CN113174386B - 一种粪污堆肥用复合发酵菌剂 - Google Patents

一种粪污堆肥用复合发酵菌剂 Download PDF

Info

Publication number
CN113174386B
CN113174386B CN202110458484.4A CN202110458484A CN113174386B CN 113174386 B CN113174386 B CN 113174386B CN 202110458484 A CN202110458484 A CN 202110458484A CN 113174386 B CN113174386 B CN 113174386B
Authority
CN
China
Prior art keywords
inoculating
fermentation
culture medium
paraffin
bacillus subtilis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110458484.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113174386A (zh
Inventor
许生军
李洁
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xingyuan Environment Technology Co ltd
Xinzhi Agricultural Ecological Technology Co ltd
Original Assignee
Xingyuan Environment Technology Co ltd
Xinzhi Agricultural Ecological Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Xingyuan Environment Technology Co ltd, Xinzhi Agricultural Ecological Technology Co ltd filed Critical Xingyuan Environment Technology Co ltd
Priority to CN202110458484.4A priority Critical patent/CN113174386B/zh
Publication of CN113174386A publication Critical patent/CN113174386A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113174386B publication Critical patent/CN113174386B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/04—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F17/00—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation
    • C05F17/20—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation using specific microorganisms or substances, e.g. enzymes, for activating or stimulating the treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/10—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a carbohydrate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/14—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00—Technologies for solid waste management
    • Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse

Abstract

本发明涉及粪污处理技术领域，尤其涉及一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，包括嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、好氧乳酸杆菌、白腐菌、褐腐菌和绿色木霉，嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌外包裹有第一密封层，白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌装载在第一密封层外，白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌外包裹有第二密封层，第二密封层外包裹有胶囊，使复合微生物菌剂在使用时，能够使相应的微生物菌种完全发酵，并发挥出各自的效果，缩短整体的发酵时间，提高粪污堆肥的肥效。

Description

一种粪污堆肥用复合发酵菌剂
技术领域
本发明涉及粪污处理技术领域，尤其涉及一种粪污堆肥用复合发酵菌剂。
背景技术
随着我国社会经济的快速发展，农业现代化水平日趋提高，各种特色养殖业、种植业在全国各地蓬勃兴起，不但丰富了日益扩大的市场需求，而且大大带动了广大农民收入水平的提高。农作物种植、肉牛、奶牛养殖等农牧业在部分省市地区已形成相对完备的产业结构，形成了从种、养到产后初加工、产品深加工、高附加值产品提取、国内国际贸易等的一整套产业体系。传统堆肥方法由于初期有效微生物数量少，需要一定时间才能繁殖起来，存在发酵时间长，臭气排放大，营养元素流失多，资源浪费严重等问题，因此，研究者们开始使用向堆料中接种复合微生物菌剂来缩短发酵周期、促进堆肥快速腐熟和提高堆肥产品质量。
