MX2007010892A

MX2007010892A - Isomero de oxepano de 42-o-(2-hidroxi)etil-rapamicina.

Info

Publication number: MX2007010892A
Application number: MX2007010892A
Authority: MX
Inventors: Tianmin Zhu
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2005-03-07
Filing date: 2006-02-22
Publication date: 2007-12-05
Also published as: BRPI0608885A2; EP1856131A1; WO2006096325A1; JP2008533007A; CN101137659A; AU2006221024A1; US7241771B2; US20060199834A1; CA2602010A1

Abstract

La invencion provee un isomero de oxepano de 42-O-(2-hidroxi)etil- rapamicina, isomero C de SDZ-RAD, purificado; un procedimiento quimico para su preparacion; composiciones farmaceuticas y envases que contienen el isomero C de SDZ-RAD; y metodos de uso del mismo como agente inmunosupresor, antiinflamatorio, antimicotico, antiproliferativo y antitumoral.

Description

ISÓMERO DE OXEPANO DE 42-O-(2-HIDROXI)ETIL-RAPAMICINA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a un isómero de oxepano de 42-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina novedoso, un procedimiento para su preparación, y su uso en el tratamiento, prevención o inhibición del rechazo de transplante, enfermedad de injerto contra hospedero, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, leucemia /linfoma de células T del adulto, tumores sólidos, infecciones micóticas y trastornos vasculares hiperproliferativos, entre otros. La estructura y síntesis de la 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina, conocida también como SDZ-RAD o RAD-666, se describe en la patente de EE. UU. No. 5,666,772 (Cottens y otros), y en la publicación de patente internacional No. WO 94/09010. Cuando se prepara de acuerdo con la patente de EE. UU. No. 5,665,772, la SDZ-RAD existe como una mezcla que contiene aproximadamente 95% en peso de isómero B y 30% en peso del isómero C (el isómero oxepano). La 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina ahora se conoce como 42-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina, debido a un cambio en la convención de la numeración. La SDZ-RAD es un análogo de la rapamicina, que es un antibiótico de trieno macrocíclico producido naturalmente por Streptomyces hygroscopicus.

