UA27038U - A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens - Google Patents
A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens Download PDFInfo
- Publication number
- UA27038U UA27038U UAU200706914U UAU200706914U UA27038U UA 27038 U UA27038 U UA 27038U UA U200706914 U UAU200706914 U UA U200706914U UA U200706914 U UAU200706914 U UA U200706914U UA 27038 U UA27038 U UA 27038U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- culture
- microbial
- agar
- drying
- spore culture
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 241000186984 Kitasatospora aureofaciens Species 0.000 title abstract 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 21
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 19
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims description 17
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 12
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 10
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 6
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 12
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 12
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 11
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 2
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 2
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Корисна модель належить до кріобіології і мікробіології й може бути використана в мікробіологічній 2 промисловості при виробництві антибіотиків.A useful model belongs to cryobiology and microbiology and can be used in the microbiological 2 industry in the production of antibiotics.
Найбільш близьким до способу, якій заявляється, є спосіб консервування спорової культури Зігеріюотусез ацйгеоїасіепе |1). Згідно зі способом мікробну культуру вирощують на скошеному агаровому регламентному живильному середовищі протягом 14 діб при температурі 282С. Вилучення мікробної культури проводиться шляхом зіскоблювання клітин мікроорганізмів з поверхні скошеного агарового регламентного живильного середовища у пробірках зі штамом спорової культури. Потім у ці пробірки вносять однаковий об'єм одного з захисних середовищ (кінська сироватка, 1095 сахароза ї- 195 желатина медична, знежирене молоко), мікробні клітини перемішують із захисним середовищем. Отриману клітинну суспензію у скляних ампулах заморожують у сосуді із сумішшю вуглекислоти з етиловим спиртом (температура суміші -70-8022) та переносять у вакуум-сушильний апарат для подальшого висушування протягом 6 годин. Залишкова вологість ліофілізованої т5 мікробної культури складає 3-595. Життєздатність культури після ліофілізації складає 12,9-44,995. Після закінчення висушування зразки зберігають при температурі 4-10 С. Життєздатність ліофілізованої культуриThe closest to the claimed method is the method of preservation of the spore culture Zigeriyuotusez atsygeoiasiape |1). According to the method, the microbial culture is grown on mowed agar regulatory nutrient medium for 14 days at a temperature of 282C. Extraction of the microbial culture is carried out by scraping the cells of microorganisms from the surface of the mowed agar regulatory nutrient medium in test tubes with a spore culture strain. Then, an equal volume of one of the protective media (horse serum, 1095% sucrose, 195% medical gelatin, skimmed milk) is introduced into these test tubes, the microbial cells are mixed with the protective medium. The obtained cell suspension in glass ampoules is frozen in a vessel with a mixture of carbon dioxide and ethyl alcohol (temperature of the mixture -70-8022) and transferred to a vacuum drying apparatus for further drying for 6 hours. The residual moisture content of the lyophilized T5 microbial culture is 3-595. The viability of the culture after lyophilization is 12.9-44.995. After drying, the samples are stored at a temperature of 4-10 C. Viability of the lyophilized culture
Зігеріюотусез ацйгеоїасіепз зберігається протягом 2 років.Zigeriuotusez atsygeoiasiepz is stored for 2 years.
Недоліками цього способу є те, що він не забезпечує високої життєздатності мікробної культури і є го складним у виконанні.The disadvantages of this method are that it does not ensure high viability of the microbial culture and is difficult to perform.
В основу корисної моделі поставлено задачу, створити такий спосіб консервування спорової культуриThe basis of a useful model is the task of creating such a method of preserving spore culture
Зігеріотусез ацйгеоїасіеп5, у якому б, шляхом зміни способу вилучення мікробних клітин, забезпечувалася можливість підвищити життєздатність мікробної культури, а також спростити процес консервування.Zigeriotusez atsygeoiasiep5, in which, by changing the method of extracting microbial cells, it would be possible to increase the viability of the microbial culture, as well as to simplify the preservation process.
