MX2008011641A - Nueva forma g cristalina de (5s)-5-[4-(5-cloro-piridin-2-iloxi)-pi peridin-1-sulfonil-metil]-5-metil-imidazolidin-2, 4-diona (i) y sus intermediarios. - Google Patents

Abstract

Se describen nuevas modificaciones de cristal de (5S)-5-[4-(5-cloro-piridin-2-iloxi)-piperidin-1-sulfonilmetil]-5- metil-imidazolidin-2, 4-diona junto con procedimientos para preparar las modificaciones, o composiciones farmacéuticas que comprenden la modificación, y el uso de la modificación en terapia.

Description

NUEVA FORMA G CRISTALINA DE ( 5S) -5- [4- ( 5-CLORO-PIRIDIN-2- ILOXI) -PIPERIDIN-l-SULFONIIi-METIL] -5-METIL-IMIDAZOLIDIN-2 , 4- DIONA (I) Y SUS INTERMEDIARIOS Campo de la invención La presente invención describe nuevas modificaciones de cristal de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, procedimientos para preparar las modificaciones, composiciones farmacéuticas que comprenden la modificación, y el uso de la modificación en terapia. Antecedentes de la invención WO 02/074767, que se incorpora aquí por referencia en su totalidad, enseña una clase de inhibidores de metaloproteinasa que son útiles en terapia. WO 02/074767 además describe un compuesto inhibidor de metaloproteinasa específico identificado en la presente como (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonilmetil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona (página 65, líneas 15 a 27; y página 120, líneas 23 a 29) . Este compuesto se designa en la presente como el compuesto (1) Ref . 196071 WO 02/074767 además describe procedimientos para la preparación del compuesto (I) . De esta forma, en una modalidad, el compuesto (I) se prepara a través de una ruta análoga a la mostrada en el siguiente esquema de reacción (WO 02/074767; páginas 87, 113 y 120) pero sustituyendo la amina apropiada en el paso (d) : Esquema de Reacción 1 Reactivos y condiciones para el Esquema de Reacción 1: a) KCN, (NH4)2C03, EtOH/H20, +90aC, 3b: b) separación quiral, CHIRALPAK AD, metanol como eluyente; c) Cl2(g), AcOH/H20, <+15sC, 25 min; d) diisopropiletilamina , THF -20SC, 30 minutos.

El compuesto (I) obtenido después se purifica ya sea a través de precipitación y lavado con etanol/agua o a través de CLAR preparativa. En una segunda modalidad, el racemato del compuesto (I), (5RS) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-1-sulfonilmetil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, se preparó a través de la reacción de 1- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonil ] -propan-2-ona con un exceso de cianuro de potasio y carbonato de amonio de etanol, y aislando el producto a través de precipitación. El compuesto (I), el (5S) -enantiomero, después se obtuvo a través de CLAR quiral WO 02/074767; páginas 55 y 65). Las formas no cristalinas del compuesto (I) se describen en WO 02/074767. El compuesto I es un inhibidor de metaloproteinasa potente, particularmente un inhibidor potente de MMP12, y como tal es útil en terapia. Sin embargo, cuando se hace de acuerdo con los procedimientos descritos en WO 02/074767, el compuesto (I) describe propiedades de estado sólido no pronosticables con respecto a la estabilidad termodinámica. Para preparar formulaciones farmacéuticas que contienen el compuesto (I) para la administración a seres humanos de acuerdo con los requerimientos de E. U. A. y otras autoridades de registro de salud internacionales, existe la necesidad de producir el compuesto (I) en una forma estable, tal como una forma cristalina estable, que tiene propiedades físicas constantes. El polimorfismo se puede caracterizar como la habilidad de un compuesto particular para cristalizarse en diferentes modificaciones de cristal mientras mantiene la misma fórmula química. Los polimorfos de una sustancia dada son químicamente idénticos en el contenido de los mismos átomos enlazados entre sí en la misma forma, pero difieren en sus modificaciones de cristal, que pueden afectar una o más propiedades físicas tales como la velocidad de disolución, el punto de fusión, la densidad en volumen, la estabilidad, las propiedades de flujo, etc. Como se utiliza en la especificación con referencia a un compuesto específico, los términos "polimorfismo", "modificación de cristal", "forma de cristal", "modificación cristalina", y "forma (cristalina)" se entienden como sinónimos. Breve descripción de la invención La presente invención proporciona un método para mejorar las propiedades termodinámicas del compuesto (I) en el estado sólido, y por lo tanto proporciona el compuesto (I) en una modificación cristalina estable que tiene Dropiedades físicas consistentes y ventajosas. Breve descripción de las figuras La Figura 1 es un diagrama de difracción de polvo de rayos X del la Forma G del compuesto (I) ; La Figura 2 es un seguimiento de calorimetría de exploración diferencial (DSC, por sus siglas en inglés) y un seguimiento analítico gravimétrico término (TGA, por sus siglas en inglés) de la Forma G del compuesto (I); La Figura 3 es un diagrama de difracción de polvo de rayos X de la Forma A del compuesto (I); La Figura 4 es un diagrama de difracción de polvo de rayos X de la Forma B del compuesto (I); La Figura 5 es un diagrama de difracción de polvo de rayos X de la Forma C del compuesto (I); La Figura 6 es un diagrama de difracción de polvo de rayos X de la Forma D del compuesto (I); La Figura 7 es un diagrama de difracción de polvo de rayos X de la Forma E del compuesto (I); La Figura 8 es un diagrama de difracción de polvo de rayos X de la Forma F del compuesto (I) . Descripción detallada de la invención Se ha encontrado ahora sorprendentemente que (5S)-5-[4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonil-metil] -5-metil- imidazolidin-2, 4-diona, compuesto (I), puede existir en al menos siete modificaciones cristalinas diferentes (polimorfos) .

En un aspecto, la presente invención proporciona siete formas polimórficas del compuesto de la fórmula (I) . En una modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-1-sulfonil-metil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designada Forma G y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X (XPRD, por sus siglas en inglés) que comprende picos específicos a 10.1, 16.2, 16.8 y 19.0 s26 y en donde dicho patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa. En otra modalidad la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-1-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designado como Forma G y caracterizado por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X (XPRD) que comprende picos específicos a 9.2, 10.1, 11.5, 12.8, 14.1, 16.2, 16.8 y 19.0 e26 y en donde patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-1-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designado Forma G y caracterizado por un patrón de difracción de polvo de rayos X (XPRD) sustancialmente igual al mostrado en la Figura 1 en donde el patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa.

En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-1-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designado Forma G y caracterizado por tener un residuo calorimétrico de exploración diferencial (DSC) sustancialmente igual al mostrado en la Figura 2. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de ( 5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2, 4-diona designado Forma A y caracterizado por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X que comprende picos específicos a 6.8, 9.8, 13.7, 16.4, 18.4, 18.7, .4 y 22.6 a20. En otra modalidad, la invención proporciona la modificación cristalina de ( 5S ) -5- [ 4- ( 5-cloro-piridin-2 -iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designado Forma A y caracterizado por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 3. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de ( 5S ) - 5 - [ 4- ( 5-cloro-piridin-2 -iloxi) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2, 4-diona designado Forma B y caracterizado por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X que comprende picos específicos a 6.6, 7.1, 8.3, 9.0, 13.6, 14.3, 16.8 y 17.7 ?2?. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2- iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designada Forma B y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvos de rayos X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 4. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designado Forma C y caracterizado por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X que comprende picos específicos a 6.3, 12.8, 14.3, 16.6, 17.8, 19.4, 22.2 y 23.7 d2?. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designada Forma C y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvos de rayos X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 5. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designado Forma D y caracterizado por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X que comprende picos específicos a 6.6, 10.9, 11.2, 15.6, 15.9, 17.7, 18.2 y 18.4 a20. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2- iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4- diona designada Forma D y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvos de rayos X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 6. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designado Forma E y caracterizado por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X que comprende picos específicos a 12.1, 13.9, 14.5, 14.8, 15.3, 16.2, 18.7 y 19.8 a26. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de ( 5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designada Forma E y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvos de rayos X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 7. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designado Forma F y caracterizado por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X que comprende picos específicos a 7.4, 9.5, 13.9, 14.9, 17.3, 18.1, 20.0 y 20.4 22?. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2- iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4- diona designada Forma F y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvos de rayos X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 8. Se entiende que las intensidades relativas de los picos en el patrón de difracción de polvo de rayos X (XPRD) pueden variar de acuerdo con la orientación de la muestra bajo el ensayo y el tipo y la configuración del instrumento utilizado, de tal forma que las intensidades en los residuos XPRD incluidos en la presente son a tal grado ilustrativos y no están limitados para utilizarse como comparaciones absolutas . Las modificaciones o formas cristalinas de la invención preferiblemente son sustancialmente puras, significando que cada modificación o forma cristalina del compuesto de la fórmula (I) incluye menos de aproximadamente 10%, preferiblemente menos de 5%, preferiblemente menos de 3%, preferiblemente menos de 1% en peso de impurezas, incluyendo otras modificaciones o formas cristalinas del compuesto. De esta forma, en una modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina sustancialmente pura de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designada Forma F y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X (XPRD) que comprende picos específicos a 10.1, 16.2, 16.8 y 19.0 a26 y en donde el patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa. De esta forma, en una modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina sustancialmente pura de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designada Forma F y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X (XPRD) que comprende picos específicos a 9.7, 10.1, 11.5, 12.8, 14.1, 16.2, 16.8 y 19.0 22? y en donde el patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa. En otra modalidad, la invención proporciona una modificación cristalina sustancialmente pura de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona designada Forma G y caracterizada por tener un patrón de difracción de polvo de rayos X (XPRD) sustancialmente igual al mostrado en la Figura 1 y en donde el patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa. La Forma G del compuesto (I) se obtiene como un polvo cristalino que comprende cristales que exhiben un hábito acicular. El material es esencialmente 100% cristalino determinado a través de mediciones de difracción de polvo de rayos X. La estructura del cristal se determinó a través de difracción de rayos X de cristal individual. En el cristal, las moléculas se empacan en un grupo de espacio ortorrómbico (?2?2?2?) . Existen 4 moléculas en la célula unitaria asimétrica (a = 10.510 Á, c = 15.560 Á) . El empaque cerrado, da como resultado la falta de espacio interno, que se manifiesta en una densidad relativamente alta de 1.46 g/ml. El patrón de difracción de polvo de rayos X simulado de la Forma G del compuesto (I) se calcula utilizando los datos de difracción de rayos X de cristal individual de acuerdo con el patrón experimentalmente determinado mostrado en la Figura 1. Las posiciones de los picos difractados tienen una correspondencia muy cercana y las diferencias en las intensidades de pico relativas se atribuyen a los efectos de orientación preferidos. Cuando se prepara de acuerdo con los procedimientos descritos en WO 02/074767, la (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona se obtiene en una fase amorfa o Forma A o Forma C o una mezcla de las mismas. Un punto de fusión para la Forma A del compuesto (I) no se ha observado ya que después del calentamiento se transforma en la Forma B a aproximadamente 175 aC. La Forma B del compuesto (I) se produce a través de transiciones de estado sólido cuando la Forma A se calienta a aproximadamente 1752C. La Forma B se funde a aproximadamente 207 SC y después puede recristalizarse a la Forma C y subsiguientemente se vuelve a fundir a aproximadamente 2102C.

La Forma C del compuesto (I) se funde a aproximadamente 2102C. La Forma D del compuesto (I) se produce cuando un compuesto (I) se prepara a través de cristalización a partir de una fusión. Por ejemplo, la Forma D se produce fundiendo la Forma D (partiendo de la Forma A a temperatura ambiente) a la temperatura de fusión de la Forma D; después se extingue enfriando a temperatura ambiente produciendo un material amorfo; y después calentando de nuevo a 5aC/min. Durante el calentamiento, este material amorfo pasa a través de la temperatura de transición de vidrio y después subsiguiente se recristaliza como la Forma D. La Forma D se funde a aproximadamente 209aC. La Forma E del compuesto (I) se produce cuando la Forma C se convierte en una lechada en agua a un pH de 3 , por ejemplo, a temperatura ambiente durante varios días. Igual que la Forma A, la Forma E experimenta una transformación térmica a aproximadamente 175SC, probablemente a la Forma B. La Forma F del compuesto (I) se produce cuando la Forma A o la Forma C se forman en lechada en etanol, por ejemplo, a temperatura ambiente durante varios días. Igual que la Forma A y la Forma E, la Forma F experimenta una transformación térmica a aproximadamente 175fiC, probablemente a la Forma B. La Forma G del compuesto (I) se puede reproducir producido cuando (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona se recristaliza de etanol acuoso o de alcoholes metilados industriales acuosos. La Forma G se fusiona a aproximadamente 2012C y, dependiendo de las condiciones utilizadas, por ejemplo, la velocidad del calentamiento, puede subsiguientemente parcial o completamente recristalizarse a la Forma C cuando después se vuelve a fundir a aproximadamente 210eC. Cuando cualquiera de las Formas A a G del compuesto (I) se calientan, no se observa ninguna pérdida de solvente ningún otro evento térmico antes de la fusión excepto para posibles transformaciones de estado sólido, tales como aquellas indicadas anteriormente, que pueden ocurrir a aproximadamente 175 aC. De esta forma, cada una de las Formas A a G es térmicamente estable. Las estabilidades termodinámicas relativas de las Formas A a G del compuesto (I) se evaluaron en experimentos de suspensión cuando las mezclas de las Formas A a G se co-incubaron en agua durante 5 días a temperaturas en la escala de 5 a 40 aC. En todos los casos, los estudios de difracción de polvo de rayos X (XPRD) en los precipitados resultantes demostraron una conversión completa en la Forma G. El mismo resultado se observó siguiendo la incubación de las suspensiones de la Forma A en varios solventes orgánicos (etanol, metanol, 1-propanol, 2-propanol, acetona o acetato de etilo). Con base en estos resultados, se pueden concluir que la Forma G del compuesto (I) es la termodinámicamente más estable de las siete modificaciones cristalinas en el intervalo de temperatura investigado. Utilizando los procedimientos descritos en la presente, la Forma G del compuesto (I) puede fabricarse de manera reproducible siguiendo síntesis a pequeña escala, intermedia o gran escala. Como se puede anticipar a partir de la determinación de la estructura de rayos X de cristal individual de la Forma G del compuesto (I) , que no demostró virtualmente ningún espacio interno para las moléculas del solvente, las mediciones de absorción de humedad utilizando la absorción de vapor gravimétrica (GVS) mostraron que el material casi no tiene absorción de humedad a humedades relativamente altas (absorción de humedad -0.05% a 80eC RH) . El material de esta forma venta osamente se clasifica como no higroscópico de acuerdo con el criterio definido en la Farmacopea Europea. La Forma G del compuesto (I) tiene propiedades de estado sólido excelentes y altamente ventajosas. Es cristalina, no higroscópica y térmicamente estable por debajo de 200SC, mostrando ni pérdida de solvente, ni otro evento térmico antes de la fusión (ver residuos DSC y TGA, Figura 2) . La Forma G también es la termodinámicamente más estable de las siete modificaciones cristalinas conocidas del compuesto ( I ) . La estabilidad de estado sólido de la Forma G del compuesto (I) se estudió bajo tres grupos de condiciones: a 25eC/disecada; a 252C/60% RH; y a 402C/75% RH. Las muestras se examinaron después de 2 , 4, y 12 semanas y se evaluó la estabilidad química y física. Se concluyó que el material fue química y físicamente estable bajo todas las condiciones de almacenamiento ya que no se observaron cambios en el contenido de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-1-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona con relación a cualquier producto de degradación posible (gradiente RPLC) ; en la forma del compuesto (I) (XRPD) ; en la morfología del compuesto (I) (SEM) ; en el contenido de solvente (TGA) ; o en el comportamiento de fusión (DSC) . Por la tanto la Forma G del compuesto (I) se considera que tiene una estabilidad química y física excelente y ventajosa en el estado sólido bajo condiciones de almacenamiento farmacéuticamente relevantes. En un aspecto, la presente invención proporciona la Forma G de ( 5S ) -5- [ 4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-1-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . En un aspecto más, la presente invención proporciona procedimientos para la preparación de la Forma G de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . De esta forma, en un aspecto, la invención proporciona un procedimiento para la preparación de la Forma G de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona que involucra la cristalización o recristalización de etanol acuoso. En otro aspecto, la invención proporciona un procedimiento para la preparación de la Forma G de (5S)-5-[4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona que involucra la cristalización o recristalización de alcoholes metilados industriales acuosos . En otro aspecto, la invención proporciona un procedimiento para la preparación de la Forma G de (5S)-5-[4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona que involucra los siguientes pasos : i) agregar (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona a una mezcla de 2:1 de alcoholes metilados industriales (IMS): agua ; ii) calentar la mezcla de reflujo para obtener una solución; iii) filtrar la solución caliente; iv) calentar el filtrado a reflujo y después permitir que se enfríe a aproximadamente 202C a una velocidad de aproximadamente 0.5aC/minuto; v) recolectar y secar la Forma G de ( 5S) -5- [4- ( 5- cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil- imidazolidin-2 , 4-diona . En un aspecto más, la presente invención proporciona la Forma G de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2- iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona para uso en terapia. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona para utilizarse en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o profilaxis de enfermedades o condiciones en donde la inhibición de la actividad MMP es benéfica. En un aspecto más, la presente invención proporciona la Forma G de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona para utilizarse en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o profilaxis de enfermedades o condiciones en donde la inhibición de la actividad MMP es benéfica . En un aspecto más, la presente invención proporciona un método para el tratamiento o profilaxis de una enfermedad o condición mediada por la actividad MMP que comprende administrar a un paciente en la necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin- 1-sulfonil-metil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . En un aspecto más, la presente invención proporciona un método para el tratamiento o profilaxis de una enfermedad o condición mediada por la actividad MMP que comprende administrar a un paciente en la necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de la Forma G de (5S)-5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . En un particular, el compuesto (I) es útil en el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por MMP12 y/o MMP13 y/o MMP9 y/o MMPS8 y/o MMP3 ; especialmente en el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por MMP12 y/o MMP9 ; más especialmente en el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por MMP12. En un aspecto más, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una modificación cristalina de (5S) -5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . En un aspecto más, la presente invención proporciona una composición que comprende la Forma G de (5S)- - [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . En un aspecto más, la presente invención proporciona un método para tratar una enfermedad o condición mediada por la actividad de metaloproteinasa, que comprende administrar a un paciente en la necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . En un aspecto más, la presente invención proporciona un método para tratar una enfermedad o condición mediada por la actividad de metaloproteinasas , que comprende administrar a un paciente en la necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende la Forma G de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . En un aspecto más, la presente invención proporciona el uso de una formulación farmacéutica que comprende una modificación cristalina de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, para el tratamiento de una enfermedad o condición en donde la inhibición de la actividad M P es benéfica.

