, 3-tetrahidropiperacinilo, 1-piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 1-pirazolinilo, 3-pirazolinilo, 4-pirazolinilo, -pirazolinilo, 1-piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 4-piperidinilo, 2-tiazolidinilo, 3-tiazolidinilo, 4-tiazolidinilo, 1-imidazolidinilo, 2-imidazolidinilo, 4-imidazolidinilo, 5-imidazolidinilo, indolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolino, benzotiolano, benzoditiano y 1 , 3-dihidro-imidazol-2-ona . Los grupos cíclicos (por ejemplo cicloalifático y heterociclos) , pueden estar linealmente fusionados, en puente o ser espirocíclicos . El término "heteroátomo" significa uno o más de oxígeno, azufre, nitrógeno, fósforo o silicio (incluyendo, cualquier forma oxidada de nitrógeno, azufre, fósforo o silicio; la forma cuaterniazada de cualquier nitrógeno básico, o un nitrógeno sustituible de un anillo heterocíclico, por ejemplo N (como en 3, 4-dihidro-2H-pirrolilo) , NH (como en pirrolidinilo) o NR+ (como en pirrolidinilo N-sustituido ) ) . El término "insaturado", como se usa en la presente, significa una porción que tiene una o más unidades de insaturación . El término "no aromático", como se usa en la presente describe anillos que están ya sea saturados o par cialmente insaturados. El término "alcoxi", o "tioalquilo" , como se usa en la presente, se refiere a un grupo alquilo, como se define anteriormente, unido a través de un átomo de oxigeno ("alcoxi") o azufre ( "dioalquilo" ) . Los términos "haloalquilo" , "haloalquenilo" , "haloalifático" , y "haloalcoxi" significan alquilo, alquenilo o alcoxi, como pueda ser el caso, sustituidos con uno o más átomos de halógeno. Los términos "halógeno", "halo", y "hal" significan F, Cl, Br o I. El término "arilo" usado sólo como parte de una porción más grande como en "aralquilo", "aralcoxi", o "ariloxialquilo" se refiere a sistemas de anillo monociclicos , biciclico o triciclicos que tienen un total de cinco a catorce miembros de anillo, en donde al menos un anillo en el sistema es aromático y en donde en cada anillo en el sistema contiene de 3 a 7 miembros de anillos. El término "arilo" se puede usar de manera indistinta con el término "anillo de arilo". El término "heteroarilo" , usado sólo como parte de una porción más grande como en "heteroaralquilo" o "heteroarilalcoxi", se refiere a sistemas de anillo monociclicos, biciclicos y triciclicos que tienen un total de cinco a catorce miembros de anillo, en donde al menos un anillo en el sistema es aromático, al menos un anillo en el sistema contiene uno o más heteroátomos y en donde cada anillo en el sistema contiene de 3 a 7 miembros de anillo. El término "heteroarilo" se puede usar de manera indistinta con el término "anillo de heteroarilo" o el término "heteroaromático" . Los anillos heteroarilo adecuados incluyen, pero no se limitan a 2-furanilo, 3-furanilo, N-imidazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, 5-imidazolilo, bencimidazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, N-pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidinilo, 4-pirimidinilo, 5-pirimidinilo, piridazinilo (por ejemplo, 3-piridazinilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, tetrazolilo (por ejemplo, 5-tetrazolilo) , triazolilo (por ejemplo, 2-triazolilo y 5-triazolilo) , 2-tienilo, 3-tienilo, benzofurilo, benzotiofenilo , indolilo (por ejemplo, 2-indolilo) , pirazolilo (por ejemplo, 2-pirazolilo) , isotiazolilo, 1 , 2 , 3-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1, 2, 4-oxadiazolilo, 1 , 2 , 3-triazolilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1 , 3 , -tiadiazolilo, 1 , 2 , 5-tiadiazolilo, purinilo, pirazinilo, 1, 3, 5-triazinilo, quinilinilo (por ejemplo, 2-quinolinilo, 4-quinolinilo) , y isoquinolinilo (por ejemplo, 1-isoquinolinilo, 3-isoquinolinilo, o 4-isoquinolinilo) . El término "grupo que protege" y "grupo protector" como se usa en la presente, son indistintos y se refieren a un agente usado para bloquear temporalmente uno o más grupos funcionales deseados en un compuesto con múltiples sitios reactivos. En ciertas modalidades, un grupo protector tiene una o más, o de manera preferente todas, las siguientes características: a) se adiciona selectivamente un grupo funcional en buen rendimiento para dar un sustrato protegido que es b) estable a reacciones que se presentan en uno o más de los otros sitios reactivos; y c) es selectivamente removible en buen rendimiento por reactivos que no atacan el grupo funcional desprotegido, regenerado. Como se entenderá por un experto en la técnica, en algunos casos, los reactivos no atacan otros grupos reactivos en el compuesto. En otros casos, los reactivos también pueden reaccionar con otros grupos reactivos en el compuesto. Los grupos protectores de ejemplo se detallan en Greene, T.W., Wuts, P. G en "Protective Groups in Organic Synthesis", Third Edition, John iley & Sons, New York: 1999 (y otras ediciones del libro) , los contenidos completos de lo cual se incorporan de este modo como referencia. El término "grupo protector de nitrógeno", como se usa en la presente, se refiere a agentes usados para bloquear temporalmente uno o más sitios reactivos deseados de nitrógeno en un compuesto multifuncional . Los grupos protectores de nitrógeno preferidos también poseen las características e emplificadas anteriormente, y ciertos grupos protectores de nitrógeno de ejemplo también se detallan en el capítulo 7 en Greene, T.W., Wuts, P.G. en "Protective in Organic Synthesis", Third Edition, John Wiley & Sons, New York: 1999, los contenidos completos de lo cual se incorporan de este modo como referencia. En algunas modalidades, una cadena alifática o de alquilo se puede reemplazar opcionalmente con otro átomo o grupo. Esto significa que una unidad de metileno de la cadena alifática o de alquilo se reemplaza opcionalmente con otro grupo o átomo. Los ejemplo de estos átomos o grupos incluirán, pero no se limitarán a -NR-, -O-, -C(O)-, C(=N-CN)-, -C(=NR)-, -C(=N0R)-, -S-, -SO-, o -S02-. Estos átomos o grupos se pueden combinar para formar grupos más grandes. Los ejemplos de estos incluyen, pero no se limitan a, -0C(0)-, -C(0)CO-, -C02-, -C(0)NR-, -C(=N-CN), -NRCO-, -NRC(0)0-, -S02NR-, -NRSO2-, -NRC(0)NR-, -0C(0)NR-, y -NRS02NR-, en donde R se define en la presente. Al menos que se especifique de otro modo, los reemplazos opcionales forman un compuesto químicamente estable. Los reemplazos opcionales pueden presentarse tanto dentro de la cadena como en cualquier extremo de la cadena; es decir, tanto en el punto de unión y/o como en el extremo terminal. Los dos reemplazos opcionales también pueden estar adyacentes entre sí dentro de una cadena en tanto que den por resultado un compuesto químicamente estable. Los reemplazos opcionales también pueden reemplazar completamente todos los átomos de carbono en una cadena. Por ejemplo, un C3 alifático se puede reemplazar opcionalmente por -NR-, -C(O)-, y -NR-para formar -NRC(0)NR- (una urea).

A menos que se especifique de otro modo, si el reemplazo se presenta del extremo terminal, el átomo de reemplazo se une a una H en el extremo terminal. Por. ejemplo, si -CH2CH2CH3 se reemplaza opcionalmente con -0-, el compuesto resultante puede ser -OCH2CH3, -CH2OCH3, o -CH2CH2OH. A menos que se señale de otro modo, las estructuras representadas en la presente también se propone que incluyan todas las formas isoméricas (por ejemplo, formas enantioméricas , diastereoméricas , geométricas, conformacionales y rotacionales de la estructura) . Por ejemplo, las configuraciones R y S para cada centro asimétrico, los isómeros de doble enlace (Z) y (E) y los isómeros conformacionales (Z) y (E) se incluyen en esta invención. Como se entenderá por un experto en la técnica, un sustituyente puede girar libremente alrededor de cualquier enlace girable. Por ejemplo, un sustituyente trazado con también representa Por lo tanto, están dentro del alcance de la invención los isómeros estereoquimicos individuales asi como las mezclas enantioméricas , diastereoméricas, geométricas, conformacionesles o rotacionales de los presentes compuestos. A menos que se señale de otro modo, están dentro del alcance de la invención todas las formas tautoméricas de los compuestos de la invención. Adicionalmente, a menos que se señale de otro modo, las estructuras representadas en la presente también se propone que incluyan los compuestos que difieren sólo en la presencia de uno o más átomos isotópicamente enriquecidos. Por ejemplo, están dentro del alcance de esta invención los compuestos que tienen las presentes estructuras excepto por el reemplazo de hidrógeno por deuterio o tritio, o reemplazo de un carbono por un carbono enriquecido con 13C- o 14C- . Estos compuestos son útiles, por ejemplo, como herramientas o sondas analíticas en ensayos biológicos. Los compuestos de esta invención pueden existir en forma libre para tratamiento, o donde sea apropiado, como una sal farmacéuticamente aceptable. Como se usa en la presente, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a sales de un compuesto que son adecuados para el uso propuesto. En algunas modalidades, las sales son adecuadas para el uso en contacto con los tejidos de humanos y animales inferiores sin toxicidad indebida, irritación, respuesta alérgica y similar, y están en proporción con una relación razonable de beneficio/riesgo. En otras modalidades, las sales pueden ser adecuadas para el uso en ensayos in vitro, estudios cinéticos, estudios de cristalografía y similares.

Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, S.M. Berge et al., describen sales farmacéuticamente aceptables, en detalle, en J. Pharmaceutical Sciences , 1977, 66, 1-19, incorporado en la presente como referencia. Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención incluyen aquéllas derivadas de ácidos y bases inorgánicos y orgánicos adecuados. Estas sales se pueden preparan in situs durante el aislamiento y purificación final de los compuestos. Se pueden preparar sales de adición de ácido al 1) hacer reaccionar el compuesto purificado en su forma de base libre con un ácido inorgánico u orgánico adecuado y 2) al aislar la sal formada de esta manera. Los ejemplos de sales de adición de ácido, no tóxicas, farmacéuticamente aceptables, son sales de un grupo amino formado con ácidos inorgánicos tal como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúricos y ácido perclórico o con ácidos orgánicos tal como ácido acético, ácido oxálico, ácidos maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico o ácido masónico o al usar otros métodos usados en la técnica tal como intercambio iónico. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, camforato, camforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, docecilsulfato, etanolsulfonato, formiato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, glicolato, gluconato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, yodhidrato, 2-hidroxi-etanosulfonato, lactobionato, lactato, laurato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, metanosulfonato, 2-naftalensulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, palmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, salicilato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluenosulfonato, undecanoato, sales de valerato y similares. Las sales derivadas de bases apropiadas incluyen sales de metales alcalinos, de metales alcanolitérreos , de amonio y de N+ (Cl-4alquilo) 4. Esta invención también contempla la cuaternización de cualquiera de los grupos que contengan nitrógeno básico de los compuestos descritos en la presente. Se pueden obtener productos solubles o dispersables en agua o en aceite, por esta cuaternización. Se pueden preparar sales de adición de base al 1) hacer reaccionar el compuesto purificado en su forma ácida con una base orgánica o inorgánica adecuada y 2) al aislar la sal formada de esta manera. Las sales de adición de base incluyen sales de metales alcalinos o alcalinotérreos . Las sales representativas de metales alcalinos o alcalinotérreos incluyen sodio, litio, potasio, calcio, magnesio, y similares. Adicionalmente , las sales farmacéuticamente aceptables incluyen, cuando es apropiado, cationes de amonio, de amonio cuaternario y de amino, no tóxicos, formados usando contra-iones tal como aluro, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquilo inferior y arilo sulfonato. Se pueden emplear otros ácidos y bases, en tanto que en si mismos sean farmacéuticamente aceptables, en la preparación de sales útiles como compuestos intermedios en la obtención de los compuestos de la invención y sus sales de adición de base o ácido farmacéuticamente aceptable. Se usan las siguientes abreviaciones: LG Grupo saliente TBTU Tetrafluoroborato de 0- (benzotriazol-l-il ) - N, N, N' , N' -tetrametiluronio DMSO Sulfóxido de dimetilo DMA Dimetil-acetamida TCA Ácido tricloroacético ATP Adenosina-trifosfato DEAD Dietilazodicarboxilato HEPES Ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazinetanosulfónico BSA Albúmina de suero bovino DTT Ditiotreitol MOPS Ácido 4-morfolinapropanosulfónico NMR Resonancia magnética nuclear HPLC Cromatografía liquida de alto desempeño LCMS Espectrometría de masas con cromatografía líquida TLC Cromatografía de capa delgada Rt Tiempo de retención Descripción Detallada de la Invención En algunos aspectos, la invención proporciona compuestos de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable útiles como inhibidores de proteína-cinasas . en donde: el anillo A es un anillo de heteroarilo de 5 miembros en donde el anillo está opcionalmente sustituido con Ci-6haloalquilo, halo, NO2, -OH, -CN o un Ci-6alquilo opcionalmente sustituido; X1 es un enlace, -0-, -NR8-, -S-, -S(0)-, o -S(0)2-; R1 es H, Cl-10 alifático, C3-i0cicloalifático, C6-xoarilo, heteroarilo de 5-10 miembros, o heterociclilo de 3-10 miembros, en donde el R1 está opcionalmente sustituido con 0-5 de J1; cada R2 y R3 es independientemente H, Ci_i0alifático, o c3-iocicloalifático, en donde cada R2 y R3 está opcional e independientemente sustituido con 0-5 de J2 y J3, respectivamente, o R2 y R3, junto con el átomo de carbono al cual están unidos, forman un anillo monociclico saturado o parcialmente insaturado, de 3-8 miembros que contiene 0-4 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, en donde el anillo monociclico formado por R2 y R3 está opcionalmente sustituido con 0-4 de J23; R4 es H, -C(0)R, -C(0)OR, -C(0)NRR', Ci_i0alifático, C3-iocicloalifático, C6-ioarilo, heteroarilo de 5-10 miembros, heterociclilo de 3-10 miembros, (Ci-6alifático) - (C3-locicloalifático) , (Ci_6alifático) - (C6-ioarilo) , o (Ci- 6alifático) - (hetoroarilo de 5-10 miembros), en donde el R4 está opcionalmente sustituido con 0-5 de J4; R8 es H, Ci-6ali ático, C3-8 cicloalifático, -C(0)R, -C (O) OR, o -C (O) NRR' ; cada J1 es independientemente Ci_6haloalquilo, halo, NO2, CN, Q, o -Z-Q, o dos J1 tomados conjuntamente pueden formar opcionalmente =0; cada Z es independientemente Ci_6alifático en el cual 0-3 unidades de -CH2- en el Ci-6alifático se reemplazan opcionalmente con -NR-, -O-, -S-, -C(O)-, -C(=NR)-, -C(=NOR)-, -S(O)-, o -S(0)2-, en donde cualquiera de las unidades -CH2-no reemplazadas en el Ci_6alifático están opcionalmente sustituidas con 0-2 de Jz; cada Q es independientemente H, Ci-6alifático, un anillo monociclico aromático o no aromático de 3-8 miembros que tiene 0-3 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, o un sistema de anillo biciclico aromático o no aromático de 8-12 miembros que tiene 0-5 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, en donde cada Q está opcionalmente sustituido con 0-5 de JQ; cada J2 y J3 es independientemente Ci-6alifático, C3-6 cicloalifático, o - (Ci_4alquilo) n- V1, en donde n es 0 ó 1, cada V1 es independientemente halo (Ci_4alifático) , -O (haloCi_ alifático) , halo, N02, CN, OH, OR", SH, SR", NH2, NHR" , N(R")2, COH, COR", C02H, C02R", CONH2, CONHR" , CONR"2, OCOR", OCONH2, OCONHR", OCON(R")2, NHCOR" , NR"COR", NHC02R", NH"C02R, NHC02H, NH"CON2H", NHCONH2, NHCONHR", NHCON(R")2, S02NH2, S02NHR", S02N(R")2, NHS02R", NR"S02R", o ¦ V1 es un grupo cíclico seleccionado de C3_ 6cicloalifático, fenilo, heteroarilo de 5-6 miembros, o heterociclilo de 3-6 miembros, en donde el grupo cíclilo está opcionalmente sustituido por 0-3 de Jv; cada R" es independientemente Ci-4alifático insustituido, o dos de los mismos J2 y J3 unidos al mismo átomo de carbono, conjuntamente pueden formar opcionalmente =0; cada Jz y Jv es independientemente halo, Ci- 6alifático, C3-6 cicloalifático, N02, CN, OH, NH2, NH(Ci-4alifático) , -C02H, -C02 (Ci_4alifático) , -0 (haloCi-4alifático) , o halo (Ci_4alifático ) ; cada JQ, J4, y J23 es independientemente -M o -Y-M; cada Y es independientemente un Ci-6alifático insustituido en el cual 0-3 unidades -CH2- en el Ci_6alifático se reemplazan opcionalmente con -NR-, -0-, -S-, -C(0)-, S(0)-, 0 -S(0)2-; cada M es independientemente H, Ci-6alifático, C3-6cicloalifático, halo (Ci- alifático) , 0 (haloCi_4alifático) , heterociclilo de 3-6 miembros, halo, N02, CN, OH, OR' , SH, SR' , NH2, NHR' , N(R')2, COH, COR', C02H, C02R' , C0NH2, CONHR' , C0NR'2, OCOR' , 0C0NH2, OCONHR' , 0C0N(R')2, NHCOR' , NR'COR, NHC02R' , NR'C02R', NHC02H, NR'C02H, NHC0NH2, NHCONHR' , NHCON(R')2, S02NH2, S02NHR' , S02N(R')2, NHS02R' , o NR' S02R; cada R es independientemente H o Ci_6alifático insustituido; y cada R' es Ci-6alifático insustituido, o dos grupos R' , junto con el átomo al cual se unen, forman un anillo monociclico saturado o parcialmente insaturado de 3-8 miembros, insustituido que tiene 0-1 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S. En algunas modalidades, el anillo A es un anillo de triazol opcionalmente sustituido con Ci_6haloalquilo, halo, N02, OH, CN o Ci_6alquilo opcionalmente sustituido.