Ця задача вирішується тим, що в способі консервування спорової культури Зігеріотусез ацйгеоїасіепв, який рб Включає вирощування мікробних клітин на скошеному агаровому регламентному живильному середовищі, вилучення мікробної культури і заморожування-висушування, згідно з корисною моделлю, вилучення мікробних - клітин здійснюють на агарових пластинках товщиною 1,Омм.This task is solved by the fact that in the method of preservation of the spore culture of Zygeriotus acygeoiasiepv, which includes the cultivation of microbial cells on a slanted agar regulatory nutrient medium, extraction of the microbial culture and freeze-drying, according to a useful model, the extraction of microbial cells is carried out on agar plates with a thickness of 1 Ohm.
Зміна умов вилучення мікробних клітин дає можливість підвищити життєздатність мікроорганізмів на 33,5905, а також скоротити процес консервування, знизити трудоємність способу й затрачуваних на його здійснення со засобів. Це пов'язане з тим, що вилучення мікробної культури здійснюється безпосередньо на агарових пластинках з ростовим середовищем і таким чином запобігаються пошкодження мікробної культури, які со відбуваються у прототипі, де пошкодження пов'язане з процесом зіскоблювання мікробних клітин. Використання о тонкого шару агарового живильного середовища скорочує процес висушування, що дає можливість скоротити час перебування мікробної культури під дією фізико-хімічних факторів, призводящих до загибелі клітин. Після - з зберігання ліофілізованих зразків при температурі 4-102С протягом 4 років життєздатність спорової культури счChanging the conditions for the extraction of microbial cells makes it possible to increase the viability of microorganisms by 33.5905, as well as shorten the preservation process, reduce the labor intensity of the method and the means spent on its implementation. This is due to the fact that the extraction of the microbial culture is carried out directly on agar plates with a growth medium, and thus damage to the microbial culture, which occurs in the prototype, where the damage is associated with the process of scraping off microbial cells, is prevented. The use of a thin layer of agar nutrient medium shortens the drying process, which makes it possible to reduce the time the microbial culture remains under the influence of physical and chemical factors that lead to cell death. After - from storage of lyophilized samples at a temperature of 4-102C for 4 years, the viability of the spore culture
Зігеріотусевз ашгеоїасієпе складає (2,64-40,1200)х102 кл/мл, тоді як мікробна культура, яка вказана у прототипі, гине після 2 років зберігання.Zygeriotusevz ashgeoiaciepe is (2.64-40.1200)x102 cells/ml, while the microbial culture, which is specified in the prototype, dies after 2 years of storage.
Спосіб пояснюється наступними прикладами.The method is explained by the following examples.
Приклад 1. Спорову культуру бігеріотусез ацйгеоїасіепе вирощували протягом 14 діб при температурі 2820 « на скошеному агаровому регламентному живильному середовищі при наступному співвідношенні компонентів, й с мас.бо: :з» Екстракт кукурудзяний 1,0Example 1. The spore culture of Bigeriotus acygeoiasiepe was grown for 14 days at a temperature of 2820 °C on a mowed agar regulatory nutrient medium with the following ratio of components, y c mass.bo: :z" Corn extract 1.0
Крохмаль картопляний 2,0Potato starch 2.0
КНоРОХ 02 ка (МНадеНРОД ом -І Мао 0,025 сасоз 0 о Агар-агар 2,0 оз 50 Вода дистильована інше со Агарові пластинки з мікробними клітинами, товщиною 1,0мм, знімали зі скошеного агарового регламентного живильного середовища гострим шпателем разом із шаром агарового середовища, потім їх містили на дно пеніцилінових флаконів. Флакони з агаровими пластинками ставили у металеві касети, які розміщували на полках установки заморожування-висушування УЗВ-2 виробництва СКТБ з ДВ ІПКІК НАН України. Зразки с заморожували зі швидкістю 22С/хв. до початкової температури висушування -202С та висушували протягом 1 години. Залишковий тиск у камері установки заморожування-висушування складав 1,33Па. Після закінчення висушування флакони із зразками укупорювали у парах сухого азоту гумовими пробками та завальцьовували металевими ковпачками. Залишкова