Se ha encontrado que la rapamicina es útil en un grupo de aplicaciones debido a sus efectos antitumorales e inmunosupresores. Los usos incluyen la prevención o tratamiento de lupus eritematoso sistémico, inflamación pulmonar, diabetes mellitus dependiente de insulina, proliferación de células del músculo liso y engrosamiento íntimo posterior a la cirugía vascular, leucemia /linfoma de células T del adulto, e inflamación ocular. La rapamicina y los derivados de rapamicina, que incluyen SDZ-RAD, continúan estudiándose para el tratamiento de estas y otras condiciones.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención provee un isómero de oxepano de 42-O-(2-hidroxí)etil-rapamicina (SDZ-RAD) purificado, conocido como el isómero C de SDZ-RAD. En otro aspecto, la invención provee un proceso químico para preparar el isómero C de SDZ-RAD purificado, a partir de SDZ-RAD. En otro aspecto, la invención provee composiciones farmacéuticas que contienen el isómero C de SDZ-RAD purificado, para usar en el tratamiento, inhibición y prevención del rechazo de transplante, enfermedad de injerto contra hospedero, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, leucemia /linfoma de células T del adulto, tumores sólidos, infecciones micóticas y trastornos vasculares hiperproliferativos, entre otras enfermedades y trastornos, en un mamífero en necesidad del mismo. En otro aspecto, la invención provee el uso del isómero C de SDZ-RAD purificado en la preparación de un medicamento útil para el tratamiento, inhibición y prevención del rechazo de transplante, enfermedad de injerto contra hospedero, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, leucemia /linfoma de células T del adulto, tumores sólidos, infecciones micóticas y trastornos vasculares hiperproliferativos, entre otras enfermedades y trastornos, en un mamífero en necesidad del mismo. En otro aspecto, la invención provee un equipo o envase farmacéutico que contiene un curso de tratamiento para el rechazo de transplante, enfermedad de injerto contra hospedero, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, leucemia /linfoma de células T del adulto, tumores sólidos, infecciones micóticas y trastornos vasculares hiperproliferativos, entre otras enfermedades y trastornos, para un mamífero individual, que comprende un contenedor que tiene el isómero C de SDZ-RAD purificado en forma de dosis unitaria.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La invención provee un isómero de oxepano de 42-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina ("SDZ-RAD") purificado, que tiene la siguiente estructura: que también puede ser descrito por la fórmula: 1 J-dihidroxi-11-{2-[4-(2-hidroxi-etoxi)-3-metoxi-ciclohexil]-1-metil-etil}-18,29-dimetoxi-14,16,20,22,28,34-hexametil-10,36-dioxa-3-aza-tr¡ciclo[29.4.1.0~3,8]hexatriaconta-15,23,25-27-tetraen-2,9,13I19,35-pentaona. Como se usa aquí, el término "isómero C de SDZ-RAD" significa un compuesto que tiene la fórmula precedente. Como se usa aquí, el término "isómero C de SDZ-RAD purificado" significa un compuesto que tiene la fórmula precedente (es decir, del isómero C de SDZ-RAD), que tiene una pureza mayor de 90% en peso, o mayor de 95% en peso, 98% en peso o 99% en peso. La invención también provee un proceso químico para preparar el isómero C de SDZ-RAD purificado a partir de SDZ-RAD. El isómero C de SDZ-RAD existe en equilibrio con el isómero B de SDZ-RAD. Bajo las condiciones aquí descritas, el equilibrio puede ser desviado del estado de isómero B ampliamente favorecido al estado del isómero C, como se resume mas adelante en el esquema I. La preparación de SDZ-RAD (42-O-(2- hidroxi)etil-rapamicina) se describe en la patente de EE. UU. No. 5,665,772 (Cottens y otros; bajo su nombre anterior de 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina). La conversión del isómero B de SDZ-RAD al isómero C de SDZ-RAD por medio de un intermediario se puede realizar en una mezcla de un amortiguador acuoso y un disolvente orgánico, a un pH en la escala de 4 a 10, aproximadamente. En otra modalidad, el amortiguador acuoso tiene un pH aproximadamente de 4 a 10, 5 a 9, 6 a 9, 7 a 9, o 7.5 a 8.5. En una modalidad adicional, el amortiguador acuoso tiene un pH de aproximadamente 8.5.

