MX2008011965A

MX2008011965A - Composicion de combinacion farmaceutica comprendiendo al menos un inhibidor de pkc y al menos un inhibidor de jak cinasa para tratar desordenes autoinmunes.

Info

Publication number: MX2008011965A
Application number: MX2008011965A
Authority: MX
Inventors: Axel Maibuecher
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2006-03-21
Filing date: 2007-03-19
Publication date: 2008-10-01
Also published as: US20090062301A1; CN101400346A; WO2007107318A1; GB0605691D0; KR20080105093A; AU2007228997A1; BRPI0708938A2; CA2644207A1; RU2008141374A; JP2009530331A; EP2004178A1

Abstract

La presente invención se refiere a una combinación farmacéutica que comprende al menos un inhibidor de PKC, en particular derivados de indolilmaleimida, y al menos un inhibidor de JAK3 cinasa y los usos de tal combinación, por ejemplo, en enfermedades autoinmunes, por ejemplo, para prevenir o tratar diabetes mellitus tipo I y desórdenes asociados con la misma, o en transplante.

Description

COMPOSICION DE COMBINACION FARMACEUTICA COMPRENDIENDO AL MENOS UN INHIBIDOR DE PKC Y AL MENOS UN INHIBIDOR DE JAK CINASA PARA TRATAR DESORDENES AUTOINMUNES La presente invención se refiere a una combinación farmacéutica que comprende al menos un inhibidor de PKC, en particular derivados de indolilmaleimida, y al menos un inhibidor de JAK3 cinasa y los usos de tal combinación, por ejemplo, en enfermedades autoinmunes, por ejemplo, para prevenir o tratar diabetes mellitus tipo I y desórdenes asociados con la misma, o en transplante. La presente invención se refiere además a una combinación farmacéutica que comprende al menos uno y al menos uno inhibidor de JAK3 cinasa y los usos de tal combinación, por ejemplo, en enfermedades autoinmunes, por ejemplo, para prevenir o tratar diabetes mellitus tipo I y desórdenes asociados con la misma, o en transplante. A pesar de numerosas opciones de tratamiento para pacientes de transplante de órganos y enfermedad autoinmune, continúa la necesidad de agentes inmunosupresores seguros y efectivos y una necesidad por su uso preferencial en terapia de combinación. Se ha encontrado ahora que una combinación que comprende al menos un inhibidor de PKC y un inhibidor de Janus Kinase 3 (JAK3) cinasa, por ejemplo, como se define más adelante, tiene un efecto benéfico sobre enfermedades autoinmunes, por ejemplo, diabetes tipo I y los desórdenes asociados con la misma o con rechazo de injerto. Los inhibidores de PKC de la invención pueden ser análogos de estaurosporina o derivados de maleimida. Por ejemplo, pueden ser de fórmula I en donde Rpk es un ciclo aromático, por ejemplo, un heterociclo aromático, opcionalmente fusionado a otro ciclo, por ejemplo, otro ciclo aromático, opcionalmente un heterociclo aromático; Rpk y el ciclo fusionado siendo opcionalmente substituido; y los ciclos A y B siendo opcionamlente substituidos. Ejemplos de inhibidores de PKC apropiados son, por ejemplo: - Compuestos como se describe en EP1337527A1, y EP 1490355A1, por ejemplo un compuesto de fórmula II en donde Ra es H; C1-4 alquilo; o C1-4 alquilo substituido por OH, NH2, NHd. 4 alquilo o N(di-Ci_ alquilo)2; Rb es H; o C1-4 alquilo; y R es un radical de fórmula (a), (b), (c), (d), (e) o (f) (d) (e) (0 en donde cada uno de R4, R7, R8, R„ y R14 es OH; SH; un residuo heterocíclico; NR 6Ri7, en donde cada uno de R16 y R17, independientemente, es H o C * alquilo o R16 y R17 forman junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos un residuo heterocíclico; o un radical de fórmula a en donde X es un enlace directo, O, S o NR18 en donde R18 es H o C^,, alquilo, Rc es C1-4 alquileno o d.4 alquileno en donde uno CH2 es reemplazado por CRxRy, en donde uno de Rx y Ry es H y el otro es CH3, cada uno de Rx y Ry es CH3 o Rx y Ry forman juntos -CH2-CH2-, y Y es unido al átomo de carbono terminal y es seleccionado de OH, un residuo heterocíclico y -NR19R2o, en donde cada uno de R19 y R20 independientemente es H, C3.6 cicloalquilo, C3.6 cicloalquil-d.4 alquilo, ar¡l-C1.4 alquilo o C1-4 alquilo opcionalmente substituido en el átomo de carbono terminal por OH, o R19 y R20 forman junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos un residuo heterocíclico; cada uno de R2, R3, R5, R6, R9, R10, R12, R13, R15 y R'15, independientemente, es H, halógeno, C,. alquilo, CF3, OH, SH, NH2, C,.4 alcoxi, d.4 alquiltio, NHC1-4 alquilo, N(di-C1.4 alquilo)2 o CN; cualquier E es -N= y G es -CH= o E es -CH= y G es -N = ; y el anillo A es opcionalmente substituido, o una sal farmacéuticamente aceptable o hidrato de la misma.

