LU80545A1

LU80545A1 - Verfahren zur herstellung von 1a,3s-dihydroxy->5-steroiden

Info

Publication number: LU80545A1
Application number: LU80545A
Authority: LU
Inventors: A Fuerst; W Meier; L Labler
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1978-11-17
Filing date: 1978-11-17
Publication date: 1980-06-05
Also published as: NL7908363A; AT387392B; FR2446841A1; FR2445838B1; ATA732379A; CH641815A5; FR2445838A1; DE2945124C2; IL58677A; IT7926409A0; GB2036030A; GB2036030B; GB2104524B; JPS6337800B2; DE2945124A1; DK486079A; FR2446841B1; BE880031A; JPS5572200A; GB2104524A

Description

D. So.239

~ ~ gBRAND-DUCHÉ DE LUXEMBOURG

Brevet N°...........^ Q......^.......t| du 17.....noverabr e.....197.8 Monsieur le Ministre

Titre rtéiîuré · de l’Économie Nationale et des Classes Moyennes ___'_""_ Service de la Propriété Industrielle

/η LUXEMBOURG

ffiT- Demande de Brevet d’invention I. Requête .......La.....société.....dite.:.....H*...JiOEPIJid;ïii”LA....IîQ.CJ9E.....&.....C.Q.*.....M.T.I>3ïIGE.S.ELL.r.................<i) .......SCHASŒ.,.....A.....4.o.o2.....BILE,......S.^ssa^^.éplé.seatêβ...^ar_..Hoasienr™J.acsttes......

........de...Xîuy.ser.f.....agissant.....en ...qualité.....de...mndataire.........................................................................(2) > ..............................................................................................................................................................................................................................................................................................

dépose........ ce ...dIx.-s.op.t... iove;?&ge....l9-Q.o.....saixaaterdix“iux.ifc.........................0) à...........15.......... ... heures, au Ministère de l’Économie Nationale et des Classes Moyennes, à Luxembourg : 1. la présente requête pour l’obtention d’un brevet d’invention concernant : ........iUer£aliKaa....aur.....Hers:telliang.....ié.Qa...l<i,3|5~D.lhi?dr.oxyr^.lr..s5.tsroid$.R,,..,(4) déclare, en assumant, la responsabilité de cette déclaration, que l’(es) inventeur® est (sont) : ........I......znàoz...£ïïm.f......MiçnoUQn.^sr)c„.14.,....à_BiaLl/......S.«is.s.e....................................................(» ........2..~,...Lud'lg....Li3LLE,....Gr ah Ariaatti-ag... 53 ......._................

........3..».·".....ΙΓ3Γΐϊ£;3Γ......νΐΕ;ΧΕ.Ε, Ei:5.'CÄStX.3i.S.S.'S....5, à LOA’Jd.A.iyk'ièNj,...Sj^.sjte................

2. la délégation de pouvoir, datée de ......M ! E................................................ le .-2-5..... MC... l v..7..8 3. la description en langue ......a.l.X.&,:.'..rv.nd©..................................... de l’invention en deux exemplaires ; 4...........//-............ planches de dessin, en deux exemplaires ; 5. la quittance des taxes versées au Bureau de l’Enregistrement à Luxembourg, le.........17.....11QV -:.:-.-2 19.73................................................ . ..................................................................................................................................

fyv/rtTiCu//lÆft//jstfkjlifq /prï/y^ immérmiéi (6) ............................................................................................. déposée(s) en ..........................................................................................................................................

le .................................................................................................................................................................................. (8) au nom de ..........................................................................................................................................................................................................................................^ élit domicile pour lui (elle) et, si désigné, pour son mandataire, à Luxembourg ........................................

........35 r blcl Legal......................................... DO) SGlIïdie la délivrance d’un brevet d’invention pour l’c-bjet décrit et représenté dans les annexes . _ . — ^ q k susmentionnées, — avec ajournement de cette délivrance à ------------—-· ........... mois.

Le..... : pl. a V....... t.......·,- - » \ », ; ‘ \ \ >. '.

