MD4473C1 - Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 - Google Patents

Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 Download PDF

Info

Publication number
MD4473C1
MD4473C1 MDA20160085A MD20160085A MD4473C1 MD 4473 C1 MD4473 C1 MD 4473C1 MD A20160085 A MDA20160085 A MD A20160085A MD 20160085 A MD20160085 A MD 20160085A MD 4473 C1 MD4473 C1 MD 4473C1
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
strain
cnmn
lyophilization
canosus
streptomyces
Prior art date
Application number
MDA20160085A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Other versions
MD4473B1 (ro
Inventor
Максим БЫРСА
Светлана БУРЦЕВА
Олег КИСЕЛИЦА
Валериу РУДИК
Original Assignee
Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы filed Critical Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы
Priority to MDA20160085A priority Critical patent/MD4473C1/ro
Publication of MD4473B1 publication Critical patent/MD4473B1/ro
Publication of MD4473C1 publication Critical patent/MD4473C1/ro

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02.Mediul, conform invenţiei, conţine 7,5% glucoză, 2,5% gelatină şi 0,1…10,0%vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide cu o concentraţie de 5 mg/ml, obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platesis CNMN-CB-02.

Description

Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 şi poate fi aplicată pentru conservarea, păstrarea, studierea şi utilizarea eficientă a genofondului microbian autohton de interes ştiinţific şi biotehnologic.
Sunt cunoscute medii de protecţie pentru liofilizarea tulpinilor de actinomicete ce conţin gelatină, zaharoză, glucoză, lapte degresat în diferite concentraţii şi combinări [1, 2]. Însă, neajunsul acestor medii de protecţie constă în viabilitatea scăzută a tulpinilor după liofilizare şi păstrare îndelungată.
În calitate de cea mai apropiată soluţie a mediului de protecţie revendicat pentru liofilizarea tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 poate servi mediul care conţine (%): gelatină 2,5 şi glucoză 7,5 [3].
La conservarea tulpinii pe acest mediu de protecţie în condiţii proxime viabilitatea ei după liofilizare constituie 90,3±2,0%, iar după păstrarea timp de 1 an este de 79,1±1,4% din numărul iniţial.
Dezavantajul acestui mediu constă în faptul că compoziţia chimică a mediului nu asigură o protecţie adecvată (deplină) tulpinii de actinomicete în timpul liofilizării şi păstrării îndelungate, astfel după liofilizare obţinându-se o viabilitate joasă, care scade semnificativ pe durata păstrării timp de 1 an.
Problema pe care o rezolvă prezenta invenţie constă în elaborarea unui mediu de protecţie care asigură viabilitate înaltă tulpinii după liofilizare şi păstrarea ei eficientă la nivel înalt timp de 1 an.
Invenţia soluţionează problema prin aceea că se propune un mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02, care conţine 7,5% glucoză, 2,5% gelatină şi 0,1…10,0% vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide cu o concentraţie de 5 mg/ml, obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02. Totodată extractul de aminoacizi şi oligopeptide este obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02 prin extragere succesivă cu hexan şi etanol şi fracţionare ulterioară (MD 545 G1 1996.05.31).
Suplinirea mediului de protecţie cu extract de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană, care manifestă acţiune antioxidantă, de stabilizare a membranelor celulare şi de stimulare a regenerării ţesuturilor, anihilează efectul negativ al temperaturilor joase, presiunii înalte, deshidratării şi formelor reactive de oxigen, la care sunt supuse microorganismele în timpul liofilizării şi păstrării îndelungate, oferind tulpinii o protecţie suplimentară, contribuind astfel la majorarea viabilităţii tulpinii şi menţinerea ei la nivel înalt pe durata păstrării îndelungate.
Rezultatul tehnic al invenţiei constă în sporirea cu 15,3…20,1% a viabilităţii tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 după liofilizare şi cu 20,6…28,3% după 1 an de păstrare, faţă de cea mai apropiată soluţie (vezi tabelul).
Exemple de realizare a invenţiei
Exemplul 1
În tuburi înclinate cu mediu agarizat Czapek, în condiţii sterile, se cultivă tulpina Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 timp de 14 zile, tuburile fiind plasate în termostat la temperatura de +27°C. Materialul semincer obţinut se transferă în mediul de protectie lichid cu următoarea componenţă: 2,5% gelatină; 7,5% glucoză şi 0,1% vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide (5 mg/ml), obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02, până la obţinerea titrului de 1010…1011 UFC ml-1. Suspensia obţinută se divizează câte 1 ml în flacoane pentru liofilizare. Probele se congelează brusc la temperatura de minus 50°C. Peste 12 ore se efectuează liofilizarea la temperatura condensorului de minus 88...94°C, vid 6…7 Pa, timp de 12 ore. Probele liofilizate se sigilează în vid şi se păstrează la temperatura de +4...5°C.
În varianta martor viabilitatea tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 este de 90,3,2±2,0% după liofilizare şi de 79,1±1,4% peste 1 an de păstrare, iar în varianta conform invenţiei este de 105,6±0,7 şi, respectiv, 101,1±3,4%, ceea ce este cu 15,3 şi, respectiv, 22,0 % mai mult.
Exemplul 2
În tuburi înclinate cu mediu agarizat Czapek, în condiţii sterile, se cultivă tulpina Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 timp de 14 zile, tuburile fiind plasate în termostat la temperatura de +27°C. Materialul semincer obţinut se transferă în mediul de protecţie lichid cu următoarea componenţă: 2,5% gelatină; 7,5% glucoză şi 1,0% vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide (5 mg/ml), obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02, până la obţinerea titrului de 1010…1011 UFC ml-1. Suspensia obţinută se divizează câte 1 ml în flacoane pentru liofilizare. Probele se congelează brusc la temperatura de minus 50°C. Peste 12 ore se efectuează liofilizarea la temperatura condensorului de minus 88...94°C, vid 6…7 Pa, timp de 12 ore. Probele liofilizate se sigilează în vid şi se păstrează la temperatura de +4...5°C. Viabilitatea tulpinii liofilizate se exprimă în procente faţă de numărul iniţial de UFC (unităţi formatoare de colonii).
În varianta martor viabilitatea tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 este de 90,3±2,0% după liofilizare şi de 79,1±1,4% peste 1 an de păstrare, iar în varianta optimizată este de 106,2±0,5 şi, respectiv, 99,7±7,1%, ceea ce este cu 15,9 şi, respectiv, 20,6% mai mult.
Exemplul 3
În tuburi înclinate cu mediu agarizat Czapek, în condiţii sterile, se cultivă tulpina Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 timp de 14 zile, tuburile fiind plasate în termostat la temperatura de +27°C. Materialul semincer obţinut se transferă în mediul de protecţie lichid cu următoarea componenţă: 2,5% gelatină; 7,5% glucoză şi 10,0% vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide (5 mg/ml), obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02, până la obţinerea titrului de 1010…1011 UFC ml-1. Suspensia obţinută se divizează câte 1 ml în flacoane pentru liofilizare. Probele se congelează brusc la temperatura de minus 50°C. Peste 12 ore se efectuează liofilizarea la temperatura condensorului de minus 88...94°C, vid 6…7 Pa, timp de 12 ore. Probele liofilizate se sigilează în vid şi se păstrează la temperatura de +4...5°C.
În varianta martor viabilitatea tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 este de 90,3±2,0% după liofilizare şi de 79,1±1,4% peste 1 an de păstrare, iar în varianta conform invenţiei este de 110,4±1,1 şi, respectiv, 107,4±2,3%, ceea ce este cu 20,1 şi, respectiv, 28,3% mai mult.
Viabilitatea tulpinii după liofilizare şi păstrare timp de 1 an se exprimă în procente faţă de numărul iniţial de UFC (unităţi formatoare de colonii) şi este calculată conform formulei BSR = (logAL/logBL) × 100 ( Muñoz-Rojas, J., Bernal, P., Duque, E., Godoy, P., Segura, A., Ramos, J. Involvement of Cyclopropane Fatty Acids in the Response of Pseudomonas putida KT2440 to Freeze-Drying. In: Applied Environmental Microbiology. 2006, vol. 72, № 1, p. 472-477).
Tabel
Viabilitatea tulpinii S. canosus CNMN-Ac-02 până, după liofilizare şi la 1 an de păstrare pe mediul proxim şi pe mediu de protecţie cu extract de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană
Mediul proxim Mediu cu adaos de extract de aminoacizi şi oligopeptide (5 mg/ml), (% vol.) Gelatină 2,5%+ glucoză 7,5% 0,1 1,0 10,0 Viabilitatea, % până după 1 an până după 1 an până după 1 an până după 1 an 100 90,3± 2,0 79,1± 1,4 100 105,6± 0,7 101,1± 3,4 100 106,2± 0,5 99,7± 7,1 100 110,4± 1,1 107,4± 2,3
1. Куплетская М. Б., Аркадьева З.А. Методы длительного хранения коллекции микроорганизмов кафедры микробиологии МГУ. Микробиология, 1997, т. 66, № 2, р. 283-288
2. Yocheva L., Najdenova M., Doncheva D., Antonova-Niconova S. Influence of the long-term preservation on some biological features of three streptomycetes strains, producers of antibiotic substances. Journal of culture collection, 2002, v. 3, p. 25-32
3. Chiseliţa Oleg, Burţeva Svetlana, Bîrsa Maxim, Bulimaga Valentina, Vasiliciuc Anastasia. Viability and antimicrobial activity of streptomyces strains from NCNM after lyophilization. Studia Universitatis Moldaviae, Seria Stiinţe reale şi ale naturii, 2016, nr.1(91), p. 61-71

