UA27038U - A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens - Google Patents
A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens Download PDFInfo
- Publication number
- UA27038U UA27038U UAU200706914U UAU200706914U UA27038U UA 27038 U UA27038 U UA 27038U UA U200706914 U UAU200706914 U UA U200706914U UA U200706914 U UAU200706914 U UA U200706914U UA 27038 U UA27038 U UA 27038U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- culture
- microbial
- agar
- drying
- spore culture
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 241000186984 Kitasatospora aureofaciens Species 0.000 title abstract 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 21
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 19
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims description 17
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 12
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 10
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 6
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 12
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 12
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 11
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 2
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 2
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Опис винаходу
Корисна модель належить до кріобіології і мікробіології й може бути використана в мікробіологічній 2 промисловості при виробництві антибіотиків.
Найбільш близьким до способу, якій заявляється, є спосіб консервування спорової культури Зігеріюотусез ацйгеоїасіепе |1). Згідно зі способом мікробну культуру вирощують на скошеному агаровому регламентному живильному середовищі протягом 14 діб при температурі 282С. Вилучення мікробної культури проводиться шляхом зіскоблювання клітин мікроорганізмів з поверхні скошеного агарового регламентного живильного середовища у пробірках зі штамом спорової культури. Потім у ці пробірки вносять однаковий об'єм одного з захисних середовищ (кінська сироватка, 1095 сахароза ї- 195 желатина медична, знежирене молоко), мікробні клітини перемішують із захисним середовищем. Отриману клітинну суспензію у скляних ампулах заморожують у сосуді із сумішшю вуглекислоти з етиловим спиртом (температура суміші -70-8022) та переносять у вакуум-сушильний апарат для подальшого висушування протягом 6 годин. Залишкова вологість ліофілізованої т5 мікробної культури складає 3-595. Життєздатність культури після ліофілізації складає 12,9-44,995. Після закінчення висушування зразки зберігають при температурі 4-10 С. Життєздатність ліофілізованої культури
Зігеріюотусез ацйгеоїасіепз зберігається протягом 2 років.
Недоліками цього способу є те, що він не забезпечує високої життєздатності мікробної культури і є го складним у виконанні.
В основу корисної моделі поставлено задачу, створити такий спосіб консервування спорової культури
Зігеріотусез ацйгеоїасіеп5, у якому б, шляхом зміни способу вилучення мікробних клітин, забезпечувалася можливість підвищити життєздатність мікробної культури, а також спростити процес консервування.
Ця задача вирішується тим, що в способі консервування спорової культури Зігеріотусез ацйгеоїасіепв, який рб Включає вирощування мікробних клітин на скошеному агаровому регламентному живильному середовищі, вилучення мікробної культури і заморожування-висушування, згідно з корисною моделлю, вилучення мікробних - клітин здійснюють на агарових пластинках товщиною 1,Омм.
Зміна умов вилучення мікробних клітин дає можливість підвищити життєздатність мікроорганізмів на 33,5905, а також скоротити процес консервування, знизити трудоємність способу й затрачуваних на його здійснення со засобів. Це пов'язане з тим, що вилучення мікробної культури здійснюється безпосередньо на агарових пластинках з ростовим середовищем і таким чином запобігаються пошкодження мікробної культури, які со відбуваються у прототипі, де пошкодження пов'язане з процесом зіскоблювання мікробних клітин. Використання о тонкого шару агарового живильного середовища скорочує процес висушування, що дає можливість скоротити час перебування мікробної культури під дією фізико-хімічних факторів, призводящих до загибелі клітин. Після - з зберігання ліофілізованих зразків при температурі 4-102С протягом 4 років життєздатність спорової культури сч
Зігеріотусевз ашгеоїасієпе складає (2,64-40,1200)х102 кл/мл, тоді як мікробна культура, яка вказана у прототипі, гине після 2 років зберігання.
Спосіб пояснюється наступними прикладами.