近年来微生物菌剂在粪污堆肥方面已有所应用，但仍存在这许多问题，如一些微生物效果单一，导致肥效效果不尽理想，一些复合微生物菌剂在使用时，由于微生物的生存温度不同，在发酵的过程中，导致一些微生物在还没有完全作用时，已经失活，导致并未起到相应的效果，进而导致发酵时间变长，肥效不理想。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的是提供一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，使复合微生物菌剂在使用时，能够使相应的微生物菌种完全发酵，并发挥出各自的效果，缩短整体的发酵时间，提高粪污堆肥的肥效。
本发明通过以下技术手段解决上述技术问题：
一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，包括嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、好氧乳酸杆菌、白腐菌、褐腐菌和绿色木霉，所述嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌外包裹有第一密封层，所述白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌装载在第一密封层外，所述白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌外包裹有第二密封层，所述第二密封层外包裹有胶囊。
通过将嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、好氧乳酸杆菌、白腐菌、褐腐菌和绿色木霉分别包裹在不同的密封层内，使复合菌剂在使用时，能够分层释放，从而适应不同的发酵温度，使相应的菌种能够完全发挥作用，避免全部菌种一起加入时，有些菌种还没发挥相应的作用就失活，导致粪污的发酵时间延长，粪污并未完全分解。
进一步，嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌呈糊状，所述嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的发酵液之比为2:4。
通过控制嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的加入菌液比，便于嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在后续的处理中，形成糊状，便于整体的运输。
进一步，所述第一密封层为石蜡，所述嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌包裹在石蜡内。
石蜡为无机材料，不会被嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌利用，且石蜡的熔点为47-64℃，在常温时，石蜡为固体，能够将嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌包裹，不会泄漏，且在刚进入粪污中不会被融化，当粪污发酵到一定程度时，粪污内的温度升高到一定程度后石蜡才会融化，将嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌释放出来，进行较高温度下的发酵。
进一步，所述第二密封层为壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐双向可逆温敏凝胶，所述凝胶与石蜡之间形成有间隙，所述白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌装载在凝胶和石蜡之间。
壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐双向可逆温敏凝胶，是一种能够在4℃以下以及40℃以上凝固的凝胶，在10-25℃的条件下处于流动性更为活跃的液态，将白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌包裹在石蜡和凝胶之间，使菌剂在使用时，在较低温度和常温下，能够将白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌释放，使白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌能够20-30℃的条件下进行发酵，将粪污中的木质纤维素降解以及增强粪污中的肥效。
本发明还公开了一种粪污堆肥用复合发酵菌剂的制备方法，包括以下步骤：
S1：将嗜热脂肪芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在58℃的条件下水浴培养24-30H，得到嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液，备用；将枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在35℃的条件下水浴培养10-15H，得到枯草芽孢杆菌发酵菌液，备用；将白腐菌接种到培养基上，在25-28℃的条件下水浴培养1-2天，得到白腐菌菌丝，备用；将褐腐菌接种到培养基上，在20-23℃的条件下水浴培养1-2天，得到褐腐菌菌丝，备用；将绿色木霉接种到培养基上，在28-30℃的条件下水浴培养3-5天，得到绿色木霉菌丝，备用；将好氧乳酸杆菌接种到发酵培养基上，在26-30℃的条件下水浴培养4-6天，得到好氧乳酸杆菌发酵菌液；