вологість зразків після висушування складала 2905. Регідратацію 60 ліофілізованих зразків проводили протягом 10 хвилин шляхом додавання дистильованої води. Життєздатність мікробної культури оцінювали за числом сформованих макроколоній на агаровому регламентному живильному середовищі. Результати наведені у таблиці 1.KNoROH 02 ka (MNadeNROD om -I Mao 0.025 sasoz 0 o Agar-agar 2.0 oz 50 Distilled water other so Agar plates with microbial cells, 1.0 mm thick, were removed from the cut agar regulatory nutrient medium with a sharp spatula together with a layer of agar medium , then they were placed at the bottom of penicillin vials. The vials with agar plates were placed in metal cassettes, which were placed on the shelves of the UZV-2 freeze-drying unit manufactured by SKTB from the Department of IPKIC of the National Academy of Sciences of Ukraine. The samples were frozen at a speed of 22C/min to the initial drying temperature -202С and dried for 1 hour. The residual pressure in the chamber of the freeze-drying unit was 1.33 Pa. After drying, the vials with the samples were sealed in dry nitrogen vapor with rubber stoppers and rolled with metal caps. The residual moisture of the samples after drying was 2905. Rehydration of 60 lyophilized of samples was carried out for 10 minutes by adding distilled water the capacity of the microbial culture was assessed by the number of formed macrocolonies on agar regulated nutrient medium. The results are shown in Table 1.
З таблиці 1 видно, що при консервуванні мікробної культури способом, який заявляється, життєздатність складала 78,69о. Залишкова вологість зразків дорівнювала 2,095. Тривалість процесу висушування становила 1 бо годину.It can be seen from Table 1 that when preserving the microbial culture in the manner claimed, the viability was 78.69%. The residual moisture content of the samples was equal to 2.095. The duration of the drying process was 1 hour.
Приклад 2. Спосіб здійснювали аналогічно прикладу 1, за винятком того, що спори мікробної культури знімали гострим шпателем із шаром живильного середовища різної товщини: О,5мм та 1,5мм. Результати наведені в таблиці 1.Example 2. The method was carried out similarly to example 1, except that the spores of the microbial culture were removed with a sharp spatula with a layer of nutrient medium of different thicknesses: 0.5 mm and 1.5 mm. The results are shown in Table 1.
З таблиці видно, що при товщині агарових пластинок 0,5мм після консервування мікробної спорової культури її життєздатність була на 595 нижче, ніж при використанні агарових пластинок товщиною 1мм. Залишкова вологість зразків була менш на 0,595. Але тривалість процесу висушування не змінювалася і складала 1 годину.It can be seen from the table that with the thickness of agar plates of 0.5 mm after preservation of the microbial spore culture, its viability was 595 lower than when using agar plates with a thickness of 1 mm. The residual moisture of the samples was less by 0.595. But the duration of the drying process did not change and was 1 hour.
Збільшення товщини агарових пластинок до 1,5мм приводило до зниження життєздатності спорової культури після висушування на 16,295. Залишкова вологість збільшувалася на 0,595. При цьому тривалість процесу висушування збільшувалася на 0,5 години, що підвищувало трудоємність способу і вимагало великих витрат 70 засобів (електроенергія, рідкий азот, захисні середовища та інші).Increasing the thickness of the agar plates to 1.5 mm led to a decrease in the viability of the spore culture after drying by 16.295. Residual moisture increased by 0.595. At the same time, the duration of the drying process increased by 0.5 hours, which increased the labor intensity of the method and required large expenditures of 70 resources (electricity, liquid nitrogen, protective media, and others).
Таким чином, у порівнянні з прототипом заявлений спосіб дає можливість підвищити життєздатність мікробної культури, зменшити тривалість процесу консервування і, крім того, знизити витрати засобів.Thus, in comparison with the prototype, the claimed method makes it possible to increase the viability of the microbial culture, reduce the duration of the preservation process and, in addition, reduce the cost of the means.