En ciertas modalidades, el anillo A es un anillo de imidazol opcionalmente sustituido con Ci-6haloalquilo, halo, N02, OH, CN o Ci_6alquilo opcionalmente sustituido. En algunas modalidades, X1 es -O-, -NR8-, o -S-. En otras modalidades, X1 es -NR8-. En algunas modalidades, R8 es H o -C(0)OR donde R es Ci-6alquilo ; por ejemplo R8 es -C(0)OCH3. En ciertas modalidades, R1 es H, C6-ioarilo opcionalmente sustituido, aralquilo opcionalmente sustituido o C5-ioheteroarilo opcionalmente sustituido. En algunas modalidades, R1 está opcionalmente sustituido con -O-Q, halo, -C(0)N(R)-Q, o Q, en el cual cada Q en Q, -C(0)N(R)-Q y -O-Q está independientemente sustituido de manera opcional con 0-5 de JQ. En algunas modalidades R1 es fenilo opcionalmente fenilo en la posición para con -C(0)N(R)-Q y cualquier posición restante con -O-Q, halo o Q, en el cual cada Q en Q, -C(0)N(R)-Q y -O-Q está independientemente sustituido de manera opcional con 0-5 de JQ. En algunas modalidades JQ es un Ci_6alifático opcionalmente sustituido con C3_6CÍcloalifático, halo(Ci-4alifático, 0 (haloCi-4alifático) , o heterociclilo de 3-6 miembros . En algunas modalidades R1 es heteroarilo sustituido con -C(0)N(R)-Q y cualquier posición restante con -O-Q, o Q, en el cual cada Q en Q, -C(0)N(R)-Q y -0-Q está independientemente sustituido de manera opcional con 0-5 de JQ. En algunas modalidades, Q en -C (O) N (R) -Q es H, Ci_ alifático, Ci-4haloalifático, C3-7CÍcloalifático, C3_ 7heterocicloalifático, Ci-6alcoxi, (Ci_6alcoxi ) Ci-6alquilo o Ci_ 6haloalcoxi . En algunas modalidades, en donde R1 es fenilo sustituido con Q en la posición para, el fenilo está opcionalmente sustituido en cualquier posición restante con halo, Ci-4alifático, Ci_4haloalifático, C3-7CÍcloalifático, C3-7 hetericicloalifático, Ci-6alcoxi, (Ci-6alcoxi ) Ci-6alquilo o Ci-6haloalcoxi . En algunas modalidades, Q de -C(0)N(R)-Q es metilo, etilo, l-metilpiperidin-4-ilo, ciclopropilo, ciclopentilo, 3-furanilo, 3-fluoropirrolidin-l-ilo o 3 , 3-difluorociclobutilo . En algunas modalidades, R1 es Ci-6alquilo o C3-7 cicloalquilo opcionalmente sustituido. En ciertas modalidades, R1 es fenilo sustituido con al menos un Q en la posición para del fenilo y Q es fluoro, carboxi, trifluorometil, 4-metilpiperazin-l-ilo, difluorometoxi , morfolin-l-ilo, pirazol-l-ilo o pirrolidin-1-ilo. En algunos casos, R1 es un heteroarilo que está sustituido con -C(0)N(R)-Q y en cualquier posición restante con -0-Q, o Q, en el cual cada Q en Q, -C(0)N(R)-Q y -0-Q está independientemente sustituido de manera opcional con 0-5 de JQ. En algunas modalidades, Q en -C(0)N(R)-Q es H, Ci_ 4alifático, Ci-4haloalifático, C3-7cicloalifático, C3_ 7heterocicloalifático, Ci_6alcoxi, (Ci-6alcoxi ) Ci-6alquilo o Ci_ 6haloalcoxi . En aún modalidades adicionales, Q en -C(0)N(R)-Q es metilo, etilo, l-metilpiperidin-4-ilo, ciclopropilo, ciclopentilo , 3-furanilo, 3-fluoropirrolidin-l-ilo o 3,3-difluorociclobutilo . En algunos casos, R1 es Ci_6alquilo o C3_ 7cicloalquilo opcionalmente sustituido. En aún casos adicionales, R1 es H, etilo, ciclopropilo o ciclopentilo . En algunas modalidades, R1 es fenilo sustituido en la posición para con Q o -ZQ. En algunos casos, el sustituyente en la posición para es fluoro, carboxi, trifluorometil , 4-metilpiperazin-l-ilo, difluorometoxi , morfolin-l-ilo, pirazol-l-ilo o pirrolidin-l-ilo . En algunas modalidades, R1 es tiofeno-2-ilo , piridin-3-ilo, piridin-4-ilo, o 6-trifluorometilpiridin-3-ilo. En ciertas modalidades, cada uno de R2 y R3 es independientemente H o un Ci_3alquilo opcionalmente e independientemente sustituido con 0-5 de J2 y J3. En algunos casos, R2 es H y R3 es C1- 3 alquilo, tal como etilo . En otras modalidades, R2 y R3 junto con el átomo de carbono al cual están unidos, forman un anillo monociclico saturado o parcialmente insaturado de 3-8 miembros que contiene 0-4 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, en donde el anillo monociclico formado por R2 y R3 está opcionalmente sustituido por 0-4 de J23. En algunos casos, J23 es H, halo, Ci_4alquilo, OH, Ci_4alcoxi, Ci-4haloalcoxi o amino. En ciertas modalidades, cada J2 y J3 es independientemente Ci_6alifático, C3_6cicloalifático, o - (Ci_ 4alquilo) n-V1, en donde n es 0 ó 1, cada V1 es independientemente halo (Ci_4alifático) , -O (haloCi_4alifático) , halo, N02, CN, OH, OR", SH, SR", NH2, NHR", N(R")2, COH, COR", C02H, C02R", CONH2, CONHR" , CONR"2, OCOR", OCONH2, OCONHR", OCON(R")2, NHCOR", NR"COR", NHC02R", NH"C02R", NHC02H", NH"C02H", NHCONH2" , NHCONHR", NHC0N(R")2, S02NH2, S02NHR", S02N(R")2, NHS02R", NR"S02R", o V1 es un grupo cíclico seleccionado de C3-6cicloalifático, fenilo, heteroarilo de 5-6 miembros, o heterociclilo de 3-6 miembros, en donde el grupo cíclico está opcionalmente sustituido por 0-3 de Jv; y cada R" es independientemente Ci-4alifático insustituido, o dos de los mismos J2 y J3 unidos al mismo átomo, conjuntamente pueden formar opcionalmente =0. En algunos casos, es cada J2 y J3 es independientemente Ci_6alifático, C3_6cicloalifático, o - (Ci_4 alquilo) n- V1, en donde n es 0 o 1, cada V1 es independientemente halo (Ci_4alifático) , -0(haloCi-4 alifático), halo, N02, CN, OH, SH, NH2, COH, C02H, 0C0NH2, OCONH2 , NHC02H, NHCONH2 , S02NH2, o V1 es grupo cíclico seleccionado a partir de C3-6cicloalifático, fenilo, heteroarilo de 5-6 miembros, o heterociclilo de 3-6 miembros, en donde el grupo cíclico está opcionalmente sustituido con 0-3 Jv; y cada R" es independientemente Ci_4alifático insustituido, o dos de los mismos J2 y J3 unidos al mismo átomo, conjuntamente pueden formar opcionalmente =0. En otras modalidades, cada J2 o J3 es independientemente amino, amido, CN, OH, Ci_4alcoxi, o Ci_4 haloalcoxi y V1 es H, halo, Ci_4alquilo, OH, Ci_4alcoxi, Ci_ 4haloalcoxi o amino. En algunas modalidades, R4 es Ci-6alifático, C3-locicloalifático, C3-i0heterocicloalifático, C6-i4arilo o C5_ i4heteroarilo cada uno opcionalmente sustituido con 0-5 de J4. En algunas modalidades, R4 es ciclopentilo . En algunas modalidades cada JQ, J4, y J23 es independientemente -M o -Y-M; En ciertas modalidades, cada Y es independientemente un Ci-6alifático insustituido en el cual 0-3 unidades -CH2- en el Ci-6alifático se reemplazan opcionalmente con -NR-, -£>-, -S-, -C(O)-, -S(O)-, o -S(0)2-; En otras modalidades, cada M es independientemente H, Ci-6alifático, C3-6cicloalifático, halo (Ci_4alifático) , 0 (haloCi-4alifático) , heterociclilo de 3-6 miembros, halo, N02, CN, OH, OR' , SH, SR' , NH2, NHR' , N(R')2 COH, COR', C02H, C02R' , CONH2, CONHR' , CONR'2, OCOR' , OCONH2, OCONHR' , OCON(R')2, NHCOR' , NR' COR' , NHC02R' , NH'C02R', NHC02H' , NH'C02H', NHCONH2', NHCONHR' , NHC0N(R')2, S02NH2, S02NHR' , S02N(R')2, NHS02R' , o NR' S02R' , En otros casos, cada M es independientemente H, Cx_ 6alifático, C3_6CÍcloalifático, halo (Ci_4alifático) , o haloCi-4alifático) , heterociclilo de 3-6 miembros, En algunas modalidades, los compuestos de la invención se pueden representar por la fórmula II; II en donde X1, R1, R2, R3 y R4 son como se describen anteriormente y JA es H, Ci-4alquilo, u OH. En algunas modalidades, los compuestos de esta invención se representan en la Tabla 1.

Tabla 1 1-1 1-2 1-3 1-4 1-5 1-6 1-13 1-14 1-15 1-22 ?-25 1-26 1-27 ?? 1-37 1-38 1-39 1-40 1-41 1-42 Metodología General de Síntesis Los compuestos de esta invención se pueden preparar en general por métodos tal como aquellos representados en los esquemas generales de reacción posteriores y los ejemplos preparativos que siguen. A menos que se indique de otro modo, todas las variables en los siguientes esquemas de reacción son como se definen en la presente.

Esquema 1 de reacción esquema 1 de reacción, anterior, muestra la ruta de síntesis para dar el punto la de inicio para la secuencia representada más adelante (ver US200 0176380 ) . El cloro en la posición 4 del compuesto A se desplaza con un aminoéster en acetona (o hexano) para dar B. La reducción del grupo nitro, seguido por ciclización intramolecular in situ da el compuesto la.

Esquema 2 de reacción 3 El esquema 2 de reacción anterior muestra una ruta general de síntesis para preparar compuestos de esta invención. El grupo funcional lactama en 1 (ver US20040176380) donde LG es un grupo saliente adecuado se activa bajo condiciones conocidas para dar los compuestos 2 (X puede ser, pero no se restringe a, halo, alcoxi y fosfato) . Entonces, el compuesto 2 se acopla en una secuencia de 1 a 2 pasos (dependiendo del anillo A) para dar los compuestos 4. De manera alternativa, la carbonil-amida en 1 se puede transformar en un tiocarbonilo para proporcionar tiolactama 3. El compuesto 3 entonces -se transforma en el compuesto 2 (X = alquiltio) o se acopla directamente en una secuencia de 1 a 2 pasos (dependiendo del anillo A) para dar los compuestos 4. Finalmente, se puede usar el LG como una agarradera para la preparación de los compuestos de la fórmula I. En este último paso, se puede desplazar, por ejemplo, LG con aminas o se acopla en reacciones de acoplamiento, conducidas, auxiliadas con paladio, por ejemplo, reacciones de Suzuki, Stille o Buchwald.

