MX2007016046A - Sistema y metodo para re-ubicar un objeto en una muestra en un portaobjetos con un dispositivo de imagen de microscopio. - Google Patents

Abstract

Un metodo para re-ubicar un objeto en una muestra esta provisto para un portaobjetos previamente escaneado que tiene objetos determinados cada uno con coordenadas almacenadas correspondientes y una imagen almacenada, los objetos siendo mapeados en relacion uno con el otro. El portaobjetos se coloca en una plataforma de microscopio, imagenes almacenadas de los objetos son desplegados visualmente y un objeto objetivo es seleccionado. El portaobjetos se mueve a una posicion de coordenada estimada, correspondiente a las coordinadas del objeto objetivo y una imagen tipo campo-de-vision de la muestra se captura para compararse con la imagen almacenada del objetivo. Si el objetivo esta en la imagen, se determina un desplazamiento entre las coordinadas reales del objetivo ubicado y las coordenadas almacenadas del objeto correspondiente. El portaobjetos entonces se mueve, via la plataforma, de la posicion de coordenada estimada, de acuerdo con el desplazamiento, al centro del objetivo en la imagen. Sistemas y metodos asociados tambien estan provistos.

Description

SISTEMA Y MÉTODO PARA RE-UBICAR UN OBJETO EN UNA MUESTRA EN UM PORTAOBJETOS CON UN DISPOSITIVO DE IMAGEN DE MICROSCOPIO CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un sistema y método para re-ubicar un objeto en una muestra en un portaobjetos previamente examinado con un dispositivo de imagen de microscopio.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los análisis microscópicos son una herramienta ampliamente usada para la investigación y las evaluaciones de rutina, particularmente en el campo de la biología celular, citología y patología. Las muestras de tejido y preparaciones de célula son visualmente inspeccionadas por patólogos bajo diversas condiciones diferentes y procedimientos de prueba, a través del uso tie un microscopio. Con base en dicha inspección visual realizada por el patólogo, las determinaciones concernientes al tejido o materíal celular se pueden hacer. Por ejemplo, en la detección del cáncer e investigación, el análisis microscópico ayuda en la detección y cuantificación de alteraciones genéticas y/o anormalidades que parecen relacionadas a la causa y progresión del cáncer, tales como cambios de expresión de genes específicos en forma de ADN o ARN mensajero (amplificación de gen, eliminación de gen, mutación de gen) o la expresión de la proteína codificada. Estas alteraciones/ anomalías pueden evaluarse en portaobjetos microscópicos específicamente preparados para presentar células individuales, como es el procedimiento estándar en citología, o secciones histológicas completas o Micro Análisis de Tejido se pueden evaluar.

Aunque existen otras numerosas técnicas o análisis de laboratorio apropiados, la microscopía se usa rutinariamente debido a que es una técnica informativa, permitiendo investigaciones rápidas en el nivel celular y sub-celular, mientras son capaces de implementarse rápidamente con un costo relativamente bajo. Sin embargo, para poder superar, por ejemplo, limitaciones de subjetividad y/o repetibilidad de microscopía convencional, los dispositivos de I análisis mejorados combinan el microscopio con provisiones de análisis de imagen automáticas.

Dichos dispositivos mejorados incluyen, por ejemplo, sistemas interactivos, dispositivos de escaneo automático y escáneres de portaobjetos virtual.

Los sistemas interactivos usualmente no cambian el flujo de trabajo del patólogo analizando e interpretando portaobjetos bajo el microscopio. Típicamente, dichos sistemas interactivos permiten el potencial para extraer información cuantitativa adicional del portaobjetos via análisis de imagen y, por lo tanto, posiblemente mejoran la reproducibilidad y la interpretación de resultados del operador. Mejores herramientas para reportar y documentar resultados de análisis también pueden realizarse. Si se configuran apropiadamente, los sistemas interactivos son relativamente rápidos y rentables, pero el impacto de dichos sistemas interactivos en el flujo de trabajo rutinario es relativamente pequeño.

Los dispositivos de detección automática de eventos poco frecuentes se establecen típicamente de manera que el análisis completo de los portaobjetos sea desempeñado por el sistema en una manera totalmente no supervisada, desde la carga de los portaobjetos en la plataforma de escaneo hasta el reporte final de los resultados. Dichos sistemas automáticos usualmente escanean los portaobjetos, identifican automáticamente objetos o áreas de interés para el análisis, evalúan los objetivos cuantitativamente y reportan y documentan los resultados. El flujo de trabajo rutinario del patólogo o citotécnico en general se cambia drásticamente, de una tarea de clasificación de labor intensivo a la interpretación de resultados de análisis. Sin embargo, dichos sistemas automáticos normalmente son bastante caros, de manera que un volumen anual relativamente alto de portaobjetos debe ser procesado para justificar el costo de la adquisición de dicho dispositivo.

Los sistemas virtuales de escaneo de portaobjetos han sido desarrollados para adquirir automáticamente grandes imágenes generales en diferentes resoluciones ópticas. Dichas imágenes generales pueden ser mucho más grandes que las FOV individuales ya que pueden verse en el microscopio. 1 Un factor común independiente del dispositivo que relaciona a estas tres aplicaciones mencionadas anteriormente, a saber sistemas interactivos, dispositivos de escaneo automático y escáneres de portaobjetos virtuales, es que puede haber circunstancias en las que el portaobjetos previamente escaneado, convertido en imagen y/o de otra forma analizado debe ser reexaminado físicamente por un operador. En dichas circunstancias, el operador se enfrenta a la tarea cíe re-ubicar un objeto de interés en la muestra en el portaobjetos, en donde dicho objeto de interés fue descubierto en el análisis previo de ese portaobjetos. Para agravar la tarea, el operador puede, en algunas circunstancias, estar usando un dispositivo de imagen de microscopio diferente del dispositivo de imagen de microscopio u otro aparato que se uso previamente para escanear, convertir en imagen y/o analizar dicho portaobjetos. En algunas circunstancias, la magnificación usada para previamente convertir en imagen o analizar el portaobjetos puede no ser conocida y el dispositivo usado por el operador puede tener una resolución diferente, tanto en términos de capacidad de conversión a imagen como en términos de provisión de movimiento de los componentes del dispositivo. i En un método típico de re-ubicación de un objeto en una muestra en un portaobjetos, una o más marcas de re-ubicación se designan y ubican en el portaobjetos y estas marcas son almacenadas como coordenadas de referencia, antes de que el portaobjetos sea escaneado o de otra forma convertido en imagen. Durante el procedimiento de escaneo de portaobjetos, una o más imágenes del portaobjetos u objetos dentro de la muestra en el portaobjetos son capturados y almacenados, posiblemente con valores de coordenada que don determinados en relación con las marcas de re-ubicación. Antes de revisar o de otra manera intentar re-ubicar un objeto en el portaobjetos, una o más de las marcas de re-ubicación debe encontrarse en el portaobjetos físico.

Si se proporciona la funcionalidad apropiada, se puede permitir al operador seleccionar un objeto i deseado de interés de un despliegue visual de objetos de interés en la muestra, en ese momento la plataforma se mueve a una ubicación esperada o estimada donde el objeto seleccionado debe estar dentro del campo de visión. Sin embargo, el operador puede tener que identificar subjetivamente si el objeto en la ubicación esperada es el mismo que el objeto seleccionado por el oper dor. El operador también debe a menudo corregir manualmente la posición de la plataforma si el objeto desplegado no está centrado con respecto al campo de visión. Además, si el objeto seleccionado no es desplegado o no puede ser de otra forma identificado en el campo de visión en la posición esperada, entonces el operador generalmente debe encontrar el objeto manualmente. Sin embargo, una vez que un procedimiento de búsqueda manual es invocado por el operador, cualquier calibración de coordenada usualmente se pierde y cualquier objeto seleccionado después para revisión requerirá que el mismo procedimiento de re-ubicación manual que consume tiempo sea desempeñado por el operador.