- Compuestos de fórmula (III) en donde R41 es un grupo de fórmula (g), (h) o (i) en donde cada v y w independientemente es 1, 2, 3 o 4; s es 0, 1, 2 o 3; t es 1 o 2; u es 0 o 1 ; y R412 es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, cicloalquilo, acetilo, arilo, -CH(arilo)2, amino, monoalquilamino, dialquilamino, guanidino, C(=N(alcoxicarbonil))NH(alcoxicarbonilo), amidino, hidroxi, carboxi, alcoxicarbonilo o heterociclilo; R'4 es hidrógeno, C1-4 alquilo, aminoalquilo, monoalquilamino o dialquilaminoalquilo, cada uno de R 2 y R'42, independientemente, es hidrógeno, alquilo, alcoxialquilo, hidroxialquilo, Ci-C3 alquiltio, S(0)C1-C3 alquilo, CF3; R43 es hidrógeno o CH3CO-; y cada uno de R44, R'44, R45. R'45, R46, R'46. R47 y R'47, independientemente, es hidrógeno, halógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, -000(?!-03 alquilo), CF3, nitro, amino, acetilamino, monoalquilamino, dialquilamino, alquiltio, d-C3 alquiltio o S(0)C1-C3 alquilo, o una sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o solvato de los mismos. Los compuestos de fórmula (I), (II) y (III) pueden ser sintetizados como es sabido en la técnica, por ejemplo, como se describe en US6,645,970 o EP1490355A1 (para los compuestos de fórmula II); EP1490355A1 (para los compuestos de fórmula II), US 5,545,636) para los compuestos de fórmula III). Los inhibidores de PKC de la invención pueden inhibir varias isoformas de pKC, en particular pueden inhibir selectivamente isoformas de PKC específicas, es decir, ser inhibidores de pKC selectivos, es decir inhibidores de PKC ¡sozima-selectivos. De preferencia, los inhibidores de PKC de la invención son capaces de inhibir selectivamente isoformas de PKC las cuales son seleccionadas de las isoformas de PKC clásicas (a, ß?, ß2, ?) y novedosas isoformas de pKC (e, ?, d, T), más preferiblemente seleccionadas de las isoformas de PKC a, ß (isoformas ß? y ß?) y T. Los inhibidores de PKC preferidos de la invención son capaces de inhibir selectivamente las isoformas a, ß y opcionalmente T de PKC. Por ejemplo, el inhibidor de PKC de la invención puede poseer una selectividad para una o más isoformas de pKC, por ejemplo, PKC alfa o pKC alfa, beta y opcionalmente teta, sobre las demás isoformas de PCK de al menos 20 veces, por ejemplo 100, 500, 1000 o 2000 veces. La actividad de inhibición de PKC de los inhibidores de PCK de la invención puede determinarse en un ensayo de reacción de linfocitos mixtos alogeneicos (MLR) El ensayo de MLR puede hacerse de acuerdo con métodos conocidos, por ejemplo, ratón de ensayo de MLR humano, por ejemplo, como se describe en EP1337527A1, el contenido con respecto al ensayo de MLR es incorporado en la presente por referencia. En una modalidad preferida, los inhibidores de PKC de la invención muestran un valor de IC50, por ejemplo, para las isoformas de PKC a y ß, y opcionalmente T, de 1 µ? o menos, de preferencia 10 nM o menos en el ensayo mencionado antes en al presente. En la fórmula II, cualquier alqulo o porción de alquilo en, por ejemplo, alcoxi, puede ser lineal o ramificada. El halógeno puede ser F, Cl, Br o I, de preferencia F o Cl. Cualquier arilo puede ser fenilo o naftilo, de preferencia fenilo. Por residuo heterocíclico como Rpk, Ri, R4, R7, Re, Rn, R14 o Y o formado, respectivamente, por NR16R17 o NR19R2o, incluyen por ejemplo, piridilo, por ejemplo, 3- o 4-piridilo, piperidilo, por ejemplo, piperidin-1-ilo, 3- o 4-piperidilo, homopiperidilo, piperazinilo, por ejemplo, 1-piperazinilo, homopiperazinilo, morfolin-4-ilo, imidazolilo, imidazolidinilo, pirrolilo o pirrolidinilo, opcionalmente substituido, por ejemplo, mono- o polisubstituido. Ejemplos adecuados de residuo heterocíclico como R incluyen por ejemplo, 4,7-diaza-espiro[2.5]oct-7-ilo. Cuando el residuo heterocíclico es substituido, este puede estar en uno o más átomos de carbono de anillo y/o en un átomo de nitrógeno de anillo cuando estén presentes. Ejemplos de un substituyente en un átomo de carbono de anillo incluyen, por ejemplo, C1- alquilo, por ejemplo, CH3; C3.6 cicloalquilo, por ejemplo, ciclopropilo, opcionalmente substituido de manera adicional por Ci_4 alquilo; ^ÍCH,), en donde p es 1, 2 o 3, de preferencia 1; CF3; halógeno; OH; NH2; -CH2-NH2; -CH2-OH; piperidin-1-ilo; o pirrolidinilo. Ejemplos de un substituyente en unátomo de nitrógeno de anillo son, por ejemplo, C1-6 alquilo; acilo, por ejemplo, R'x-CO en donde R'x es H, C1-6 alquilo o fenilo opcionalmente substituido por C1-4 alquilo, C1- alcoxi o amino, por ejemplo, formilo; C3.6 cicloalquilo; C3.6 cicloalquil-C1- alquilo; fenilo; fenil-C^ alquilo, por ejemplo, bencilo; un residuo heterocíclico, por ejemplo, como se describe antes, por ejemplo, un residuo heterocíclico aromático que comprende 1 o 2 átomos de nitrógeno; o un residuo de fórmula ß en donde Ri es C1-4 alquileno o C2-4 alquileno interrumpido por O y Y' es OH, NH2, NH(C1-4 alquilo) o N(C1-4 alquilo)2. En la fórmula II, C2.4 alquileno interrumpido por O puede ser, por ejemplo, -CH2-CH2-0-CH2-CH2-. En la fórmula II, cuando el substituyente en un nitrógeno cíclico es un residuo heterocíclico, puede ser un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros, saturado, insaturado o aromático comprendiendo 1 o 2 heteroátomos, de preferencia seleccionado de N, O y S. Ejemplos incluyen, por ejemplo, 3- o 4-piridilo, piperidilo, por ejemplo, piperidin-1-ilo, 3- o 4-piperidilo, homopiperidilo, piperazinilo, homopiperazinilo, pirimidinilo, morfolin-4-ilo, imidazolilo, imidazolidinilo, pirrolilo o pirrolidinilo. En la fórmula II, cuando Ra es C1.4 alquilo substituido, el substituyente es de preferencia en el átomo de carbono terminal. Cuando el anillo A es substituido, puede ser mono- o polisubstituido, de preferencia monosubstituido, siendo seleccionado el o los substituyentes del grupo que consiste de, por ejemplo, halógeno, OH, C1-4 alcoxi, por ejemplo, OCH3, C1-4 alquilo, por ejemplo, CH3, N02, CF3, NH2, NHC^ alquilo, N(di-C1-4 alquilo)2 y CN. Por ejemplo, el anillo A puede ser un residuo de fórmula en donde Rd es H; C1-4 alquilo; o halógeno; y Re es OH; N02; NH2; NHC1-4 alquilo; o N(di-C1-4 alquilo)2. De preferencia, Rd está en la posición 1; de preferencia Re está en la posición 3. Cuando Rc tiene un CH2 reemplazado por CRxRy, es de preferencia Y que porta CH2. Ejemplos de residuo heterocíclico como R,, R , R7, Re, Rn, Ri4 o Y o formado, respectivamente, por NR16Ri7 o NR19R20, incluyen por ejemplo, un residuo de fórmula (?) en donde el anillo D es un anillo saturado, insaturado o aromático de 5, 6 o 7 miembros; Xb es -N-, -C= o -CH-; Xc es -N = , -NRf-, -CRf'= o -CHRf'-, en donde Rf es un substituyeme como es indicado antes para un átomo de nitrógeno de anillo, y Rf' es un substituyente como se indica antes para un átomo de carbono de anillo; el enlace entre d y C2 es ya sea saturado o insaturado; cada uno de Ci y C2, independientemente, es un átomo de carbono, el cual es opcionalmente substituido por uno o dos substituyentes seleccionados entre aquéllos indicados por arriba durante un átomo de carbono de anillo; y la línea entre C3 y Xb y entre y X , respectivamente, representa el número de átomos de carbono como se requiere para obtener un anillo D de 5, 6 o 7 miembros. Un residuo preferido de fórmula (?) es uno en donde el anillo D forma un anillo 1 ,4-piperazinilo opcionalmente C- y/o N-substituido como se indica. Ejemplos representativos de un residuo de fórmula (?) son, por ejemplo, 3- o 4-piridilo; piperidin-1 -ilo; l-N- C^ alquil)- o -(?-hidroxi-C1-4 alquil)-3-piperidilo; morfolin-4-ilo; imidazolilo; pirrolidinilo; 1-piperazinilo; 2-C1-4 alquil- o -C3.6 cicloalquil-1 -piperazinilo; 3-C -4 alquil-o -C3-6 cicloalquil-1-piperazinilo; 2,2- o 3,5- o 2,5- o 2,6-di(C1-4 alquil)-1-piperazinilo; 3,4,5-tri-(C1-4 alquil)-1-piperazinilo; 4-N-(Ci_4 alquil)- o -(?-hidroxi-d-4 alquil)- o -(?-dimetilamino-d.-, alquil)-1 -piperazinilo; 4-N- píridin-4-¡l-1 -piperazinilo; 4-N-fenil- o -C3.6 cicloalquil-1 -piperazinilo; 4- -(Ci_4 alquil)- o -(co-h¡drox¡-Ci.4 alqui!)-3-C -4 alquil- o -3,3-di(C1.4 alquil- 1 -piperazinilo; 4-N-(1-Ci_4 alquil-C3.6 cicloalquil)-1-piperazinilo; 4-N-form i 1-1 -piperazinilo; 4-N-pirimidin-2-il-1 -piperazinilo; 4,7-diaza-spiro[2.5]oct-7-ilo o 4-N-C1-4 alquil-1 -homopiperazinilo. Los compuestos de fórmula I y II pueden existir en forma libre o en forma de sal, por ejemplo, sales de adición con por ejemplo, ácidos orgánicos o inorgánicos, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido acético, cuando R,, R4, R7, R8, R o R14 y/o R2, R3, R5, Re, R9, Río, R12, R13 o R15 comprende un grupo amino opcionalmente substituido o un residuo heterocíclico, el cual puede formar sales de adición de ácido. Se apreciará que los compuestos de fórmula I, fórmula II y fórmula III pueden existir en la forma de isómeros ópticos, racematos o diastereoisómeros por ejemplo, un átomo de carbono de anillo que porta un substituyente en el residuo heterocíclico como R,, R4, R7, R8, R , Ri4 o Y o formado, respectivamente por NR16Ri7 o NR 19R20. es asimétrico y puede tener la configuración D o L. Se entenderá que la presente invención abarca todos los enantiómeros y sus mezclas. Consideraciones similares aplican en relación a materiales de inicio que exhibe átomos de carbono asimétricos como se menciona. En los compuestos de fórmula II, los siguientes significados son preferidos de manera indivdual o en cualquier sub-combinación: 1. Ra es H o CH3; 2. Rb es H; 3. Anillo A es no substituido; o es substituido por metilo en la posición 7; 4. Residuo heterocíclico preferido como es formado por NRi6R17, es por ejemplo, piperazin-1-ilo opcionalmente N-substituido, por ejemplo, por C-|.4 alquilo, a>-hidroxi-Ci.4 alquilo, ro-dimetilamino-C1.4 alquilo, C5-6 cicloalquilo, C1-4 alquil-C5.6 cicloalquilo, un residuo hetercíclico aromático que comprende 1 o 2 átomos de nitrógeno, por ejemplo, piridilo o pirimidin-2-ilo, o un residuo de fórmula ß como se define antes y/o opcionalmente C-substituido, por ejemplo, por CH3, por ejemplo, en posiciones 2 y/o 3 y/o 5 y/o 6 y/o 2,2 o 3,3 o por CH2 , por ejemplo, en la posición 2 o 3; piperidin-1 -ilo opcionalmente C-substituido, por ejemplo, en la posición 4, por NH2, -CH2-NH2 o piperidin-1-ilo o en posición 3, por ejemplo, por OH o NH2; o pirrolidinilo opcionalmente C-substituido en la posición 3 por OH o NH2; 5. R8 es H o CH3; 6. Rc es C1-4 alquileno o C1-4 alquileno, en donde el CH2 terminal es reemplazado por CRxRy en donde Rx y Ry forman juntos -CH2-CH2-; 7. X es O; 8. El radical de fórmula (a) es -0-CH2-CH2-Y; 9. Cada uno de R19 y R20 es H, Ci_4 alquilo, por ejemplo, metilo, C1-4 alquilo substituido en el átomo de carbono terminal por OH, por ejemplo, -CH2-CH2-OH o ciclopropilo; 10. Residuo heterocíclico preferido como es formado por NR19R20 es, por ejemplo, piperazin-1-ilo opcionalmente N-substituido por C1-4 alquilo o un residuo de fórmula ß; piperidin-1 -ilo; 1-(C1-4 alquil)- piperidin-3-ilo; 3-o 4-piridilo; imidazolilo; pirrolidinilo; o morfolin-4-ilo; 11. Cada uno de R, R , R7, Re, R o R14, independientemente es 1-N-metil-piperidin-4-ilo; 4-metil-piperazin-1 -ilo; 4-metil-1-homopiperazinilo; 4-(2-hidroxietil)-piperazin-1 -ilo; o -X'-d.2 o 3 -alquileno-NR 19R201 sn donde X es un enlace directo, O o NH; 12. En el residuo de fórmula (a) ya sea cada uno de R2 y R3 es H o uno de R2 y R3 es H y el otro es F, Cl, CH3, OH, OCH3 o CF3; 13. En el residuo de fórmula (a) R2 es OH; 14. En el residuo de fórmula (b) ya sea cada uno de R5 y R6 es H o uno de R5 y R6 es H y el otro es F, Cl, CH3, OCH3 o CF3; 15. En el residuo de fórmula (b), R4 es un radical de fórmula (a o 16. En el residuo de fórmula (d), ya sea cada uno de R9 y R10 es H o uno de R9 y R10 es H y el otro es F, Cl, CH3, OCH3 o CF3; de preferencia R0 es H y R9 está en posición 5, 6, 7 u 8, de preferencia en posición 6; 17. En el residuo de fórmula (d), cada uno de R9 y R10 es H, R8 es piperazina opcionalmente substituida, por ejemplo, R8 es 4-metil-piperazin-1 -ilo. 18. En el residuo de fórmula (e) cada uno de R12 y Ri3 es H; 19. En el residuo de fórmula (e) cada uno de R12 y Ri3 es H y el otro es F, Cl, CH3, OCH3 o CF3; cuando E es -N= y G es -CH = , de preferencia R13 es H y R12 está en posición 6 o 7; cuando E es -CH= y G es -N = , de preferencia R13 es H y R2 está en posición 7; 20. En el residuo de fórmula (e), cada uno de R 2 y R13 es H; E es -CH= y G es -N = , R es 4,7-diaza-spiro[2.5] octil-7-ilo; o piperazin-1 -il substituido en posición 3 por metilo o etilo y opcionalmente en la posición 4 por metilo, 21. En el residuo de fórmula (f) R5 es H, CH3 o Cl, por ejemplo, en posición 5 o 6; 22. En el residuo de fórmula (f) R'15 es H o CH3, por ejemplo, en la posición 5, de preferencia H; 23. R es un radical de fórmula (d), (e) o (f). En los compuestos de fórmula III, se prefieren los siguientes significados: cada uno de R 4, R'44, R45, R'45, R46, R' 6- R47 y ' 7 es hidrógeno; en donde ya sea s' es 0 y R'12 es hidrógeno o C1-4 alquilo; o s' es 1 y R'412 es piridilo, de preferencia 2-piridilo, y R4r es H; o C1- alquilo. Los compuestos preferidos de fórmula II son 3-(1. H . -i ndo l-3-i l)-4- [2-(4-metil-piperazin-1-il)-quinazolin-4-il]-pirrol-2,5-diona (referida de aquí en adelante como Compuesto A), 3-(1.1.-indol-3-il)-4-[2-(piperazin- 1-il)-quinazolin-4-il]-pirrol-2,5-diona (referida de aquí en adelante como Compuesto B), 3-[3-(4,7-diaza-spiro[2.5]oct-7-il)-isoquinolin-1-il]-4-(7- metil-1 H-indol-3-il)-pirrol-2,5-diona (Compuesto C), en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, la sal de acetato del mismo. Los compuestos preferidos de fórmula II son 3-(1 -metil-1 -H-indol-3-il)-4-[1-{(1-piridin-2-ilmetil)-piperidin-4-il}-1 H-indol-3-il]-pirrol-2,5-diona (Compuesto D), 3-(1 -metil-1 H-indol-3-il)-4-[1 - (piperidin-4-il)-1 H-indol-3-il]-pirrol-2,5-diona (Compuesto E), o una sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o solvante del mismo. JAK3 es una enzima la cual es expresada principalmente en células T y B y juega un papel crítico en el desarrollo y función de células T. Los inhibidores de JAK3 cinasa son, por ejemplo, compuestos teniendo un valor de IC50 < 5 µ?, de preferencia < 1 µ?, más preferiblemente < 0.1 µ? en los siguientes ensayos: Ensayos de proliferación dependientes de interleucin-2 (IL-2) con células CTL/L y HT-2 Las líneas de células T de ratón dependientes de IL-2 CTL/L y HT-2 son cultivadas en RMPI 1640 (Gibco 52400-025) complementado con 10% de Fetal Clone I (HyClone), 50 µ? 2-mercaptoetanol (31350-010), 50 µ?/Gt?? gentamicina (Gibco 15750-037), 1 mM piruvato de sodio (Gibco 11360-039), aminoácidos no esenciales (Gibco 11140-035; 100x) y 250U/ml de IL-2 de ratón (sobrenadante de células transfectadas X63-Ag8 conteniendo 50?00 U/ml de IL-2 de ratón de acuerdo con el estándar Genzyme). Los cultivos se dividen dos veces a la semana 1:40. Antes de usar las células se lavan dos veces con medio de cultivo sin IL-2 de ratón. El ensayo de proliferación es realizado con 4000 CTL/L células /cavidad o 2500 HT-2 células/cavidad en placas de cultivo de tejido de 96 cavidades de fondo plano conteniendo diluciones apropiadas de compuestos de prueba en medio de cultivo con 50 U/ml de IL-2 de ratón. Los cultivos de CTL/L son incubados a 37°C durante 2 h y los cultivos de HT-2 son incubados durante 48 h. Después de la adición de 1 µ? 3H-timidina y una incubación durante la noche adicional, las células son recolectadas sobre filtros de fibra y la radioactividad es contada.