Esquema 3 de reacción El esquema 3 de reacción, anterior, muestra una ruta general de síntesis para preparar compuestos de esta invención donde el anillo A es un triazol. El cloroimidato en 2A (X = Cl) o fosfato (X 0P(0) (0Et)2) en 2A reacciona con hidrazina para dar el compuesto intermedio 5. La reacción de 5 con los ortoésteres JaC(OR)3 conduce a los compuestos 4A donde el anillo A es un triazol. De manera alternativa, se puede reducir el cloroimidato o fosfato (X = 0P(0) (0Et)2) en 2A con a c i lh i dra z i na s JaC(0)NHNH2 para dar directamente los compuestos 4A donde el anillo A es un triazol. Finalmente, se puede usar LG como una agarradera para la preparación de los compuestos de la fórmula IA. En este último paso, por ejemplo, se puede desplazar el LG con aminas o se acopla en reacciones de acoplamiento asistidas con paladio, conocidas por los expertos en la técnica (por ejemplo, Suzuki, Stille y Buchwald) . Se han reportado planteamientos similares, en la literatura, para transformar amidas R1-NH-CO-R2 en R1-triazol-R2, por ejemplo: • Trends in Het Chem, 8, 49-60, 2002 • J Org Chem, 70(7), 2878-2880, 2005 • Bioorg Med Chem Lett, 15(19), 4359-4362, 2005 El esquema 4 de reacción anterior muestra una ruta general de síntesis para preparar compuestos de esta invención donde el anillo A puede ser, pero no se restringe a, un imidazol IB, o una imidazolina 1C. Se han reportado en la literatura planteamientos similares para transformar amidas R1-NH-CO-R2 en R1-imidazol-R2, por ejemplo: • Afinidad, 45 (417), 443-446, 1988 • J Org Chem, 59 (7), 5084-5087, 1994 . Hev. Chim. Acta, 80 (3), 979-987, 1997 • US2004132708 • Bioorg Med Chem Lett, 12 (21), 3219-3222, 2002 Se han reportado en la literatura planteamientos similares para transformar amidas Rx-NH-CO-R2 en R1- imidazolina-R2, por ejemplo: • Afinidad, 45 (417), 443-446, 1988 • J Het Chem, 19 (1), 193-200, 1982 • J Org Chem, 50 (13), 2220-2224, 1985 • Indian J Chem, 12 (3), 263-269, 1974 • Heterocycles, 60 (6), 1425-1432, 2003 En la literatura se han reportado planteamientos similares para transformar amidas R1-NH-CO-R2 en R1-tetrahidropirimidina-R2, por ejemplo: • J Am Chem Soc, 126 (7), 1971-1979, 2004 • Angew Chemie, 43 (4), 478-482, 2004 • J Am Chem Soc, 103 (14), 4186-4194, 1981 • Indian J Chem, 12 (3), 263-269, 1974 Una modalidad de esta invención proporciona un proceso para preparar un compuesto de la fórmula I: I en donde X1, R1, R2, R3, R4, y el anillo A son como se definen en la presente. El término "reacción de acoplamiento", como se usa en la presente, se refiere a una reacción en la cual se forma un enlace carbono-carbono con la ayuda de un catalizador metálico. Usualmente, uno de los átomos de carbono se une a un grupo funcional (un "grupo de acoplamiento cruzado") en tanto que el otro átomo de carbono se une a un halógeno. Los ejemplos de reacciones de acoplamiento incluyen, pero no se limitan a, acoplamientos de Suzuki, acoplamientos de Stille, acoplamientos de Negishi y Buchwald. El término "grupo de acoplamiento", como se usa en la presente, se refiere a un grupo funcional capaz reaccionar con otro grupo funcional (por ejemplo, halo) en una reacción de acoplamiento para formar un enlace carbono-carbono ("C-C") o un enlace de carbono-nitrógeno ("C-N"). En algunas modalidades, el enlace C-C se forma entre dos grupos aromáticos . El término "condición de acoplamiento", como se usa en la presente, se refiere a condiciones químicas (por ejemplo, temperatura, duración de tiempo de reacción, volumen de solvente requerido) requerido a fin de permitir que se presenta la reacción de acoplamiento. Los ejemplos de grupos de acoplamiento y sus respectivas condiciones de acoplamiento incluyen, pero no se limitan a, ácidos borónicos y ésteres borónicos con condiciones de acoplamiento de Suzuki, SnBu3 con condiciones de acoplamiento de Stille, y ZnX con condiciones de acoplamiento de Negishi. Estas tres condiciones - de acoplamiento comprenden típicamente el uso de un catalizador, un solvente adecuado, y opcionalmente una base. Las condiciones de acoplamiento de Suzuki comprenden el uso de un catalizador de paladio, una base adecuada y un solvente adecuado. Los ejemplos de catalizadores adecuados de paladio incluyen, pero no se limitan a, PdCl2 ( PPh3) 2, Pd(Ph3)4, y PdCl2(dppf). Las bases adecuadas incluyen, pero no se limitan a, K2C03 y Na2C03. Los solventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, tetrahidrofurano, tolueno y etanol. Las condiciones de acoplamiento de Stille comprenden el uso de un catalizador (usualmente paladio, pero algunas veces níquel), un solvente adecuado, y otros reactivos opcionales. Los ejemplos de catalizadores adecuados incluyen, pero no se limitan a, PdCl2 ( PPh3) 2, Pd(Ph3)4, y PdCl2(dppf). Los solventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, tetrahidrofurano, tolueno y dimetilformamida . Las condiciones de acoplamiento de Negishi comprenden el uso de un catalizador (paladio o níquel) y un solvente adecuado. Los ejemplos de catalizadores adecuados incluyen, pero no se limitan a, Pd2(dba)3, Ni ( PPh3) 2C12, PdCl2 ( PPh3) 2, y Pd(Ph3)4. Los solventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, tetrahidrofurano, tolueno, y dimetilformamida . Se conocen por el experto en la técnica las condiciones de Suzuki, Stille y Negishi y se describen en más detalle en una variedad de referencias, que incluyen "March's Advanced Organic Chemistry". Las condiciones de acoplamiento de Buchwald comprenden el uso de un catalizador de paladio, una base adecuada y un solvente adecuado. Los ejemplos de catalizadores adecuados de paladio incluyen, pero no se limitan a, Pd(OAc)2 con xanthphos, PdCl2 ( PPh3) 2, Pd(Ph3)4, y PdCl2(dppf). Las bases incluyen, pero no se limitan a, Cs2C03, K2C03 y Na2C03. Los solventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, dioxano, tetrahidrofurano, tolueno, y etanol. Como se entenderá por un experto en la técnica, los grupos de acoplamiento se forman a partir de precursores de grupos de acoplamiento. Un "precursor de grupo de acoplamiento" es un reactivo o grupo de reactivos usado para formar un grupo de acoplamiento cruzado. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, bis (pinacolato ) diborano para la formación de ásteres de boronato, trimetilboratos para la formación de ácidos borónicos, Bu3SnCl para la formación de estannanos, y ZnCl2 para la formación de zincatos en reacciones de acoplamiento de Negishi. Los ejemplos de condiciones adecuadas en formación de grupos de acoplamiento incluyen, pero no se limitan a, elaboración de ásteres borónicos mediante catalizadores mediados por paladio; elaboración de ácidos borónicos al hidrolizar ásteres borónicos; elaboración de estannanos mediante un proceso de dos pasos: 1) intercambio de metal de halógeno seguido por 2) transmetalización con Bu3SnhCl; y elaboración de zincatos mediante un proceso de dos pasos: 1) intercambio de metal de halógeno seguido por 2) adición de ZnCl2. Otro aspecto de esta invención proporciona compuestos que son inhibidores de proteina-cinasas , y de esta manera son útiles para el tratamiento de enfermedades, trastornos, y condiciones, junto con otros usos descritos en la presente. En otro aspecto de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticamente aceptables, en donde estas composiciones comprenden cualquiera de los compuestos como se describe en la presente, y comprenden opcionalmente un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptables. En ciertas modalidades, estas composiciones comprenden opcionalmente además uno o más agentes terapéuticos adicionales. La presente invención proporciona compuestos y composiciones que son útiles como inhibidores de proteina-cinasas. En algunas modalidades, las proteina-cinasas son PLK. En algunas modalidades, PLK1. Como inhibidores de proteina-cinasas, los compuestos y composiciones de esta invención son particularmente útiles para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad, condición, o trastorno en donde esté implicada una proteína-cinasa, en la enfermedad, condición o trastorno. En un aspecto, la invención proporciona un método para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad, condición o trastorno donde una proteina-cinasa esté implicada en el estado de enfermedad. En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad, condición o trastorno de una proteina-cinasa, donde la inhibición de la actividad enzimática está implicada en el tratamiento de la enfermedad. En otro aspecto, esta invención proporciona un método para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad, condición, o trastorno con compuestos que inhiben la actividad enzimática por la unión a una proteina-cinasa. Otro aspecto proporciona un método para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad, condición o trastorno de cinasa al inhibir la actividad enzimática de la cinasa con un inhibidor de proteina-cinasa. En algunas modalidades, el inhibidor de proteina-cinasa es un inhibidor de PLK. Un aspecto de la invención se refiere a un método para inhibir la actividad de proteina-cinasa en un paciente, método que comprende administrar al paciente un compuesto de la fórmula I, o una composición que comprende este compuesto. En algunas modalidades, el método se usa para tratar o prevenir una condición seleccionada de enfermedades autoinmunitarias , enfermedades inflamatorias, enfermedades proliferativas e hiperproliferativas , enfermedades inmunológicamente medidas, enfermedades óseas, enfermedades metabólicas, enfermedades neurológicas y neurodegenerativas, enfermedades cardiovasculares, enfermedades relacionadas a hormonas, alergias, asma y enfermedad de Alzheimer. En algunas modalidades, la proteina-cinasa en PLK. En otras modalidades, la condición se selecciona de un trastorno proliferativa y un trastorno neurodegenerativo. Dependiendo de las condiciones particulares mediadas por la proteina-cinasa, que se van a tratar o prevenir, se pueden administrar los fármacos adicionales, que normalmente se administran para tratar o prevenir esta condición, conjuntamente con los inhibidores de esta invención. Por ejemplo, se pueden combinar agentes quimioterapéuticos u otros agentes anti-proliferativos con los inhibidores de proteina-cinasa de esta invención para tratar enfermedades proliferativas . Estos agentes adicionales se pueden administrar de manera separada, como parte de un régimen de múltiples dosis, del compuesto o composición que contiene el inhibidor de proteina-cinasa. De manera alternativa, estos agentes pueden ser parte de una forma de dosis individual, mezclados conjuntamente con el inhibidor de proteina-cinasa en una composición individual. Como inhibidores de proteina-cinasas , los compuestos y composiciones de esta invención también son útiles en muestras biológicas. Un aspecto de la invención se refiere a inhibir la actividad de la proteina-cinasa en una muestra biológica, método que comprende poner en contacto la muestra biológica con un compuesto de la fórmula I o una composición que comprende este compuesto. El término "muestra biológica", como se usa en la presente, significa una muestra in vi tro o ex vivo, que incluye, sin limitación, cultivos celulares o extractos de los mismos; material de biopsia obtenido de un mamífero o extractos del mismo; y sangre, saliva, orina, heces, semen, lágrimas u otros fluidos corporales o extractos de los mismos. La inhibición de la actividad de proteina-cinasa en una muestra biológica es útil para una variedad de propósitos que se conocen por el experto en la técnica. Los ejemplos de estos propósitos incluyen, pero no se limitan a, transfusión sanguínea, trasplante de órganos, y almacenamiento de especímenes biológicos. Otro aspecto de esta invención se refiere al estudio de proteína-cinasas en fenómenos biológicos y patológicos; el estudio de rutas intracelulares de transducción de señales mediadas por estas proteína-cinasas; y la evaluación comparativa de nuevos inhibidores de proteína-cinasas. Los ejemplos de estos usos incluyen, pero no se limitan a, ensayos biológicos tal como ensayos enzimáticos y ensayos basados en células.

La actividad de los compuestos como inhibidores de proteina-cinasa se puede valorar in vitro, in vivo o en una linea de células. Los ensayos in vitro incluyen ensayos que determinan la inhibición de ya sea la actividad de la cinasa o la actividad de ATPasa de la cinasa activada. Los en sayos in vitro alternos cuantifican la capacidad del inhibidor para unirse a la proteina-cinasa y se pueden medir ya sea al radiomarcar el inhibidor antes de la unión, al aislar el complejo de inhibidor/cinasa y al determinar la cantidad de radiomarca unida, o al correr un experimento de competición donde se incuban nuevos inhibidores con la cinasa unida a los radioligandos conocidos. Las condiciones detalladas para valorar un compuesto utilizado en esta invención como un inhibidor de PLK1, PLK2 , PLK3, y PLK4 se exponen en los ejemplos posteriores. Un aspecto de esta invención proporciona compuestos que son útiles para el tratamiento de enfermedades, trastornos, y condiciones caracterizadas por proliferación celular excesiva o anormal. Estas enfermedades incluyen, una enfermedad proliferativa o hiperproliferativa , y una enfermedad neurodegenerativa. Los ejemplos de enfermedades proliferativas e hiperproliferativas incluyen, sin limitación, cáncer. El término "cáncer" incluye, pero no se limita a los siguientes cánceres: de mama; de ovario; de cerviz; de próstata, de testículos, del tracto genitourinario; de esófago, de laringe, glioblastoma; neuroblastoma ; de estómago; de piel, queratoacantoma ; de pulmón, carcinoma epidermoide, carcinoma de células grandes, carcinoma de células pequeñas, adenocarcinoma pulmonar; de hueso; de colon; colorrectal ; adenoma; de páncreas, adenocarcinoma ; de tiroides, carcinoma folicular, carcinoma no diferenciado, carcinoma papilar; seminoma; melanoma; sarcoma; carcinoma de vejiga; carcinoma de hígado y pasajes biliares; carcinoma de riñon; trastornos mieloides, trastornos linfoides, células pilosas de Hodgkin; de cavidad bucal y faringe (oral), de labio, de lengua, de boca, de faringe; intestino delgado; de colon-recto, de intestino grueso, de recto; del sistema nervioso central y cerebro; leucemia mieloide crónica (CML) y leucemia. Los ejemplos de enfermedades neurodegenerativas incluyen, sin limitación, enfermedad de Alzheimer. Otro aspecto de esta invención proporciona un método para el tratamiento o disminución de la severidad de una enfermedad seleccionada de una enfermedad proliferativa o hiperproliferativa, o una enfermedad neurodegenerativa, que comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto, o una composición farmacéuticamente aceptable que comprende un compuesto, a un sujeto en necesidad del mismo. En ciertas modalidades, una "cantidad efectiva" del compuesto o composición farmacéuticamente aceptables es aquella cantidad efectiva a fin de tratar esta enfermedad. Los compuestos y composiciones, de acuerdo al método de la presente invención, se pueden administrar usando cualquier cantidad y cualquier ruta de administración efectiva para tratar o disminuir la severidad de la enfermedad. En algunas modalidades, la enfermedad es una condición mediada por proteina-cinasas . En algunas modalidades, la enfermedad es una enfermedad mediada por PLK. El término "condición mediada por proteina-cinasas", como se usa en la presente, significa cualquier enfermedad u otra condición perjudicial en la cual juega un papel una proteina-cinasa . Estas condiciones incluyen, sin limitación, enfermedades autoinmunitarias , enfermedades inflamatorias, enfermedades proliferativas e hiperproliferativas , enfermedades inmunológicamente mediadas, enfermedades óseas, enfermedades metabólicas, enfermedades neurológicas. y neurodegenerativas, enfermedades cardiovasculares, enfermedades relacionadas a hormonas, alergias, asma y enfermedad de Alzheimer. El término "condición mediada por PLK", como se usa en la presente significa cualquier enfermedad u otra condición perjudicial en la cual juega un papel el PLK. Esta condición incluye, sin limitación, una enfermedad proliferativa o hiperproliferativa , o una enfermedad neurodegenerativa . En otro aspecto de la presente invención, se proporcionan composiciones farmacéuticamente aceptables, en donde estas composiciones comprenden cualquiera de los compuestos como se describe en la presente, y opcionalmente comprenden un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable. En ciertas modalidades, estas composiciones comprenden además opcionalmente uno o más agentes terapéuticos adicionales. Por ejemplo, los agentes quimioterapéuticos u otros agentes antiproliferativos se pueden combinar con los compuestos de esta invención para tratar enfermedades proliferativas y cáncer. Los ejemplos de agentes quimioterapéuticos conocidos incluyen, pero no se limitan a, GleevecMR, adriamicina, dexametasona , vincristina, ciclofosfamida , fluorouracilo, topotecan, taxol, interferones , y derivados de platino . Otros ejemplos de agentes con los cuales se pueden combinar también los inhibidores de esta invención, incluye, sin limitación, tratamientos para la enfermedad de Alzheimer tal como AriceptMR y ExcelonMR; tratamientos para la enfermedad de Parkinson tal como L-DOPA/carbidopa, entacapona, ropinrol, pramipexol, bromocriptina , pergolido, trihexefendil , y amantadina; agentes para tratar esclerosis múltiple (MS) tal como interferón beta (por ejemplo, AvonexMR y RebifMR) , CopaxoneMR, y mitoxantrona ; tratamientos para asma tal como albuterol y SingulairMR; agentes para tratar esquizofrenia tal como zyprexa, risperdal, seroquel, y haloperidol; agentes anti-inflamatorios tal como cort icosteroides , bloqueadores de TNF, IL-1 RA, azatioprina, ciclofos.famida, y sulfasalazina; agentes inmunomoduladores y inmunosupresores tal como ciclosporina, tacrolimus, rapamicina, micofenolato-mofetil , interferones , cort icosteroides , ciclofosfamida, azatioprina, y sulfasalazina; factores neurotrópicos tal como inhibidores de acetilcolinesterasa, inhibidores de MAO, interferones , anticonvulsivos, bloqueadores de canales iónicos, riluzol, y agentes anti-parkinsonianos; agentes para tratar enfermedad cardiovascular tal como beta-bloqueadores, inhibidores de ACE, diuréticos, nitratos, bloqueadores de canal de calcio, y estatinas; agentes para tratar enfermedad hepática tal como cort icosteroides , colestiramina , interferones , y agentes anti-virales ; agentes para tratar trastornos sanguíneos tal como corticosteroides , agentes ant i-leucémicos , y factores de crecimiento; y agentes para tratar trastornos de inmunodeficiencia tal como gamma-globulina. Como se describe en la presente, las composiciones farmacéuticamente aceptables de la presente invención comprenden adicionalmente un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptables, que, como se usa en la presente, incluye cualquiera y todos los solventes, diluyentes, u otros vehículos líquidos, ayudas de dispersión o suspensión, agentes tensioactivos, agentes isotónicos, agentes espesantes o emulsionantes, conservadores, aglutinantes sólidos, lubricantes y similares, como sea adecuado a la forma particular de dosis deseada. Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa . , 1980) describe varios portadores usados en la formulación de composiciones farmacéuticamente aceptables y técnicas conocidas para la preparación de las mismas. Excepto con respecto a cualquier medio portador convencional que sea incompatible con los compuestos de la invención, tal como al producir cualquier efecto biológico indeseable o al interactuar de otro modo de manera perjudicial con cualquiera de los otros componentes de la composición farmacéuticamente aceptable, su uso se contempla que esté dentro del alcance de la invención. Algunos ejemplos de materiales que pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, intercambiadores iónicos, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas de suero, tal como albúmina de suero humano, sustancias amortiguadoras tal como fosfatos, glicina, ácido sórbico, o sorbato de potasio, mezclas de glicéridos parciales de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrolitos, tal como sulfato de protamina, fosfato ácido de disodio, fosfato ácido de potasio, cloruro de sodio, sales de zinc, sílice coloidal, trisilicato de magnesio, polivinil-pirrolidona, poliacrilatos , ceras, polímeros de bloque de polietileno-polioxipropileno , grasa de lana, azúcares tal como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones tal como almidón de maíz y almidón de patata; celulosa y sus derivados tal como carboximetilcelulosa sódica, etilcelulosa y acetato de celulosa; tragacanto en polvo; malta; gelatina; talco; excipientes tal como manteca de cacao y ceras de supositorio; aceites tal como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón; aceite de cártamo; aceite de ajonjolí; aceite de oliva; aceite de maíz y aceite de soya; glicoles; tal como propilenglicol o polietilenglicol ; ásteres tal como oleato de etilo y laurato de etilo; agar; agentes amortiguadores tal como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; ácido algínico, agua libre de pirógenos; solución salina isotónica; solución de Ringer; alcohol etílico, y soluciones amortiguadoras de fosfato, así como otros lubricantes compatibles no tóxicos tal como laurilsulfato de sodio y estearato de magnesio, así como agentes colorantes, agentes de liberación, agentes de revestimiento, agentes edulcorantes, saborizantes y aromatizantes, conservadores y antioxidantes también pueden estar presentes en la composición, de acuerdo al juicio del formulador . Los inhibidores de proteina-cinasas o sales farmacéuticas de los mismos se pueden formular en composiciones farmacéuticas para administración a animales o humanos. Estas composiciones farmacéuticas, que comprenden una cantidad del inhibidor de proteina efectiva para tratar o prevenir una condición mediada por proteina-cinasa y un portador farmacéuticamente aceptable, son otra modalidad de la presente invención. En algunas modalidades, esta condición mediada por proteina-cinasa es una condición mediada por PLK. La cantidad exacta de compuesto requerida para el tratamiento variará de sujeto a sujeto, dependiendo de la especie, edad y condición general del sujeto, la severidad de la infección, el agente particular, su modo de administración, y similares. Los compuestos de la invención se formulan de manera preferente en forma de dosis unitaria para facilidad de administración y uniformidad de dosis. La expresión "forma de dosis unitaria" como se usa en la presente se refiere a una unidad físicamente discreta de agente apropiado para el paciente que se va a tratar. Sin embargo, se entenderá que el uso diario total de los compuestos y composiciones de la presente invención se decidirá por el facultativo que atiende dentro del alcance del juicio médico razonable. El nivel específico de dosis efectiva para cualquier paciente u organismo particular dependerá de una variedad de factores que incluyen el trastorno que se trata y la severidad del trastorno; la actividad del compuesto especifico empleado; la composición especifica empleada; la edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del paciente; el tiempo de administración, ruta de administración, y velocidad de excreción del compuesto especifico empleado; la duración del tratamiento; fármacos usados en combinación o coincidentes con el compuesto especifico empleado, y factores similares bien conocidos en las técnicas médicas. El término "paciente", como se usa en la presente, significa un animal, preferentemente un mamífero, y de manera más preferente un humano. Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se pueden administrar a humanos u otros animales de forma oral, rectalmente, de manera parenteral, de manera intracisternal , intravaginalmente , de forma intraperitoneal , tópicamente (como por polvos, ungüentos o gotas), de forma bucal, como una aspersión oral o nasal, o similares, dependiendo de la severidad de la infección que se trate. En ciertas modalidades, los compuestos de la invención se pueden administrar de manera oral o de forma parenteral a niveles de dosis de aproximadamente 0.01 mg/kg a aproximadamente 50 mg/kg y de manera preferente de aproximadamente 1 mg/kg a aproximadamente 25 mg/kg, del peso corporal del sujeto por día, una o más veces por día, para obtener el efecto terapéutico deseado. Las formas líquidas de dosificación para administración oral incluyen, pero no se limitan a, emulsiones, microemulsiones , soluciones, suspensiones, jarabes y elíxires farmacéuticamente aceptables. Además de los compuestos activos, las formas líquidas de dosificación pueden contener diluyentes inertes comúnmente usados en la técnica tal como por ejemplo, agua u otros solventes, agentes solubilizantes y emulsionadores tal como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol , 1,3-butilenglicol , dimetilformamida, aceites (en particular, aceites de semilla de algodón, de cacahuate, de maíz, de germen, de olivo, de ricino y ajonjolí), glicerol, alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácidos grasos de sorbitano, y mezclas de los mismos. Además de los diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes tal como agentes humectantes, agentes emulsionadores y de suspensión, agentes edulcorantes, saborizantes , y aromatizantes. Las preparaciones inyectables, por ejemplo, las suspensiones oleaginosas o acuosas inyectables estériles se pueden formular de acuerdo a la técnica conocida usando agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspensión. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución, suspensión o emulsión inyectable estéril, en un diluyente o solvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo, como una solución en 1 , 3-butanodiol . Entre los vehículos aceptables y solventes aceptables que se pueden emplear están agua, solución de Ringer, solución de cloruro de sodio isotónica y U.S.P. Además, convencionalmente se emplean aceites fijos, estériles como un solvente o medio de de suspensión. Para este propósito, se puede emplear cualquier aceite fijo insípido incluyendo mono- o di-glicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tal como ácido oleico se usan en la preparación de productos inyectables . Las formulaciones inyectables se pueden esterilizar, por ejemplo, por filtración a través de un filtro de retención bacteriana, o al incorporar agentes esterilizantes en la forma de composiciones sólidas estériles que se pueden disolver o dispersar en agua estéril u otro medio inyectable estéril antes del uso. A fin de prolongar el efecto de un compuesto de la presente invención, frecuentemente es deseable retrasar la absorción del compuesto de la inyección subcutánea o intramuscular. Esto se puede lograr por el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo con pobre solubilidad en agua. La velocidad de absorción del compuesto dependen entonces de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño del cristal y forma cristalina. De manera alternativa, la absorción retrasada de una forma de compuesto parenteralmente administrada se logra al disolver o suspender el compuesto en un vehículo aceitoso. Las formas inyectables de depósito se elaboran al formar matrices de microcápsula del compuesto en polímeros biodegradables tal como poliláctido-poliglicólido .