\ \ V \ ÏI. Frocès-verbal de Dépôt

La susdite demande de brevet d’invention a été déposée au Ministère de rEeonorrne Nationale et das Classes Moyennes, Service de la Propriété Industrielle à Luxembourg, en date du.

- — . · r- *7 n .1/ <2 X? t u

Pr. le Ministre à ’ 5 pÜT Χ'Λ·'ί<Ϊ\ de l'Économie .Naticnale et des Classes Moyennes, /J>- eP-d· wî ... SKÎyl __________ i ! · ' » Λ

X

s » , F. Hoffmann-La Roche & Co. Aktiengesellschaft, Basel, Schweiz RAN 4212/21

Verfahren zur Herstellung von la,3ß~Dihydroxy-A^-steroiden

Die Erfindung betrifft ein neues Verfahren zur Herstel- 5 lung von la,3ß-Dihydroxy-A -Steroiden der Teilformel ,

AB I

> welches dadurch gekennzeichnet ist, dass man in einer ersten Ξ Stufe ein Steroid der Teilforr.-al * /

Mi/ii .::..73 « — Ο - *· Λ» * (

A B | II

in einem Lösungsmittel mit der stöchiometrischen Menge oder einem geringfügigen Ueberschuss Lithium in flüssigem Ammo- * niak, in Abwesenheit eines Protonendonators, zu einem 5 Steroid der Teilformel

LiO

! CH3I L,

III

reduziert, gegebenenfalls unverbrauchtes Reduktionsmittel mit einem nicht protonierenden Mittel vernichtet und das Steroid der Teilformel III mit einer zur zugegebenen Menge 10 Lithium äquivalenten Menge eines Protonendonators zu einem Steroid der Teilformel

—N

HO

I CH3I

IV

umsetzt und in einer zweiten Stufe das Steroid der Teilformel IV durch mehrmalige alternierende Zugabe eines Pro-* 15 tonendonators,.jeweils gefolgt von der zur Menge des Pro tonendonators äquivalenten Menge Lithium zum Steroid der Teilformel I reduziert.

/ / : U'·' • Ί ‘ “ J “ I Die Steroide der Teilformel I, insbesondere diejenigen der Formel

R

CH3

HO

; ch3

Ia worin R eine gegebenenfalls durch eine oder 5 mehrere Sauerstoffunktionen substituierte

Cholesterin-Seitenkette, eine gegebenenfalls geschützte Keto- o.der Acetylgruppe oder ein Rest der CH3

Formel -CH^ darstellt, worin Y Hydroxy, Hydroxy- ! xy methyl oder leicht spaltbares veräthertes Hydroxy 10 oder Hydroxymethyl ist, sind Zwischenprodukte für die Herstellung von Derivaten des Cholecalciferols (Vitamin D^), z.B. von Ία-Hydroxy- oder la,25-Dihydroxy-cholecalciferol. Die Ueberführung einer Verbindung der Teilformel I in diese Derivate des Cholecalci-15 ferols kann in an sich bekannter Weise, z.B. gemäss den in den deutschen Offenlegungsschriften 2607322 und 2746107 beschriebenen Synthesewegen, durchgeführt werden.

Die den Steroiden der Formel Ia entsprechenden Aus-, gangssteroide der Teilformel II, nämlich diejenigen der , 20 Formel r ch3 ox ch3I J_

Ha - 4 - worin R obige Bedeutung hat, sind bevorzugt. Beispiele von Verbindungen der Formel Ha sind diejenigen, worin R ein Rest der Formel CH3 5 ist, worin X Wasserstoff, Hydroxy oder insbesondere leicht : spaltbares veräthertes Hydroxy ist, wie Ια,2a-Epoxy-cholesta-4,6-dien-3-on, la,2a-Epoxy-25-hydroxy-cholesta-4,6-dien-3-on, la,2a-Epoxy-25-tetrahydropyranyloxy-cholesta-4,6-10 dien-3-on und la,2a-Epoxy-25-(1-äthoxyäthoxy)-cholesta-4,6-dien-3-on-