Proliferación dependiente de interleucin-2 de células mononucleares de sangre periférica humana Las células mononucleares de sangre periférica humana son aisladas en Ficoll a partir de recubrimientos amarillentos con tipo HLA desconocido (Blutspendezentrum, Kantonsspital, Basilea, Suiza). Las células son mantenidas a 2 x 10' células/ml (90% FCS, 10% DMSO) en criotubos (Nunc) en nitrógeno líquido hasta su uso. Las células son incubadas durante cuatro días a 37°C en un incubador de C02 humidificado (7%) en matraces costar a la concentración de 7 x 105 células/ml en medio de cultivo conteniendo RPMI 1640 (Gibco, Pacely, Inglaterra) complementado con Na-piruvato (1 mM; Gibco), aminoácidos no esenciales MEM y vitaminas (Gibco), 2-mercaptoetanol (50 µ?), L-glutamina (2 mM), gentamicina y penicilina/estreptomicina (100 µg/ml; Gibco), bacto asparagina (20 üg/ml; Difco), insulina humana (5 Dg/ml; Sigma), transferrina humana (40 Dg/ml; Sigma), suero de ternera fetal seleccionada (10%, Hyclo9ne Laboratories, Logan, UT) y 100 µg/ml de fitohemaglutinina. Las células son lavadas dos veces en medio RPMI 1640 conteniendo 10% FCS e incubadas durante 2 horas. Después de la centrifugación las células son tomadadas en el medio de cultivo mencionado antes (sin fitohemaglutinina) conteniendo interleucin-2 (Chiron 200 U/ml), distribuido por triplicado en placas de cultivo de tejido de 96 cavidades de fondo plano (Costar #3596) a una concentración de 5 x 104 células/0.2 mi en la presencia de concentraciones apropiadas de compuestos de prueba e incubadas a 37°C durante 72 horas. 3H-timidina (1 µ??/0.2 mi) se adicionó durante las últimas 16 horas de cultivo. Subsecuentemente, las células son recolectadas y contadas en un contador de centelleo. Los inhibidores de JAK3 cinasa adecuados incluyen, por ejemplo, - Compuestos como se describe en USP 2003/0073719A1 , por ejemplo, un compuesto de fórmula IV en donde cada uno de R2j y F*3j independientemente es seleccionado grupo que consiste de H, amino, halógeno, OH, nitro, carboxi, C alquenilo, C2-e alquinilo, CF3,trifluorometox¡, C1-6 alquilo, Ci_6 alcoxi, C cicloalquilo en donde los grupos alquilo, alcoxi o cicloalquilo son opcionalmente substituidos por uno hasta tres grupos seleccionados de halógeno, OH, carboxi, amino, d_6 alquiltio, C,_6 alquilamino, (d.6 alquil)2amino, C5.9 heteroarilo, C2-9 heterocicloalquilo, C3.9 cicloalquilo o C6.10 arilo; o cada uno de R2j y 3j independientemente es C3-i0 cicloalquilp. C3.i0 cicloalcoxi, C3.10 cicloalcoxi, d.6 alquilamino, (C -6 alquil)2amino, C6-io arilamino, Ci_6 alquiltio, C6-io ariltio, C1.6 alquilsulf inilo , C6-io arilsulfinilo, C1-6 alquilsulfonilo, C6-io arilsulfonilo, C -6 acilo, C,_6 alcoxi-CO-NH-, C1-6 alquilamino-CO-, C5.9 heteroarilo, C2. 9 heterocicloalquilo o C6-io arilo, en donde los grupos heteroarilo, heterocicloalquiloy arilo son opcinoalmente substituidos por uno a tres halógeno, C1-6 alquilo, C,.6 alquil-CO-NH-, C1-6 alcoxi-CO-NH-, C,.6 alquil-CO-NH-C1-6 alquilo, C1-6 alcoxi-CO-NH-C1-6 alquilo, C1-6 alcoxi-CO-NH-d.6 alcoxi, carboxi, carboxi-C1-6 alcoxi, benciloxicarbonil-d.6 alcoxi, d.6 alcoxicarbonil-Ci-6 alcoxi, C s-10 arilo, aminoCi.6 alquilo, C2-7 alcoxicarbonilamino, C6-10 aril-C2.7 alcoxicarbonilamino, d.6 alquilamino, (Ci-6 alquil)2amino, C1.6 alquilamino-C1-6 alquilo, (C,^ alquil)2 amino-C1-6 alquilo, hidroxi, Ci_6 alcoxi, carboxi, carboxi-Ci.6 alquilo, C2.7 alcoxicarbonilo, C2.7 alcox¡carbonil-d-6 alquilo, C1-6 alcoxi-CO-NH-, C1-6 alquil-CO-NH-, ciano, C5.9 alquil-CO-NH-, ciano, C5.9 hetero-cicloalquilo, amino-CO-NH-, d.6 alquilamino-CO-NH-, (d.6 alquil)2amino-CO-NH-, C6. 10 arilamino-CO-NH-, C5.9 heteroarilamino-CO-NH-, C1-6 alquilamino-CO-NH-d-e alquilo, (d-6 alquil)2amino-CO-NH-C1.6 alquilo, C1-6 arilamino-CO-NH-C1.6 alquilo, C5.9 heteroarilamino-CO-NH-Ci.e alquilo, C1-6 alquilsulfonilo, C1-6 alquilsulfonilamino, C -6 alquilsulfonilaminoC^e alquilo, C6 - i o arilsulfonilo, C6.10 arilsulfonilamino, C6 - i o arilsulfonilamino-C 1.6 alquilo, C i _6 alquilsulfonilamino, C 1 -6 alquilsulfonilamino-d-6 alquilo, C5.g heteroarilo o C2-9 eterocicloalquilo; por ejemplo, metil-[(3R,4R)-4-metil-1 -(propano-1 -sulfonil)-piperidin-3-il]-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-amina, metil éster de ácido (3R,4R)-)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2-,3-d]pirimidin-4-il)-amino]-piperidin-1 -carboxílico; 3 , 3, 3, -trif I uoro- 1 - {(3R,4R)-4-met¡l-3-[metil-(7H-pirrolo[2 , 3-d]pirimidin-4-¡l)-arriirio]-piperidin-1 -il}-propan-1 -ona; dimetilamida de ácido (3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-4-il)-amino]-piperid i n-1 -carboxílico, etil éster de ácido {(3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2 , 3-d]pirimidin-4-il)-amino]-piperidin-1 -carbonil}-amino)-acético; 3-{(3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2 , 3-d]pir¡midin-4-il)-amino]-piperidin-1 -il}-3-oxo-propionitrilo; 3,3,3-trifluoro-1 -{(3R,4R)-4-metil-3-[-metil-(5-metil-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-amino]-piperidin-1 -il}-propan-1 -ona; 1 -{(3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2, 3-d]pirirriidin-4-il)-amino]piperidin-1 -il}-but-3-in-1 -ona; 1 -{(3R,4R)-3-[(5-cloro-7H-pirrol-o[2, 3-d]pirimidin-4-il)-metil-amino]-4-metil-piperidin-1 -il}-propan-1 -ona; 1 -[(3R,4R)-3-[(5-fluoro-7H-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-4-il)-metil-amino]-4-rrietil-piperidin-1 -il}-propan-1 -ona; (3R,4R)-N-ciano-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2 , 3-d]pir¡midin-4-il)-amino]-N'-propil-piperidin-1 -carboxamidina; o (3R,4R)-N-ciano-4, N' , N'-trimet¡l-3-[met¡l·(7H-pirrolo[2,3-d]pir¡midin-4-¡l)-arnino]-piper¡d¡n-1 -carboxamidina; - Compuestos como se describe en WO 01 /042246, por ejemplo, un compuesto de fórmula IVb - Compuestos como se describe en WO 02/092571, por ejemplo, compuesto de fórmula V en donde An es seleccionado de fenilo, tetrahidronaftenilo, indolilo, pirazolilo, dihidroindenilo, 1-oxo-2,3-dihidroindenilo o indazolilo, cada uno de los cuales puede ser opcionalmente substituido por uno o más grupos seleccionados de halógeno, hidroxi, ciano, Ci.B alcoxi, C02R8k, CONR 9k iok> Ci-8 alquil-O-C^e alquilo, C^e alquil-NR8k-C1-8 alquilo, Ci.8 alquil-CONRe-C^s alquilo, C1-8 alquil-CONR9kRiok, RskCOd.e alquilo, C1-8 tioalquilo, C1-8 alquilo (por sí mismo opcionalmente substituido por uno o más OH o ciano o flúor) o C1-8 alcoxi; Xk es NR3k u O; nk es 0 o 1; cada grupo Rk independientemente es hidrógeno o C1-8 alquilo; cada uno de R k y R2k independientemente es seleccionado de H, halógeno, nitro, ciano, C1-8 alquilo, C-|.8 alcoxi, OH, arilo, Yk(CRiik2)pkNR4kR5k, Yk(CR11k2)pkCONR4kR5kYk(CR1 k2)pkC02R Yk(CR11k2)PkOR6k; Yk(CR11k2)PkR6k; o R1k y R2k son enlazados juntos como -OCHO- o -OCH2CH20-; cada R11k independientemente es H, C1-8 alquilo, hidroxi o halógeno; pk es 0, 1, 2, 3, 4 o 5; R3k es H o d_8 alquilo; Yk es oxígeno, CH2 o NR7kR3k es hidrógeno o C1-8 alquilo; cada uno de R k y R5k es independientemente H, C B alquilo o R4k y R5k junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sisema de anillos heterocíclico saturado o aromático de 4 a 7 miembros, conteniendo opcionalmente un O, S o NR6k adicional, o uno de R4k y R5k es H o Ci_8 alquilo y el otro s un sistema de anillos heterocíclico de 5 o 6 miembros opcionalmente conteniendo un átomo de O, S o N adicional; R6k es H, C1-8 alquilo, fenilo o bencilo; R7k es H o C1-8 alquilo; R8k es H o CLO alquilo; cada uno de R9k y Ri0 independientemente es hidrógeno o C1-8 alquilo; - Compuestos como se describe en US 2002/0055514A1 , por ejemplo un compuesto de fórmula VI R 10 es H, C1-4 alquilo o alcanoilo; cada uno de R10 a R8o> independientemente, es H, halógeno, OH, mercapto, amino, nitro, Ci-4 alquilo, C1.4 alcoxi o d. alquiltio; en donde 2 de R10 junto con el anillo fenilo al cual están unidos pueden formar opcionalmente un anillo fusionado, por ejemplo, formando un anillo naftilo o uno tetrahidronaftilo; y adicionalmente, en donde el anillo formado por los dos grupos adyacentes de R10 pueden opcionalmente ser substituidos por 1, 2, 3 o 4 halógeno, hidroxi, mercapto, amino, nitro, d.4 alquilo, d-4 alcoxi o C,. alquiltio; y siempre que al menos uno de R20 es OH, y cada uno de R 9o y 100 independientemente es H, halógeno, C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi o d-4 alcanoilo; o R9o y R10o juntos son metilendioxi; - Compuestos como se describe en WO 04/052359, por ejemplo, un compuesto de fórmula VII en donde np es 1, 2, 3, 4 o 5; Rip es H, CH3 o CH2N(CH3)2; y R3P es CH2N(CH3)2 en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de fórmulas IV a VII pueden existir en forma libre o de sal. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de las fórmulas IV a VI incluyen sales con ácidos inorgánicos, tales como, hidrocloruro, sales con ácidos orgánicos, tales como acetato o ácido cítrico o, cuando sea apropiado, sales con metales tales como sodio o potasio, sales con aminas, tales como trietilamina y sales con aminoácidos dibásicos, tal como lisina. Cuando los compuestos de fórmulas IV a VII tienen uno o más centros asimétricos en la molécula, la presente invención será entendida como que abarca los diversos isómeros ópticos, así como racematos, diasteroisómeros y mezclas de los mismos son abarcados. Cuando los compuestos de fórmulas IV a VII comprenden un doble enlace, los compuestos pueden existir como configuraciones cis o trans o como mezclas de los mismos. En la fórmula IV, C6-io arilo es fenilo o naftilo. C2-9 heterocicloalquilo puede ser por ejemplo, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidropiranilo, piranilo, tiopiranilo, aziridinilo, oxiranilo, metilendioxi, isoxazolidinilo, 1 ,3-oxazolidin-3-ilo, isotiazolidinilo, 1 ,3-tiazolidin-3-ilo, 1 ,2-pirazolidin-2-ilo, 1 ,3-pirazolidin-1-ilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, etc. Tal grupo estará unido ya sea por un átomo C o N. C2.9 heteroarilo puede ser, por ejemplo, furilo, tienilo, tiazolilo, pirazolilo, isotizolilo, oxazolilo, isoxazolilo, pirrolilo, triazolilo, tetrazolilo, imidazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridilo, pirimidilo, pirazinilo, piridazinilo, triazinilo, pirazolo[3,4-b]piridinilo, cinolinilo, pteridinilo, purinilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, benzofuranilo, isoindolilo, indolilo, indolizinilo, indazolilo, isoquinolilo, quinolilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, benzoxazinilo, etc. Tal grupo estará unido por ya sea un átomo de C o N.