Dependiendo de la relación del compuesto al polímero y de la naturaleza del polímero particular empleado, se puede controlar la velocidad de liberación del compuesto. Los ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli (ortoésteres ) y poli (anhídridos ) . Las formulaciones inyectables de depósito también se preparan al atrapar el compuesto en liposomas o microemulsiones que son compatibles con los tejidos corporales. Las composiciones para administración rectal o vaginal son preferentemente supositorios que se pueden preparar al mezclar los compuestos de esta invención con excipientes o portadores no irritantes adecuados tal como manteca de cacao, polietilenglicol o una cera de supositorio que es sólida a temperatura ambiente pero líquida a temperatura corporal y por lo tanto se funde en el recto o cavidad vaginal y libera el compuesto activo. Las formas sólidas de dosificación para administración oral incluyen cápsulas, tabletas, pildoras, polvos, y gránulos. En estas formas sólidas de dosificación, el compuesto activo se mezcla con al menos un excipiente o portador inerte farmacéuticamente aceptable tal como citrato de sodio o fosfato de dicalcio y/o a) agentes de relleno o extendedores tal como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, y ácido silícico, b) aglutinantes tal como por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidinona , sacarosa y goma de acacia, c) humectantes tal como glicerol, d) agentes desintegrantes tal como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de patata o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos, y carbonato de sodio, e) agentes retardantes de solución tal como parafina, f) aceleradores de absorción tal como compuestos de amonio cuaternario, g) agentes humectantes tal como por ejemplo, alcohol cetílico y monoestearato de glicerol, h) absorbedores tal como caolín y arcilla de bentonita, e i) lubricantes tal como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, laurilsulfato de sodio, y mezclas de los mismos. En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, la forma de dosis -también puede comprender agentes amortiguadores . Las composiciones sólidas de un tipo similar también se pueden emplear como agentes de relleno en cápsulas de gelatina de relleno blando y duro usando excipientes tal como lactosa o azúcar láctea asi como polietilenglicoles de alto peso molecular, y similares. Las formas sólidas de dosificación de tabletas, grageas, cápsulas, pildoras y gránulos se pueden preparar con revestimientos y cubiertas tal como revestimientos entéricos y otros revestimientos bien conocidos en la técnica de formulación farmacéutica. Opcionalmente pueden contener agentes opacificadores y también pueden ser de una composición que liberen sólo los ingredientes activos, o preferencialmente, en una cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, de una manera retrasada. Los ejemplos de composiciones de incrustación que se pueden emplear incluyen sustancias y ceras poliméricas. Las composiciones sólidas de un tipo similar también se pueden emplear como agentes de relleno y cápsulas de gelatina de relleno blando y duro usando excipientes tal como lactosa o azúcar láctea asi como polietilenglicoles de alto peso molecular, y similares. Los compuestos activos también pueden estar en la forma microencapsulada con uno o más excipientes como se señala anteriormente. Las formas sólidas de dosificación de tabletas, grageas, cápsulas, pildoras y gránulos se pueden preparar con revestimientos y cubiertas tal como revestimientos entéricos, revestimientos que controlan la liberación y otros revestimientos bien conocidos en la técnica de formulación farmacéutica. En estas formas sólidas de dosificación, el compuesto activo se puede mezclar con al menos un diluyente inerte tal como sacarosa, lactosa o almidón. Estas formas de dosificación también pueden comprender, como es práctica normal, sustancias adicionales diferentes de diluyentes inertes, por ejemplo, lubricantes de formación de tabletas y otras ayudas de formación de tabletas tal como estearato de magnesio y celulosa microcristalina . En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes amortiguadores. Opcionalmente , pueden contener agentes opacificadores y también pueden ser de una composición que libere los ingredientes activos únicamente, o preferencialmente , en una cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, de una manera retrasada. Los ejemplos de composiciones de incrustación que se pueden usar incluyen sustancias y ceras poliméricas. Las formas de dosificación para administración tópica o transdérmica de un compuesto de esta invención incluyen ungüentos, pastas, cremas, lociones, geles, polvos, soluciones, aspersiones, inhalantes o parches. El componente activo se mezcla bajo condiciones estériles con un portador farmacéuticamente aceptable y cualquier conservador o amortiguador necesario como se pueda requerir. También se contemplan formulación oftálmica, gotas para oídos y gotas para ojos como que está dentro del alcance de la invención.

Adicionalmente, la presente invención contempla el uso de parches transdérmicos, que tienen la ventaja adicional de proporcionar distribución controlada de un compuesto hacia el cuerpo. Estas formas de dosificación se pueden elaborar al disolver o distribuir el compuesto en el medio apropiado. También se pueden usar mejoradores de absorción para incrementar el flujo del compuesto a través de la piel. La velocidad se puede controlar ya sea al proporcionar una membrana que controla la velocidad o al distribuir el compuesto en una matriz o gel polimérico. Además de los compuestos de esta invención, también se contemplan derivados o profármacos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención, en las composiciones para tratar o prevenir los trastornos identificados anteriormente. Los compuestos de esta invención también pueden existir como derivados farmacéuticamente aceptables. Un "derivado farmacéuticamente aceptable" es un aducto o derivado que, en la administración a un paciente en necesidad, es capaz de proporcionar, ya sea de manera directa o indirecta, un compuesto como se describe de otro modo en la presente, o un metabolito o residuo del mismo. Los ejemplos de derivados farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, ésteres y sales de estos ésteres. Un "derivado o profármaco farmacéuticamente aceptables" significa cualquier éster, sal de un éster u otro derivado farmacéuticamente aceptable, de un compuesto de esta invención que, en la administración a un receptor, es capaz de proporcionar, ya sea de manera directa o indirecta, un compuesto de esta invención o un metabolito o residuo inhibitoriamente activo del mismo. Los derivados o profármacos particularmente favorecidos son aquellos que incrementan la biodisponibilidad de los compuestos de esta invención cuando estos compuestos se administran a un paciente (por ejemplo, al permitir que un compuesto oralmente administrado se absorba más fácilmente en la sangre) o que mejora la distribución del compuesto de origen a un compartimiento biológico (por ejemplo, el cerebro o sistema linfático) con relación a la especie de origen. Los profármacos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención incluyen, sin limitación, ésteres, ésteres de aminoácidos, ésteres de fosfato, sales metálicas y ésteres de sulfonato. Los portadores farmacéuticamente aceptables que se pueden usar en estas composiciones farmacéuticas incluyen, pero no se limitan a, intercambiadores iónicos, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas de suero, tal como albúmina de suero humano, sustancias amortiguadoras tal como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potasio, mezclas de glicéridos parciales de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrolitos, tal como sulfato de protamina, fosfato ácido de disodio, fosfato ácido de potasio, cloruro de sodio, sales de zinc, sílice coloidal, trisilicato de magnesio, polivinilpirrolidona , sustancias basadas en celulosa, polietilenglicoles , carboximetilcelulosa sódica-, poliacrilatos , ceras, polímeros de bloque de polietileno-polioxipropileno, polietilenglicol y grasa de lana. Las composiciones de la presente invención se pueden administrar de manera oral, parenteralmente, por aspersión de inhalación, de forma tópica, rectalmente, de manera nasal, bucalmente, de forma vaginal o por un depósito implantado. El término "parenteral" como se usa en la presente incluyen, pero no se limitan a, técnicas de infusión o inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular, intra-articular, intra-sinovial , intraesternal , intratecal, intrahepática , intralesional e intracraneal. De manera preferente, las composiciones se administran de manera oral, intraperitonealmente o de forma intravenosa. Las formas estériles inyectables de las composiciones de esta invención pueden ser suspensión acuosa u oleaginosa. Estas suspensiones se pueden formular de acuerdo a técnicas conocidas usando agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspensión adecuados. La preparación inyectable estéril también puede ser una suspensión o solución inyectable estéril en un diluyente o solvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo como una solución en 1 , 3-butanodiol . Entre los vehículos y solventes aceptables que se pueden emplear están agua, solución de Ringer y solución isotónica de cloruro de sodio. Además, convencionalmente se emplean aceites fijos estériles como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito, se puede emplear cualquier aceite fijo insípido incluyendo mono- o di-glicéridos sintéticos. Los ácidos grasos, tal como ácido oleico y sus derivados de glicérido son útiles en la preparación de productos inyectables, puesto que son aceites naturales farmacéuticamente aceptables, tal como aceite de oliva o aceite de ricino, especialmente en sus versiones polioxietiladas . Estas soluciones o suspensiones aceitosas también pueden contener un dispersante o diluyente de alcohol de cadena larga, tal como carboximetilcelulosa o agentes dispersantes similares que comúnmente se usan en la formulación de formas de dosificación farmacéuticamente aceptables incluyendo emulsiones y suspensiones. Otros agentes tensioactivos comúnmente usados, tal como Tweens, Spans y otros agentes emulsionadores o mejoradores de biodisponibilidad que se usan comúnmente en la elaboración de formas de dosificación sólidas, líquidas u otras farmacéuticamente aceptables también se pueden usar para los propósitos de la formulación. Las composiciones farmacéuticas de esta invención se pueden administrar de manera oral en cualquier forma de dosificación oralmente aceptable que incluyen, pero no se limitan a, cápsulas, tabletas, suspensiones o soluciones acuosas. En el caso de tabletas para uso oral, los portadores comúnmente usados incluyen, pero no se limitan a, lactosa y almidón de maíz. Los agentes lubricantes, tal como estearato de magnesio, también se adicionan de forma típica. Para administración oral en una forma de cápsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Cuando se requieran suspensiones acuosas para uso oral, el ingrediente activo se combina con agentes emulsionadores y de suspensión. Si se desea, también se pueden adicionar ciertos agentes edulcorantes, saborizantes o aromatizantes. De manera alternativa, las composiciones farmacéuticas de esta invención se pueden administrar en la forma de supositorios para administración rectal. Éstas se pueden preparar al mezclar el agente con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperatura ambiente pero líquido a temperatura rectal y por lo tanto se fundirá en el recto para liberar el fármaco. Estos materiales incluyen, pero no se limitan a, manteca de cacao, cera de abeja y polietilenglicoles. Las composiciones farmacéuticas de esta invención también se pueden administrar de forma tópica, especialmente cuando el objetivo del tratamiento incluye áreas u órganos fácilmente accesibles por aplicación tópica, incluyendo enfermedades del ojo, la piel o el tracto intestinal inferior. Las formulaciones tópicas adecuadas se preparan fácilmente para cada una de estas áreas u órganos. La aplicación tópica para el tracto intestinal inferior se puede efectuar en una formulación de supositorio rectal (ver anteriormente) o en un formulación de enema, adecuada. También se pueden usar parches tópicamente transdérmicos . Para aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticas se pueden formular en un ungüento adecuado que contiene el componente activo suspendido o disuelto en uno o más portadores. Los portadores para administración tópica de los compuestos de esta invención incluyen, pero no se limitan a, aceite mineral, petrolato liquido, petrolato blanco, propilenglicol , polioxietileno, compuesto de polioxipropileno, cera emulsionante y agua. De manera alternativa, las composiciones farmacéuticas se pueden formular en una loción o crema adecuada que contiene los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más portadores farmacéuticamente aceptables. Los portadores adecuados incluyen, pero no se limitan a, aceite mineral, monoestearato de sorbitan, polisorbato 60, cera de ésteres de cetilo, alcohol cetearilico, 2-oct ildodecanol , alcohol bencílico y agua. Para uso oftálmico, las composiciones farmacéuticas se pueden formular como suspensiones micronizadas en solución salina estéril ajustada en pH, isotónica, o de manera preferente, como soluciones en solución salina estéril ajustada en pH, isotónica, ya sea con o sin un conservador tal como cloruro de bencilalconio . De manera alternativa, para usos oftálmicos, las composiciones farmacéuticas se pueden formular en un ungüento tal como petrolato. Las composiciones farmacéuticas de esta invención también se pueden administrar por aerosol o inhalación nasal. Estas composiciones se preparan de acuerdo a técnicas bien conocidas en la técnica de formulación farmacéutica y se pueden preparar como soluciones en solución salina, empleando alcohol bencílico u otros conservadores adecuados, promotores de absorción para mejorar la biodisponibilidad, fluorocarburos, y/u otros agentes dispersantes o solubilizantes convencionales. La cantidad de inhibidor de proteína-cinasa que se puede combinar con los materiales portadores para producir una forma de dosis individual variará dependiendo del hospedador tratado, del modo particular de administración. De manera preferente, las composiciones se deben formular de modo que se pueda administrar una dosis de entre 0.01-100 mg/kg de peso corporal/día del inhibidor a un paciente que recibe estas composiciones. También se debe entender que una dosis específica y régimen de tratamiento específicos para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores, que incluyen la actividad del compuesto especifico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, velocidad de excreción, combinación de fármacos, y el juicio del facultativo que atiende y la severidad de la enfermedad particular que se trata. La cantidad del inhibidor también dependerá del compuesto particular en la composición. De acuerdo a otra modalidad, la invención proporciona métodos para tratar o prevenir una condición mediada por proteina-cinasa (en algunas modalidades, una condición mediada por PLK) que comprende el paso de administrar a un paciente una de las composiciones farmacéuticas descritas anteriormente. El término "paciente", como se usa en la presente, significa un animal, preferentemente un humano. En algunas modalidades, el método se usa para tratar o prevenir una condición seleccionada de un trastorno proliferativo, tal como cáncer, un trastorno neurodegenerativo, un trastorno autoinmunitario, un trastorno inflamatorio, y un trastorno inmunológicamente mediado. En algunas modalidades, el método se usa para tratar o prevenir una condición seleccionada de cánceres tal como cánceres de la mama, colon, próstata, piel, páncreas, cerebro, tracto genitourinario, sistema linfático, estómago, laringe y pulmón, incluyendo adenocarcinoma pulmonar y cáncer pulmonar de células pequeñas; ataque, diabetes, mieloma, hepatomegalia , cardiomegalia, enfermedad de Alzheimer, fibrosis cística, y enfermedad viral, o cualquier enfermedad especifica descrita anteriormente. Los compuestos de esta invención se pueden preparar en general por los métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica. Estos compuestos se pueden analizar por métodos conocidos, incluyendo, pero no limitados a LCMS (espectrometría de masa con cromatografía líquida) y RMN (resonancia magnética nuclear) . Los compuestos de esta invención también se pueden probar de acuerdo a estos ejemplos. Se debe entender que las condiciones específicas mostradas más adelante son sólo ejemplos, y no se propone que limiten el alcance de las condiciones que se pueden usar para elaborar, analizar o probar los compuestos de esta invención. En cambio, esta invención también incluye condiciones conocidas por aquellos expertos en la técnica para elaborar, analizar y probar los compuestos de esta invención.