En un aspecto más, la presente invención proporciona el uso de una formulación farmacéutica que comprende la Forma G de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona para el tratamiento de una enfermedad o condición en donde la inhibición de la actividad M P es benéfica. En otro aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I) Forma G en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o profilaxis de enfermedades o condiciones inflamatorias; y un método para tratar, o reducir el riesgo de, enfermedades o condiciones inflamatorias que comprenden administrar a una persona que sufre de o está en riesgo de, la enfermedad o condición, de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I) Forma G. El compuesto (I) se puede utilizar en el tratamiento de enfermedades del tracto respiratorio tales como enfermedades obstructivas de las vías aéreas incluyendo: asma, incluyendo asma bronquial, alérgica, intrínseca, extrínseca, inducida por el ejercicio, inducida por fármacos (incluyendo inducida por aspirina o NSAID) y asma inducida por polvo, ambas intermitentes y persistentes y todas las severidades y otras causas de híper-reacción de las vías aéreas; enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD, por sus siglas en inglés); bronquitis, incluyendo bronquitis infecciosa y eosinofílica, enfisema, bronquiectasia; fibrosis quística, sarcoidosis ; pulmón de granjero y enfermedades relacionadas; neumonitis de hipersensibilidad; fibrosis de pulmón, incluyendo alveolitis fibrosa criptogénica, neumonías intersticiales idiopáticas, terapia anti-neoplásica que complica la fibrosis e infección crónica, incluyendo tuberculosis y aspergilosis y otras infecciones micóticas; complicaciones de transplante de pulmón; trastornos vasculíticos y trombóticos de la vasculatura del pulmón, e hipertensión pulmonar; actividad antitusiva incluyendo el tratamiento de tos crónica asociada con condiciones inflamatorias y secretorias de las vías aéreas, y tos iatrogénica; rinitis aguda y crónica incluyendo rinitis medicamentosa, y rinitis vasomotora; rinitis alérgica perene y de estación incluyendo rinitis nerviosa (fiebre del heno); poliposis nasal; infección viral aguda incluyendo el resfriado común, y la infección debido al virus sincitial respiratorio, influenza, coronavirus (incluyendo SRAS) y adenovirus . El compuesto (I) también se puede utilizar en el tratamiento de enfermedades del hueso y articulaciones tales como artritis asociadas con o incluyendo osteoartritis/osteoartrosis , tanto primaria como secundaria, por ejemplo, displasia de cadera congénita; espondilitis cervical y lumbar, y dolor de la espalda baja y el cuello; artritis reumatoide y enfermedad de Still; espondiloartropat as seronegativas incluyendo espondilitis anquilosante, artritis psoriática, artritis reactiva y espondartropatía no diferenciada; artritis séptica y otras artropatias relacionadas con la infección y los trastornos del hueso tales como tuberculosis, incluyendo la enfermedad de Potts y el síndrome de Poncet; sinovitis inducida por cristal aguda y crónica incluyendo gota por urato, enfermedad de deposición de pirofosfato cálcico, y tendón relacionada con apatita calcica, inflamación bursal y sinovial; enfermedad de Behcet; síndrome de Sjogren primario y secundario; esclerosis sistémica y escleroderma limitada; lupus eritematoso sistémico, enfermedad de tejido conectivo mixto, y enfermedad de tejido conectivo no diferenciado; miopatías inflamatorias incluyendo dermatomiositis y polimiositis ; polimalgia reumática; artritis juvenil incluyendo artritis inflamatoria idiopática de cualquier distribución de articulación y síndromes asociados, y fiebre reumática y sus complicaciones sistémicas; vasculitis incluyendo artritis de célula gigante, artritis de Takayasu, síndrome de Churg-Strauss , poliartritis nodosa, poliartritis microscópica, y vasculitis asociada con infección viral, reacciones de hipersensibilidad, crioglobulinas , y paraproteínas ; dolor de espalda baja,- fiebre mediterránea familiar, síndrome de Muckle-Wells , y Fiebre Irlandesa Familiar, enfermedad de Kikuchi; artralgias inducidas por fármaco, tendinitis y miopatías. El compuesto (I) también se puede utilizar en el tratamiento de dolor y tejido conectivo que remodelan los trastornos músculo esqueléticos debido al daño [por ejemplo, daño por deporte] o enfermedad; artritis (por ejemplo, artritis reumatoide, osteoartritis , artropatía de gota o cristal) otras enfermedades de las articulaciones (tales como degeneración del disco intervertebral o degeneración de la articulación temporomandibular) , enfermedad o remodelación del hueso (tal como osteoporosis , enfermedad de Paget o osteonecrosis) , policondritis , escleroderma, trastorno tisular conectivo mixto, espondiloartropatías o enfermedad periodontal (tal como periodontitis ) . El compuesto (I) también se puede utilizar en el tratamiento de enfermedades de la piel tal como soriasis, dermatitis atópica, dermatitis de contacto u otras dermatitis eccematosas, y reacciones de hipersensibilidad de tipo retrasado; fito y fotodermatitis ; dermatitis seborreica, dermatitis herpetiformis , liquen plano, liquen escleroso y atrópico, Hipoderma gangrenosa, piel sarcoide, lupus eritematoso discoidea, pénfigos, pemfigoide, epidermólisis bulosa, urticaria, angioedema, vasculitis, eritemas tóxicos, eosinofilias cutáneas, alopecia areata, calvicie de patrón en hombres, síndrome de Sweet , síndrome de Weber-Christian, eritema multiforme; celulitis, tanto infecciosa como no infecciosa; paniculitis; linfornas cutáneos, cáncer de piel no de melanoma y otras lesiones displásicas; trastornos inducidos por fármacos incluyendo erupciones de fármacos fijas . El compuesto (I) también se puede utilizar en el tratamiento de enfermedades del ojo tales como blefaritis; conjuntivitis, incluyendo conjuntivitis alérgicas perene y primaveral; iritis; uveítis anterior y posterior, coroiditis; autoinmunitaria ; trastornos degenerativos e inflamatorios que afectan la retina; oftalmitis incluyendo oftalmitis simpatética ; sarcoidosis; infecciones incluyendo viral, micótica y bacteriana. El compuesto (I) también se puede utilizar en el tratamiento de enfermedades del tracto gastrointestinal tale como glositis, gingivitis, periodontitis ; oesofagitis, incluyendo reflujo; gastro-enteritis eosinofílica; mastocitosis ; enfermedad de Crohn, colitis incluyendo colitis ulcerativa; proctitis, pruritos ani; enfermedad del celiaco, síndrome de intestino irritable, diarrea no inflamatoria, y alergias relacionadas con los alimentos que pueden efectos remotos desde el estómago (por ejemplo, migraña, rinitis o eccema) . El compuesto (I) también se puede utilizar en el tratamiento de enfermedades del sistema cardiovascular tales como ateroesclerosis, que afectan la circulación coronaria y periférica; pericarditis; miocarditis, cardiomiopatías inflamatorias y autoinmunitarias incluyendo sarcoma del miocardio; daño de reperfusión isquémica; endocarditis, valvulitis, y aortitis incluyendo infección (por ejemplo, sifilítica); vasculitis; trastornos de las venas próxima y periférica incluyendo flebitis y trombosis, incluyendo trombosis de vena profunda y complicaciones de venas varicosas . El compuesto (I) también se puede utilizar en oncología tal como en el tratamiento de tumores malignos comunes incluyendo próstata, pecho, pulmón, ovario, pancreático, de intestino y colón, de estómago, piel y tumores cerebrales y malignidades que afectan la médula espinal (incluyendo las leucemias) y sistemas linfoproliferativos , tales como el linfoma Hodgkiniano y no Hodgkiniano; incluyendo la prevención y tratamiento de la enfermedad metastática y recurrencias de tumor, y síndromes paraneoplásicos . En particular, el compuesto (I) se puede utilizar en el tratamiento del síndrome de estrés respiratorio en adultos (ARDS, por sus siglas en inglés), fibrosis cística, enfisema pulmonar, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD, por sus siglas en inglés), hipertensión pulmonar, asma, rinitis, daño por reperfusión de isquemia, artritis reumatoide, osteoartritis, cáncer, ateroesclerosis y daño de la mucosa gástrico. Más particularmente, el compuesto (I) se puede utilizar en el tratamiento de enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) , asma y rinitis. Aún más particularmente, el compuesto (I) se puede utilizar en el tratamiento de enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) . Se espera que la profilaxis sea particularmente relevante para el tratamiento de personas que han sufrido de un episodio previo de, o por el contrario considerandos como estar en riesgo de, la enfermedad o condición en cuestión. Las personas con riesgo de desarrollar una enfermedad o condición particular generalmente incluyen aquellas que tienen un historial en la familia de enfermedad o condición, o aquellos que han sido identificados a través de ensayo genético o clasificación como siendo particularmente susceptibles a desarrollar la enfermedad o condición. Para las indicaciones terapéuticas antes mencionadas, la dosis del compuesto a ser administrado dependerá del daño que se está tratando, la severidad de la enfermedad, el modo de administración, la edad, peso y sexo del paciente. Los factores se pueden determinar por el médico que atiende. Sin embargo, en general, los resultados satisfactorios se obtienen cuando los compuestos se administran a ser humano a una dosificación diaria de entre 0.1 mg/kg a 100 mg/kg (medido como el ingrediente activo) . Los compuestos cristalinos de la fórmula (I) se pueden utilizar por sí mismos, o en la forma de formulaciones farmacéuticas apropiadas que comprenden el compuesto de la invención en combinación con un diluyente, adyuvante o portador farmacéuticamente aceptable. Los particularmente preferidos son composiciones que no contienen material capaz de causar una reacción adversa, por ejemplo, una reacción alérgica. Los procedimientos convencionales para selección y preparación de formulaciones farmacéuticas adecuadas se describen en, por ejemplo, "Pharmeceuticals - The Science of Dosage Form Designs", M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988. De acuerdo con la invención, se proporciona una formulación farmacéutica que comprende preferiblemente menos del 95% en peso y más preferiblemente menos del 50% en peso de un compuesto en la Forma G de la fórmula (I) mezclado con un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. También se proporciona para la preparación de las formulaciones farmacéuticas que comprenden la mezcla de los ingredientes . Los compuestos se pueden administrar tópicamente, por ejemplo, a los pulmones y/o las vías áreas, en la forma de soluciones, suspensiones, aerosoles HFA o formulaciones en polvo seco, por ejemplo, formulaciones en el dispositivo inhalador conocido como Turbuhaler®; o sistémicamente, por ejemplo, a través de administración oral en la forma de tabletas, pildoras, cápsulas, jarabes, polvos o granulos; o a través de administración parenteral (incluyendo inyección intraperitoneal, intravenosa, subcutánea o intramuscular) , por e emplo, en la forma de soluciones o suspensiones parenterales estériles; o a través de administración rectal por ejemplo, en la forma de supositorios. Las formulaciones en polvo seco y los aerosoles HFA presurizados de los compuestos de la invención se pueden administrar a través de inhalación oral o nasal; para la inhalación, el compuesto deseablemente se divide finamente. El compuesto finamente dividido preferiblemente tiene un diámetro medio de masa de menos de 10 un, y se puede suspender en una mezcla impulsora con la ayuda de un dispersante, tal como ácido graso de C8-C20 o una sal del mismo, (por ejemplo ácido oleico) , una sal biliar, un fosfolípidos, un alquilsacárido, un agente tensioactivo prefluorinado o polietoxilado, u otro dispersante farmacéuticamente aceptable . Los compuestos de la invención también se pueden administrar por medio de un inhalador de polvo seco. El inhalador puede ser un inhalador individual o de multidosis, y puede ser un inhalador de polvo seco accionado por la respiración. Una posibilidad es mezclar el compuesto finamente dividido con una sustancia portadora, por ejemplo, un mono-, di- o polisacárido, un alcohol de azúcar u otro poliol . Los portadores adecuados son azúcares, por ejemplo, lactosa, glucosa, rafinosa, melezitosa, lactitol, maltitol, trehalosa, sacarosa, manitol; y almidón. Alternativamente el compuesto finamente dividido puede recubrirse con otra sustancia. La mezcla en polvo también dispensar en cápsulas de gelatina dura, cada una que contienen la dosis deseada del compuesto activo. Otra posibilidad es procesar el polvo finamente dividido en esferas que se rompen durante el procedimiento de inhalación. Este polvo en esferas puede rellenarse en el depósito del fármaco de un inhalador multidosis, por ejemplo, el conocido como Turbuhaler® en donde una unidad de dosificación mide la dosis deseada la cual después se inhala por el paciente. Con este sistema el compuesto activo, con o sin sustancia portadora, se distribuye al paciente. Para la administración del compuesto activo se puede mezclar con un adyuvante o portador, por ejemplo, lactosa, sacarosa, sorbítol, manitol; un almidón, por ejemplo, almidón de papa, almidón de maíz o amilopectina; un derivado de celulosa por ejemplo, un aglutinante, por ejemplo, gelatina o polivinilpirrolidona; y/o un lubricante, por ejemplo, estearato de magnesio, estearato de calcio, polietilenglicol, una cera, una parafina y similar, Y después comprimirse en tabletas. Si se requieren tabletas recubiertas, los centros, preparados como se describió anteriormente, se pueden cubrir con una solución de azúcar concentrada que puede contener, por ejemplo, goma arábiga, gelatina, talco, dióxido de titanio y similares. Alternativamente, la tableta se puede recubrir con un polímero adecuado disuelto en un solvente orgánico fácilmente volátil . Para la preparación de cápsulas de gelatina suave, el compuesto se puede mezclar con, por ejemplo, un aceite vegetal o polietilenglicol . Las cápsulas de gelatina dura pueden contener granulos del compuesto utilizando cualquiera de los excipientes antes mencionados para las tabletas . También se pueden rellenar de formulaciones líquidas o semisolidas del fármaco en las cápsulas de gelatina dura. Las preparaciones líquidas para aplicación oral pueden estar en la forma de jarabes o suspensiones, por ejemplo, soluciones que contienen el compuesto, el balance siendo el azúcar y una mezcla de etanol, agua, glicerol, y propilenglicol . Opcionalmente las preparaciones líquidas pueden contener agentes de color, agentes saborizantes, sacarina y/o carboximetilcelulosa como un agente espesante u otros excipientes conocidos por los expertos en la técnica. En un aspecto más de la invención se proporcionan procedimientos novedosos para la síntesis del compuesto (I) . En particular, se describen nuevos procedimientos para la síntesis de modificaciones cristalinas del compuesto (I) . En particular, se describen nuevos procedimientos para la síntesis de la Forma G del compuesto (I) . Un procedimiento preferido para la síntesis del compuesto (I) se muestra en el Esquema de Reacción Esquema de Reacción 2 KCN, (NH4)2C03 (ll) 2-propanol AcOH AcOH, HjO (I) Rerlstalizacd.ái EtOH, Hfi Forma G Compuesto (I) En el Esquema de Reacción 2, la porción de azufre en los compuestos (II) , (III) y (V) está protegido como un derivado de S-bencilo. El experto en la técnica fácilmente apreciará que se pueden utilizar otros grupos protectores adecuados alternativamente como t-butilo. De esta forma, ya que por conveniencia las subsiguientes reacciones se muestran utilizando compuestos protegidos con S-bencilo, se entiende que también se pueden utilizar grupos protectores alternativos adecuados tales como t-butilo. La 5-cloro-2- (piperidin-4-ilosi ) -piridina (VI) es un sólido ceroso (p.m. aproximadamente 43SC) y como tal, la cristalización y el aislamiento de este material, particularmente a gran escala, no es ideal. La preparación de una sal tal como la sal de acetato (VII) permite que el compuesto se aisle como un sólido que se maneja más convenientemente. Las sales diferentes del acetato también se pueden utilizar. Las sales incluyen fosfato, mono-clorhidrato, di-clorhidrato, trimetilacetato , tartrato, citrato, fumarato, maleato, benzoato, mono-bromhidrato, di-bromhidrato, carbonato y hemi-carbonato . Las sales de carbonato son particularmente útiles ya que son termalmente lábiles de tal forma que la base libre se puede liberar in si tu simplemente a través de calentamiento. De esta forma, en un aspecto se describe un procedimiento mejorado para el aislamiento y manejo de 5- cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina (VI) que involucra la intervención de la sal de acetato de 5-cloro-2- (piperidin-4- iloxi ) -piridina (VII) . En otro aspecto, se describen nuevas sales de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi) -piridina (VI) , útiles como intermediarios en la preparación del compuesto (I) . En un procedimiento preferido, la síntesis del acetato de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina (VII) ventajosamente se lleva a cabo en un solvente tal como tolueno. El uso de tolueno como el solvente de reacción permite la reacción de 2 , 5-dicloropiridina con 4-hidroxipiperidina, lavados subsecuentes acuosos y la formación a sal a ser desarrollada en el mismo recipiente de reacción sin la necesidad de aislamiento de la base libre intermedia. Ya que el agua es un parámetro crítico en esta reacción (y 4-hidroxipiperidina es higroscópica) el uso de tolueno para azeotrópicamente remover el agua antes del inicio de la reacción representa una mejora significa y permite rendimientos consistentes a ser aislados, aún a una escala multi-kilogramo . La preparación de (RS) -5-metil-5- {[( fenilmetil ) tio]metil}imidazolidina-2 , 4-diona (III) de benciltioacetona (II) se describe en WO 02/074767. Comparado con las condiciones descritas en la presente se describe un procedimiento mejorado en donde el solvente orgánico se cambia de etanol a 2 -propanol y la cantidad de cianuro de potasio utilizada se reduce de 2 equivalentes a aproximadamente 1.00 a 1.02 equivalentes. En esta forma, el cianuro de potasio esencialmente se consume por completo en la reacción y la necesidad de manejar y disponer las soluciones que contienen grandes cantidades de cianuro potásico sin reaccionar se evitan. Además se describe que es particularmente ventajoso reducir la cantidad de carbonato de amonio utilizado de aproximadamente 5 equivalentes a aproximadamente 1.1 a 1.25 equivalentes. En esta forma la presión operativa máxima se reduce de aproximadamente 9 barg a aproximadamente 1.5 a 2.5 barg, una ventaja de seguridad significativamente, particularmente para trabajo a escala mayor. Utilizando estos parámetros revisados, la síntesis de (RS) -5-metil-5-{ [ ( fenilmetil) tio] metil}imidazolidina-2 , 4-diona (III) ha sido rutinariamente corrida en una escala muí ti -kilogramo . De esta forma, en otro aspecto se describen condiciones mejoradas para la preparación de (RS ) -5-metil-5-{[( fenilmetil ) tio] metil}imidazolidina-2 , 4-diona (III) de benciltioacetona (II) . Estas condiciones mejoradas son particularmente ventajosas para preparaciones a gran escala. Como se describe en WO 02/074767, la separación de (RS) -5-metil-5-{ [ ( fenilmetil ) tio]metil}imidazolidina-2 , 4-diona (III) en enantiómeros constituyentes se logra convenientemente a través de CLAR quiral utilizando una columna Chiralpak AD como la fase estacionaria y metal como eluyente. Como una alternativa que es particularmente conveniente para trabajo a escala mayor, se describe un procedimiento en donde la separación quiral se lleva a cabo bajo esencialmente las mismas condiciones pero utilizando cromatografía de cama en movimiento simulada (SMB) . En esta forma, (S) -5-metil-5-{ [ (fenilmetil) tio] metilj-imidazolidina-2, 4-diona (IV) en una escala de muí ti -kilogramo . El tiol no protegido, (RS) -5-metil-5-tiometil-imidazolidina-2 , 4-diona, es sorprendentemente estable y también puede ser conveniente resuelto a través de CLAR quiral utilizando una columna Chiralpak AD como la fase estacionaria e isohexano/etanol /dietilamina como la fase móvil. Como una alternativa para cromatografía quiral, se describen otras rutas para la imidazolidin-2 , 4-diona (IV) quiral . El uso de (S) -oc-metilbencilamina en la resolución de ciertos derivados de hidantoína, ha sido previamente descrito (WO 92/08702) . Se ha encontrado que la (RS) -5-metil-5-{ [ (fenilmetil) tio]metil}imidazolidina-2 , 4-diona (III) racémica se puede resolver a través de cristalización a partir de un solvente adecuado en la presencia de amina quiral y de una base tal como hidróxido de sodio. Los ejemplos de amina del grupo quiral incluyen (lS)-(-)-c- metilbencilamina, ( IR) - ( + ) -a-metilbencilamina, L-tirosinamida, (1S) - (-) -a- (1-naftil) etilamina, (1R) - (+) -a- (1-naftil ) etilamina, L- ( - ) -cinconidina, D- (+) -cinconina, (-)-quinina, (+) -ß-quinidina, ( IR, 2S )-(-) -efedrina, (2R)-(-)-2-amino-l-butanol , (2R) -1-amino-2 -propanol (D-alaninol) , (IR, 2S) - (-) -2-amino-l , 2-difeniletanol , N-metil-D- (-) -glucamina, (2S) - (+) -2-fenilglicinol , norefedrina, (-)-brucina, ( - ) -estriquina, ( + ) -yohimbina, (1S, 2S) - ( + ) - treo-2-amino-1- (p-nitrofenil ) -1, 3-propanodiol , (L) - (+) - treo-2-amino-1-fenil-1 , 3 -propanodiol , cis-mirtanilamina , ( IR, 2R) - ( - ) -1 , 2-diaminociclohexano y ( 2R) -(-) -2-amino-2-feniletanol . En un procedimiento preferido, la amina quiral es ( 1S ) - ( - ) -a-metilbencilamina . De esta forma, en un aspecto, se describe un procedimiento para la resolución de (RS) -5-metil-5-{ [ ( fenilmetil ) tio] metil}imidazolidina-2 , 4-diona ( III ) utilizando ( 1S ) -a-metilbencilamina racémico. En un procedimiento preferido, la amina quiral es ( 1S ) - ( - ) -a-metilbencilamina (1.0 a 2.0 equivalentes), la base es hidróxido de sodio (0.4 a 0.6 equivalentes) y el solventes agua (4 a 8 volúmenes). La cristalización después da (5S)-5-benciltiometil-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona (S) -oc-metilbencilamina de pureza enantiomérica alta, generalmente más de 95%. Además de la conversión de este material en (5S)-5-metil-5-{ [ ( fenilmetil ) tio] metil}imidazolidina-2 , 4-diona (IV) se puede efectuar bajo condiciones estándares, por ejemplo, utilizando 2N de ácido clorhídrico, o simplemente a través de recristalización a partir de una variedad de solventes adecuados incluyendo isopropilo acetato, metil isobutil cetona (MIBK) , tolueno, t-butilmetil metil éter (TBME) , y combinaciones de los solventes. La conversión de (5S) -5-benciltiometil-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona (S) -oc-metilbencilamina en (IV) también se puede efectuar simplemente convirtiendo en lechada el sólido en un solvente caliente adecuado tal como ciclohexano, dibutiléter o agua. De esta forma, la acción de calentar el co-cristal en solución, o como una lecha, causa la liberación de (RS)-5-metil-5-{[ ( fenilmetil ) tio] metil }imidazolidina-2 , 4-diona ( IV) libre el cual después se cristaliza en el enfriamiento. Una mejora quiral adicional se observa cuando se utilizan cualquiera de estos métodos para liberar (IV) . En otro aspecto, 2-amino-3-benciltio-2-metilpropionamida (VIII) (VIH) se puede resolver a través de cristalización partir de un solvente orgánico en la presencia de un áci quiral adecuado. Los ejemplos de ácidos del grupo quiral incluyen ácido (L) -tartárico, ácido (R) - ( - ) -mandélico, ácido dibenzoil- (L) -tartárico [DBTA] , ácido di-p- toluil- (L) -tartárico [DTTA] , ácido (L)-málico ácido [(2S)-(-)-2-hidroxisuccínico] , ácido ( 1S) - ( + ) -10-camforsulfónico [(D)-CSA] , ácido (IR, 3S) -( + ) -alcanfórico [ácido cis-alcanfórico] , ácido (L) -glutámico [ácido (2S) - ( +) -2-aminopentandioco] , ácido (L) -aspártico [ácido (S) - (+) -aminosuccinico] , ácido (L) -piroglutámico [ácido (S) - (-) -2-pirrolidon-5-carboxílico] , ácido clorhidrato (L)-ornitina [ácido (S) - (-) -2-pirrolidona-5-carboxílico] , clorhidrato (L)-ornitina [ácido (2S) - ( + ) -2, 5-diaminopentanóico] , (L) -histidina, (L)-lisina [ácido (2S)- (+) -2 , 6-diaminohexanóixo] (L) -arginina, N-acetil- (L) -fenilalanina, N-acetil- (L) -leucina, N-carbobenciloxi- (L) -alanina [ácido (2S) -2-benciloxicarbonilaminopropiónico] , ácido ( - ) -metiloxiacético, ácido N-acetil- (L) -tirosina y (2R) - (+) -2- (4-hidroxifenoxi ) propiónico . En un procedimiento preferido, el ácido quiral es ácido (R) -(-) -mandélico . De esta forma, en un aspecto, se describe un procedimiento la resolución de una 2-amino-3-benciltio-2-metilpropionamida racémica (VIII) utilizando ácido (R)-(-)-mandélica . En un procedimiento preferido, el ácido quiral es ácido (R) -(-) -mandélico y el solvente es una mezcla de metanol y acetato de isopropilo. La cristalización debe realizarse en la presencia de agua. En esta forma, se obtiene (2S) -2-amino-3-benciltio-2-metilpropionamida (R) -mandelato hemihidratado de una pureza enantiomérica alta. La pureza enantiomérica de esta sal además se puede mejorar a través de la recristalización de un solvente tal como acetato de isopropilo . En otro procedimiento preferido, el ácido quiral es ácido L-tartárico. De esta forma, en un aspecto, se describe un procedimiento para la resolución de 2-amino-3-benciltio-2-metilpropionamida racémico (VIII) utilizando ácido L-tartárico . En otro procedimiento preferido, el ácido quiral es ácido L-tartárico y el solventes es etanol . La recristalización del ( 2S) -2-amino-3-benciltio-2-metilpropiionamida (L)-tartrato resultante de un solvente adecuado tal como una mezcla de metanol y metil isobutil cetona entonces da el material de pureza enantiomérica alta. La conversión adicional de (2S) -2-amino-3-benciltio-2-metilpropionamida en ( 5S) -5-metil-5- {[( fenilmetil ) tio ] metil}imidazolidina-2 , 4-diona (IV) se puede lograr utilizando métodos que serán fácilmente evidentes para un experto en la técnica. Ver, por ejemplo, Tetrahedrom Asymm, 2001, 12, 101; Tetrahedrom, 1991, 47(12), 2133; y Chem. Ver., 1928, 1431. En otro aspecto, la 5-metil-5- {[( fenilmetil ) tio] metil}imidazolidina-2 , 4-diona quiral (IV) debe preparase a través de resolución biocatalitica (enzimática) de una molécula precursora racémica adecuada. Ciertas posibles rutas se indican en el Esquema de Reacción 3. Esquema de Reacción 3 resolución enzima resoluci enzim resolución Ph enzima Como se indica en el Esquema de Reacción 3, cualquier ácido (S) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metilpropionamida (IX) o (S) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metilpropiónico (X) puede servir como un precursor adecuado para la hidantoína quiral deseada (IV) . La resolución biocatalitica de la amida amino racémica (VIII) requiere el uso de amidasa que es capaz de aceptar esto en lugar de un tipo de sustrato estéricamente inhibido. El uso de amidasas Mycobacterium neoaurum ATCC 25795 o Ochrobacttrum anthropi NCIMB 40321. para resolución de amidas a-amino tetrasustituida Ca se describe en Tetrahedron, 2001, 57, 6567-6577. La Mycobacterium neoaurum probó ser una amidasa adecuada para la resolución de una amida amido particular (VIII), pero Ochrobactrum anthropi sorprendentemente dio una hidrólisis racémica. Otras amidasas que podrían ser exitosamente utilizadas en la resolución de la amida amino (VIII) incluyen Rhodococcus erthoplis y Pseudomonas fluorescens AL45. La resolución de amida amino (VIII) utilizando Pseudomonas Fluorescens AL45 se describe en WO 2005/123932. Como se muestra en el Esquema de Reacción 4, los resultados estereoquímicos de estas resoluciones biocatalíticas pueden convenientemente controlarse mediante la elección de la amidasa apropiada. Los procedimientos específicos típicos para la resolución biocatalítica de la amida de amino racémica (VIII) se dan en la sección de ejemplos de la presente solicitud y los procedimientos representan aspectos específicos de la presente invención.