Beispiele von Verbindungen der Formel lia, worin R ein /CH3

Rest der Formel -CHf ist, und Y obige Bedeutung hat, sind 15 (20S)-Ια,2a-Epoxy~20-methyl-21-tetrahydropyranyloxy- pregna-4,6"dien~3-on, (20S)-la,2a-Epoxy-21-(1-äthoxyäthoxy)-20-methyl-pregna-4,6-dien-3-on, (20S)-la,2a-Epoxy-21-hydroxy-20-methyl-pregna-4,6-20 dien-3-on, (20S)-la,2a-Epoxy-21-(1—methoxy-1—methyläthoxy)-20-methyl-pregna-4,6-dien-3-on, (20Rj-la,2a-Epoxy-20-[(tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy]-pregna-4,6-dien-3-on und 25 (20R)-Ια,2a-Epoxy-20-hydroxy-pregna~4,6-dien-3~on.

Beispiele von Verbindungen der Formel lia, worin eine gebenenfalls geschützte Keto- oder Acetylgruppe darstellt, sind 1 ................

17,17-Aethylendioxy-la, 2a-epoxy-androsta-4,6-dien-3-on und 20,20-Aethylendioxy-la,2a-epoxy-pregna-4,6-dien-3- on.

5 Die Verbindungen der Formel la, worin R eine Chole- sterin-Seitenkette mit einem leicht spaltbaren veräther-ten Hydroxyrest in 25-Stellung, z.B. la, 3j3-Dihydroxy~25-tetrahydropyranyloxy-cholest-5-en und 25-(1-Aethoxy-äthoxy)-la,3ß-dihydroxy-cholest-5-en, sowie die Ver-10 bindungen der Formel

HS

CH3 0Z

ch3 n IIb ?*·. ch3 worin -0Z leicht spaltbares veräthertes Hydroxy darstellt, sind neu und als solche Gegenstand der vorliegenden Er-15 findung.

Als Sauerstoffunktionen im Rest R der Steroide der Formel la oder Ha kommen z.B. Hydroxy oder leicht spaltbares veräthertes Hydroxy in Frage.

Aethergruppen, die sich leicht, d.h. ohne Veränderung 20 an anderen Stellen des Moleküls spalten lassen, sind z.B.

'312* 12

Gruppen der Formel R 0-C{R ,R )-0, worin R und R Was- * serstoff oder C, ,-Alkvl und C. ,-Alkvl oder und R"1 t-b " I-b

Gemeinsam C-, .--Alkvien bedeuten, wie Tetrahvdropvran-2- ^ 3 O ** “ ' yloxy, 1-Aethoxyäthoxy oder 1-Methoxy-l-methyläthoxy.

2Ξ Birne Keto- oder Acetylgruppe R kann in ge- / . — ο — schützter, insbesondere ketalisierter Form, z.B. in Form des Aethylenketals vorliegen.

Das Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Teilformel I ausgehend von einer solchen der Teilformel II 5 wird zweckmässig in einer Argonatmosphäre, bei einer Temperatur zwischen -30 und -55°C, vorzugsweise zwischen -31 und -33°C, d.h. bei Siedetemperatur des Ammoniaks durchgeführt.

Bei der Reduktion einer Verbindung der Teilformel II zu 10 einer solchen der Teilformel III mit Lithium in flüssigem Ammoniak ist das Ausgangssteroid der Teilformel II zweckmässig in einem Lösungsmittel, z.B. einem Aether, wie Diäthyläther, Tetrahydrofuran oder Gemischen davon, vorzugsweise in absolutem Diäthyläther, gelöst. Die Reduktion eines 15 Steroids der Teilformel II zu einem solchen der Teilformel III wird zweckmässig mit 4 bis 7 Aequivalenten, vorzugsweise mit etwas mehr als der stöchiometrischen Menge, d.h. mit 4,5 bis 5 Aequivalenten Lithium durchgeführt. Unverbrauchtes Lithium wird gegebenenfalls mit einem nicht protonierenden 20 Mittel, wie Brombenzol oder vorzugsweise Isopren, vernichtet. Es ist wesentlich, dass die Reduktion eines Steroids der Teilformel II zu einem solchen der Teilformel ΙΪΙ unter Ausschluss eines Protonendonators, wie Wasser, Alkohole oder Ammoniumsalze, durchgeführt wird. Das Steroid der Teilformel 25 III wird durch Zugabe der zur Reduktion eingesetzten Menge Lithium äquivalenten Menge eines Protonendonators, vorzugsweise eines Ammoniumsalzes, insbesondere Ammoniumchlorid, in das Steroid der Teilformel IV übergeführt.