S2：将石蜡在29℃的条件下软化，将石蜡制备成圆球状，所述圆球的顶部有开口，所述圆球的四周有多个凸棱，将圆球的外表面分为多个区域，相邻两个所述凸棱的底部有承载台，将S1步骤中制备的嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液按照2：4的比例从圆球的顶部开口加入圆球内，再加入培养物质，搅拌均匀，再用软化石蜡将开口封闭，将承载两个菌液的圆球置于低温条件下，冷冻20-30min，得到第一密封层封闭的嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液，备用；
S3：将经过S2步骤处理的石蜡取出，在相邻两个凸棱之间涂覆不同的培养基，分别将白腐菌菌丝、褐腐菌菌丝、绿色木霉菌丝接种到相应的培养基上，将好氧乳酸杆菌发酵菌液喷涂在相应的培养基；
S4：于25℃条件下，将经过S3步骤处理的石蜡置于壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液内，然后将整个石蜡和溶液置于冷冻室内，于1-3℃的条件下，将壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液形成凝胶，并包覆在石蜡上，得到发酵菌剂；
S5：将S4步骤制备得到的复合发酵菌剂置于胶囊内，并在1-3℃的条件下，保存、储藏。
通过将嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌包裹在石蜡形成的球体内，并在低温条件下冷冻呈糊状，使嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌处于休眠状态，并便于保存、运输，再将白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌包裹在石蜡球体的外部，并用凝胶将白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌封闭，并在1-3℃的条件下，使凝胶凝固，并再次降低嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌的活性，使其处于休眠状态，避免菌体失活，最后再用胶囊将凝胶包裹，便于菌体的保存和运输，且使菌体在使用时，能够分层释放相应的菌种，使菌种发挥相应的作用，提高发酵效率，提高粪污肥效。
进一步，所述S1步骤中，嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和好氧乳酸杆菌在发酵培养前，经过菌种活化处理。
通过活化处理，加强嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和好氧乳酸杆菌的活性，便于在后续的处理步骤中，避免在保存过程中，失活。
进一步，所述嗜热脂肪芽孢杆菌活化的处理步骤为：将嗜热脂肪芽孢杆菌划线接种于营养琼脂培养基上，在60℃的条件下培养2-3天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨和氯化钠形成的液体培养基上，得到S1步骤中的嗜热脂肪芽孢杆菌。
进一步，所述枯草芽孢杆菌活化的处理步骤为：将枯草芽孢杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在32℃的条件下培养3-5天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到S1步骤中的枯草芽孢杆菌。
进一步，所述好氧乳酸杆菌活化的处理步骤为：将好氧乳酸杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在23℃的条件下培养72H，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到S1步骤中的好氧乳酸杆菌。
进一步，所述S2步骤中的低温条件为5-10℃。
本发明的有益效果：本发明的复合发酵菌剂，能够保存较长时间，且在使用时，能够分层释放，将不同的菌种在不同的粪污发酵条件下发酵，使不同的菌种都能充分发挥作用，使菌种能够完全起到作用，降低粪污的发酵时间，提高粪污的堆肥效果，避免有些菌种在还没发挥出作用时，就由于粪污发酵温度升高，导致有些菌种失活，从而延长粪污的发酵时间，降低粪污的肥效的问题。
附图说明
图1是本发明实施例中粪污堆肥过程中温度变化的示意图；
图2是本发明实施例中氮素损失的示意图；
具体实施方式
以下将结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明：
本发明的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，包括嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、好氧乳酸杆菌、白腐菌、褐腐菌和绿色木霉，嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌外包裹有石蜡球体，白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌装载在石蜡球体外，白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌外包裹有壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐双向可逆温敏凝胶，壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐双向可逆温敏凝胶外包裹有胶囊，通过将不同的菌种包裹在不同的密封层内，使复合菌剂在使用时，能够相应的分成释放不同的菌种，从而避免菌种失活，提高发酵效率，提高肥效。
实施例1，复合发酵菌剂的制备一