Esquema de Reacción 4 M. neoarum (IX) (VIH) P. fluorescens o R. erthoplis (X) En un método biocatalítico alternativo, el ácido -ureido racémico (XI) se prepara a través de la hidrólisis de hidantoína (III) racémica o de el aminoácido racémico correspondiente, que se somete a un cierre de anillo catalizado con hidantoinasa (Esquema de Reacción 5) . Las hidantoinasas adecuadas incluyen Hidantoinasa 1 e Hidantoinasa 2 Roche. En un aspecto, se describe un procedimiento para la preparación de ( S ) -5-metil-5- {[( fenilmetil ) tio] metil}imidazolidina-2 , 4-diona (IV), útil como un intermediario en la síntesis de (5S) -5- [4- (5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonil-metil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, que comprende el uso de hidantoinasa enzima para efectuar el cierre de anillo de el ácido (RS)-3- bencilsulfanil- 2-metil- 2-ureido-propiónico (XI). En un aspecto adicional, la hidantoinasa enzima es Hidantoinasa 1 o Hidantoinasa 2 Roche. Los métodos biocatalíticos alternativos para la resolución de ácido de a-ureido se describen en EP 0 175 3 12 (Kanegafuchi) y WO 03 / 10 6 6 89 (Kaneka) . Esquema de Reacción 5 (XI) (IV) En un método biocatalítico alternativo (Esquema de Reacción 6 ) el racemato del aminoácido (X) se convierte en el aminoácido protegido con trifluoroacetilo correspondiente (XII) que después se somete a una hidrólisis catalizada por aminoácido acilasa. Las aminoácido acilasas adecuadas incluyen Aspergillus sp. , acilasa de riñon L-Hog y L-acilasa de Penicillium sp. Otras acilasas adecuadas son fácilmente evidentes para un experto en la técnica. Esquema de Reacción 6 Sorprendentem los sustratos más tradicionales tales como N-acetil o N-cloroacetil amidas correspondientes al compuesto (XII) fallaron al demostrar cualquier reacción con L-amino ácido acilasa. El experto en la técnica fácilmente apreciará que la trifluoroacetilo amida (XII) podría ser reemplazada por otras aminas activadas y que la selectividad de la resolución podrían invertirse sustituyendo una D-amino ácido acilasa, por lo tanto facilitando la cristalización directa de (S)-amino ácido de la mezcla de reacción . En un aspecto, se proporciona un procedimiento para la preparación de ácido (R)- o (S) -2-amino-3-bencilsulfanil-2 -metil-propiónico , útil como intermediarios en la síntesis de (R) - o (S) -5-metil-5- { [ ( fenilmetil ) tio]metil}imidazolidina-2 , 4-diona, que comprende tratar una amida activada de ácido (RS) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propiónico con una acilasa enzima adecuada. En un aspecto particular la amida activada es una amida de trifluoroacetilo . En otro aspecto, la 5-metil-5- {[( fenilmetil ) tio] metil}imidazolidina-2 , 4-diona quiral (IV) se puede preparar a través de eliminación de la simetría biocatalítica (enzimática) de una molécula precursora a quiral adecuada {meso) . Las transformaciones enzimáticas que se han descrito anteriormente todas son resoluciones por lo tanto el rendimiento máximo teórico del estereoisómero adecuado es de 50%. En contraste, la eliminación de la simetría de los compuestos proquirales simples (meso) pueden en teoría producir 100% del estereoisómero deseado. Ciertas posibles rutas se indican en el Esquema de Reacción 7. Esquema de Reacción 7 De esta forma, los meso-precursores adecuados tales como nitrilo (XIII), la mida (XIV) o a un éster (XV) puede eliminársele la simetría utilizando un enzima adecuada por lo tanto dando los precursores de hidantoína quirales mostrados anteriormente. Los grupos R adecuados para estos ásteres (XV) incluyen alquilo de Cl a 4. Los meso-precursores requeridos pueden prepararse utilizando métodos análogos a aquellos en la literatura. Ver, por ejemplo, J. Org. Chem. , 1995, 60(17), 5487; J. Chem. Soc, Perkin Trans . 1, 1991, 4, 2589; Synth. Co m, 2001, 1323; y Inorg. Chem., 2003, 42(9), 2950. La síntesis de los meso-precursores específicos se describe en la sección de e emplos . Las enzimas potenciales para quitar la simetría del meso-nitrilo (XIII) se describe en, por ejemplo, Tetrahedrom Asym., 2004, 15, 2817; Tetrahedrom Asym. , 2001, 12, 3367; Tetrahedrom Asym., 1993, 4, 1081; y J. Org. Chem., 2003, 68, 2479. La eliminación de simetría de la meso-amida (XIV) se logró utilizando la Rhodococcus erthoplis amidasa. La amida ácida quiral resultante (XVI) después además se transformó en una secuencia de un solo recipiente para dar la hidantoína quiral (IV) con un excelente ee. La eliminación de la simetría de un meso-S-t-butil metil éster utilizando Estearasa de Hígado de Puerco ha sido previamente descrita (J. Org. Chem., 2003, 68(13), 5403).

Ahora se ha demostrado que el /neso-S-bencil etil éster (XV, R = Et) también es un sustrato para esta enzima. La eliminación de la simetría prosiguió en línea con la literatura precedente, dando (después de la reconfiguración Curtius del éster ácido inicialmente formado (XVII) y la hidrólisis del éster subsiguiente), el (R)-amino ácido (X) en 60-80% ee. Además se ha establecido que las transformaciones de eliminación de simetría similares pueden lograrse utilizando representantes de dos diferentes clases de enzimas, principalmente, Bacillus licheniformis y un amino ácido acilasa. En el caso de eliminación de simetría utilizando Bacillus licheniformis proteasa la transformación prosiguió con la estereoselectividad inversa para dar el ácido (S) -éster. Este ( S ) -éster/ácido además se convirtió en el aminoácido correspondiente, la configuración absoluta y la pureza quiral del cual se determinaron a través de la comparación con una muestra auténtica. Siguiendo los métodos bien conocidos en la literatura (ver, por ejemplo, Chem. Rev., 1950, 46, 403), el aminoácido en (S) -5-metil-5-{[ (fenilmetil) tio]metil}imidazolidina-2 , 4-diona (IV) . De esta forma, en un aspecto más, se describe un procedimiento para la síntesis de (S) -5-metil-5- {[( fenilmetil ) tio]metil}imidazolidin, 2 , 4-diona (IV), útil como un intermediario en la síntesis del compuesto (I), que comprende la eliminación de la simetría enzimático de un /neso-nitrilo (XIII) , o una meso-amida (XIV) o un zneso-éster (XV) . En un aspecto particular, se describe un procedimiento en donde se elimina la simetría de la meso-amida ( (XIV) utilizando una amidasa enzima adecuada. En otro aspecto particular, la amidasa es Rhodococcus erthoplis amidasa. En las resoluciones biocatalíticas anteriores, la enzima puede, cuando es apropiado, utilizarse como tal o en una forma inmovilizada (soportada) . En otro aspecto, 5-metil-5- {[( fenilmetil ) tiojmetiljimidazolidin, 2 , 4-diona quiral (IV) se puede preparar a través de una síntesis asimétrica. La reacción Strecker asimétrica es un método importante para la síntesis de aminoácidos de , a-dialquilo . El (R) -fenilglicinol es un auxiliar quiral típico para utilizarse en las reacciones (Tetrahedrom, 2001, 57, 6383-6397). De esta forma, la condensación de benciltioacetona (II) con (R) -(-) fenilglicinol dio la oxazolidina (XVIII) como una mezcla de diaestereómero . La reacción de la oxazolidina (XVIII) con trimetilsililcianuro entonces dio el amino nitrilo (XIX) como una mezcla de diaestereómeros en una proporción de 85:15. La recristalización de esta mezcla de un solvente adecuado tal como iso-hexano incrementó la proporción diaestereomérica (XIX) a más de 99:1 (Esquema de Reacción 8) . Esquema de Reacción 8 HBr, AcOH Bn = PhCH, (XXII) El tratamiento del aminonitrilo (XIX) con un equivalente de agua en la presencia de gas de cloruro de hidrógeno entonces dio la lactona (XX) . La reacción con cianato de potasio seguido por la remoción de la cadena lateral utilizando cloruro ácido en ácido acético entonces dio la hidantoína quiral (XXII).