Como tal, los métodos típicos de re-ubicación a menudo requieren de portaobjetos específicos que tienen marcas de precisión particularmente para el procedimiento de re-ubicación. Además, las plataformas motorizadas costosas de alta precisión (típicamente en el rango micrón) son a menudo necesarias para capturar y/o re-ubicar objetos en el portaobjetos para mantener reproducibilidad suficiente con respecto a la imagen previamente escaneada sobre la extensión entera del portaobjetos. Antes de escanear el portaobjetos, las marcas de re-ubicación u otros parámetros deben establecerse encontrando físicamente esas marcas en el portaobjetos, en donde dichas marcas de re-ubicación otra vez deben encontrarse antes de revisar el portaobjetos para re-ubicar objetos de interés. Si la metodología de re-ubicación no es lo suficientemente precisa, la ubicación de un objeto seleccionado podría tener que ser manualmente corregida para llevar ese objeto a la posición apropiada en el campo de visión. También, ubicar un objeto generalmente hace poco o nada para mejorar la precisión de ubicación para objetos subsecuentemente seleccionados de interés en ese portaobjeto. Aún además, la precisión de re-ubicación es dependiente de la precisión de la plataforma de escaneo, así como de la precisión de la plataforma de revisión y también puede ser afectada por la precisión de la determinación de las marcas de re-ubicación durante los procedimientos de escaneo y re-ubicación.

Así, existe una necesidad por un método y aparato para la re-ubicación rápida y eficiente de un objeto de interés en una muestra en un portaobjetos de microscopio previamente escaneado bajo ¡un dispositivo de imagen de microscopio, en donde la mínima o ninguna intervención manual i del operador se requiere, particularmente donde la plataforma de microscopio es motorizada y el microscopio es así capaz de desempeñar automáticamente la mayoría si no es que todas las funcipnes de re-ubicación. Dicho método y aparato deseablemente debería ser capaz de re-ubicar i el objeto sin importar si el portaobjetos fue escaneado por ese dispositivo o un dispositivo diferente.

Dicho aparato y método deseablemente debería ser relativamente rentable, tener requerimientos de equipo relativamente pequeños y/o simples y ser fácilmente adaptable a diversas magnificaciones.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN Las anteriores y otras necesidades son cumplidas por la presente invención que, en una modalidad, proporciona un método de re-ubicación de un objeto de interés en una muestra en un portaobjetos como es visto a través de un objetivo de microscopio. Dicho método comprende escanear el portaobjetos para determinar objetos de interés en la muestra, asociando coordenadas correspondientes con cada objeto de interés y almacenando una imagen y coordenadas correspondientes de cada objeto de interés. Los objetos de interés son mapeados en relación uno con otro vía las coordenadas. El portaobjetos es entonces colocado en una plataforma de microscopio y las imágenes almacenadas de los objetos de interés son desplegadas en un i despliegue visual. Un primer objeto objetivo de interés se selecciona de las imágenes almacenadas desplegadas de los objetos de interés. El portaobjetos se mueve, vía la plataforma de microscopio, hacia1 una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos correspondiendo a las í coordinadas del primer objeto objetivo de interés. Una imagen de campo de visión de la muestra en la ppmera posición de coordenada estimada a través del objetivo de microscopio. La imagen de campo de visión es entonces comparada con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de i interés y si el primer objeto objetivo de interés está ubicado en la imagen de campo de visión, un primer desplazamiento entre las coordenadas reales del primer objeto objetivo ubicado de interés y las coordenadas almacenadas del objeto de interés correspondiente al primer objeto objetivo de interés se determina. El portaobjetos es entonces movido, vía la plataforma de microscopio, de la primera posición de coordenada estimada y de acuerdo con el primer desplazamiento para centrar el primer objeto objetivo de interés en la imagen de campo de visión.

Otro aspecto de la presente invención comprende un método para re-ubicar un objeto de interés en una muestra en un portaobjetos en una plataforma de microscopio, con el portaobjetos habiendo sido previamente escaneado para determinar objetos de interés en la muestra y en donde las coordenadas correspondientes han sido asociadas con cada objeto de interés, una imagen y coordenadas correspondientes de cada objeto de interés han sido almacenadas y los objetos de interés mapeados en relación uno con el otro vía las coordenadas. Dicho método comprende desplegar las imágenes almacenadas de los objetos de interés en un despliegue visual y seleccionar un primer objeto objetivo de interés de las imágenes almacenadas desplegadas de los objetos de interés. El portaobjetos es entonces movido, vía la plataforma de microscopio, a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos correspondiente a las coordenadas del primer objeto objetivo de interés. Una imagen de campo de visión de la muestra es capturada en la primera posición de coordenada estimada a través de un objetivo de microscopio. La imagen de campo de visión se compara con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés y si el primer objeto objetivo de interés es ubicado en la imagen de campo de visión, un primer desplazamiento entre las coordenadas reales del primer objeto objetivo ubicado de interés y las coordenadas almacenadas del objeto de interés correspondientes al primer objeto objetivo de interés es determinado. El portaobjetos es entonces movido, vía la plataforma de microscopio, de la primera posición coordinada estimada y de acuerdo con el primer desplazamiento para centrar el primer objeto objetivo de interés en la imagen de campo de visión. 1 Otro aspecto de la presente invención comprende un método para re-ubicar un objeto de interés en una muestra en un portaobjetos en una plataforma de microscopio, con el portaobjetos habiendo sido previamente escaneado para determinar objetos de interés en la muestra y en donde las coordenadas correspondientes han sido asociadas con cada objeto de interés, una imagen y coordenadas correspondientes de cada objeto de interés han sido almacenadas y los objetos de interés mapeados en relación uno con otro vía las coordenadas. Dicho método comprende desplegar las imágenes almacenadas de los objetos de interés en un despliegue visual y seleccionar un primer objeto objetivo de interés de las imágenes almacenadas desplegadas de los objetos de interés. El portaobjetos es movido, vía la plataforma de microscopio, a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos correspondiente a las coordenadas del primer objeto objetivo de interés. Una imagen de campo de visión de la muestra en la primera posición de coordenada estimada vista a través de un objetivo de microscopio es manualmente comparada con ! la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés y, si el primer objeto objetivo de interés está ubicado en la imagen de campo de visión, un primer desplazamiento entre las coordenadas reales del primer objeto objetivo ubicado de interés y las coordenadas almacenadas del objeto de í interés correspondientes al primer objeto objetivo de interés es determinado. El portaobjetos es entonces movido, vía la plataforma de microscopio, de la primera posición de coordenada estimada y de acuerdo con el primer desplazamiento para centrar el primer objeto objetivo de interés en la imagen de campo de visión. i Aparatos apropiados para implementar y lograr los métodos divulgados también están provistos, en donde muchas configuraciones y arreglos diferentes de aparatos pueden ser usados, como podrá apreciar una persona con habilidad en la técnica. Por consiguiente, las modalidades de la presente invención proporcionan distintas ventajas como se describe y discute ¡ adicionalmente en el presente documento.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS ' Habiendo así descrito la invención en términos generales, se hará ahora referencia a los i dibujos que la acompañan, que no necesariamente están dibujados a escala y en donde: La Figura 1 ilustra esquemáticamente un aparato para re-ubicar un objeto de interés en un portaobjetos previamente escaneado bajo un microscopio, de conformidad con una de las mod lidades de la presente invención, en donde A es un dispositivo de cámara, B es un microscopio, C es una plataforma codificada motorizada o manualmente operada, D es un dispositivo de computadora y E es un despliegue visual.