Приклад 3. Консервування спорової культури Зігеріотусевз ацйгеоїасіепз проводили згідно з прототипом у різних захисних середовищах (кінська сироватка, 1090 сахароза «195 желатина медична і знежирене молоко).Example 3. Preservation of the spore culture of Zygeriotusevs acygeoiasiepz was carried out according to the prototype in various protective media (horse serum, 1090 sucrose, 195 medical gelatin and skimmed milk).
Спорову культуру бігеріотусез ашцйгеоїасіепв, як у прототипі, вирощували протягом 14 діб при температурі 289Сб на скошеному агаровому регламентному живильному середовищі при наступному співвідношенні компонентів, мас. 90:As in the prototype, the spore culture of bigeriotusez ashtsygeoiasiepv was grown for 14 days at a temperature of 289С on mowed agar regular nutrient medium with the following ratio of components, by weight. 90:
Екстракт кукурудзяний 1,0Corn extract 1.0
Крохмаль картопляний 2,0Potato starch 2.0
КНоРОХ 02 (МНО)2НРОд ОАKNoROH 02 (MNO) 2NROd OA
Мазод 0,025 сасоз 0Mazod 0.025 sasoz 0
Агар-агар 2,0 шщAgar-agar 2.0 sh
Вода дистильована іншеDistilled water is different
Вилучення мікробної культури проводилося шляхом зіскоблювання клітин мікроорганізмів з поверхні скошеного агарового регламентного живильного середовища у пробірках зі штамом спорової культури. Потіму ці 09 пробірки вносили однаковий об'єм захисного середовища (кінська сироватка, 10950 сахароза ї- 195 желатина со медична і знежирене молоко), мікробні клітини перемішували із захисним середовищем. Отриману клітинну суспензію розливали по мл у пеніцилінові флакони, котрі вміщали у сосуд із сумішшю вуглекислоти зетиловим (2 спиртом (температура суміші складала - 70-80) на 10 хвилин для заморожування та переносили у чн вакуум-сушильний апарат для подальшого висушування протягом б годин. Залишкова вологість висушеної 3о мікробної культури складала 3-595. Результати наведені у таблиці 2. сExtraction of the microbial culture was carried out by scraping the cells of microorganisms from the surface of the mowed agar regulatory nutrient medium in test tubes with a spore culture strain. Then, these 09 tubes were filled with the same volume of the protective medium (horse serum, 10950 sucrose and 195 ml of medical gelatin and skimmed milk), the microbial cells were mixed with the protective medium. The obtained cell suspension was poured into penicillin vials by ml, which were placed in a vessel with a mixture of carbon dioxide and ethyl alcohol (2 alcohol (the temperature of the mixture was 70-80)) for 10 minutes for freezing and transferred to a vacuum-drying apparatus for further drying for two hours. The residual moisture of the dried 3o microbial culture was 3-595. The results are shown in Table 2. c
З таблиці видно, що після консервування мікробної спорової культури відомим способом життєздатність складала 12,995-44,995, що нижче, ніж у способі, який заявляється. При цьому залишкова вологість зразків після 6 годин висушування складала 3,1-4,8905. « не я а після консервування на агарових пластинках різної товщини мм кл/мл (х107) ю ою вв 00050109 - ою 1яявомою 18612611 51110 ввою 0вм100002860001ю («в)It can be seen from the table that after preservation of the microbial spore culture by a known method, the viability was 12,995-44,995, which is lower than in the method that is claimed. At the same time, the residual moisture of the samples after 6 hours of drying was 3.1-4.8905. " not me, but after preservation on agar plates of different thicknesses, mm cells/ml (x107)
Фо со кл/мл (х107) зв с Хвема сиовиа 00020100: 0 отолив 00290005Fo so cl/ml (х107) with Khvema siovia 00020100: 0 otolyv 00290005
ЗОжвкарося і желатин моджної лото 00олетоляи 00290005ZOzhvkarosya and gelatin of fashionable lotto 00oletolyai 00290005
Знекирен мюю 00000000 1втоожо 0 овезолих ме 0008 бо Джерела інформації: 1. Семенов С.М. Сравнительная оценка сред суспендирования при лиофилизации актиномицетовZnekiren myu 00000000 1vtoozho 0 obezolih me 0008 bo Sources of information: 1. Semenov S.M. Comparative assessment of suspending media during lyophilization of actinomycetes
ПАнтибиотики.-1973.-т.18.-Мо11.- С.1026-1029.Antibiotics.-1973.-t.18.-Mo11.- P.1026-1029.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200706914U UA27038U (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200706914U UA27038U (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA27038U true UA27038U (en) | 2007-10-10 |