ESQUEMA I Conversión de SDZ-RAD al isómero C de SDZ-RAD por medio de un intermediario En una modalidad, el amortiguador acuoso es acetato de trietilamonio (TEAA). En otras modalidades el experto en la materia puede seleccionar fácilmente cualquier amortiguador acuso adecuado que incluye, sin limitación, solución salina amortiguadora de fosfatos y agua con amortiguador de citrato de sodio. En una modalidad, el disolvente orgánico es un disolvente polar aprótico, es decir, un disolvente que tiene un dipolo molecular pero cuyos átomos de hidrógeno no están unidos al oxígeno ni al nitrógeno; o un disolvente dipolar aprótico, es decir, un disolvente que tiene un dipolo molecular cero y cuyos átomos de hidrógeno no están unidos al oxígeno ni al nitrógeno, pero que tiene cargas en átomos individuales. En una modalidad, el disolvente orgánico es acetonitrilo (H-CO-N(CH3)2) o 1 ,4-dioxano (referido comúnmente como dioxano). En otra modalidad, el disolvente orgánico es 1 ,4-dioxano. En otras modalidades, el disolvente orgánico es acetonitrilo, sulfóxido de dimetilo (DMSO; CH3-SO-CH3), dimetilformamida (HCON(CH3)2), un aldehido o una cetona. En otras modalidades se contemplan combinaciones de los disolventes anteriores. En una modalidad, el amortiguador acuoso y el disolvente orgánico se proveen en una proporción de aproximadamente 1 :1.5 a aproximadamente 1 :1 en volumen. Sin embargo, serán evidentes para el experto en la materia otras proporciones adecuadas de amortiguador:disolvente. Similarmente, a la luz de la especificación serán evidentes para los expertos en la materia otros amortiguadores acuosos y otros disolventes orgánicos adecuados útiles en los procesos de la invención. La reacción de conversión del isómero B de SDZ-RAD al isómero C de SDZ-RAD se puede hacer a temperatura ambiente, es decir, de aproximadamente 22°C a aproximadamente 28°C. Alternativamente, la conversión se puede realizar a temperaturas mas altas o mas bajas según se requiera. Normalmente la conversión se deja proceder durante aproximadamente 4 horas (o más, según se requiera o se desee), y se detiene mediante la extracción del isómero C de SDZ-RAD con un disolvente orgánico adecuado. En una modalidad, el disolvente orgánico usado en la extracción es un disolvente polar aprótico. En una modalidad, el disolvente orgánico usado para la extracción es cloruro de metileno (CH2CI2). Otros disolventes adecuados, o combinaciones de los mismos, serán evidentes para el experto en la materia a la luz de la especificación. En aislamiento del isómero C de SDZ-RAD se puede hacer usando técnicas de cromatografía preparativa como las que son conocidas para los expertos en la materia; véase en general "Preparative Chromatography", de R. P. W. Scott, Chrom-Ed Book Series, disponible en línea, y "Fundamentáis of Preparative and Nonlinear Chromatography", de Guiochon, G. Y otros, 1 st Academic Press (1994). El isómero C de SDZ-RAD es útil como un agente inmunosupresor y antiinflamatorio en el tratamiento, prevención o inhibición, o en la preparación de medicamentos útiles en el tratamiento, prevención o inhibición, de: rechazo de transplantes, tales como riñon, corazón, hígado, pulmón, médula ósea, páncreas (células de ¡sleta), córnea, intestino delgado, aloinjertos de piel y xenoinjertos de la válvula cardiaca; enfermedad de injerto contra hospedero; enfermedades autoinmunes como lupus, artritis reumatoide, diabetes mellitus, miastenia grave y esclerosis múltiple; enfermedades inflamatorias como soriasis, dermatitis, eczema, seborrea, enfermedad inflamatoria del intestino, inflamación pulmonar (que incluye asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfisema, síndrome de dificultad respiratoria aguda, bronquitis, y similares), y uveítis del ojo. El isómero C de SDZ-RAD también tiene actividades antitumorales, antimicóticas y antiproliferativas. Por consiguiente, el isómero C de SDZ-RAD es útil en el tratamiento, prevención o inhibición, o en la preparación de medicamentes útiles en el tratamiento, prevención o inhibición, de: tumores sólidos que incluyen fibroides (leiomioma uterino), sarcomas y carcinomas, tales como astrocitoma, cáncer de próstata, cáncer mamario, cáncer de colon, cáncer de pulmón de célula pequeña y cáncer ovárico; anemia; leucemia /linfoma de células T del adulto, linfoma de célula del manto; infecciones micóticas; y enfermedades vasculares hiperproliferativas, tales como restenosis, aterosclerosis vascular de injerto, enfermedad cardiovascular, enfermedad vascular cerebral y enfermedad vascular periférica, tal como la enfermedad de la arteria coronaria, enfermedad cerebrovascular, arteriosclerosis, aterosclerosis, arteriosclerosis no ateromatosa, lesión de la pared vascular por eventos celulares que conducen a lesión vascular mediada por inmunidad, proliferación de células del músculo liso y engrosamiento íntimo posterior a lesión vascular, y ataque cerebral o demencia de multiinfarto. En una modalidad, el isómero C de SDZ-RAD se usa para tratar, prevenir o inhibir la restenosis posterior a un procedimiento de angioplastia. Cuando se usa para este fin, el isómero C de SDZ-RAD se puede administrar antes, durante o después del procedimiento, o cualquier combinación de los anteriores. Cuando se administra para el tratamiento, o inhibición, o prevención de cualquiera de las enfermedades o condiciones anteriores, el isómero C de SDZ-RAD se puede administrar a un mamífero por vía oral, parenteral, intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, intranasal, intrabronquial, transdérmica, tópica, intavaginal o rectal. Los requerimientos de dosificación varían de acuerdo con la vía de administración. En una modalidad, la dosis diaria del isómero C de SDZ-RAD es de aproximadamente 0.1 µg/kg - 100 µg/kg, 0.001 mg/kg - 25 mg/kg, o aproximadamente de 0.01 mg/kg - 5 mg/kg. En otras modalidades, la dosis variará dependiendo de la vía de administración, la severidad de los síntomas del sujeto tratado (es decir, la historia del paciente). El tratamiento generalmente se iniciará con dosis pequeñas, es decir, dosis menores que la dosis óptima. Después, la dosis se aumenta hasta alcanzar el efecto óptimo bajo las circunstancias. Las dosis precisas pueden ser determinadas por el médico en base a su experiencia general y a su experiencia con el sujeto individual o paciente por tratar. La invención también provee composiciones farmacéuticas del isómero C de SDZ-RAD de acuerdo con la invención, y uno o más vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables. Los vehículos o excipientes farmacéuticos pueden ser sólidos o líquidos. Un vehículo sólido puede incluir una o más sustancias que también pueden actuar como agentes saborizantes, lubricantes, solubilizantes, agentes de suspensión, agentes qelatantes, agentes tensioactivos, rellenos, deslizantes, auxiliares de compresión, aglutinantes, agentes desintegradores de tableta, o material de encapsulación. Para hacer los polvos, el vehículo que es un sólido finamente dividido se mezcla con el ingrediente activo finamente dividido, es decir, el isómero C de SDZ-RAD. Para hacer tabletas, el isómero C de SDZ-RAD se mezcla con un vehículo que tiene las propiedades de compresión necesarias, en las proporciones adecuadas, y se comprime a la forma y tamaño deseados. En una modalidad, los polvos y las tabletas contienen aproximadamente 99% o más del ingrediente activo. Los vehículos sólidos adecuados incluyen, por ejemplo, fosfato de calcio, estearato de magnesio, talco, azúcares, lactosa, dextrina, almidón, gelatina, celulosa, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, polivinilpirrolidona, ceras de bajo punto de fusión y resinas de ¡ntercambio iónico. Para preparar soluciones, suspensiones, emulsiones, jarabes, elíxires y composiciones presurizadas, se