Bei der Reduktion des Steroids der Teilformel IV zu dem 30 der Teilformel I ist zu verhindern, dass ersteres in das von Lithium in Ammoniak nicht reduzierbare Salz der Teilformel III übergeht. Dies 'wird erreicht, wenn der Protonendonator •während des Reduktionsvorgangs stets im Ueberschuss verliere. Durch mehrmalige alternierende Zugabe von kleinen - - Mengen Protcnenconator, jeweils Gefolgt von der dazu äaui- Λ valenten Menge Lithium kann die Reduktion besonders einheitlich und ökonomisch gestaltet werden. Die Menge der einzelnen Zugaben kann 0,3 bis 6 Aequivalente, die Anzahl der Zugaben je nach Menge 5 bis 30 betragen, wobei zweck-5 mässigerweise insgesamt 9 bis 30 Aequivalente Protonendonator bzw. Lithium verwendet werden. Die zehn- bis zwanzigmalige, insbesondere die sechzehnmalige Zugabe von je einem Aequivalent Protonendonator bzw. Lithium gehört zu den bevorzugten Ausführungsformen.

10 Ausgangsäther der Teilformel II können in an sich bekannter Weise, z.B. durch Verätherung der entsprechenden Alkohole oder durch Verätherung der entsprechenden 1,4,6-Trien~3-one und anschliessende 1,2-Epoxydierung hergestellt werden. So kann man beispielsweise das zu 15 veräthernde Steroid in einem Lösungsmittel, wie Benzol, ; mit einem Vinyläther, z.B. 3,4-Dihydro-2H-pyran oder

Aethylvinyläther, in Gegenwart von wasserfreier p-Toluol-j Sulfonsäure, zweckmässigerweise bei Raumtemperatur, i umsetzen.

I A

j i » .

1 * i j i i Î i \ i i - 3 -

Beispiel 1

Zu einer Lösung von 210 mg (4 Aequivalente) Li in 300 ml über Na getrocknetem und destilliertem NH^ wird unter Rühren in Ar-Atmosphäre bei -31 bis -33 eine 5 Lösung von 3,0 g (1 Aequivalent) la,2a-Epoxy-cholesta- 4,6-dien-3-on in 200 ml abs. Aether innert 45 Minuten zugetropft.' Dabei wird, sobald die Mischung nur noch hellblau gefärbt ist, das Zutropfen rasch unterbrochen und 52,5 mg (1 Aequivalent) Li zugegeben. Nach beendetem 10 Zutropfen wird 15 Minuten gerührt, dann die blaue Farbe der Lösung durch Zufügen von Isopren (0,2 ml) zum Verschwinden gebracht und unter Rühren innert 4 Minuten portionenweise total 2,025 g (5 Aequivalente) NH^Cl zugefügt. Die gerührte gelbliche Mischung wird unter Ar 15 bei -31° bis -33° in 'gleicher Weise mit 2,312 g (5,7 Aequivalente) NH^Cl versetzt, dann 298 mg (5,7 Aequiva-* lente) Li zugefügt und, sobald dieses reagiert hat, das gleiche Vorgehen, d.h. Zugabe von 5,7 Aequivalente NH4C1 gefolgt von 5,7 Aequivalenten Li noch viermal wiederholt.