Ejemplos Como se usa en la presente, el término "RT (min) " se refiere al tiempo de retención por HPLC, en minutos, asociado con el compuesto. A menos que se indique de otro modo, el método de HPLC utilizado para obtener el tiempo de retención reportado es como sigue: Columna: columna ACE C8, 4.6 x 150 mm Gradiente: 0-100 % de acetonitrilo + metanol 60:40 (fosfato de Tris 20 mM) Velocidad de flujo: 1.5 mL/minuto Detección: 225 nm. Se analizaron las muestras de espectro de masa en un espectrómetro de masa MicroMass Quattro Micro operado en el modo de MS individual con ionización por electrorrociado . Las muestras se introdujeron en el espectrómetro de masas usando cromatografía. Los espectros de RMN1H se registraron a 400 MHz usando un instrumento Bruker DPX 400 y se reportan en ppm d. Los siguientes compuestos de la fórmula I se prepararon y analizaron como sigue.

Ejemplo 1: 4- ( {R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4,3-f] pteridin-7-ilamino) -3-metoxi-i\/-metilbenzamida (1-1) Método A: (R) -7-cloro-5-ciclopentil-4-etil- , 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4, 3-f] pteridina La (R) -2-cloro-8-ciclopentil-7-etil-7, 8-dihidropteridin-6 ( 5H) -ona (100 mg, 0.357 mmol) en oxicloruro de fósforo (3.0 mL) se agitó a 110°C durante 3 horas luego se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en diclorometano anhidro y se adicionó gota a gota a hidrazina 1.0 M en THF (3.6 mL, 3.57 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, se tomó en acetato de etilo y se lavó con carbonato ácido de sodio acuoso, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró. El residuo de la hidrazida cruda se disolvió en ortoformiato de trimetilo (2.0 mL) y se agitó a 110°C durante 90 minutos. La mezcla se concentró bajo presión reducida y se purificó por cromatografía instantánea en gel de sílice eluyendo con acetato de etilo para dar (R) -7-cloro-5-ciclopentil-4-etil-4 , 5-dihidro- [ 1, 2, 4 ] triazol [4 , 3-f ] pteridina (68 mg, 63 %) como un sólido café pálido. RMN1H (DIVISO D6) 0.75 (3H, t), 1.50-1.64 (2H, 1.80-2.08 (8H, m) , 4.22-4.33 (1H, m) , 5.28-5.35 (1H, m) , 8.68 (1H, s), 9.35 (1H, s) ; MS ES+) 305.

Método B: 4-{{R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, ] triazol [4, 3-f] pteridin-7-i lamino) -3-metoxi-N-metilbenzamida ( 1-1 ) Se adicionaron 4 -amino-3-metoxi - -met ilbenzamida (72 mg, 0.394 mmol) seguido por una cantidad catalítica de HC1 concentrado (0.04 mL) a una solución de (R) -7-cloro-5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1,2,4] triazol [4, 3-f] pteridina (80 mg, 0.263 mmol) en una mezcla de etanol/agua (1/4, 5 mL) , La mezcla de reacción se agitó a 90°C durante 24 horas, luego se enfrió a temperatura ambiente y se basificó con solución acuosa saturada de NaHC03. La mezcla se extrajo con acetato de etilo, la capa orgánica se secó (MgS04) y el residuo se purificó por cromatografía instantánea para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (92 mg, 78 % de rendimiento) . Presentado como una base libre. RMN1H (DMSO D6) 0.75 (3H, t), 1.43-1.60 (4H, m) , 1.80-2.07 (6H, m) , 2.80 (3H, d) , 3.88 (3H, s), 4.19 (1H, m) , 7.50 (1H, m) , 7.59 (1H, s), 7.83 (1H, d) , 8.47 (1H, m) , 8. (1H, s), 9.31 (1H, s), 9.40 (1H, s amplio) ; MS (ES+) 449. Ejemplo 2: 4- ( {R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4 , 3-f] pteridin 7-ilamino) -3-metoxi-N- (l-metilpiperidin-4-il) benzamida (1-2) Preparado usando el método B, presentada como una base libre. MN^H (CMSO D6) 0.73 (3H, t) , 1.52-2.11 (15H, m) , 2.25 (3H, s), 2.80-2.92 (2H, m) , 3.27-3.32 (1H, m) , 3.72-3.82 (1H, m) , 4.37-4.47 (1H, m), 5.16-5.22 (1H, m) , 7.46-7.51 (2H, m) , 7.94 (1H, s) , 8.12 (1H, d), 8.27 (1H, d), 8.61 (1H, s) , 9.25 (1H, s) ; MS (ES+) 532.

Ejemplo 3: Ácido 4- ( (R) -5-ciclopentil-4 -etil-4 , 5-dihidro- [1,2,4] triazol [ 4 , 3 -f] pteridin-7-ilamino ) -3-clorobenzoico (1-3) . 1-3 Preparado usando el método B, presentado como una base libre. MS (ES+) 440; (ES") 438.

Ejemplo 4 Método C: 4- ( (R) - 5-ciclopent i 1 -4 -etil- 4, 5-dihidro- [1,2,4] triazol [4,3] pteridin-7-ilamino) -3-cloro -N-met ilbenzamida (1-4) 1-4 Se disolvió el ácido 4- ( (R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1,2, 4] triazol [4, 3 -f] pteridin-7-ilamino) -3-clorobenzoico (1-3) (27 mg) en DMF (0.4 mL) y se trató con carbonil-diimidazol (12 mg, 0.077 mmol) se la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 90 minutos. La solución se enfrió en un baño con hielo y se burbujeó gas de metilamina durante 2 minutos. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, se evaporó bajo presión reducida y se purificó por cromatografía para dar 4- ( (R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4, 3 -f] pteridin-7 -i lamino ) -3- cloro -N-metilbenzamida (15 mg) como un sólido incoloro. Presentada como una base libre. RMN^ (DMSO D6) 0.71 (3H, t), 1.37-2.05 (10H, m) , 2.80 (3H, s), 4.12-4.25 (1H, m) , 5.20-5.31 (1H, m) , 7.88 (1H, d) , 8.00 (1H, d) , 8.05 (1H, s), 8.50-8.55 (1H, m) , 8.60 (1H, s), 8.97 (1H, s amplio), 9.35 (1H, s); MS (ES+) 453, (ES") 451.

Ejemplo 5: 4- ( {R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4 ] triazol [ 4 , 3 ] pteridin-7-ilamino ) - , N, 3-trimetilbenzamida ( 1-5 ) 1-5 Método D: N,N, 3-trimetil-4-nitrobenzamida Se agitó ácido 3-metil-4-nitrobenzoico (3.0 g, 16.56 mmol) en DMF (30 raL) con carbonil-diimidazol (3.22 g, 1.2 eq) durante 90 minutos. La mezcla de reacción se enfrió en un baño con hielo, y se adicionó dimetilamina (2 M en THF, 25 mL, 3 eq) . La mezcla entonces se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. La mezcla se virtió sobre agua con hielo (200 mL) y se extrajo con EtOAc (x6) . Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y evaporaron. La titulación con éter seguida por filtración dio ?,?, 3-trimetil-4 -nitrobenzamida (2.6 g, sólido incoloro); MS (ES+) 209.

Método E: 4-amino-A/, N, 3-trimetilbenzamida La N,N, 3-trimetil-4-nitrobenzamida (0.6 g, 2.88 mmol) en metanol se hidrógeno usando aparato de H-cubo (1.2 mL/min, temperatura ambiente, presión atmosférica) . Después de 45 minutos, la reacción estuvo completa. La remoción del solvente in vacuo dio 4-amino-N,N, 3-trimetilbenzamida como un sólido incoloro (cuantitativo); MS (ES+) 179. 4- ( {R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4, 3] pteridin-7-ilamino ) -?,?, 3-trimetilbenzamida (1-5) 1-5 Preparada usando el método B, presentada como una base libre. RMN1H (DMSO D6) 0.69 (3H, t), 1.25-1.45 (4H, m) , 1.70-2.05 (6H, m) , 2.27 (3H, s) , 2.97 (6H, s) , 4.08-4.15 (1H, m) , 5.30-5.37 (1H, m) , 7.29 (1H, d) , 7.36 (1H, s) , 7.46 (1H, d) , 8.62 (1H, s), 9.33 (1H, s) , 9.75 (1H, s amplio); MS (ES") 445.

Ejemplo 6: 4- ( {R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [l,2,4]triazol[4,3] pteridin-7-ilamino) -N, 3-dimetilbenzamida (1-6) 1-6 N, 3-Dimetil-4-nitrobenzamida Preparada usando el método D. 4-amino-N, 3-dimetilbenzamida Preparada usando el método E, presentada como una base libre. 4- ( (R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1,2, 4] triazol [4,3] pteridin-7-ilamino) -N, 3-dimetilbenzamida (1-6) 1-6 Preparada usando el método B, presentada como una base libre.

RMN1H (DMSO D6) 0.68 (3H, t), 1.15-1.35 (4H, m) , 1.62-2.05 (6H, m) , 2.26 (3H, s), 2.78 (3H, s), 4.03-4.17 (1H, m) , 7.52 (1H, d) , 7.76 (1H, d) , 7.90 (1H, s), 8.52-8.57 (1H, m) , 8.74 (1H, s), 9.39 (1H, s), 10.13 (1H, s); MS (ES+) 433, (ES~) 431.

Ejemplo 7: 4 - ( (i¾)-5-ciclopentil-6-etil-5, 6-dihidroimidazol- [1,2] pteridin-3-ilamino ) -3-metoxi -N-met ilbenzamida (1-7) 1-7 Método F: (R) -2-cloro-8-ciclopentil-7-etil-7 , 8-dihidropteridin-6-amina La (R) -2-cloro-8-ciclopentil-7-etil-7 , 8-dihidropteridin-6 (5H) -ona (200 mg, 0.714 mmol) en P0C13 (6 mL) , se calentó a 100°C durante 4.5 horas. El solvente se removió in vacuo y se hizo en azeotropo dos veces con tolueno seco. El residuo se disolvió en CH2CI2 seco (1.5 mL) y se adicionó gota a gota a THF (5 mL) y en NH3 liquido (4.2 g) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla de reacción se virtió en agua con hielo, y se extrajo con EtOAc x 3. Los extractos orgánicos combinados se concentraron in vacuo para dar {R) -2-cloro-8-ciclopentil-7-etil-7 , 8-dihidropteridin-6-amina como un aceite café (181 mg) . MS (ES+) 280, (ES") 278.

Método G: {R) -3-cloro-5-ciclopentil-6-etil-5, 6-dihidroimidazo [ 1 , 2-f] pteridina La (R) -2-cloro-8-ciclopentil-7-etil-7, 8-dihidropteridin-6-amina (177 mg, 0.64 mmol) en MeOH (1.5 mL) se trató con cloroacetaldehido acuoso al 50 % (131 L, 1.3 eq) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 6 horas. Se adicionó una porción adicional de cloroacetaldehido acuoso al 50 % (400 µ?,, 3.0 eq) , y la mezcla de reacción se calentó a 68°C durante la noche. Se adicionaron NaHC03 (acuoso, saturado), y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron in MS (ES+) 304. 4 - ( (R) -5-ciclopentil-6-etil-5 , 6-dihidroimidazol- [1,2) pteridin-3-ilamino ) -3-metoxi -N-metilbenzamida (1-7) 1-7 Preparada usando el método B, presentada como una base libre. RMN1H (DMSO D6) 0.66 (3H, t), 1.55-2.13 (10H, m) , 2.79 (3H, d) , 3.94 (3H, s), 4.35-4.48 (1H, m) , 4.98-5.07 (1H, m) , 7.13 (1H, s), 7.45-7.53 (2H, m) , 7.79 (1H, s), 7.86 (1H, s), 8.25-8.38 (2H, m) , 8.45 (1H, s ) ; MS (ES+ ) 448, MS (ES") 446.

Ejemplo 8: (R) -4- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1,2, 4] triazol [4, 3-f] pteridin-7-ilamino) -A7-ciclopropil-3-met ilbenzamida (1-8) Preparada usando el método B, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.56-0.59 (2H, m) , 0.68-0.73 (5H, m) , 1.55-2.10 (10H, m) , 2.82 (1H, m) , 3.92 (3H, s), 4.42 (1H, m) , .21 (1H, m) , 7.46-7.48 (2H, m) , 7.95 (1H, s), 8.26 (1H, d) , 8.35 (1H, d) , 8.59 (1H, s); HPLC rt (min) : 8.91; MS (ES+) 475, (ES") 474.

Ejemplo 9: 4- ( (R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [ 1 , 2 , 4 ] triazol- [ 4 , 3-f] pteridin-7-ilamino ) -3-metoxi -??-tetrahidrofurano-3-il)benzamida (1-9) Preparada usando el método B, presentada como una base libre.

RMN1H DMSO D6 0.71 (3H, t), 1.55-2.20 (12H, m) , 3.60 (1H, dd) , 3.72 (1H, m) , 3.87 (2H, m) , 3.94 (3H, s), 4.40-4.53 (2H, m) , 5.22 (1H, m) , 7.51-7.54 (2H, m) , 7.96 (1H, s) , 8.30 (1H, m) , 8.42 (1H, d) , 8.60 (1H, s), 9.25 (1H, s); HPLC rt(min) : 8.63; MS(ES+) 505.

Ejemplo 10: (R) -N-ciclopentil-4- (5-ciclopentil-4-etil-4 , 5-dihidro [1,2, 4] triazol [4, 3 -f] pteridin-7-ilamino) -3 -metoxibenzamida ( 1-10 ) Preparada usando el método B, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.71 (3H, t), 1.48-1.65 (6H, m) , 1.67- 2.09 (12H, m) , 3.93 (3H, s), 4.21-4.26 (1H, m) , 4.42 (1H, quin) , 5.20-5.22 (1H, m) , 7.49-7.51 (2H, m) , 7.95 (1H, s), 8.16 (1H, d) , 8.29 (1H, d) , 8.59 (1H, s), 9.25 (1H, s) ; HPLC rt(min) : 9.76; MS (ES+) 503, (ES*) 501.

Ejemplo 11: (R) -4- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro [ 1 , 2 , 4] triazol [4,3 f] pteridin-7-ilamino) -W-ciclopropilbenzamida (1-11) Preparada usando el método B, presentada como una base libre. RMNXH DMSO D6 0.53-0.57 (2H, m) , 0.63-0.73 (5H, m) , 1.59-1.99 (9H, m) , 2.06-2.15 (1H, m) , 2.79-2.83 (1H, m) , 4.48-4.55 (1H, m) , 5.21 (1H, dd) , 7.73-7.80 (4H, m) , 8.26 (1H, d) , 8.60 (1H, s), 9.25 (1H, s) , 9.65 (1H, s) ; HPLC rt(min) : 8.36, MS (ES+) 445, (ES") 443.

E emplo 12: (4 - ( (R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [ 1 , 2 , ] triazol [4,3 f] pteridin-7 -i lamino ) -3-metoxifenil ) ( (S) - 3-fluoropirrolidin 1-il ) metanona (1-12) Preparada usando el método B, presentada como una base libre. RMN^ DMSO D6 0.70 (3H, t), 1.50-1.62 (2H, m) , 1.69-2.23 (10H, m) , 3.53-3.84 (4H, m) , 3.90 (3H, s), 4.38 (1H, t), 5.20 (1H, dd) , 5.40 (1H, dd) , 7.15 (1H, d) , 7.20 (1H, d) , 7.99 (1H, s), 8.20 (1H, s), 8.57 (1H, s), 9.25 (1H, s) ; HPLC rt(min) : 8.94; MS (ES+) 507, (ES") 505.