Claims (2)

1. Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02, care conţine 7,5% glucoză, 2,5% gelatină şi 0,1…10,0%vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide cu o concentraţie de 5 mg/ml, obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02.
2. Mediu, conform revendicării 1, în care extractul de aminoacizi şi oligopeptide este obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02 prin extragere succesivă cu hexan şi etanol şi fracţionare ulterioară.
MDA20160085A 2016-07-15 2016-07-15 Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 MD4473C1 (ro)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDA20160085A MD4473C1 (ro) 2016-07-15 2016-07-15 Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDA20160085A MD4473C1 (ro) 2016-07-15 2016-07-15 Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02

Publications (2)

Publication Number Publication Date
MD4473B1 MD4473B1 (ro) 2017-03-31
MD4473C1 true MD4473C1 (ro) 2017-10-31

Family

ID=58412682

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDA20160085A MD4473C1 (ro) 2016-07-15 2016-07-15 Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02

Country Status (1)

Country Link
MD (1) MD4473C1 (ro)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MD1226Z (ro) * 2017-06-29 2018-08-31 Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы Mediu de protecţie pentru conservarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02
MD1235Z (ro) * 2017-06-29 2018-09-30 Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы Mediu de protecţie pentru conservarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02
CN108739053A (zh) * 2018-06-22 2018-11-06 辽东学院 一种长期保存高虫草素蛹虫草菌种的方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0530895A (ja) * 1991-07-31 1993-02-09 Gordex Kk 食鳥の骨付もも肉の骨に沿つてすじ入れする装置
JPH05308955A (ja) * 1991-03-19 1993-11-22 Mitsubishi Heavy Ind Ltd 亜硝酸菌の保存と復元方法
MD617B1 (ro) * 1995-08-28 1996-11-29 Univ Nicolae Testemitanu Mediu pentru cultivarea campilobacteriilor
MD1353F1 (ro) * 1998-12-03 1999-11-30 Inst De Microbiologie Al Acade Mediu nutritiv pentru cultivarea streptomicetelor
MD20010233A (ro) * 2001-07-24 2003-02-28 Inst De Microbiologie Al Acade Mediu nutritiv pentru cultivarea pseudomonadelor fluorescente
RU2006138233A (ru) * 2004-03-31 2008-05-10 Даниско А/С (Dk) Способ

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH05308955A (ja) * 1991-03-19 1993-11-22 Mitsubishi Heavy Ind Ltd 亜硝酸菌の保存と復元方法
JPH0530895A (ja) * 1991-07-31 1993-02-09 Gordex Kk 食鳥の骨付もも肉の骨に沿つてすじ入れする装置
MD617B1 (ro) * 1995-08-28 1996-11-29 Univ Nicolae Testemitanu Mediu pentru cultivarea campilobacteriilor
MD1353F1 (ro) * 1998-12-03 1999-11-30 Inst De Microbiologie Al Acade Mediu nutritiv pentru cultivarea streptomicetelor
MD20010233A (ro) * 2001-07-24 2003-02-28 Inst De Microbiologie Al Acade Mediu nutritiv pentru cultivarea pseudomonadelor fluorescente
RU2006138233A (ru) * 2004-03-31 2008-05-10 Даниско А/С (Dk) Способ