Приклад 1. Спорову культуру бігеріотусез ацйгеоїасіепе вирощували протягом 14 діб при температурі 2820 « на скошеному агаровому регламентному живильному середовищі при наступному співвідношенні компонентів, й с мас.бо: :з» Екстракт кукурудзяний 1,0
Крохмаль картопляний 2,0
КНоРОХ 02 ка (МНадеНРОД ом -І Мао 0,025 сасоз 0 о Агар-агар 2,0 оз 50 Вода дистильована інше со Агарові пластинки з мікробними клітинами, товщиною 1,0мм, знімали зі скошеного агарового регламентного живильного середовища гострим шпателем разом із шаром агарового середовища, потім їх містили на дно пеніцилінових флаконів. Флакони з агаровими пластинками ставили у металеві касети, які розміщували на полках установки заморожування-висушування УЗВ-2 виробництва СКТБ з ДВ ІПКІК НАН України. Зразки с заморожували зі швидкістю 22С/хв. до початкової температури висушування -202С та висушували протягом 1 години. Залишковий тиск у камері установки заморожування-висушування складав 1,33Па. Після закінчення висушування флакони із зразками укупорювали у парах сухого азоту гумовими пробками та завальцьовували металевими ковпачками. Залишкова вологість зразків після висушування складала 2905. Регідратацію 60 ліофілізованих зразків проводили протягом 10 хвилин шляхом додавання дистильованої води. Життєздатність мікробної культури оцінювали за числом сформованих макроколоній на агаровому регламентному живильному середовищі. Результати наведені у таблиці 1.
З таблиці 1 видно, що при консервуванні мікробної культури способом, який заявляється, життєздатність складала 78,69о. Залишкова вологість зразків дорівнювала 2,095. Тривалість процесу висушування становила 1 бо годину.
Приклад 2. Спосіб здійснювали аналогічно прикладу 1, за винятком того, що спори мікробної культури знімали гострим шпателем із шаром живильного середовища різної товщини: О,5мм та 1,5мм. Результати наведені в таблиці 1.
З таблиці видно, що при товщині агарових пластинок 0,5мм після консервування мікробної спорової культури її життєздатність була на 595 нижче, ніж при використанні агарових пластинок товщиною 1мм. Залишкова вологість зразків була менш на 0,595. Але тривалість процесу висушування не змінювалася і складала 1 годину.
Збільшення товщини агарових пластинок до 1,5мм приводило до зниження життєздатності спорової культури після висушування на 16,295. Залишкова вологість збільшувалася на 0,595. При цьому тривалість процесу висушування збільшувалася на 0,5 години, що підвищувало трудоємність способу і вимагало великих витрат 70 засобів (електроенергія, рідкий азот, захисні середовища та інші).
Таким чином, у порівнянні з прототипом заявлений спосіб дає можливість підвищити життєздатність мікробної культури, зменшити тривалість процесу консервування і, крім того, знизити витрати засобів.
Приклад 3. Консервування спорової культури Зігеріотусевз ацйгеоїасіепз проводили згідно з прототипом у різних захисних середовищах (кінська сироватка, 1090 сахароза «195 желатина медична і знежирене молоко).
Спорову культуру бігеріотусез ашцйгеоїасіепв, як у прототипі, вирощували протягом 14 діб при температурі 289Сб на скошеному агаровому регламентному живильному середовищі при наступному співвідношенні компонентів, мас. 90:
Екстракт кукурудзяний 1,0
Крохмаль картопляний 2,0
КНоРОХ 02 (МНО)2НРОд ОА
Мазод 0,025 сасоз 0
Агар-агар 2,0 шщ
Вода дистильована інше
Вилучення мікробної культури проводилося шляхом зіскоблювання клітин мікроорганізмів з поверхні скошеного агарового регламентного живильного середовища у пробірках зі штамом спорової культури. Потіму ці 09 пробірки вносили однаковий об'єм захисного середовища (кінська сироватка, 10950 сахароза ї- 195 желатина со медична і знежирене молоко), мікробні клітини перемішували із захисним середовищем. Отриману клітинну суспензію розливали по мл у пеніцилінові флакони, котрі вміщали у сосуд із сумішшю вуглекислоти зетиловим (2 спиртом (температура суміші складала - 70-80) на 10 хвилин для заморожування та переносили у чн вакуум-сушильний апарат для подальшого висушування протягом б годин. Залишкова вологість висушеної 3о мікробної культури складала 3-595. Результати наведені у таблиці 2. с
З таблиці видно, що після консервування мікробної спорової культури відомим способом життєздатність складала 12,995-44,995, що нижче, ніж у способі, який заявляється. При цьому залишкова вологість зразків після 6 годин висушування складала 3,1-4,8905. « не я а після консервування на агарових пластинках різної товщини мм кл/мл (х107) ю ою вв 00050109 - ою 1яявомою 18612611 51110 ввою 0вм100002860001ю («в)
Фо со кл/мл (х107) зв с Хвема сиовиа 00020100: 0 отолив 00290005
ЗОжвкарося і желатин моджної лото 00олетоляи 00290005
Знекирен мюю 00000000 1втоожо 0 овезолих ме 0008 бо Джерела інформації: 1. Семенов С.М. Сравнительная оценка сред суспендирования при лиофилизации актиномицетов
ПАнтибиотики.-1973.-т.18.-Мо11.- С.1026-1029.