20 Die Mischung wird mit 10 g NH^Cl versetzt und NH^ solange verdampft, bis die Innentemperatur 0° erreicht hat. Die Suspension wird mit 50 ml ges. NH^Cl-Lösung versetzt und nach Verdünnen mit 200 ml Wasser mit Essigester extrahiert. Die organische Phase wird über Na3S04 getrocknet und bei '25 40°/ll Torr eingeengt. Das Rohprodukt, 3,3 g, wird an einer in Hexan-Aether 9:1 zubereiteten Säule an 60 g Kieselgel chromatographiert. Die Eluierung liefert mit 400 ml Hexan-Aether 4:1 und 1,3 1 Hexan-Aether 1:1 0,55 g apolare Anteile und mit 2,5 1 .Aether 2,472 g (81%) 30 kristallines lc-Hydroxy-cholcsterin. Die Substanz schmilzt

O 2 ÎD

nach Umkristallisation aus .Azeton bei 157-159 , [a]Q --39,6° (c = 0,5, CHC13).

Beispiel 2

Das Verfahren von Beispiel 1 wird unter Verwendung 2 3 vcr. abs. Tetrahydrofuran an stelle von abs. Aether wiederholt. Man erhält 2,242 g (73,4%) Ic-Hydrcxy-cholesterin.

/ I - ? - ί > ,

Beispiel 3 i . Das Verfahren von Beispiel 1 wird unter Verwendung von | 150 ml NH3 an Stelle von 300 ml NH3 wiederholt. Man erhält 1 - 2,585 g (84,6%) la-Hydroxy-cholesterin.

j 5 Beispiel 4 o

Zu 5 1 trockenem Ammoniak werden bei -31 bis -33 unter j ' Rühren in Ar-Atmosphäre 8,75 g (1/26 g-At) Lithium gegeben.

| · Nach 10 Minuten wird zur dunkelblauen Lösung eine Lösung von : 100,0 g (0,25 Mol) la,2a-Epoxy-cholesta-4,6-dien-3-on in 6,0 ! 10 1 abs. Aether während 45 Minuten zugetropft und anschlies- j send weitere 15 Minuten gerührt. Zur noch dunkelblauen Lösung werden bis zum Farbumschlag nach hellgelb 25,5 ml Isopren getropft und dann portionenweise 67,43 g (1,26 Mol) 1 Airanoniumchlorid zugefügt. 13,48 g (0,25 Mol) Ammoniumchlorid I 15 werden zugegeben und dann 1,75 g (0,25 g-At) Lithium zuge fügt. Sobald sich das Lithium gelöst hat, wird dieser Vorgang, d.h. Zugabe von 0,25 Mol Ammoniumchlorid und 0,25 g-At | Lithium, noch fünfzehnmal wiederholt, wofür noch 202,30 g (3,75 Mol) Ammoniumchlorid und 26,25 g (3,75 g-At) Lithium 20 benötigt werden. Sobald sich das Lithium der letzten Zugabe gelöst hat, werden 100 g (1,87 Mol) Ammoniumchlorid‘zuge- ! j geben. 5 1 Aether werden zum Reaktionsgemisch getropft.

j ! Durch Rühren über Nacht bei Raumtemperatur wird Ammoniak verdampft. Zur verbleibenden Suspension werden 6 1 Wasser 25 und dann 12 1 Aether hinzugegeben. Nach Durchrühren wird die organische Phase abgetrennt und die wässrige zweimal mit je 10 1 Essigester extrahiert. Die organischen Extrakte werden . der Reihe nach zweimal mit je 5 1 ges. NaCl-Lcsung ge waschen. Der Aether- und der Essigester werden getrennt über 30 Natriumsulfat getrocknet, konzentriert, vereinigt und vom restlichen Lösungsmittel befreit. Nach 18 Stunden Trocknen bei Raumtemperatur unter Wasserstrahlvakuum werden 104,7 g rches la,32-Dihydroxy-cholest-5-en in Form eines gelbbraunen festen Rückstandes erhalten.