Ejemplo 13: (R) -4- (5-ciclopentil-4-etil-l-metil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4, 3-f] pteridin-7-ilamino) -W-ciclopropil-3-metoxibenzamida (1-13) Preparada usando el método B, presentada como una base libre. RMNXH DMSO D6 0.55-0.60 (2H, m) , 0.69-0.78 (5H, m) , 1.55-2.10 (10H, m) , 2.68 (3H, s), 2.82 (1H, ra), 3.93 (3H, s), 4.48 (1H, quint), 5.01 (1H, dd) , 7.46-7.49 (2H, ra), 7.94 (1H, s) 8.30 (1H, d) , 8.35 (1H, d) , 8.45 (1H, s); HPLC rt(min) : 9.12; MS (ES+) 490, (ES") 488.

Ejemplo 14: (R) -4- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4 f] pteridin-7-ilamino) -N-ciclopropil-3 -fluorobenzamida (I Preparada usando el método C, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.55-0.59 (2H, m) , 0.67-0.73 (5H, m) , 1.46-1.95 (10H, m) , 2.84 (1H, m) , 4.30 (1H, quint) , 5.18 (1H, dd) , 7.64-7.70 (2H, m) , 7.91 (1H, t), 8.41 (1H, d) , 8.55 (1H, s), 9.02 (1H, s) , 9.24 (1H, s); HPLC rt (min) : 8.58; MS (ES+) 464, (ES") 462.

Ejemplo 15: {R) -5- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro [ 1 , 2 , 4 ] triazol [ 4 , 3 -f] pteridin-7-ilamino) -W-ciclopropilt iofeno-2-carboxamida (1-15) Preparada usando el método B, presentada como una base libre. RMN^ DIVISO D6 0.48-0.54 (2H, m) , 0.63-0.74 (5H, m) , 1.65-1.95 (10H, m) , 2.74 (1H, m) , 4.83 (1H, s amplio), 5.24 (1H, dd) , 7.58 (1H, d) , 7.47 (1H, d) , 8.14 (1H, d) , 8.63 (1H, s), 9.24 (1H, s) , 10.83 (1H, s amplio) : HPLC rt(min) : 8.17, MS (ES+) 452, (ES") 450.

Ejemplo 16: (R) - - (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro [ 1 , 2 , 4 ] triazol [ 4 , 3 f] pteridin-7-ilamino) -3 -fluoro-N-metilbenzamida (1-16) Preparada usando el método C, presentada como una base libre.

Método H: Formación de mexilato. La base libre (38.2 mg, 0.088 mmol) se disolvió en metanol caliente (3 mi) y se trató con ácido metanosulfónico (5.68 ]iL, 0.088 mmol), se evaporó bajo presión reducida y se volvió en azeotropo tres veces con éter dietilico. El residuo se trituró con éter y se filtró para dar la sal de metanosulfonato (50.4 mg) . RMN^ D SO D6 0.69 (3H, t), 1.35-1.55 (4H, m) , 1.70-2.0 (6H, m) , 2.33 (3H, s), 2.79 (3H, d) , 4.24 (1H, quint), 5.25 (1H, dd) , 7.69-7.73 (2H, m) , 7.84 (1H, t), 8.48 (1H, q) , 8.57 (1H, s), 9.28 (1H, s) , 9.39 (1H, s); HPLC rt (min) : 8.07; MS (ES+) 438, (ES") 436.

Ejemplo 17: (R) - 4- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [l,2,4]triazol[4,3-f] pteridin-7 -i lamino) -N- (3, 3-difluorociclobutil ) -3-metoxibenzamida (1-17) Preparada usando el método B, presentada como una sal de metilato (método H) . RMN1H DMSO D6 0.70 (3H, t), 1.42-1.70 (4H, m) , 1.75-2.04 (6H, m) , 233 (3H, s) , 2.70-2.85 (2H, m) , 2.90-3.20 (2H, m) , 3.92 (3H, s), 4.32 (2H, m) , 5.33 (1H, dd) , 7.52-7.56 (2H, m) , 7.99 (1H, d) , 8.59 (1H, s) , 8.78 (1H, d) , 8.98 (1H, s amplio), 9.30 (1H, s); HPLC rt(min) : 9.35; MS (ES+) 526, (ES") 524.

Ejemplo 18: (R) -4- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4,3-f] pteridin-7-ilamino) -ZV-etil-3-metoxibenzamida (1-18) Preparada usando el método B, presenta como una sal de metilato (método H) . RMN1H DMSO D6 0.70 (3H, t), 1.14 (3H, t) , 1.45-1.67 (4H, m) , 1.77-2.30 (6H, m) , 2.31 (3H, s), 3.31 (2H, quint), 3.91 (3H, s), 4.32 (1H, quint), 5.32 (1H, dd) , 7.52 (1H, dd) , 7.56 (1H, d) , 7.98 (1H, br d) , 8.47 (1H, t) , 8.58 (1H, s), 9.29 (1H, s); HPLC rt (min) : 8.94; MS (ES+) 463, (ES") 461.

Ejemplo 19: {R) -4- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro [1,2, 4] triazol [4, 3-f] pteridin-7-ilamino) - -etil-3 -fluorobenzamida (1-19) Preparada usando el método C, presentada como una sal de mesilato (método H) . R K^H DMSO D6 0.70 (3H, t) , 1.13 (3H, t), 1.38-1.55 (4H, m) , 1.75-2.00 (6H, m) , 2.32 (3H, s), 3.29 (2H, quint), 4.23 (1H,. quint), 5.27 (1H, dd) , 7.70-7.77 (2H, m) , 7.83 (1H, t), 8.51 (1H, t), 8.57 (1H, s), 9.29 (1H, s), 9.45 (1H, s amplio); HPLC rt (min) : 8.64; MS (ES+) 452, (ES") 450. ' Ejemplo 20: (R) -5-ciclopentil-4-etil-N- (2-fluoro-4- (trifluorometil ) -4, 5-dihidro [1, 2, ] triazol [4 , 3-f] pteridin-7 -amina (1-20) Preparada usando el método B, presentada como una sal de mesilato (método H) . RMN1H DMSO D6 0.69 (3H, m) , 1.35-1.45 (4H, m) , 1.73-2.00 (6H, m) , 2.38 (3H, s), 4.16 (1H, quint), 5.31 (1H, dd) , 7.63 (1H, d) , 7.81 (1H, d) , 7.91 (1H, t), 8.62 (1H, s), 9.34 (1H, s), 9.85 (1H, s amplio); HPLC rt (min) : 10.44; MS (ES+) 448, (ES") 446.

Ejemplo 21: Método I: (R) -4- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4 ] triazol [ 4 , 3 f] pteridin-7-ilamino ) -?/-meti 1-3- ( trifluorometil ) benzamida 21) Una mezcla de (i?) -7-cloro-5-ciclopentil-4-etil-4 , 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4, 3 -f] pteridina (100 mg, 0.329 mmol) , 4-amino-3-trifluorometil -N-metilbenzamida , acetato de paladio (6 mg) , carbonato de cesio (214 mg, 0.658 mmol) y xantphos (20 mg) en dioxano (4 mi) se agitó- a 150°C en un microondas durante 1 hora. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución acuosa de carbonato ácido de sodio y, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con metanol al 0-12 %/acetato de etilo para dar 4 — ( ( J¾) —5— ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro [ 1 , 2 , 4] triazol [4, 3-f] pteridina-7-ilamino) -3-trifluorometil -W-met ilbenzamida como un vidrio incoloro (70 mg, 46 %) . Presentada como una sal de mesilato (método H) . RMN^ DMSO D6 0.67 (3H, t), 0.96-1.35 (4H, m) , 1.60- 2.00 (6H, m) , 2.34 (3H, s), 2.83 (3H, d) , 3.90-4.03 (1H, m) , 7.82 (1H, d) , 8.19 (1H, d) , 8.26 (1H, s), 8.57 (1H, s), 8.75 (1H, d) , 9.30 (1H, s), 9.46-9.66 (1H, s amplio) ; HPLC rt(min) : 8.94; MS (ES+) 487.

Ejemplo 22: (R) -5-ciclopentil-4-etil-N-fenil-4, 5-dihidro [1,2,4] triazol [4 , 3-j] pteridin-7-amina (1-22) Preparada usando el método B, presentada como una base libre. R N1H DMSO D6 0.69-0.73 (3H, m) , 1.59 (2H, m) , 1.66-1.91 (7H, m) , 2.06 (1H, m) , 4.48 (1H, m) , 5.18 (1H, m) , 6.94 (1H, m) , 7.25-7.28 (2H, m) , 7.69-7.71 (2H, m) , 8.55 (1H, s), 9.23 (1H, s), 9.37 (1H, s); HPLC rt (min) : 9.75; MS (ES+) 362, (ES") 360.

Ejemplo 23: (R) -5-ciclopentil-4-etil -N- (piridin-4 -il) -4, 5-dihidro-[1,2,4] triazol [4, 3-f] pteridin-7 -amina (1-23) Preparada usando el método I, presentada como una base libre. R N1H DIVISO D6 0.70-0.74 (3H, m) , 1.60-1.63 (2H, m) , 1.72-1.93 (7H, m) , 2.11 (1H, m) , 4.54 (1H, m) , 5.23 (1H, m) , 7.72 (2H, d), 8.33 (2H, d) , 8.64 (1H, s), 9.27 (1H, s) , 9.83 (1H, s); HPLC rt (min) : 8.70; MS (ES+) 363, (ES") 361.

Ejemplo 24: (R) - 4- ( 5-ciclopenti 1-4 -meti 1-4 , 5-dihidro- [1,2,4] triazolo [4,3 -f] pteridin-7-ilamino) -3- (difluorometil ) -N-met i lbenzamida (1-24 Preparada usando el método I, presentada como una sal de mesilato (método H) . RMN1H DMSO D6 0.69 (3H, t) , 1.17-1.34 (4H, m) , 1.71-1.89 (6H, m) , 2.33 (3H, s), 2.81 (3H, d) , 4.07-4.11 (1H, m) , .27-5.29 (1H, m) , 7.25 (1H, t), 7.70 (1H, d) , 8.04 (1H, d) , 8.15 (1H, s), 8.59 (1H, s), 8.63-8.65 (1H, m) , 9.31 (1H, s), 9.60-9.64 (1H, m) ; HPLC rt (min) : 8.28; MS (ES+) 469, (ES~) 467.

Ejemplo 25: (R) -5-ciclopentil-4-etil -N- (piridin-3-il)-4, 5-dihidro-[1, 2, 4] triazolo [4, 3 -f] pteridin-7 -amina (1-25) Preparado usando el método I, presentada como una base libre. R N^ DMSO d6 0.69-0.73 (3H, m) , 1.57-1.58 (2H, m) , 1.71-1.90 (7H, m) , 2.07 (1H, m) , 4.48 (1H, m) , 5.20 (1H, m) , 7.30 (1H, m) , 8.113-8.15 (2H, m) , 8.58 (1H, m) , 8.87 (1H, d) , 9.25 (1H, s), 9.55 (1H, s); HPLC rt (min) : 8.50; MS (ES+) 363, (ES") 361.

Ejemplo 26: Método J: (R) -5-ciclopentil -N-ciclopropil-4-etil-4 , 5-dihidro [l,2,4]triazolo[4,3 -f] pteridin-7 -amina (1-26) Se calentaron (.R) -7-cloro-5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [ 1 , 2 , 4 ] triazol [ 4 , 3 -f] pteridina (70 mg, 0.23 mmol), ciclopropilamina (0.5 mi, 7.18 mmol), DIPEA (0.16 mi, 0.918 mmol) en nBuOH (2 mL) en un tubo sellado en el microondas a 140°C durante 90 minutos. La mezcla de reacción se concentró in vacuo, y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa [columna Waters Sunfire C18 10 M, 100 Á, gradiente 10 %-95 % de B (solvente A: TFA al 0.05 % en agua, solvente B: CH3CN) durante 16 minutos a 25 mL/min] para dar el compuesto del titulo como un polvo blanquecino. La base libre se generó usando una resina de bicarbonato, y se secó por congelación para dar el compuesto del titulo como un sólido incoloro (25.6 mg, 34 % rendimiento) Presentada como una base libre. R Í^H DMSO D6 0.46 (2H, m) , 0.62-0.63 (2H, m) , 0.67-0.71 (3H, m) , 1.49 (2H, m) , 1.60-2.00 (8H, m) , 2.64 (1H, m) , 4.22 (1H, s amplio), 5.11 (1H, m) , 7.17 (1H, m) , 8.38 (1H, s), 9.16 (1H, s); HPLC rt (min) : 9.15; MS (ES+) 326, (ES") 324.

Ejemplo 27: Método K: (R) -5-ciclopentil-4-etil-4 , 5-dihidro- [1, 2, 4 ] triazol [ , 3 -f] pteridin-7-amina (1-27) Una solución de (R) -7-cloro-5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4, 3 -f] pteridina (500 mg, 1.64 mmol) en hidróxido de amonio (10 mL) se calentó bajo irradiación de microondas a 140°C durante 30 minutos. El solvente se removió bajo presión reducida y se adicionó agua fría (5 mL) . El sólido café claro resultante se filtró a través de vacio y se lavó con agua fría para dar el compuesto del titulo (170 mg, 36 % de rendimiento) . Presentada como una base libre. RMNXH DMSO D6 0.69 (3H, t) , 1.48-2.01 (10H, m) , 4.40 (1H, dt), 5.06 (1H, dd) , 6.40 (2H, s), 8.35 (1H, s), 9.15 (1H, s); HPLC rt (min) : 7.43; MS (ES+) 286.

Ejemplo 28: Método L: (R) -5-ciclopentil-4-etil- - (piridin-3-il ) -4,5-dihidro- [1,2,4] triazol [4,3-f"] pteridin-7 -amina (1-28 ) A (R) -5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [ 4 , 3 -f] pteridin-7-amina (50 mg, 0.175 mmol) en DMF (1 mi) a 0°C se adicionó hidruro de sodio (60 % en aceite mineral, 7.7 mg, 0.193 mmol) . La mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos, luego se adicionó cloroformiato de metilo (13.6 iL, 0.175 mmol) . La reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 18 horas. Se adicionó cloruro de amonio (5 mi, solución acuosa saturada) y se extrajo con EtOAc (3 x 10 mi) . Las capas orgánicas combinadas se levaron con salmuera (10 mL) , se secaron sobre MgS04, se filtraron y el solvente se removió bajo vacio. El producto crudo se purificó por HPLC preparativa de fase invertida [columna Waters Sunfire C18, 10 M, 100 Á, gradiente 10 %-95 % de B (solvente A: TFA al 0.05 % en agua; solvente B: CH3CN) durante 16 minutos a 25 mL/min] para dar el compuesto del titulo como un polvo blanquecino (25 mg, 31 %) . Presentada como una sal de ácido trifluoroacético . RMN1H D SO D6 0.69 (3H, t), 1.47-1.63 (2H, m) , 1.78-2.18 (8H, m) , 3.70 (3H, s), 4.28 (1H, dt) , 5.30 (1H, dd) , 8.58 (1H, s), 9.34 (1H, s), 10.69 (1H, s amplio); HPLC rt(min) : 7.62; MS (ES+) 344, (ES") 342.

Ejemplo 29: (R) -4- (5-ciclobutil-4-etil-4, 5-dihidro- [ 1 , 2 , 4 ] triazol [4, 3-f] pteridin-7-ilamino) -3-metoxi -W-met ilbenzamida (1-29) Preparado usando el método B, presentada como una sal de mesilato (método H) . RMN1H DMSO D6 0.72 (3H, t), 1.63-1.87 (4H, m) , 2.10- 2.50 (4H, m) , 2.31 (3H, s), 2.80 (3H, d) , 3.92 (3H, s), 4.47 (1H, quint), 5.32 (1H, dd) , 7.50-7.55 (2H, m) , 8.11 (1H, br d) , 8.43 (1H, br q) , 8.59 (1H, s), 8.82 (1H, s amplio), 9.30 (1H, s); HPLC rt(min) : 8.32; MS (ES+) 435, (ES") 433.

Ejemplo 30: {R) -4- (5-ciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [4,3- f] pteridin-7 -i lamino) -3- (metoximetil ) - -met ilbenzamida ( 1-30 ) Preparada usando el método I, presentada como una sal de mesilato (método H) . RMN^ DIVISO D6 0.69 (3H, t), 1.31-1.50 (4H, m) , 1.72-2.03 (6H, m) , 2.33 (3H, s), 2.79 (3H, d) , 3.32 (3H, s), 4.09-4.20 (1H, m) , 4.52 (2H, s), 5.28-5.35 (1H, m) , 7.80-7.87 (2H, m) , 7.90 (1H, s), 8.41-8.49 (1H, m) , 8.58 (1H, s), 9.20-9.35 (1H, s amplio), 9.30 (1H, s); HPLC rt (min) ; 8.39; MS (ES+) 463, (ES") 461.

Ejemplo 31: (R) -N-bencil-5-ciclopentil-4-etil-4 ,5-dihidro-[l,2,4]triazol [4 , 3-f] pteridin-7-amina (1-31) Preparada usando el método J, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.65-0.69 (3H, m) , 1.48 (2H, m) , 1.64-1-8 (8H, m) , 4.10 (1H, m) , 4.45 (2H, m) , 5.07 (1H, m) , 7.20 (1H, m) , 7.28 (4H, m) , 7.57 (1H, s amplio), 8.38 (1H, s), 9.14 (1H, s) ; HPLC rt (min) : 9.77; MS (ES+) 376, (ES") 374.

Ejemplo 32: (J?) -5-ciclopentil-4-etil-N- (4 - ( 4 -metilpiperidin-l-il ) fenil) - 4, 5-dihidro- [1,2, 4] triazol [4, 3-f] pteridin-7 -amina (1-32) Preparada usando el método I, presentada como una base libre. RMN1!-! DMSO D6 0.70-0.72 (3H, m) , 1.56 (2H, m) , 1.74-2.02 (8H, m) , 2.23 (3H, s), 2.50 (4H, m) , 3.06 (4H, m) , 4.43 (1H, m) , 5.15 (1H, m) , 6.86 (2H, d) , 7.50 (2H, d) , 8.49 (1H, s), 9.10 (1H, s), 9.20 (1H, s) ; HPLC rt (min) : 9.02; MS (ES+) 460, (ES") 458.

Ejemplo 33: {R) -5-ciclopentil-N- (4- (difluorometoxi ) fenil) -4-etil-4, 5-dihidro-[l,2,4]triazol[4,3-f"] pteridin-7 -amina ( 1-33 ) Preparada usando el método I, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.75 (3H, m) , 1.59 (2H, m) , 1.76-1.89 (8H, m) , 2.07 (1H, m) , 4.48 (1H, m) , 5.18 (1H, m) , 7.11 (2H, 7.72 (2H, d) , 8.55 (1H, s), 9.23 (1H, s), 9.44 (1H, s), HPLC rt(min) : 9.70; MS (ES+) 428, (ES") 426.

Ejemplo 34: (R) -5-ciclopentil-4-etil -N- ( 4-morfolinofenil ) -4 , 5-dihidro-[l,2,4]triazol[4,3-f~]pteridin-7-amina (1-34) .

Preparada usando el método I, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.69-0.72 (3H, m) , 1.57 (2H, m) , 1.71-1.89 (7H, m) , 2.00 (1H, m) , 2.54 (4H, m) , ' 3.72-3.75 (4H, m) , 4.43 (1H, m) , 5.16 (1H, m) , 6.87 (2H, d) , 7.52 (2H, d) , 8.50 (1H, s), 9.12 (1H, s), 9.21 (1H, s) ; HPLC rt (min) : 9.12; MS (ES+) 447, (ES") 445.

Ejemplo 35: (R) -5-ciclopentil-4-etil-N- (4-fluorofenil) -4, 5-dihidro- [l,2,4]triazolo[4,3 -f] pteridin-7-amina ( 1-35 ) Preparada usando el método I, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.69-0.72 (3H, m) , 1.60 (2H, m) , 1.73-1.90 (7H, m) , 2.06 (1H, m) , 4.46 (1H, m) , 5.19 (1H, m) , 7.09 (2H, m) , 7.67-7.70 (2H, m) , 8.54 (1H, s), 9.23 (1H, s), 9.38 (1H, s); HPLC rt (min) : 9.78; MS (ES+) 380, (ES") 378.

Ejemplo 36: Método M: (R) -5-ciclopentil-4-etil -N-metil-4 , 5-dihidro- [1, 2, 4] triazol [ 4 , 3 -f] pteridin-7-amina (1-36) En un frasco que contiene {R) -7-cloro-5-ciclopentil-4-etil-4 , 5-dihidro- [ 1 , 2 , 4 ] triazol [ 4 , 3 -f] pteridina (70 mg, 0.23 mmol) se adicionó una solución de metilamina en metanol (2 mL, solución 2M) . El recipiente se selló luego se calentó a 50°C durante 18 horas. Después del enfriamiento, el solvente se removió bajo presión reducida y el producto crudo se purificó por HPLC preparativa de fase inversa [columna Waters Sunfire C18, 10 M, 100Á, gradiente 10 %-95 % de B (solvente A: TFA al 0.05 % en agua; solvente B: CH3CN) durante 16 minutos a 25 mL/min] . La base libre se obtuvo al hacer pasar la sal de TFA en acetonit rilo/agua a través de un cartucho de carbonato para dar el compuesto del titulo como un polvo blanco (42 mg, 61 % de rendimiento) . Presentada como una base libre. RMN1H DIVISO D6 0.68 (3H, t), 1.47-2.03 (10H, m) , 2.77 (3H, d) , 4.24-4.32 (1H, m) , 5.09 (1H, d) , 6.86 (1H, bs), 8.38 (1H, s), 9.15 (1H, s); HPLC rt(min) : 8.57; MS (ES+) 300, (ES") 298.

Ejemplo 37 (R) -5-ciclopentil-iV, 4-dietil-4, 5-dihidro- [ 1 , 2 , 4] triazol [4,3-f] pteridin-7-amina (1-37) Preparada usando el método M, presentada como una base libre. RMI^H DMSO D6 0.69 (3H, t), 1.10 (3H, t) , 1.47-1.99 (10H, m) , 3.26 (2H, dt), 4.27 (1H, s amplio ), 5.09 (1H, d) , 6.94 (1H, s amplio), 8.37 (1H, s), 9.15 (1H, s) ; HPLC rt(min) : 9.14; MS (ES+) 314, (ES") 312.

Ejemplo 38: (R) -N, 5-diciclopentil-4-etil-4, 5-dihidro- [1,2, 4] triazol [4,3-f] pteridin-7-amina (1-38) Preparada usando el método J, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.69 (3H, t), 1.43-2.00 (18H, m) , 4.07-4.17 (1H, m) , 4.17-4.34 (1H, m) , 5.08 (1H, bs), 6.98 (1H, bs), 8.36 (1H, s), 9.14 (1H, s) ; HPLC rt(min) : 10.2; MS (ES+) 354, (ES") 352. Ejemplo 39: (R) -N-(4- (lH-pirazol-l-il) fenil) -5-ciclopentil-4-etil-4 , 5-dihidro- [1,2,4] triazol [4, 3 -f] pteridin-7 -amina (1-39) Preparada usando el método I, presentada como una sal de ácido trifluoroacético . RMIN^H DIVISO D6 0.70 (3H, m) , 1.58-1.59 (2H, m) , 1.75- 2.07 (7H, m) , 2.33 (1H, m) , 4.48 (1H, m) , 5.22 (1H, m) , 6.52 (1H, s), 7.71-7.81 (5H, m) , 8.42 (1H, m) , 8.58 (1H, s), 9.26 (1H, s), 9.64 (1H, s); HPLC rt(min) : 9.32; MS (ES+) 4.28, (ES" ) 426.

Ejemplo 40: (R) -5-ciclopentil- -etil -N- ( trifluoromet il ) piridin-3-il) -4, 5-dihidro- [l,2,4]triazolo[4,3 -f] pteridin-7 -amina (1-40) Preparada usando el método I, presentada como una base libre. RMN1H DMSO D6 0.70 (3H, m) , 0.70-0.74 (3H, m) , 1.60- 1.63 (2H, m) , 1.71-1.92 (7H, m) , 2.08 (1H, m) , 4.51 (1H, m) , 5.22 (1H, m) , 7.82 (1H, d) , 8.42 (1H, d) , 8.64 (1H, s), 9.03 (1H, m) , 9.27 (1H, s), 9.98 (1H, s); HPLC rt (min) : 9.70; MS (ES+) 431, (ES~) 429.

Ejemplo 41: {R) -5-ciclopent il-4-etil -N- ( 6- ( 4 -metilpiperazin-l-il ) piridin-3-il) -4, 5-dihidro- [l,2,4]triazol[4,3 -f] pteridin-7-amina (1-41) Preparada usando el método I, presentada como una base libre. R 1H DIVISO D6 0.68-0.72 (3H, m) , 1.53 (2H, m) , 1.69- 1.97 (8H, m) , 2.23 (3H, s) , 2.42 (4H, m) , 3.40 (4H, m) , 4.35 (1H, m) , 5.14 (1H, m) , 6.80 (1H, d) , 7.79 (1H, m) , 8.32 (1H, m) , 8.48 (1H, s), 9.04 (1H, s), 9.20 (1H, s) ; HPLC rt (min) : 8.70; MS (ES+) 461, (ES") 459.

Ejemplo 42: (R) -5-ciclopentil-4-etil-N- (4- (pirrolidin-l-il ) fenil) -4,5-dihidro-[l,2,4]triazol[4,3-f]pteridin-7-amina (1-42) .

Preparada usando el método I, presentada como una base libre. RMN1!-! DMSO D6 0.69-0.72 (3H, m) , 1.54 (2H, m) , 1.60-1.81 (8H, m) , 1.89-1.94 (4H, m) , 3.19 (4H, m) , 4.38 (1H, m) , 5.13 (1H, m) , 6.47-6.52 (2H, m) , 7.42 (2H, d) , 8.46 (1H, s), 8.91 (1H, s), 9.19 (1H, s); HPLC rt (min) : 10.44; MS (ES+ ) 431, (ES") 429.

Ejemplo 43: Ensayo de PLK1 Los compuestos de la presente invención se pueden evaluar como inhibidores de la cinasa PLK humana usando los siguientes ensayos.

Ensayo de Inhibición de Plkl: Se seleccionaron compuestos para su capacidad inhibir Plkl usando un ensayo de incorporación de fosfato radioactivo. Los ensayos se llevaron a cabo en una mezcla de HEPES 25mM (pH 7.5), MgCl2 lOmM, y DTT lm . Las concentraciones finales de sustrato fueron 50µ? [?-33?]??? (136mCi 33P ATP/mmol ATP, Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals) y péptido 10 µ (SAM68, proteina ?332-443) . Los ensayos se llevaron a cabo a 25°C en la presencia de Plkl 15nM (A20-K338). Una solución concentrada de amortiguador de ensayo se preparó, conteniendo todos los reactivos listados anteriormente, con la excepción de ATP y el compuesto de prueba de interés. Se colocaron 30 L de la solución concentrada en una placa de 96 concavidades seguido por la adición de 2 L de solución concentrada de DMSO que contiene diluciones en serie del compuesto de prueba (iniciando típicamente desde una concentración final de 10 µ con diluciones en serie de dos veces) en duplicado (concentración final de DMSO, 5 %). La placa se pre-incubó durante 10 minutos a 25°C y la reacción inició por la adición de 8 pL de [?-33?]??? (concentración final 50 µ?) . La reacción se detuvo después de 60 minutos por la adición de 100 pL de ácido fosfórico 0.14M. Se pre-trató una placa de 96 concavidades (Millipore, Cat no. MAPHN0B50) de filtro de fosfocelulosa de multitamiz con 100 pL de ácido fosfórico 0.2 M antes de la adición de 125 pL de la mezcla detenida de ensayo. La placa se lavó con 4 x 200 pL de ácido fosfórico 0.2M. Después del secado, se adicionaron 100 del cóctel de escintilación liquido "SuperMix" Optiphase (Perkin Elmer) a la concavidad antes del conteo de escintilación (Contador de Escintilación Liquida 1450 Microbeta, Wallac) . Después de remover los valores medios de fondo para todos los puntos de datos, se calcularon los datos de .i(app) a partir de un análisis de regresión no lineal de los datos de velocidad iniciales usando el paquete de software Prism (GraphPad Prism versión 3.0cx for Macintosh, GraphPad Software, San Diego California, EUA) .

Ensayo de Inhibición de Plkl Se seleccionaron compuestos para su capacidad para inhibir Plkl usando un ensayo de incorporación de fosfato radioactivo. Los ensayos se llevaron a cabo en una mezcla de HEPES 25mM (pH 7.5), MgCl2 lOmM, BSA al 0.1 %, y DTT 2mM. Las concentraciones finales de sustrato fueron 150 µ? (350 µ? para determinar valores de < InM) [?-33?]??? (115mCi 33P ATP/mmol ATP, Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals) y 300 µ? (450 µ? para determinar valores de <lnM) péptido ( KKKlSDELMDATFADQEAK) SEQ. ID NO. 1. Los ensayos se llevaron a cabo a 25°C en la presencia de Plkl 4nM (InM para determinar valores de <lnM) . Se preparó una solución concentrada de amortiguador de ensayo que contiene todos los reactivos listados anteriormente, con la excepción de ATP y el compuesto de prueba de interés. Se colocaron 30 µ?, de la solución concentrada en una placa de 96 concavidades seguido por la adición de 2 µ?, de solución concentrada de DMSO que contiene diluciones en serie del compuesto de prueba (iniciando típicamente desde una concentración final de 10 µ? con diluciones en serie de 2 veces) en duplicado (concentración final de DMSO 5 %) . La placa se pre-incubó durante 10 minutos a 25°C y la reacción inició por la adición de 8 yL de [?-33?]??? (concentración final 150 µ? (350 µ? para determinar valores de <lnM) ) ) . La reacción se detuvo después de 90 minutos (240 minutos para determinar valores de <lnM) por la adición de 100 de ácido fosfórico 0.14 M. Se pre-trató una placa de 96 concavidades (Millipore, Cat no. MAPHN0B50) de filtro de fosfocelulosa de multitamiz con 100 µ?, de ácido fosfórico 0.2 M antes de la adición de 125 \i~L de la mezcla detenida de ensayo. La placa se lavó con 4 x 200 µL de ácido fosfórico 0.2 M. Después del secado, se adicionaron 100 µ? de cóctel de escint ilación líquido "SuperMix" Optiphase (Perkin Elmer) a la concavidad antes del conteo de escintilación (Contador de Escintilación Líquida 1450 Microbeta, Wallac) . Después de remover los valores medios de fondo para todos los puntos de datos, se calcularon los datos de K.i(app) a partir de un análisis de regresión no lineal de los datos de velocidad iniciales usando el paquete de software Prism (GraphPad Prism versión 3.0cx for Macintosh, GraphPad Software, San Diego California, EUA) . En general, los compuestos de la invención son efectivos para la inhibición de Plkl. Los siguientes compuestos mostraron Ki por abajo de 10 nM en el ensayo de incorporación radioactiva: 1-1, 1-2, 1-4, 1-5, 1-6, 1-7, 1-8, 1-9, 1-10, 1-11, 1-12, 1-13, 1-14, 1-15, 1-16, 1-17, 1-18, 1-19, 1-20, 1-21, 1-22, 1-23, 1-24, 1-25, 1-29, 1-30, 1-32, I-33, 1-34, 1-35, 1-39, 1-41, 1-42. Los siguientes compuestos mostraron Ki entre 10 nM y 100 nM en el ensayo de incorporación radioactiva: 1-31, 1-40. Los siguientes compuestos mostraron Ki entres 100 nM y 4 µ? en el ensayo de incorporación radioactiva: 1-26, 1-27, 1-28, 1-36, 1-37, I-38.

Ensayos de Inhibición de Plk2 Se seleccionaron compuestos para su capacidad para inhibir Plk2 usando un ensayo de incorporación de fosfato radioactivo. Se llevaron a cabo los ensayos en una mezcla de HEPES 25mM (pH 7.5), MgCl2 lOmM, BSA al 0.1 %, y DTT 2mM. Las concentraciones finales de sustrato fueron 200 µ? [?-33?]??? (57mCi 33P ATP/mmol ATP, Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals) y péptido 300 µ? (KKKISDELMDATFADQEAK) SEQ. ID NO. 2. Se llevaron a cabo los ensayos a cabo a 25°C en la presencia de Plk2 25nM. Se preparó una solución concentrada de amortiguador de ensayo que contiene todos los reactivos listados anteriormente, con la excepción de ATP y el compuesto de prueba de interés. Se colocaron 30 µ?, de la solución concentrada en una placa de 96 concavidades seguido por la adición de 2 de solución concentrada de DMSO que contiene diluciones en serie del compuesto de prueba (típicamente iniciando desde una concentración final de 10 µ? con diluciones en serie de 2 veces) en duplicado (concentración final de DMSO 5 %) . La placa se pre-incubó durante 10 minutos a 25°C y la reacción inició por la adición de 8 yL de [?-33?]??? (concentración final 200µ?) . La reacción se detuvo después de 90 minutos por la adición de 100 µL de ácido fosfórico 0.14M. Se pre-trató una placa de 96 concavidades (Millipore, Cat no. MAPHN0B50) de filtro de fosfocelulosa de multitamiz con 100 L de ácido fosfórico 0.2 M antes de la adición de 125 \i~L de la mezcla detenida de ensayo. La placa se lavó con 4 x 200 µL de ácido fosfórico 0.2M. Después del secado, se adicionaron 100 pL del cóctel de escintilación líquido "SuperMix" Optiphase (Perkin Elmer) a la concavidad antes del conteo de escintilación (Contador de Escintilación Líquida 1450 Microbeta, Wallac) . Después de remover los valores medios de fondo para todos los puntos de datos, se calcularon los datos de K.i(app) a partir del análisis de regresión no lineal de los datos iniciales de velocidad usando el paquete de software Prism (GraphPad Prism versión 3.0cx for Macintosh, GraphPad Software, San Diego California, EUA) .