Claims (1)
- 65 Формула винаходуСпосіб консервування спорової культури Зігеріотусез ацйгеоїасіепз, який включає вирощування мікробних клітин на скошеному регламентному живильному середовищі, вилучення мікробної культури і заморожування-висушування, який відрізняється тим, що вилучення мікробних клітин здійснюють на агарових пластинках товщиною 1,0 мм. Офіційний бюлетень "Промислова власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2007, М 16, 10.10.2007. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки України. - (ее) (зе) «в) ча с -с . и? іме) -І («в) о) 70 ІЧ е) с 60 б5
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
UAU200706914U UA27038U (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
UAU200706914U UA27038U (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
UA27038U true UA27038U (en) | 2007-10-10 |
Family
ID=38800645
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
UAU200706914U UA27038U (en) | 2007-06-19 | 2007-06-19 | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
UA (1) | UA27038U (uk) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MD4474C1 (ro) * | 2016-07-15 | 2017-10-31 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 |
MD4498C1 (ro) * | 2016-07-15 | 2018-02-28 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 |
MD4499C1 (ro) * | 2016-07-15 | 2018-02-28 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 |
CN108504579A (zh) * | 2018-03-30 | 2018-09-07 | 丽珠集团福州福兴医药有限公司 | 一种卡那霉素菌种制备方法 |
-
2007
- 2007-06-19 UA UAU200706914U patent/UA27038U/uk unknown
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MD4474C1 (ro) * | 2016-07-15 | 2017-10-31 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Mediu de protecţie pentru liofilizarea şi păstrarea îndelungată a tulpinii Streptomyces canosus CNMN-Ac-02 |
MD4498C1 (ro) * | 2016-07-15 | 2018-02-28 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 |
MD4499C1 (ro) * | 2016-07-15 | 2018-02-28 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Mediu de protecţie pentru conservarea tulpinii Streptomyces massasporeus CNMN-Ac-06 |
CN108504579A (zh) * | 2018-03-30 | 2018-09-07 | 丽珠集团福州福兴医药有限公司 | 一种卡那霉素菌种制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5856172A (en) | Preservation of microorganisms in a vial with a cap comprising an immobilized desiccant | |
Homolka | Preservation of live cultures of Basidiomycetes–recent methods | |
Shepherd et al. | Laboratory maintenance of Streptomyces species | |
McEldowney et al. | The effect of temperature and relative humidity on the survival of bacteria attached to dry solid surfaces | |
CN105154343B (zh) | 一种简易的稻曲菌分离和保存方法 | |
Perry | Freeze-drying and cryopreservation of bacteria | |
US6610531B1 (en) | Viable dried bacteria produced by drying in the presence of trehalose and divalent cation | |
CN110791448B (zh) | 一株甘蔗内生芽孢杆菌及其应用 | |
UA27038U (en) | A method for conservation of spore culture of streptomyces aureofaciens | |
US5279964A (en) | Storable inoculation device containing stabilized microorganisms | |
Peiren et al. | Impact of the freeze-drying process on product appearance, residual moisture content, viability, and batch uniformity of freeze-dried bacterial cultures safeguarded at culture collections | |
Pacioni et al. | Truffle-inhabiting fungi | |
US3671400A (en) | Bacterial controls and preparation thereof | |
WO2012012858A1 (pt) | Método para embalar esporos de fungos em atmosfera modificada visando ao aumento da vida-de-prateleira de fungos | |
JP2014503208A (ja) | 接種材料及び製造方法 | |
JPWO2004101736A1 (ja) | 生物培養装置および培養方法 | |
Eichlerová et al. | Preservation of basidiomycete strains on perlite using different protocols | |
Seligmann Jr et al. | Freeze drying and residual moisture | |
Spencer et al. | Maintenance and culture of yeasts | |
JP2003505024A (ja) | 微生物、細胞、および組織の貯蔵 | |
Stillman | The preservation of pneumococcus by freezing and drying | |
RU2541452C1 (ru) | Способ длительного хранения микроводорослей | |
CN109619168A (zh) | 肉桂精油在蓝莓抑菌保鲜上的应用及应用方法 | |
US3449209A (en) | Method of preparing brucella abortus vaccines | |
CN104774770B (zh) | 凤阳产气霉制剂 |