La Figura 2 ilustra esquemáticamente un despliegue visual de objetos previamente escaneados de interés desplegados a lo largo de una imagen FOV en un despliegue visual, de conformidad con una de las modalidades de la presente invención, ' La Figura 3 ilustra esquemáticamente una plataforma siendo automáticamente movida en una manera espiral alrededor de una posición de coordenada estimada original para buscar adicionalmente un objeto de interés, de conformidad con una modalidad de la presente invención, si el objeto de interés no se encuentra en una imagen FOV, en donde F son las ubicaciones del objeto almacenado, G es la ubicación del objeto seleccionado y H es la posición de la plataforma actual (FOV) y La Figura 4 ilustra esquemáticamente un despliegue visual de objetos previamente escapeados de interés ordenados con respecto uno del otro, mostrando un objeto seleccionado de interés y una ubicación actual del campo de visión del microscopio con respecto al objeto seleccionado de interés y los otros objetos de interés en el portaobjetos, de conformidad con una de las modalidades de la presente invención, en donde F son las ubicaciones del objeto almacenado, G es la ubicación del objeto seleccionado, H es la posición de la plataforma actual (FOV) e I es la dirección del objetivo.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención será ahora descrita más completamente en lo sucesivo con referencia a los dibujos que la acompañan, en los que algunas, pero no todas las modalidades de las invenciones se muestran. De hecho, estas invenciones pueden ser moduladas en muchas formas diferentes y no deben ser interpretadas como limitadas a las modalidades establecidas en el presente documento; más bien, estas modalidades están provistas de manera que esta divulgación satisfaga los requerimientos legales aplicables. Números similares se refieren a elementos similares en toda la descripción.

! Las modalidades de la presente invención están dirigidas a métodos para re-ubicar un objetó en una muestra en un portaobjetos previamente examinado con un disposifivo de imagen de microscopía. Para poder llevar a cabo dicho métodos, una modalidad de la presente ¡nvención implémenta un sistema 50 como se muestra, por ejemplo, en la Figura 1 , que incluye un microscopio 100 con funcionalidades de automatización incorporadas (por ejemplo, un Zeiss Axiolmager), una plataforma motorizada 150 para el microscopio 100 que puede ser controlada por un disposifivo de computadora 300 o manualmente operada por un operador (alternativamente, la plataforma motorizada 150 puede comprender, por ejemplo, una plataforma que se puede colocar manualmente que está configurada y/o codificada para moverse de acuerdo con un sistema de coordenadas calibrado x-y u otro apropiado) y un dispositivo de cámara 200 tal como una cámara de escaneo progresivo de área (por ejemplo, una cámara tipo CCD o CMOS). La plataforma de microscopio motorizada 150 puede estar en comunicación con un disposifivo de computadora 300 i que tiene un despliegue visual 325, mientras el dispositivo de cámara 200 puede también estar en comunicación con el dispositivo de computadora 300 vía, por ejemplo, un digitalizador o un dispositivo captador de marcos. El sistema 50 está configurado para recibir, en la plataforma 150, un portaobjetos 350 que tiene una muestra asociada al mismo, en donde la muestra/portaobjetos 350 ha sido previamente escaneado por un dispositivo de imagen y cualquier objeto de interés ubicado dentro de la muestra como resultado de dicho escaneo almacenado como imágenes individuales. Las imágenes individuales pueden ser almacenadas, por ejemplo, en medios portátiles o en el disco duro o en otros sistemas de almacenamiento asociados con el disposifivo de computadora 300.

Dichas imágenes de los objetos de interés pueden obtenerse vía el sistema 50 o vía cualquier otro sistema de imagen apropiado capaz de identificar y convertir en imagen, los objetos de interés. Sin embargo, el sistema 50 está configurado particularmente para re-ubicar los objetos de interés en el portaobjetos 350, sin importar si el portaobjetos 350 se mueve al sistema 50 desde el otro sistema de imagen o sin importar si el portaobjetos es retirado desde el otro sistema 50 después de convertirlo en imagen y luego es reemplazado en la plataforma 150 en un momento posterior para examinación adicional. Una persona con habilidad en la técnica notará, sin embargo, que los métodos descritos en el presente documento pueden ser igualmente aplicables donde el portaobjetos 350 ha sido movido con respecto a la plataforma 150 o donde el operador desea verificar la orientación/alineación del portaobjetos 350 con respecto a la condición como fue convertida en imagen.

El dispositivo de computadora 300 está además configurado para alojar y ejecutar una o más bases de datos, con dichas bases de datos incluyendo las imágenes de objetos de interés de las muestras/portaobjetos examinados o escaneados. Además, las coordenadas, tales como las coordenadas Cartesianas o coordenadas en cualquier otro sistema de coordenadas apropiado, de los objetos almacenados de interés con respecto a un punto de referencia en el portaobjetos son determinadas y almacenadas en asociación con la imagen respectiva (también mencionada en el presente documento como las "coordenadas de escaneo" de una imagen en un "sistema de coordenadas de escaneo"). El punto de referencia puede ser cualquier característica apropiada presente en el portaobjetos tal como, por ejemplo, una de las esquinas del portaobjetos o una marca fiducial bien definida en el portaobjetos. En algunas circunstancias, el punto de referencia mismo puede salvarse como uno de, o con, los objetos de interés para el portaobjetos escaneado. En la alternativa, el sistema de coordenadas puede establecerse o de otra manera asociarse con una calibración de la plataforma de microscopio 150, de manera que las imágenes almacenadas sean asociadas con las coordenadas relativas al sistema de coordenadas de plataforma.

Cuando el portaobjetos 350 es colocado en la plataforma 150 del sistema 50 para examinación adicional, las modalidades de la presente invención están dirigidas a permitir a cualquiera de los objetos previamente convertidos en imágenes de interés de un ejemplar, tal como un ejemplar biológico, que sean re-ubicados en el portaobjetos 350 por un operador bajo el microscopio 100 mediante la selección de la imagen de ese objeto de interés de imágenes digitales previamente escaneadas de los objetos de interés en el portaobjetos como se presentaron al operador en el despliegue visual 325. Antes de que el portaobjetos 350 sea colocado en la plataforma 150, sin embargo, la plataforma de microscopio 150 es primero calibrada para establecer un sistema de coordenadas actual (que puede ser el mismo que el sistema de coordenadas de plataforma establecido en la fase de escaneo de portaobjetos, si se esfá usando el mismo sistema 50, o diferente del sistema de coordenadas de plataforma de la fase de escaneo de portaobjetos si el sistema 50 es diferente del escáner). Dicho sistema de coordenadas "actual" también se menciona en el presente documento en términos de "coordenadas de plataforma'' con respecto a un "sistema de coordenadas de plataforma".

Cuando el portaobjetos 350 es primero colocado en la plataforma 150 y un objeto de interés 330 es seleccionado del despliegue visual 325 por el operador (el "primer objeto de interés"), el sistema 50 automáticamente determina y calibra los parámetros para el sistema de i coordenadas de plataforma de la plataforma 150, en donde la plataforma 150 puede inferacfuar con él dispositivo de computadora 300 para desempeñar dicha calibración. Típicamente, no se requiere ninguna acción del operador, aunque malas alineaciones en bruto u otros problemas que pueden ocurrir durante el procedimiento podrían ser reportados al operador vía el dispositivo de computadora 300, donde es necesario, para corrección manual. Cuando el sistema de coordenadas de plataforma para la plataforma 150 ha sido calibrado, el dispositivo de de cámara 200 proporciona continuamente una imagen del campo de visión ("FOV") 340 de la muestra vista por el microscopio 100 al dispositivo de computadora 300. El dispositivo de computadora 300 puede, en algunas circunstancias, desplegar continuamente la imagen FOV 340 en el despliegue visual 325. Las imágenes previamente escaneadas de los objetos de interés 330 asociadas con ese portaobjetos 350 también pueden ser desplegadas a lo largo de la imagen FOV 340 en el despliegue visual 325, o de otra manera ser visualmente provistos al operador, como se muestra, por ejemplo, en la Figura 2. Junto con la imagen FOV 340, el sistema de computadora 300, del sistema de coordinadas de plataforma calibrado, estima o de otra manera determina una posición actual para la imagen FOV con respecto al portaobjetos 350. Esto es, si un portaobjetos 350 se engrana con la plataforma 150 en una posición conocida en la plataforma 150 y el movimiento de la plataforma 150 está correlacionado con un cambio en las coordenadas en ese portaobjetos desde la posición conocida, entonces para cualquier portaobjetos colocado en la plataforma calibrada, una posición actual aproximada para el FOV con respecto al portaobjetos se puede determinar desde la posición de la plataforma 150 vía el sistema de coordenadas de plataforma.

Aunque la posición actual aproximada del FOV con respecto al portaobjetos 350 se puede determinar, el sistema de coordenadas de plataforma no necesariamente corresponde al sistema de coordenadas de escaneo asociado con el portaobjetos previamente escaneado. Además, el objeto de información de interés asociado con el portaobjetos 350, como se discutió previamente, está asociado con el sistema de coordenadas de escaneo. Como tal, cuando el primer objeto deseado de imagen de interés es seleccionado por el operador del despliegue visual 325 o de otro dispositivo de despliegue visual (no mostrado), las coordenadas almacenadas para ese primer objeto de interés están asociadas con el sistema de coordenadas de escaneo. El sistema 50 debe por lo tanto reconciliar el sistema de coordenadas de escaneo con el sistema de coordenadas de plataforma para re-ubicar ese primer objeto de interés en el FOV mostrado en el despliegue visual 325. Por consiguiente, ya que la posición actual aproximada del FOV es conocida con respecto al portaobjetos 350 del sistema de coordenadas de plataforma, el sistema 50 se configura para mover el portaobjetos 350 a una posición de coordenada estimada del FOV, correspondiente a las coordinadas del primer objeto seleccionado de interés transferido al sistema de coordenadas de plataforma. La posición de coordenada estimada comprende pues una ubicación general en el portaobjetos 350 en la cual una búsqueda automática del primer objeto seleccionado de interés pued comenzar. l De conformidad con un aspecto ventajoso de la presente invención, la imagen del FOV en la posición de coordenada estimada se compara con la imagen almacenada del primer objeto de interés, usando un método de correlación, como se describe adicionalmente en el presente documento, para poder determinar si el primer objeto seleccionado de interés está dentro de la imagen FOV en la posición de coordenada estimada. Dicha correlación de imágenes puede lograrse, por ejemplo, en un dominio de espacio o en un dominio de frecuencia. El método de dominio de frecuencia usa un procedimiento de Transformada Rápida de Fourier ("FFT"), mientras el método de dominio de espacio usa un procedimiento de convolución para desempeñar la correlación. Para imágenes de nivel gris, dicha correlación se basa en el valor de nivel de gris de los píxeles en las imágenes respectivas. Para imágenes RGB, dicha correlación puede basarse en, por ejemplo, la luminancia de cada píxel, las intensidades promedio de rojo, verde y azul, o un canal de un solo color, en las imágenes respectivas. En algunas circunstancias, una combinación particular de los tres colores (RGB) que resulta de una técnica de separación de cromógeno (Dichas técnicas se discuten en más detalle, en la Publicación de Solicitud de Patente de EUA No. US 2003/0091221 A1 (Método para video-microscopía cuantitativa y sistema asociado y producto de programa de software de computadora) y US 2003/0138140 A1 (Método para video-microscopía cuantitativa y sistema asociado y producto de programa de software de computadora), ambas de Marcelpoil ßf al. y cedidas al cesionario de la presente invención, los contenidos de las cuales están incorporados en el presente documento como referencia en su totalidad) puede ser utilizada como un valor base para la correlación entre las imágenes respectivas. Esto es, para dicha correlación, características particulares del primer objeto seleccionado de interés se determinan y luego la imagen FOV en la posición de coordenada estimada se analiza para determinar su esas características particulares están presentes en la imagen FOV.

Dicho procedimiento de correlación puede ser ilustrado por un coeficiente de correlación para las dos imágenes, el cual se define como: "1,2 P = -?/sis2 donde s, es la desviación estándar de los valores base seleccionados de la Imagen 1 (es decir, la imagen del primer objeto seleccionado de interés y s2 es la desviación estándar de los valores base correspondientes de la Imagen 2 (es decir, la imagen FOV). ?1 2 es la desviación estándar del producto de los valores base de las Imágenes 1 y 2. , Con el método de dominio de frecuencia, ambas imágenes se transforman en el dominio de frecuencia usando FFT para formar los respectivos conjuntos o matrices transformados de datos de dos dimensiones. Esto es, los conjuntos de datos transformados de dos dimensiones comprenden matrices de números complejos, con las matrices teniendo las mismas dimensiones que las imágenes originales (en forma de matriz). Los conjuntos de datos transformados de dos dimensiones de las imágenes respectivas son entonces multiplicados elemento por elemento para formar un objeto de datos de dos dimensiones. Un vector del valor del centro (es decir, el centro del objeto de dos dimensiones resultante) al valor absoluto más alto del objeto de datos de dos dimensiones resultante representa así el desplazamiento de las dos imágenes en términos de distancia y dirección. Cuando se usa el método de dominio de frecuencia, sin embargo, las imágenes respectivas deben tener, por ejemplo, dimensiones x y y iguales, en donde cada dimensión de imagen debe ser un poder de dos (es decir, 64, 128, 512, ...). Usando este método, el tiempo requerido para determinar el desplazamiento o compensación depende solamente del tamaño (dimensión, pí?eles, etc.) de las dos imágenes respectivas y no depende del contenido real de las mismas. En este método, un valor real del coeficiente de correlación es desconocido o determinado, con sólo el punto de correlación más alto resultando del análisis.

Usando este método de dominio de espacio, la Imagen 1 es primero cambiada tanto en la dirección x como en la y, y los coeficientes de correlación con respecto a la Imagen 2 son entonces determinados como una función del vector de desplazamiento (x, y). Los valores x y y del coeficiente de correlación más alto encontrado en dicho proceso son entonces usados como el desplazamiento de la Imagen 1 con respecto a la Imagen 2, si el coeficiente de correlación está por encima de un límite preestablecido. Si el coeficiente de correlación está por debajo de ese límite, las imágenes respectivas no pueden ser igualadas y dicho resultado indica que el primer objeto seleccionado de interés no ha sido ubicado dentro de la imagen FOV.

Con el método de dominio de espacio como se describe, sin embargo, analizar grandes imágenes con todas las posibles combinaciones de ? y y en las mismas puede ser una operación consumidora de tiempo, que puede, en algunas circunstancias, ser acelerada por el siguiente procedimiento repetido de manera iterativa: 1. Correlacionar las dos imágenes con punto de inicio D (x,y) con un rango limitado R > (x,y) usando solamente cada píxel Nx y Ny. Inicialmente, el punto de inicio D (x,y) se establece para el centro de la Imagen 1 y el rango R (x,y) se establece para la imagen completa. 2. Usar el punto con la correlación más alfa como el nuevo punto de inicio. Establecer el N Nv rango de búsqueda R (x,y) a (± Nx, ± Nv). Usar — - y — - como los nuevos valores 2 2 para Nx y Ny. 3. Repetir hasta que Nx y Ny sean iguales a 1.

Si el coeficiente de correlación resultante está por encima de un límite preestablecido (por ejemplo, 0.9), el primer objeto seleccionado de interés se determina para estar dentro de la imagen FOV y un desplazamiento resultante puede ser determinado. Sin embargo, si el coeficiente de correlación está por debajo de ese límite, las imágenes respectivas no pueden ser igualadas y dicho resultado indica que el primer objeto seleccionado de interés no ha sido ubicado dentro de la imagen FOV.

Usando ya sea el método de dominio de frecuencia o el método de dominio de espacio de la manera descrita anteriormente, los fiduciales particulares u otras marcas de re-ubicación conocidas precisamente en el portaobjetos 350 no se requieren. Además, si las imágenes almacenadas de los objetos de interés fueron capturadas (escaneadas) usando una magnificación difer nte de la magnificación de microscopio activo usada por el sistema 50, la más grande de las dos magnificaciones se ajusta a la escala para que corresponda a la magnificación de la imagen con magnificación menor antes del procedimiento de correlación.

Si el primer objeto de interés 330 no se encuentra en la imagen FOV 340 mediante el método de dominio de frecuencia o el método de dominio de espacio en el procedimiento de correlación descrito anteriormente, la plataforma 150 (motorizada y configurada para ser controlada por él dispositivo de computadora 300) puede entonces moverse automáticamente de manera circular alrededor de la posición estimada original para buscar adicionalmenfe el primer objeto de interés 330, como se muestra, por ejemplo, en la Figura 3. Esto es, la plataforma 150 se configura para responder al dispositivo de computadora 300 de manera que, si el primer objeto de interés 330 no se encuentra en la imagen FOV 340 en la posición de coordenada estimada, la plataforma 150 mueve el portaobjetos 350 de manera que el dispositivo de cámara 200 capture las imágenes FOV sucesivas en un patrón circular alrededor de la posición de coordenada estimada, mientras cada imagen FOV sucesiva está sujeta al procedimiento de correlación para determinar si esa imagen FOV incluye el primer objeto de interés. El radio del círculo de búsqueda es incrementado sucesivamente (es decir, de manera espiral) en lo sucesivo hasta que el primer objeto de interés es ubicado en una imagen FOV particular. Si el primer objeto de interés no se encuentra en la imagen FOV y la plataforma 150 está configurada para ser manualmente operada, el operador entonces mueve manualmente la plataforma 150 a una posición fuera del FOV en la posición de coordenada estimada de manera que en las imágenes FOV se pueda buscar el primer objeto de interés usando el procedimiento de correlación como se describe previamente.

Cuando el primer objeto de interés es re-ubicado en el portaobjetos 350, el desplazamiento entre las coordenadas almacenadas (en el sistema de coordenada de escaneo) y las coordenadas reales en el portaobjetos 350 en las cuales el primer objeto de interés está re-ubicado se registran y almacenan. El primero objeto de interés es entonces centrado en el campo de visión para permitir una examinación adicional por el operador. Una vez que el primer objeto de interés seleccionado ha sido ubicado en el portaobjetos 350, el operador puede seleccionar un segundo objeto de interés de las imágenes previamente escaneadas de los objetos de interés asociados con ese ¡ portaobjeto 350 desplegado a lo largo de la imagen FOV (que ahora fiene al primer objeto de interés en el centro del FOV) en el despliegue visual, o de otra forma visualmente provisto al operador. Ya que las coordenadas reales del primer objeto de interés son ahora conocidas con respecto al sistema de coordenada de plataforma y al sistema de coordenada de escaneo, la ubicación del segundo objeto de interés involucra un cálculo apropiado de la ubicación relativa del segundo objeto de interés con respecto al primer objeto de interés en el sistema de coordenada de escaneo y el desplazamiento correspondiente de la plataforma 150/ portaobjetos 350 en el sistema de coordenada de plataforma. Una vez en la ubicación calculada del segundo objeto de interés, el(los) método(s) de correlación previamente descritos pueden usarse otra vez para verificar la ubicación real del segundo objeto de interés. Conocer la ubicación real del segundo objeto de interés (o cualquier selección subsiguiente de objetos de interés) permite que el desplazamiento sea redefinido por el dispositivo de computadora 300. Además, al saber las coordenadas reales del primer y segundo objetos de interés, el dispositivo de computadora 300 también puede determinar cualquier rotación del portaobjetos 350 en el sistema de coordenada de plataforma con respecto a las coordenadas almacenadas en el sistema de coordenada de escaneo, mejorando así adici?nalmente la precisión de la re-ubicación de otros objetos de interés en la muestra en el portaobjetos 350. ; I ¡ En circunstancias donde el sistema 50 está configurado de manera que la plataforma 150 sea manualmente operada, las modalidades de la presente invención también pueden proporcionar una guía para el operador al ubicar el(los) objeto(s) seleccionado(s) de interés a través de, por i ejemblo, instrucciones direccionales 345 con respecto al movimiento de la plataforma 150 visualmenfe presentada al operador en el despliegue visual 325 (es decir, ayudas visuales para i colocar manualmente la plataforma 150 con respecto al (a los) objeto(s) de interés). Una persona ! I con habilidad en la técnica apreciará, sin embargo, que dichas instrucciones pueden estar provistas en diferentes formas, tales como de manera auditiva o a través de mensajes de texto vistos en un despliegue separado. En una circunstancia, tal como se muestra en la Figura 4, una imagen del portaobjetos completo 350 de despliega en el despliegue visual 325, mostrando los objetos de interés previamente escaneados relacionados uno con el otro. Al mismo fiempo, un indicador de la posición de coordenada estimada del FOV actual 340 con respecto al portaobjetos 350 también se muestra en el despliegue visual 325. Esto es, de esta manera, el sistema 50 proporciona un indicador visual de los objetos de interés como fueron escaneados junto con una estimación de las ubicaciones de aquellos objetos de interés en el portaobjetos que se esfán viendo. Cuando el operador selecciona el primer objeto de interés 330, el primer objeto de interés 330 y la posición de coordenada estimada del FOV se resaltan o de otra manera marcan claramente en el despliegue visual 325. i I ; Con la diferencia entre la posición de coordenada estimada dei FOV y el primero objeto de interés estando provista en el despliegue visual 325, el operador entonces mueve manualmente la ! plataforma 150 hacia la ubicación indicada visualmente del prim ro objeto de interés en la imagen del portaobjetos completo mostrada en el despliegue visual 325, con cualquier guia necesaria siendo proporcionada por el sistema 50 vía el dispositivo de computadora 300 y la posición de coordenada cambiante del FOV siendo continuamente actualizada en el despliegue visual 325. El procedimiento de correlación puede correrse continuamente mientras la plataforma 150 está siendo movida por el operador o, en la alternativa, el procedimiento de correlación puede invocarse cuando el movimiento de la plataforma 150 se ha detenido. La guía para el operador para mover la i plataforma 150 continúa así hasta que el dispositivo de computadora 300 determina que el primero i objeto de interés está ubicado dentro del centro del FOV desplegado en el despliegue visual 325. i Cuando el primer objeto de interés se ubica manualmente en el portaobjetos 350, el desplazamiento entre las coordenadas almacenadas del primer objeto de interés previamente escarieado en el sistema de coordenada de escaneo y las coordenadas reales del primer objeto de interés ubicado en el portaobjetos 350 en el sistema de coordenada de plataforma se registra y un ¡ indicador de guía tal como, por ejemplo, un cursor de cruz u otro indicador apropiado para indicar la ubicación del primer objeto de interés deseado se sobrepone o de otra manera asocia con una imagen en tiempo real del portaobjetos 350 o FOV para proporcionar un indicador del primer objeto de interés en el portaobjetos real 350. Las selecciones subsiguientes de objetos de interés refinarán asi el desplazamiento, como se discutió previamente, así como corregirá cualquier rotación del sistema de coordenada de plataforma con respecto al sistema de coordenada de escaneo, mejorando así la precisión del proceso de re-ubicación del objeto de interés.

Las modalidades de la presente invención mejoran y facilitan así el flujo de trabajo, velocidad y precisión en un sistema de imagen de microscopio donde un operador necesita reexaminar un portaobjetos previamente escaneado y convertido en imagen. Dichas modalidades también pueden reducir los costos de equipo y/o proporcionar eficiencia de costo en un sistema de imagen de microscopio y aplicaciones relacionadas. Más particularmente, las modalidades de la i presente invención, particularmente los aspectos de re-ubicación de la misma, no requieren portaobjetos especiales y la precisión requerida y reproducibilidad de la plataforma motorizada del dispositivo de microscopio es de baja a moderada sin importar si el dispositivo de microscopio se usa en la fase de escaneo o en la fase de re-ubicación, como se discute en el presente documento. Además, no se requiere ningún procedimiento de establecimiento o procedimiento de calibración para que cada portaobjetos individual sea examinado. En su lugar, sólo la plataforma de microscopio requiere calibración, la cual se puede desempeñar en diversos intervalos, tales como una vez al día o una vez por procedimiento de examinación de lote. Además, una vez calibrada, la plataforma motorizada no requiere de ningún procedimiento de establecimiento en particular anterior a ia recepción de los portaobjetos para examinación.

Con el(los) procedimiento(s) de re-ubicación divulgados en el presente documento, el riesgo de re-ubicación por debajo del estándar o imprecisa de un objeto de interés se reduce significativamente ya que los procedimientos de correlación se desempeñan en una base por píxel I en un espacio de alta resolución. Además, el(los) proceso(s) de re-ubicación están configurados para j-e-ubicar automáticamente el objeto de interés deseado e incluso considerar las diferencias de magnificación en el proceso. Cualquiera de los objetos de interés ubicados también es automáticamente centrados en el campo de visión microscópico para ayudar al operador en el análisis. El sistema también está configurado para actualizar continuamente los parámetros de reubicación de manera que la precisión de re-ubicación y eficiencia incrementen a medida que más objetos de interés en ese portaobjetos son examinados por el operador. Además, la precisión de re-ubicación puede ser mejorada al disminuir el tamaño mínimo de etapa de la plataforma del dispositivo de revisión de portaobjetos y puede, por ejemplo, permitir la re-ubicación de nivel de píxel precisa de un objeto de interés si la resolución del tamaño de etapa de plataforma es suficientemente alta.

Muchas modificaciones y otras modalidades de las invenciones establecidas en el presente documento le vendrán a la mente a una persona con habilidad en la técnica a la cual estas invenciones pertenecen que tenga el beneficio de las enseñanzas presentadas en las descripciones anteriores y los dibujos asociados. Por ejemplo, los métodos divulgados en el presente documento con respecto a la re-ubicación de un objeto en un portaobjetos pueden, en algunas circunstancias, lograrse alternativamente donde el microscopio 100 no está equipado con un dispositivo de cámara 200. En dichas circunstancias, el microscopio 100 incluye una plataforma motorizada codificada 150, como se describió previamente, capaz de ser colocada manualmente, asi como controlada por el dispositivo de computadora 300. La plataforma 150 esfá adicionalmente configurada para estar en comunicación con el disposifivo de computadora 300 de manera que la posición actual de la plataforma 150 pueda ser reportada al dispositivo de computadora 300. Para el portaobjetos previamente escaneado 350, el disposifivo de computadora 300 incluye coordenadas, tales como coordenadas Cartesianas o cualquier otro tipo de coordenadas apropiado, para cualquier objeto previamente identificado de interés con respecto a un punto de referencia en el portaobjetos 350, en donde el punto de referencia puede ser definido por cualquier punto apropiado en el portaobjetos 350 tal como, por ejemplo, una de las esquinas del portaobjetos o cualquier otro fiducial preciso, bien definido en el portaobjetos 350.

' De conformidad con dicho método alternativo, la correlación cruzada no puede usarse ya que las imágenes en vivo del portaobjetos 350 no están disponibles debido a la falta de un dispositivo de cámara 200. Como tal, el portaobjetos 350 es colocado primero en la plataforma de microscopio 150 y el primer objeto objetivo de interés se selecciona en el despliegue visual 325 asociado con el dispositivo de computadora 300. El dispositivo de computadora 300 entonces dirige a la plataforma 150 para moverse a la posición de coordenada estimada del primer objeto objetivo de interés, como se discutió previamente. Una vez en la posición de coordenada estimada, el operador es dirigido para ubicar manualmente el primer objeto objetivo de interés al comparar el FOV del microscópico 100 con la imagen del primer objeto objetivo de interés en el despliegue visual 325. Cuando el primer objeto objetivo de interés es identificado por el operador, el primer objeto objetivo de interés es centrado en el FOV del microscópico 100 por el operador. En algunas circunstancias, el operador puede también indicar al dispositivo de computadora 300 cuando el primer objeto objetivo de interés está centrado en el FOV del microscopio 100 para facilitar la iniciación de las etapas subsiguientes que serán desempeñadas por el disposifivo de computadora 300. Las coordenadas reales del primer objeto objetivo de interés con respecto a la plataforma 150 tambjén son almacenadas por el dispositivo de computadora 300 y un desplazamiento entre las coordenadas reales almacenadas del primer objeto objetivo de interés y las coordenadas almacenadas del primero objeto objetivo de interés del escaneo anterior (es decir, en el sistema de coordenada de escaneo) también son calculadas por el dispositivo de computadora 300.

¡ El operador entonces selecciona el siguiente o segundo objeto objetivo de interés de las imágenes previamente almacenadas de los objetos de interés asociados con ese portaobjetos 350 desplegado a lo largo de la imagen FOV (que ahora tiene al primer objeto de interés en el centro del FOV) en el despliegue visual 325. Ya que las coordenadas reales del primer objeto de interés son ahora conocidas con respecto al sistema de coordenada de plataforma y sistema de i coordenada de escaneo, la ubicación del segundo objeto de interés involucra un cálculo apropiado de la ubicación relativa del segundo objeto de interés con respecto al primer objeto de interés en el sistema de coordenada de escaneo y el desplazamiento correspondiente de la plataforma 150/ portaobjetos 350 en el sistema de coordenada de plataforma. Una vez en la ubicación calculada del segundo objeto de interés, el operador debe nuevamente ubicar manualmente el segundo objeto objetivo de interés al comparar el FOV del microscópico 100 con la imagen del segundo objeto objetivo de interés en el despliegue visual 325. Otra vez, una vez encontradas y centradas en ej FOV del microscopio 100, las coordinadas reales (en el sistema de coordenada de plataforma) del segundo objeto de interés son almacenadas por el dispositivo de computadora 300.

Conocer la ubicación real del segundo objeto de interés (o cualquier otra selección subsiguiente de i objetos de interés) permite que el desplazamiento sea redefinido por el disposifivo de computadora 300. Además, al conocer las coordenadas reales del primero y segundo objetos de interés, el dispositivo de computadora 300 puede también determinar cualquier rotación del portaobjetos 350 i en el sistema de coordenada de plataforma con respecto a las coordenadas almacenadas en el sistema de coordenada de escaneo. Si es necesario, el sistema de coordenada de plataforma puede ser refinado, por ejemplo, al eliminar selectivamente las coordenadas extremas de objetos de interés y/o mediante un promedio u otra técnica para minimizar errores, mientras las nuevas i coordenadas de objetos seleccionados de interés son determinadas y almacenadas. ! I I j Además, la funcionalidad adicional puede ser asociada con los aparatos, sistemas y i métodos divulgados en el presente documento. Por ejemplo, si un operador encontrara un objeto de interés en el portaobjetos 350 durante una búsqueda manual del portaobjetos 350 a través del microscopio 100 y ese objeto de interés no es el objeto objetivo actual seleccionado de interés, el dispositivo de computadora 300 puede ser configurado para identificar ese objeto de interés del esca?eo anterior del portaobjetos 350, por ejemplo, asociando la ubicación de la plataforma 150 con el sistema de coordenada de escaneo (considerando cualquier desplazamiento identificado, si ya fué calculado) e identificando ese objeto de interés en la base de datos y/o las imágenes previamente almacenadas de objetos de interés asociados con ese portaobjetos 350 desplegado en e despliegue visual 325. Por consiguiente, dicho método puede ser ventajoso al re-ubicar objetos en un portaobjetos 350 usando una estación de trabajo menos costosa que no está equipada con un dispositivo de cámara 200.

Por lo tanto, se debe entender que las invenciones no deberán estar limitadas a las modalidades específicas divulgadas y que las modificaciones y otras modalidades tienen la intención de estar incluidas dentro del alcance de las reivindicaciones anexas. Aunque se emplean términos específicos en el presente documento, se usan solamente en un sentido genérico y descriptivo y no para propósitos de limitación.