Family
ID=38800645
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU200706914U UA27038U (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA27038U (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD4474C1 (en) * | 2016-07-15 | 2017-10-31 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Protective medium for lyophilization and long-term storage of Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 strain |
| MD4499C1 (en) * | 2016-07-15 | 2018-02-28 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Protective medium for the preservation of Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 strain |
| MD4498C1 (en) * | 2016-07-15 | 2018-02-28 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Protective medium for the preservation of Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 strain |
| CN108504579A (en) * | 2018-03-30 | 2018-09-07 | 丽珠集团福州福兴医药有限公司 | A kind of kanamycins process for preparing strain thereof |
-
2007
- 2007-06-19 UA UAU200706914U patent/UA27038U/en unknown
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD4474C1 (en) * | 2016-07-15 | 2017-10-31 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Protective medium for lyophilization and long-term storage of Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 strain |
| MD4499C1 (en) * | 2016-07-15 | 2018-02-28 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Protective medium for the preservation of Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 strain |
| MD4498C1 (en) * | 2016-07-15 | 2018-02-28 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Protective medium for the preservation of Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 strain |
| CN108504579A (en) * | 2018-03-30 | 2018-09-07 | 丽珠集团福州福兴医药有限公司 | A kind of kanamycins process for preparing strain thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Homolka | Preservation of live cultures of Basidiomycetes–recent methods | |
| Shepherd et al. | Laboratory maintenance of Streptomyces species | |
| McEldowney et al. | The effect of temperature and relative humidity on the survival of bacteria attached to dry solid surfaces | |
| CN105154343B (en) | A kind of easy rice aspergillus separation and store method | |
| CN112680398B (en) | Culture medium for storing organoid at room temperature and method for maintaining growth activity of organoid | |
| US6610531B1 (en) | Viable dried bacteria produced by drying in the presence of trehalose and divalent cation | |
| CN110791448B (en) | Sugarcane endophytic bacillus and application thereof | |
| CN103436448A (en) | Method for preserving strain of ustilaginoidea virens for long time | |
| UA27038U (en) | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens | |
| Peiren et al. | Impact of the freeze-drying process on product appearance, residual moisture content, viability, and batch uniformity of freeze-dried bacterial cultures safeguarded at culture collections | |
| Fages | An optimized process for manufacturing an Azospirillum inoculant for crops | |
| US5279964A (en) | Storable inoculation device containing stabilized microorganisms | |
| Pacioni et al. | Truffle-inhabiting fungi | |
| US4879239A (en) | Method of culturing freeze-dried microorganisms and resultant preparation | |
| US3671400A (en) | Bacterial controls and preparation thereof | |
| JP2014503208A (en) | Inoculum and production method | |
| WO2012012858A1 (en) | Method for packaging fungal spores in a modified atmosphere with a view to increasing the shelf life of the fungi | |
| Spencer et al. | Maintenance and culture of yeasts | |
| Seligmann Jr et al. | Freeze drying and residual moisture | |
| JP2003505024A (en) | Microbial, cell, and tissue storage | |
| Eichlerová et al. | Preservation of basidiomycete strains on perlite using different protocols | |
| Steinkraus et al. | Mass harvesting of the entomopathogenic fungus, Neozygites fresenii, from natural field epizootics in the cotton aphid, Aphis gossypii | |
| Stillman | The preservation of pneumococcus by freezing and drying | |
| CN113717905A (en) | Strain RD4 and application thereof | |
| RU2541452C1 (en) | Method for long-term storage of microalgae |