MX2007002044A - Polimorfo ii de rapamicina y usos del mismo. - Google Patents

Abstract

La presente invencion provee polimorfo forma II de rapamicina; esta invencion provee tambien procedimientos para preparar polimorfomo forma II de rapamicina y composiciones farmaceuticas que incluyen polimorfo forma II de rapamicina.

Description

POLIMORFO II DE RAPAMICINA Y USOS DEL MISMO ANTECEDENTES DE LA INVENCION Esta invención se relaciona con el polimorfo forma II de rapamicina. La rapamicina es un antibiótico de trieno macrocíclico producido por Streptomices hygroscopicus, que se identificó inicialmente con actividad antifúngica, particularmente contra Candida albicans, tanto in vitro como in vivo (C. Vezina et al., J. Antibiot. 28, 721 (1975); S.N. Sehgal et al., J. Antibiot. 28, 727 (1975); H. A. Baker et al., Antibiot. 31 , 539 (1978); patentes de los Estados Unidos No. 3,929,992 y 3,993,749). La rapamicina está comercialmente disponible como Sirolimus (Wyeth). La rapamicina se utiliza ampliamente como un inmunosupresor en receptores de transplante de órganos y ha mostrado limitada toxicidad incluso en calendarios de combinación con otros inmunosupresores como ciclosporina o corticoesteroides. El receptor de rapamicina intercelular es una pequeña proteína llamada FKBP12 (proteína de unión a FK506). El complejo KFBP-rapamicina inhibe la función de una serina/treonina cinasa, TORm (objetivo mamífero de rapamicina), bloqueando así la estimulación de la p70s6 cinasa de s6 cinasa ribosomal (p70s6k), P70s6k a su vez fosforila la proteína ribosomal 40s S6, que favorece la traducción de ARNm que codifica las proteínas y los factores de alargamiento. Otro objetivo de TORm es un represor de bajo peso molecular del inicio de traducción llamado proteína fosforilada estable al ácido y al calor regulada por insulina (PHAS-I). La fosforilación PHAS-I resulta en su disociación a partir del factor de inicio eucariótico (elF)-4E e incrementa el inicio de la traducción dependiente de elF-4E. Se ha reportado que la rapamicina inhibe el avance del ciclo celular en una variedad de tipos celulares, incluyendo célula T y células B humanas. Adicionalmente, la rapamicina tiene un actividad in vitro e in vivo contra una amplia gama de líneas celulares de tumor humano y se considera que representa una nueva clase promisoria de agentes anticáncer citostáticos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCION En un aspecto, la presente invención proporciona el polimorfo forma II de rapacimina. Convenientemente, este polimorfo es propenso a menos adhesión a las herramientas durante la compresión en comparación con la forma I, proporcionando ventajas mecánicas para formulación y otros procesamientos. En otro aspecto, la presente invención proporciona un procedimiento para preparar polimorfo forma II de rapamicina. En un aspecto adicional, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que contienen el polimorfo forma II de rapamicina.

En incluso otro aspecto, la presente invención proporciona equipos que contienen el polimorfo forma il de rapamicina. En incluso un aspecto adicional, la presente invención proporciona métodos para preparar composiciones farmacéuticas que contienen el polimorfo forma II de rapamicina. Otros aspectos y ventajas de la presente invención se describen adicionalmente en la siguiente descripción detallada de las modalidades preferidas de la misma.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La fjgura 1 proporciona patrones de difracción de rayos X (XRD) del polimorfo forma II de rapamicina. El patrón XRD del polimorfo forma II de rapamicina está en el conjunto superior de picos, un estándar es provisto en el medio y el patrón XRD de rapamicina está en el conjunto inferior de picos. La figura 2 proporciona termogramas de calorimetría por barrido diferencial (DSC) para rapamicina y el polimorfo forma II de rapamicina. El termograma DSC de rapamicina se ubica por debajo del termograma DSC del polimorfo forma II de rapamicina.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención proporciona polimorfo forma II de rapamicina y proporciona un nuevo procedimiento para hacer la forma I a partir de la forma II al remover el solvato. El polimorfo forma II de rapamicina se aisló y se caracterizó mediante difracción de rayos X (XRD), calorimetría de barrido diferencial (DSC), y análisis termogravimétrico (TGA). El polimorfo forma II de rapamicina tiene un menor punto de fusión que la rapamicina y se pega menos a las herramientas que la forma I, formando una superficie uniforme al comprimir. La propiedad distinguible de la forma I a partir de este nuevo procedimiento es que puede convertirse a la forma II totalmente en el ambiente de vapor de t-butil metil éter. Lo siguiente proporcionará ventajas adicionales del polimorfo forma II de rapamicina y métodos para obtener y utilizar el mismo.

I. Definiciones Como se utiliza en la presente, el término "rapamicina" se refiere a la forma de rapamicina actualmente disponible para los expertos en la técnica, que se identifica por tiempos de retención en cromatografía liquida de alto desempeño fácilmente disponible u obtenible, estructura de cristal de rayos X, patrón XRD en polvo y termograma DSC. El patrón de XRD en polvo de rapamicina es fácilmente disponible a los expertos en la técnica y contiene varios picos de variada intensidad a 2? de alrededor de 7.2°, 9.9°, 10.2°, 11.1°, 12.5°, 14.5°, 15.3°, 15.5°, 16.2°, 20.0°, 20.4°, y 21.8°. Ver el patrón XRD inferior para la rapamicina en la figura 1. La estructura de cristal de rayos X de rapamicina tiene un grupo de espacio ortorrómbico P2-?2?2? con a=34.85(2) A, b=13.08(1 ) A, c=12.25(1 ) A (D.C. Neil Swindwells et al Can. J. Chem 56, 2491 , 1978, que se incorpora en la presente mediante referencia). El termograma DSC de rapamicina está caracterizado por un elevado endotermo de fusión a alrededor de 194°C. Como se utiliza en la presente, el término "polimorfo" se refiere a un compuesto (por ejemplo rapamicina) que, cuando está presente como un sólido, existe como formas diferentes. Deseablemente, el polimorfo de rapamicina incluye formas sólidas de un compuesto como cristales, microcristales, espumas y polvos, entre otros. Preferiblemente, los polimorfos de rapamicina de la presente invención son cristalinos. Los polimorfos típicamente difieren en sus propiedades físicas debido al orden de las moléculas en la retícula del polimorfo. Adicionalmente, las propiedades físicas del polimorfo pueden diferir debido a la presencia de solvatos u otras moléculas incorporadas en la retícula del polimorfo. Típicamente, polimorfos son fácilmente distinguidos utilizando técnicas como punto de fusión, índice de disolución, espectroscopia infrarroja y de Raman y difracción de rayos X como técnicas de cristal y polvo. El término "amorfo" como se utiliza en la presente se refiere a un compuesto que no tiene una estructura o forma de cristal definida. En la presente solicitud el término amorfo se refiere a rapamicina amorfa que puede estar presente en forma amorfa como sólido o en solución. El término "precipitación" o "que se precipita" quiere describir un procedimiento mediante el cual una forma sólida de un compuesto se precipita a partir de una solución que contiene un compuesto disuelto. Como se utiliza en la presente, la precipitación pretende describir precipitar el polimorfo forma II de rapamicina de una solución de rapamicina, preferiblemente en t-butil metil éter. El término "temperatura ambiente" pretende describir una temperatura de alrededor de 23 a alrededor de 25°C. Sin embargo, un experto en la técnica fácilmente entendería que la temperatura ambiente específica puede variar dependiendo de las condiciones utilizadas durante la formación del polimorfo forma II de rapamicina y de las condiciones ambientales.