S1：将嗜热脂肪芽孢杆菌划线接种于营养琼脂培养基上，在60℃的条件下培养2天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨和氯化钠形成的液体培养基上，得到活化处理的嗜热脂肪芽孢杆菌，将活化后的嗜热脂肪芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在58℃的条件下水浴培养30H，得到嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液，备用；将枯草芽孢杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在32℃的条件下培养3天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到活化的枯草芽孢杆菌，将活化后的枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在35℃的条件下水浴培养15H，得到枯草芽孢杆菌发酵菌液，备用；将白腐菌接种到培养基上，在25℃的条件下水浴培养2天，得到白腐菌菌丝，备用；将褐腐菌接种到培养基上，在20℃的条件下水浴培养2天，得到褐腐菌菌丝，备用；将绿色木霉接种到培养基上，在28℃的条件下水浴培养5天，得到绿色木霉菌丝，备用；将好氧乳酸杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在23℃的条件下培养72H，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到活化的好氧乳酸杆菌，将活化后的好氧乳酸杆菌接种到发酵培养基上，在26℃的条件下水浴培养6天，得到好氧乳酸杆菌发酵菌液；
S2：将石蜡在29℃的条件下软化，将石蜡制备成圆球状，所述圆球的顶部有开口，所述圆球的四周有多个凸棱，将圆球的外表面分为多个区域，相邻两个所述凸棱的底部有承载台，将S1步骤中制备的嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液按照2：4的比例从圆球的顶部开口加入圆球内，再加入培养物质，搅拌均匀，再用软化石蜡将开口封闭，将承载两个菌液的圆球置于5℃下，冷冻20min，得到石蜡封闭的嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液，并在冷冻条件下，使嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌呈糊状包裹在石蜡内，备用；
S3：将经过S2步骤处理的石蜡取出，在相邻两个凸棱之间涂覆不同的培养基，分别将白腐菌菌丝、褐腐菌菌丝、绿色木霉菌丝接种到相应的培养基上，将好氧乳酸杆菌发酵菌液喷涂在相应的培养基；
S4：于25℃条件下，将经过S3步骤处理的石蜡置于壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液内，然后将整个石蜡和溶液置于冷冻室内，于3℃的条件下，将壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液形成凝胶，并包覆在石蜡上，得到发酵菌剂；
S5：将S4步骤制备得到的复合发酵菌剂置于胶囊内，并在1-3℃的条件下，保存、储藏，得到复合发酵菌剂。
实施例2，复合发酵菌剂的制备二
S1：将嗜热脂肪芽孢杆菌划线接种于营养琼脂培养基上，在60℃的条件下培养2.5天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨和氯化钠形成的液体培养基上，得到活化处理的嗜热脂肪芽孢杆菌，将活化后的嗜热脂肪芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在58℃的条件下水浴培养27H，得到嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液，备用；将枯草芽孢杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在32℃的条件下培养4天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到活化的枯草芽孢杆菌，将活化后的枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在35℃的条件下水浴培养13H，得到枯草芽孢杆菌发酵菌液，备用；将白腐菌接种到培养基上，在27℃的条件下水浴培养1.5天，得到白腐菌菌丝，备用；将褐腐菌接种到培养基上，在21℃的条件下水浴培养1.5天，得到褐腐菌菌丝，备用；将绿色木霉接种到培养基上，在29℃的条件下水浴培养4天，得到绿色木霉菌丝，备用；将好氧乳酸杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在23℃的条件下培养72H，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到活化的好氧乳酸杆菌，将活化后的好氧乳酸杆菌接种到发酵培养基上，在28℃的条件下水浴培养5天，得到好氧乳酸杆菌发酵菌液；
S2：将石蜡在29℃的条件下软化，将石蜡制备成圆球状，所述圆球的顶部有开口，所述圆球的四周有多个凸棱，将圆球的外表面分为多个区域，相邻两个所述凸棱的底部有承载台，将S1步骤中制备的嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液按照2：4的比例从圆球的顶部开口加入圆球内，再加入培养物质，搅拌均匀，再用软化石蜡将开口封闭，将承载两个菌液的圆球置于8℃下，冷冻25min，得到石蜡封闭的嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液，并在冷冻条件下，使嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌呈糊状包裹在石蜡内，备用；
S3：将经过S2步骤处理的石蜡取出，在相邻两个凸棱之间涂覆不同的培养基，分别将白腐菌菌丝、褐腐菌菌丝、绿色木霉菌丝接种到相应的培养基上，将好氧乳酸杆菌发酵菌液喷涂在相应的培养基；