Claims (39)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método para re-ubicar un objeto de interés en una muestra en un portaobjetos como es visto a través de un objetivo de microscopio, comprendiendo: escanear el portaobjetos para determinar objetos de interés en una muestra, asociando las coordenadas correspondientes con cada objeto de interés y almacenando una imagen y coordenadas correspondientes de cada objeto de interés, mapear los objetos de interés relativos uno al otro via las coordenadas, colocar el portaobjetos en una plataforma de microscopio, desplegar las imágenes almacenadas de los objetos de interés en un despliegue visual, seleccionar un primer objeto objetivo de interés de las imágenes almacenadas desplegadas de los objetos de interés, mover el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos correspondiente a las coordenadas del primer objeto objetivo de interés, capturar una imagen del campo de visión de la muestra en la primera posición de coordenada estimada a través del objetivo de microscopio, comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés y, si el primer objeto objetivo de interés está ubicado en la imagen del campo de visión, determinar un primer desplazamiento entre las coordenadas reales del primer objeto objetivo ubicado de interés y las coordenadas del objeto de interés correspondiente al primer objeto objetivo de interés y mover el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, de la primera posición de coordenada estimada y de acuerdo con el primer desplazamiento para centrar el primer objeto objetivo de interés en la imagen del campo de visión.
2. 2. Un método de conformidad con la reivindicación 1, comprendiendo además determinar un sistema de coordenada de plataforma asociado con la colocación del portaobjetos y el movimiento del la plataforma de microscopio, después de la colocación del portaobjetos en la plataforma del microscopio.
3. I ! 3. Un método de conformidad con la reivindicación 2, en donde mover el portaobjetos, vía la plataforma de microscopio, a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos además comprende mover el portaobjetos a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos, la primera posición de coordenada estimada correspondiendo a las coordenadas del primer objeto objetivo de interés trasladado al sistema de coordenada de plataforma.
4. 4. Un método de conformidad con la reivindicación 1 , en donde comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés además comprende comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando uno de un procedimiento de identificación manual y un procedimiento de correlación.
5. 5. Un método de conformidad con la reivindicación 4, en donde comparar la imagen del campo de visión de la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando un procedimiento de correlación además comprende comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando un procedimiento de correlación de dominio de espacio y un procedimiento de correlación de dominio de frecuencia.
6. ' 6. Un método de conformidad con la reivindicación 4, en donde comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando un i procedimiento de correlación además comprende comparar la imagen del campo de visión con la I imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando un procedimiento de correlación i de co'nvolución y un procedimiento de correlación de Transformada Rápida de Fourier.
7. 7. Un método de conformidad con la reivindicación 1, comprendiendo además, si el primer objeto objetivo de interés no está ubicado en la imagen de campo de visión, mover automáticamente el portaobjetos, vía la plataforma de microscopio, en un movimiento circular de radio incrementado sucesivamente alrededor de la posición de coordenada estimada mientras captura imágenes adicionales del campo de visión y busca el primer objeto objetivo de interés dentro de cada imagen del campo de visión.
8. 8. Un método de conformidad con la reivindicación 1 , comprendiendo además, si el primer objeto objetivo de interés no está ubicado en la imagen del campo de visión, mover manualmente el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, mientras captura imágenes adicionales del campo de visión y busca el primer objeto objetivo de interés dentro de cada imagen dei campo de visión.
9. 9. Un método de conformidad con la reivindicación 1, en donde mover el portaobjetos vía la plataforma de microscopio comprende además al menos uno de mover manualmente y mover automáticamente la plataforma del microscopio para mover el portaobjetos.
10. 10. Un método de conformidad con la reivindicación 9, en donde la plataforma de microscopio se mueve manualmente, proporcionando un indicio direccional para mover manualmente la plataforma de microscopio hacia el primer objeto objetivo de interés, dicho indicio direccional siendo seleccionado del grupo que consiste de un indicio visual y un indicio auditivo.
11. 11. Un método de conformidad con la reivindicación 10, en donde proporcionar un indicio direccional visual comprende además proporcionar al menos uno de un indicio alfanumérico, un indicio de carácter y un indicio de mapa dinámico relacionando la imagen de campo de visión con la primera posición de coordenada estimada del primer objeto objetivo de interés.
12. 12. Un método de conformidad con la reivindicación 1 , comprendiendo además: seleccionar un segundo objeto objetivo de interés de las imágenes almacenadas despl gadas de los objetos de interés, , ubicar el segundo objeto objetivo de interés en el portaobjetos en relación con el primer objeto objetivo de interés usando al menos uno del mapa de los objetos de interés en relación uno con el otro y el primer desplazamiento con respecto a las coordenadas almacenadas del objeto de interés correspondientes al segundo objeto de interés y determinar un segundo desplazamiento entre las coordenadas reales del segundo objeto objetivo ubicado de interés y las coordenadas almacenadas del objeto de interés correspondientes al segundo objeto objetivo de interés.
13. 13. Un método de conformidad con la reivindicación 12, en donde ubicar el segundo objeto objetivo de interés además comprende comparar la imagen del campo de visión de una segunda posición de coordenada estimada en el portaobjetos, correspondiente a las coordenadas del segundo objetivo de interés, con la imagen almacenada del segundo objeto objetivo de interés, para determinar si el segundo objeto objetivo de interés esfá ubicado en la imagen del campo de visión. 1
14. 14. Un método de conformidad con la reivindicación 12, comprendiendo además comparar el primer desplazamiento con el segundo desplazamiento para verificar las coordenadas reales del primer objeto objetivo de interés en relación con las coordenadas reales del segundo objeto objetivo de interés y con respecto a los objetos mapeados correspondientes de interés.
15. 15. Un método de conformidad con la reivindicación 12, comprendiendo además determinar una rotación del portaobjetos en relación con los objetos mapeados de interés al comparar las coordenadas reales del primero y segundo objetos objetivos de interés con los objetos mapeados correspondientes de interés.
16. 16. Un método de re-ubicación de un objeto de interés en una muestra en un portaobjetos en una plataforma de microscopio, el portaobjetos habiendo sido previamente escaneado para determinar objetos de interés en la muestra, en donde las coordenadas correspondientes han sido asociadas con cada objeto de interés, una imagen y coordenadas correspondientes de cada objeto de interés han sido almacenadas y los objetos de interés mapeados en relación uno con el otro vía las coordenadas, dicho método comprende: desplegar las imágenes almacenadas de los objetos de interés en un despliegue visual, > seleccionar un primer objeto objetivo de interés de las imágenes almacenadas desplegadas de los objetos de interés, mover el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos correspondiente a las coordenadas del primer objeto objetivo de interés, capturar una imagen del campo de visión de la muestra en la primera posición de coordenada estimada a través del objetivo de microscopio, comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés y, si el primer objeto objetivo de interés esfá ubicado en la imagen de campo de visión, determinar un primer desplazamiento entre las coordenadas reales del primer objeto objetivo ubicado de interés y las coordenadas almacenadas del objeto de interés correspondientes al primer objeto objetivo de interés y mover el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, de la primera posición de coordenada estimada y de acuerdo con el primer desplazamiento para centrar el primer objeto objetivo de interés en la imagen del campo de visión.
17. 17. Un método de conformidad con la reivindicación 16, comprendiendo además determinar un sistema de coordenada de plataforma asociado con la colocación del portaobjetos y i el movimiento de la plataforma de microscopio, después de la colocación del portaobjetos en la plataforma de microscopio.
18. 18. Un método de conformidad con la reivindicación 17, en donde mover el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos comprende además mover el portaobjetos a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos, la primera posición de coordenada estimada correspondiente a las coordenadas del primer objeto objetivo de interés trasladado al sistema de coordenada de plataforma.
19. 19. Un método de conformidad con la reivindicación 16, en donde comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés además comprende comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando un procedimiento de identificación manual y un procedimiento de correlación.