utilizan vehículos líquidos. El ingrediente activo se puede disolver o suspender en un vehículo líquido farmacéuticamente aceptable, tal como agua, un disolvente orgánico, o una mezcla de ambos, o en aceites o grasas farmacéuticamente aceptables. El vehículo líquido puede contener otros aditivos farmacéuticos adecuados, tales como solubilizantes, emulsionantes, amortiguadores, conservadores, edulcorantes, agentes saborizantes, agentes de suspensión, agentes quelatantes, agentes tensioactivos (por ejemplo polisorbato 20 o polisorbato 80), agentes espesantes, colorantes, reguladores de la viscosidad, antioxidantes, estabilizadores o reguladores osmóticos. Los vehículos líquidos adecuados para administración oral y parenteral incluyen agua (que contiene aditivos como los anteriores, por ejemplo derivados de celulosa, tal como una solución de carboximetilcelulosa de sodio), alcoholes y sus derivados (que incluyen alcoholes monohídricos y alcoholes polihídricos, por ejemplo glicoles), lecitinas y aceites (por ejemplo aceite de coco fraccionado y aceite de cacahuate). Para administración parenteral, el vehículo también puede ser un éster oleoso, tal como oleato de etilo y miristato de isopropilo. Los vehículos líquidos estériles son útiles en composiciones líquidas estériles para administración parenteral. El vehículo líquido para composiciones presurizadas puede ser un hidrocarburo halogenado u otro propulsor farmacéuticamente aceptable. Las formulaciones orales del isómero C de SDZ-RAD pueden incluir cualquier forma oral usada convencionalmente, que incluye tabletas, cápsulas, formas bucales, trociscos, pastillas y líquidos, suspensiones o soluciones orales. Las cápsulas pueden contener mezclas del isómero C de SDZ-RAD con rellenos y/o diluentes inertes, tales como los almidones farmacéuticamente aceptables (por ejemplo almidón de maíz, papa o tapioca), azúcares, agentes edulcorantes artificiales, celulosas en polvo como celulosa cristalina y microcristalina, harinas, gelatinas, gomas, etc. Las formulaciones de tableta útiles se pueden hacer mediante compresión convencional, granulación en húmedo o métodos de granulación en seco, y utilizan diluentes, agentes aglutinantes, lubricantes, desintegrantes, agentes modificadores de superficie (que incluyen agentes tensioactivos), agentes de suspensión o estabilizadores farmacéuticamente aceptables, que incluyen, sin limitación, estearato de magnesio, ácido esteárico, talco, lauriisulfato de sodio, celulosa microcristalina, carboximetilcelulosa de calcio, polivinilpirrolidona, gelatina, ácido algínico, goma acacia, goma de xantano, citrato de sodio, silicatos complejos, carbonato de calcio, glicina, dextrina, sacarosa, sorbitol, fosfato dicálcico, sulfato de calcio, lactosa, caolín, manitol, cloruro de sodio, almidones secos y azúcar pulverizada. Los agentes modificadores de superficie útiles en las formulaciones de tableta incluyen agentes modificadores de superficie no iónicos y aniónicos. Los ejemplos representativos de los agentes modificadores de superficie incluyen, sin limitación, poloxamer 188, cloruro de benzalconio, estearato de calcio, alcohol cetoestearílico, cera emulsionante, cetomacrogol, esteres de sorbítán, dióxido de silicio coloidal, fosfatos, dodeciisulfato de sodio, silicato de aluminio y magnesio y trietanolamina. Las formulaciones orales de la presente pueden ser formulaciones estándares o de liberación retardada para alterar la absorción del isómero C de SDZ-RAD. La formulación oral también puede incluir la administración del ingrediente activo en agua o jugo de fruta que contiene los solubilízantes o emulsionantes apropiados según se requiera. Las formas farmacéuticas del isómero C de SDZ-RAD adecuadas para uso inyectable, incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. En todos los casos, la forma debe ser estéril y debe ser fluida al grado que exista una fácil jeringabilidad. Debe ser estable bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento, y debe estar preservada contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El vehículo puede ser un disolvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propílenglicol y polietilenglicol líquido), mezclas adecuadas de los mismos, y aceites vegetales. Las formulaciones parenterales útiles en esta invención se pueden usar para producir una forma de dosis adecuada para su administración, ya sea por inyección directa o mediante la adición a fluidos de infusión estériles para infusión intravenosa. En otra modalidad, el isómero C de SDZ-RAD se puede preparar para su administración directa a las vías respiratorias en forma de un aerosol. La administración transdérmica se puede lograr usando un parche transdérmico que contiene el compuesto activo y un vehículo que es inerte para el compuesto activo y es inocuo para la piel, y que permite el suministro del agente para su absorción sistémica en la corriente sanguínea a través de la piel. Se entiende que la administración transdérmica incluye toda administración a través de la superficie del cuerpo y los revestimientos interiores de los pasajes corporales, que incluyen los tejidos epitelial y mucosal. Dichas administraciones se pueden efectuar usando el isómero C de SDZ-RAD en lociones, cremas, espumas, parches, suspensiones, soluciones y supositorios (rectales y vaginales). El vehículo puede tomar cualquier cantidad de formas, tales como cremas y ungüentos, pastas, geles y dispositivos oclusivos. Las cremas y ungüentos pueden ser emulsiones viscosas líquidas o semísólidas del tipo aceite en agua o agua en aceite. También pueden ser adecuadas las pastas comprendidas de polvos absorbentes dispersos en petrolato o petrolato hidrofílico, que contiene el ingrediente activo. Se puede usar una variedad de dispositivos oclusivos para liberar el ingrediente activo en la corriente sanguínea, tal como una membrana semipermeable que cubre un depósito que contiene el ingrediente activo, con o sin un vehículo, o una matriz que contiene el ingrediente activo. La invención contempla otros dispositivos oclusivos conocidos en la literatura. Las formulaciones de supositorio se pueden hacer de los materiales conocidos, que incluyen manteca de cacao, con o sin ceras para alterar el punto de fusión del supositorio, y glicerina. También se pueden usar bases de supositorios solubles en agua, tales como polietilenglicoles de varios pesos moleculares. El isómero C de SDZ-RAD se puede formular para cualquier vía y vehículo de suministro adecuados, y se acondiciona en forma de un envase farmacéutico o equipo de partes. Los envases o equipos farmacéuticos de acuerdo con la invención son útiles en el tratamiento, inhibición o prevención de cualquiera de las enfermedades o trastornos aquí mencionados, o en la preparación de medicamentos útiles para lo mismo. En una modalidad, la invención incluye un producto que contiene el isómero C de SDZ-RAD de acuerdo con la invención para usar en el tratamiento de un mamífero. En otra modalidad, la invención incluye un envase farmacéutico que contiene un curso de tratamiento de un neoplasma para un mamífero individual, en donde el envase contiene unidades del isómero C de SDZ-RAD en forma de dosis unitaria. En otras modalidades, los envases/equipos anteriormente mencionados incluyen otros componentes, por ejemplo instrucciones para disolución, mezcla y/o administración del isómero C de SDZ-RAD, contenedores, jeringas, agujas, etc. Otros componentes de envases/equipos serán muy evidentes para el experto en la materia. Los reactivos usados en la preparación del isómero C de SDZ-RAD se pueden obtener comercialmente o se pueden preparar mediante los procedimientos estándares descritos en la literatura. Los siguientes ejemplos son ilustrativos de la presente invención, pero no son una limitación de la misma.

