CN108504579A - 一种卡那霉素菌种制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于工业微生物领域，特别涉及一种卡那霉素菌种制备方法；包括以下步骤：步骤1：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶0.7‑1.3的体积比混合均匀后，于‑70℃冻存备用；步骤2：将步骤1中‑70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养21‑33h，所述摇瓶培养的温度为25‑30℃，所述摇瓶培养的转速为210‑250rpm；相比传统的通过沙土管保存卡那霉素孢子的形式，不需要一代斜面和二代斜面的活化培养，大大节省了卡那霉素菌种的制备周期。
Description
技术领域
本发明属于工业微生物领域，特别涉及一种卡那霉素菌种制备方法。
背景技术
卡那霉素(别名康丝菌素)为一种由卡那链霉菌产生的氨基糖苷类抗生素，用于治疗大肠杆菌、变形杆菌属(吲哚阳性或吲哚阴性)、产气杆菌、肺炎杆菌、粘质沙雷菌、不动杆菌属和葡萄球菌属所致的感染。传统的卡那霉素菌种制备方法中，卡那霉素菌种需要依次经过沙土管培养、1代斜面培养、2代斜面培养、摇瓶种子培养后送种至车间，大约需要耗费11天时间，生产需要提前12天进行准备，卡那霉素菌种制备周期长。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：提供一种制备时间短的卡那霉素菌种制备方法。
为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
一种卡那霉素菌种制备方法，包括以下步骤：
步骤1：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶0.7-1.3的体积比混合均匀后，于-70℃冻存备用；
步骤2：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养21-33h，所述摇瓶培养的温度为25-30℃，所述摇瓶培养的转速为210-250rpm。
本发明的有益效果在于：本发明涉及的卡那霉素菌种制备方法中，将摇瓶得到的菌丝液与甘油混合均匀后，直接于-70℃冻存；当需要发酵生产卡那霉素时，只需要将上述冻存的菌丝甘油混合液解冻后，摇瓶培养21-33h即可，相比传统的通过沙土管保存卡那霉素孢子的形式，不需要一代斜面和二代斜面的活化培养，大大节省了卡那霉素菌种的制备周期，卡那霉素的发酵生产调度灵活方便，只需要2天时间准备就可以送种。
具体实施方式
为详细说明本发明的技术内容、所实现目的及效果，以下结合实施方式予以说明。
本发明最关键的构思在于：将摇瓶得到的菌丝液与甘油混合均匀后，直接于-70℃冻存；当需要发酵生产卡那霉素时，只需要将上述冻存的菌丝甘油混合液解冻后，摇瓶培养21-33h即可，大大节省了卡那霉素菌种的制备周期。
本发明提供一种卡那霉素菌种制备方法，包括以下步骤：
步骤1：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶0.7-1.3的体积比混合均匀后，于-70℃冻存备用；
步骤2：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养21-33h，所述摇瓶培养的温度为25-30℃，所述摇瓶培养的转速为210-250rpm。
上述卡那霉素菌种制备方法中，将摇瓶得到的菌丝液与甘油混合均匀后，直接于-70℃冻存；当需要发酵生产卡那霉素时，只需要将上述冻存的菌丝甘油混合液解冻后，摇瓶培养21-33h即可，相比传统的通过沙土管保存卡那霉素孢子的形式，不需要一代斜面和二代斜面的活化培养，大大节省了卡那霉素菌种的制备周期，卡那霉素的发酵生产调度灵活方便，只需要2天时间准备就可以送种。
进一步的，上述卡那霉素菌种制备方法中，所述步骤1为：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶0.7的体积比在三角瓶中混合并摇匀后，通过移液器转移至冻存管，将冻存管于-70℃冻存备用。
进一步的，上述卡那霉素菌种制备方法中，所述步骤1为：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶1.3的体积比在三角瓶中混合并摇匀后，通过移液器转移至冻存管，将冻存管于-70℃冻存备用。
进一步的，上述卡那霉素菌种制备方法中，所述步骤1为：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶1的体积比在三角瓶中混合并摇匀后，通过移液器转移至冻存管，将冻存管于-70℃冻存备用。
进一步的，上述卡那霉素菌种制备方法中，所述步骤2为：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养21h，所述摇瓶培养的温度为25℃，所述摇瓶培养的转速为210rpm。
进一步的，上述卡那霉素菌种制备方法中，所述步骤2为：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养33h，所述摇瓶培养的温度为30℃，所述摇瓶培养的转速为250rpm。
进一步的，上述卡那霉素菌种制备方法中，所述步骤2为：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养27h，所述摇瓶培养的温度为27.5℃，所述摇瓶培养的转速为230rpm。
实施例1
本发明提供一种卡那霉素菌种制备方法，包括以下步骤：
步骤1：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶0.7的体积比混合均匀后，于-70℃冻存备用；
步骤2：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养21h，所述摇瓶培养的温度为25℃，所述摇瓶培养的转速为210rpm。
实施例2
本发明提供一种卡那霉素菌种制备方法，包括以下步骤：
步骤1：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶1.3的体积比混合均匀后，于-70℃冻存备用；
步骤2：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养33h，所述摇瓶培养的温度为30℃，所述摇瓶培养的转速为250rpm。
实施例3
本发明提供一种卡那霉素菌种制备方法，包括以下步骤：
步骤1：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶1的体积比混合均匀后，于-70℃冻存备用；
步骤2：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养27h，所述摇瓶培养的温度为27.5℃，所述摇瓶培养的转速为230rpm。
综上所述，本发明涉及的卡那霉素菌种制备方法中，将摇瓶得到的菌丝液与甘油混合均匀后，直接于-70℃冻存；当需要发酵生产卡那霉素时，只需要将上述冻存的菌丝甘油混合液解冻后，摇瓶培养21-33h即可，相比传统的通过沙土管保存卡那霉素孢子的形式，不需要一代斜面和二代斜面的活化培养，大大节省了卡那霉素菌种的制备周期，卡那霉素的发酵生产调度灵活方便，只需要2天时间准备就可以送种。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等同变换，或直接或间接运用在相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (7)
1.一种卡那霉素菌种制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶0.7-1.3的体积比混合均匀后，于-70℃冻存备用；
步骤2：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养21-33h，所述摇瓶培养的温度为25-30℃，所述摇瓶培养的转速为210-250rpm。
2.根据权利要求1所述的卡那霉素菌种制备方法，其特征在于，所述步骤1为：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶0.7的体积比在三角瓶中混合并摇匀后，通过移液器转移至冻存管，将冻存管于-70℃冻存备用。
3.根据权利要求1所述的卡那霉素菌种制备方法，其特征在于，所述步骤1为：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶1.3的体积比在三角瓶中混合并摇匀后，通过移液器转移至冻存管，将冻存管于-70℃冻存备用。
4.根据权利要求1所述的卡那霉素菌种制备方法，其特征在于，所述步骤1为：将卡那霉素菌种的菌丝液在无菌条件下，与甘油按1∶1的体积比在三角瓶中混合并摇匀后，通过移液器转移至冻存管，将冻存管于-70℃冻存备用。
5.根据权利要求1所述的卡那霉素菌种制备方法，其特征在于，所述步骤2为：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养21h，所述摇瓶培养的温度为25℃，所述摇瓶培养的转速为210rpm。
6.根据权利要求1所述的卡那霉素菌种制备方法，其特征在于，所述步骤2为：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养33h，所述摇瓶培养的温度为30℃，所述摇瓶培养的转速为250rpm。
7.根据权利要求1所述的卡那霉素菌种制备方法，其特征在于，所述步骤2为：将步骤1中-70℃冻存的菌丝液解冻，在无菌条件下，吸取解冻的菌丝液移入药瓶种子培养基中摇瓶培养27h，所述摇瓶培养的温度为27.5℃，所述摇瓶培养的转速为230rpm。
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