Alternativamente, el tratamiento del amino nitrilo (XIX) con clorosulfonil isocianato dio la mezcla que comprende las hidantoinas (XXI; R = H) y (XXI; R = CONH2) , en donde la mezcla cuando se trató con bromuro de ácido en ácido acético dio la (R) -hidantoína (XXII). Al utilizar (S) -fenilglicinol como el auxiliar quiral, se obtuvo la (S) -hidantoína enantiomérica . En un aspecto, se describe un procedimiento para la síntesis de (R)- o (S) -5-metil-5-{[( fenilmetil ) tio]metil}imidazolidin, 2 , 4-diona que comprende una abertura de anillo de una oxazolidina marcada auxiliar quiral (XVIII) . Además de describe la síntesis de hidantoinas quirales utilizando la catálisis de transferencia de fase asimétrica. Los procedimientos asimétricos catalíticos son especialmente atractivos a este respecto y a que permiten el uso de cantidades sub-estequiométricas del elemento de control quiral, que por lo general es el reactivo más costoso en el procedimiento. La catálisis de transferencia de fase quiral ofrece además ventajas porque típicamente involucra condiciones medias, procedimientos de reacción simples, reactivos seguros y no costosos y solventes . El uso de órganocatalizadores (catalizadores sin metales), y la posibilidad de conducir las reacciones ya sea a pequeña o gran escala. Sin embargo, la construcción de los compuestos que contienen centros estereogénicos cuaternarios (carbonos con cuatro diferentes grupos no de hidrógeno) a través de procedimientos enantioselectivos catalíticos continúa siendo un reto. Una ruta adecuada que hace posible la construcción de dicho centro estereogénico cuaternario se indica en el Esquema de Reacción 9. Esquema de Reacción 9 (XXIII) (XXIV) Hidrólisis (X) (IV) R = Pr1 o Bu1 Ar = Ph, 2-naftil o Cl-Ph En un paso inicial, se condensó t-butil (DL) -alaninato o isopropil (DL) -alaninato con un derivado de carbonilo adecuado tal como benzaldehído, clorobenzaldehído o 2-naftaldehído para dar un éster de imina (XXIII) . Preferiblemente se utilizó éster t-butilo. Esta imina después se alquilo con bromometilsulfanilmetilbenceno en la presencia de una base adecuada y un catalizador de transferencia de fase quiral adecuado para dar la imina (XXIV) . Las fases adecuadas incluyen, por ejemplo, hidróxido de potasio, hidruro de sodio, hidróxido de cesio, e hidróxido de rubidio. Los catalizadores de transferencia de fase adecuados incluyen, por ejemplo, bromuro de (-) -O-alil-N- (9-antracenilmetil ) cinconidinio y bromuro de (+) -O-alil-N- (9-antracenilmetil ) cinconidinio . La selección del catalizador de transferencia de fase pseudo-enantiomérico correcto (antípoda) permite la estereoquímica absoluta de la imina resultante, a ser controlada. Otros catalizadores de transferencia de fase quirales adecuados serán fácilmente evidentes para un experto en la técnica. La hidrólisis de la imina (XXIV) después produjo el -aminoácido (X) . Al seccionar los reactivos correctos y las condiciones de reacción correctas, la a-aminoácido (X) quiral, o el enantiómero de la misma se obtiene con una alta pureza enantiomérica . En un aspecto particular, los procedimientos específicos descritos en los ejemplos anexos se reivindican específicamente. En un aspecto, se proporciona un procedimiento para la preparación de ácido (R) - o (S) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propiónico, útil como intermediario en la síntesis de (R)- o (S) -5-metil-5-{[ ( fenilmetil ) tio]metil}imidazolidin, 2 , 4-diona, que comprende la alquilación de un éter de imina (XXIII) en la presencia de un catalizador de transferencia de fase quiral adecuado. En un aspecto particular, el catalizador de transferencia de fase es bromuro de (-)-O-alil-N- ( 9-antracenilmetil ) cinconidinio o bromuro de (+)-0-alil-N- ( 9-antracenilmetil ) -cinconidinio . El experto en la técnica fácilmente apreciará que en el procedimiento anterior el átomo de azufre podría alternativamente estar protegido por un grupo diferente del bencilo. El -aminoácido quiral (X) además se puede convertir en la hidantoína quiral (IV) utilizando procedimientos de la literatura. Ver, por ejemplo, Chem. Rev., 1950, 46, 403. La preparación de cloruro de ( (S) -4-metil-2 , 5-dioxo-imidazolidin-4-il ) -metansulfonilo (V) de (S) -5-metil-5-{[( fenilmetil ) tiojmetiljimidazolidin, 2 , 4-diona (IV) a través de clorinación directa en ácido acético acuoso se describe en WO 02/074767. Los nuevos procedimientos alternativos para la preparación de cloruro de sulfonilo (V) se describen en la solicitud de patente co-pendiente, US 60/782892. Para el acoplamiento con el cloruro de sulfonilo (V) , la sal de acetato de éster de piridinilio (VII) primero debe recuperarse en la base libre correspondiente (VI) . Esta conversión puede lograrse utilizando una base tal como carbonato de sodio en la presencia de un solvente de éster tal como acetato de etilo o acetato de isopropilo. En un procedimiento preferido, la conversión se logra en un sistema bifásico mediante la suspensión de la sal de acetato en tolueno y utilizando un hidróxido de sodio acuoso como base. El uso de tolueno permite un más eficiente secado de la solución de la base libre (VI) a través de destilación azeotrópica. Esta es una ventaja importante ya que la reacción de acoplamiento del compuesto (VI) con el cloruro de sulfonilo (V) es particularmente sensible a la presencia de agua. En cualquier caso, la solución obtenida de la base libre (VI) en ya sea acetato de isopropilo o tolueno después se hace reaccionar directamente con cloruro de sulfonilo (V) en la presencia de una base adecuada tal como diisopropiletilamina y utilizando tetrahidrofurano como el co-solvente. En esta forma, el compuesto (I) es conveniente y eficientemente preparado aún a una escala de muíti-kilogramo . En un aspecto, se describe un procedimiento para la preparación del compuesto (I) que involucra la reacción de cloruro de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) piridina (VI) con ( ( S ) -4-metil-2 , 5-dioxo-imidazolidin-4-il ) -metansulfonilo (V) en donde el compuesto (VI) se prepara a través de la liberación de la base libre de una sal correspondiente. En un aspecto más particular, el compuesto (VI) se prepara a través de la liberación de la base libre de la sal de acetato de 5-cloro-2- (piridin-4-iloxi ) -piridina (VII) . Las modificaciones no cristalinas del compuesto (I) se describen en O 02/074767. Se encontró que el compuesto (I) , preparado a través de un método sintético, se puede cristalizar utilizando etanol acuoso o alcoholes metilados industriales acuosos como un solvente para dar de manera reproducible la modificación G del compuesto (I), independientemente de la modificación polimórfica del material de entrada. La identificación de las modificaciones polimórficas diferentes y su cristalinidad se investigaron utilizando los siguientes instrumentos y métodos. Difracción de Polvo de Rayos X (XPRD) SE hicieron las mediciones XRPD utilizando ya sea: i) Un instrumento Scintag Inc. XDS 2000 con los siguientes parámetros : CuK« (1.5418Á) 45 kV y 30 mA 2 ° < 2T < 40 0 1 °/min, incr. 0.03 0 Disco de cuarzo giratorio Condiciones ambientales Se colocaron aproximadamente 10 mg de la muestra de prueba en el soporte de muestras y se repartieron en la superficie de cuarzo utilizando una barra de teflón plana; o ii) Un instrumento X'Pert PRO MPD analítico con los siguientes parámetros: CuKa (1.5418Á) 45 kV y 40 mA 2 0 < 2T < 40 0 1 °/min, incr. 0.016 0 Microplaqueta de silicón giratoria Condiciones ambientales Se colocaron aproximadamente 2 mg de la muestra de prueba en el soporte de muestra y se distribuyeron en la superficie de silicón utilizando una barra de teflón plana. Calorimetría (DSC) La respuesta calorimétrica de una muestra de prueba para incrementar la temperatura se investigó utilizando un Calorímetro de Exploración Diferencia de Temperatura Modulada Q1000 (MTDSC) (TA Instruments) utilizando diferentes métodos, las características principales siendo: Modo normalmente modulado ("calor solamente") con una velocidad de rampa de 5°C/min (pero también 1 y 20°C/min se utilizaron sin modulación) . El intervalo de temperatura fue de por debajo de temperatura ambiente a por arriba de 200°C. Se colocaron aproximadamente 2 mg de la muestra de prueba en copas de aluminio con una tapa (sin arrugar) . Análisis Gravimétrico (TGA) La respuesta gravimétrica de muestras de prueba para incrementar temperaturas se investigó utilizando el Analizador Gravimétrico Térmico (TGA) (TA Instruments) utilizando los siguientes parámetros: Velocidad de calentamiento (normalmente) : 5°C/min Se colocaron aproximadamente 2 a 5 mg de la muestra de prueba en una copa y se calentó justo por arriba de 200°C. Interacción de Humedad Las respuestas gravimétricas de las muestras de pruebas a cambios en humedad se investigaron utilizando ya sea un instrumento de absorción de vapor gravimétrico (GVS) SGA 100 (VTI Corporation) o un DVS2 (Sistema de Medición de Superficie) con las siguientes características: Secar a 90% RH y de regreso en pasos de, por ejemplo 10% RH . Condiciones de equilibrio: <0.01 en porcentaje en peso por 10 minutos (<0.001 en porcentaje en peso/min) . Se colocaron aproximadamente 5 mg de la muestra de prueba en la copa y se evaluaron. Morfología La morfología del compuesto de prueba se investigó utilizando un Microscopio de Electrón de Exploración Jeol JSM-5200 (SEM) utilizando una ampliación de hasta 500 veces. Se rociaron unas cuantas partículas en el soporte de la muestra con una cinta pegajosa de carbono y se recubrieron con una capa de oro delgada y se investigaron.

Métodos Químicos Generales Se registró el espectro 1H MR y 13C NMR en un instrumento Varían Unity Inova de 300 MHz o Varían Unity Inova de 400 MHz. Los picos centrales de cloroformo d (¾ 7.27 ppm) , dimetilsulfóxido de ( (¾ 2.50 ppm) , acetonitrilo dj (d? 1.95 ppm) o metanol d4 (¾ 3.31 ppm) se utilizaron como referencias internas. La cromatografía de columna se llevó a cabo utilizando gel de sílice (0.040-0.063 mm, Merck) . Los materiales de partida estuvieron comercialmente disponibles a menos que se manifieste lo contrario. Todos los solventes y reactivos comerciales fueron de grado de laboratorio y se utilizaron cuando se recibieron. A menos que se declare lo contrario, las operaciones se condujeron a temperatura ambiente, típicamente de 20 a 25°C. El análisis LC se llevó a cabo utilizando los instrumentos CLAR Agilent 1100. Se utilizaron varios métodos LC utilizados para el análisis del producto. El análisis LCMS se llevó a cabo utilizando CLAR WATERS 2790 CLAR, con un Detector de Arreglo de Fotodiodos 996, y un Espectrómetro de Masa de Cuatro Polos Individual MicroMass ZMD, con interfaz de Z-aspersión. Abreviaturas : vol eq. gramos de sustancia limitante expresada como un volumen Ac acetilo DCM diclorometano DMF N, N-dimetilformamida DMSO sulfóxido de dimetilo ep pureza enantiomérica eq equivalente IMS alcoholes industriales metilados LDA diisopropil amida de litio MIBK metil isobutil cetona RT temperatura ambiente TBME ter-butil metil éter THF tetrahidrofurano TFA ácido trifluoroacético Ejemplo 1 Acetato de 5-Cloro-2- (piperidin-4-iloxi) -piridina Se suspendió 4-Hidroxipiperidina (12.1 g, 0.12 moles, 1.18 moles eq.) en tolueno (120 mi) para dar una suspensión de color naranja. La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 15 minutos (temperatura de cubierta 115 °C) . Se formó una solución de color naranja entre 85-90°C y se observó algo de aceite en la cámara de agitación y la sonda de temperatura. Se removió tolueno (26 mi) por destilación. La mezcla de reacción se enfrió a 20°C durante 15 minutos. Se precipitó un sólido blanco a aproximadamente 30 a 35°C. En un recipiente separado, se suspendió ter-BuOK (13.4 g, 0.12 moles, 1.18 moles eq. ) en tolueno (150 mi).

Esta suspensión se agregó a la mezcla de 4-hidroxipiperidina anterior a 20°C. Después se llevó a cabo un lavado de línea de tolueno (11 mi) . La suspensión espesa resultante se calentó a 50°C durante 30 minutos con agitación vigorosa. Se agregó una solución de 2 , 5-dicloropiridina (15 g, 0.10 moles, 1 moles eq.) en tolueno (45 mi), a la lechada a 50°C durante aproximadamente 1 hora, seguido por un lavado de línea de tolueno (11 mi). La mezcla de reacción se calentó a reflujo (aprox. 105-107°C) durante 70 minutos y después se calentó a reflujo durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente durante 30 minutos y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se lavó con agua (2 x 75 mi) después se calentó a 90°C durante 1 h. Se agregó una solución de ácido acético glacial (6.1 g, 0.10 moles, 1 moles eq. ) en tolueno (60 mi) a la mezcla a 90°C en una porción, seguido por un lavado de línea de tolueno (15 mi) . Después de completar la adición, la solución se enfrió a temperatura ambiente durante 70 minutos. El acetato de 5-cloro-2-(piperidin-4-iloxi ) -piridina requerido se precipitó durante el enfriamiento. Después de agitar durante 1 h a temperatura ambiente, la suspensión se filtró y la torta se lavó con tolueno (2 x 75 mi) . Después de secar en un horno de vacío a 50°C durante la noche, el producto se obtuvo en 85 a 95% de rendimiento. ¾ RMN (400 MHz, D2O) d 8.1 (1H, d) , 7.8 (1H, dd) , 6.9 (1H, d), 5.0 (1H, m), 3.4 (4H, m) , 2.2 (4H, m) , 1.9 (3H, s).