Los inhibidores de JAK3 cinasa preferidos incluyen, por ejemplo, N-bencil-3,4-dihidroxi-benciliden-cianoacetamida a-ciano-(3,4-dihidroxi)-]N-bencilcinamamida (Tyrphostin AG 490), prodigiosin 25-C (PNU 156804), [4-(4'-hidroxifenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] (WHI-P131 ), [4-(3'-bromo-4'-hidroxilfenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] (WHI-P154), [4-(3',5'-dibromo-4'-hidroxilfenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] WHI-P96 y 3-{(3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-amino]-piperidin-1 - il}-3-oxo-propionitrilo, en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, mono-citrato, o un compuesto de fórmula IVb, en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, mono-citrato (también llamado CP-690,550) o un compuesto de fórmula VII. En cada caso donde las citas de solicitudes de patente están dadas antes, la materia en cuestión que se relaciona con los compuestos es incorporada aquí en la presente solicitud por referencia. De igual manera están comprendidas las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, los racematos, diastereoisómeros, enantiómeros, tautómeros correspondientes así como las modificaciones de cristales correspondientes de los compuestos descritos antes donde estén presentes, por ejemplo, solvatos, hidratos y polimorfos, los cuales están descritos en la presente. Los compuestos usados com ingredients activos en las combinaciones de la invención pueden prepararse y administrarse como se describe en los documentos citados, respectivamente. Además dentro del alcance de esta invención es la combinación de más de dos ingredientes activos separados como se expone antes, es decir, una combinación farmacéutica dentro del alcance de esta invención podría incluir tres ingredientes activos o más.