S4：于25℃条件下，将经过S3步骤处理的石蜡置于壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液内，然后将整个石蜡和溶液置于冷冻室内，于3℃的条件下，将壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液形成凝胶，并包覆在石蜡上，得到发酵菌剂；
S5：将S4步骤制备得到的复合发酵菌剂置于胶囊内，并在1-3℃的条件下，保存、储藏，得到复合发酵菌剂。
实施例3，复合发酵菌剂的制备二
S1：将嗜热脂肪芽孢杆菌划线接种于营养琼脂培养基上，在60℃的条件下培养3天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨和氯化钠形成的液体培养基上，得到活化处理的嗜热脂肪芽孢杆菌，将活化后的嗜热脂肪芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在58℃的条件下水浴培养24H，得到嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液，备用；将枯草芽孢杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在32℃的条件下培养5天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到活化的枯草芽孢杆菌，将活化后的枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在35℃的条件下水浴培养10H，得到枯草芽孢杆菌发酵菌液，备用；将白腐菌接种到培养基上，在28℃的条件下水浴培养1天，得到白腐菌菌丝，备用；将褐腐菌接种到培养基上，在23℃的条件下水浴培养1天，得到褐腐菌菌丝，备用；将绿色木霉接种到培养基上，在30℃的条件下水浴培养3天，得到绿色木霉菌丝，备用；将好氧乳酸杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在23℃的条件下培养72H，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到活化的好氧乳酸杆菌，将活化后的好氧乳酸杆菌接种到发酵培养基上，在30℃的条件下水浴培养4天，得到好氧乳酸杆菌发酵菌液；
S2：将石蜡在29℃的条件下软化，将石蜡制备成圆球状，所述圆球的顶部有开口，所述圆球的四周有多个凸棱，将圆球的外表面分为多个区域，相邻两个所述凸棱的底部有承载台，将S1步骤中制备的嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液按照2：4的比例从圆球的顶部开口加入圆球内，再加入培养物质，搅拌均匀，再用软化石蜡将开口封闭，将承载两个菌液的圆球置于10℃下，冷冻30min，得到石蜡封闭的嗜热脂肪芽孢杆发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液，并在冷冻条件下，使嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌呈糊状包裹在石蜡内，备用；
S3：将经过S2步骤处理的石蜡取出，在相邻两个凸棱之间涂覆不同的培养基，分别将白腐菌菌丝、褐腐菌菌丝、绿色木霉菌丝接种到相应的培养基上，将好氧乳酸杆菌发酵菌液喷涂在相应的培养基；
S4：于25℃条件下，将经过S3步骤处理的石蜡置于壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液内，然后将整个石蜡和溶液置于冷冻室内，于3℃的条件下，将壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液形成凝胶，并包覆在石蜡上，得到发酵菌剂；
S5：将S4步骤制备得到的复合发酵菌剂置于胶囊内，并在1-3℃的条件下，保存、储藏，得到复合发酵菌剂。
对实施例1、实施例2和实施例3制备出的复合发酵菌剂，置于发酵箱内，对粪污进行发酵处理，并将不添加复合发酵菌剂，而是添加市面上常见的粪污发酵剂的发酵箱作为对照，试验结果如下，添加了复合发酵菌剂的粪污升温较快，在5天内温度升到60℃以上，市面上普通的发酵剂在10天温度才升到60℃以上，且添加复合发酵菌剂的发酵箱维持60℃在22天以上，市面上普通的发酵剂维持60℃以上在13天左右，发酵完成后，检测粪污堆肥内的氮素，添加了实施例1、实施例2和实施例3的发酵箱，氮素损失12.41％左右，对照组氮素损失21.36％左右。从实验结果可以得出，在实施例1、实施例2和实施例3制备出的复合发酵菌剂能够使相应的微生物菌种完全发酵，缩短粪污的发酵时间，提高粪污堆肥效果。
对实施例1、实施例2和实施例3制备出的复合发酵菌剂进行保存时间测试，测试结果如下：
Figure BDA0003041373670000081
从实验结果可知，实施例1、实施例2和实施例3制备出的复合发酵菌剂能够较长时间保存。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。本发明未详细描述的技术、形状、构造部分均为公知技术。

Claims (10)

1.一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，包括嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、好氧乳酸杆菌、白腐菌、褐腐菌和绿色木霉，所述嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌外包裹有第一密封层，所述白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌装载在第一密封层外，所述白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌外包裹有第二密封层，所述第二密封层外包裹有胶囊。