Sales Alternativas de 5-Cloro-2- (piperidin-4-iloxi) -piridina Se agregó el ácido apropiado (ya sea en un solvente para ácidos minerales; o como un sólido para ácidos orgánicos; o, para la sal de carbonato, se hizo burbujear gas C02 en la solución) a una solución de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina en tolueno a temperatura ambiente. Se agregó más tolueno y la solución resultante se agitó hasta que ocurrió la cristalización. El sólido formado se recolectó a través de filtración y se lavó con iso-hexano. Los Ejemplos de ácidos utilizados para este procedimiento incluyen: - Ácido fosfórico acuoso: XH RMN (D20) d 2.10 (2H, m) , 2.20 (2H, m) , 3.28 (2H, m) , 3.45 (2H, m) , 5.15 (1H, m) , 5 6.91 (1H, d, J 8.8 Hz) , 7.78 (1H, d, 8.8 Hz), 8.10 (1H, s). - Ácido clorhídrico (en propanol)- utilizado para hacer las sales de mono- y di-clorhidrato. Mono-HCl, XH RMN (d6-DMSO) d 1.91 (2H, m) , 2.14 (2H, m) , 3.07 (2H, m) , 3.21 (2H, m) , 5.19 (1H, m) , 6.90 (1H, d, J 9.6 Hz), 7.83 (1H, d, J 9.6 Hz), 8.21 (1H, s), 9.17 (2H, bs) . o P.f. 156°C. Di-HCl, XH RMN (d6-DMSO) d 1.93 (2H, m) , 2.16 (2H, m) , 3.08 (2H, ) , 3.20 (2H, m) , 5.20 (1H, m) , 5.27 (1H, bs), 6.91 (1H, d, J 9.2 Hz), 7.83 (1H, d, J 9.2 Hz) , 8.21 (1H, s), 9.35 (2H, bs) . P.f . 131°C. - Ácido trimetilacético ?? RM (d6-DMSO) d 1.10 (9H, s), 1.48 (2H, m) , 1.93 (2H, m) , 2.58 (2H, m) , 2.95 (2H, m) , 4.99 (1H, m) , 6.83 (1H, d, J 8.8 Hz) , 7.77 (1H, d, J 8.8 Hz) , 8.18 (1H, s). P.f. 91-96°C. - Ácido tartárico XH RMN (D20) d 2.10 (2H, ra), 2.21 (2H, m) , 3.29 (2H, m) , 3.46 (2H, m) , 4.53 (2H, s), o 5.17 (1H, m) , 6.93 (1H, d, J 9.2 Hz), 7.80 (1H, d, J 9.2 Hz) , 8.12 (1H, s). - Ácido Cítrico Hemi-citrato, XH RMN (D20) d 2.10 (2H, m) , 2.21 (2H, m) , 2.64 (1H, d, J 15.2 Hz), 2.73 (1H, d, J 15.2 Hz), 3.28 (2H, m) , 3.46 (2H, m) , 5.16 (1H, bs), 6.915 (1H, d, J 8.8 Hz) , 7.79 (1H, d, J 8.8 Hz), 8.10 (1H, s). P.f. 88°C. - Ácido Fumárico XR RMN (CD3OD) d 2.05 (2H, m) , 2.20 (2H, m) , 3.23 (2H, m) , 3.39 (2H, m) , 5.30 (1H, m) , 6.72 (2H, s), 6.83 (1H, d, J 8.8 Hz), 7.70 (1H, d, J 8.8 Hz), 8.11 (1H, s). P.f. 128°C. - Ácido Maleico XH RMN (d6-DMSO) d 1.85 (2H, m) , 2.13 (2H, m) , 3.13 (2H, m) , 3.27 (2H, m) , 5.20 (1H, 0 m) , 6.12 (2H, s), 6.90 (1H, d, J 9.2 Hz), 7.83 (1H, d, J 9.2 Hz), 8.21 (1H, s), 8.48 (2H, bs) . P.f. 96-104°C. - Ácido Benzoico XH RMN (d6-DMSO) d 1.66 (2H, m) , 2.02 (2H, m) , 2.80 (2H, m) , 3.09 (2H, m) , 5.08 (1H, m) , 6.86 (1H, d, J 8.8 Hz) , 7.40 (2H, t, J 9.6), 7.48 (IH3 d, J 9.6 Hz), 7.79 (1H, d, 8.8 Hz), 5 7.91 (2H, d, J 9.6 Hz), 8.19 (1H, s) . P.f. 140°C. - Ácido Bromhídrico (acuoso) - utilizado para hacer las sales de mono- y di-bromhidrato Mono-HBr, H RMN (d6-DMSO) d 1.90 (2H, m) , 2.15 (2H, m) , 3.12 (2H, m) , 3.25 (2H, m) , 5.19 (1H, m) , 6.91 (1H, d, J 8.8 Hz), 7.85 (1H, d, J 8.8 Hz), 8.21 (1H, s) , 8.80 (2H, bs). P.f. 198°C. Di-HBr, XH RMN (d6-DMSO) d 1.91 (2H, m) , 2.16 (2H, m) , 3.15 (2H, m) , 3.26 (2H, m) , 5.21 (1H, m) , 6.92 (1H, d, J 9.2 Hz), 7.84 (1H, d, J 9.2 Hz) , 8.21 (1H, s) , 8.76 (2H, bs). P.f. 183°C. - Ácido Carbónico (gas C02) Hemi -carbonato, XH RMN (d6-DMSO) d 1.53 (2H, m) , 1.94 (2H, m) , 2.59-3.02 (4H) , 5.04 (IH), 6.84 (1H, d, J 8.7 Hz), 7.77 (1H, d, J 8.7 Hz), 8.17 (1H, s) . Ejemplo 2 (RS) -5- ethyl-5-{ [ (phenylmethyl)thio]methyl}imidazolidine-2#4-dione Se cargó un reactor con presión graduada de tamaño adecuado con benciltioacetona (95% de pureza) (85.26 g, 450 mmoles, 1 moles eq. ) , agua (413 mi) y 2-propanol (146 mi). La mezcla se agitó durante aproximadamente 15 minutos para lograr la homogeneidad. Después se cargó carbonato de amonio (49.56 g, 509 mmoles, 1.13 moles eq.) y cianuro de potasio (30.54 g, 460 mmoles, 1.02 moles eq.). La mezcla de reacción se calentó a 90°C, lo que indujo una presión de aproximadamente 2.5 barg. La reacción se enfrió y se analizó por LC para desaparecer el material de partida. Después de completar la reacción, el producto requerido se dejó cristalizar. Si es necesario, la cristalización se indujo por sembrado. Después de la cristalización, se cargaron agua (971.9 mi) y ácido clorhídrico concentrado (96.7 g) a la mezcla de reacción. Esto originó un cambio de pH de alrededor de 11.9 a 7.4. La masa cristalina se filtró y subsiguientemente se lavó con acetato de isopropilo. Después del secado, se obtuvo el compuesto del título como un sólido cristalino blanco en 86% de rendimiento. XH RMN (d6-DMSO) d 10.74 (1H, s), 8.00 (1H, s), 7.35-7.20 (5H, m) , 3.76 (2H9 s), 2.72, 2.262 (2xlH cada inp, Abq) , 1.29 (3H, s) . Ejemplo 3 (S) -5-Metil-5- { [ (fenilmetil) tio]metil}imidazolidin- 2 , 4-diona Se separó (RS ) -5-Metil-5- {[( fenilmetil ) tio] metil } imidazolidin-2 , 4-diona en los enantiómeros del componente utilizando cromatografía de cama movible simulada (SMB, por sus siglas en inglés ) quiral preparativa. Se utilizó la misma fase estacionaria quiral y de fase móvil como se describe en WO 02/074767 (página 89). Los enantiómeros se recuperaron en un rendimiento esencialmente cuantitativo. La (S) -5-bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin-2, 4-diona resultante (5 g) en solución metanólica se redujo en volumen (a aproximadamente 20 mi) bajo presión reducida a 35°C. Se agregó agua (40 mi) a la solución por goteo, manteniendo la temperatura interna a 35°C. Después de agregar alrededor de la mitad del agua, el producto se empezó a precipitar. La mezcla se dejó enfriar lentamente a temperatura ambiente y después se enfrió en un baño helado a 2°C. El producto (4.56 g, 91% teórico después de separación SMB) se recolectó por filtración a 2°C como un sólido cristalino blanco. En una escala de 5.86 kg, el producto de este paso de recristalización se aisló en 98% de rendimiento (5.73 kg) . La (S) -5-Metil-5-{[ (fenilmetil) tiojmetil} imidazolidin-2 , 4-diona también se puede cristalizar de otras mezclas de metanol incluyendo metanol/tolueno o metanol /dibutiléter . Se puede recristalizar de un intervalo de solventes incluyendo tolueno, di-isopropiléter , dibutiléter y agua. 1H RM (300 MHz, d6-DMSO) d 10.74 (1H, s), 8.00 (1H, s), 7.35-7.20 (5H, m) , 3.76 (2H, s), 2.72, 2.262 (2xlH cada uno, ABq) , 1.29 (3H, s) . La pureza quiral del producto se estableció por LC utilizando CLAR serie 25 Hewlett Packar 1100 ajustada con un detector de arreglo de diodos; una columna Astee Chirobiotic V de 50 mm x 4.6 mía; 70:30 isohexano : etanol como fase móvil? temperatura de horno 55°C; velocidad de flujo 1.0 ml/minuto? detección a 210 nm; volumen de inyección 1 µ?; y tiempo de corrida de 5 minutos. Los tiempos de retención para los isómeros (S)- y (R)- fueron de 2.6 y 3.8 minutos respectivamente . Ejemplo 4 Cloruro de ( (S) -4- etil-2, 5-dioxo-imidazolidin-4-yl) -metansulfonilo Método 1 Se disolvió (S) -5-Bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona (106.9 g, 427.1 mmoles, 1.000 moles eq.) en una mezcla de ácido acético glacial (8 vol eq. ) y agua (1 vol eq.) y se enfrió a aproximadamente 4°C. Después se hizo pasar gas de cloro (96.9 g, 3.2 moles eq. ) en la solución bien agitada a una velocidad constante durante aproximadamente 1 h de tal forma que la temperatura de la mezcla de reacción se mantuvo entre 12 y 15 °C a lo largo de la mayor parte de la adición (la temperatura de cubierta se mantuvo a 4°C siempre) . Después de que se completó la reacción (la mezcla se cambió a un color verde característico y la temperatura disminuyó notablemente) , la mezcla se roció con nitrógeno y se calentó a aproximadamente 30°C para dar una lechada blanca. El volumen del solvente después se removió por destilación al vacío. Se agregó tolueno (534.5 mi) y se removió un volumen similar de solvente por destilación bajo vacío. La adición/destilación de tolueno se repitió una vez más. Después se agregó Isohexano (534.5 mi) al residuo y la mezcla se enfrió a 20°C. Después de la agitación, el producto se recolectó por filtración. El sólido recolectado se lavó con isohexano (213.8 mi) y se secó a un peso constante al vacío a 40°C para dar el cloruro de sulfonilo requerido como un sólido cristalino blanco (95.5 g, 98.7%) . XH RMN (300MHz, d8-THF) d, 9.91 (1H, bs ) , 7.57 (1H, s), 4.53, 4.44 (2 x 1H, cada uno ABq) , 1.52 (3H, s). Método 2 Se disolvió (S) -5-Bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona (50 g, 199 J A inmoles) en una mezcla de ácido acético glacial (8 vol . eq. ) y agua (4 moles eq. ) y se enfrió a aproximadamente 4°C. Después se hizo pasar gas de cloro en la solución bien agitada a una velocidad constante durante aproximadamente 1 hora de tal forma que la temperatura de la mezcla de reacción se mantuvo a aproximadamente 12 °C a lo largo de la mayor parte de la adición (el controlador Huber se configuró para mantener la temperatura de reacción a 12 °C) . Después de que se completó la reacción (la mezcla se cambió a un color verde característico y la temperatura disminuyó notablemente) , la mezcla se roció con nitrógeno y se calentó a aproximadamente 20°C para dar una lechada blanca. Después se removieron entre la mitad y dos tercios del solvente por destilación al vacío (a 100 mbarias de presión) . Después de agregó Iso-octano (250 mi, 5 vol eq. ) al residuo y la mezcla se enfrió a 20°C. Después de la agitación, el producto se recolectó por filtración. El sólido recolectado se lavó con iso-octano (2 x 100 mi) y se secó a un peso constante al vacío a 40-50°C para dar el cloruro de sulfonilo requerido como un sólido cristalino blanco (41.37 g, 91%) . H RM (300MHz, d8 -THF ) d, 9.91 (1H, bs ) , 7.57 (1H, s), 4.53, 4.44 (2 x 1H, cada uno ABq) , 1.52 (3H, s). Ejemplo 5 Procedimiento 1 (S) -5- [4- (5-Cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonilmetil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona a) 5-Cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina Se hizo lechada de acetato de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina (40 g, 0.146 moles) en iso-PrOAc (664 mi) a 30°C. A esta lechada se agregó Na2C03 (1.5 moles por litro; 196 mi, 2 moles eq. ) . Esta lechada después se agitó rápidamente a 30°C por 15 minutos. La mezcla bifásica se dejó asentar, y la fase acuosa de la parte inferior se separó y se descartó . El procedimiento de lavado base anterior se repitió dos veces más. La fase orgánica después se lavó una vez con agua (200 mi) . La solución iso-PrOAC resultante se redujo en volumen a aproximadamente 300 mi por destilación bajo presión reducida. La solución después se diluyó con iso-PrOAc (400 mi) y se volvió a destilar a aproximadamente 300 mi. Este procedimiento se repitió una vez más. Se removió una muestra por análisis de contenido de 5-cloro- 2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina y contenido de agua. El peso o el volumen de la solución se removió con el fin de calcular la concentración de 5-cloro-2- (piperidin-4- iloxi)-piridina en la solución de iPrOAc. b) (S) -5- [4- ( 5-Cloro-piridin-2-iloxi ) piperidin-1-sulfonilmetil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona Se agrego diisopropiletilamina (24.3 mi, 0.139 moles, 1 moles eq. ) a la solución de iso-PrOAc preparada en parte (a) [aproximadamente 300 mi; equivalente a 31.2 g, 0.146 moles, 1.05 moles eq. de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina] en una porción a temperatura ambiente. La solución después se enfrió a -15°C. Se disolvió cloruro de ( (S) -4-metil-2 , 5-dioxo-imidazolidin-4-yl ) -metansulfonilo (31.65 g, 0.139 moles, 1 moles eq. ) en THF seco (285 mi) a temperatura ambiente con agitación. La solución resultante después se agregó a la solución de iso-PrOAc de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina por goteo a -15°C durante alrededor de 1.5 . Se vio un precipitado en la adición del cloruro de ( (S) -4-metil-2 , 5-dioxo-imidazolidin-4-il) -metansulfonilo . Al final de la adición, se agregó, TDF seco (32 mi) a la mezcla de reacción para lacar la línea y la mezcla se agitó por 1 h at - 15°C. Después se calentó a 20°C durante 1 h y se agitó a 20°C por 1 h más. La reacción se extinguió con 10% en peso de NaHS04 (157 mi) con rápida agitación. Después de alrededor de 15 minutos, la mezcla bifásica se dejó asentar, y la fase acuosa de la parte inferior se separó y se descartó. Este procedimiento de lavado ácido se repitió una vez más. La fase orgánica después se lavó con agua (157 mi) utilizando agitación rápida y dejando completar la fase de separación antes de la división. La solución de reacción después se calentó a 40°C y se volvió a lavar con agua (157 mi) . Se agregó THF (95 mi) a la capa orgánica que después se calentó a 40°C y se filtró a 40°C para remover cualquier materia en partículas. El volumen del solvente después se redujo a alrededor de 157 mi por destilación con presión reducida con la temperatura de cubierta a 55°C. Después se agregó iso-PrOAc (317 mi) y el volumen se volvió a reducir a alrededor de 157 mi. Se realizaron dos más recolecciones y tomas de iso-PrOAc (317 mi) . Los sólidos se empezaron a precipitar durante las destilaciones y resultó en una suspensión. El volumen se redujo a aproximadamente 157 mi cada vez y después de la destilación final después se removió una pequeña muestra del solvente de la mezcla de reacción para el análisis THF residual. La 1H R N no mostró picos de THF . El contenido de la reacción después se enfrió a 0°C y el producto se recolectó por filtración. El recipiente de reacción se lavó con iso-PrOAc (63 mi) y este enjuague se utilizó para lavar el producto en el filtro. El producto se seco durante la noche en un horno de vacío a 40°C. La (S)-5- [4- ( 5-cloro-piridin-2 -iloxi ) -piperidin-l-sulfonilmetil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona se aisló como un sólido blanco con un 71% de rendimiento (41.8 g) . XH RMN (300MHz, d6-DMSO) d 10.74 (1H, s), 8.20 (1H, d) , 8.01 (1H, s), 7.81 (1H, dd) , 6.87 (1H, d) , 5.09 (1H, m) , 3.52-3.35 (4H, m) , 3.13 (2H, m) , 2.02 (2H, m) , 1.72 (2H, m) , 1.33 (3H, s) . Ejemplo 6 Procedimiento 2 (S) -5- [4- (5-Cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonilmetil ] -5-metil- imidazolidin-2 , 4-diona a) Se convirtió en lechada el acetato de 5-Cloro-2-p'iperidm-4 -iloxi ) -piridina (70 g, 257 mmoles) en tolueno (560 mi) a temperatura ambiente. Se agregó 1M de NaOH (420 mi) y la lechada se agitó rápidamente a temperatura ambiente por 15 min. La mezcla bifásica se dejó asentar, y la fase acuosa de la parte inferior se separó y se descartó. La fase orgánica después se lavó con agua (2 x 420 mi) . Se removió una muestra de la fase orgánica y se ensayó para 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina . La solución de tolueno resultante después se redujo en volumen por destilación a presión reducida, de forma descendente a aproximadamente 168 mi (2.4 vol eq. con respecto a una carga de acetato de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina) . La solución después se diluyó con tolueno (420 mi) y se volvió a destilar a aproximadamente 168 mi (2.4 vol eq.). Se removió una muestra por análisis de contenido de agua . b) (S) -5- [4- ( 5-Cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-1-sulfonilmeil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona Se agregó diisopropiletilamina (38.4 mi, 220 mmoles) a la solución de tolueno de 5-cloro-2- (piperidin-4-iloxi ) -piridina obtenida en el paso (a) (contiendo 236 mmoles) en una porción, seguido por TDF seco (151 mi) como un lavado de linea. Se disolvió cloruro de ( (S) -4-Metil-2 , 5-dioxo-imidazolidin-4-il ) -metansulfonilo (48.7 g, 215 mmoles) en TDF seco (352 mi) a temperatura ambiente con agitación. La solución resultante de cloruro de sulfonilo después se agregó por goteo a la solución de tolueno/THF de 5-cloro-2-(piperidin-4-iloxi ) -piridina y diisopropiletilamina a temperatura ambiente durante 1 a 2 h. Se vio un precipitado en la adición del cloruro de sulfonilo. Al final de la adición, se agregó TDF seco (50 mi) a la mezcla de reacción como un lavado de linea. Después de que se completó la adición, la reacción se agitó durante aproximadamente 30 min a temperatura ambiente. La reacción se extinguió con 10% en peso de NaHS04 (251 mi) con rápida agitación por aproximadamente 15 min. La mezcla bifásica se dejó asentar, cuando la fase acuosa de la parte inferior se separó y descartó. Este procedimiento de lavado ácido se repitió una vez más. El volumen del solvente después se redujo a aproximadamente 220 mi por destilación con presión reducida. Después se agregó tolueno (300 mi) y el volumen de redujo a aproximadamente 245 mi. Los sólidos se empezaron a precipitar durante la destilación y dio como resultado una suspensión. Después de la destilación final, entonces se removió una pequeña muestra de solvente de la mezcla de reacción por análisis de THF residual. El contenido de la mezcla de reacción después se enfrió a 0°C, se agitó durante aproximadamente 30 minutos a esta temperatura y el producto se recolectó por filtración. El recipiente de reacción se lavó con tolueno (100 mi) y este enjuague se utilizó para lavar el producto en el filtro. El producto se secó en un horno de vacío a 40°C a un peso constante. Se aisló ( S) -5- [4- ( 5-cloro- piridin-2-iloxi ) - piperidin-l-sulfonilmetil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona como un sólido blanco en típicamente 85 a 88% de rendimiento durante los dos pasos. Ejemplo 7 Forma G de (S) -5- [4- (5-Cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-l-sulfonilmetil] -5-metil- imidazolidin-2, 4-diona Una mezcla de 2:1 de alcoholes metilados industriales (IMS):agua (10 vol eq.) se agregó a (S)-5- [4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonilmetil] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona . La mezcla se calentó a reflujo (alrededor de 80 a 82°C) para obtener una solución. Esta solución se mantuvo a reflujo por 15 minutos y, después se filtró. El filtrado se calentó a reflujo y se mantuvo a esta temperatura por 15 minutos. La solución después se enfrió a 20°C a una velocidad de 0.5°C / minuto. Después de la agitación a 20°C por 2 a 3 h, se recolectó la forma G de (S)-5- [4- ( 5-cloro- piridin-2-iloxi ) -piperidin-1 -sulfonilmetil ] -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona a través de filtración, se lavó con IMS: agua 2:1 (2.5 vol eq. ) y se secó. El producto se aisló en 80 a 87% de rendimiento. Este Método ha demostrado que da de forma reproducible el polimorfo G independientemente de la modificación polimórfica del material de entrada. Los polimorfos A, C, F y las mezclas polimórficas todas se han recristalizado para dar la forma G utilizando este Método.

