MX2007015001A - Aumento de la tolerancia al estres mediante la aplicacion de neonicotinoides en plantas modificadas mediante ingenieria genetica para que toleren el estres. - Google Patents

Aumento de la tolerancia al estres mediante la aplicacion de neonicotinoides en plantas modificadas mediante ingenieria genetica para que toleren el estres.

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MX2007015001A
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Abstract

La presente invencion se refiere a procedimientos para aumentar la tolerancia al estres en plantas y en celulas vegetales, mediante los cuales se aplican compuestos neonicotinoides, tales como, pero sin caracter limitativo, el imidacloprid, el clothianidin, el thiamethoxam, el dinotefuran, el nitenpyram, el acetamiprid o el thiacloprid, a plantas o a sus celulas, que comprenden un genoma que se ha modificado para hacer las plantas o sus celulas mas que toleran el estres, es decir plantas modificadas mediante ingenieria genetica para que toleren el estres. Los compuestos neonicotinoides, que comprenden una cadena lateral de cloropiridina, tales como, por ejemplo, el imidacloprid, el thiacloprid, el acetamiprid, el nitenpyram y el acido 6-cloronicotinico (6-CNA), son sinergicos de tolerancia al estres particularmente eficaces en combinacion con plantas geneticamente modificadas, que toleran el estres, o con sus celulas.

Description

AUMENTO DE LA TOLERANCIA AL ESTRÉS MEDIANTE LA APLICACIOKÍ D? NEONICOTINOIDES EN PLANTAS MODIFICADAS MEDIANTE INGENIERÍA GENÉTICA PARA QUE TOLEREN EL ESTRÉS CAMPO DE LA INVENCIÓN Se proporcionan procedimientos para aumentar la tolerancia al estrés en plantas y en células vegetales de conformidad con los cuales se aplican compuestos neonicotinoides tales como, pero sin carácter limitativo, el imidacloprid, el clothianidin, el thiamethoxam, el dinotefuran, el nitenpyram, el acetamiprid o el thiacloprid, a las plantas o sus células, que comprenden un genoma, que se ha modificado para hacer que las plantas o sus células toleren mejor el estrés, es decir, plantas modificadas mediante ingeniería genética para que toleren el estrés. Los compuestos neonicotinoides son sinérgicos de la tolerancia al estrés particularmente eficaces en combinación con plantas genéticamente modificadas, que toleran el estrés, o sus células, cuyos compuestos comprenden una cadena lateral de cloropiridina, tal como, por ejemplo, el imidacloprid, el thiacloprid, el acetamiprid, el nitenpyram y el ácido 6-cloronicotínico (6-CNA) . ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Se conocen en el estado de la técnica plantas modificadas mediante ingeniería genética para que toleren el REF. S188135 estrés. La tolerancia al estrés en células vegetales y en plantas puede conseguirse, por ejemplo, mediante la reducción de la actividad o del nivel de poli-ADP-ribosa polimerasas (ParP) o de poli (ADP-ribosa) glicohidrolasas (ParG) , endógenas, tal como se describe en las publicaciones WO 00/04173 Al y PCT/EP2004/003995, respectivamente. Se cree que, de esta manera, puede evitarse el agotamiento fatal de NAD y de ATP en las células vegetales sometidas a condiciones de estrés, dando como resultado la muerte celular traumática, o que puede postponerse suficientemente para que las células sometidas a estrés sobrevivan y se aclimaten a las condiciones de estrés. La solicitud de patente europea número 04077624.7 describe que la tolerancia al estrés en plantas y en células vegetales se consigue utilizando secuencias de nucleótidos que codifican enzimas implicados en la ruta de síntesis natural de NAD y/o la ruta de síntesis de novo de NAD, por ejemplo, para la sobreexpresión en plantas. También se conoce por el estado de la técnica la aplicación de compuestos de la clase de los neonicotinoides en plantas para fines distintos al control de los insectos (publicaciones WO 01/26468 A2 , WO 03/096811 Al). La publicación WO 01/26468 A2 describe un procedimiento para mejorar el crecimiento de las plantas, que comprende la aplicación a las plantas o a su medio ambiente de, al menos, un compuesto seleccionado de la clase de los neonicotinoides. La publicación WO 03/096811 Al describe que el rendimiento y/o el vigor de una planta agronómica pueden aumentarse o mejorarse en regiones en las que el nivel de infestación por parte de los insectos sea menor que el que indica la necesidad del empleo de un insecticida para fines de control de insectos mediante el tratamiento de una semilla de la planta con un compuesto neonicotinoide. El procedimiento se considera útil para plantas no transgénicas y para plantas que tengan un gen foráneo que codifique la producción de una proteína de delta-endotoxina de Bacillus thuringiensis modificada. Sin embargo, el estado la técnica no se pronuncia sobre la posibilidad de aumentar la salud y el vigor de las plantas que toleran el estrés, tal como se describe en la técnica anterior y, además, de aumentar adicionalmente la tolerancia al estrés de las plantas ya modificadas mediante ingeniería genética, para que toleren el estrés, mediante la aplicación de compuestos químicos. SUMARIO DE LA INVENCIÓN Por lo tanto, brevemente, la invención se refiere a un nuevo procedimiento para aumentar la tolerancia al estrés de las plantas y de las células vegetales que son modificadas mediante ingeniería genética para que toleren el estrés, que comprende tratar la planta y/o el medio ambiente de dichas plantas, las células vegetales o las semillas, a partir de las cuales se desarrollan dichas plantas, con un compuesto neonicotinoide . De igual modo, la presente invención se refiere a un nuevo procedimiento para aumentar la salud y el vigor de las plantas y de las células vegetales, que son modificadas mediante ingeniería genética, para que toleren el estrés, que comprende tratar la planta y/o el medio ambiente de dichas plantas, las células vegetales o las semillas, a partir de las cuales se desarrollan dichas plantas, con un compuesto neonicotinoide . Así mismo, la invención se refiere a una nueva semilla, a partir de la cual se desarrollan las plantas que toleran el estrés, y cuya semilla está tratada con un compuesto neonicotinoide. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Tal como se utilizan en la presente descripción, los conceptos de "plantas modificadas mediante ingeniería genética para que toleren el estrés" o de "células vegetales modificadas mediante ingeniería genética para que toleren el estrés", se refieren a las plantas o a las células y a sus semillas, que contengan ADN foráneo, que comprenda un gen potenciador de la tolerancia al estrés, exógeno, o una variante de un gen endógeno correspondiente a tal gen potenciador de la tolerancia al estrés, exógeno, variante que da como resultado una tolerancia al estrés mayor que la de las células vegetales o que la de las plantas que contienen dicha variante. De conformidad con la presente invención, se ha descubierto que la tolerancia al estrés, la salud y el vigor de una planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés pueden aumentarse mediante el tratamiento de las plantas o de la semilla de las plantas y/o el medio ambiente de dichas plantas con una cantidad eficaz de un compuesto neonicotinoide. Sorprendentemente, tales compuestos neonicotinoides tienen la capacidad de producir un aumento de la tolerancia al estrés y de la salud de las plantas que ya toleran el estrés más que las respectivas plantas de tipo natural. Este efecto supera, incluso, al efecto que podría esperarse tomándose como base, simplemente, la suma de los efectos de las propiedades de potenciación del crecimiento de los neonicotinoides cuando se aplican en las plantas, tal como se describe en la publicación WO 01/26468 A2 y de los efectos derivados de la tolerancia al estrés, modificada mediante ingeniería genética, de una planta dada. El efecto es independiente de la presencia de insectos, que son las dianas de los neonicotinoides precedentemente citados. En consecuencia, el efecto está relacionado con la mejora bioquímica de la tolerancia al estrés de una planta o de una célula vegetal o de la semilla a partir de la cual se desarrolla. Se ha descubierto que este efecto potencia la tolerancia al estrés, modificada mediante ingeniería genética, de tales plantas y células vegetales modificadas mediante ingeniería genética. Tal como se utiliza en la presente descripción, el concepto de "tolerancia al estrés" se refiere a una mejor tolerancia al estrés, comparado con la planta no modificada mediante ingeniería genética, cuando se aplica estrés a una planta, por ejemplo, mediante la aplicación de compuestos químicos (por ejemplo, los herbicidas, los insecticidas, los reguladores del crecimiento de la planta, los adyuvantes, los fertilizantes) , debido a la exposición a estrés abiótico (por ejemplo, la sequía, las condiciones de alta luminosidad, las temperaturas extremas, el ozono y otros contaminantes atmosféricos, la salinidad del suelo o los metales pesados) o debido al estrés biótico (por ejemplo, las infecciones provocadas por patógenos o las plagas con inclusión de la infección producido por los hongos, los virus, las bacterias, los insectos, los nematodos, los micoplasmas y los organismos de tipo micoplasma, etc.). En una realización de la invención, se describe un procedimiento que es útil para aumentar la tolerancia al estrés y para aumentar salud de una planta o célula vegetal o semilla, a partir de la cual se desarrolla dicha planta, y que se modifica mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés, que comprende la aplicación a dicha planta y/o a su medio ambiente, a una célula vegetal o a una semilla, a partir de la cual se desarrollan dichas plantas, una cantidad eficaz de un compuesto neonicotinoide de la fórmula (I) en la que Het representa un heterociclo que monosubstituido o polisubstituido, respectivamente, de manera opcional por flúor, por cloro, por metilo o por etilo, cuyo heterociclo se selecciona entre el siguiente grupo de heterociclos : pirid-3-ilo, pirid-5-ilo, 3-piridinio, l-óxido-5- piridinio, l-óxido-5-piridinio, tetrahidrofuran-3 -ilo, tiazol-5-ilo, A representa alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, N(RX) (R2) o S(R2) , en los que R1 representa hidrógeno, alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, fenil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono o alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, y R2 representa alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, -C(=0)-CH3 o bencilo, R representa hidrógeno, alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, -C(=0)-CH3 o bencilo o junto con R2 representa los grupos siguientes: -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2- , -CH2-0-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2- NH-CH2-, -CH2-N(CH3)-CH2-, y x representa N-N02, N-CN o CH-N02. Los radicales hidrocarbonados saturados o no saturados, tales como alquilo o alquenilo, pueden ser, respectivamente, de cadena lineal o de cadena ramificada en la medida en que esto sea posible, incluso en combinación con heteroátomos, tal como, por ejemplo, en alcoxi. Se sabe que estos compuestos tienen actividad insecticida (véanse, por ejemplo, las publicaciones EP-Al-192 606, EP-A2-580 533, EP-A2-376 279, EP-A2-235 725). Los compuestos preferentes de la fórmula (I) que pueden ser mencionados son los neonicotinoides enumerados en "The Pesticide Manual", 13a edición, 2003 (British Crop Protection Council, Consejo Británico de Protección de Cultivos ) . Un compuesto muy particularmente preferente es el imidacloprid de la fórmula conocido, por ejemplo, por la publicación EP Al 0 192 060. Otro compuesto, muy particularmente preferente, es el acetamiprid de la fórmula conocido, por ejemplo, por la publicación WO Al 91/04965. Otro compuesto, muy especialmente preferente, es el thiacloprid de la fórmula conocido, por ejemplo, por la publicación EP A2 0 235 725. Otro compuesto, muy especialmente preferente, es el nitenpyram de la fórmula conocido, por ejemplo, por la publicación EP A2 0 302 389. Otro compuesto preferente, es el clothianidin de la fórmula conocido, por ejemplo, por la publicación EP A2 0 376 279. Otro compuesto preferente, es el thiamethoxam de la fórmula conocido, por ejemplo, por la publicación EP A2 0 580 553. Otro compuesto preferente, es el dinotefuran de la fórmula conocido, por ejemplo, por la publicación EP Al 0 649 845. El imidacloprid es un compuesto especialmente preferente para el empleo en procedimientos de conformidad con la invención. También debe mencionarse el clothianidin como un compuesto preferente en el contexto de la presente invención.