EJEMPLO 1 A. Materiales e instrumentos Se obtuvo SDZ-RAD de Chemical Development Wyeth-Ayerst Research, Peral River, NY. Todos los disolventes eran grado HPLC y todos los otros reactivos químicos eran reactivos analíticos o equivalentes. La HPLC preparativa consistió en dos sistemas de suministro de disolvente Dynamax™ (modelo SD-1 ) y un detector de absorbancia Dynamax™ (modelo UV-1 ) de Rainin Instrument Company, Inc. (Woburn, Massachusetts). Se obtuvo un concentrador automático speed-vac (Savant, Modelo AS 160) de Savant Instruments, Inc. (Holbrook, NY) y se obtuvo un sistema rotativo de evaporación BUCHI (RE260 y R124) de Buchi (Flawil, Suiza). Se adquirieron datos de 1H RMN y 13C en espectrómetros Varian Unity Plus de 600 MHz con una temperatura de sonda de 25° C. Se obtuvieron espectros de masa de un espectrofotómetro de masa API 365, de PE Sciex. Todas las muestras se prepararon y corrieron a temperatura ambiente.

B. Preparación del compuesto Se disolvió SDZ-RAD (40 mg; 0.042 mmol) en 50 ml de 40% de amortiguador TEAA 0.1 M, pH 8.5, y 60% de díoxano. La solución se agitó a temperatura ambiente (aproximadamente 22° C) durante 4 horas. La conversión se detuvo mediante extracción con CH2CI2, 2x50 mL. La capa orgánica se redujo por medio del sistema rotativo de evaporación hasta sequedad. El compuesto se aisló por medio de una columna de BDS-Hypersil-C18 (250 x 20 mm) usando la fase móvil que consistía en 60% de dioxano, 40% de agua con amortiguador TEAA 0.01 M, pH 3.9. La velocidad de flujo fue de 12 mL/min. La fracción del isómero C (28.9 minutos) se recogió y se extrajo con CH2CI2 usando un embudo de separación. La capa orgánica se combinó y se lavó con agua, 2 x 50 mL, y después la capa orgánica se secó con Na2SO4 anhidro. El disolvente orgánico se redujo por evaporación rotativa aproximadamente a 1 mL. El producto se transfirió a un frasco y se precipitó agregando n-hexano. Se obtuvo un polvo blanco usando N2 para desalojar el disolvente y el frasco se puso en el aparato speed-vac hasta sequedad durante la noche. La pureza del isómero C de cada paso de purificación se analizó por medio de HPLC. La espectrometría de masa ESI indica el ion molecular [M+NH4]+ m/e 975.8, que es igual que la muestra de referencia de SDZ-RAD. La muestra de RMN se preparó en acetona-d6.