Ejemplo 8 Resolución de (RS) -5-bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin-2, 4-diona utilizando (1S) - ( - ) -ct-metil bencilamina Se agregó una solución de NaOH (0.45 eq. ) en agua (4 vol eq. ) a (1S) - -metilbencilamina (1.7 eq. ) y (RS)-5-bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona (50 g) . La suspensión resultante se calentó a 83 °C. La mezcla se enfrió lentamente y se sembró por arriba de temperatura ambiente (36 °C) . El sembrado no es esencial pero ayuda a facilitar con qué la mezcla de reacción se puede agitar y filtrar. Se agregó más agua (3 vol eq. ) durante el ciclo de enfriamiento. La reacción se agitó a 20°C durante la noche antes de recolectar el producto por filtración y lavar con ciclohexano para producir la sal de (5S) -5-bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona (1S) -a-metilbencilamina con 45% de rendimiento. La LC (mismas condiciones que el Ejemplo 3) indicó que el producto tuvo 94.5% de pureza enantiomérica. XH RM (400 MHz, d6-DMSO) d 1.23 (3H, d, J= 6.7 Hz), 1.28 (3H, s), 2.61 (1H, d, J 14.1 Hz) 2.72 (1H, d, J 14.1 Hz), 3.76 (2H, s), 3.96 (1H, q, J= 6.7 Hz), 7.37 - 7.15 (10H, m) , 7.97 (1H, s) . 2-Amino-3-benciltio-2-metilpropionamida (VIII) Se cargó una solución de cianuro de potasio (1.07 Kg) e hidróxido de amonio (4.46 Kg de una solución al 28%) en un matraz de 20 1. A esta mezcla se agregó una solución preformada de cloruro de amonio (1 Kg en 3.47 Kg agua) durante alrededor de 0.5 h con agitación. Después se agregó 1- (Benciltio) -2-propanona (2.71 Kg) . La mezcla se agitó a aproximadamente 40°C por 65 h. Se agrego agua desionizada (1 L) y las fases se separaron. La fase orgánica separada (3.13 Kg) se utilizó directamente en el siguiente paso. A una mezcla de 37% de ácido clorhídrico (13.3 Kg) y 48% ácido bromhídrico (1.26 Kg) se agregó la mitad del material anterior durante alrededor de 1 h a aproximadamente 5°C. La mezcla después se agitó por 2 h a 5°C y después se calentó a aproximadamente 30°C y se agitó durante la noche. La mezcla después se enfrió y el producto se recolectó a través de filtración. La torta de filtro se lavó con ácido clorhídrico concentrado helado y acetona. El material resultante se volvió a suspender en acetona (10 L) y se calentó a reflujo por un corto tiempo. El producto después se recolectó a través de filtración y se secó durante la noche bajo vacío. Este procedimiento se repitió para la segunda mitad del material de partida. A los lotes combinados del material preparado anteriormente (1.66 Kg y 1.51 Kg) se agregó acetato de etilo acetato (9 Kg) y una solución de carbonato de potasio preformada (9 Kg de 50% en peso en agua) . La mezcla se agitó por 1 h y las fases después se separaron. La fase acuosa después se extrajo con acetato de etilo (3 Kg) . Las fases orgánicas combinadas se extrajeron con solución de carbonato de potasio (3.1 Kg of 50% en peso en agua) . La fase orgánica resultante se secó sobre carbonato de sodio, se filtró y se concentró. El sólido resultante se hizo lechada y se calentó a reflujo en TBME por un corto periodo. Después del enfriamiento, el producto se recolectó por filtración y se secó durante la noche bajo vacío. Se aisló 2-Amino-3-benciltio-2-metilpropionamida (VIII) (2.4 Kg, 73.2% total). Ejemplo 9 Resolución de (RS) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida utilizando ácido (R) - ( - ) -mandélico (R)Mandelato de (2S) ) -2-Amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida Se mezcló metanol (20 mi, 4 vol eq. ) y acetato de iso-propilo (80 mi, 16 vol eq. ) para dar una solución de 20% v/v de metanol en acetato de iso-propilo. Se disolvió (RS)-2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida (5 g, 22.2 mmoles) en la solución pre-mezclada de MeOH/1PrOAc (13 vol eq. ) y agua (0.4 mi, 1 moles eq. ) . La solución resultante se calentó a 50°C. Se disolvió ácido (R) -(-) -Mandélico (3.39 g, 22.2 mmoles, 1.0 moles eq. ) en la solución premezclada de MeOH/1PrOAc (30 mi, 6 vol eq. ) y después se agregó a la solución de amida en una forma controlada durante 1 h. Durante la adición la temperatura de reacción se mantuvo a 50°C. La precipitación del producto puede iniciarse durante la adición. La solución de eOH/1PrOAc premezclada restante (alrededor de 1 vol eq. ) se utilizó como un lavado de línea. La suspensión después se enfrió lentamente a 0°C y después del período de agitación a esta temperatura el producto se recolectó por filtración. El recipiente de reacción se regresó a 20 °C y se lavó con 1PrOAc (25 mi, 5 vol eq. ) durante aproximadamente 5 a 10 minutos. Esta solución subsiguientemente se utilizó para lavar el producto en el filtro. El producto se secó en un horno de vacío a 40°C a un peso constante. Se aisló (R) -mandelato hemihidratado de (2S) -2-Amino-3 -bencilsulfanil-2-metil-propionamida como un sólido blanco en típicamente 47 a 48% de rendimiento y 97 a 99% de pureza enantiomérica . El (R) -mandelato hemihidratado de (2S) -2-Amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida de una pureza enantiomérica de más de 90% puede enantioméricamente mejorarse mediante recristalización de 1PrOAc (35 vol eq.) para dar un rendimiento de material de >99.35% de pureza enantiomérica con >87% recuperación. XH RM (400 MHz , d6-DMSO) d 1.28 (s, 3H, CH3) , 2.79 (AB q, J= 140.5, 13.8 Hz, 2H SC¾Cq) , 3.76 (AB q, J= 16.4, 13.1 Hz, 2H, ArC¾S)5 4.79 (s, 1H ArC/íOH) , 7.41 - 7.18 (m, 1 1H, ArH y CON¾HB) , 7.56 (s, 1H CONHA¾) · La pureza quiral del producto se estableció mediante LC utilizando CLAR de la serie 1100 Hewlett Packard adaptado con un detector de arreglo de diodos; una columna Chiracel ChiralPak AD de 25 cm x 0.46 cm ID x 10 µp?; solvente - 0.1% v/v dietilamina en etanol; Método isocrático; temperatura de horno 20°C; velocidad de flujo 1.0 ml/minuto; diluyente de muestra - agua purificada; detección a 210 nm; volumen de inyección 5.0 µ?; y tiempo de corrida 15 minutos. Los tiempos de retención para las (S)- y (R)-amino amidas fueron de aproximadamente 5.4 y 11.8 minutos respectivamente. Ejemplo 10 Resolución de (RS) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida utilizando ácido L-tartárico ( 2S ) -2 -Amino-3-benci1sulf ni1-2-meti1-propionamida ( 2R, 3R) -Tartrato Método 1 Las soluciones de (RS) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propiona ida y ácido L-tartárico (0.25-1.0 eq.) en etanol (11.75 - 90 vol eq. ) se mezclaron. El sólido resultante que se precipitó se recolectó a través de filtración. Esto produjo tartrato de 2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil- propionamida en típicamente 45 a 90% de rendimiento y 50 a 92% de pureza enantiomérica (ep, por sus siglas en inglés) . Los solventes diferentes de etanol (ver el Método 1) también podrían utilizarse. Utilizando Ácido L-tartárico (1 eq.) y EtOH (90 vol eq.), el producto se aisló como una sal de 1:1 en 44% de rendimiento y con 92.2% de ep. Método 2 Una mezcla de (RS) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida y ácido L-tartárico (0.25-1.0 eq.) se convirtió en lechada en un volumen mínimo de un solvente (los solventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, metanol, etanol, iso-propanol , n-butanol, acetato de iso-propilo, acetato de etilo, tolueno, acetonitrilo y IMS) . Estas lechadas después se calentaron a temperatura por arriba de temperatura ambiental y se agregó solvente adicional con el fin de formar soluciones completas a varias temperaturas. Si no se formaron las soluciones completas en 35 vol eq. de solvente a reflujo, se agregó suficiente agua para crear una solución. Estas soluciones después se enfriaron a temperatura ambiente y el sólido resultante se recolectó a través de filtración para producir tartrato de 2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida en 78 a 100% de rendimiento (con respecto a introducción de ácido L-tartárico y la corrección de la formación de cualquier sal al 1:1 o sales al 2:1), con purezas enantioméricas en el intervalo de 50 a 60%. Estas sales de L-tartrato de 2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida podrían recristalizarse de varios solventes (los ejemplos de solventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, (i) recristalizaciones de solventes mixtos con ya sea MeOH o agua como solvente o ya sea iso-propanol , n-butanol, acetato de etilo, acetato de iso-propilo, tolueno, acetonitrilo, acetona, THF, TBME, DCM, MIBK, éter dietílico, 2 , 2 , 4-trimetilpentano o IMS como antisolventes; o (ii) recristalización directa de etanol, metanol, IMS o agua) . La recristalización típicamente da rendimientos en la escala de 1 a 99% con purezas enantioméricas en la escala de 50 a 96%. La recristalización de MeOH/MIBK (20/29.5 vol eq. respectivamente) dio (2R, 3R) -tartrato de (2S) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida en 75% de rendimiento y con una pureza enantiomérica de 96.63% (el material de partida fue aproximadamente 50% ep) . La pureza quiral se estableció mediante LC, como para el Ejemplo 9. XH RM (300 MHz, d6-DMSO) d 1.35 (3H, s, CH3), 2.69 (1H, d, J 13.7 Hz, S-CH2) , 3.00 (1H, d, J 13.7 Hz, S-CH2) , 3.79 (2H, s, S-CH2), 3.98 (2H, s, CHOH) , 7.22-7.36 (5H, m, Ar-H) , 7.44 (1H, s, NH) , 7.63 (1H, s, NH) . Ejemplo 11 Resoluciones Biocatalíticas 1. Utilizando Rhodococcus erthoplís amidasa Se disolvió la sal de clorhidrato de (RS) -2-Amino-3-bencilsulfanil-2 -metil-propionamida (5 g, 0.019 moles) en 0.1N H 8.00 de regulador de pH de borato (100 mi) para dar una solución con un pH de alrededor de 4.0. El pH se ajustó a 7.00 con 2N de solución de KOH y se agregó Rhodococcus erthoplis amidasa como un agregado de enzima entrelazado (CLEA) (1 mi de una suspensión en regulador de pH, 25 unidades / mi de actividad específica) . La mezcla de reacción se agitó a 35 °C por 1.5 h. La CLAR mostró de 25 a 30% de conversión de la amida para el aminoácido correspondiente. El pH se ajusto a 1.00 con ácido clorhídrico concentrado y después se filtró para remover la enzima CLEA. El pH se ajustó a 11 con 2N de solución de KOH y se extrajo con DCM (1 x 100 mi; 1 x 40 mi) . Los extractos de DCM combinados se secaron y se evaporaron para dar (R) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida como un sólido blanco (2.67 g) con 62% de rendimiento. La pureza enantiomérica se encontró siendo 67% de (R)-ent por CLAR guiral (34% ee) . La capa acuosa se trató con ácido clorhídrico concentrado a un pH de 6.80 y se mantuvo a un pH de 6.80 por 1 h mediante la adición ocasional de 2N de solución de KOH. Los cristales blancos resultantes se recolectaron a través de filtración, se lavaron con regulador de pH a un pH de 7.00 y se secaron a 40°C durante la noche para dar ácido (S) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propiónico (1.2 g, 27% de rendimiento) . La pureza enantiomérica se encontró siendo 99% (S) -ent (98% ee) . 2. Utilizando Pseudomonas fluorescens AL45 amidasa ( O 2005/123932) a) Cultivo de microorganismo Se cultivaron Ps fluorescens AL45 en un termentador de 10 1 en 5 1 de medio de sales minerales a pH de 7.2 suplementado con extracto de levaduras (2 g/1) y lactamida (2.5 g/1) y se mantuvo a 28°C. El termentador se aireó a 5 1/min y se agitó a 400 rpm por 24 h. Las células se cosecharon mediante centrifugación y las células recuperadas se lavaron por mediante la re-suspensión en 100 M de regulador de pH con fosfato a un pH de 7.2 y se volvieron a centrifugar. Las células recuperadas se almacenaron a 4°C durante la noche antes de utilizarse en la biotransformación . b) Condiciones de la biotransformación El granulado celular se volvió a suspender en regulador de pH con fosfato (100 mM, pH 7.2 , 1 1) y a esto se agregó (RS) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida (5 g) . La mezcla se agitó y se incubó a 28°C y las muestras se removieron periódicamente mediante análisis. Después de 8.5 h, la CLAR cuantitativa indicó que la reacción alcanzó 50% de hidrólisis. El análisis quiral (LC) indicó (R) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida 96% ee; y ácido (S)-2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propiónico 97.5% ee. c) Desarrollo de la reacción Las células se removieron del caldo de biotransformación mediante centrifugación y el sobrenadante (aproximadamente 1000 mi) se ajustó a un pH de 10.5 utilizando 20% de solución de carbonato de sodio (volumen final de aproximadamente 1200 mi) . El sobrenadante alcalino se extrajo con TBME (750 mi), cualquier emulsión siendo retenida con la fase orgánica. La fase TBME se mezcló con acetona (aproximadamente 250 mi) que dio como resultado la formación de un precipitado. Mientras tanto la fase acuosa se volvió a extraer con TBME (750 mi) y otra vez la fase orgánica se mezcló con acetona (aproximadamente 250 mi) . Esto dio como resultado la separación de una pequeña capa acuosa que se combinó con el resto de la fase acuosa. Las dos fases de TBME/acetona se combinaron, se secaron (Na2SÜ4) , se filtraron y el solvente se removió para dar (R) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida como un sólido cristalino blanquecino (1.7 g) con 68% de rendimiento. La pureza enantiomérica fue >99% (R)-ent. La fase acuosa se ajustó a un pH de 6.8 utilizando 2M de HCl y se concentró por liofilización a aproximadamente 300 mi. Después de descongelar se produjo una lechada blanda. El sólido cristalino se recuperó a través de filtración y se secó durante la noche a 37°C para dar ácido ( S ) -2-amino-3 -bencilsulfanil-2-metil-propionia como cristales blancos finos (1.8 g) con 72% de rendimiento, 98% pureza por CLAR. La pureza enantiomérica fue >99% (S)-ent. 3. Utilizando Mycobacterium neoarum L-amidasa Utilizando un procedimiento análogo al descrito para Rhodococcus erthoplis, (RS) -2-amino- 3-bencilsulfanil-2-metil-propionamida se puede resolver utilizando una amidasa L-específica para Mycobacterium neoarum. Este Método es complementario en que el ácido (R) -2-amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propionico y la (S)-2- amino-3 -bencilsulfanil-2-metil-propionamida se producen con -99% ee. 4. (S) -5-Bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin-2,4-diona mediante resolución de ácido (RS) -3-bencilsulfanil-2-metil-2-ureido-propiónico Ácido (RS) -3-Bencilsulfanil-2-metil-2-ureido-propiónico Se suspendió ácido (RS) -2-Amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propiónico (350 g) en agua (2.6 1) y THF (2.6 1), se agregó cianuro potásico (504 g) y la reacción se agitó a 25°C durante la noche. Después se agregó cianuro potásico adicional (75 g) y la reacción se agitó por 6 h más. La agitación después se detuvo y la reacción se enfrió a 0°C durante la noche. La lechada resultante se filtró y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El concentrado se hizo ácido a un pH de 2 con 6% solución de HC1 acuoso con rápida agitación. Después de 1 hora el sólido resultante se recolectó a través de filtración y después se volvió a hacer lechada secuencialmente en agua (4 1) y metanol (4 1) . Después de secar bajo vacío, el producto se purificó utilizando cromatografía con sílice. Las impurezas se eluyeron utilizando DCM/THF mientras el producto se eluyó utilizando THF/AcOH seguido por MeOH. La remoción del solvente seguida por trituración con TBME dio ácido 3-bencilsulfanil-2-metil-2-ureido-propiónico (151 g) como un sólido blanquecino. Se agregó ácido (RS) -3-Bencilsulfanil-2-metil-2-ureido-propiónico (9 g, alrededor de 90% puro, equivalente a 30 mmoles) a solución de sulfito de sodio (5 mmoles, 100 mi) . Se agregó OH (2.5 g, 44 mmoles) . La solución se agitó hasta que ácido se disolvió y después se filtró. El pH se ajustó de 12.5 a 7.00 con ácido acético glacial. Se agregó solución de MnCl2-4H20 (10 mmolar, 10 mi) . La solución se calentó a 40°C bajo N2 y se agrego hidantoinasa D-específica (1 mi de suspensión en regulador de pH, Hidantoinasa 2 Roche recombinante in E. coli., 300 unidades por mg, proteína total 70 mg) . La mezcla de reacción se agitó a 40°C bajo N2. Durante la reacción el pH se mantuvo a 7.0 mediante titulación de solución de ácido acético 5% v/v.

Tiempo H Sol. Graduada Conversión por CLAR 1.0 h 7.00 10 mi 32% 1.0 h 7.00 17 mi 44% Durante la reacción se formó un precipitado blanco espeso. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se agitó por 3 h, después se filtró y se lavó con 0.1N de regulador de pH de fosfato a un pH de 7. El sólido se secó durante la noche a 40 °C. El producto se aisló como un polvo blanco (3.3 g) en 42% de rendimiento, 100% de pureza química por CLAR. El análisis CLAR quiral mostró el producto siendo 100% (S)-ent. La pureza quiral se estableció utilizando una columna de 25 cm x 4.6 mm Chiralpack AD, 30°C, eluyente MeOH + 0.1% v/v HC02H, flujo 1 mi min1, detección UV a 220 nM. Tr (S) -enantiómero 4.42 mins ; Tr (R) -enantiómero 9.21 mins . 5. Resolución de ácido (RS) -3-Bencilsulfanil-2-metil-2- (2,2 , 2-trifluoro-acetilamino) -propiónico utilizando L-Acilasa de Aspergillus sp. Ácido (RS) -3 -Bencilsulfanil-2-metil-2- (2,2,2-trifluoro-acetilamino) -propiónico Se hizo lechada de ácido (RS) -2-Amino-3- bencilsulfanil-2-metil-propiónico (5 g, 0.022 moles) en anhídrido trifluoroacético (15 mi) y DCM (15 mi) . La lechada se enfrió a -20°C y se agregó trietilamina (2.5 g, 0.025 mole) por goteo. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. La CLAR mostró una conversión completa de la amida. La mezcla se diluyó con agua (30 mi) y DCM (30 mi) . La capa acuosa se descartó y la capa orgánica se lavó con agua (3 x 50 mi) . La capa orgánica se separó y se evaporó para dejar un aceite. Este material se disolvió en acetonitrilo y el solvente se evaporó al vacío. Rendimiento 7.2 g de aceite amarillo pálido. (-100% de rendimiento) . MS M+, 321 (100%) . 2H RMN (CDC13) d 7.4 (1H, brs), 7.30 (5H, m) , 3.85 (2H, m) , 3.4 (1H, d) , 3.05 (1H, d) , 1.75 (3H, s) .