Ensayo de Inhibición de Plk3 Se seleccionaron compuestos para su capacidad para inhibir Plk3 usando un ensayo de incorporación de fosfato radioactivo. Se llevaron a cabo los ensayos en una mezcla de HEPES 25mM (pH 7.5), MgCl2 lOmM, y DTT lmM. Las concentraciones finales de sustrato fueron [?-33?]??? 75µ? (60mCi 33P ATP/mmol ATP, Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals) y péptido ??µ? ( SAM68 , proteina ?332-443) . Se llevaron a cabo los ensayos a cabo a 25°C en la presencia de Plk3 5nM (S38-A340). Se preparó una solución concentrada de amortiguador de ensayo que contiene todos los reactivos listados anteriormente, con la excepción de ATP y el compuesto de prueba de interés. Se colocaron 30 µ?? de la solución concentrada en una placa de 96 concavidades seguido por la adición de 2 pL de solución concentrada de DMSO que contiene diluciones en serie del compuesto de prueba (típicamente iniciando desde una concentración final de 10 µ? con diluciones en serie de 2 veces) en duplicado (concentración final de DMSO 5 %) . La placa se pre-incubó durante 10 minutos a 25°C y la reacción inició por la adición de 8 µ? de [?-33?]??? (concentración final 75 µ?) . La reacción se detuvo después de 60 minutos por la adición de 100 \iL de ácido fosfórico 0.14M. Se pre-trató una placa de 96 concavidades (Millipore, Cat no. MAPHN0B50) de filtro de fosfocelulosa de multitamiz con 100 L de ácido fosfórico 0.2 M antes de la adición de 125 v~L de la mezcla detenida de ensayo. La placa se lavó con 4 x 200 L de ácido fosfórico 0.2M. Después del secado, se adicionaron 100 L de cóctel de escintilacion liquido "SuperMix" Optiphase (Perkin Elmer) a la concavidad antes del conteo de escintilacion (Contador de Escintilacion Liquida 1450 Microbeta, Wallac) . Después de remover los valores medios de fondo para todos los puntos de datos, se calcularon los datos de K.i(app) a partir de un análisis de regresión no lineal de los datos iniciales de velocidad usando el paquete de software Prism (GraphPad Prism versión 3.0cx for Macintosh, GraphPad Software, San Diego California, EUA) .

Ensayo de Inhibición de Plk4 Se seleccionaron compuestos para su capacidad para inhibir Plk4 usando un ensayo de incorporación de fosfato radioactivo. Se llevaron a cabo los ensayós en una mezcla de MOPS8 mM (pH 7.5), MgCl2 lOmM, BSA al 0.1 %, y DTT 2mM. Las concentraciones finales de sustrato fueron [?-33?]??? 15 µ? (227mCi 33P ATP/mmol ATP, Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals) y péptido 300 µ? (KKKMDATFADQ) SEQ. ID NO. 3. Se llevaron a cabo los ensayos a cabo a 25°C en la presencia de Plk4 25n . Se preparó una solución concentrada de amortiguador de ensayo que contiene todos los reactivos listados anteriormente, con la excepción de ATP y el compuesto de prueba de interés. Se colocaron 30 µ?, de solución concentrada en una placa de 96 concavidades seguido por la adición de 2 pL de solución concentrada de DMSO que contiene diluciones en serie del compuesto de prueba (iniciando típicamente desde una concentración final de 10 µ? con diluciones en serie de 2 veces) en duplicado (concentración final de DMSO 5 %). La placa se pre-incubó durante 10 minutos a 25°C y la reacción inició por la adición de 8 L de [?-33?]??? (concentración final 15 µ?. La reacción se detuvo después de 180 minutos por la adición de 100 pL de ácido fosfórico 0.14M. Se pre-trató una placa de 96 concavidades (Millipore, Cat no. MAPHN0B50) de filtro de fosfocelulosa de multitamiz con 100 L de ácido fosfórico 0.2 M antes de la adición de 125 L de la mezcla detenida de ensayo. La placa se lavó con 4 x 200 pL de ácido fosfórico 0.2M. Después del secado, se adicionaron 100 L de cóctel de escintilación líquido "SuperMix" Optiphase (Perkin Elmer) a la concavidad antes del conteo de escintilación (Contador de Escintilación Líquida 1450 Microbeta, Wallac) . Después de remover los valores medios de fondo para todos los puntos de datos, se calcularon los datos de K.i(app) a partir del análisis de regresión no lineal de los datos iniciales de velocidad usando el paquete de software Prism (GraphPad Prism versión 3.0cx for Macintosh, GraphPad Software, San Diego California, EUA) . Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la presente invención, es el que resulta claro a partir de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES
Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Compuesto de la fórmula I. caracterizado porque el anillo A es un anillo de heteroarilo de 5 miembros en donde el anillo está opcionalmente sustituido con Ci_6haloalquilo, halo, N02, -OH, -CN, o un Ci_6alquilo opcionalmente sustituido; X1 es un enlace, -0-, -NR8-, -S-, -S(0)-, o -S(0)¿-; R1 es H, Ci-io alifático, C3-iocicloalifático, C6-i0arilo, heteroarilo de 5-10 miembros o heterociclilo de 3-10 miembros, en donde el R1 está opcionalmente sustituido con 0-5 de J1; cada R2 y R3 e independientemente H, Ci-io alifático, o C3-iocicloalifático, en donde cada R2 y R3 es opcional e independientemente sustituido con 0-5 de J2 y J3, respectivamente, o R2 y R3, junto con el átomo de carbono al cual están unidos, forman un anillo monociclico saturado o parcialmente insaturado, de 3-8 miembros que contiene 0-4 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, en donde este anillo monociclico formado por R2 y R3 está opcionalmente constituido con 0-4 de J23; R4 es H, -C(0)R, -C(0)OR, -C(0)NRR', Ci-i0alifático,
C3-iocicloalifático, C6-i0arilo, heteroarilo de 5-10 miembros, heterociclilo de 3-10 miembros, (Ci_6alifático) - (C3-locicloalifático) , (Ci-6alifático) - (C6-ioarilo) , o (Ci- 6alifático) - (hetoroarilo de 5-10 miembros), en donde el R4 está opcionalmente sustituido con 0-5 de J4; R8 es H, Ci_6alifático, C3-8cicloalifático, -C(0)R, -C (O) OR, o -C (O) RR' ; cada J1 es independientemente Ci_6haloalquilo, halo, N02, CN, Q, o -Z-Q, o dos J1 tomados conjuntamente pueden formar opcionalmente =0; cada Z es independientemente Ci_6alifático en el cual 0-3 unidades de -CH2- en el Ci-6alifáticos se reemplazan opcionalmente con -NR-, -O-, -S-, -C(O)-, -C(=NR)-, -C(=NOR)-, -S(O)-, o -S(0)2-, en donde cualquiera de las unidades -CH2-no reemplazadas en el Ci_6alifático están opcionalmente sustituidas con 0-2 de Jz; cada Q es independientemente H, Ci-6alifático, un anillo monociclico aromático o no aromático de 3-8 miembros que tiene 0-3 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, o un sistema de anillo biciclico aromático o no aromático de 8-12 miembros que tiene 0-5 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S, en donde cada Q está independientemente sustituido de manera opcional con 0-5 de JQ;' cada J2 y J3 es independientemente Ci_6alifático, C3- 6cicloalifático, o - (Ci_4alquil) n- V1, en donde n es 0 ó 1, cada V1 es independientemente halo (Ci-4alifático) , -O (haloCi-4alifático) , halo, N02, CN, OH, OR", SH, SR", NH2, NHR" , N(R")2, COH, COR", C02H, C02R", CONH2, CONHR" , CONR"2, OCOR", OCONH2, OCONHR", OCON(R")2, NHCOR", NR"COR", NHC02R", NR"C02H, NHCONH2, NHCONHR", NHC0N(R")2, S02NH2, S02NHR", S02N(R")2, NHS02R", NR"S02R", o V1 es un grupo cíclico seleccionado de C3-6CÍcloalifático, fenilo, heteroarilo de 5-6 miembros, o heterociclilo de 3-6 miembros, en donde el grupo cíclico está opcionalmente sustituido por 0.3 de Jv; cada R" es independientemente Ci_4alifático insustituido, o dos de los mismos J2 y J3 unidos al mismo átomo de carbono, conjuntamente pueden formar opcionalmente =0; cada Jz y Jv es independientemente halo, Ci_ 6alifático, C3_6cicloalifático, N02, CN, OH, NH2, NH(Ci_ 4alifático) , -C02H, -C02 (Ci_4alifático) , -O (haloCi-4alifático) , o halo (Ci_4alifático) ; cada JQ, J4, y J23 es independientemente -M o -Y-M; ' cada Y es independientemente un Ci_6alifático insustituido en el cual 0-3 unidades -CH2- en el Ci-6alifático se reemplazan opcionalmente con -NR-, -O-, -S-, -C(O)-, S(O)-, O -S(0)2-; cada M es independientemente H, Ci-6alifático, C3_ 6cicloalifático, halo (Ci-4alifático) , O (haloCi_4alifático) , heterociclilo de 3-6 miembros, halo, N02, CN, OH, OR' , SH, SR' , NH2, NHR' , N (R' ) 2, COH, COR', C02H, C02R' , CONH2, CONHR' , CONR'2, OCOR' , OCONH2, OCONHR' , OCON(R')2, NHCOR' , NR'COR, NHC02R' , NR'C02R', NHC02H, NR'C02H, NHCONH2, NHCONHR' , NHCON(R')2, S02NH2, S02NHR' , S02N(R')2, NHS02R' , o NR' S02R; cada R es independientemente H o Ci_6alifático insustituido; y cada R' es Ci-6alifático insustituido o dos grupos
R' , junto con el átomo al. cual se unen, forman un anillo monociclico saturado o parcialmente insaturado de 3-8 miembros, insustituido que tiene 0-1 heteroátomos independientemente seleccionados de O, N y S. 2. Compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el anillo A es un anillo de triazol opcionalmente sustituido con Ci_6haloalquilo, halo, N02, OH, CN o Ci_6alquilo opcionalmente sustituido. 3. Compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el anillo A es un anillo de imidazol opcionalmente sustituido con Ci-6haloalquilo, halo, N02, OH, CN o Ci-6alquilo opcionalmente sustituido. 4. Compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, caracterizado porque X1 es -0-, -NR8-, o -S-.
5. Compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque X1 es -NR8-.
6. Compuesto de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque R8 es H o -C(0)0R.
7. Compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque R8 es H.
8. Compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque R8 es -C (O) OCi_6alquilo .
9. Compuesto de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque R8 es -C(0)OCH3.
10. Compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, caracterizado porque R1 es H, C6-ioarilo opcionalmente sustituido, aralquilo opcionalmente sustituido o C5_ioheteroarilo opcionalmente sustituido.
11. Compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque R1 es H.
12. Compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque cada R1 es C6-ioarilo opcionalmente sustituido .
13. Compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque R1 es Cs-ioheteroarilo opcionalmente sustituido .
14. Compuesto de conformidad con la reivindicación 12 ó 13, caracterizado porque R1 esta opcionalmente sustituido con 0-3 de -0-Q, halo, -C(0)N(R)-Q, o Q, en los cuales cada Q en Q, -C(0)N(R)-Q y -O-Q, está independientemente sustituido opcionalmente con 0-5 de JQ.
15. Compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque el C6-ioarilo es fenilo opcionalmente sustituido en la posición para con -C(0)N(R)-Q y cualquier posición restante con -O-Q, halo o Q, en la cual cada Q en Q, -C(0)N(R)-Q y -O-Q está independientemente sustituido opcionalmente con 0-5 de JQ.
16. Compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el heteroarilo está sustituido con - C(0)N(R)-Q y cualquier posición restante con -O-Q, o Q, en la cual cada Q en Q, -C(0)N(R)-Q y -O-Q está independientemente sustituido de manera opcional con 0-5 de JQ.
17. Compuesto de conformidad con las reivindicaciones 15 ó 16, caracterizado porque Q en C(0)N(R)-Q es H, Ci_4alifático, Ci_4haloalifático, C3_ cicloalifático, C3-7heterocicloalifático, Ci_6alcoxi, (Ci-6alcoxi ) Ci-6alquilo o Ci-6haloalcoxi .
18. Compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque el fenilo está opcionalmente sustituido en cualquier posición restante con halo, Ci_ 4alifático, Ci-4haloalifático, C3_7cicloalifático, C3_ 7heterocicloalifático, Ci_6 alcoxi, (Ci-6alcoxi ) Ci_6alquilo o Ci_ 6haloalcoxi .
19. Compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque Q de -C(0)N(R)-Q es metilo, etilo, l-metilpiperidin-4-ilo, ciclopropilo, ciclopentilo, 3-furanilo, 3-fluoropirrolidin-l-ilo o 3 , 3-difluorociclobutilo .
20. Compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, caracterizado porque R1 es Ci-6 alquilo opcionalmente sustituido o C3-7 cicloalquilo .
21. Compuesto de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque R1 es H, etilo, ciclopropilo o ciclopentilo .
22. Compuesto de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque R1 es fenilo y un sustituyente en la posición para el fenilo es Q o -Z-Q.
23. Compuesto de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el sustituyente en la posición para es fluoro, carboxi, trifluorometilo, 4-metilpiperazin-l-ilo, difluorometoxi , morfolin-l-ilo, pirazol-l-ilo o pirrolidin-1-ilo.
24. Compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque R1 es tiofeno-2-ilo, piridin-3-ilo, piridin-4-ilo, o 6-trifluorometilpiridin-3-ilo .
25. Compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, caracterizado porque cada uno de R2 y R3 es un Ci-3alquilo opcionalmente sustituido.
26. Compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, caracterizado porque R2 es H y R3 es Ci-3 alquilo opcionalmente sustituido.
27. Compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque R3 es etilo.
28. Compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-24, caracterizado porque R2 y R3 junto con el átomo al cual están unidos forman un anillo de cicloalquilo de 3 a 7 miembros opcionalmente sustituido con 0-4 J23.
29. Compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-28, caracterizado porque R4 es Ci-6alifático, C3-i0cicloalifático, C3_i0 eterocicloalifático, C6-i4arilo o Cs-i^heteroarilo cada uno opcionalmente sustituido con 0-5 de J .
30. Compuesto de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque R4 es C3-iocicloalifático opcionalmente sustituido con 0-5 de J4.
31. Compuesto de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque R4 es ciclopentilo .
32. Compuesto de conformidad con la reivindicación 1, representado por la fórmula II; II caracterizado porque R1 es C3-i0arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido; y cada R2 y R3 es independientemente H, Ci_i0alifático, o C3-io cicloalifático; en donde cada R2 y R3 está opcionalmente sustituido con 0-5 de J2 y J3 respectivamente; o R2 y R3, junto con el átomo de carbono al cual están unidos, pueden formar un anillo monociclico saturado o parcialmente insaturado, de 3 a 6 miembros, opcionalmente sustituido; y JA es H o C1-4 alquilo.
33. Compuesto caracterizado porque se selecciona del grupo: 1-1 1-2 1-3 1-10 1-11 1-12 25 1-19 1-20 1-21 1-25 1-26 1-27 1-28 1-29 1-30 1-37 1-38 1-39 1-40 1-41 1-42
34. Composición, caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-33, y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.
35. Método para inhibir la actividad de proteína-cinasa en un paciente, caracterizado porque comprende administrar a ese paciente un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-33 o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 34.
36. Método para inhibir la actividad de proteína-cinasa en una muestra biológica, caracterizado porque comprende poner en contacto esta muestra biológica con un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-33, o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 34.
37. Método de conformidad con la reivindicación 35 o 36, caracterizado porque la proteína-cinasa es PLK.
38. Método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque la proteina-cinasa es PLKl.
39. Método para tratar un trastorno proliferativo, un trastorno neurodegenerativo, un trastorno auto inmunitario, un trastorno inflamatorio o un trastorno inmunológicamente mediado en un paciente, caracterizado porque comprende el paso de administrar a este paciente un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-33 o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 34.
40. Método de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado porque comprende administrar al paciente un agente terapéutico adicional seleccionado de un agente quimioterapéutico o anti-proliferativo, un agente anti-inflamatorio, un agente inmunomodulador o inmunosupresor , un factor neurotrófico, un gente para tratar enfermedad cardiovascular, un agente para tratar trastornos óseos destructivos, un agente para tratar enfermedad hepática, un agente anti-viral, un agente para tratar trastornos sanguíneos, un agente para tratar diabetes, o un agente para tratar trastornos de inmunodeficiencia, en donde: a) el agente terapéutico adicional es apropiado para la enfermedad que se trata; y b) el agente terapéutico adicional se administra junto con la composición como una forma de dosis individual o de manera separada de la composición como parte de una forma de múltiples dosis.
41. Método para tratar melanoma, mieloma, leucemia, linfoma, neuroblastoma o cáncer seleccionado de colon, mama, gástrico, ovárico, cervical, pulmonar, sistema nervioso central (CNS), renal, próstata, vejiga o pancreático, en un paciente, caracterizado porque comprende administrar al paciente un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-33 o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 34.
42. Método para tratar cáncer en un paciente, caracterizado porque comprende administrar al paciente un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-33 o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 3 .
43. Método de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado porque comprende el paso de interrumpir la mitosis de las células de cáncer al inhibir PLK con un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1-33 o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 34.