II. Métodos para preparar el polimorfo forma II de rapamicina En un aspecto, la presente invención proporciona métodos para preparar polimorfo forma li de rapamicina. Preferiblemente, el polimorfo forma II de rapamicina se prepara a partir de rapamicina amorfa. El procedimiento particular utilizado para producir rapamicina amorfa a partir de rapamicina no es sin embargo una restricción en la presente invención. La rapamicina se combina con un solvente inicial que es capaz de disolver la rapamicina. Típicamente, el solvente inicial es acetona. El solvente inicial luego se remueve utilizando presiones reducidas de menos de alrededor de una atmósfera (atm), típicamente mediante el uso de un evaporador giratorio a temperaturas elevadas de alrededor de 40°C a 50° C. Después de la remoción del solvente inicial la rapamicina sólida se forma nuevamente preferiblemente en una forma amorfa. Mayores o menores temperaturas pueden ser utilizadas para remover el solvente inicial pero el uso de éste no debe considerarse una limitación de la presente invención. Típicamente la rapamicina sólida formada después de la remoción inicial del solvente es una espuma. Sin embargo, la rapamicina obtenida después de la remoción inicial del solvente puede ser un polvo o un aceite. Después de la remoción de solvente inicial la rapamicina amorfa se disuelve en un segundo solvente de disolución. En una modalidad, el segundo solvente de disolución es un éter, preferiblemente t-butil metil éter (TBME). El éter puede ser deshidratado o puede contener agua. Preferiblemente, la rapamicina se disuelve en el segundo solvente de disolución a temperaturas elevadas de alrededor de 45°C. Sin embargo, un experto en la técnica podría fácilmente ser capaz de utilizar temperaturas por debajo o encima de 45°C para disolver la rapamicina en el segundo solvente de disolución. Después de la adición de rapamicina segundo solvente de disolución, la solución se mezcla durante por lo menos alrededor de un minuto. Típicamente la rapamicina inicialmente se combina con el segundo solvente de disolución a las temperaturas elevadas observadas arriba. Sin embargo, menores temperaturas pueden ser utilizadas para promover la formación de polimorfo forma II de rapamicina y pueden ser seleccionadas fácilmente por un experto en la técnica. Típicamente la temperatura se disminuye y mantiene a una temperatura de alrededor de temperatura ambiente. La solución generalmente se mantiene a alrededor de temperatura ambiente durante alrededor de 6 a alrededor de 12 horas. Un experto en la técnica sería fácilmente capaz de determinar el tipo de mezclado empleado, el periodo y temperaturas requeridas para disolver rapamicina amorfa en el solvente de disolución. Preferiblemente rapamicina es disuelta en TBME a alrededor de 45°C y luego se mantiene a temperatura ambiente por alrededor de 6 a alrededor de 8 horas. Después de la disolución de rapamicina y mantenimiento en el segundo solvente de disolución muestras sólidas del polimorfo forma II de rapamicina se forman en la solución vía precipitación. Típicamente, el polimorfo forma II de rapamicina es precipitado como cristales blancos. Sin embargo, el polimorfo forma II de rapamícina puede precipitarse como un polvo fino o grueso. El polimorfo forma II de rapamicina puede aislarse utilizando técnicas conocidas para los expertos en la técnica e incluyen filtrado, decantación, centrifugado y cromatografía, entre otros. Típicamente la filtración es utilizada para aislar la muestra de polimorfo forma II de rapamicina precipitada. El solvente de disolución residual obtenido después de filtrado puede opcionalmente ser concentrado y/o enfriado a temperaturas menores que alrededor de temperatura ambiente para promover la precipitación del polimorfo forma II de rapamicina adicional.

Una vez aislado, el solvente residual puede ser removido por secado con aire o bajo una atmósfera inerte como de nitrógeNo. Típicamente cualquier solvente residual es removido sobre un período de por lo menos 0.5 horas y preferiblemente alrededor de 0.5 a 3 horas. En una modalidad, la presente invención proporciona un procedimiento para preparar polimorfo forma II de rapamicina incluyendo disolver de rapamicina en acetona; remover la acetona para formar una espuma; disolver la espuma en t-butil metil éter; y recolectar polimorfo forma II de rapamicina.

III. Caracterización de polimorfo forma II de rapamicina La caracterización de polimorfo forma II de rapamicina y distinguir el mismo de la rapamicina se logra utilizando técnicas conocidas para el experto en la técnica. Específicamente la verificación que el polimorfo forma II de rapamicina está presente después de la precipitación puede realizarse utilizando técnicas incluyendo punto de fusión, espectroscopia infrarroja (IR), espectroscopia de resonancia magnética nuclear (NMR), análisis espectral de masa (MS), análisis de combustión, espectroscopia Raman, análisis de elementos y cromatografía incluyendo cromatografía líquida de alto desempeño. Otras técnicas incluyendo calorimetría de barrido diferencial (DSC) y difracción con rayos X (XRD) también se utilizan en distinguir polimorfos, y especialmente, rapamicina a partir de polimorfo forma II de rapamicina.

(A) Identificación utilizando espectroscopia HPLC puede utilizarse para verificar que el producto obtenido como se notó arriba es polimorfo forma II de rapamicina. Preferiblemente, el polimorfo de rapamicina es analizado utilizando espectroscopia HPLC-ultra violeta (UV) o HPLC espectral de masa (MS) utilizando las técnicas descritas en French et al., Clinical Chemistry, 47(7): 1316 (2001 ) y Holt et al., Clinical Chemistry, 46(8): 1179 (2000), que son todas incorporadas mediante referencia. Deseablemente, la cromatografía HPLC del polimorfo forma II de rapamicina es idéntica a la cromatografía HPLC de rapamicina utilizando las condiciones descritas en French y Holt notados arriba. La cromatografía HPLC de polimorfo forma II de rapamicina puede contener picos adicionales que corresponden a impurezas que pueden ser fácilmente identificadas por un experto en la técnica. Sin embargo, un experto en la técnica puede fácilmente entender que la presencia de las impurezas no interfiere con la identificación y caracterización del polimorfo forma II de rapamicina. Una variedad de condiciones HPLC útiles para obtener una cromatografía HPLC pueden fácilmente ser determinadas por un experto en la técnica y no deben considerarse como una restricción de la presente invención. Estas condiciones HPLC incluyen variaciones en la temperatura de columna, gasto, longitud de onda de detección, tipo de columna, tamaño de columna y fase móvil, entre otros. En una modalidad, las condiciones HPLC-MS incluyen las condiciones establecidas en Holt observadas arriba. Por ejemplo, las condiciones incluyen una columna de 15 centímetros (cm) x 4.6 mm Supelcosil™ LC-18-DB que contiene partículas ODS de 5 mieras (µ), una temperatura de alrededor de 50°C, y un gasto de alrededor de 1.0 mililitros (mL)/minuto. Una variedad de fases móviles puede ser utilizada para obtener una cromatografía HPLC-UV de polimorfo forma II de rapamicina. En una modalidad, la fase móvil es una solución de metanol: agua (por ejemplo 80:20 en volumen) opcionalmente suplementada con una solución de acetato de amonio u otro solvente, como acetonitrilo y/o dioxano, entre otros. Al utilizar las condiciones HPLC-MS establecidas arriba, la cromatografía HPLC que tiene un tiempo de retención de alrededor de 6 minutos debe ser obtenida para el polimorfo forma II de rapamicina. La cromatografía HPLC-MS del polimorfo forma II de rapamicina puede ser entonces compararse con el HPLC-MS de rapamicina utilizando las mismas condiciones HPLC-MS. En la presente invención, el tiempo de retención para el polimorfo forma II de rapamicina debe ser idéntico al tiempo de retención de alrededor de 6 minutos para rapamicina. Típicamente técnicas XRD y DSC son utilizadas como confirmación adicional para verificar que el polimorfo forma II de rapamicina está presente.

(B) Identificación utilizando difracción de ravos X Técnicas XRD son utilizadas para distinguir el polimorfo forma II de rapamicina de rapamicina. Uno de experiencia en la técnica sería fácilmente capaz de determinar las condiciones requeridas para obtener un patrón XRD del polimorfo forma II de rapamicina. Una variedad de instrumentos XRD están disponibles e incluyen el instrumento de sistema de difracción avanzado Scintag ™ X-2 utilizando el programa Diffraction Management Software NT, entre otros. El patrón de XRD de polvo de polimorfo forma II de rapamicina descrita aquí fue entonces obtenido utilizando técnicas cristalográficas de rayos X conocidas para los expertos en la técnica. En una modalidad, el patrón XRD del polimorfo forma II de rapamicina incluye picos múltiples que difieren de los picos XRD obtenidos de rapamicina. En otra modalidad, el patrón de XRD el polimorfo forma II de rapamicina contiene un pico largo y varios picos más pequeños. En una modalidad adicional el patrón XRD del polimorfo forma II de rapamicina contiene picos 2T de alrededor de 7.0°, 9.7°, 10.1°, 11.0°, 12.4°, 13.1°, 14.1°, 14.6°, 15.0°, 15.2°, 15.8°, 16.3°, 16.6°, 17.6°, 18.1°, 18.3°, 19.7°, 20.2° y 21.2°. Otros picos pueden estar presentes en el patrón XRD del polimorfo forma II de rapamicina y corresponden a impurezas en la muestra. Los otros picos típicamente corresponden a cantidades menores de rapamicina. Además de caracterizar el polimorfo de forma II de rapamicina XRD puede ser usada para monitorear la formación de polimorfo forma II de rapamicina.

(C) Identificación utilizando calorimetría de barrido diferencial Técnicas de calorimetría de barrido diferencial (DSC) pueden ser también utilizadas para distinguir el polimorfo forma II de rapamicina de la rapamicina. Un experto en la técnica sería capaz de determinar las condiciones necesarias para obtener un termograma DSC de polimorfo forma II de rapamicina. Una variedad de calorímetros de barridos diferenciales están disponibles para los expertos en la técnica e incluyen el instrumento DSC Pyris™ 1 utilizado en temperaturas de alrededor de 25°C a alrededor de 220°C y aumentos de temperatura a varias velocidades incluyendo 5°C/min, 10°C/min, y 30°C/min, entre otros instrumentos y condiciones. El termograma DSC de polimorfo forma II de rapamicina preparado de conformidad con la presente invención no cuenta con el pico endotérmico de alrededor de 194°C que está presente en el patrón de XRD para rapamicina. El termograma DSC más bien contiene un pico endotérmico de alrededor de 188°. Ver la figura 2. El termograma DSC de polimorfo forma II de rapamicina también puede incluir endotérmos de degradación. Sin estar ligado por teoría alguna un endotérmo que corresponda a t-butil metil éter residual puede también estar presente. En una modalidad el polimorfo de forma II de rapamicina puede entonces ser preparado teniendo un termograma DSC que contiene un pico endotérmico a alrededor de 188°C y que no tiene un pico endotérmico de alrededor de 194°C.

(D) Identificación utilizando análisis termogravimétrico (TGA) TGA también puede ser utilizado para determinar la presencia de moléculas de solvato como moléculas de TBME en la muestra de polimorfo de forma II de rapamicina. En la presente invención la relación de la molécula de rapamicina a las moléculas de solvente arrastradas en el polimorfo forma II de rapamicina es de alrededor de 2:1 y las moléculas de solvente por ello incluyen alrededor de 4% de la muestra sólida. Un experto en la técnica podría ser capaz de determinar fácilmente los instrumentos y condiciones utilizados durante TGA.

IV. Conversión de polimorfo forma II de rapamicina a otras formas de rapamicina El polimorfo forma II de rapamicina puede convertirse a los esteres correspondientes, carbamatos, sulfatos, éteres, oximas, carbonatos, los similares utilizando técnicas conocidas para los expertos en la técnica. Por ejemplo, polimorfo forma II de rapamicina puede ser convertido al éster 42 de rapamicina con ácido 3-hidroxi-2-(hidroximetil)-2-metilpropiónico (CCI-779). El polimorfo forma II de rapamicina también puede desolvarse para formar forma I de rapamicina especial o una mezcla de forma I de rapamicina y polimorfo forma II de rapamicina. Típicamente la forma II se convierte a la forma I o una mezcla de forma II con forma I al calentar la forma II sólida a temperaturas mayores de alrededor de 60°C. Alternativamente, la forma II puede convertirse a la forma I o una mezcla de forma II con forma I mediante el uso de vacíos. Vacíos teniendo presiones menores a alrededor de una atmósfera (atm) pueden ser utilizados en la presente invención para desolvar el polimorfo forma II de rapamicina. Preferiblemente vacíos obtenidos mediante el uso de un concentrador de vacíos son deseables. Tales vacíos pueden ser mantenidos por períodos cortos o largos. Un experto en la técnica sería capaz fácilmente de determinar la cantidad de tiempo requerido para desolvar el polimorfo forma II de rapamicina. En una modalidad el vacío es mantenido durante por lo menos alrededor de 8 horas. En otra modalidad el vacío es mantenido durante por lo menos alrededor de 2 días. En una modalidad adicional el vacío es mantenido por alrededor de 2 días a alrededor de 7 días. Sin desear estar limitados por la teoría los inventores han descubierto que el polimorfo forma II de rapamicina es un solvato que contiene alrededor de 4% de solvente. El solvente puede ser removido para producir un polimorfo forma I de rapamicina especial que tiene un patrón de difracción de rayos X idéntico a la forma I de rapamicina pero muy ligeramente diferentes propiedades físicas como se detalla a continuación. Así, la invención proporciona el polimorfo I de rapamicina preparada al desolvar el polimorfo II de rapamicina. Los inventores también han descubierto que la forma 1 especial puede ser convertida a forma II totalmente en el ambiente de vapor de T-butil metí éter. Eso contrasta con la forma I de rapamicina regular producida por la técnica antecedente que no forma completamente el polimorfo II de rapamicina cuando se expone al solvente.

Deseablemente, el polimorfo II de rapamicina se convierte a la forma I de rapamicina al calentar la forma II a temperaturas mayores de alrededor de 100°C bajo presiones reducidas. Los inventores también han descubierto que la forma I de rapamicina puede resolvarse en el vapor del solvente de disolución preferiblemente vapor TBME para formar polimorfo forma II de rapamicina.

V. Composiciones que contienen polimorfo forma II de rapamicina Las composiciones que contienen el polimorfo forma II de rapamicina también puede ser preparadas de conformidad con la presente invención. Tales composiciones son preparadas al combinar el polimorfo forma II de rapamicina y un portador farmacéuticamente aceptable. En una modalidad la invención proporciona una composición o mezcla de polimorfo forma II de rapamicina y/o polimorfo forma I de rapamicina especial junto con 1 o más formas cristalinas, polimórficas, de solvato, amorfas u otras formas de rapamicina. Por ejemplo, tal una composición puede comprender polimorfo forma II de rapamicina junto con una o más formas de rapamicina, tal como rapamicina y/o polimorfo forma I de rapamicina. En otro ejemplo, tal una composición puede comprender polimorfo forma I de rapamicina junto con uno o más otras formas de rapamicina, como rapamicina y/o polimorfo forma II de rapamicina. Más específicamente, la composición puede comprender desde 0.5% a 100% en peso de polimorfo forma II de rapamicina o polimorfo forma I de rapamicina o cualquier cantidad entre éstos. Por ejemplo, la composición puede comprender menos de 1 %, 2%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, ó 50% en peso de polimorfo forma II de rapamicina o polimorfo forma I de rapamicina con base en la cantidad total de composición. Alternativamente, la composición puede comprender por lo menos 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, 99.5% ó 99.9% en peso de polimorfo forma II de rapamicina y/o polimorfo forma I de rapamicina con base en la cantidad total de rapamicina en la composición. En una modalidad adicional, previo a la administración, el polimorfo forma II de rapamicina o polimorfo forma I de rapamicina puede formularse como una composición farmacéutica que contiene una cantidad de dosificación efectiva de polimorfo forma II de rapamicina y/o forma I en combinación con 1 (o más) portadores farmacéuticamente aceptables. En incluso otra modalidad la composición farmacéutica comprende una dosificación efectiva de una composición de rapamicina que comprende por lo menos un cierto porcentaje de polimorfo forma II de rapamicina o polimorfo forma I de rapamicina (con base en la cantidad total de rapamicina presente en la composición, es decir, la cantidad total de formas de rapamicina siendo 100%). En otras palabras, por lo menos un cierto porcentaje de rapamicina presente dentro de la composición farmacéutica existe como polimorfo forma II de rapamicina o polimorfo forma I de rapamicina, con el resto de rapamicina siendo una forma diferente, incluyendo (pero sin restricción) rapamicina, polimorfo forma II de rapamicina, polimorfo forma I de rapamicina o cualquier otra forma cristalina, polimórfica, de solvato o amorfo. Las composiciones descritas aquí conteniendo polimorfo forma II de rapamicina pueden formularse en cualquier forma adecuada para la ruta deseada de suministro utilizando una cantidad farmacéuticamente efectiva de polimorfo forma II de rapamicina. Por ejemplo, las composiciones de la invención pueden suministrarse por una ruta como oral, dérmica, transdérmica, intrabronquial, intranasal, intravenosa, intramuscular, subcutánea, parenteral, intraperitoneal, intranasal, vaginal, rectal, sublingual, intracraneal, epidural, intratraquial o por liberación sostenida. Preferiblemente el suministro es oral. La composición en tableta de dosificación oral de esta invención también puede utilizarse para hacer tabletas de dosificación oral que contienen derivados de polimorfo forma II de rapamicina incluyendo sin restricciones esteres, carbamatos, sulfatos, éteres, oximas, carbonatos los similares que son conocidos para los expertos en la técnica. La propiedad de menos adhesión a las herramientas de forma II como se compara con la forma II se anticipa como particularmente conveniente para la formación de tabletas y proporcionar un área superficial uniforme. Una cantidad farmacéuticamente efectiva de polimorfo forma II de rapamicina puede variar dependiendo de los compuestos específicos, modo de suministro, severidad de la condición que se está tratando y cualesquiera otros ingredientes activos utilizados en la composición. El régimen de dosificación también puede ajustarse para proporcionar la respuesta terapéutica óptima. Varias dosis divididas pueden suministrarse diariamente por ejemplo en dosis divididas 2 a 4 veces al día o una dosis individual puede ser suministrada. La dosis puede sin embargo ser proporcionalmente reducida o incrementada como lo indican las exigencias de la situación terapéutica. En una modalidad el suministro es en una base diaria, semanal o mensual. En otra modalidad del suministro es en un suministro diario. Sin embargo, dosis diaria pueden ser disminuidas o elevadas con base en el suministro periódico. El polimorfo forma II de rapamicina puede ser combinado con 1 o más portadores farmacéuticamente aceptables o insipientes incluyendo, sin restricción portadores sólidos y líquidos que sean compatibles con las composiciones de la presente invención tales portadores incluyen adyuvantes, jarabes, elíxires, diluyentes, aglutinantes, agentes tensioactivos, polímeros solubles en agua, lubricantes, agentes tensioactivos, agentes de granulación, agentes de desintegración, emolientes, quelatadores de metal, ajustadores de pH, agentes tensioactivos, llenadores, desintegrantes, agentes de suspensión y estabilización y combinaciones de éstos entre otros. En una modalidad el polimorfo forma II de rapamicina se combina con quelatadores de metal, ajustadores de pH, agentes tensioactivos, llenadores, desintegrantes, lubricantes y aglutinantes.

Adyuvantes pueden incluir, sin restricción agentes saborizantes, agentes colorantes, conservadores y antioxidantes suplementales que pueden incluir vitamina E, ácido cítrico, ácido ascórbico, hidroxitolueno butilado (BHT), hidroxianisol butilado (BHA), d,1 -a-tocoferol, monotioglicerol y propilgalato. Concentraciones típicas de los antioxidantes utilizados en las formulaciones orales utilizadas en esta invención serán usados en concentraciones en la escala de 0.0005 a 0.5% p/v. Lubricantes pueden incluir estearato de magnesio, ácido silícico anhidro ligero, talco, ácido esteárico, laurilsulfato de sodio y estearil fumarato de sodio entre otros. En una otra modalidad el lubricante es estereato de magnesio, ácido esteárico o estearil fumarato de sodio. En otra modalidad, el lubricante es estearato de magnesio. Agentes de granulación pueden incluir, sin restricción, dióxido de silicio, celulosa microcristalina, almidón, carbonato de calcio, pectina y crospovidona, poliplasdona entre otros. Aglutinantes, llenadores y desintegrantes pueden incluir almidón, mannitol, fosfato de calcio, azúcares, sacarosa, caolín, lactosa y dextrosa, croscarmelosa de sodio, estearato de magnesio, goma acacia y arábiga, colesterol, tragacanto, ácido esteárico, gelatina, caseína, lecitina (fosfatidas), carboximetilcelulosa, carboximetilcelulosa de calcio, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroximetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, celulosa no cristalina, celulosa microcristalina, alcohol cetoestearílico, alcohol cetílico, cera de éster cetílico, dextratos, dextrina, monooleato de glicerilo, monoestearato de glicerilo, palmitostearato de glicerilo, alquiléteres de polioxietileno, polietilenglicoles, derivados de aceite de ricino polioxietileno, estearatos de polioxietileno, alcohol polivinílico, bicarbonato de sodio sustituido, citrato de calcio, glicolato almidón de sodio, almidón pregelatinizado, crospovidona, polipropilpirrolidona, polivinilpirrolidona (povidona, PVP), colesterol, ácido esteárico, gelatina, caseína, lecitina (fosfatidas), y similares también pueden ser incorporados en la formulación oral. Emolientes pueden incluir sin restricción a alcohol esterarílico, aceite de mink, alcohol cetílico, alcohol oleico, laurato de isopropilo, polietilenglicol, aceite de oliva, gel de petrolato, ácido palmítico, ácido oleico y miristato de miristilo. Agentes tensioactivos pueden incluir agentes no iónicos aniónicos incluyendo polisorbatos como polisorbato 20 y 80, esteres de sorbitán, poloxámeros como poloxámero 188, lauril sulfato de sodio, dodecil sulfato de sodio, cloruro de benzalconio, estearato de calcio, alcohol cetoestearílico, cera emulsionante de cetomacrogol, dióxido de silicio coloidal, fosfatos, silicato de aluminio y magnesio, trietanolamina, o sales de ácidos de bilis (taurocolato, glicocolato, colato, desoxicolato, etc.) que pueden combinarse con lecitina. Los agentes tensioactivos también pueden incluir agentes vegetales etoxilados como Cremophor EL o aceite de resino pegilado [por ejemplo, como aceite de resino PEG-35 que se vende bajo el nombre Cremophor EL, BASF], succinato de propilenglicol y tocoferol de vitamina E (Vitamina E TGPS), copolímeros de bloque de polioxietileno-polioxipropileno, y poloxámeros. Se espera que el tensioactivo pueda contener 0.5 a 100% p/v de la composición, 0.5% a 10% p/v, 5 a 80% p/v, 10 a 75% p/v, 15 a 60% p/v, y preferiblemente, al menos 5% p/v o al menos 10% p/v, de la composición. Los quelatadores de metal pueden incluir agentes de quelatación fisiológicamente aceptables incluyendo ácido edético, ácido málico, ácido fumárico, ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), o aminoácidos como glicina que sean capaces de mejorar la estabilidad del polimorfo forma II de rapamicina. En una modalidad el quelatador de metal es ácido edético. Ajustadores de pH también pueden utilizarse para ajustar el pH de una solución que contiene rapamicina a alrededor de 4 a alrededor de 6. en una modalidad el pH de una solución que contiene rapamicina se ajusta a un pH de alrededor de 4.6. Ajustadores de pH pueden incluir agentes fisiológicamente aceptables incluyendo ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido fumárico, ácido málico, o ácido clorhídrico diluido, y sales de éstos. En una modalidad el ajustador de pH es ácido cítrico. Polímeros solubles en agua incluyen, sin restricción, polivinilpirrolidona (PVP), hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC), polietilenglicol (PEG), y ciclodextrina y mezclas de éstos. Se prefiere que polímero soluble en agua sea PVP, y que tenga un peso molecular de entre 2.5 y 60 kilodaltons. Cualquier formulación oral dada útil en la invención puede contener múltiples ingredientes de cada clase de componente. Por ejemplo una formulación oral que contiene un antioxidante puede contener uno o más antioxidantes como el componente antioxidante. Agentes de suspensión o estabilización pueden incluir, sin restricción, estearato de magnesio, ácido esteárico, talco, laurilsulfato de sodio, celulosa microcristalina, carboximetilcelulosa de calcio, polivinilpirrolidona, gelatina, ácido algínico, goma de acacia, goma de xantano, citrato de sodio, silicatos complejos, carbonato de calcio, glicina, dextrina, sacarosa, sorbitol, fosfato dicálcico, sulfato de calcio, lactosa, caolín, mannitol, cloruro de sodio, talco, almidones secos, y azúcar en polvo. Los diluyentes pueden incluir agua, etanol, polietilenglicol 300, polietilen 400, polietilen 600 polietilen 1000, o mezclas que contienen uno o más de estos polietilenglicoles, propilenglicol y otros cosolventes farmacéuticamente aceptables o agentes para ajustar la osmolaridad de la solución como cloruro de sodio, lactosa, mannitol u otras azúcares, polioles y electrolitos parenteralmente aceptables. En una modalidad, las composiciones que contiene el polimorfo forma II de rapamicina se suministra oralmente por tableta, capleta o cápsula, microcápsulas, polvo dispersable, granulo, suspensión, jarabe, elíxir y aerosol. Convenientemente, cuando las composiciones que contiene polimorfo forma II de rapamicina se suministran oralmente, el suministro es por tableta y cápsula de relleno duro o líquido. Los solventes no alcohólicos pueden incluir dimetilacetamida, sulfóxido de dimetilo o acetonitrilo, o mezclas de los mismos entre otros.

Los solventes alcohólicos pueden incluir uno o más alcoholes como el componente solvente alcohólico de la formulación. Las formulaciones orales particularmente adecuadas para el polimorfo forma II de rapamicina incluyen las mismas formulaciones utilizadas con CCI-779 y descritas en la publicación de patente de E.U.A. número US-20040077677 y la publicación de patente internacional WO 04/026280 (Solicitud número PCT/US03/29228), que se incorporan por este medio por referencia. Tales formulaciones orales contienen una granulación que se prepara usando un procedimiento de granulación en húmedo. La granulación puede contener el polimorfo forma II de rapamicina, un polímero soluble en agua, un agente modificador de pH, un agente tensioactivo y un antioxidante. En una modalidad, la formulación contiene de 0.1 a 30% de 0.5 a 25%, de 1 a 20%, de 5 a 15% o de 7 a 12% (p/) del polimorfo formador de rapamicina; de 0.5 a 50%, de 1 a 40%, de 5 a 35%, de 10 a 25%, o de15 a 20% (p/p) de polímero soluble en agua; de 0.5 a 10%, de 1 a 8%, o de 3 a 5% (p/p) de agente tensioactivo; y de 0.001% a 1%, de 0.01% a 1% o de 0.1% a 0.5% (p/p) de antioxidante. Sin embargo, otras modalidades pueden contener más o menos, de esos componentes. En otra modalidad, las composiciones que contiene el polimorfo forma II de rapamicina se pueden suministrar por vía intravenosa, intramuscular, subcutánea, parenteral o intraperitoneal en forma de soluciones inyectables estériles, suspensiones, dispersiones y polvos que sean fluidos al grado que exista la fácil capacidad de jeringa. Tales composiciones inyectables son estériles y estables bajo condiciones de fabricación y almacenamiento y libres de la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. En condiciones ordinarias de almacenamiento y uso estas preparaciones tienen un conservador para evitar el crecimiento de microorganismos. Una formulación parenteral útil en la invención se puede preparar como una sola solución o preferiblemente se puede preparar como un concentrado cosolvente que contenga el polimorfo forma II de rapamicina, un solvente alcohólico y un antioxidante, que se combine subsiguientemente con un diluyente que contenga un solvente diluyente y un agente tensioactivo adecuado. Cuando se prepara como una sola solución o dispersión, el polimorfo forma II de rapamicina se combina con un diluyente. En una modalidad, se combina el polimorfo forma II de rapamicina con agua, se mezcla opcionalmente con un agente tensioactivo tal como hidroxipropilcelulosa. Se pueden preparar las dispersiones en glicerol, polietilenglicoles líquidos o mezclas de los mismos en aceites. Las formulaciones inyectables particularmente adecuadas para el polimorfo forma II de rapamicina incluyen aquellas formulaciones inyectables utilizadas para CCl-779 en la publicación de patente de E.U.A. No 20040167152-A1 (solicitud número 10/626,943); la publicación de patente internacional No. WO 03/23267 (solicitud número PCT/US03/223276); la publicación de patente internacional número WO 2004/011000; la publicación de patente de E.U.A. No 20040167152-1 A (solicitud número 10/626, 943), que se incorporan por este medio por referencia. Cualquier formulación dada útil en esta invención puede contener múltiples ingredientes de cada clase de componente, En una modalidad, un solvente parenteralmente aceptable puede incluir un solvente no alcohólico, un solvente alcohólico o mezclas de los mismos. Los ejemplos de solventes útiles en la invención de formulaciones incluyen, sin limitación, etanol, propilenglicol, polietilenglicol 300, polietilenglicol 400, polietilenglicol 600, polietilenglicol 1000, o mezclas de los mismos. Estos solventes son particularmente convenientes, porque ocurre la degradación mediante la oxidación y el desdoblamiento de lactona a un menor grado para estos cosolventes. Además, se puede combinar etanol y propilenglicol para producir un producto menos inflamable, pero las mayores cantidades de etanol en la mezcla dan por resultado generalmente mejor estabilidad química. Se prefiere una concentración de 30 a 100% v/v de etanol en la mezcla. Se puede realzar la estabilidad del polimorfo forma II de rapamicina en los cosolventes alcohólicos parenteralmente aceptables mediante la adición de un antioxidante a la formulación. Generalmente, las formulaciones parenterales útiles en esta modalidad de la invención contendrán componentes antioxidantes en una concentración que varía de 0.001 % a 1 % p/v, o de 0.01 % a 0.5% p/v, del concentrado cosolvente, aunque se pueden requerir concentraciones menores o mayores. De los antioxidantes, el d,l-a-tocoferol es particularmente conveniente y se usa a una concentración de 0.01 a 0.1 % p/v con una concentración preferida de 0.075% p/v del concentrado cosolvente. Ventajosamente, en ciertas modalidades de las formulaciones parenterales útiles en la invención, se evita la precipitación de polimorfo forma II de rapamicina tras la dilución con soluciones acuosas de infusión o sangre, mediante el uso de un agente tensioactivo contenido en la solución diluyente. Un agente tensioactivo particularmente conveniente es polisorbato 20 o polisorbato 80, como se indica posteriormente. Sin embargo, un experto en la técnica seleccionará fácilmente otros agentes tensioactivos adecuados. Antes de su uso, se mezcla el concentrado cosolvente con un diluyente que comprende un solvente diluyente y un agente tensioactivo. Cuando se prepara el polimorfo forma II de rapamicina como concentrado cosolvente de acuerdo con esta invención, el concentrado puede contener concentraciones del polimorfo forma II de rapamicina de 0.05 mg/ml, de 2.5 mg/ml, de 5 mg/ml, de 10 mg/ml, o de 25 mg/ml, hasta aproximadamente 50 mg/ml. Se puede mezclar el concentrado con el diluyente hasta aproximadamente una parte de concentrado a una parte de diluyente, para dar formulaciones parenterales que tengan concentraciones de polimorfo forma II de rapamicina de 1 mg/ml, de 5 mg/ml, de 10 mg/ml, de 20 mg/ml, hasta aproximadamente 25 mg/ml. Por ejemplo la concentración del polimorfo forma II de rapamicina en la formulación parenteral puede ser de aproximadamente 2.5 a 10 mg/ml. Esta invención cubre también el uso de formulaciones que tienen menores concentraciones del polimorfo forma II de rapamicina en el concentrado cosolvente y formulaciones de las cuales se mezcla una parte del concentrado con más de una parte del diluyente, por ejemplo concentrado:diluyente en una relación de aproximadamente 1 :1.5, 1 :2, 1 :3, 1 :4, 1 :5 ó 1 :9 v/v, etc., a formulaciones parenterales de polimorfo forma II de rapamicina que tiene una concentración del polimorfo forma II de rapamicina hasta los niveles mínimos de detección. Para los propósitos de esta exposición, se entiende que las administraciones transdérmicas incluyen todas las administraciones a través de la superficie del cuerpo y los revestimientos internos de los conductos corporales, ¡ncluyendo tejidos epiteliales y mucosos. Se pueden llevar a cabo tales administraciones usando el polimorfo forma II de rapamicina, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en lociones, cremas, espumas, parches, suspensiones, soluciones y supositorios (rectal y vaginal). Se puede efectuar la administración trasdérmica mediante el uso de un parche trasdérmico que contenga el polimorfo forma il de rapamicina y un portador que sea inerte al polimorfo forma II de rapamicina, sea no tóxico a la piel y permita el suministro del agente para la absorción sistémica al torrente sanguíneo a través de la piel. El portador puede adoptar cualquier número de formas tales como cremas y ungüentos, pastas, geles y dispositivos oclusivos. Las cremas y los ungüentos pueden ser líquidos viscosos o emulsiones semisólidas ya del tipo de aceite en agua ya de agua en aceite. Pueden ser adecuadas también las pastas constituidas de polvos adsorbentes dispersados en petróleo o petróleo hidrófilo que contengan polimorfo forma II de rapamicina. Se puede usar una variedad de dispositivos oclusivos para liberar el polimorfo forma II de rapamicina al torrente sanguíneo, tal como una membrana semipermeable que cubra un depósito que contenga el polimorfo forma II de rapamicina con o sin portador, o una matriz que contenga el polimorfo forma II de rapamicina. Se conocen otros dispositivos oclusivos en la literatura. En una modalidad adicional, las composiciones que contienen el polimorfo forma II de rapamicina se pueden suministrar rectalmente en forma de supositorio convencional. Se pueden hacer las formulaciones de supositorios de materiales tradicionales, incluyendo manteca de cacao, con o sin la adición de ceras para alterar el punto de fusión del supositorio, y glicerina. Se pueden usar también bases de supositorio solubles en agua, tales como polietilenglicoles de varios pesos moleculares. En otra modalidad, las composiciones que contienen el polimorfo forma II de rapamicina se pueden suministrar vaginalmente en forma de supositorio, crema, gel, anillo, o dispositivo intrauterino revestido (IUD) convencionales. En otra modalidad todavía, las composiciones que contienen el polimorfo II de rapamicina, se pueden administrar por vía intranasal o intrabronquial en forma de aerosol. Se contempla también que las composiciones de esta invención que contengan el polimorfo forma II de rapamicina se puedan administrar conjuntamente con uno o más agentes diferentes que incluyan agentes quimioterapéuticos de antirrechazo. Los requisitos de dosificación del polimorfo forma II de rapamicina pueden variar dependiendo de la severidad de los síntomas presentados, el sujeto particular que se esté tratando y la vía de administración. Un experto en la técnica podría determinar fácilmente la cantidad de polimorfo forma II de rapamicina que se requiera. En una modalidad, se administra de aproximadamente 2 a aproximadamente 100 mg/día de polimorfo forma II de rapamicina. En otras modalidades se administra polimorfo forma II de rapamicina a razón de 5 mg/día a 75 mg/día, de 10 mg/día a 50 mg/día, de 15 mg/día a 35 mg/día o de aproximadamente 20 mg/día a 25 mg/día. Se puede iniciar el tratamiento con dosificaciones de polimorfo forma II de rapamicina menores a las requeridas para introducir un efecto deseado y generalmente menor a la dosis óptima de polimorfo forma II de rapamicina. Después de ello, se puede aumentar la dosificación hasta que se alcance el efecto óptimo según las circunstancias. Las dosificaciones precisas serán determinadas por el médico administrador sobre la base de la experiencia con el sujeto individual que se esté tratando. En general, las composiciones de esta invención se administran muy convenientemente a una concentración que proveerá generalmente resultados efectivos sin causar efectos secundarios dañinos o perjudiciales.

VI Métodos de preparar composiciones administrables que contiene polimorfo forma II de rapamicina En un aspecto, la presente invención incluye métodos de preparar una composición farmacéutica que contiene polimorfo forma II de rapamicina. Se puede administrar la composición a un sujeto mamífero por varias rutas diferentes, como se indica anteriormente, y se administra convenientemente por vía oral en forma sólida y líquida. Las formulaciones orales que contienen polimorfo forma II de rapamicina pueden contener formas orales usadas convencionalmente, incluyendo tabletas, cápsulas, formas bucales, rótulas, pastillas y líquidos orales, suspensiones o soluciones. Se pueden formar tales formulaciones orales que contienen polimorfo forma II de rapamicina, combinando polimorfo forma II de rapamicina con uno o más de los componentes descritos anteriormente. En una modalidad, los componentes de la composición se mezclan en seco o en húmedo. En otra modalidad, los componentes se pueden granular en seco. En una modalidad adicional, los componentes se suspenden o se disuelven en un líquido y se añaden a una forma adecuada para su administración a un sujeto mamífero. Las formulaciones orales pueden incluir también formulaciones estándar de liberación retrasada o temporalizada para alterar la absorción del polimorfo forma II de rapamicina. La formulación oral puede consistir también en administrar polimorfo forma II de rapamicina en agua o jugo de fruta, que contengan solubilizadores o emulsionadores apropiados, según se necesite.

Las cápsulas pueden contener mezclas de polimorfo forma II de rapamicina con llenadores y/o diluyentes, tales como almidones farmacéuticamente aceptables (por ejemplo almidón de maíz, papa o tapioca), azúcares, agentes edulcorantes artificiales, celulosas en polvo tales como celulosas cristalinas y macrocristalinas, gelatinas, gomas, etc., descritos anteriormente. Se pueden hacer las formulaciones de tableta útiles mediante métodos convencionales de compresión, granulación en húmedo o granulación en seco y utilizar diluyentes farmacéuticamente aceptables, agentes aglutinantes, lubricantes desintegrantes, agentes modificadores de superficie (incluyendo agentes tensioactivos). Se prefriere realizar la granulación en húmedo con un sistema solvente hidroalcohólico que comprenda agua y un alcohol, siendo el etanol el componente alcohol preferido. Se pueden formar formas líquidas que contengan polimorfo forma II de rapamicina, disolviendo o suspendiendo polimorfo forma II de rapamicina en un líquido adecuado para su administración a un sujeto mamífero. En una modalidad, los métodos de preparar una composición farmacéuticamente que contiene polimorfo forma II de rapamicina incluye combinar polimorfo forma II de rapamicina, un quelatador de metal, un ajustador de pH, un agente tensioactivo, un llenador, un aglutinante, un desintegrante y un lubricante.

En otra modalidad, los métodos de preparar una composición farmacéutica que contiene polimorfo forma II de rapamicina incluyen combinar polimorfo forma II de rapamicina, un quelatador de metal, un ajustador de pH, un agente tensioactivo, por lo menos un llenador, un aglutinante, un desintegrante y un lubricante. La presente invención provee también equipos o paquetes de composiciones farmacéuticas diseñadas para su uso en la presente invención. Los equipos de la presente invención pueden incluir polimorfo forma II de rapamicina y un portador adecuado para su administración a un sujeto mamífero, como se discute anteriormente. La invención incluye por lo tanto un producto que contiene (a) polimorfo forma II de rapamicina para su uso en el tratamiento de un mamífero. La invención incluye también un paquete farmacéutico que contiene un curso de tratamiento de un neoplasma para un mamífero individual, en donde el paquete contiene (a) polimorfo forma II de rapamicina en forma de dosificación unitaria. Así, se puede formular el polimorfo forma II de rapamicina de la invención, como una composición farmacéutica y, opcionalmente, se juntan en forma de equipo para su uso en el tratamiento de un mamífero.

Vil. Métodos de usar polimorfo forma II de rapamicina Se puede utilizar polimorfo forma II de rapamicina en el tratamiento o la prevención en una variedad de afecciones conocidas por los expertos en la técnica que se sabe que la rapamicina trata o previene. El polimorfo forma II de rapamicina puede poseer por tanto actividades inmunosupresoras, de antirrechazo, antifúngicas, antiinflamatorias, antitumorales y antiproliferativas. Específicamente, se puede usar el polimorfo forma II de rapamicina solo o en composición o equipo, preparada como se indica anteriormente, como agente antineoplástico y, en particular, en el tratamiento de tumores sólidos, incluyendo sarcomas y carcinomas; y más particularmente contra astrocitomas, cáncer de próstata, cáncer de pecho, cáncer de colon, cáncer pulmonar de células pequeñas y cáncer ovárico; leucemia/linfoma de células T en adultos. Las composiciones que contienen polimorfo forma II de rapamicina y los equipos son también útiles en el tratamiento o la inhibición del rechazo de transplantes, tales como aloinjertos de riñon, corazón, hígado, pulmón, medula ósea, páncreas (células de los islotes), córnea, intestino delgado y piel, y xenoinjertos de válvulas de corazón; en el tratamiento o la inhibición de enfermedad o injerto contra hospedero; en el tratamiento o la inhibición de enfermedades autoinmunes tales como lupus, incluyendo lupus sistémico eritematoso, artritis reumatoide, diabetes mellitus, miastenia grave y esclerosis múltiple; enfermedades de inflamación tales como soriasis, dermatitis, eczema, seborrea, trastornos intestinales incluyendo enfermedad de intestino inflamatorio, inflamación pulmonar (incluyendo asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfisema, síndrome de molestia respiratoria aguda, bronquitis y similares), enfermedad inflamatoria cardiaca e inflamación ocular tal como uveítis ocular; anemia; leucemia/linfoma de células T en adultos; infecciones fúngicas; carcinomas malignos; enfermedades vasculares y proliferativas tales como restenosis; arterosclerosis vascular de injerto; y enfermedad cardiovascular, enfermedad vascular cerebral y enfermedad vascular periférica, tal como enfermedad de arteria coronaria, enfermedad cerebrovascular, arteriosclerosis, aterosclerosis, arteriosclerosis no ateromatosa, daño a la pared vascular a causa de eventos celulares que dan lugar a daño vascular inmunemente mediado, proliferación de células de músculo liso y engrosamiento de la túnica íntima como resultado de daño vascular, e inhibición de la demencia por accidente cerebrovascular o por múltiples infartos. Se pueden determinar fácilmente los regímenes apropiados de dosificación, basándose en la información provista en la presente. Se proveen los siguientes ejemplos para ilustrar la invención y no limitar el alcance de la misma. Un experto en la técnica apreciará que, aunque se definen reactivos y condiciones específicos en los siguientes ejemplos, se pueden hacer modificaciones que estén designadas a estar abarcadas por el espíritu y alcance de la invención.

EJEMPLOS EJEMPLO 1 Preparación de polimorfo forma II de rapamicina Se disolvió rapamicina (3 g) en 20 ml de acetona. Se removió luego el solvente a presiones reducidas mediante el uso de evaporador giratorio a una temperatura de aproximadamente 40°C a aproximadamente 50°C hasta obtener una espuma. La rapamicina en espuma seca se disolvió en éter t-butilmetílico (10 ml) a aproximadamente 45°C y se mantuvo luego a temperatura ambiente durante una noche. Se recogieron por filtración los cristales blancos precipitados y se secaron al aire libre o bajo una atmósfera de gas nitrógeno durante aproximadamente 0.5 a aproximadamente 3 horas. Se obtuvo un total de 2.5 g de polimorfo forma II de rapamicina.

EJEMPLO 2 Estudio de difracción de rayos X del polimorfo forma II de rapamicina Se realizó el análisis XRD en polvo del polimorfo forma II de rapamicina en un instrumento de sistema avanzado de difracción Scintag™X- 2 (de Scintag Inc., E.U.A.). Se utilizó un tubo de rayos x, de cobre, de enfoque normal, a 1.8 kW, explorando 1 grado/minuto de 3.00 a 40.00 grados. Los datos fueron registrados por una computadora con el programa Diffraction Management Software™ NT (DMSNT). El error fue menor a 0.1°. Se molieron las muestras hasta lograr un polvo fino y se empacaron en un portamuestras del tipo de cavidad con una placa de fondo cero. Se registraron y compararon las posiciones pico caracterizadas por el patrón de difracción de rayos X en polvo de la posición angular (2T). La XRD en polvo del polimorfo forma II de rapamicina contenía picos a 2T a 7.0°, 9.7°, 10.1 °, 11.0°, 12.4°, 13.1 °, 14.1 °, 14.6°, 15.0°, 15.2°, 15.8°, 16.3°, 16.6°, 17.6°, 18.1°, 18.3°, 19.7°, 20.2° y 21.2°. Véase la figura 1.

EJEMPLO 3 Estudio de termograma de exploración diferencial del polimorfo forma II de rapamicina Se usó el calorímetro de exploración diferencial (DSC), modelo Pyris™1 (Perkin Elmer) con equipo lógico empresarial Pyris™, para analizar el polimorfo forma II de rapamicina. Se añadió aproximadamente 4-5 mg de polimorfo forma II de rapamicina a recipientes de aluminio y se sellaron así. Se calentó la muestra de 25°C a 220°C a regímenes variantes (5°C/min., 10°C/min y 30°C/min). Se purgó el gas nitrógeno a 50 ml/min. Se obtuvo el termograma de calorimetría de exploración diferencial que tenía un pico endotérmico de aproximadamente 188°. Véase la figura 2.

Todas las publicaciones citadas en esta memoria descriptiva se incorporan por este medio por referencia en la presente. Aunque se ha descrito la invención con respecto a una modalidad particularmente preferida, se apreciará que se pueden hacer modificaciones sin desviarse del espíritu de la invención. Se pretende que tales modificaciones estén comprendidas dentro del alcance de las reivindicaciones anexadas.

Claims (37)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- Un polimorfo forma II de rapamicina, caracterizado porque tiene: (a) un termograma de calorimetría de exploración diferencial que carece de un pico endotérmico de aproximadamente 194°; y (b) un patrón de pico de difracción de rayos X que carece de picos a 2T a 7.2°, 9.9°, 10.2°, 11.1 °, 12.5°, 14.5°, 15.3°, 15.5°, 16.2°, 20.0°, 20.4° y 21.8.

2.- Un polimorfo forma II de rapamicina, caracterizado porque tiene las siguientes características: (a) un patrón de pico de difracción de rayos X que comprende picos a 20 de aproximadamente 7°, 9.7°, 10.1 °, 11.0°, 12.4°, 13.1 °, 14.1°, 14.6°, 15.0°, 15.2°, 15.8°, 16.3°, 16.6°, 17.6°, 18.1 °, 18.3°, 19.7°, 20.2° y 21.2°; y (b) un termograma de calorimetría de exploración diferencial que tiene un pico endotérmico de aproximadamente 188°.

3.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado además porque dicho termograma carece de un pico endotérmico de aproximadamente 194°.

4.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado además porque contiene moléculas de solvato de éter t-butilmetílico.

5.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque dichas moléculas de solvato comprenden aproximadamente 4% de dicha forma II, determinado por análisis termogravimétrico TGA.

6.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque la relación molecular de dicha rapamicina a dicho solvato es de aproximadamente 2:1.

7.- Un polimorfo forma II de rapamicina, caracterizado porque se obtiene recristalizando rapamicina procedente de éter t-butilmetílico.

8.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque se disuelve rapamicina amorfa en dicho éter t-butilmetílico a una temperatura elevada.

9.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada además porque dicha temperatura elevada es de aproximadamente 45°C.

10.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 8 o la reivindicación 9, caracterizado además porque comprende adicionalmente enfriar dicha solución de éter t-butilmetílico a aproximadamente 23 y hasta aproximadamente 25°C.

11.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque dicho polimorfo forma II de rapamicina se precipita de dicha solución enfriada de éter t-butilmetílico.

12.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 7 a 11 , caracterizado además porque se seca a una temperatura menor a aproximadamente 23°C.

13.- Un polimorfo forma II de rapamicina, caracterizado porque se obtiene precipitando dicho polimorfo forma II de rapamicina de una solución que comprende rapamicina amorfa y éter t-butilmetílico.

14.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque se disuelve dicha rapamicina en dicho éter t-butilmetílico a una temperatura elevada.

15.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado además porque dicha temperatura elevada es de aproximadamente 45°C.

16.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con la reivindicación 14 o la reivindicación 15, caracterizado además porque comprende adicionalmente enfriar dicha solución de éter t-butilmetílíco a 23 y hasta aproximadamente 25°C.

17.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, caracterizado además porque se seca a una temperatura menor aproximadamente 23°C.

18.- El polimorfo forma II de rapamicina de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 13 a 17, caracterizado además porque se realiza dicha precipitación a una temperatura de aproximadamente 45°C o inferior.

19.- Un procedimiento para preparar polimorfo forma II de rapamicina, caracterizado porque comprende precipitar polimorfos forma II de rapamicina procedente de una solución que comprende éter t-butilmetílico y rapamicina amorfa.

20.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque se prepara la rapamicina amorfa disolviendo rapamicina en acetona y someter a evaporación giratoria hasta formar una espuma.

21.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 19 ó la reivindicación 20, caracterizado además porque se mantiene la solución de éter t-butilmetílico a una temperatura de aproximadamente 40 a aproximadamente 50°C.

22.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizado además porque se mantiene la solución de éter t-butilmetílico a una temperatura de aproximadamente 45°C.

23.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 22, caracterizado además porque se realiza dicha precipitación enfriando dicha solución de éter t-butilmetílico.

24.- El procedimiento de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19 a 23, caracterizado además porque comprende adicionalmente secar el polimorfo forma II de rapamicina que se ha precipitado.

25.- Un procedimiento para preparar polimorfo forma II de rapamicina, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) disolver rapamicina en un solvente inicial; (b) promover dicho solvente inicial en el paso (a); (c) disolver el producto del paso (b) en éter t-butilmetílico; y (d) recoger dicho polimorfo forma II de rapamicina.

26.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado además porque dicho solvente inicial es acetona.

27.- Un procedimiento para preparar polimorfo forma I de rapamicina, caracterizado porque comprende desolvatar poliformo forma II de rapamicina.

28.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado además porque se realiza dicha desolvatación usando un vacío.

29.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado además porque se realiza dicha desolvatación a temperatura elevada.

30.- Un procedimiento para preparar polimorfo forma I de rapamicina, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) disolver rapamicina en un solvente inicial; (b) remover dicho solvente inicial en el paso (a); (c) disolver el producto del paso (b) en éter t-butilmetílico; y (d) recoger dicho polimorfo forma II de rapamicina que se ha precipitado; y (e) desolvatar dicho polimorfo formador II de rapamicina.

31.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado además porque se realiza dicha desolvatación usando un vacío.

32.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 31 , caracterizado además porque se revisa dicha desolvatación a temperatura elevada.

33.- Un poliformo forma II de rapamicina, caracterizado porque tiene un patrón de difracción de rayos X de la figura 1.

34.- Un polimorfo forma II de rapamicina, caracterizado porque tiene un termograma de calorimetría de exploración diferencial de la figura 2.

35.- Una composición farmacéutica, caracterizado porque comprende poliformo forma II de rapamicina y un portador farmacéuticamente aceptable.

36.- Un equipo caracterizado porque comprende (i) poliformo en forma II de rapamicina; y (ii) un portador adecuado para su administración a un sujeto mamífero.

37.- Un método de preparar una composición farmacéutica que comprende un poliformo forma II de rapamicina, caracterizado porque comprende combinar uno o más de: (i) polimorfo forma II de rapamicina; (ii) un quelatador de metal; (iii) un ajustador de pH; (iv) un agente tensioactivo; (v) por lo menos un llenador; (vi) un aglutinante; (vii) un desintegrante; y (viii) un lubricante.