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chiseliţa Oleg, Burţeva Svetlana, Bîrsa Maxim, Bulimaga Valentina, Vasiliciuc Anastasia. Viability and antimicrobial activity of streptomyces strains from NCNM after lyophilization. Studia Universitatis Moldaviae, Seria Stiinţe reale şi ale naturii, 2016, nr.1(91), p. 61-71 *
Yocheva L., Najdenova M., Doncheva D., Antonova-Niconova S. Influence of the long-term preservation on some biological features of three streptomycetes strains, producers of antibiotic substances. Journal of culture collection, 2002, v. 3, p. 25-32 *
Куплетская М. Б., Аркадьева З.А. Методы длительного хранения коллекции микроорганизмов кафедры микробиологии МГУ. Микробиология, 1997, т. 66, № 2, р. 283-288 *
Нечисляев В. А., Орлова В. Е., Бахтин И. А. Универсальная защитня среда для лиофилизации пробиотических преператов. Казанский медицинский журнал. 2010, том 91, №1. Găsit internet: <URL:http://cyberleninka.ru/article/n/universalnaya-zaschitnaya-sreda-dlya-liofilizatsii-probioticheskih-preparatov> *

Also Published As

Publication number Publication date
MD4473B1 (ro) 2017-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Bellali et al. A new protectant medium preserving bacterial viability after freeze drying
McEldowney et al. The effect of temperature and relative humidity on the survival of bacteria attached to dry solid surfaces
Day et al. Cryo-injury in algae and the implications this has to the conservation of micro-algae
Tashyreva et al. Effect of nitrogen starvation on desiccation tolerance of Arctic Microcoleus strains (cyanobacteria)
Tosi et al. Antioxidant enzyme activity of filamentous fungi isolated from Livingston Island, Maritime Antarctica
Taylor et al. Nitrogen-fixation associated with the marine blue-green alga, Trichodesmium, as measured by the acetylene-reduction technique
MD4473C1 (ro) Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02
Demirel et al. Influence of media and temperature on the growth and the biological activities of Desmodesmus protuberans (FE Fritsch & MF Rich) E. Hegewald
Jia et al. Algicidal bacteria in phycosphere regulate free-living Symbiodinium fate via triggering oxidative stress and photosynthetic system damage
CN112251388B (zh) 一种植物乳杆菌及其乳酸菌发酵剂的应用
MD4474C1 (ro) Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02
Talib et al. Isolation, culture, and maintenance of Extremophilic fungi
CN103952359A (zh) 一株短波单胞菌及其应用
CN110885767A (zh) 一株具有良好抗氧化活性的乳酸乳球菌霍氏亚种及其应用
MD4498C1 (ro) Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06
US7374905B2 (en) Medium composition, method and device for selectively enhancing the isolation of anaerobic microorganisms contained in a mixed sample with facultative microorganisms
Amrei The Eff ect of Diff erent Light Conditions on Antimicrobial Activity of the Microalgae Chlorella sp. Ethanolic Extract Against Streptococcus mutans
Vamanu et al. Antioxidant and antibacterial properties of the extracts from Pleurotus ostreatus EVFB1 and EVFB4
RU2737321C1 (ru) Способ сохранения бактерий в фекальной микробиоте и бактериальных культур, выращенных на плотных агаризованных питательных или дифференциальных средах в условиях низких температур с использованием составной среды для заморозки
CN107058110B (zh) 一种雨生红球藻细胞的保存及复苏方法
CN117158474A (zh) 普罗旺斯类芽孢杆菌pp-2在海鲈鱼保鲜中的应用
MD4499C1 (ro) Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06
Malik Preservation of unicellular gree algae by a liquid-drying method
MD1226Y (ro) Mediu de protecţie pentru conservarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02
MD1235Y (ro) Mediu de protecţie pentru conservarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02

Legal Events

Date Code Title Description
FG4A Patent for invention issued
KA4A Patent for invention lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration)
MM4A Patent for invention definitely lapsed due to non-payment of fees