CUADRO Asignación de resonancia de protón y carbono del isómero C de SDZ-RAD (NB# L20156-xxx) en acetona-d6 a 25° C, 500 MHz (13C: 100 MHz) CUADRO (Continuación) EJEMPLO 2 La actividad antimicótica del compuesto de esta invención se estableció evaluándolo contra varias cepas de hongos. Brevemente, se utilizó el siguiente procedimiento para evaluar dicha actividad. Una placa de microtítulo de 96 pocilios se llenó con RPMI 1640 (50 µL/pocillo). Los compuestos por evaluar se colocaron en los pocilios apropiados y se diluyeron en serie en pocilios sucesivos para proveer varias diluciones. Las concentraciones variaron de 64 a 0.06 mg/mL. A cada pocilio se le agregó un inoculo ajustado de hongos (50 µL) y las placas se incubaron a 35° C durante 24-48 horas. La concentración inhibidora mínima (CIM) es la concentración mas baja de compuesto que inhibe completamente el crecimiento del organismo en los pocilios. El siguiente cuadro 1 muestra los resultados obtenidos en este procedimiento estándar de prueba farmacológica. En donde se indica más de una vez el mismo hongo, significa que se evaluó mas de una cepa. El compuesto de esta invención se indica en el encabezado del cuadro como "compuesto".

