MD4498C1 - Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 - Google Patents
Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 Download PDFInfo
- Publication number
- MD4498C1 MD4498C1 MDA20160083A MD20160083A MD4498C1 MD 4498 C1 MD4498 C1 MD 4498C1 MD A20160083 A MDA20160083 A MD A20160083A MD 20160083 A MD20160083 A MD 20160083A MD 4498 C1 MD4498 C1 MD 4498C1
- Authority
- MD
- Moldova
- Prior art keywords
- cnmn
- strain
- medium
- oligopeptides
- preservation
- Prior art date
Links
- 241000946871 Streptomyces massasporeus Species 0.000 title claims abstract description 15
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 238000004321 preservation Methods 0.000 title claims description 6
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims abstract description 12
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000016425 Arthrospira platensis Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 240000002900 Arthrospira platensis Species 0.000 claims abstract description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 claims description 5
- 241001464430 Cyanobacterium Species 0.000 claims description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 17
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 239000012225 czapek media Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 2
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- -1 Cyclopropane Fatty Acids Chemical class 0.000 description 1
- 108700005443 Microbial Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000320117 Pseudomonas putida KT2440 Species 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii de actinomicete Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06.Mediul, conform invenţiei, conţine 2,5% gelatină, 7,5% glucoză, 0,5…2,0% vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide cu o concentraţie de 5 mg/ml, obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02 şi apă distilată restul.
Description
Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii de actinomicete Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06.
Invenţia poate fi aplicată pentru conservarea, păstrarea, studierea şi utilizarea eficientă a genofondului microbian autohton de interes ştiinţific şi biotehnologic.
Sunt cunoscute medii de protecţie pentru liofilizarea tulpinilor de actinomicete ce conţin gelatină, zaharoză, glucoză, lapte degresat în diferite concentraţii şi combinări: lapte degresat (LD), lapte degresat cu glucoză de 7% (LD+G7%), gelatină 1,0% cu zaharoză 10,0% (Gel1%+Z10%), gelatină 2,5% cu zaharoză 7,5% (Gel 2,5%+Z 7,5%) [1].
Mai este cunoscut mediul de protecţie pentru liofilizarea tulpinilor de actinomicete ce conţine: zahăr (10%), lapte degresat (5,5%) şi gelatină (1,5%) [2].
Însă, neajunsul acestor medii de protecţie constă în viabilitatea scăzută a tulpinilor după liofilizare.
Cea mai apropiată soluţie a mediului de protecţie revendicat pentru liofilizarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 este mediul care conţine, (%): gelatină - 2,5 şi glucoză -7,5 [3].
La conservarea tulpinii pe acest mediu de protecţie în condiţii proxime viabilitatea ei după liofilizare constituie 75,7±1,4% din numărul iniţial.
Dezavantajul acestui mediu constă în faptul că compoziţia chimică a mediului nu asigură o protecţie deplină tulpinii de actinomicete în timpul liofilizării, astfel obţinându-se o viabilitate scăzută.
Problema pe care o rezolvă prezenta invenţie constă în elaborarea unui mediu de protecţie care asigură sporirea viabilităţii tulpinii după liofilizare.
Mediul de protecţie pentru conservarea tulpinii de actinomicete Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06, conform invenţiei, conţine 7,5% glucoză, 2,5% gelatină, 0,5…2,0% vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide cu o concentraţie de 5 mg/ml, obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02 şi apă distilată restul.
Extractul de aminoacizi şi oligopeptide este obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02 prin extragere succesivă cu hexan şi etanol şi fracţionare ulterioară.
Extractul de aminoacizi şi oligopeptide din Spirulina platensis (Nordst) Getil CNMN-CB-02 cu o concentraţie de 5 mg/ml este obţinut în conformitate cu MD 545 F1 1996.05.31.
Efectul pozitiv se datorează suplinirii mediului de protecţie cunoscut cu extract de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană, care manifestă acţiune antioxidantă, de stabilizare a membranelor celulare şi de stimulare a regenerării ţesuturilor, ce oferă tulpinii o protecţie suplimentară, contribuind astfel la majorarea viabilităţii ei.
Rezultatul tehnic al invenţiei constă în sporirea viabilităţii tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06.
Rezultatul se obţine datorită includerii în mediul de protecţie a extractului ce conţine amestec de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană, care manifestă acţiune antioxidantă, de stabilizare a membranelor celulare şi de stimulare a regenerării ţesuturilor, ce anihilează efectul negativ al temperaturilor joase, presiunii înalte, deshidratării şi formelor reactive de oxigen, la care sunt supuse microorganismele în timpul liofilizării.
Exemplu de realizare a invenţiei
Exemplul 1
În tuburi înclinate cu mediu agarizat Czapek, în condiţii sterile, se cultivă tulpina Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 timp de 14 zile, în termostat la temperatura de +27°C. Materialul semincer obţinut se transferă în mediul de protecţie lichid cu următoarea componenţă, (%): gelatină - 2,5; glucoză - 7,5 şi extract de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană (5 mg/ml) - 0,5% vol., până la obţinerea titrului de 108…1010 UFC ml-1. Suspensia obţinută se plasează câte 1 ml în flacoane pentru liofilizare. Probele se congelează brusc la temperatura de minus 50°C. Peste 12 ore se efectuează liofilizarea la temperatura condensorului de minus 88...94°C, vid 6…7 Pa, timp de 12 ore. Probele liofilizate se sigilează în vid şi se păstrează la temperatura de +4…+5°C.
În varianta martor viabilitatea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 este de 75,7±1,4%, iar în varianta optimizată de 94,5±4,9%, ceea ce este cu 18,8% mai mult.
Exemplul 2
În tuburi înclinate cu mediu agarizat Czapek, în condiţii sterile, se cultivă tulpina Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 timp de14 zile, în termostat la temperatura de +27°C. Materialul semincer obţinut se transferă în mediul de protecţie lichid cu următoarea componenţă, (%/): gelatină - 2,5; glucoză - 7,5 şi extract de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană (5 mg/ml) - 1% vol., până la obţinerea titrului de 108…1010 UFC ml-1. Suspensia obţinută se plasează câte 1 ml în flacoane pentru liofilizare. Probele se congelează brusc la temperatura de minus 50°C. Peste 12 ore se efectuează liofilizarea la temperatura condensorului de minus 88…94°C, vid 6…7 Pa, timp de 12 ore. Probele liofilizate se sigilează în vid şi se păstrează la temperatura de +4…+5°C.
În varianta martor viabilitatea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 este de 75,7±1,4%, iar în varianta optimizată de 94,1±3,9%, ceea ce este cu 18,4% mai mult.
Exemplul 3
În tuburi înclinate cu mediu agarizat Czapek, în condiţii sterile, se cultivă tulpina Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 timp de 14 zile, în termostat la temperatura de +27°C. Materialul semincer obţinut se transferă în mediul de protecţie lichid cu următoarea componenţă, (%/): gelatină - 2,5; glucoză - 7,5 şi extract de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană (concentraţia de 5 mg/ml) - 2,0% vol., până la obţinerea titrului de 108…1010 UFC ml-1. Suspensia obţinută se plasează câte 1 ml în flacoane pentru liofilizare. Probele se congelează brusc la temperatura de minus 50°C. Peste 12 ore se efectuează liofilizarea la temperatura condensorului de minus 88...94°C, vid 6…7 Pa, timp de 12 ore. Probele liofilizate se sigilează în vid şi se păstrează la temperatura de +4…+5°C. Viabilitatea tulpinii liofilizate se exprimă în procente faţă de numărul iniţial de UFC (unităţi formatoare de colonii).
În varianta martor viabilitatea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 este de 75,7±1,4%, iar în varianta optimizată de 104,7±2,2%, ceea ce este cu 29,0% mai mult.
Viabilitatea tulpinii liofilizate se exprimă în procente faţă de numărul iniţial de UFC (unităţi formatoare de colonii) şi este calculată conform formulei BSR = (logAL/logBL) × 100 [Muñoz-Rojas, J., Bernal, P., Duque, E., Godoy, P., Segura, A., Ramos, J. Involvement of Cyclopropane Fatty Acids in the Response of Pseudomonas putida KT2440 to Freeze-Drying. In: Applied Environmental Microbiology. 2006, vol. 72, № 1, p. 472-477].
Rezultatul tehnic al invenţiei constă în sporirea cu 18,4…29,0% a viabilităţii tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 faţă de cea mai apropiată soluţie (tab.).
Tabel
Viabilitatea tulpinii S. massasporeus CNMN-Ac-06 până şi după liofilizare pe mediu de protecţie cu extract de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană (5 mg/ml) în diferite concentraţii
Mediul prototip Mediul cu adaos de extract de aminoacizi şi oligopeptide de origine cianobacteriană (5 mg/ml), (%/vol.) gelatină 2,5%+ glucoză 7,5% 0,5% 1,0% 2,0% până după până după până după până după 100% 75,7±1,4 100% 94,5±4,9 100% 94,1±3,9 100% 104,7±2,2
1. Куплетская М. Б., Аркадьева З.А. Методы длительного хранения коллекции микроорганизмов кафедры микробиологии МГУ. Микробиология. 1997, т. 66, № 2, р. 283-288
2. Yocheva L., Najdenova M., Doncheva D., Antonova-Niconova S. Influence of the long-term preservation on some biological features of three streptomycetes strains, producers of antibiotic substances. Jornal of culture collection, 2002, v. 3, p. 25-32
3. Chiselita Oleg, Burteva Svetlana, Birsa Maxim, Bulimaga Valentina, Vasiliciuc Anastasia. Viability and antimicrobial activity of streptomyces strains from NCNM after lyophilization. Studia Universitatis Moldaviae, Seria Stiinte reale si ale naturii. 2016, nr.1(91), p. 61-71
Claims (2)
1. Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii de actinomicete Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06, care conţine 7,5% glucoză, 2,5% gelatină, 0,5…2,0% vol. extract de aminoacizi şi oligopeptide cu o concentraţie de 5 mg/ml, obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02 şi apă distilată restul.
2. Mediu, conform revendicării 1, în care extractul de aminoacizi şi oligopeptide este obţinut din biomasa tulpinii de cianobacterie Spirulina platensis CNMN-CB-02 prin extragere succesivă cu hexan şi etanol şi fracţionare ulterioară.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| MDA20160083A MD4498C1 (ro) | 2016-07-15 | 2016-07-15 | Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| MDA20160083A MD4498C1 (ro) | 2016-07-15 | 2016-07-15 | Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| MD4498B1 MD4498B1 (ro) | 2017-07-31 |
| MD4498C1 true MD4498C1 (ro) | 2018-02-28 |
Family
ID=59383908
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MDA20160083A MD4498C1 (ro) | 2016-07-15 | 2016-07-15 | Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| MD (1) | MD4498C1 (ro) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05308955A (ja) * | 1991-03-19 | 1993-11-22 | Mitsubishi Heavy Ind Ltd | 亜硝酸菌の保存と復元方法 |
| MD617B1 (ro) * | 1995-08-28 | 1996-11-29 | Univ Nicolae Testemitanu | Mediu pentru cultivarea campilobacteriilor |
| MD1353F1 (ro) * | 1998-12-03 | 1999-11-30 | Inst De Microbiologie Al Acade | Mediu nutritiv pentru cultivarea streptomicetelor |
| UA27038U (en) * | 2007-06-19 | 2007-10-10 | Inst Problems Of Cryobiology & Cryomedicine | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens |
-
2016
- 2016-07-15 MD MDA20160083A patent/MD4498C1/ro not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05308955A (ja) * | 1991-03-19 | 1993-11-22 | Mitsubishi Heavy Ind Ltd | 亜硝酸菌の保存と復元方法 |
| MD617B1 (ro) * | 1995-08-28 | 1996-11-29 | Univ Nicolae Testemitanu | Mediu pentru cultivarea campilobacteriilor |
| MD1353F1 (ro) * | 1998-12-03 | 1999-11-30 | Inst De Microbiologie Al Acade | Mediu nutritiv pentru cultivarea streptomicetelor |
| UA27038U (en) * | 2007-06-19 | 2007-10-10 | Inst Problems Of Cryobiology & Cryomedicine | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Chiselita Oleg, Burteva Svetlana, Birsa Maxim, Bulimaga Valentina, Vasiliciuc Anastasia. Viability and antimicrobial activity of streptomyces strains from NCNM after lyophilization. Studia Universitatis Moldaviae, Seria Stiinte reale si ale naturii. 2016, nr.1(91), p. 61-71 * |
| Yocheva L., Najdenova M., Doncheva D., Antonova-Niconova S. Influence of the long-term preservation on some biological features of three streptomycetes strains, producers of antibiotic substances. Jornal of culture collection, 2002, v. 3, p. 25-32 * |
| Куплетская М. Б., Аркадьева З.А. Методы длительного хранения коллекции микроорганизмов кафедры микробиологии МГУ. Микробиология. 1997, т. 66, № 2, р. 283-288 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MD4498B1 (ro) | 2017-07-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bellali et al. | A new protectant medium preserving bacterial viability after freeze drying | |
| Melo et al. | Isolation and biological activities of an endophytic Mortierella alpina strain from the Antarctic moss Schistidium antarctici | |
| Zayed et al. | Influence of trehalose and moisture content on survival of Lactobacillus salivarius subjected to freeze-drying and storage | |
| Burja et al. | Culture of the marine cyanobacterium, Lyngbya majuscula (Oscillatoriaceae), for bioprocess intensified production of cyclic and linear lipopeptides | |
| Tashyreva et al. | Effect of nitrogen starvation on desiccation tolerance of Arctic Microcoleus strains (cyanobacteria) | |
| Krishnakumar et al. | Evaluation of bioactive metabolites from halophilic microalgae Dunaliella salina by GC-MS analysis | |
| Taylor et al. | Nitrogen-fixation associated with the marine blue-green alga, Trichodesmium, as measured by the acetylene-reduction technique | |
| Demirel et al. | Influence of media and temperature on the growth and the biological activities of Desmodesmus protuberans (FE Fritsch & MF Rich) E. Hegewald | |
| Jia et al. | Algicidal bacteria in phycosphere regulate free-living Symbiodinium fate via triggering oxidative stress and photosynthetic system damage | |
| MD4473C1 (ro) | Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 | |
| Corona et al. | Screening study for antibacterial activity from marine and freshwater microalgae | |
| Mathan et al. | Anticancer and antimicrobial activity of Aspergillus protuberus SP1 isolated from marine sediments of South Indian coast | |
| Su et al. | Optimization of medium and cultivation conditions for enhanced exopolysaccharide yield by marine Cyanothece sp. 113 | |
| MD4474C1 (ro) | Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 | |
| Bhatt et al. | Isolation and characterization of a halophilic cyanobacterium Euhalothece SLVH01 from Sambhar salt lake, India | |
| Lv et al. | Medium optimization of three marine probiotics and their application in the culture of Sebastes schlegelii | |
| Vamanu et al. | Antioxidant and antibacterial properties of the extracts from Pleurotus ostreatus EVFB1 and EVFB4 | |
| MD4499C1 (ro) | Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 | |
| Kaushik et al. | Cyanobacteria: antibacterial activity | |
| RU2737321C1 (ru) | Способ сохранения бактерий в фекальной микробиоте и бактериальных культур, выращенных на плотных агаризованных питательных или дифференциальных средах в условиях низких температур с использованием составной среды для заморозки | |
| Malik | Preservation of unicellular gree algae by a liquid-drying method | |
| MD1226Y (ro) | Mediu de protecţie pentru conservarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 | |
| MD1235Y (ro) | Mediu de protecţie pentru conservarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 | |
| Zawawi et al. | Antibacterial Activity of Probiotics Isolated from Commercialized Yogurt Against Pathogenic Bacteria | |
| RU2257415C1 (ru) | Способ дифференциации атоксигенных штаммов холерных вибрионов от токсигенных |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG4A | Patent for invention issued | ||
| KA4A | Patent for invention lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration) | ||
| MM4A | Patent for invention definitely lapsed due to non-payment of fees |