De acuerdo con los hallazgos particulares de la presente invención, se proporciona 1. Una combinación farmacéutica que comprende: a) al menos un inhibidor de PKC, y b) al menos un inhibidor de JAK3 cinasa. 2. Un método para tratar o prevenir una enfermedad o desorden autoinmune, o rechazo de injerto de célula, tejido u órgano en un sujeto en necesidad del mismo, que comprende la co-administración a dicho sujeto, por ejemplo, concomitantemente o en secuencia, de una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un inhibidor de PKC, y de preferencia al menos un inhibidor de JAK3 cinasa, por ejemplo, como se describe antes. Ejemplos de enfermedades autoinmunes incluyen, por ejemplo, sarcoidosis, pulmón fibroide, neumonía intersticial idiopática, enfermedad obstructiva de vías respiratorias, incluyendo condiciones tales como, asma, asma intrínseca, asma extrínseca, asma de polvo, en particular asma crónica o inveterado (por ejemplo, asma tardía e hipersensibilidad de vías respiratorias), bronquitis, incluyendo asma bronquial, asma infantil, artritis reumatoide alérgica, lupus eritematoso sistémico, lupus de síndrome nefrótico, tiroiditis de Hashimoto, esclerosis múltiple, miastenia gravis, diabetes mellitus tipo I y complicaciones asociadas con la misma, diabetes mellitus de ataque de inicio adulto tipo II, uveitis, síndrome nefrótico, nefrosis resistente a esteroides y dependiente de esteroides, pustulosis palmoplantar, encefalomielitis alérgica, glomerulonefritis, psoriasis, artritis psoriática eczema atópico (dermatitis atópica), dermatitis de contacto y dermatitis eczematosas adicionales, dermatitis seborreica, liquen plano, pénfigo, penfigoide bulloso, epidermólisis bullosa, urticaria, angioedemas, vasculitides, eritemas, eosinofilias cutáneas, acné, alopecia areata, fasciitis eosinofílica, aterosclerosis, conjuntivitis, queratoconjuntivitis, queratitis, conjuntivitis vernal, uveitis asociada con enfermedad de Behcet, queratitis herpética, córnea cónica, córneas de distrofia epitelialis, queatoleucoma, pénfigo ocular, úlcera de Mooren, escleritis, oftalmopatía de Graves, inflamación intraocular severa, inflamación de mucosa o vasos sanguíneos, tales como, enfermedades mediadas por leucotrieno B4, úlceras gástricas, daño vascular provocado por enfermedades isquémicas y trombosis, enfermedad de intestino isquémico, enfermedad de intestino inflamatorio (por ejemplo, enfermedad de Crohn y colitis ulcerante), enterocolitis necrotizante, enfermedades renales incluyendo nefritis intersticial, síndrome de Goodpasture, síndrome urémico hemolítico y nefropatía diabética, enfermedades nerviosas seleccionadas de miositis múltiple, síndrome de Guillain-Barre, enfermedd de Meniere y radiculopatía, enfermedad de colágeno incluyendo escleroderma, granuloma de Wegener y síndrome de Sjogren, enfermedades de hígado autoinmunes crónicas incluyendo hepatitis autoinmune, cirrosis biliar primaria y colangitis esclerosante), resección dehigado parcial, necrosis de hígado aguda (por ejemplo, necrosis provocada or toxinas, hepatitis viral, parálisis o anoxia), hepatitis de virus B, hepatitis no A/no B y cirrosis, hepatitis fulminante, psoriasis pustular, enfermedad de Behcet, hepatitis crónica activa, síndrome de Evans, polinosis, hipoparatiroidismo idiopático, enfermedad de Addison, gastritis atrófica autoinmune, hepatitis lupoide, nefritis tubulointersticial, nefritis membranosa, esclerosis lateral amiotrófica o fiebre reumática. Por rechazo de injerto se quiere decir rechazo agudo o crónico de céluals, tejido o alo- o xenoinerjtos de órganos sólidos de, por ejemplo, isletas pancreáticas, células madre, médula ósea, piel, músculo, tejido de córnea, tejido neuronal, corazón, pulmón, corazón-pulmón combinado, riñon, hígado, intestino, páncreas, tráquea o esófago, o enfermedades de injerto-versus-huésped. El rechazo crónico también puede ser nombrado enfermedades de recipiente de inerto o vasculopatías de injerto. 3. Una combinación farmacéutica como se define bajo 1) anterior, por ejemplo, en la forma de un kit, el cual puede comprender instrucciones para la administración, por ejemplo, para usarse en un método como se define bajo 2) anterior. 4. Una combinación farmacéutica como se define bajo 1) anterior, para usarse en la preparación de un medicamento para usarse en un método como se define bajo 2) anterior. La utilidad de la combinación de la invención en un método como se especifica antes en la presente, puede demostrarse en métodos de prueba animal así como en clínica, por ejemplo, de acuerdo con los métodos descritos antes en la presente.