2.根据权利要求1所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌呈糊状，所述嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的发酵液之比为2:4。
3.根据权利要求2所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述第一密封层为石蜡，所述嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌包裹在石蜡内。
4.根据权利要求3所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述第二密封层为壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐双向可逆温敏凝胶，所述凝胶与石蜡之间形成有间隙，所述白腐菌、褐腐菌、绿色木霉和好氧乳酸杆菌装载在凝胶和石蜡之间。
5.根据权利要求4所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述复合发酵菌剂的制备包括以下步骤：
S1：将嗜热脂肪芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在58℃的条件下水浴培养24-30H，得到嗜热脂肪芽孢杆菌发酵菌液，备用；将枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基上，在35℃的条件下水浴培养10-15H，得到枯草芽孢杆菌发酵菌液，备用；将白腐菌接种到培养基上，在25-28℃的条件下水浴培养1-2天，得到白腐菌菌丝，备用；将褐腐菌接种到培养基上，在20-23℃的条件下水浴培养1-2天，得到褐腐菌菌丝，备用；将绿色木霉接种到培养基上，在28-30℃的条件下水浴培养3-5天，得到绿色木霉菌丝，备用；将好氧乳酸杆菌接种到发酵培养基上，在26-30℃的条件下水浴培养4-6天，得到好氧乳酸杆菌发酵菌液；
S2：将石蜡在29℃的条件下软化，将石蜡制备成圆球状，所述圆球的顶部有开口，所述圆球的四周有多个凸棱，将圆球的外表面分为多个区域，相邻两个所述凸棱的底部有承载台，将S1步骤中制备的嗜热脂肪芽孢杆菌发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液按照2：4的比例从圆球的顶部开口加入圆球内，再加入培养物质，搅拌均匀，再用软化石蜡将开口封闭，将承载两个菌液的圆球置于低温条件下，冷冻20-30min，得到第一密封层封闭的嗜热脂肪芽孢杆菌发酵菌液和枯草芽孢杆菌发酵菌液，备用；
S3：将经过S2步骤处理的石蜡取出，在相邻两个凸棱之间涂覆不同的培养基，分别将白腐菌菌丝、褐腐菌菌丝、绿色木霉菌丝接种到相应的培养基上，将好氧乳酸杆菌发酵菌液喷涂在相应的培养基；
S4：于25℃条件下，将经过S3步骤处理的石蜡置于壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液内，然后将整个石蜡和溶液置于冷冻室内，于1-3℃的条件下，将壳聚糖/壳聚糖季铵盐-甘油磷酸盐溶液形成凝胶，并包覆在石蜡上，得到发酵菌剂；
S5：将S4步骤制备得到的复合发酵菌剂置于胶囊内，并在1-3℃的条件下，
保存、储藏。
6.根据权利要求5所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述S1步骤中，嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和好氧乳酸杆菌在发酵培养前，经过菌种活化处理。
7.根据权利要求6所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述嗜热脂肪芽孢杆菌活化的处理步骤为：将嗜热脂肪芽孢杆菌划线接种于营养琼脂培养基上，在60℃的条件下培养2-3天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨和氯化钠形成的液体培养基上，得到S1步骤中的嗜热脂肪芽孢杆菌。
8.根据权利要求7所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌活化的处理步骤为：将枯草芽孢杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在32℃的条件下培养3-5天，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到S1步骤中的枯草芽孢杆菌。
9.根据权利要求8所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述好氧乳酸杆菌活化的处理步骤为：将好氧乳酸杆菌划线接种到营养琼脂培养基上，在23℃的条件下培养72H，划线接种活化培养5次形成单菌落，然后将单菌落接种到牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和水形成的液体培养基上，得到S1步骤中的好氧乳酸杆菌。
10.根据权利要求9所述的一种粪污堆肥用复合发酵菌剂，其特征在于，所述S2步骤中的低温条件为5-10℃。
CN202110458484.4A 2021-04-27 2021-04-27 一种粪污堆肥用复合发酵菌剂 Active CN113174386B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110458484.4A CN113174386B (zh) 2021-04-27 2021-04-27 一种粪污堆肥用复合发酵菌剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110458484.4A CN113174386B (zh) 2021-04-27 2021-04-27 一种粪污堆肥用复合发酵菌剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113174386A CN113174386A (zh) 2021-07-27