Se disolvió CoCl2.6H20 (0.25 g, 0.001 moles) en regulador de pH de borato (100 mi, pH 8.0, 0.1N). La solución se desgasificó y la (RS) -trifluoroacetamida (7.00 g) se agregó como un aceite. La mezcla se agitó bajo N2 a 45°C agregando solución de Na2C02 saturada hasta que el pH alcanzó 8.00 (aproximadamente 35 mi agregados). Se disolvió la L- aminoácido acilasa (0.7 gramos, L-Acilasa de Aspergillus sp. , 30,000 unidades g"1) en regulador de pH a un pH de 8.00 (5 mi) y se agregó a la reacción. La reacción se agitó por 30 h a 45°C bajo N2, manteniendo el pH a -7.50. El pH se ajustó a 7.00 con HOAc y se recolectó un sólido precipitado a través de filtración, se lavó con regulador de pH a un pH de 7.00 y se secó al vacio. El (R) -aminoácido (1.7 g, 34%) se aisló como un sólido blanquecino. La CLAR quiral mostró él material siendo 98% de (R) -enantiomero (96% ee) . Algo de aminoácido sin cristalizar permaneció en el filtrado. El filtrado se ajustó a un pH 1 con HC1 concentrado y se extrajo con DCM (2 x 75 mi) . La CLAR mostró que los extractos de DCM no contienen (R) -aminoácido . El DCM se secó (Na2S04) y se evaporó para dejar ácido (S) -3-bencilsulfanil-2-metil-2- (2,2, 2-trifluoro-acetilamino) -propiónico (2.5 g, 35%) como un sólido blanquecino ceroso. Este material se hidrolizó al (S)-aminoácido utilizando MeOH/agua/KOH en 98% de rendimiento. El producto ( S ) -aminoácido se demostró mediante CLAR como siendo 96% ee . Ejemplo 12 Resoluciones Biocatalíticas utilizando Eliminación de la simetría Ester dietílico de ácido 2-Bencilsulfanilmetil-2- metil-malónico A una solución enfriada de metilmalonato de dietilo (79.9 g) y benciltiobromometano (110.4 g) en 2-metil-THF (480 mi) se agregó butóxido de potasio (53.6 g) en porciones durante aproximadamente 2 h manteniendo la temperatura por debajo de 0°C. La mezcla después se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La reacción se diluyó con agua (320 mi) y las fases se separaron. La fase orgánica se secó (Na2S04), se filtró y el solvente se removió bajo vacio. El aceite resultante se purificó utilizando cromatografía de columna (eluyente DCM/hexano) dando el compuesto del título como un aceite amarillo (109 g, 78%). XR RMN (CDC13) d 1.23 (6H, t), 1.47 (3H, s), 2.98 (2H5 s), 3.72 (2H, s), 4.17 (4H, q) , 7.2- 7.3 (5H5 m) . 2-Bencilsulfanilmetil-2-metil-malonamida Una mezcla de metilmalononitrilo (6.6 g) y bromuro de tetrabutilamonio (1.06 g) en DCM (50 mi) se enfrió a aproximadamente 0°C. A esta mezcla se agregó t-butóxido de potasio (9.2 g) seguido por la lenta adición de benciltiobromometano (17.89 g) . La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche cuando se diluyó con salmuera (100 mi) . Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo tres veces más con DCM (3 x 25 mi) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04) , se filtró y se concentró bajo vacío. El aceite color café resultante se purificó utilizando cromatografía de columna (eluyente acetato de etilo/hexano) . Se aisló 2-Bencilsulfanilmetil-2-metil-malononitrilo como un sólido incoloro (9.76 g, 52%). 2H RMN (CDC13) d 1.82 (3H, s), 2.89 (2H, s), 4.00 (2H, s) , 7.26-7.37 (5H, m) . Se disolvió 2-Bencilsulfanil-2-metill-malononitrilo (2.3 g) en t-butanol (30 mi). La solución se calentó a 60°C cuando se agregó hidróxido de potasio en polvo (10 g) en porciones. Después del calentamiento a 60°C durante la noche, la reacción se diluyó con salmuera y se extrajo con DCM (3 x 25 mi) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04) , se filtró y se concentró bajo vacío para dar el compuesto del título como un sólido blanquecino. XH RMN (d6-DMSO) d 1.38 (3H, s) , 2.98 (2H, s), 3.78 (2H, s), 6.94 (4H, s), 7.15-7.43 (5H, m) . Preparación alternativa utilizando nitrilo hidratasa Se disolvió (RS) -2-Bencilsulfanil-2-metil malononitrilo (4 g, 0.19 moles) en DSMO (15 mi ) . Las células liofilizadas (0.75 g) que contienen la nitrilo idratasa (Zyanotase™) se hicieron lechada en 0.1N de regulador de H con fosfato a un pH de 7 (120 mi) y la solución de DMSO de dinitrilo se agregó. La reacción se agitó a 38°C por 2 días y después se filtró. El producto cristalizado se disolvió en acetonitrilo (70 mi) y se filtró para remover las células. El solvente se removió por evaporación y el producto cristalizado se lavó con agua y se secó para dar 2-bencilsulfanilmetil-2-metil-malonamida (3 g, 65%) . La extracción del filtrado acuoso de la reacción con DCM (100 mi) seguido por evaporación produjo una cosecha más del producto (750 mg, 16%) . Ácido (S) -2-Amino-3-bencilsulfanil-2-metil-propiónico mediante eliminación de simetría Se hizo lechada de éster dietílico de ácido 2-Bencilsulfanilmetil-2-metil-malónico (5 g) en 0.1 de regulador de pH con fosfato a un pH de 7 y se agrego Bacillus licheniformis proteasa (1 g) y la mezcla de reacción se agitó a 35°C. El pH se mantuvo por la adición de 2 amoníaco a través de un pH estático. Después de 4 días, la reacción después se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mi) para remover el diéster no reaccionado, se hizo ácida a un pH de 4 con HCl diluido se extrajo con 1 , 2-dicloroetano (2 x 50 mi) . La fase de dicloroetano que contienen el producto se secó (Na2S04) y se filtró. A la fase de dicloroetano, se agregó trietilamina (1.6 g) seguido por difenilfosforil azida (PhO)2P(0)N3 (4.4 g) . La reacción se calentó a reflujo durante la noche, se mezcló con 5 HCl (50 mi) y se calentó a reflujo por 6 h más. El análisis CLAR quiral de la fase acuosa ácida, en la cual el producto de aminoácido se extrajo, mostró que el ( S ) -aminoácido estuvo presente y el ee fue de 100%. Es decir, no se pudo detectar el (R) -aminoácido . La pureza quiral se estableció utilizando una columna T de 25 cm x 4.6 mm Chirobiotic , 30°C, eluyente 20% v/v de agua en EtOH, flujo 1 mi min"1 , detección UV a 220 nM . Tr de ( R ) - enant i ómero 6.86 mins ; Tr de ( S ) -enantiómero 8.21 mins . (S) -5-Bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin-2, -diona mediante eliminación de simetría Se disolvió 2 -benc i 1 sul fani lmet i 1 - 2 -met i 1 -malonamida (2 g) en DMSO (10 mi) a 50°C. La solución resultante se agregó a 0.1M de regulador de pH de fosfato a un pH de 7 (100 mi) . A esto se agregó Rhodocuccus erthoplis amidasa (2 mi de una suspensión de 25 unidades /mi de agregados de enzima entrelazados (CLEA, por sus siglas en inglés) ) . Después de la agitación a 35°C por 4 días, los CLEA se removieron a través de filtración, el filtrado se hizo ácido a un pH de 4 con HC1 concentrado y el producto ácido/amida se extrajo con acetato de iso-propilo (3 x 50 mi) . La CLAR quiral mostró que el mono ácido tuvo un ee de 93%. El solvente se removió bajo vacío y se volvió a colocar con 1 , 2 -di cloroetano (50 mi) . A esta solución se agregó trietilamina (0.79 g) seguido por difenilfosforilazida (2.2 g) . La reacción se calentó a reflujo por 18 h, se enfrió, se lavó con HCl diluido (0.1 M , 2 x 25 mi) y se concentró bajo vacío. El producto crudo demostró ser el ( S ) -enantiómero y 93% ee por CLAR quiral. El producto de hidantoína se purificó utilizando cromatografía de columna (eluyente acetato de etilo) y se recristalizó de etanol para dar el compuesto del título (1 g, 49%) como un sólido incoloro. El ee se actualizó a 97%. La pureza quiral se estableció utilizando una columna de 25 cm x 4.6 mm Chiralpack AD , 30°C, eluyente MeOH + 0.1% v/v de HC02H, flujo 1 mi min"1, detección UV a 220 nM. Tr de ( S ) -enantiómero 4.42 mins ; Te de ( R ) - enant i ómero 9.21 mins .

Ejemplo 13 a) (R) -2-Bencilsulfanilmetil-2-metil-4-fenil-oxazolidina Se agregaron tamices moleculares 4Á (3.6 g) y benciltioacetona (10.0 mmoles, 1. 65 mi, 1.80 g) a una solución de (R) - (-) -fenilglicinol (1.00 eq, 10.0 mmoles, 1.37 g) en tolueno (170 mmoles, 18.0 mi, 15.7 g) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a 50°C y se agitó a esta temperatura por 24 h. Después de la filtración a través de un embudo para sinterizar de 50 mm del no. 3, se obtuvo una solución de la oxazolidina requerida. Esta solución se utilizó en experimentos subsiguientes sin purificación adicional. Para propósitos analíticos, se evaporó una pequeña muestra de esta solución a sequedad para dar un aceite de color claro. Este material se analizó por espectroscopia de RMN XH RMN (CDCl3, 400MHz ) mostrando que la oxazolidina existió como una mezcla de 54:46 de isómeros (2R,4R)- y (2S, 4R) . XH RMN (CDCI3, 400MHz): isómero (2R,4R): d 1.43 (3H, s); 2.83 (2H, AB, J 14.5Hz, ? 119.5Hz); 3.65 (1H, t, J 7.5Hz); 3.86 (2H, AB, J 13.1Hz, ? 40.7Hz); 4.24 (1H, t, J 7.5Hz); 4.51 (1H, brt, J 7.5Hz); 7.2-7.5 (10H, m) . Isómero (2S,4R): d 1.50 (3H, s); 2.70 (2H, AB, J 13.7Hz, ? 43.1Hz); 3.65 (1H, t, J 7.5Hz); 3.86 (2H, AB, J 12.8Hz, ? 11.3Hz); 4.24 (1H, t, J 7.5Hz); 4.46 (1H, brt, J 7.5Hz) ; 7.2-7.5 (10H, m) . b) (R) -3-Bencils lfanil-2-metil-2- ( (R) -1-fenil-2-trimetilsilaniloxi-etilamino) -propionitrilo A una solución de (R) -2-Bencilsulfanilmetil-2-metil-4-fenil-oxazolidina (1.00 eq, 100 mmoles, 29.9 g) en tolueno (4.25 moles, 449 mi, 391 g) a -20°C se agregó dietil eterato de bromuro de magnesio (99% en peso, 5.00 mmoles, 1.30 g) seguido por cianuro de trimetilsililo (105 mmoles, 14.1 mi, 10.4 g) . La mezcla se agitó a -20°C por 18 h y después se dejó calentar a 0°C y se lavó con agua (60 mi, 2 vol eq. ) . El solvente se removió utilizando un evaporador giratorio (temperatura de baño 44 °C) a un volumen de 60 mi (2 vol eq. ) y después se diluyó con iso-hexano (240 mi, 8 vol eq. ) . La mezcla se calentó a reflujo para dar una solución amarilla transparente y después se dejó enfriar con agitación durante la noche. El producto sólido se recolectó a través de filtración, se lavó con iso-hexano (30 mi, 1 vol eq.) y se secó para dar el compuesto del título (21.5 g, 54.0 m oles, 54%) . XH RM (CDCI3 , 400MHz): d 0.16 (9H, s ) ; 0.98 (3H, s); 2.69 (2H, AB, J 14.2Hz, ? 43.1Hz); 3.33 (1H, brs); 3.42 (1H, dd, J 10.6, 9.8Hz); 3.66 (1H, dd, J 10.6, 4.2Hz); 3.99 (2H, AB, J 13.5Hz, ? 32.4Hz); 4.03 (1H, dd, J 9.8, 4.2Hz); 7.0-7.5 (10H, m) . c) (3R, 5R) -3-Bencilsulfanilmetil-3-metil-5-fenil-morfolin-2-ona 4 5 Se hizo burbujear cloruro de hidrógeno por 15 minutos a través de una solución de (R)-3-bencilsul f ani 1 -2-metil-2- ( (R) -l-fenil-2-trimetilsilaniloxi-etilamino) -propionitrilo (1.00 eq. , 10.0 mmoles, 3.99 g) en DCM (622 mmoles, 39.9 mi, 52.8 g) mantenida a -20°C. Se agregó agua (10.0 mmoles, 180 µ?, 180 mg) y se hizo burbujear cloruro de hidrógeno a través de la misma durante 20 minutos más. La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente después se agitó a temperatura ambiente por 12 h antes de evaporarse a sequedad bajo presión reducida. La mezcla se dispersó en DCM (50 mi) y se agitó con carbonato ácido de sodio acuoso saturado (50 mi) por 30 minutos. La capa orgánica se separó, se secó (Na2S04) y se evaporó a sequedad bajo presión reducida para dar el compuesto del título como un sólido cristalino de color café claro. XH RMN (d6-DMSO, 400MHz); d 1.66 (s, 3 H ) ; 2.80 (AB, J 13.1Hz, ? 71.1 Hz, 2H); 3.02 (brs, IH); 3.91 (s, 2H); 4.15 (t, J 10.4 Hz, IH); 4.30 (1H, dd, J 10.3, 2.8 Hz); 4.40 (dd, J 10.8, 2.8 Hz, IH); 7.2-7.4 (m, 5H) . 13C RMN (d6-DMSO, 100MHz); d 25.4; 37.1; 42.7; 51.8; 62.6; 74.8; 126.7; 127.3; 128.0; 128.4; 128.4; 128.8; 138.5; 138.9; 172.0) . IR (sólido neto) 3312, 3061, 3030, 2978, 2921, 2322 (w), 1730 (s) , 1494, 1453, 1405, 1369, 1325, 1289, 1276, 1237, 1202 (m), 1167 (s) , 1071, 1053 (m) , 1029, 758, 733, 697 (s) cm"1. MS (CI), m/z (%); 350 (M+Na, 30), 328 (M+H, 100) . d) (R) -5-Bencilsulfanilmetil-1- ( (R) -2-hidroxi-1- fe i 1-etil) -5 -me ti 1 -imidazolidin-2 , 4-diona y éster ( R ) - 2 - ( ( R ) - 5 - benc i 1 sul fani lme t i 1 - 5 -met i 1 - 2 , 4 -dioxo- imidazol idin- 1 -yl ) -2-f enil-etí lico de ácido carbámico (XIII) (XV) R = H, n = 1 R = H, n = 2 R = CONH2, n = 1 R = CONH2> n = 2 Se agregó isocianato de clorosulfonilo (2.26 inmoles, 197 µ?, 320 mg) a una solución de (R)-3-bencilsulfanil-2-metil-2- ( (R) -1-fenil-2-trimetilsilaniloxi-etilamino) -propionitrilo (2.26 mmoles, 900 mg) en DCM (9.00 mi) a -55°C. La mezcla se agitó de -55 a -40 °C por 2 h, después se dejó calentar a temperatura ambiente y el solvente se removió por evaporación bajo presión reducida para dar una espuma de color naranja. Este material se calentó a reflujo en 1M de ácido clorhídrico (9.0 mi) por 2 h, después se dejó enfriar a temperatura ambiente y se extrajo con DCM (10 mi ) . El extracto de DCM se secó (Na2S04) y se evaporó a sequedad bajo presión reducida para dar una espuma de color naranja-café. La purificación por cromatografía en una columna biotage 40M (eluyente gradiente 90:10 iso-hexano : acetato de etilo a acetato de etilo) dio una espuma incolora que se endureció en el secado a alto vacío a un sólido vidrioso. La cristalización de tolueno (1.8 mi) dio una mezcla de hidantoína (XV; 20 R = H, n = 1) y el análogo de disulfuro (XV; R = H, n = 2), junto con los uretanos correspondientes (XV; R = CONH2, n = 1) y (XV; R = CONH2 , n = 2) en una proporción de 60:25:13:2 como un sólido blanco (150 mg, aproximadamente 0.41 mmoles, 18%). Hidantoína (XV; R = H, n = 1) XH R (CDCI3, 300MHz); d 1.52 (3H, s); 2.50 (2H, AB, J 14.4Hz, ? 51.0Hz); 3.02 (1H, t, J 6.0Hz); 3.41 (2H, AB, J 13.3Hz, ? 44.4Hz); 3.89 (1H, ddd, J 11.5, 6.0, 4.5Hz); 4.26 (1H, dd, J 9.0, 4.5Hz); 4.55 (1H, ddd, J 11.5, 9.0, 6.0Hz); 7.1-7.5(10H, m) ; 8.50 (1H, brs ) . 13C RMN (CDCI3, 75MHz); d 21.7; 36.5; 37.3; 60.6; 63.4; 68.8; 127 a 140 (picos 12); 156.9; 175.9. IR 3189 (br) ; 3061 (m) ; 1765 (m) ; 720 (s); 1495 (w) ; 1432; 1374 (m) ; 1265; 1242; 1199; 1130; 1070; 1045; 851; 764 (w) ; 699 (m) cm"1. MS (CI), m/z (%); 371 (M+H, 70); 251 (M-PhCH2CH2OH, 100) . e) (R) -5-Bencilsulfanilmetil-1- ( (R) -2-hidroxi-l-fenil-etil ) -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona Se disolvió (3R, 5R) -3-Bencilsulfanilmetil-3- metriyl-5-fenil-morfolin-2-ona (1.00 eq. , 2.69 mmoles, 880 mg) en ácido acético (9 mi) y se cargó en un recipiente de tipo 'bomba' de acero inoxidable. Se cargó cianuro potásico (26.9 mmoles, 2.18 g) , el recipiente se selló inmediatamente y el contenido se agitó a temperatura ambiente por 4 días. La mezcla se vació en agua (18 mi) y se extrajo dos veces con DCM (18 mi) . Los extractos orgánicos se secaron (Na2S04) y se evaporaron a sequedad bajo presión reducida para dar un aceite de color café. El análisis de este material por LC-MS mostró una mezcla de (R) -5-bencilsulfanilmetil-1- ( (R) -2-hidroxi-l-fenil-etil ) -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona y (3R, 5R) -3-bencilsulfanilmetil-3-metil-5-fenil-morfolin-2-one en una proporción de aproximadamente 40:60. f ) (R) -5-Bencilsulfanilmetil-5-metil-imidazolidin- 2 , 4-diona Se disolvió (R) -5-bencilsulfanilmetil-1- ( (R) -2-hidroxi-l-fenil-etil ) -5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona (1.00 eq. , 1.00 mmoles, 370 mg) en ácido acético (140 mmoles, 8.00 mi, 8.38 g) . Se agrego Ácido bromhídrico al 48% (133 mmoles, 15.0 mi, 22.5 g) y la mezcla se calentó a reflujo por 4 h. La mezcla se enfrió a 0°C, se agregó hielo (100 g) , la mezcla se neutralizó a un pH de 7 a través de la adición de 0.880 SG de amon aco acuoso y se extrajo con DCM (100 mi) . El extracto orgánico se secó (Na2S04) y se evaporó a sequedad bajo presión reducida para dar el compuesto del titulo como una goma de color café (100 mg, 0.624 mmoles, 62%). Ejemplo 14 a) ter-butil-N-bencilidenalaninato Se hizo en lechada clorhidrato t-Butil (DL)-alaninato (5 g, 27 mmoles) en DCM (100 mi) y se agregó sulfato de magnesio (6.50 g, 51 mmoles), benzaldehído (2.86 g, 27 mmoles) y trietilamina (2.73 g, 27 mmoles) . Esta mezcla se agitó por 16 h a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. Se agregó sulfato de magnesio (0.81 g, 0.67 mmoles) a La mezcla y la reacción se agitó por 24 h más. La mezcla se filtró y el filtrado se lavó con agua (2 x 50 mi) . La capa orgánica se secó (MgS04) y se evaporó para dar el compuesto del titulo como un aceite incoloro (5.54 g, 83%). 1H-R N (300MHz, CDC13) d 1.47 (9H, s) , 1.50 (3H, s), 4.01-4.08 (1H, q) , 7.39-7.43 (3H, m) , 7.76-7.79 (2H, m) , 8.31 (1H, s) . b) S-bencil-N-bencilideix-2-metilcisteinato de ter- butilo Se agregó hidruro de sodio (0.17 g, 4.3 mmoles) a una solución de N-bencilidenalaninato de ter-butilo (0.5 g, 2 mmoles) en THF (5 mi) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó por 30 minutos y después se agregó bromometilsulfanilmetil-benceno (0.52 g, 2.4 mmoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 48 h y después se extinguió con agua (10 mi) . La capa acuosa después se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mi). La capa de acetato de etilo se lavó con agua (10 mi) , se secó (MgS04) y se evaporó a sequedad para dar el compuesto del título como un aceite amarillo (0.60 g, 86%) . El análisis CLAR quiral mostró la presencia de una mezcla de 1:1 de enantiómeros .