En otra realización de la invención, se describe un procedimiento que es útil para aumentar la tolerancia al estrés y para aumentar salud de una planta o de una célula vegetal o de una semilla, a partir de la cual se desarrolla dicha planta, y que se modifica mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés, que comprende aplicar a dicha planta y/o a su medio ambiente, a una célula vegetal o a una semilla, a partir de la que se desarrollan dichas plantas, una cantidad eficaz del ácido 6-cloronicotínico (niacina, Na CAS: 5326-23-8) de la fórmula El ácido 6-cloronicotínico puede ser liberado durante la degradación de los neonicotinoides, precedentemente citados, que porten este grupo, tales como el imidacloprid, el thiacloprid, el acetamiprid, el nitenpyram. Por ejemplo, el imidacloprid se degrada gradualmente para dar el metabolito primario del ácido 6-cloronicotínico que, eventualmente, se descompone en dióxido de carbono. Se ha descubierto que este metabolito también aumenta la tolerancia al estrés y que aumenta la salud de una planta o de una célula vegetal o de una semilla, a partir de la cual se desarrolla dicha planta, y que se ha modificado mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés. Los compuestos, precedentemente citados, producen un aumento de la tolerancia al estrés de las plantas o de las células y de sus semillas, que contienen ADN foráneo que comprenden un gen exógeno de potenciación de la tolerancia al estrés o una variante de un gen endógeno correspondiente a tal gen exógeno de potenciación de la tolerancia al estrés, cuya variante da como resultado una mayor tolerancia al estrés de las células vegetales o de las plantas que contienen dicha variante. Por regla general, un aumento de la tolerancia al estrés significa, al menos, una reducción significativa de un parámetro que indica estrés, que puede medirse o bien como una diferencia morfológica, como una diferencia fisiológica o bien como una diferencia bioquímica en una comparación con las plantas de referencia no transgénicas, no tratadas, sometidas a estrés o con las células y con sus semillas frente a las plantas de referencia transgénicas, tratadas o frente a las células y frente a sus semillas. El concepto de "salud", tal como se menciona en la presente descripción, se refiere a un nivel de infestación significativamente bajo de las plantas, de las células y de sus semillas con plagas y con enfermedades que, por ejemplo, pueden contarse o estimarse como varias especies de plagas individuales presentes o como la expresión de síntomas macroscópicos (por ejemplo, la reducción relativa del área de la hoja, la infestación del área de la hoja, la necrosis del área de la hoja) . Se demuestra la magnitud por medio de la fórmula de Colby. Además, también puede medirse la resistencia a condiciones de estrés midiendo los niveles de NAD(H) (que en las plantas tolerantes, sometidas a estrés, siguen siendo mayores que en las plantas de control, sometidas a estrés) y el nivel de las especies reactivas de oxígeno (menor en las plantas tolerantes, sometidas a estrés, que en las plantas control sometidas a estrés) en condiciones de estrés tal como se describe en la solicitud de patente europea EP04077624.7 (incorporada como referencia en la presente descripción) . Una de las ventajas de la presente invención redice en que las propiedades sistémicas particulares de los compuestos de conformidad con la invención y las composiciones que comprenden dichos compuestos, significan que el tratamiento de la semilla de las plantas que se han modificado mediante ingeniería genética para que sean que toleran el estrés con estas composiciones, aumenta la tolerancia al estrés de la planta en germinación y la planta resultante tras su emergencia. De esta manera, puede prescindirse del tratamiento inmediato del cultivo en el momento de la siembra o poco después . En otra realización de la invención, se describe un procedimiento que es útil para aumentar la tolerancia al estrés y para aumentar la salud de una planta o fr unas célula vegetal o de una semilla, a partir de la cual se desarrolla dicha planta, y que se modifica mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés, que comprende aplicar a dicha planta y/o a su medio ambiente, a una célula vegetal o a una semilla, a partir de la que se desarrollan dichas plantas, una cantidad eficaz de una composición que comprende los compuestos de la fórmula (I). En consecuencia, la invención también se refiere a composiciones que comprenden los compuestos de la fórmula (I) para el empleo de tales composiciones de conformidad con la invención. Los compuestos de fórmula (I) pueden utilizarse también en una mezcla con otros compuestos activos, por ejemplo, insecticidas, bactericidas, acaricidas, fungicidas, etc. en la forma de sus formulaciones comercialmente útiles o en las formas de aplicación preparadas a partir de tales formulaciones. Esto puede realizarse para obtener composiciones que, además de mejorar la tolerancia al estrés y la salud de las plantas de conformidad con la invención, también combatan las plagas que puedan estar presentes . Los insecticidas que pueden ser utilizados son, por ejemplo, los agentes de organofosforados, los agentes de carbamato, los compuestos químicos de tipo carboxilato, los compuestos químicos de tipo hidrocarburo clorado, las substancias insecticidas producidas por microbios, etc. En muchos casos, esto da como resultado efectos sinérgicos, es decir, que la actividad de la mezcla es mayor que la actividad de los componentes individuales . Tales formulaciones y formas de aplicación son especialmente útiles desde el punto de vista comercial y ecológico ya que generalmente pueden utilizarse menores cantidades de productos activos. Sin embargo, un sinérgico no debe ser necesariamente activo por sí mismo, siempre que potencie la acción del compuesto activo. Del mismo modo, es posible una mezcla de otros compuestos activos conocidos, tales como los herbicidas, o con fitoprotectores, con fertilizantes y con reguladores del crecimiento. El tratamiento, de conformidad con la invención, de las plantas y de las partes de las plantas con los compuestos activos se lleva a cabo directamente o permitiéndose que los compuestos actúen en sus alrededores, en su medio ambiente o en el lugar para su almacenamiento mediante procedimientos de tratamiento habituales, por ejemplo, mediante inmersión, pulverización, evaporación, nebulización, dispersión, pintado y, en el caso de un material de reproducción, en particular en el caso de una semilla, también mediante la aplicación de una o más capas . Los compuestos activos pueden convertirse en formulaciones habituales, tales como soluciones, emulsiones, polvos humectables, suspensiones, polvos, materiales pulverizados, pastas, polvos solubles, granulados, concentrados de suspensión-emulsión, materiales naturales y sintéticos impregnados con el compuesto activo, y microencapsulamientos en substancias polímeras. El contenido de los compuestos activos de la presente invención en una formulación o forma de aplicación comercialmente útil puede variar dentro de amplios límites. El contenido de compuesto activo de las formas de empleo preparadas a partir de las formulaciones comerciales puede variar dentro de amplios límites. Estas formulaciones se producen de manera conocida, por ejemplo, por mezcla de los compuestos activos con extendedores, es decir disolventes líquidos y/o vehículos sólidos, opcionalmente con el empleo de tensioactivos, es decir emulsionantes y/o dispersantes, y/o formadores de espuma . Cuando el extendedor utilizado sea el agua, será posible, también, el empleo, por ejemplo, de disolventes orgánicos a título de disolventes auxiliares. Esencialmente, los disolventes líquidos adecuados son: los hidrocarburos aromáticos tales como el xileno, el tolueno o los alquilnaftalenos, los hidrocarburos aromáticos clorados o los hidrocarburos alifáticos clorados tales como los clorobencenos, los cloroetilenos o el cloruro de metileno, los hidrocarburos alifáticos, tales como el ciciohexano o las parafinas, por ejemplo las fracciones del petróleo, los aceites minerales y vegetales, los alcoholes tales como el butanol o el glicol y también sus éteres y esteres, las cetonas tales' como la acetona, la metiletilcetona, la metilisobutilcetona o la ciciohexanona, los disolventes fuertemente polares tales como la dimetilformamida y el dimetiisulfóxido, y también el agua. Como vehículos sólidos son adecuados: por ejemplo, las sales de amonio y los minerales naturales molidos tales como los caolines, las arcillas, el talco, la caliza, el cuarzo, la attapulgita, la montmorillonita o la tierra de diatomeas, y los minerales sintéticos molidos, tales como la sílice altamente dispersada, la alúmina y los silicatos; como vehículos sólidos para granulados son adecuados: por ejemplo, las rocas naturales fraccionadas y trituradas tales como la calcita, el mármol, la piedra pómez, la sepiolita y la dolomita, y también los granulados sintéticos de harinas inorgánicas y orgánicas tales como el serrín de madera, las cascaras de coco, las panochas de maíz y los tallos de tabaco; como emulsionantes y/o formadores de espuma son adecuados: por ejemplo, los emulsionantes no iónicos y aniónicos, tales como los esteres de los ácidos grasos polioxietilenados, los éteres de los alcoholes grasos polioxietilenados, por ejemplo, los alquilarilpoliglicoléteres, los sulfonatos de alquilo, los sulfatos de alquilo, los sulfonatos de arilo y también los hidrolizados de proteínas; como dispersantes son adecuados; por ejemplo, las lejías sulfíticas residuales de lignina y la metilcelulosa . Pueden utilizarse En las formulaciones pueden emplearse adhesivos tales como la carboximetilcelulosa y los polímeros naturales y sintéticos en forma de polvos, de granulados o de látices, tales como la goma arábiga, el alcohol polivinílico y el acetato de polivinilo, así como los fosfolípidos naturales tales como las cefaliñas y las lecitinas, y los fosfolípidos sintéticos. Otros