20. 20. Un método de conformidad con la reivindicación 19, en donde comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando un procedimiento de correlación comprende además comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando un procedimiento de correlación de dominio de espacio y un procedimiento de correlación de dominio de frecuencia.
21. 21. Un método de conformidad con la reivindicación 19, en donde comparar la imagen del campo de visión con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés usando un procedimiento de correlación comprende además compara la imagen del campo de visión con la imag n almacenada del primer objeto objetivo de interés usando uno de un procedimiento de correlación de convolución y un procedimiento de correlación de Transformada Rápida de Fourier.
22. 22. Un método de conformidad con la reivindicación 16, comprendiendo además, si el primer objeto objetivo de interés no está ubicado en la imagen del campo de visión, mover automáticamente el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, en un movimiento circular de radio incrementado sucesivamente alrededor de la posición de coordenada estimada mientras captura imágenes adicionales del campo de visión y busca el primer objeto objetivo de interés dentro de cada imagen del campo de visión.
23. 23. Un método de conformidad con la reivindicación 16, comprendiendo además, si el primer objeto objetivo de interés no esfá ubicado en la imagen del capo de visión, mover manualmente el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, mientras captura imágenes adicionales del campo de visión y busca el primer objeto objetivo de interés dentro de cada imagen del campo de visión. i
24. 24. Un método de conformidad con la reivindicación 16, en donde mover el portaobjetos vía la plataforma del microscopio comprende además al menos uno de mover manualmente y mover automáticamente la plataforma de microscopio para mover el portaobjetos.
25. 25. Un método de conformidad con la reivindicación 24, en donde, cuantío la plataforma de microscopio se mueve manualmente, proporcionar un indicio direccional para mover manualmente la plataforma de microscopio hacia el primer objeto objetivo de interés, dicho indicio direccional es seleccionado del grupo que consiste de un indicio visual y un indicio auditivo.
26. 26. Un método de conformidad con la reivindicación 25, en donde proporcionar un indicio direccional visual demás comprende proporcionar al menos uno de un indicio alfanumérico, un indicio de carácter y un indicio de mapa dinámico relacionando la imagen del campo de visión con la primera posición de coordenada estimada del primer objeto objetivo de interés.
27. 27. Un método de conformidad con la reivindicación 16, comprendiendo además: seleccionar un segundo objeto objetivo de interés de las imágenes almacenadas despl gadas de los objetos de interés, ubicar el segundo objeto objetivo de interés en el portaobjetos en relación con el primer objeto objetivo de interés usando al menos uno del mapa de objetos de interés relativo uno al otro y el primer desplazamiento con respecto a las coordenadas almacenadas del objeto de interés correspondientes al segundo objeto de interés y determinar un segundo desplazamiento entre las coordenadas reales del segundo objeto objetivo ubicado de interés y las coordenadas del objeto de interés correspondientes al segundo objeto objetivo de interés.
28. 28. Un método de conformidad con la reivindicación 27, en donde ubicar el segundo objeto objetivo de interés comprende además comparar la imagen del campo de visión de una segunda posición de coordenada estimada en el portaobjetos, correspondiente a las coordenadas del segundo objetivo de interés, con la imagen almacenada del segundo objeto objetivo de interés, para determinar si el segundo objeto objetivo de interés está ubicado en la imagen del campo de visión.
29. 29. Un método de conformidad con la reivindicación 27, comprendiendo además comparar el primer desplazamiento con el segundo desplazamiento para verificar las coordenadas reales del primer objeto objetivo de interés en relación con las coordenadas reales del segundo objeto objetivo de interés y con respecto a los objetos mapeados correspondientes de interés.
30. 30. Un método de conformidad con la reivindicación 27, comprendiendo además determinar una rotación del portaobjetos con respecto a los objetos mapeados de interés al comparar las coordenadas reales del primero y segundo objetos objetivos de interés con los objetos mapeados correspondientes de interés.
31. 31. Un método para re-ubicar un objeto de interés en una muestra en un portaobjetos en una plataforma de microscopio, el portaobjetos habiendo sido previamente escaneado para determinar objetos de interés en una muestra, en donde las coordenadas correspondientes han sido asociadas con cada objeto de interés, una imagen y coordenadas correspondientes de cada objetó de interés han sido almacenadas y los objetos de interés mapeados en relación uno con el otro vía las coordenadas, dicho método comprendiendo: desplegar las imágenes almacenadas de los objetos de interés en un despliegue visual, seleccionar un primer objeto objetivo de interés de las imágenes almacenadas desplegadas de los objetos de interés, mover el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, a una primera posición de I coordenada estimada en el portaobjetos correspondiente a las coordinadas del primer objeto objeti ivo de interés, j comparar manualmente una imagen del campo de visión de la muestra en la primera I posición de coordenada estimada vista a través de u objetivo de microscopio con la imagen almacenada del primer objeto objetivo de interés y, si el primer objeto objetivo de interés está ! ubicado en la imagen del campo de visión, determinar un primer desplazamiento entre las coordenadas reales del primer objeto objetivo de interés y las coordenadas almacenadas del objeto i de interés correspondiente al primer objeto objetivo de interés y 1 mover el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, de la primera posición de coordenada estimada y de acuerdo con el primer desplazamiento para centrar el primer objeto objetivo de interés en la imagen del campo de visión. I
32. ¡ 32. Un método de conformidad con la reivindicación 31, comprendiendo además determinar un sistema de coordenada de plataforma asociado con la colocación del portaobjetos y el movimiento de la plataforma del microscopio, después de la colocación del portaobjetos en la plataforma del microscopio. i
33. 33. Un método de conformidad con la reivindicación 32, en donde mover el portaobjetos, vía la plataforma del microscopio, a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos comprende además mover el portaobjetos a una primera posición de coordenada estimada en el portaobjetos, la primera posición de coordenada estimada correspondiente a las coordenadas del primer objeto objetivo de interés trasladado al sistema de coordenada de plataforma.
34. 34. Un método de conformidad con la reivindicación 31, en donde mover el portaobjetos vía la plataforma del microscopio además comprende al menos uno de mover manualmente y mover automáticamente la plataforma del microscopio para mover el portaobjetos.
35. 35. Un método de conformidad con la reivindicación 34, en donde, cuando la plataforma del microscopio se mueve manualmente, proporcionar un indicio direccional para mover manualmente la plataforma del microscopio hacia el primer objeto objetivo de interés, dicho indicio direccional es seleccionado del grupo que consiste de un indicio visual y un indicio auditivo.
36. 36. Un método de conformidad con la reivindicación 35, en donde proporcionar un indicio direccional visual además comprende proporcionar al menos uno de un indicio alfanumérico, un indicio de carácter y un indicio de mapa dinámico relacionado con la imagen del campo de visión a la primera posición de coordenada estimada del primer objeto objetivo de interés.
37. 37. Un método de conformidad con la reivindicación 31, comprendiendo además: seleccionar un segundo objeto objetivo de interés de las imágenes almacenadas desplegadas de los objetos de interés, mover el portaobjetos a una segunda posición de coordenada almacenada del segundo objeto objetivo de interés usando al menos uno del mapa de los objetos de interés relativo uno del otro y el primer desplazamiento con respecto a las coordenadas almacenadas del objeto de interés correspondiente al segundo objeto objetivo de interés y i comparar manualmente una imagen del campo de visión de la muestra en la segunda posición de coordenada estimada vista a través del objetivo del microscopio con la imagen almacenada del segundo objeto objetivo de interés y, si el segundo objeto objetivo de interés esfá ubicado en la imagen del campo de visión, determinar un segundo desplazamiento entre las coordenadas reales del segundo objeto objetivo ubicado de interés y las coordenadas almacenadas del objeto de interés correspondientes al segundo objeto objetivo de interés.
38. 38. Un método de conformidad con la reivindicación 37, comprendiendo además comparar el primer desplazamiento con el segundo desplazamiento para verificar las coordenadas reales del primer objeto objetivo de interés con las coordenadas reales del segundo objeto objetivo de interés y con respecto a los objetos mapeados correspondientes de interés. i i
39. 39. Un método de conformidad con la reivindicación 37, comprendiendo además determinar una rotación del portaobjetos con respecto a los objetos mapeados de interés al comparar las coordenadas reales del primero y segundo objetos objetivos de interés con los objetos mapeados correspondientes de interés.