CUADRO 1 Actividad antimicótica (CIM en µg/mL) Los resultados obtenidos en este procedimiento estándar de prueba farmacológica demuestran la eficacia del isómero C de SDZ-RAD. Todas las patentes, solicitudes de patente, artículos, publicaciones y otros documentos aquí citados se incorporan como referencia.

El experto en la materia reconocerá que se pueden hacer modificaciones menores a las condiciones y técnicas de las modalidades aquí descritas, sin apartarse de la presente invención como está definida por las siguientes reivindicaciones, y están abarcadas por la invención.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto isómero C de SDZ-RAD de estructura: que tiene una pureza mayor de 90% en peso.

2.- El isómero C de SDZ-RAD de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque su pureza es mayor de 95% en peso.

3.- El isómero C de SDZ-RAD de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque su pureza es mayor de 99% en peso.

4.- El compuesto isómero C de SDZ-RAD de estructura: preparado a partir de 42-O-(2-hidroxi)etíl-rapamicina: (a) disolviendo 42-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina en una solución que contiene un disolvente orgánico y un amortiguador acuoso, dicho amortiguador acuoso teniendo un pH de 4 a 10; y (b) extrayendo el isómero C de SDZ-RAD en un disolvente orgánico.

5.- El isómero C de SDZ-RAD preparado de acuerdo con la reivindicación 4, caracterizado además porque el disolvente orgánico en el paso (a) es un disolvente polar aprótico o dipolar aprótico.

6.- El isómero C de SDZ-RAD preparado de acuerdo con la reivindicación 5, caracterizado además porque el disolvente orgánico en el paso (a) es acetonitrilo o 1 ,4-dioxano. 7 '.- El isómero C de SDZ-RAD preparado de acuerdo con la reivindicación 6, caracterizado además porque el disolvente orgánico es 1 ,4-dioxano. 8.- El isómero C de SDZ-RAD preparado de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 7, caracterizado además porque el amortiguador acuoso tiene un pH de aproximadamente 7 a 9. 9.- El isómero C de SDZ-RAD preparado de acuerdo con la reivindicación 8, caracterizado además porque el amortiguador acuoso tiene un pH de aproximadamente

7.5 a

8.5. 10.- El isómero C de SDZ-RAD preparado de acuerdo con la reivindicación 9, caracterizado además porque el amortiguador acuoso tiene un pH de aproximadamente 8.5. 11.- El isómero C de SDZ-RAD preparado de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 10, caracterizado además porque el disolvente orgánico en el paso (b) es un disolvente polar aprótico. 12.- El isómero C de SDZ-RAD preparado de acuerdo con la reivindicación 11 , caracterizado además porque el disolvente en el paso (b) es CH CI . 13.- El compuesto isómero C de SDZ-RAD de la estructura: obtenible mediante cualquiera de los procedimientos descritos en cualquiera de las reivindicaciones 4 a 12. 14.- Una composición farmacéutica que comprende el isómero C de SDZ-RAD que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, y un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. 15.- Un envase farmacéutico que contiene un curso de tratamiento para un mamífero, en donde el envase comprende unidades del isómero C de SDZ-RAD que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en forma de dosis unitarias. 16.- Un envase farmacéutico que contiene un curso de tratamiento para un mamífero, en donde el envase comprende unidades del isómero C de SDZ-RAD que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 en forma de dosis unitarias. 17.- El compuesto isómero C de SDZ-RAD de la estructura: para usar como un medicamento.