CN113174386B true CN113174386B (zh) 2022-06-24

Family

ID=76926440

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110458484.4A Active CN113174386B (zh) 2021-04-27 2021-04-27 一种粪污堆肥用复合发酵菌剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113174386B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114105688A (zh) * 2021-12-23 2022-03-01 太原理工大学 一种高效增热型堆肥自热颗粒及其制备方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103232944A (zh) * 2013-04-25 2013-08-07 南京林业大学 一种秸秆与粪便混合堆肥微生物菌剂
CN108624532A (zh) * 2018-05-15 2018-10-09 江苏世邦生物工程科技有限公司 一种用于土壤修复的核壳结构微生物制剂及其制备方法和应用
CN109055262A (zh) * 2018-08-10 2018-12-21 江苏思威博生物科技有限公司 一种用于畜禽粪便低温堆肥发酵的复合微生物菌剂及其制备方法
CN109355218A (zh) * 2018-10-18 2019-02-19 东北农业大学 用于畜禽粪便堆肥快速升温除味的多功能发酵复合菌剂及其制备方法与应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103232944A (zh) * 2013-04-25 2013-08-07 南京林业大学 一种秸秆与粪便混合堆肥微生物菌剂
CN108624532A (zh) * 2018-05-15 2018-10-09 江苏世邦生物工程科技有限公司 一种用于土壤修复的核壳结构微生物制剂及其制备方法和应用
CN109055262A (zh) * 2018-08-10 2018-12-21 江苏思威博生物科技有限公司 一种用于畜禽粪便低温堆肥发酵的复合微生物菌剂及其制备方法
CN109355218A (zh) * 2018-10-18 2019-02-19 东北农业大学 用于畜禽粪便堆肥快速升温除味的多功能发酵复合菌剂及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Microbial additives in the composting process;Noelly de Queiroz Ribeiro1等;《Ciência e Agrotecnologia》;20170430;第159-168页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113174386A (zh) 2021-07-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103598420B (zh) 一种香蕉茎叶青贮的微生物复合菌剂及其制备方法
CN102210332A (zh) 促生根抗重茬香蕉种植土壤生态修复微生物菌剂及其制备方法
CN101914443B (zh) 低温快速启动的发酵床养猪复合微生物菌剂及其制备方法
CN107176891A (zh) 一种能促进秸秆快速降解的生物制剂及其生产工艺
CN104177138B (zh) 一种以固体发酵技术制备的生物菌肥及其应用
CN103504123A (zh) 一种具复合酶功能的发酵豆粕及其制备方法
CN107603916A (zh) 一种微生物组合菌剂，其制备方法及应用
CN108795816A (zh) 一种微生物菌剂及该微生物菌剂的制备、使用工艺
CN111533586B (zh) 一种鸡粪生物有机肥及其制备方法
CN109971682A (zh) 一种用于水产养殖的em菌液及其制作方法和应用
CN106905047A (zh) 一种生态有机肥及其制备方法
CN109055262A (zh) 一种用于畜禽粪便低温堆肥发酵的复合微生物菌剂及其制备方法
CN113174386B (zh) 一种粪污堆肥用复合发酵菌剂
CN103289930A (zh) 一种微生物腐熟菌剂及其制备方法和应用
CN107312735A (zh) 一种酵母菌和乳酸菌混合同步发酵制备微生态制剂的方法及应用
CN104531588A (zh) 一种防控连作烟草青枯病的高效拮抗菌株、包括该菌株的微生物有机肥料、生产方法及应用
CN103160453B (zh) 一种降解亚硝酸盐的微生态制剂的制备方法、所得微生态制剂及其用途
CN111394257B (zh) 一种利用菌菇渣和生鲜牛粪定向发酵制备哈茨木霉菌种的方法
CN101451107A (zh) 一种大量制备粘帚霉厚垣孢子的方法
CN107746356A (zh) 盐碱地微生物生态改良菌肥的制备方法及其施用方法
CN105420130A (zh) 一种饲用酿酒酵母液固两相发酵方法
CN110194694A (zh) 由貂狐貉粪污制备的草莓专用抗枯萎生物有机肥及其制备方法
CN117467577A (zh) 一种红薯泥发酵产物及其应用
Listya et al. Exploration of local microorganisms from rumen and their potential to make silage from agricultural waste
CN107974423A (zh) 一种土壤生物活化剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant