MD4465C1 - Procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare - Google Patents
Procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare Download PDFInfo
- Publication number
- MD4465C1 MD4465C1 MDA20140089A MD20140089A MD4465C1 MD 4465 C1 MD4465 C1 MD 4465C1 MD A20140089 A MDA20140089 A MD A20140089A MD 20140089 A MD20140089 A MD 20140089A MD 4465 C1 MD4465 C1 MD 4465C1
- Authority
- MD
- Moldova
- Prior art keywords
- sample
- optical density
- dehydrogenase activity
- tff
- ttc
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 29
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 title claims abstract description 27
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 24
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 claims abstract description 10
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 claims abstract description 8
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC=CC=C1C(N=[N+]1C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 7
- 238000006356 dehydrogenation reaction Methods 0.000 claims abstract description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims abstract description 5
- BEIHVSJTPTXQGB-QIXACUJNSA-N n'-anilino-n-phenyliminobenzenecarboximidamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1N\N=C(C=1C=CC=CC=1)\N=NC1=CC=CC=C1 BEIHVSJTPTXQGB-QIXACUJNSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 8
- 238000012937 correction Methods 0.000 claims description 6
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 claims description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 4
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical class [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 28
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 7
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N methyl pentane Natural products CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- LNOBZXNCABUBKK-UHFFFAOYSA-N 2,3,5-triphenyltetrazolium Chemical compound C1=CC=CC=C1C(N=[N+]1C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 LNOBZXNCABUBKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 238000003975 animal breeding Methods 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000000696 methanogenic effect Effects 0.000 description 1
- -1 mono-substituted sodium phosphate Chemical class 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000010865 sewage Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare.Procedeul, conform invenţiei, prevede introducerea în proba analizată a soluţiei de glucoză şi de clorură de 2,3,5-trifeniltetrazoliu (TTC), incubarea amestecului, extragerea ulterioară cu alcool, determinarea colorimetrică a densităţii optice a soluţiei colorate de trifenilformazan formate în rezultatul reacţiei de dehidrogenare a TTC cu calcularea ulterioară a activităţii dehidrogenazei, totodată, în componenţa amestecului supus analizei se introduce scualenă şi soluţie tampon de fosfat cu pH-ul 7,2, procesul de incubare având loc în condiţii mezofile timp de 25…30 min cu agitare ulterioară, iar calcularea activităţii dehidrogenazei se efectuează după formulă.
Description
Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare.
Invenţia poate fi aplicată pentru controlul expres al procesului de fermentare anaerobă a materiei prime organice în tehnologia de biogaz şi pentru dirijarea acestui proces. Activitatea sumară a fermenţilor dehidrogenezici reprezintă un indicator al activităţii biologice generale în procesul de fermentare anaerobă, care caracterizează activitatea microorganismelor însuşi, determină viteza şi profunzimea proceselor biochimice din bioreactor.
Este cunoscut procedeul de control al procesului de fermentare anaerobă a materiei prime organice, care constă în determinarea analitică a materiei prime organice, care include determinarea analitică a indicatorilor de consum chimic al oxigenului (CCO) şi consum biochimic (CBO) al oxigenului în biomasa supusă fermentării, pH-ului şi a temperaturii în bioreactor. Însă acest procedeu este indirect, nu permite evaluarea cantitativă a activităţii procesului de metanogeneză şi, respectiv, controlul operativ al formării biogazului pe parcursul proceselor anaerobe de fermentare a biomasei [1].
Cel mai apropiat conform esenţei tehnice şi rezultatului scontat este procedeul de determinare a activităţii dehidrogenazei, care include introducerea în proba analizată de biomasă supusă fermentării a soluţiilor de glucoză şi 2,3,5-trifenil-tetrazoliu clorurat (TTC), incubarea amestecului în condiţii de vid cu extragerea ulterioară cu alcool şi determinarea colorimetrică a densităţii optice a soluţiei colorate de trifenil-formazan (TFF) în calitate de produs al reacţiei de dehidrogenare a TTC [2].
Dezavantajele acestui procedeu constau în durata mare a reacţiei, volumul mare de muncă şi capacitatea înaltă de absorbţie a energiei, lipsa factorilor de stabilizare a activităţii dehidrogenazei (extractele colorate se decolorează repede) şi inconvenienţa determinării şi măsurării activităţii dehidrogenazei în cazul unui număr mare de probe analizate, ceea ce îl face nerentabil din punct de vedere economic. Totodată, procesul de incubare, având loc timp de 60 min, este îndelungat.
Problema soluţionată prin prezenta invenţie constă în accelerarea, reducerea volumului de muncă a procesului de analiză şi ieftinirea procedeului de efectuare a analizei.
Procedeul de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare prevede introducerea în proba analizată a soluţiei de glucoză şi de clorură de 2,3,5-trifeniltetrazoliu (TTC), incubarea amestecului în condiţii de vid, extragerea ulterioară cu alcool, determinarea colorimetrică a densităţii optice a soluţiei colorate de trifenilformazan (TFF) formate în rezultatul reacţiei de dehidrogenare a TTC cu calcularea ulterioară a activităţii dehidrogenazei, totodată în componenţa amestecului supus analizei se introduce scualenă, în cantitate de (5,0…5,5)10-4 % în raport cu volumul amestecului analizat, şi soluţie tampon de fosfat cu pH-ul 7,2, totodată se utilizează soluţii de 0,2 M de glucoză şi 2% TTC, procesul de incubare având loc în condiţii mezofile la temperatura de 33±1°C timp de 25…30 min, cu agitarea ulterioară prin scuturare timp de 5 min, iar calcularea activităţii dehidrogenazei se efectuează conform formulei:
,
unde
- activitatea dehidrogenazei, mg TFF/ml·h;
- valoarea absolută a densităţii optice a probei analizate, media a 3 măsurări;
- valoarea absolută a densităţii optice a probei sterile;
- valoarea absolută a densităţii optice a reactivilor fără probă;
t- timpul incubării, h;
- coeficient de corecţie a densităţii optice conform curbei de calibrare, mg TFF/ml;
- raportul dintre volumul amestecului pentru extragere în probă şi volumul probei pentru calibrare.
Soluţia tampon, utilizată la realizarea procedeului, conţine fosfat de sodiu monosubstituit (NaH2PO4) - 68,4 g/L şi disubstituit (Na2HPO4) - 31,6 g/L.
Rezultatul tehnic obţinut în urma realizării invenţiei propuse constă în accelerarea procesului de incubare datorită prezenţei în componenţa amestecului a microadaosului de scualenă (2,6,10,15,19,23 - hexametiltetracoza - 2,6,10,14,18,22 - hexaen), care reduce durata de adaptare a microorganismelor la noile substraturi şi asigură o efectuare mai rapidă a reacţiei de dehidrogenare a TTC şi de formare a TFF. Utilizarea unor concentraţii mai mari de glucoză şi TTC duce la accelerarea suplimentară a reacţiei ţintă de dehidrogenare. Agitarea prin scuturare a amestecului după incubare îl omogenizează şi îmbunătăţeşte solubilitatea şi extragerea TFF pentru determinarea colorimetrică a densităţii optice a probei. După intensitatea colorării se apreciază cantitatea de formazan, care este proporţională cu activitatea dehidrogenazei.
Rezultatul obţinut este condiţionat de reducerea duratei de incubare a probelor datorită utilizării adaosului activant de scualenă şi majorării concentraţiei de TTC şi glucoză de 2 ori, stabilizării activităţii dehidrogenazei prin utilizarea amestecului tampon, îmbunătăţirii extragerii TFF prin agitare şi economia energiei electrice la incubarea probelor.
Exemplu de realizarea a invenţiei
Determinarea activităţii dehidrogenazei a fost efectuată în modul următor. Au fost preluate mostre din bioreactorul metanogen al gospodăriei agricole „GARMA-GRUP, SRL”, c. Fârlădeni, Hânceşti. Componenţa biomasei fermentate - 60% de borhot de la distilarea alcoolului + 40% bălegar.
Proba biomasei fermentate, cu volumul de 1 ml, a fost plasată într-o eprubetă, s-au adăugat 2 ml de soluţie tampon fosfat cu pH=7,2, 1 ml de soluţie 2% TTC, 1 ml 0,2 M de soluţie de glucoză şi scualenă (5,0…5,5)10-4% în raport cu volumul total de amestec (5 ml) incubat, care este scuturat atent.
Apoi amestecul a fost vacuumat la un vid de 10…12 mm Hg şi incubat la temperatura de 33±1°C timp de o oră în termostat. Drept control au servit materia primă (biomasa) fermentată sterilizată şi reactivii.
După finalizarea incubării în eprubetă s-au adăugat porţionat câte 10 ml de alcool etilic 96%, apoi a fost supusă agitării prin scuturare timp de 5 min. Conţinutul eprubetelor a fost apoi filtrat, iar soluţia de TFF a fost analizată la fotocolorimetru, folosind chiuvete cu lăţimea de 5 mm şi un filtru de lumină cu lungimea de undă de 540 nm. Cantitatea de trifenilformazan (în mg) a fost determinată cu ajutorul curbei standard. Pentru alcătuirea curbei de calibrare a fost preparată soluţia standard de formazan în alcool etilic (0,1 mg la 1 ml). Calculele s-au efectuat conform formulei.
Exemplu de calcul conform procedeului propus:
AD = * K * 1,5*10,
unde AD - activitatea dehidrogenazei, mg TFF/10 ml/1 oră;
D probă - valoarea absolută a densităţii optice a probei analizate, media a 3 măsurări;
D probă sterilă - valoarea absolută a densităţii optice a probei sterile;
D control - valoarea absolută a densităţii optice a reactivilor fără probă;
t - timpul incubării, ore;
K - coeficientul de corecţie a densităţii optice conform curbei de calibrare, mg TFF/ml;
1,5 - raportul dintre amestecul pentru extragere în probă (15 ml) şi în proba pentru calibrare (10 ml);
10 - recalcularea/corecţia pentru 10 ml de biomasă analizată.
D probă = 0,26; 0,27; 0,29
D probă sterilă = 0
D control = 0
t = 0,5
K = 0,641152899
AD1 = * 0,641152899* 1,5*10 ≈ 5,00 mg TFF/10 ml/1 oră
AD2 = * 0,641152899* 1,5*10 ≈ 5,19 mg TFF/10 ml/1 oră
AD3 = * 0,641152899* 1,5*10 ≈ 5,58 mg TFF/10 ml/1oră
AD medie = (AD1 + AD2 + AD3)/3 = (5,00+5,19+5,58)/3 = 5,26 mg TFF/10ml/1ore
Exemplu de calcul conform celei mai apropiate soluţii
Calculele s-au efectuat conform formulei:
AD = * K * 1,3*10,
unde: AD - activitatea dehidrogenazei, mg TFF/10 ml/1oră;
D probă - valoarea absolută a densităţii optice a probei analizate, media a 3 măsurări;
D probă sterilă - valoarea absolută a densităţii optice a probei sterile;
D control - valoarea absolută a densităţii optice a reactivilor fără probă;
t - timpul incubării, ore;
K - coeficent de corecţie a densităţii optice conform curbei de calibrare, mg TFF/ml;
1,3 - raportul dintre amestecul pentru extragere în probă (13 ml) şi în proba pentru calibrare (10 ml);
10 - recalcularea/corecţia pentru 10 ml de biomasă analizată.
D probă = 0,59; 0,56; 0,59
D probă sterilă = 0
D control = 0
t = 1,0
K = 0,641152899
AD1 = * 0,641152899 * 1,3*10 ≈ 4,92 mg TFF/10 ml/1oră
AD2 = * 0,641152899 * 1,3*10 ≈ 4,67 mg TFF/10 ml/1oră
AD3 = * 0,641152899 * 1,3*10 ≈ 4,92 mg TFF/10 ml/1oră
AD medie = (AD1 + AD2 + AD3)/3 = (4,92+4,67+4,92)/3 = 4,84 mg TFF/10 ml/1oră
Rezultatele analizelor activităţii dehidrogenazei din biomasa fermentată sunt prezentate în tabel.
Tabel
Condiţii Date cantitative Procedeul conform invenţiei Conform celei mai apropiate soluţii Biomasa fermentată (60% borhot de la distilarea alcoolului + 40% bălegar) 1 ml 1 ml clorură de 2,3,5- trifeniltetrazoliu (TTC), 1% 1 ml 1 ml Concentraţia de glucoză 0,1 М - 1 ml 0,2 М 1 ml - СаСО3 - 10 mg Soluţie tampon de fosfat, pH=7,2 2 ml - Alcool etilic, 96% 10 ml 10 ml Scualenă (2,6,10,15,19,23-hexametiltetracoza -2,6,10,14,18,22-hexaen) 0,025 mg - Timpul de incubare, min 30 55 Activitatea dehidrogenazei, mg TFF(10 ml) 5,26 4,84
Rezultatele obţinute demonstrează că durata incubării probelor analizate s-a redus de 2 ori în comparaţie cu condiţiile analizei activităţii dehidrogenazei conform procedeului cunoscut, ceea ce este condiţionat de utilizarea adaosului biologic activ de scualenă, de majorarea concentraţiilor de TTC şi glucoză, precum şi de utilizarea soluţiei tampon, ceea ce stabilizează activitatea dehidrogenazei, iar agitarea suplimentară a amestecului după incubare majorează precizia analizei datorită îmbunătăţirii solubilităţii şi a extracţiei TFF în soluţia hidroalcoolică a amestecului analizat. De rând cu aceasta, accelerarea esenţială a procesului de efectuare a analizei asigură reducerea volumului de muncă, iar concomitent se reduce consumul de energie datorită reducerii duratei de incubare a probelor în termostat.
Nu este mai puţin importantă operativitatea tehnologică a rezultatelor analizei care este mai înaltă în comparaţie cu condiţiile de efectuare a lor în conformitate cu cea mai apropiată soluţie - procedeul cunoscut, ceea ce permite o dirijare operativă a procesului de obţinere a biogazului, de exemplu, prim introducerea adaosurilor stimulante pentru intensificarea producţiei de biogaz din biomasă şi majorarea maxim posibilă a conţinutului de biometan.
1. Звягинцев Д. Г. Методы почвеной микробиологии и биологии. Москва, МГУ, 1991, р. 245-246, http://padaread.com/?book=51406&pg=251
2. Инструкция по лабораторному контролю очистных сооружений на животноводческих комплексах. Часть 3. Определение биогенных веществ. Методические рекомендации по определению дегидрогеназной активности ила при технологическом контроле работы аэротенков. Москва, Колос, 1984, р. 22-24
Claims (2)
1. Procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare, care prevede introducerea în proba analizată a soluţiei de glucoză şi de clorură de 2,3,5-trifeniltetrazoliu (TTC), incubarea amestecului în condiţii de vid, extragerea ulterioară cu alcool, determinarea colorimetrică a densităţii optice a soluţiei colorate de trifenilformazan (TFF) formate în rezultatul reacţiei de dehidrogenare a TTC cu calcularea ulterioară a activităţii dehidrogenazei, caracterizat prin aceea că în componenţa amestecului supus analizei se introduce scualenă, în cantitate de (5,0…5,5)10-4 % în raport cu volumul amestecului analizat, şi soluţie tampon de fosfat cu pH-ul 7,2, totodată se utilizează soluţii de 0,2 M de glucoză şi 2% TTC, procesul de incubare având loc în condiţii mezofile la temperatura de 33±1°C timp de 25…30 min, cu agitarea ulterioară prin scuturare timp de 5 min, iar calcularea activităţii dehidrogenazei se efectuează conform formulei: ,
unde - activitatea dehidrogenazei, mg TFF/ml·h; - valoarea absolută a densităţii optice a probei analizate, media a 3 măsurări; - valoarea absolută a densităţii optice a probei sterile; - valoarea absolută a densităţii optice a reactivilor fără probă;
t - timpul incubării, h; - coeficient de corecţie a densităţii optice conform curbei de calibrare, mg TFF/ml; - raportul dintre volumul amestecului pentru extragere în probă şi volumul probei pentru calibrare.
2. Procedeu, conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că soluţia tampon conţine fosfat de sodiu monosubstituit (NaH2PO4) - 68,4 g/L şi disubstituit (Na2HPO4) - 31,6 g/L.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| MDA20140089A MD4465C1 (ro) | 2014-08-22 | 2014-08-22 | Procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| MDA20140089A MD4465C1 (ro) | 2014-08-22 | 2014-08-22 | Procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| MD20140089A2 MD20140089A2 (ro) | 2016-02-29 |
| MD4465B1 MD4465B1 (ro) | 2017-01-31 |
| MD4465C1 true MD4465C1 (ro) | 2017-08-31 |
Family
ID=55447188
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MDA20140089A MD4465C1 (ro) | 2014-08-22 | 2014-08-22 | Procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| MD (1) | MD4465C1 (ro) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109580510A (zh) * | 2018-12-04 | 2019-04-05 | 天津大学 | 一种活性污泥ttc脱氢酶活性测定方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2053897A5 (en) * | 1969-07-09 | 1971-04-16 | American Hospital Supply Corp | Dehydrogenase activity determination with - dyeing composition |
| SU1043568A1 (ru) * | 1981-06-11 | 1983-09-23 | Московский Ордена Ленина,Ордена Октябрьской Революции И Ордена Трудового Красного Знамени Государственный Университет Им.М.В.Ломоносова | Способ определени активности дегидрогеназ крови |
| US4622296A (en) * | 1983-12-28 | 1986-11-11 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Process for measuring activity of dehydrogenase employing a reaction stopper |
| RU2387996C1 (ru) * | 2008-09-22 | 2010-04-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-исследовательский институт природных газов и газовых технологий - Газпром ВНИИГАЗ" (ООО "ВНИИГАЗ") | Способ контроля очистки почв, загрязненных углеводородами, и нейтрализации углеводородных шламов посредством анализа активности дегидрогеназы |
| RU2476598C2 (ru) * | 2011-04-27 | 2013-02-27 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Северный (Арктический) федеральный университет" (С(А)ФУ) | Способ количественного определения дегидрогеназной активности микроорганизмов |
| CN103525896A (zh) * | 2013-09-27 | 2014-01-22 | 南京工业大学 | 一种基于ttc染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法 |
-
2014
- 2014-08-22 MD MDA20140089A patent/MD4465C1/ro not_active IP Right Cessation
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2053897A5 (en) * | 1969-07-09 | 1971-04-16 | American Hospital Supply Corp | Dehydrogenase activity determination with - dyeing composition |
| SU1043568A1 (ru) * | 1981-06-11 | 1983-09-23 | Московский Ордена Ленина,Ордена Октябрьской Революции И Ордена Трудового Красного Знамени Государственный Университет Им.М.В.Ломоносова | Способ определени активности дегидрогеназ крови |
| US4622296A (en) * | 1983-12-28 | 1986-11-11 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Process for measuring activity of dehydrogenase employing a reaction stopper |
| RU2387996C1 (ru) * | 2008-09-22 | 2010-04-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-исследовательский институт природных газов и газовых технологий - Газпром ВНИИГАЗ" (ООО "ВНИИГАЗ") | Способ контроля очистки почв, загрязненных углеводородами, и нейтрализации углеводородных шламов посредством анализа активности дегидрогеназы |
| RU2476598C2 (ru) * | 2011-04-27 | 2013-02-27 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Северный (Арктический) федеральный университет" (С(А)ФУ) | Способ количественного определения дегидрогеназной активности микроорганизмов |
| CN103525896A (zh) * | 2013-09-27 | 2014-01-22 | 南京工业大学 | 一种基于ttc染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Звягинцев Д. Г. Методы почвеной микробиологии и биологии. Москва, МГУ, 1991, р. 245-246, http://padaread.com/?book=51406&pg=251 * |
| Инструкция по лабораторному контролю очистных сооружений на животноводческих комплексах. Часть 3. Определение биогенных веществ. Методические рекомендации по определению дегидрогеназной активности ила при технологическом контроле работы аэротенков. Москва, Колос, 1984, р. 22-24 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MD20140089A2 (ro) | 2016-02-29 |
| MD4465B1 (ro) | 2017-01-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mauerhofer et al. | Methods for quantification of growth and productivity in anaerobic microbiology and biotechnology | |
| CN104374758B (zh) | 一种利用叶绿素荧光参数Fv/Fm确定产油微藻收获时间的方法 | |
| EP0309429A2 (en) | Luminometric assay of cellular ATP | |
| US20130130308A1 (en) | Process for directly measuring multiple biodegradabilities | |
| CN108034621A (zh) | 一种窖泥厌氧梭菌Clostridium的富集方法 | |
| Horiuchi et al. | Simplified method for estimation of microbial activity in compost by ATP analysis | |
| Wutthithien et al. | Improvement of photobiological hydrogen production by suspended and immobilized cells of the N2-fixing cyanobacterium Fischerella muscicola TISTR 8215 | |
| Scherer et al. | Long term fermentation studies about the nutritional requirements for biogasification of fodder beet silage as mono-substrate | |
| Adams et al. | Investigating microbial activities in compost using mushroom (Agaricus bisporus) cultivation as an experimental system | |
| Zhang et al. | Acute heavy metal toxicity test based on bacteria-hydrogel | |
| Chiu et al. | ATP pools in activated sludge | |
| CN103525896B (zh) | 一种基于ttc染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法 | |
| CN108277163A (zh) | 一种分离纯化裸藻藻种的方法 | |
| Vanderhoef et al. | Diurnal variation in algal acetylene reduction (nitrogen fixation) in situ | |
| Rouatt et al. | Influence of light on bacterial flora of roots | |
| MD4465C1 (ro) | Procedeu de determinare a activităţii dehidrogenazei în biomasă la fermentare | |
| NO308545B1 (no) | FremgangsmÕte ved hurtig pÕvisning av soppinfeksjoner, samt et sett for bruk ved en slik fremgangsmÕte | |
| CN103509784A (zh) | 一种用于混凝土裂缝自修复的矿化微生物的筛选方法 | |
| Wang et al. | Role of methanogenesis and methanotrophy in CH4 fluxes from rice paddies under elevated CO2 concentration and elevated temperature | |
| Koistinen et al. | Determining dissolved and biogenic silica | |
| CN117285387A (zh) | 一种利用合成菌群对鸡粪堆肥氨气和温室气体协同减排以及保氮工艺 | |
| Johnson et al. | Evaluating viable cell indicators for filamentous cyanobacteria and their application | |
| CN112210586B (zh) | 一种检测凋落物β-葡萄糖醛酸苷酶活性的方法 | |
| CN113075345A (zh) | 一种采用高效液相色谱法分析确定好氧高温堆肥是否腐熟稳定的方法 | |
| CN102816715B (zh) | 小肠结肠耶尔森菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG4A | Patent for invention issued | ||
| KA4A | Patent for invention lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration) | ||
| MM4A | Patent for invention definitely lapsed due to non-payment of fees |