XH-RMN (300MHz, CDC13) d 1.47 (9?, s), 1.48 (3?, s), 2.89-3.05 (2H, m) , 3.78 (2H,s), 7.2-7.50 (5H, m) , 7.39- 7.43 (3H, m) , 7.76-7.79 (2H, m) , 8.31 (1H, s). c) S-bencil-N-benciliden-2-metil-D(R) -cisteinato de ter-butilo El hidróxido de potasio en polvo (5.90 g, 105 mmoles) y el catalizador de transferencia de la fase quiral bromuro de ( - ) -O-alil-N- ( 9-antracenilmetil ) cinconidinio (1.27 g, 2.1 mmoles) a N-bencilidenalaninato de ter-butilo (5 g, 21 mmoles) en tolueno (50 mi) a -20°C. La mezcla se agitó a esta temperatura por 1 h. La mezcla de reacción después se enfrió a -30°C y a solución de bromometilsulfanilmetil-benceno (11.6 g, 53 mmoles) en tolueno (50 mi) se agregó por goteo durante 1 h. La mezcla se agitó a esta temperatura por 1 h y después se dejó llegar a temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de celite y se lavó con tolueno (100 mi). El solvente se evaporó para dar a un residuo crudo (19 g) que se absorbió en tolueno (100 mi) y se lavó con agua (2 x 25 mi) . La capa orgánica se evaporó para dar el compuesto del titulo. La pureza enantiomérica en esta etapa no se determinó. Este material se utilizó directamente en el siguiente paso. 1H-RM (300MHz, CDCl3) d 1.47 (9H, s), 1.48 (3H, s), 2.89-3.05 (2H, m) , 3.78 (2H, s), 7.2-7.50 (5H, m) , 7.39-7.43 (3H, m) , 7.76-7.79 (2H, m) , 8.31 (1H, s). d) Clorhidrato de S-Bencil-2-metil-D(R) -cisteína Se agregó THF (50 mi) y 6M de ácido clorhídrico (50 mi) al producto crudo del paso (c) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. El solvente orgánico se evaporó y la capa acuosa restante se lavó con 6M de ácido clorhídrico (50 mi) . Las capas acuosas combinadas se calentaron a 60°C por 24 h. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el material resultante se hizo lechada en DCM (100 mi) y el sólido se recolectó a través de filtración. Este sólido se lavó con DCM (100 mi) para proporcionar el compuesto del título como un sólido (3.6 g, 64% de rendimiento durante dos pasos) . El análisis HPCL quiral mostró que el producto tiene 96.90% de pureza enantiomérica . LC Método: H-RMN (400MHz, dmso-d6) d 1.44 (3H5 s) , 2.87 (1H, d) , 2.98 (1H, d) , 3.8-3.85 (2H, m) , 7.3-7.39 (5H, m) , 8.50 (3H, s) . MS m/z, 226 [MH]+. Ejemplo 15 a) 5-S-bencil-N-benciliden-2-metil-L(S) -cisteinato ter-butilo Se agregó hidróxido de potasio en polvo (1.17 g, 21 mmoles) y el catalizador de transferencia de fase quiral bromuro de (+)-0- alil-N- (9-antracenilmetil ) cinconidinio (0.26 g, 0.42 mmoles) a N-bencilidenalaninato de ter-butilo (1 g, 4.2 mmoles) en tolueno (15 mi) a -30°C. Se agregó una solución de bromometilsulfanilmetil-benceno (4.65 g, 21 mmoles) en tolueno (5 mi) a esta mezcla a -30°C. La reacción se agitó a -15°C por 16 h. La mezcla se filtró a través de celite y se lavó con tolueno (40 mi) . El filtrado se lavó con agua (5 mi) y la capa orgánica se evaporó a sequedad para dar un aceite café oscuro. La pureza enantiomérica se encontró siendo aproximadamente 91.8% {S)-ent en esta etapa. El material crudo se utilizó directamente en la siguiente etapa.

Clorhidrato de S-Bencil-2-metil-L(S) -cisteína Se agregó THF (20 mi) y 6M de ácido clorhídrico mi) al producto crudo del paso (a) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. El solvente orgánico se evaporó y la capa acuosa restante secó con éter (3 x 20 mi) . Las capas orgánicas combinadas se volvieron a extraer con 6M ácido clorhídrico (20 mi) . La fase acuosa combinada se calentó a reflujo por 16 h. El solvente se evaporó bajo presión reducida para producir el compuesto del título como un sólido de color crema (1.10 g, 100%). La pureza enantiomérica se mostró siendo 90.12% (S)-ent (LC; mismo Método que el Ejemplo 14d) . 1H-RM (400MHz, dmso-d6) d 1.48 (3H, s), 2.87 (1H, d) , 2.98 (1H, d) , 3.82 (2H, m) , 7.3- 7.39 (5H, m) , 8.48 (3H, s) . Ejemplo 16 a) Clorhidrato de iso-Propil alaninato agregó cloruro de tionilo (26.70 g, 224 mmo por goteo a una solución de DL-alanina (10 g, 112 mmoles) en iso-propanol (400 mi) a -20°C. La mezcla se dejó llegar a temperatura ambiente y después se calentó a reflujo por 4 h. El solvente se evaporó para producir el compuesto del título (18.8 g, 100%) . 1H-RMN (300MHz) d 1.20-1.22 (6H+3H, cada d) , 3.46-3.50 (1H, q) , 4.01-4.06 (1H, m) . b) N-bencilidenalaninato de iso-propilo Se agregó sulfato de magnesio (13.50 g, 112 mmoles) y benzaldehído (4.76 g, 44.8 mmoles) a una lechada de clorhidrato de iso-propil alaninato (9.40 g, 56 mmoles) en DCM (200 mi). Se agregó trietilamina (5.6 g, 56 mmoles) a esta mezcla que después se agitó por 16 h bajo una atmósfera de nitrógeno. Se agregó más sulfato de magnesio (3.30 g, 28 mmoles) y trietilamina (0.56 g, 5.6 mmoles). La mezcla se agitó por 24 h. La mezcla se filtró y el filtrado se lavó con agua (2 x 50 mi) . La capa orgánica se secó (MgS04) y el solvente se evaporó para dar el producto como un aceite incoloro (9 g, 76%) . 1H-RMN (400MHz, CDCI3 , ) d 1.23-1.26 (6H, m) , 1.51 (3H, d) , 4.08-4.13 (1H, q) , 5:03- 5.09 (1H, m) , 7.36-7.45 (3H, m) , 7.76-7.79 (2H, m) , 8.31 (1H, s) . c) Clorhidrato de S-Bencil-2-metil-D(R) -cisteína Se agregó hidróxido de cesio en polvo (3.82 g, 22.8 mmoles) y el catalizador de transferencia de fase quiral bromuro ( - ) -O-alil-N- ( 9-antracenilmetil ) cinconidinio (0.27 g, 0.45 mmoles) a N-bencilidenalaninato de iso-propilo (1 g, 4.5 mmoles) en tolueno (10 mi) a -10°C. La mezcla se agitó a esta temperatura por 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a -30°C y se agregó una solución de bromometilsulfanilmetil-benceno (2.47 g, 11.4 mmoles) en tolueno (10 mi) por goteo. La reacción se agitó a esta temperatura por 1 h y después se dejó llegar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con tolueno (10 mi) . El solvente se evaporó para dar el producto crudo como una goma. Este material se absorbió en THF (20 mi) y se agregaron 6M de ácido clorhídrico (20 mi) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 16 h y después se calentó a reflujo por 4 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se lavó con acetato de etilo (20 mi ) . La capa acuosa se evaporó a sequedad bajo presión reducida. El residuo se absorbió en tolueno (2 x 20 mi) y después se evaporó a sequedad bajo presión reducida para producir el compuesto del título como un sólido color crema (1.20 g, 100%). El análisis CLAR quiral mostró que el producto tiene 91.72% de pureza enantiomérica . 1H-RMN (400MHz, dmso-d6) d 1.44 (3H, s), 2.87 (1H, d) , 2.98 (1H, d) , 3.8-3.85 (2H, m) , 7.3-7.39 (5H, m) , 8.50 (3H, s) . MS m/z 226 [MH]+. Ejemplo 17 a) N- (naftalen-2-il-metiliden) alaninato de ter-butilo Se agregó sulfato de magnesio (2.65 g, 22 mmoles), 2-naftaldehído (1.63 g, 20 mmoles) y trietilamina (1.1 g, 10 mmoles) a una lechada de clorhidrato de t-butil alaninato (DL) (2 g, 11 mmoles) en DCM (40 mi) . La mezcla se agitó por 24 h bajo una atmósfera de nitrógeno. Se agregó sulfato de magnesio (1.32 g, 11 mmoles) y la reacción se agitó por otras 16 horas. Después del análisis, se agregó más sulfato de magnesio (2.65 g, 22 mmoles) y la mezcla se agitó por 3 días a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y el filtrado se lavó con agua (2 x 100 mi) . La capa orgánica se secó con sulfato de magnesio, se filtró y el solvente se evaporó para dar el compuesto del título como un sólido blanco (2.43 g, 78%) . ??-??? (300MHz, CDC13) d 1.46 (9?, s), 1.56 (3?, s), 4.07-4.14 (1H, q) , 7.48-7.55 (2H, m) , 7.84-7.91 (3H, m) , 8.02-8.09 (2H, m) , 8.45 (1H, s) . b) Clorhidrato de S-Bencil-2-metil-D(R) -cisteína Se agregó hidróxido de rubidio monohidratado en polvo (1.79 g, 17.5 mmoles) y el catalizador de transferencia de fase quiral bromuro de ( - ) -O-alil-N- (9-antracenilmetil ) cinconidinio (0.21 g, 0.35 mmoles) a N- (naftalen-2-il-metiliden) alaninato de ter-butilo (1 g, 3.5 mmoles) en tolueno (10 mi) a -30 °C . La mezcla se agitó a esta temperatura por 30 mins . Se agrego por goteo una solución de bromometilsulfanilmetil-benceno (1.91 g, 8.8 mmoles) en tolueno (10 mi) a esta mezcla. La reacción se agitó a esta temperatura por 1 h y después se agitó a temperatura ambiente por 3 días. La mezcla se filtró a través de celite y se lavó con tolueno (50 mi) . El solvente se evaporó para dar la metil cisteína protegida como una goma. Este material se utilizó directamente sin aislamiento o caracterización. El producto crudo se absorbió en una mezcla de THF (20 mi) y 6M de ácido clorhídrico (20 mi) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 16 h. El solvente orgánico se evaporó y el residuo se lavó con acetato de etilo (20 ral). La capa de acetato de etilo se volvió a extraer con 6M de ácido clorhídrico (20 mi) . Las fases acuosas combinadas después se calentaron a 70°C por lo horas. La capa acuosa se lavó con acetato de etilo (50 mi) antes de evaporarse a sequedad bajo presión reducida. El residuo se azeo-secó utilizando tolueno (50 mi) para producir el compuesto del título como un sólido de color crema (0.90 g, 83%) . El análisis CLAR quiral mostró que el producto tiene 94.3% de pureza enantiomérica . 1H-RM (300MHz, dmso-d6) d 1.50 (3H, s), 2.90 (1H, d) , 3.20 (1H, d) , 3.82 (2H, s), 7.3- 7.39 (5H, m) , 8.52(3H, s) . MS (ES) , m/z 226 [MH]+. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (19)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. - La Forma G de ( 5S) -5-[4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, caracterizada porque tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X que comprende picos específicos a 10.1, 16.2, 16.8 y 19.0 °2?, y en donde el patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa.
2. 2. - La Forma G de (5S) -5-[4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, caracterizada porque tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X que comprende picos específicos a 9.7, 10.1, 11.5, 12.8, 14.1, 16.2, 16.8 y 19.0 °2?, y en donde el patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa.
3. 3. - La Forma G de (5S) -5-[4- (5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, caracterizada porque tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X sustancialmente igual al mostrado en la Figura 1, y en donde patrón XPRD se mide utilizando la radiación CuKa.
4. 4. - El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque es la Forma G de (5S) -5-[4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-1- sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona sustancialmente puro .
5. 5. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque es al menos 99% puro.
6. 6. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque es al menos 95% puro.
7. 7. - La Forma G del compuesto (I) de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada para utilizarse en terapia.
8. 8. - La Forma G del compuesto (I) de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada para utilizarse en la fabricación de un medicamento para utilizarse en el tratamiento o profilaxis de una enfermedad o condición en donde la inhibición de la actividad MMP es benéfica .
9. 9. - El uso de conformidad con la reivindicación 8, en donde la enfermedad o condición es una enfermedad o condición inflamatoria.
10. 10. - El uso de conformidad con la reivindicación 9, en donde la enfermedad es COPD.
11. 11. - Una composición farmacéutica que comprende la Forma G de (5S) -5-[4- (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-1-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2, 4-diona de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada porque se mezcla con un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable.
12. 12. -Un método para tratar una enfermedad o condición mediada por la actividad de metaloproteinasa , caracterizado porque comprende la administración de un paciente en la necesidad del mismo de una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 11.
13. 13. -Un procedimiento para la preparación de la Forma G del compuesto (I) de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque comprende la cristalización de ( 5S ) - 5 - [4 - (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-1-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona de un alcohol acuoso o de alcoholes metilados industriales acuosos .
14. 14. -Un procedimiento de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la (5S)-5-[4-(5-cloro-piridin-2-iloxi)-piperidin-l-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona se prepara a través de la reacción de un cloruro de 5 - cloro - 2 - (piperidin- 4 -iloxi ) -pir idin (VI) con ( ( S ) - 4 -met i 1 - 2 , 5 - dioxo -imidazol idin- 4 - i 1 ) -metilsulfonil (V) y en donde el compuesto (VI) se prepara a través de la liberación de la base libre de una sal correspondiente.
15. 15. -Un procedimiento para la preparación de (S) -5-metil-5-{[ (fenilmetil) tio]metil}imidazolidin, 2 , 4-diona (IV), útil como el intermediario en la síntesis de (5S) - 5 - [4 - (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-1-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, caracterizado porque comprende utilizar una hidantoinasa enzima para efectuar el cierre de anillos del ácido (RS) - 3 -benc i 1 sul f anil-2-metil-2-ureido-propiónico (XI) .
16. 16. - Un procedimiento de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque la hidantoinasa enzima es la Hidantoinasa 1 o Hidantoinasa 2 Roche.
17. 17. -Un procedimiento para la preparación de ( 2S ) -2 -amino-3 -benciltio-2 -me ti lpropionamida (R)-(-)-mandelato hemihidratado , útil como un intermediario en la síntesis de ( 5S ) -5-[4- ( 5-cloro-piridin-2-iloxi ) -piperidin-l-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4 -diona, caracterizado porque comprende la cristalización del ácido 2 -amino- 3 -benci 11 io- 2 -metilpropionamida y ( R ) - ( - ) -mandél i co racémico en la presencia de agua.
18. 18. - Un procedimiento para la preparación de (S) -5-metil-5-{[ ( fenilmetil ) tio]metil}imidazolidin, 2 , 4 -diona, útil como un intermediario en la síntesis de (5S) - 5 - [ - (5-cloro-piridin-2-iloxi) -piperidin-1-sulfonilmetil]-5-metil-imidazolidin-2 , 4-diona, caracterizado porque comprende la eliminación de la simetría enzimática de una meso-amida (XIV) utilizando una amidasa enzima adecuada.
19. 19.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la amidasa es Rhodococcus erthoplis amidasa.