A. Transplante de corazón de rata La combinación de cepa usada: Mmacho Lewis (RT1 haplotipo) y BN (RT haplotipo). Los animales son anestesiados usando isofluorano para inhalar. Siguiendo la heparinización de la rata donadora a través de la vena cava inferior abdominal con exsanguinación simultánea vía la aorta, el pecho es abierto y el corazón es enfriado rápidamente. La aorta es ligada y dividida distal a la primera ramificación y el tronco braquiocefálico es dividido en la primera bifurcación. La arteria pulmonar izquierda es ligada y dividida y el lado derecho es dividido pero dejado abierto. Todos los demás recipientes son disecados libres, ligados y divididos y el corazón de donador es removido en solución salina helada. El receptor es preparado mediante disección y sujeción de pinzas cruzada de la aorta abdominal infra-renal y vena cava. El injerto es implantado con anastomoses de extremo-a-lado, usando sutura de monofilamento 10/0, entre el tronquo braquicefálico de donador y la aorta de receptor y la arteria pulmonar derecha de donador a la vena cava de receptor. Las pinzas son removidas, el injerto trabado retroabdominalmente, los contenidos abdominales se lavan con solución salina tibia y el animal es cerrado y se permite que se recupere bajo una lámpara de calentamiento. La supervivencia a injerto es monitoreada mediante palpación diaria del corazón palpitante de donador a través de la pared abdominal. El rechazo es considerado como completo cuando el latido cardíaco se detiene. Aumentos de supervivencia de injerto son obtenidos en animales tratados con una combinación de acuerdo con la invención, por ejemplo, una combinación de Compuesto A, por ejemplo, en forma de sal de acetato, y el compuesto CP-690,550 en la forma de sal de mono-citrato, cada componente de la combinación siendo administrada oralmente a una dosis diaria de 0.1 a 50 mg/kg. De esta manera, el Compuesto A en la forma de acetato, cuando se administra a una dosis de 1 a 30 mg/kg/día, y CP-690,550 mono-citrato, cuando se administra a una EC50 (concentración de medicamento en sangre a la cual 50% de los animales mantienen su injerto durante >28 días) de 60 ng/ml, aumentan significativamente la supervivencia de injerto.

B. Tratamiento combinado Estudios clínicos adecuados son, por ejemplo, estudios de escalado de dosis, de etiqueta abierta, en pacientes con psoriasis o esclerosis múltiple. Tales estudios prueban en particular la sinergia de los ingredients activos de la combinación de la invención. Los efectos benéficos en psoriasis o esclerosis múltiple pueden determinarse directamente a través de los resultados de estos estudios, los cuales son conocidos como tales para una persona experta en la técnica. Tales estudios son adecuados, en particular, para comparar los efectos de una monoterapia usando los ingredientes activos y una combinación de la invención. De preferencia, la dosis de agente (a) es escalada hasta que se alcanza la dosificación máxima tolerada, y el agente (b) es administrado con una dosis fija. De manera alternativa, el agente (a) es administrado en una dosis fija y la dosis de agente (b) es escalado.

Cada paciente recibe dosis del agente (a) ya sea diario o de manera intermitente. La eficacia del tratamiento puede ser determinada en tales estudios, por ejemplo, después de 12, 18 o 24 semanas mediante evaluación de calificación de síntoma cada 6 semanas. De manera alternativa, un estudio de doble ciego, de placebo controlado, puede ser usado con el fin de probar los beneficios de la combinación de la invención mencionada en la presente, por ejemplo, en transplante de un órgano, tejido o células, por ejemplo, células de isletas de Langerhans. La administración de una combinación farmacéutica de la invención resulta no solo en un efecto benéfico, por ejemplo, un efecto terapéutico sinérgico, por ejemplo, con respecto a aliviar, retardar la progresión de o inhibir los síntomas, sino también en efectos benéficos sorprendentes adicionales, por ejemplo, menos efectos laterales, una calidad de vida mejorada o morbidez disminuida, comparada con una monoterapia que aplica solo uno de los ingredientes farmacéuticamente activos usados en la combinación de la invención. Un beneficio adicional es que menores dosis de los ingredientes activos de la combinación de la invención pueden usarse, por ejemplo, que las dosificaciones no necesitan solamente ser frecuentemente más pequeñas, sino que también se aplican menos frecuentemente, lo cual puede disminuir la incidencia o severidad de efectos laterales. Esto de acuerdo con los deseos y requerimientos de los pacientes a ser tratados. Los términos "co-administración" o "administración combinada" o similares como se utilizan en la presente, significan que abarcan la administración de los agentes terapéuticos seleccionados a un solo paciente, y pretenden incluir regímenes de tratamiento en los cuales los agentes no son necesariamente administrados por la misma ruta de administración o al mismo tiempo. Un objetivo de esta invención es proporcionar un composición farmacéutica que comprende una cantidad, la cual es de manera conjunta terapéuticamente efectiva contra rechazo de injerto o enfermedades autoinmunes o desórdenes asociados con los mismos, que comprende una combinación de la invención. En esta composición, el agente a) y el agente b) pueden ser administrados juntos, uno después del otro o por separado en una forma de dosificación de unidad combinada o en dos formas de dosificación de unidad separadas. La forma de dosificación de unidad también puede ser una combinación fija. Las composiciones farmacéuticas para administración separada de agente a) y agente b) o para la administración en una combinación fija, es decir, una composición galénica simple, comprendiendo al menos dos compañeros de combinación a) y b), de acuerdo con la invención, pueden prepararse en una manera conocida per se y son aquéllas adecuadas para administración enteral, por ejemplo, oral, y parenteral, a mamíferos (animales de sangre caliente), incluyendo humanos, comprendiendo una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compañero de combinación farmacológicamente activa sola, por ejemplo, como se indica antes, o en combinación con uno o más portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables, en especial adecuados para aplicación enteral o parenteral. Composiciones farmcéuticas adecuadas contienen, por ejemplo, desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 99.9%, de preferencia desde aproximadamente 1% hasta aproximadamente 60%, del o los ingredientes activos. Preparaciones farmacéuticas para la terapia de combinación para administración enteral o parenteral son, por ejemplo, aquéllas en formas de dosificación de unidad, tales como, tabletas recubiertas con azúcar, tabletas, cápsulas o supositorios o ampolletas. Si no se indica de otra manera, se preparan en una manera conocida per se, por ejemplo, por medio de procesos de mezclado, granulado, recubrimiento con azúcar, disolución o liofilización convencionales. Se apreciará que el contenido de unidad de un compañero de combinación contenido en una dosis individual de cada forma de dosificación no necesita en sí misma constituir una cantidad efectiva, debido a que la cantidad efectiva necesaria puede alcanzarse mediante administración de una pluralidad de unidades de dosificación.

En particular, una cantidad terapéuticamente efectiva de cada uno de los compañeros de combinación de la combinación de la invención, puede administrarse de manera simultánea o secuencial y en cualquier orden, y los componentes pueden ser administrados por separado o como una combinación fija. Por ejemplo, el método para prevenir o tratar rechazo de injerto o enfermedades autoinmunes de acuerdo con la invención puede comprender (i) administración del primer agente a) en forma de sal farmacéuticamente aceptable o libre, y (ii) administración de un agente b) en forma de sal farmacéuticamente aceptable o libre, de manera simultánea o secuencial en cualquier orden, en cantidades terapéuticamente efectivas conjuntas, de preferencia en cantidades sinérgicamente efectivas, por ejemplo, en dosificaciones diarias o intermitentes correspondientes a las cantidades descritas en la presente. Los compañeros de combinación individuales de la combinación de la invención pueden ser administrados por separado a diferentes tiempos durante el curso de terapia o concurrentemente en formas de combinación simple o divididas. Adicionalmente, el término administrar también abarca el uso de un pro-medicamento de un compañero de combinación que convierte in vivo al compañero de combinación como tal. La presente invención será entendida por lo tanto como que abarca todos esos regímenes de tratamiento simultáneo o alternante y el término "administrar" va a ser interpretado de manera acorde. La dosificación efectiva de cada uno de los compañeros de combinación empleados en la combinación de la invención puede variar dependiendo del compuesto particular o composición farmacéutica empleada, el modo de administración, la condición siendo tratada, la severidad de la condición siendo tratada. De esta manera, el régimen de dosificación de la combinación de la invención es seleccionado de acuerdo con una variedad de factores incluyendo la ruta de administración y la función renal y hepática del paciente. Un médico, clínico o veterinario de habilidad ordinaria puede determinar fácilmente y prescribir la cantidad efectiva de los ingredientes activos simples requeridos para aliviar, combatir o detener el progreso de la condición.

La precisión óptima para lograr la concentración de los ingredientes activos dentro del rango que produce eficacia sin toxicidad requiere un régimen basado en la cinética de la disponiblidad de ingredientes activos a sitios objetivo. Las dosificaciones diarias para agente a) o b) o por supuesto variará dependiendo de una variedad de factores, por ejemplo, el compuesto elegido, la condición particular a ser tratada y el efecto deseado. Sin embargo, en general, se logran resultados satisfactores sobre la administración de agente a) a velocidades de dosificación diaria del orden de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 100 mg/kg por día, como una sola dosis o en dosis divididas. El inhibidor de PKC, por ejemplo, un compuesto de fórmulas I III, por ejemplo, Compuesto A, B, C, D o E, puede administrarse mediante cualquier ruta convencional, en particular, de manera enteral, por ejemplo, oral, por ejemplo, en la forma de tabletas o cápsulas, o de manera parenteral, por ejemplo, en la forma de soluciones o suspensiones inyectables, de manera atópica, por ejemplo, en la forma de lociones, geles, ungüentos o cremas, o en una forma nasal o de supositorio. Una dosificación diaria indicada para administración oral en el mamífero mayor, por ejemplo, humanos, está en el rango de aproximadamente 0.5 mg hasta aproximadamente 200 mg de ingrediente activo, por ejemplo, Compuesto A, B, C, D o E, convenientemente administrado, por ejemplo, en dosis dividida hasta cuatro veces al día o en forma retardada. El agente b), por ejemplo, CP-690,550 o un compuesto de fórmula XVII, puede ser administrado a un humano en una rango de dosificación diaria de 0.5 hasta 1000 mg. Las formas de dosificación de unidad adecuadas para administración oral comprenden desde ca. 0.1 hasta 500 mg de ingrediente activo, junto con uno o más diluyentes o portadores farmacéuticamente aceptables para el mismo. La administración de una combinación farmacéutica de la invención resulta no solo en un efecto benéfico, por ejemplo, un efecto terapéutico sinérgico, por ejemplo, con respecto a inhibir el rechazo de injerto en pacientes con transplante o disminuir o detener desórdenes autoinmunes, sino también en efectos benéficos sorprendentes adicionales, por ejemplo, menos efectos laterales, una calidad de vida mejorada o una morbidez disminuida, comparada con una monoterapia que aplica solo uno de los ingredientes farmacéuticamente activos usados en la combinación de la invención. Un beneficio adicional es que menores dosis de los ingredientes activos de la combinación de la invención pueden usarse, por ejemplo, que las dosificaciones no necesitan solo ser frecuentemente más pequeñas, sino también son aplicadas con menos frecuencia, o pueden usarse con el fin de disminuir la incidencia de efectos laterales. Esto es de acuerdo con los deseos y requerimientos de los pacientes a ser tratados. Una combinación preferida es la combinación de compuesto A, B, C, D o E, de preferencia el compuesto A, aún más preferiblemente el compuesto A en forma de sal de acetato, con CP-690,555 monocitrato.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una combinación farmacéutica que comprende: a) al menos un inhibidor de PKC, y b) al menos un inhibidor de JAK3 cinasa.

2. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el agente a) es un inhibidor de PKC seleccionado de un compuesto de fórmula I y II como se describe antes en la presente, una sal farmacéuticamente aceptable o hidrato del mismo, un compuesto de fórmula III como se describe antes en la presente, una sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o solvato del mismo.

3. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde el agente b) es un inhibidor de JAK3 cinasa teniendo un valor de IC50 < 5 µ? en el ensayo de proliferación dependiente de IL-2 con céluals CTL/L y HT-2 y en el ensayo de proliferación dependiente de IL-2 de células mononucleares de sangre periférica humana.

4. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el agente b) es seleccionado de un compuesto de fórmula IV a VII como se describe antes en la presente, o como una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el agente a) es 3-(1.H.-indol-3-il)-4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-quinazolin-4-il]-pirrol-2,5-diona; 3-(1.H.-indol-3-il)-4-[2-(piperazin-1-il)-quinazolin-4-il]-pirrol-2,5-diona; o 3-[3-(4,7-diaza-spiro[2.5]oct-7-il)-isoquinolin-1 -il]-4-(7-metil-1 H-indol-3-il)-pirrol-2,5-diona, en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable en forma de hidrato; 3-(1 -metil-1 H-indol-3-il)-4-[1 -{(1 -piridin-2-ilmetil)-piperidin-4-il}-1 H-indol-3-il]-pirrol-2,5-diona o 3-(1 -metil-1 H-indol-3-il)-4-[1 -(piperidin-4-il)-1 H-indol-3-il]-pirrol-2,5-diona o una sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o solvato del mismo; de preferencia en donde el agente a) es la sal de acetato de 3-(1.H.-indol-3-il)-4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-quinazolin-4-il]-pirrol-2,5-diona.

6. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 o 5, en donde el inhibidor de JAK3 cinasa b) es 3-{(3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-amino]-piperidin-1 -il}-3-oxo-propionitrilo o un compuesto o fórmula XVII como se define en la reivindicación 5, en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable.

7. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 o 5, en donde el inhibidor de JAK3 cinasa b) es CP-690,550 en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable.

8. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1 para usarse en un método para tratar o prevenir una enfermedad o desorden autoinmune, o rechazo de injerto de célula, tejido u órgano.

9. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, para usarse en la preparación de un medicamento o un conjunto para tratar o prevenir una enfermedad o desorden autoinmune, o rechazo de injerto de célula, tejido u órgano.

10. Un método para tratar o prevenir una enfermedad o desorden autoinmune, o rechazo de injerto de célula, tejido u órgano en un sujeto en necesidad del mismo, que comprende co-administración a dicho sujeto, por ejemplo, concomitantemente o en secuencia, de una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un inhibidor de PKC y al menos un inhibidor de JAK3 cinasa.