aditivos pueden ser los aceites minerales y vegetales. También es posible utilizar colorantes tales como los pigmentos inorgánicos, por ejemplo, el óxido de hierro, el óxido de titanio y el azul de Prusia, y colorantes orgánicos, tales como los colorantes de alizarina, los colorantes azoicos y los colorantes de ftalocianina metálicos, y nutrientes en trazas, tales como las sales de hierro, de manganeso, de boro, de cobre, de cobalto, de molibdeno y de zinc . Las formulaciones comprenden generalmente entre el 0,1 y el 98 % en peso de compuesto activo, preferentemente entre el 0,1 y el 90 % y, de manera particularmente preferente, entre el 0, 5 y el 70 % en peso de compuesto activo. El ventajoso efecto de potenciación de la tolerancia al estrés de los compuestos neonicotinoides y 6-CNA se presente de una manera particularmente marcada con determinadas cantidades de aplicación. Sin embargo, las cantidades de aplicación de los compuestos activos pueden variarse dentro de intervalos relativamente amplios. En general, las cantidades de aplicación están comprendidas entre 1 g y 1.600 g del compuesto activo por cada hectárea, preferentemente comprendidas entre 10 g y 800 g del compuesto activo por cada hectárea y, de manera particularmente preferente, comprendidas entre 10 g y 600 g del compuesto activo por cada hectárea. Tal como se mencionó precedentemente, una realización de la invención consiste en un procedimiento que es útil para aumentar la tolerancia al estrés y la salud de una planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés, que comprende aplicar al material de reproducción de la planta, incluyendo la semilla, a partir de la que se desarrolla dicha planta, una cantidad eficaz de una composición que comprende los compuestos de la fórmula (I) . El material de reproducción de la planta puede tratarse antes de plantarla, por ejemplo, la semilla puede recubrirse antes de la siembra. Los compuestos de conformidad con la invención también pueden aplicarse a granos de semilla o bien los granos pueden ser impregnados con una formulación líquida o bien pueden ser recubiertos con una formulación sólida. Del mismo modo, la composición puede aplicarse al lugar destinado a la siembra, en el momento de llevarse a cabo la plantación del material de reproducción, por ejemplo durante la siembra.
En consecuencia, la invención también se refiere a una semilla de una planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés y que se ha tratado con un compuesto de conformidad con la invención. En relación con el tratamiento del material de reproducción de la planta tal como semillas, las cantidades favorables de aplicación están comprendidas entre 0,1 y 1.000 g, en particular comprendidas entre 1 y 800 g, preferentemente comprendidas entre 10 y 500 g de uno de los compuestos neonicotinoides o 6-CNA por cada 100 kg de material que debe ser tratado. Los cultivos, que pueden ser mejorados de conformidad con el presente procedimiento incluyen cualquier planta modificada mediante ingeniería genética para ser resistente al estrés, tanto semillas dicotiledóneas como monocotiledóneas, células vegetales especialmente el algodón, la cañóla, la colza oleaginosa, el trigo, el maíz o el maíz dulce, la cebada, el arroz, la avena, el centeno, el trigo sarraceno, el tritical, la caña de azúcar, la soja, los girasoles, la alfalfa, los frijoles, el lino, la mostaza, los chícharos, el tabaco, la papa, el boniato dulce, la remolacha azucarera, la hierba de césped, el sorgo, el mijo, las hortalizas del género del colinabo, otras hortalizas (incluyendo las alcachofas, los espárragos, las zanahorias, el apio, las endivias, los pepinos, las berenjenas, el puerro, la lechuga, los melones, el quingombó, las cebollas, los pimiento, las calabaza, los rábanos, la rutabaga, el cártamo, las espinacas, las calabazas confiteras, el jitomate, las sandías, el ñame, los calabacines) , la almendra, la manzana, el albaricoque, la banana, la mora, el arándano, el cacao, los cítricos (incluyendo la toronja, el limón, la naranja, el kumquat, la lima, la mandarina, la tangerina, el pomelo y la mandarina Satsuma) , la cereza, el coco, el arándano rojo, el dátil, la grosella espinosa, la uva, la guayaba, el kiwi, el mango, la nectarina, la papaya, el maracuyá, el durazno, el cacahuate, la pera, la piña, la nuez pecana, el pistacho, la ciruela, la frambuesa, la fresa, la planta de té, la nuez así como, también, las plantas utilizadas en horticultura, floricultura y selvicultura. Todas las plantas y las partes de las plantas pueden tratarse de conformidad con la invención. Deben entender, como partes de las plantas, todas las partes y los órganos aéreos y subterráneos de las plantas, tales como los brotes, las hojas, las flores y las raíces, pudiéndose citar a título de ejemplo las hojas, las agujas, los tallos, los pedúnculos, las flores, los cuerpos de fruto, los frutos, las semillas, las raíces, los tubérculos y los rizomas. Las partes de las plantas también incluyen material cosechado y material de reproducción vegetativo y generativo, por ejemplo, los esquejes, los tubérculos, los rizomas, los bulbos y las semillas. También incluyen células vegetales, tales como las que pueden utilizarse o las que resultan de la transformación de una célula vegetal de conformidad con la invención. También es posible aplicar los compuestos precedentemente citados sobre o en el suelo, por ejemplo, como paso previo a la plantación o a la siembra para conseguir el efecto descrito, por ejemplo, para potenciar la tolerancia al estrés de las plantas tras su plantación y la planta emergente que crece a partir de una semilla que se ha sembrado en el suelo tratado. Las plantas, las células vegetales y las semillas a las que se hace referencia en esta invención se modifican mediante ingeniería genética para aumentar la tolerancia al estrés de dichas plantas de manera específica. En una realización de la invención, un gen exógeno de potenciación de la tolerancia al estrés puede reducir la expresión y/o la actividad del gen de la poli (ADP-ribosa) polimerasa (PARP) en las células vegetales o plantas, de conformidad con la descripción de las publicaciones WO 00/04173 Al o EP 04077984.5 (incorporados como referencia a la presente descripción) . La poli (ADP-ribosa) polimerasa (PARP), también conocida como poli (ADP-ribosa) transferasa (ADPRT) (EC 2.4.2.30), es un enzima nuclear que se encuentra en la mayoría de los eucariotas, incluyendo los vertebrados, los artrópodos, los moluscos, los mohos mucilaginosos, los dinoflagelados, los hongos y otros eucariotas inferiores con la excepción de las levaduras. También se ha demostrado la actividad enzimática en varias plantas (Payne et al . , 1976; Willmitzer y Wagner, 1982; Chen et al . , 1994; O'Farrell, 1995). La PARP cataliza la transferencia de un resto de ADP-ribosa derivado de NAD+, principalmente al grupo carboxilo de un residuo de ácido glutámico en la proteína diana, y posterior polimerización de ADP-ribosa. La principal proteína diana es la propia PARP, así como, también, las histonas, las proteínas cromosómicas del grupo de alta movilidad, la topoisomerasa, las endonucleasas y las ADN polimerasas han demostrado ser objeto de esta modificación. Como una realización particular, el gen de potenciación de la tolerancia al estrés puede comprender los siguientes fragmentos de ADN unidos operativamente: a) un promotor expresable en plantas; b) una región de ADN que cuando se transcribe da como resultado una molécula de ARN que puede reducir la expresión de genes que codifican PARP endógeno de una planta (una molécula de AR? inhibidora de PARP) ; c) una región de AD? implicada en la terminación de la transcripción y en la poliadenilación. La región de AD? mencionada puede dar como resultado una molécula denominada de ARN no codificante, reduciendo de manera transcripcional o postranscripcional la expresión de un gen que codifica PARP en la planta o célula vegetal diana, que comprende, al menos, 20 ó 21 nucleótidos consecutivos que tienen una identidad de secuencia de, al menos, el 95 % al 100 % con el complemento de la secuencia de nucleótidos de un gen que codifica PARP presente en la célula vegetal o planta. La región de ADN mencionada puede dar como resultado una denominada molécula denominada de ARN codificante, que comprende reducir de manera transcripcional o postranscripcional la expresión de un gen que codifica PARP en la planta o célula vegetal diana, que comprende, al menos, 20 ó 21 nucleótidos consecutivos que tienen una identidad de secuencia de, al menos, el 95 % al 100 % con la secuencia de nucleótidos de un gen que codifica PARP presente en la célula vegetal o planta. Sin embargo, la secuencia de nucleótidos mínima de la región de ARN no codificante o codificante de aproximadamente 20 nt de la región codificante de PARP puede estar comprendida dentro de una molécula de ARN mayor, que varía en tamaño desde 20 nt hasta una longitud igual al tamaño del gen diana. Las regiones de nucleótidos no codificantes o codificantes, mencionadas, pueden ser, por tanto, desde aproximadamente 21 nt hasta aproximadamente 5,000 nt de largo, tal como 21 nt, 40 nt, 50 nt, 100 nt, 200 nt, 300 nt, 500 nt, 1,000 nt, 2,000 nt o incluso aproximadamente 5,000 nt o más en longitud. Además, no se requiere para el fin de la invención que la secuencia de nucleótidos de la molécula de ARN de PARP inhibidora utilizada o la región codificante del gen exógeno, sea completamente idéntica o complementaria del gen de PARP endógeno, cuya expresión está dirigida para reducirse en la célula vegetal . Cuanto más larga es la secuencia, menos riguroso es el requisito para la identidad de la secuencia global. Por tanto, las regiones codificantes o no codificantes pueden tener una identidad de secuencia global de aproximadamente el 40 I o el 50 % o el 60 % o el 70 % o el 80 % o el 90 % o el 100 % con respecto a la secuencia de nucleótidos del gen de PARP endógeno o el complemento del mismo. Sin embargo, tal como se mencionó, las secuencias no codificantes o codificantes deben comprender una secuencia de nucleótidos de 20 nucleótidos consecutivos que tienen una identidad de secuencia de aproximadamente el 100 % con respecto a la secuencia de nucleótidos del gen de PARP endógeno. Preferentemente, el tramo de identidad de secuencia de aproximadamente el 100 % debe ser de aproximadamente 50, 75 o 100 nt. Para el fin de esta invención, el concepto de "identidad de secuencia" entre dos secuencias de nucleótidos relacionadas, expresada como un porcentaje, se refiere al número de posiciones en las dos secuencias alineadas de manera óptima que tienen residuos idénticos (xlOO) dividido entre el número de posiciones comparadas. Un hueco, es decir, una posición en una alineación en la que un residuo está presente en una secuencia pero no en la otra, se considera como una posición con residuos no idénticos. La alineación de las dos secuencias se realiza mediante el algoritmo de Needleman y Wunsch (Needleman y Wunsch 1970) . Puede realizarse la alineación de secuencia asistida por ordenador utilizando un programa de software habitual, tal como GAP que es parte del Wisconsin Package Versión 10.1 (Genetics Computer Group, Madison, Wisconsin, USA) utilizando la matriz de puntuación por defecto con una penalización por creación de hueco de 50 y una penalización por extensión de hueco de 3. Quedará claro que siempre que se definan secuencias de nucleótidos de moléculas de ARN haciendo referencia a la secuencia de nucleótidos de las correspondientes moléculas de AD?, la timina (T) en la secuencia de nucleótidos debe sustituirse por uracilo (U) . Si se hace referencia a moléculas de AR? o AD?, quedará claro a partir del contexto de la aplicación. La eficacia de los genes exógenos precedentemente citados en reducir la expresión del gen de PARP endógeno puede potenciarse adicionalmente mediante la inclusión de elementos de AD? que dan como resultado la expresión de moléculas de ARN inhibidoras de PARP aberrantes, no poliadeniladas . Un elemento de ADN de este tipo adecuado para ese fin es una región de ADN que codifica una ribozima de autoempalme, tal como se describe en la publicación WO 00/01133 Al. La eficacia de los genes exógenos precedentemente citados en reducir la expresión del gen de PARP endógeno de una célula vegetal también puede potenciarse adicionalmente incluyendo en una célula vegetal simultáneamente un gen exógeno tal como se describe en la presente descripción que codifica una molécula de ARN inhibidora de PARP no codificante y un gen exógeno tal como se describe en la presente descripción que codifica una molécula de ARN inhibidora de PARP codificante, en el que dichas moléculas de ARN inhibidoras de PARP no codificantes y codificantes pueden formar una región de ARN bicatenaria mediante el apareamiento de bases entre los mencionados, al menos, 20 nucleótidos consecutivos, tal como se describe en la publicación WO 99/53050 Al. Tal como se describe adicionalmente en la publicación WO 99/53050 Al, las regiones de AR? inhibidoras de PARP no codificantes y codificantes, que pueden formar una región de ARN bicatenaria pueden estar presentes en una molécula de AR?, preferentemente separada por una región espaciadora. La región espaciadora puede comprender una secuencia de intrón.
Tal gen exógeno pueden construirse convenientemente uniendo operativamente un fragmento de ADN que comprende, al menos, 20 nucleótidos del gen de PARP endógeno aislado o identificado, cuya expresión está dirigida a reducirse, en una repetición invertida, a un promotor expresable en plantas y una región de formación del extremo 3' implicada en la terminación de la transcripción y en la poliadenilación. Para obtener la construcción de tal gen exógeno, puede hacerse empleo de los vectores descritos en la publicación WO 02/059294 Al. La nomenclatura actual se refiere a las clásicas polimerasas que contienen dedos de Zn como proteínas PARPl (y correspondientes genes parpl) mientras que las proteínas PARP no clásicas se denominan actualmente como PARP2 (y correspondientes genes parp2) y los genes que codifican PARP tal como se utilizan en la presente descripción, pueden referirse a cualquier tipo. Las siguientes entradas de bases de datos (incorporadas como referencia en la presente descripción) que identifican experimentalmente secuencias de proteína poli ADP-ribosa polimerasa demostradas y supuestas, partes de las mismas o secuencias homologas, podrían utilizarse de conformidad con la invención actual: BAD53855 ( Oryza sa tiva) ; BAD52929 ( Oryza sativa) ; XP_477671 ( Oryza sativa) ; BAC84104 ( Oryza sativa) ; AAT25850 ( Zea mays) ; AAT25849 ( Zea mays) ; NP_197639 (Arabiáopsis thaliana) ; NP_850165 (Arabi?opsis thaliana) ; NP_188107 (Arabi?opsis thaliana) ; NP_850586 (Arabi?opsis thaliana) ; BAB09119 (Arabi?opsis thaliana) ; AAD20677 (Arabi?opsis thaliana ) ; Q11207 (Arabi?opsis thaliana) ; C84719 (Arabi?opsis thaliana) ; T51353 (Arabi?opsis thaliana) ; T01311 (Arabi?opsis thaliana) ; AAN12901 (Arabi?opsis thaliana) ; AAM13882 (Arabi?opsis thaliana) ; CAB80732 (Arabi?opsis thaliana ) ; CAA10482 (Arabi?opsis thaliana) ; AAC79704 ( Zea mays) : AAC19283 (Arabi?opsis thaliana) ; CAA10888 ( Zea mays) ; CAA10889 ( Zea mays) ; CAA88288 (Arabi?opsis thaliana) . Como una realización particular de la invención, el gen que reduce la expresión del gen de PARP puede comprender los siguientes fragmentos de ADN unidos operativamente: a) un promotor expresable en plantas b) una región de ADN que cuando se transcribe produce una molécula de ARN, comprendiendo la molécula de ARN : a. Una secuencia de nucleótidos no codificante, que comprende, al menos, aproximadamente 20 nucleótidos consecutivos que tienen una identidad de secuencia del 96 % con respecto a una secuencia de nucleótidos de aproximadamente 20 nucleótidos consecutivos seleccionados de la secuencias de nucleótidos de SEQ ID 1 (región codificante de parpl de Arabi?opsis) , SEQ ID 2 (región codificante de parp2 de Arabi?opsis) , SEQ ID 3 (región codificante de parpl de Zea mays) , SEQ ID 4 (otra región codificante de parpl de Zea mays) , SEQ ID 5 (región codificante de parp2 de Zea mays) o SEQ ID 6 (ADNc parcial de parp2 de algodón) o de las secuencias de nucleótidos que codifican proteínas con secuencias de aminoácidos similares o idénticas a las codificadas por las secuencias de nucleótidos mencionadas . Una secuencia de nucleótidos codificante, que comprende, al menos, aproximadamente 20 nucleótidos que son complementarios de la secuencia de nucleótidos codificante. La secuencia de nucleótidos codificante, por tanto, comprender una secuencia de, al menos, aproximadamente 20 nucleótidos consecutivos que tienen una identidad de secuencia del 96 % con respecto a una secuencia de nucleótidos de aproximadamente 20 nucleótidos consecutivos seleccionados de la secuencias de nucleótidos de SEQ ID 1 (región codificante de parpl de Arabi?opsis) , SEQ ID 2 (región codificante de parp2 de Arabi?opsis) , SEQ ID 3 (región codificante de parpl de Zea mays) , SEQ ID 4 (otra región codificante de parpl de Zea mays) , SEQ ID 5 (región codificante de parp2 de Zea mays) o SEQ ID 6 (ADNc parcial de parp2 de algodón) o de las secuencias de nucleótidos que codifican proteínas con secuencias de aminoácidos similares o idénticas a las codificadas por las secuencias de nucleótidos mencionadas; mediante lo cual la secuencia de nucleótidos codificante y no codificante pueden formar una molécula de ARN bicatenaria (ARNds ) ; c) una región de AD? para la terminación de la transcripción y la poliadenilación. Sin embargo, quedará claro que pueden utilizarse otros genes que codifican PARP tal como se describe en las publicaciones WO00/04173 o EP 04077984.5. También quedará claro que el objetivo de la actual invención para aumentar la tolerancia al estrés también puede conseguirse aplicando los compuestos químicos mencionados en plantas o células vegetales que comprenden en su genoma un gen que codifica PARP variante, mediante lo cual la expresión y/o actividad de PARP se reduce comparado con la expresión y/o actividad de PARP en una planta similar, que también daría como resultado un aumento de la tolerancia al estrés de la planta con la PARP variante. Tales genes que codifican PARP variantes pueden inducirse, por ejemplo, mediante mutagénesis o pueden ser alelos que se producen de manera natural de genes que codifican PARP, que se correlacionan con un aumento de la tolerancia al estrés de las plantas que los contienen. En otra realización de la invención, . los compuestos mencionados se aplican en plantas o células vegetales que comprenden un gen exógeno de potenciación de la tolerancia al estrés que puede reducir la expresión y/o la actividad de los genes que codifican ParG de las plantas o células vegetales, tal como se describe por ejemplo en la publicación WO 2004/090140 (incorporado como referencia en la presente descripción) . La PARG (poli (ADP-ribosa) glicohidrolasa; E.C.3.2.1.143 ) convierte polímeros de poli (ADP-ribosa) en ADP-ribosa libre mediante su actividad exoglicosidasa y endoglicosidasa (PARG) . En plantas, se ha identificado una poli (ADP-ribosa) glicohidrolasa mediante clonación basada en mapas del gen de tipo natural inactivado en un mutante afectado en la transcripción, controlada por reloj, de genes en Arabiáopsis y la transición dependiente de fotoperíodo desde el crecimiento vegetativo hasta la floración (tej). La secuencia de nucleótidos del gen puede obtenerse a partir de bases de datos de nucleótidos con el número de registro AF394690 (Panda et al., 2002 Dev. Cell. 3, 51-61; SEQ ID No 7) Las secuencias de nucleótidos de otros genes que codifican PARG vegetales procedentes de plantas pueden encontrarse en la publicación WO 2004/090140 A2 , tales como el gen de PARG procedente de Solanum tuberosum (SEQ ID No 8) ; Oryza sa tiva (SEQ ID No 9) o Zea mays (SEQ ID No 10) así como procedimientos para aislar genes que codifican PARG adicionales y variantes de los mismos de otras plantas. Por tanto, en una realización, las plantas o células vegetales modificadas mediante ingeniería genética para que sean resistentes al estrés pueden comprender los siguientes fragmentos de ADN unidos operativamente: a) un promotor expresable en plantas b) una región de ADN, que cuando se transcribe produce una molécula de ARN inhibidora, comprendiendo la molécula de ARN i. una región de nucleótidos no codificante, que comprende, al menos, 20 nucleótidos consecutivos que tiene una identidad de secuencia de, al menos, el 96 % con respecto a una secuencia de nucleótidos de aproximadamente 20 nucleótidos seleccionados del complemento de una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína PARG vegetal, tal como las secuencias de nucleótidos de SEQ ID 7, SEQ ID 8, SEQ ID 9 o SEQ ID 10 o secuencias de nucleótidos que codifican proteínas con secuencias de aminoácidos similares o idénticas a las secuencias de nucleótidos mencionadas; o ü. una región de nucleótidos codificante, que comprende, al menos, 20 nucleótidos consecutivos seleccionados de una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína PARG vegetal, tal como las secuencias de nucleótidos de SEQ ID 7, SEQ ID 8, SEQ ID 9 o SEQ ID 10 o secuencias de nucleótidos que codifican proteínas con secuencias de aminoácidos similares o idénticas a las secuencias de nucleótidos mencionadas; o iii. una secuencia de nucleótidos no codificante y codificante tal como las mencionadas bajo i) o ii) mediante lo cual dicha secuencia de nucleótidos no codificante y codificante pueden formar una molécula de ARN bicatenaria; c) una región de ADN implicada en la terminación de la transcripción y en la poliadenilación. Quedará claro inmediatamente para el experto en la técnica que pueden utilizarse parámetros adicionales de longitud de las secuencias de nucleótidos codificantes y no codificantes o moléculas de ARNds, y la identidad de secuencia para las moléculas de ARN inhibidoras de ParG como se mencionó precedentemente para las moléculas de ARN inhibidoras de PARP. Todavía en otra realización de la invención, el gen exógeno de potenciación de la tolerancia al estrés puede comprender las siguientes moléculas de AD? unidas operativamente : a) un promotor expresable en plantas; b) una región de ADN que codifica un enzima funcional de la planta de la ruta de síntesis natural de nicotinamida adenina dinucleótido seleccionada entre la nicotinamidasa, el nicotinato fosforribosiltransferasa, el ácido nicotínico mononucleótido adenil transferasa o la nicotinamida adenina dinucleótido sintetasa; y c) una región 3' implicada en la terminación de la transcripción y en la poliadenilación, tal como se describe en la publicación EP 04077624.7 (incorporado como referencia en la presente descripción) . Tal como se utiliza en la presente descripción, el concepto de "un enzima funcional de la planta de la ruta de síntesis natural de nicotinamida adenina dinucleótido" es un enzima que cuando se introduce en plantas, unido a elementos de control apropiados tales como un promotor expresable en plantas y una región de terminación, puede transcribirse y traducirse para producir un enzima de la ruta de síntesis natural de NAD funcional en células vegetales . Se incluyen los enzimas (y genes que los codifiquen) de la síntesis natural de NAD, que se obtienen de una fuente vegetal, así como también los enzimas obtenidos a partir de levaduras ( Saccharomyces cereviseae) o de otras levaduras u hongos. Se cree que estas últimas proteínas pueden ser incluso más adecuadas para los procedimientos de conformidad con la invención, puesto que es menos probable que se vean sometidas a la regulación de retroalimentación enzimática, etc. a la que pueden verse sometidos los enzimas derivados de plantas similares . Los enzimas implicados en la ruta de síntesis natural de NAD comprenden los siguientes Nicotinamidasa (EC 3.5.1.19) que cataliza la hidrólisis del grupo amida de la nicotinamida, liberando así nicotinato y NH3. La enzima también se conoce como nicotinamida desaminasa, nicotinamida amidasa, YNDasa o nicotinamida amidohidrolasa Nicotinato fosforribosiltransferasa (EC 2.4.2.11) también conocida como niacina ribonucleotidasa, ácido nicotínico mononucleótido glicohidrolasa; ácido nicotínico mononucleótido pirofosforilasa; ácido nicotínico fosforribosiltransferasa que cataliza la siguiente reacción nicotinato-D-ribonucleótido + difosfato = nicotinato + 5-fosfo-a-D ribosa 1-difosfato Nicotinato-nucleótido adenililtransferasa, (EC 2.7.7.18) también conocida como desamido-NAD + pirofosforilasa; nicotinato mononucleótido adenililtransferasa; desamidonicotinamida adenina dinucleótido pirofosforilasa; NaMT-ATasa; ácido nicotínico mononucleótido adenililtransferasa que cataliza la siguiente reacción ATP + nicotinato ribonucleótido = difosfato + desairado-NAD+ NAD-sintasa (EC 6.3.1.5) también conocida como NAD sintetasa; NAD+sintasa; nicotinamida adenina dinucleótido sintetasa; difosfopiridina nucleótido sintetasa, que cataliza la siguiente reacción desamido-NAD+ + ATP + NH3 = AMP + difosfato + NAD+ En una realización de la invención, las regiones de ADN, que codifican un enzima funcional de la planta de la ruta natrual de NAD, pueden comprender una secuencia de nucleótidos de SEQ ID Nos 11, 12, 13, 14 o 15 o una secuencia de nucleótidos que codifican una proteína con secuencias de aminoácidos similares o idénticas a las de las proteínas codificadas por las secuencias de nucleótidos mencionadas precedentemente . Tal como se describe por Hunt et al., 2004 se han identificado homólogos vegetales de estos enzimas y pueden utilizarse estas secuencias de ADN para un efecto similar (Hunt et al., 2004, New Phytologist 163(1): 31-44). Las secuencias de ADN identificadas tienen los siguientes números de registro: para nicotinamidasa: At5g23220 (SEQ ID No 16) ; At5g23230 (SEQ ID No 17) y At3gl6190 (SEQ ID No 18); para nicotinato fosforribosiltransferasa: At4g36940 (SEQ ID No 19), At2g23420 (SEQ ID No 20), para ácido nicotínico mononucleótido adeniltransferasa: At5g55810 (SEQ ID No 21) y para NAD sintetasa: Atlg55090 (SEQ ID No 22). Sin embargo, quedará claro que las plantas modificadas mediante ingeniería genética para que sean resistentes al estrés también pueden comprender variantes de estas secuencias de nucleótidos, incluyendo inserciones, deleciones y sustituciones de las mismas. Igualmente, pueden utilizarse homólogos de las secuencias de nucleótidos mencionadas de especies distintas a Saccharomyces cerevisea . Éstas incluyen, pero sin carácter limitativo, las secuencias" de nucleótidos procedentes de plantas, y secuencias de nucleótidos que codifican proteínas con las mismas secuencias de aminoácidos, así como variantes de tales secuencias de nucleótidos. Las variantes de la secuencia de nucleótidos descrita tendrán una identidad de secuencia que es preferentemente de, al menos, aproximadamente el 80 %, o el 85 o el 90% o el 95 % con secuencias de nucleótidos identificadas, que codifican enzimas de la ruta natrual de NAD, tales como las identificadas en la lista de secuencias. Preferentemente, estas variantes codificarán para proteínas funcionales con la misma actividad enzimática que los enzimas de la ruta natrual de NAD. Los procedimientos de la invención pueden utilizarse para aumentar la tolerancia de las plantas o de las células vegetales a diferentes clases de condiciones que inducen estrés, particularmente condiciones de estrés abiótico incluyendo sumergimiento, condiciones de alta luminosidad, niveles elevados de radiación UV, aumento de los niveles de peróxido de hidrógeno, condiciones de sequía, temperaturas altas o bajas, aumento de las condiciones de salinidad, aplicación de herbicidas, pesticidas, insecticidas, etc. Los procedimientos de la invención también pueden utilizarse para reducir el nivel de especies reactivas de oxígeno (ROS) o para aumentar el nivel de NAD+, NADH+ o ATP en las células de las plantas que crecen en condiciones adversas, particularmente condiciones de estrés abiótico incluyendo sumergimiento, condiciones de alta luminosidad, niveles elevados de radiación UV, aumento de los niveles de peróxido de hidrógeno, condiciones de sequía, temperaturas altas o bajas, aumento de las condiciones de salinidad, etc. El nivel de ROS o el nivel de NADH pueden determinarse utilizando los procedimientos conocidos en la técnica, incluyendo los descritos en los ejemplos. También puede analizarse el aumento de la tolerancia al estrés de las plantas utilizando los procedimientos para determinar el flujo electrónico mitocondrial tal como se describe en las publicaciones WO97/06267 o WO02/066972. Aunque no se pretende limitar la invención a un modo particular de acción, se espera que los metabolitos de los neonicotinoides, particularmente de los compuestos neonicotinoides que comprenden una cadena lateral de cloropiridina, se introduzcan en la ruta natrual de NAD y den como resultado mayores rendimientos de los niveles de NAD. De esa manera, no se espera que la aplicación de tales compuestos en plantas modificadas mediante ingeniería genética para que sean resistentes al estrés tenga ningún efecto, ya que los niveles de NAD en condiciones de estrés en tales células vegetales ya eran significativamente mayores que en las células vegetales no modificadas mediante ingeniería genética, para que sean resistentes al estrés. El procedimiento de la invención actual para aumentar la resistencia al estrés mediante la aplicación de compuestos neonicotinoides en una planta o células vegetales puede ser adecuado para cualquier planta modificada por ingeniería genética para que sea resistente al estrés o para las células vegetales y para las plantas tanto dicotiledóneas como monocotiledóneas, incluyendo, pero sin carácter limitativo, el algodón, las hortalizas del género colinabo, la colza oleaginosa, el trigo, el maíz o el maiz dulce, la cebada, los girasoles, el arroz, la avena, la caña de azúcar, la soja, las hortalizas (incluyendo la endivia, la lechuga, el jitomate) , el tabaco, la papa, la remolacha azucarera, la papaya, la piña, el mango, Arabi?opsis thaliana , así como, también, las plantas utilizadas en horticultura, en floricultura o en selvicultura, las plantas de cereales incluyendo las plantas de trigo, de avena, de cebada, de centeno, de arroz, la hierba de césped, el sorgo, el mijo o la caña de azúcar. Los procedimientos de la invención también pueden aplicarse a cualquier planta incluyendo, pero sin carácter limitativo, el algodón, el tabaco, la cañóla, la colza oleaginosa, la soja, las hortalizas, las papas, Lemna spp., Nicotiana spp., los boniatos dulces, Arabiáopsis, la alfalfa, la cebada, los frijoles, el maíz, el algodón, el lino, los chícharos, la colza, el arroz, el centeno, el cártamo, el sorgo, la soja, el girasol, el tabaco, el trigo, el espárrago, la remolacha, el brócoli, la col, la zanahoria, la coliflor, el apio, el pepino, la berenjena, la lechuga, la cebolla, la colza oleaginosa, el pimiento, la papa, la calabaza, el rábano, la espinaca, el zapallo, el jitomate, el calabacín, la almendra, la manzana, el albaricoque, el plátano, la mora, el arándano, el cacao, la cereza, el coco, el arándano rojo, el dátil, la uva, la toronja, la guayaba, el kiwi, el limón, la lima, el mango, el melón, la nectarina, la naranja, la papaya, el maracuyá, el durazno, el cacahuate, la pera, la piña, el pistacho, la ciruela, la frambuesa, la fresa, la tangerina, la nuez y la sandía. Tal como se utiliza en la presente descripción el concepto de "que comprende" ha de interpretarse como que especifica la presencia de las características, números enteros, etapas o componentes establecidos tal como se hace referencia, pero que no excluye la presencia o la adición de una o más características, números enteros, etapas o componentes, o grupos de los mismos. Por tanto, por ejemplo, un ácido nucleico o una proteína que comprenda una secuencia de nucleótidos o de aminoácidos, puede comprender más nucleótidos o aminoácidos que los citados realmente, es decir, que puede estar incluida en un ácido nucleico o proteína mayor . Un gen exógeno que comprende una región de ADN que está definida funcional o estructuralmente, puede comprender regiones de ADN adicionales, etc. A menos que se establezca lo contrario en los ejemplos, todas las técnicas de ADN recombinante se llevan a cabo de conformidad con protocolos habituales tal como se describe en Sambrook et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, segunda edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY y en los volúmenes 1 y 2 de Ausubel et al. (1994) Current Protocols in Molecular Biology, Current Protocols, USA. Los materiales y procedimientos habituales para el trabajo molecular con plantas se describe en Plant Molecular Biology Labfax (1993) por R.D.D. Croy, publicado conjuntamente por BIOS Scientific Publications Ltd (RU) y Blackwell Scientific Publications, RU. Otras referencias para técnicas de biología molecular habituales incluyen Sambrook y Russell (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, tercera edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY, volúmenes I y II de Brown (1998) Molecular Biology LabFax, segunda edición, Academic Press (RU) . Los materiales y procedimientos habituales para las reacciones en cadena de la polimerasa pueden encontrarse en Dieffenbach y Dveksler (1995) PCR Primer: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, y en McFerson at al. (2000) PCR - Basics: From Background to Bench, primera edición, Springer Verlag, Alemania. En toda la descripción y los ejemplos, se hace referencia a las siguientes secuencias: SEQ ID No . 1: región codificante de parpl de Arabi?opsis thaliana . SEQ ID No. 2: región codificante de parp2 de Arabi?opsis thaliana . SEQ ID No. 3: región codificante 1 de parpl de Zea mays . SEQ ID No. 4: región codificante 2 de parpl de Zea mays . SEQ ID No. 5: región codificante de parp2 de Zea mays . SEQ ID No. 6: región codificante parcial de parp2 del algodón. SEQ ID No. 7: región codificante de parG de Arabi?opsis thaliana . SEQ ID No. 8: región codificante de parG de Solanum tuberosum. SEQ ID No. 9: región codificante de parG de Oryza sativa . SEQ ID No. 10: región codificante de parG de Zea mays .
SEQ ID No. 11: secuencia de nucleótidos de la nicotinamidasa de Saccharomyces cereviseae (PNCl ) . SEQ ID No. 12: secuencia de nucleótidos de la nicotinato fosforribosiltransferasa de Saccharomyces cereviseae (NPTl ) (complemento) SEQ ID No. 13: secuencia de nucleótidos del ácido nicotínico de la mononucleótido adenil transferasa 1 (NMAl) de Saccharomyces cereviseae . SEQ ID No. 14: secuencia de nucleótidos del ácido nicotínico de la mononucleótido adenil transferasa 2 (NMA2) de Saccharomyces cereviseae . SEQ ID No. 15: secuencia de nucleótidos de la NAD sintecantidad (QNS1) de Saccharomyces cereviseae . SEQ ID No. 16: secuencia de nucleótidos de la nicotinamidasa de Arabi?opsis thaliana (isoforma 1 ) . SEQ ID No. 17: secuencia de nucleótidos de la nicotinamidasa de Arabi?opsis thaliana (isoforma 2) SEQ ID No. 18: secuencia de nucleótidos de la nicotinamidasa de Arabi?opsis thaliana (isoforma 3) SEQ ID No. 19: secuencia de nucleótidos de la nicotinato fosforribosiltransferasa de Arabi?opsis thaliana (isoforma 1 ) . SEQ ID No. 20: secuencia de nucleótidos de la nicotinato fosforribosiltransferasa de Arabi?opsis thaliana (isoforma 2) . SEQ ID No. 21: secuencia de nucleótidos del ácido nicotínico de la mononucleótido adenil transferasa de Arabi?opsis thaliana . SEQ ID No. 22: secuencia de nucleótidos de la NAD sintecantidad de Arabi?opsis thaliana . EJEMPLOS Ejemplo lg Protocolos para la medición del contenido de BJADH y del contenido de superóxido. Cuantificación de NAD(P)H intracelular utilizando una sal de tetrazolio soluble en agua Referencia: Jun Nakamura, Shoji Asakura, Susan D. Hester, Gilbert de Murcia, Keith W. Caldecott y James A. Swenberg (2003): Quantitation of intracellular NAD(P)H can monitor an imbalance of DNA single strand break repair in base excisión repair deficient cells in real time. Nucleic Acids Research 31(17), el04. Material vegetal Pueden utilizarse la mayor parte de materiales vegetales, por ejemplo, brotes de Arabi?opsis desarrollados in vi tro con una edad de 14 - 18 días pero NO explantes de floración o hipocótilo de colza oleaginosa. Estuche de recuento celular 8 (CCK-8) Sopachem n. v. /Belgium, 72A, Avenue du Laarbeeklaan, 1090 Bruselas, Bélgica Contenido Botellas de 5 ml que contienen WST-8 5 mMol/L (sal de tetrazolio), 1-metoxi-PMS 0,2 mMol/L, NaCl 150 mMol/L; Sol uci ón áe reacci ón : 10 ml de tampón fosfato de K 25 mM pH 7,4; 0,5 ml de CCK-8; metiisulfato de l-metoxi-5-metilfenazinio (= metosulfato de 1-metoxifenazina) 0,1 mM: 1 µL/ml de solución madre 100 mM (PM = 336.4; 100 mg en 2.973 ml de agua); 1 gota de Tween20/25ml Procedimiento Recoger el material vegetal y ponerlo en tampón fosfato de K 25 mM pH 7,4 (por ejemplo: 150 explantes de hipocótilo de colza oleaginosa o 1 g de brotes de Arabi?opsis (sin raíces)). Sustituir el tampón por solución de reacción (15 ml para 1 g de brotes de Arabi ?opsi s o 15 ml para 150 explantes de hipocótilo de colza oleaginosa) . Incubar a 26°C en la obscuridad durante aproximadamente 1/2 hora (seguir la reacción) . Medir la absorbancia de la solución de reacción a 450 nm. Medición de la producción de superóxido cuem ificaado la reducción de XTT Referencia : De Block, M., De Brouwer, D. (2002) A simple and robust in vitro assay to quantify the vigour of oilseed rape lines and hybrids . Plant Fysiol. Biochem. 40, 845-852 Brassica napus Medios y tampones de reacción Me?io ?e siembra (me?io 201 ) : sales de Murashige y Skoog semiconcentradas; 2 % de sucrosa, pH 5.8; 0,6 % de agar (Difco Bacto Agar); triacilina 250 mg/l. Me?io que in?uce callo A2S3 : medio MS, Mes 0,5 g/1 (pH 5.8), 3 % de sucrosa, adenina-S04 40 mg/l, 0,5 % de agarosa, 2,4-D 1 mg/l, NAA 0,25 mg/l, BAP 1 mg/l, triacilina 250 mg/l. Tampón de reacción: tampón fosfato de K 25 mM pH 8; 3'-{l- [ fenilamino-carbonil] -3 , 4-tetrazolio} -bis (4-metoxi-6-nitro) de sodio = XTT 1 mM (BioVectra, Canadá) (PM 674.53). Disolver XTT calentando cuidadosamente la solución (± 37 aC) (enfriada hasta temperatura ambiente antes de su empleo) . 1 gota de Tween20 para 25 ml de tampón Esterilización de semillas - pregerminación de semilláis -crecimiento de plantones Se empapan las semillas con etanol al 70 % durante 2 minutos, luego se esteriliza la superficie durante 15 minutos en una solución de hipoclorito de sodio (con aproximadamente un 6 % de cloro activo) que contiene un 0,1 % de Tween20. Finalmente, las semillas se enjuagan con 1 litro de agua del grifo estéril. Se incuban las semillas durante, al menos, una hora en agua del grifo estéril (para permitir la difusión desde las semillas de los componentes que pueden inhibir la germinación) . Se ponen las semillas en matraces Erlenmeyer de 250 ml que contienen 50 ml de agua del grifo estéril ( + triacilina 250 mg/l) . Agitar durante aproximadamente 20 horas. Las semillas de las que sobresale la radícula se ponen en recipientes Vitro Vent de Duchefa que contienen aproximadamente 125 ml de medio de siembra (10 semillas/recipiente, no demasiadas para reducir la pérdida de semilla por contaminación) . Las semillas se germinan a ± 24°C y 10-30 µEinstein s"1m"2 con una duración del día de 16 horas. Para calcular la cantidad de semillas que tienen que cortarse: 5 segmentos de hipocótilo/plantón. Precultivo de explantes de hipocótilo e inducción de estrés Al cabo de 12-14 días, desde la siembra, se cortan los hipocótilos en segmentos de aproximadamente 7 - 10 mm. Los explantes de hipocótilo (25 hipocótilos/placa de Petri de Optilux, Falcon S1005, Dinamarca) se cultivan durante 5 días en medio A2S3 a 25°C (a 10-30 µEinstein s_1m"2) . Se utilizan 150 explantes de hipocótilo por condición. Inducción de estrés Transferir los explantes de hipocótilo a medio A2S3 que contiene respectivamente ácido acetilsalicí lico 0, 25 y 50 mg/l. Incubar durante aproximadamente 24 horas a 25°C y 10-30 µEinstein s" 1pT2 con una longitud del día de 16 horas.
Ensayo de XXT Transferir 150 explantes de hipocótilo a un tubo Falcon de 50 ml . Lavar con tampón de reacción (sin XTT). Añadir 20 ml de tampón de reacción + XTT. Los explantes han de sumergirse, pero no infiltrarse a vacío. Incubar en la obscuridad a 26°C. Seguir la reacción midiendo la absorción del medio de reacción a 470 nm. B Arabidopsis thaliana Medios y tampones de reacción Me?io ?e la planta : sales de Murashige y Skoog semiconcentradas; vitaminas B5 ; 1.5 % de sucrosa; pH 5.8; 0,7 % de agar Difco. Me?io ?e incubación : sales MS semiconcentradas 1 % de sucrosa; MES 0,5 g/1 pH 5.8; 1 gota de Tween20 para 25 ml de medio. Tampón ?e reacción : tampón fosfato de K 25 mM pH 8; 3'-{l-[fenilamino-carbonil] -3 , 4-tetrazolio}-bis (4-metoxi-6-nitro) de sodio = XTT 1 mM (BioVectra, Canadá) (PM 674.53). Disolver XXT calentando cuidadosamente la disolución (± 37°C) (enfriar hasta temperatura ambiente antes de su empleo) . 1 gota de Tween20 para 25 ml de tampón. Plantas de Arabi?opsis Líneas ?e Arabi?opsis : control (línea madre de la que se derivan las líneas probadas) , líneas que van a probarse. Esterilización ?e semillas ?e Arabi?opsis : 2 minutos etanol al 70 %; 10 minutos lejía ( 6 % de cloro activo) + 1 gota de Tween 20 para 20 ml de disolución; lavar 5 veces con agua del grifo estéril; la esterilización se realiza en tubos Eppendorf de 2 ml . Las semillas de Arabiáopsis se hunden hasta el fondo del tubo permitiendo la retirada de los líquidos por medio de una pipeta Pipetman de 1 ml . Preger inación ?e semillas : En placas de Petri de Optilux de 9 cm (Falcon) que contienen 12 ml de agua del grifo estéril. Baja luminosidad durante la noche a 24 horas. Crecimiento ?e las plantas ?e Arabi?opsis : Se siembran las semillas en placas de cultivo de tejido Intergrid de Falcon (nr. 3025) que contienen ± 125 ml de medio de la planta: 1 semilla/rejilla. Las plantas se hacen crecer a 24°C. 30 µEinstein s"^"2. 16 horas de luz - 8 horas de obscuridad durante aproximadamente 18 días (antes de la floración prematura) . Se necesita 1 g de material de la planta (brotes sin raíces) /línea/condición para llevar a cabo el ensayo. 1 g de brotes corresponde a 40 - 60 plantas. Inducción de estrés Paraqua t : recoger los brotes de Arabi?opsis (sin raíces). Poner 1 g de brotes en medio de incubación (los brotes han de sumergirse, pero no infiltrarse a vacío) que contiene respectivamente paraquat 0, 5 y 10 µM. Medio de incubación: ± 150 ml en placas de cultivo de tejido Intergrid de Falcon (nr. 3025) . Incubar a 24 SC en la obscuridad durante ± 24 horas y 30-50 µEinstein s_1m"2 con una duración del día de 16 horas . Al ta l uminosi?a? : transferir la mitad de las placas a alta luminosidad (250 µEinstein s_1m"2) e incubar durante 4 a 20 horas . Ensayo de XXT Recoger los brotes (sin raíces) de las placas de agar (estrés de alta luminosidad) o del medio de incubación líquido (estrés con paraquat) y ponerlos en tubos Falcon de 50 ml que contienen tampón de reacción (sin XXT) : Sustituir el tampón de reacción por tampón que contiene XTT (15 ml/g) . Los brotes han de sumergirse, pero no infiltrarse a vacío. Incubar en la obscuridad a 269C. Seguir la reacción midiendo la absorción del medio de reacción a 470 nm (aproximadamente una hora) . Ejemplo 2; Análisis de la tolerancia al estrés r s la aplicación de compuestos neonicotinoides en plantas que comprenden un gen que aumenta la tolerancia al estrés Se tratan plantas del género Brassica que comprenden una molécula de ARNds que puede reducir los genes de PARP endógenos, tal como se describe en la publicación WO 00/04173 Al, (por ejemplo, en el ejemplo 8) con diversas concentraciones de imidacloprid, de clothianidin, de thiamethoxam, de acetamiprid, de nitenpyram, de dinotefuran, de ácido 6-cloronicotínico y de thiacloprid y se someten a diversas condiciones de estrés, particularmente alta - baja temperatura, altas intensidades luminosas o estrés por sequía o cualquier combinación de las mismas . Tras el tratamiento, las plantas se puntúan visualmente para determinar la supervivencia y el daño en comparación con plantas control transgénicas no tratadas, y plantas isogénicas no transgénicas tratadas con los compuestos mencionados de manera similar. Se determinaron los niveles de especies reactivas de oxígeno, NAD y ATP y se compararon con las plantas control . Las plantas del género Brassica transgénicas tratadas con los compuestos químicos sobreviven a las condiciones de estrés mejor que las plantas de control transgénicas no tratadas. El nivel de ROS en las plantas del género Brassica transgénicas tratadas es menor que en las plantas del género Brassica transgénicas no tratadas, mientras que es mayor el nivel de NAD o ATP. Se trataron plantas de maíz que comprenden un gen transgénico que codifica una molécula de ARNds que puede reducir genes de PARP endógenos, tal como se describe en la publicación WO 00/04173 Al, con diversas concentraciones de imidacloprid, de clothianidin, de thiamethoxam, de acetamiprid, de nitenpyram, de dinotefuran, de ácido 6- -54 temperatura, altas intensidades luminosas o estrés por sequía o cualquier combinación de las mismas. Tras el tratamiento, las plantas se puntúan visualmente para determinar la supervivencia y el daño en comparación con plantas control transgénicas no tratadas, y plantas isogénicas no transgénicas tratadas con los compuestos mencionados de manera similar. Se determinaron los niveles de especies reactivas de oxígeno, NAD y ATP y se compararon con las plantas control . Las plantas de algodón transgénicas tratadas con los compuestos químicos sobreviven a las condiciones de estrés mejor que las plantas control transgénicas no tratadas. El nivel de ROS en las plantas de algodón transgénicas tratadas es menor que en las plantas de algodón transgénicas no tratadas, mientras que es mayor el nivel de NAD o de ATP. Se tratan plantas del género Brassica o de arroz que comprenden un gen transgénico que codifica una molécula de ARNds que puede reducir genes de PARG endógenos, tal como se describe en la publicación WO2004/090140 con diversas concentraciones de imidacloprid, de clothianidin, de thiamethoxam, de acetamiprid, de nitenpyram, de dinotefuran, de ácido 6-cloronicotínico y de thiacloprid y se someten a diversas condiciones de estrés, particularmente alta - baja temperatura, altas intensidades luminosas o estrés por sequía o cualquier combinación de las mismas. cloronicotínico y de thiacloprid y se someten a diversas condiciones de estrés, particularmente alta - baja temperatura, altas intensidades luminosas o estrés por sequía o cualquier combinación de las mismas. Tras el tratamiento, las plantas se puntúan visualmente para determinar la supervivencia y el daño en comparación con plantas control transgénicas no tratadas, y plantas isogénicas no transgénicas tratadas con los compuestos mencionados de manera similar. Se determinaron los niveles de especies reactivas de oxígeno, NAD y ATP y se compararon con las plantas control . Las plantas de maíz transgénicas tratadas con los compuestos químicos sobreviven a las condiciones de estrés mejor que las plantas control transgénicas no tratadas. El nivel de ROS en las plantas de maíz transgénicas tratadas es menor que en las plantas de maíz transgénicas no tratadas, mientras que es mayor el nivel de NAD o de ATP. Se trataron plantas de algodón que comprenden un gen transgénico que codifica una molécula de ARNds que puede reducir genes de PARP endógenos, tal como se describe en la publicación EP 04077984.5 con diversas concentraciones de imidacloprid, de clothianidin, de thiamethoxam, de acetamiprid, de nitenpyram, de dinotefuran, de ácido 6-cloronicotínico y de thiacloprid y se someten a diversas condiciones de estrés, particularmente alta - baja Tras el tratamiento, las plantas se puntúan visualmente para determinar la supervivencia y el daño en comparación con plantas control transgénicas no tratadas, y plantas isogénicas no transgénicas tratadas con los compuestos mencionados de manera similar. Se determinaron los niveles de especies reactivas de oxígeno, NAD y ATP y se compararon con las plantas control . Las plantas del género Brassica o de arroz transgénicas tratadas con los compuestos químicos sobreviven a las condiciones de estrés mejor que las plantas control transgénicas no tratadas . El nivel de ROS en las plantas del género Brassica o de arroz transgénicas tratadas es menor que en las plantas del género Brassica o de arroz transgénicas no tratadas, mientras que es mayor el nivel de NAD o ATP. Se tratan plantas de Arabiáopsis que comprenden un gen transgénico que codifica un enzima funcional de la planta implicada en la ruta natrual de NAD, tal como se describe en la publicación EP0477624.7 con diversas concentraciones de imidacloprid, de clothianidin, de thiamethoxam, de acetamiprid, de nitenpyram, de dinotefuran, de ácido 6-cloronicotínico y de thiacloprid y se someten a diversas condiciones de estrés, particularmente alta - baja temperatura, altas intensidades luminosas o estrés por sequía o cualquier combinación de las mismas . Tras el tratamiento, las plantas se puntúan visualmente para determinar la supervivencia y el daño en comparación con plantas control transgénicas no tratadas, y plantas isogénicas no transgénicas tratadas con los compuestos mencionados de manera similar. Se determinaron los niveles de especies reactivas de oxígeno, NAD y ATP y se compararon con las plantas control . Las plantas de Arabiáopsis transgénicas tratadas con los compuestos químicos sobreviven a las condiciones de estrés mejor que las plantas control transgénicas no tratadas. El nivel de ROS en las plantas de Arabiáopsis transgénicas tratadas es menor que en las plantas de Arabiáopsis transgénicas no tratadas, mientras que es mayor el nivel de NAD o de ATP. Se hace constar que, con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (4)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :
1. - Procedimiento para aumentar la tolerancia al estrés en una planta, que comprende aplicar una cantidad eficaz de ácido 6-cloronicotínico o un compuesto de fórmula (I) en la que Het representa un heterociclo que está monosubstituido o polisubstituido, respectivamente, de manera opcional por flúor, por cloro, por metilo o por etilo, cuyo heterociclo se selecciona del siguiente grupo de heterociclos : pirid-3-ilo, pirid-5-ilo, 3-piridinio, l-óxido-5- piridinio, l-óxido-5-piridinio, tetrahidrofuran-3-ilo, tiazol-5-ilo, A representa alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, NÍR1) (R2) o S(R2) , en los que R1 representa hidrógeno, alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, fenil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono o alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, y R2 representa alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, -C(=0)-CH3 o bencilo, R representa hidrógeno, alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, -C(=0)-CH3 o bencilo o junto con R2 representa los grupos siguientes: -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH2-0-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2-NH- CH2-, -CH2-N(CH3)-CH2-, y X representa N-N02, N-CN o CH-N02 a dicha planta o a su medio ambiente, o a las semillas de dicha planta, caracterizado porque dicha planta es una planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés.
2. - Procedimiento de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés es una planta transgénica que comprende un gen exógeno que aumenta la tolerancia al estrés.
3. - Procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el gen exógeno codifica una molécula de ARN inhibidora de PARP. 4.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el gen exógeno comprende los siguientes fragmentos de AD? unidos operativamente: a. un promotor expresable en plantas; b. una región de AD? que codifica una molécula de AR? inhibidora de PARP que comprende, al menos, 19 de 20 nucleótidos consecutivos seleccionados de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 1, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 2, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 3 , la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 4, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 5 o la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 6; y c. una región de AD? de terminación de la transcripción y de poliadenilación. 5. - Procedimiento de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el gen exógeno comprende los siguientes fragmentos de AD? unidos operativamente: a. un promotor expresable en plantas; b. una región de AD? que codifica una molécula de ARN inhibidora de PARP que comprende, al menos, 19 de 20 nucleótidos consecutivos seleccionados del complemento de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 1, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 2, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 3, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID No 4, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID No 5 o la secuencia de nucleótidos de SEQ ID No 6; y c. una región de ADN de terminación de la transcripción y de poliadenilación. 6.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el gen exógeno comprende los siguientes fragmentos de ADN unidos operativamente: a. un promotor expresable en plantas; b. una región de ADN que codifica una molécula de ARN inhibidora de PARP, comprendiendo dicha molécula de ARN : i. una secuencia de nucleótidos codificante, que comprende, al menos, 19 de 20 nucleótidos consecutivos seleccionados de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 1, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 2, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 3, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 4, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 5 o la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 6; y ii. una secuencia de nucleótidos no codificante, que comprende una secuencia de nucleótidos complementaria de dichos, al menos, 20 nucleótidos consecutivos en dicha secuencia de nucleótidos codificante iü. en el que dicha secuencia de nucleótidos codificante y no codificante pueden formar una región de ARN bicatenaria; y c. una región de AD? de terminación de la transcripción y de poliadenilación. 7. - Procedimiento de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la secuencia de nucleótidos no codificante tiene una identidad de secuencia de aproximadamente el 95 % o es idéntica a dicha secuencia de nucleótidos codificante. 8. - Procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el gen exógeno codifica una molécula de AR? inhibidora de ParG. 9.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el gen exógeno comprende los siguientes fragmentos de AD? unidos operativamente: a. un promotor expresable en plantas; b. una región de AD? que codifica una molécula de ARN inhibidora de PARG que comprende, al menos, 19 de 20 nucleótidos consecutivos seleccionados de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 7, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 8, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 9 o la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 10; y c. una región de AD? de terminación de la transcripción y de poliadenilación. 10.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el gen exógeno comprende los siguientes fragmentos de ADN unidos operativamente: a. un promotor expresable en plantas; b. una región de ADN que codifica una molécula de ARN inhibidora de PARG que comprende, al menos, 19 de 20 nucleótidos consecutivos seleccionados de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID No 7, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID No 8, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID No 9 o la secuencia de nucleótidos de SEQ ID No 10; y c. una región de ADN de terminación de la transcripción y de poliadenilación. 11.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el gen exógeno comprende los siguientes fragmentos de ADN unidos operativamente: a. un promotor expresable en plantas; b. una región de ADN que codifica una molécula de ARN inhibidora de PARG, comprendiendo dicha molécula de ARN: i. una secuencia de nucleótidos codificante que comprende, al menos, 19 de 20 nucleótidos consecutivos seleccionados de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 7, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 8, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID ?o 9 o la secuencia de nucleótidos de SEQ ID No 10; y ii. una secuencia de nucleótidos no codificante, que comprende una secuencia de nucleótidos complementaria de, al menos, dichos 20 nucleótidos consecutivos en dicha secuencia de nucleótidos codificante iii. en el que dicha secuencia de nucleótidos codificante y no codificante pueden formar una región de ARN bicatenaria; y c. una región de ADN de terminación de la transcripción y de poliadenilación. 12.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque la secuencia de nucleótidos no codificante tiene una identidad de secuencia de aproximadamente el 95 % o es idéntica a la secuencia de nucleótidos codificante. 13. - Procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el gen exógeno codifica un enzima funcional de la planta de la ruta de síntesis natural de la nicotinamida adenina dinucleótido seleccionada entre una nicotinamidasa, una nicotinato fosforribosiltransferasa, el ácido nicotínico mononucleótido adenil transferasa o la nicotinamida adenina dinucleótido sintetasa. 1
4. - Procedimiento de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el gen exógeno comprende una secuencia de nucleótidos seleccionada entre la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 11, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 12, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 13, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 14, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 15, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 16, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 17, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 18, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 19, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 20, la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 21 o la secuencia de nucleótidos de SEQ ID 22. 15.- Procedimiento de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizado porque el compuesto seleccionado de la clase de los neonicotinoides es el imidacloprid. 16.- Procedimiento de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizado porque el compuesto seleccionado de la clase de los neonicotinoides es el clothianidin. 17.- Procedimiento de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizado porque el ho compuesto seleccionado de la clase de los neonicotinoides es el thiacloprid. 18.- Procedimiento de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizado porque el compuesto seleccionado de la clase de los neonicotinoides es el nitenpyram. 19.- Procedimiento de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizado porque el compuesto seleccionado de la clase de los neonicotinoides es el acetamiprid. 20.- Procedimiento de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizado porque dicho compuesto es el ácido 6-cloronicotínico. 21.- Uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, para aumentar la tolerancia al estrés de una planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 14. 22.- Semilla caracterizada porque es una planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 14, que se ha tratado con un compuesto de conformidad con la reivindicación 1. 23.- Procedimiento para aumentar la tolerancia al estrés en una planta, caracterizado porque comprende tratar el suelo en el que se planta una semilla de una planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 14, con una cantidad eficaz de ácido 6-cloronicotínico o de un compuesto de la fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1. 24.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la planta es la planta transgénica, dicotiledónea o monocotiledónea, tolerante al estrés, dicha célula vegetal o su semilla. 25.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la semilla se trata con una cantidad de un compuesto, de conformidad con la reivindicación 1 comprendida entre 0,1 g/100 kg de semilla hasta 1.000 g/100 kg de semilla. 26.- Procedimiento de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la planta se trata con una cantidad de aplicación comprendida entre 10 g y 1.600 g por hectárea de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1. 27.- Envase caracterizado porque comprende, al menos, a. un compuesto químico de conformidad con la reivindicación 1, y b. una planta modificada mediante ingeniería genética para que sea tolerante al estrés o una semilla de dicha planta de conformidad con una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 14.
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