A

Eine Lösung der vorstehend erhaltenen 104,7 g Rohprodukt wird in 1,5 1 Pyridin gelöst und nach'Zugabe von 1,5 1 Essigsäureanhydrid und 1,44 g 4-Dimethylaminopyridin versetzt und 48 Stunden bei Raumtemperatur aufbewahrt. Das 5 Reaktionsgemisch wird auf 10 kg Eis gegossen und das Produkt dreimal mit je 4 1 Aether extrahiert. Die Extrakte werden mit 6 1 2 N HCl, zweimal mit je 6 1 Wasser, dann mit 6 1 ges. Natriumbicarbonat-Lösung und schliesslich zweimal mit je 6 1 ges. NaCl-Lösung gewaschen. Die vereinigten orga-10 nischen Phasen werden vereinigt, über ^£30^ getrocknet und abgedampft. Der braune ölige Rückstand (134 g) wird an einer in Hexan-Aether 9:1 zubereiteten Säule von 2,7 kg Kieselgel chromatographiert. Durch Eluierung mit 16 1 Hexan-Aether 9:1 werden vorerst 2,8 g apolare Anteile erhalten. Anschlies-15 sende Eluierung mit 23 1 des gleichen Lösungsmittelgemisches liefert nach Einengen und 24 Stunden Trocknen bei 30°/ 0,05 Torr 101,6 g (82,7% bez. auf la,2a-Epoxy-cholesta-4,6-dien- 3-on) reines la,3ß-Diacetoxy-cholest-5-en vom Smp. 95-96°, [a]^5 = -17,1° (c = 1,0, CHC13).

20 Beispiel 5

Eine durch Zugabe von 201 mg (29 mg~Ät, 4 Aequivalente) Li zu 290 ml NH^ bei -33° unter Ar bereitete Lösung wird 5 Minuten gerührt und dann während 45 Minuten eine Lösung von 3,0 g (7,27 mMol, 1 Aequivalent) la,2a-Epoxy-25-hydroxy-25 cholesta-4,6-dien-3-on in 173 ml getrocknetem THF unter Rühren in Ar-Atmosphäre zugetropft. Während des Zutropfens wird, jeweils wenn die Mischung nur noch hellblau gefärbt isr, zweimal je 50 mg (7,2 m.g-At, 1 Aequivalent) Li zugegeben. Wach beendetem Zutropfen wird 15 Minuten gerührt, 30 dann die blaue Farbe der Mischung durch Versetzen mit 2

Tropfen Isopren zum Verschwinden gebracht und unter Rühren portionenweise total 2,321 g (43,4 mMol, 6 Aequivalente) WH4C1 zugegeben. Die gerührte orange-gelbe Mischung wird unter Ar bei -33° portionenweise mit total 2,222 g (41,5 zu r.Mc_, z,7 Aequivalente) WH4Ci versetzt, dann 2S8 mg (41,5

/L

I - 11 - 1 * mg-At, 5,7 Aequivalente) Li zugefügt und, sobald dieses I reagiert hat, das gleiche Vorgehen, d.h. Zugabe von 5,7

Aequivalenten NH^Cl gefolgt von 5,7 Aequivalenten Li noch viermal wiederholt. Die Mischung wird mit 9,6 g (170 mMol, 5 23 Aequivalente) NH^Cl versetzt und NH^ solange verdampft, bis die Innentemperatur 0° erreicht hat. Die Suspension wir mit 0,5 1 ges. NaCl-Lösung versetzt, einmal mit 1 Liter Aether und dann noch zweimal mit je 2 1 Essigester extrahiert. Die organischen Extrakte werden zweimal mit je 0,5 1 • 10 ges. NaCl-Lösung gewaschen, vereinigt, über Na2S0^ getrock net und bei 40°/ll Torr eingeengt. Der Rückstand wird in 10 ml Benzol gelöst und an einer in Hexan-Aether 9:1 zuberei-| teten Säule von 30 g Kieselgel chromatographiert. Die Eluie rung liefert a) mit 1,05 1 Hexan-Aether 1:1 1,21 g apolare 15 Anteile, b) mit 2,4 1 Aether 1,94 g (63,7%) kristallines la,3ß,25-Trihydroxy-cholest~5-en und c) mit 1 1 Aceton 0,2 ; polare Anteile. Das unter b) erhaltene Produkt schmolz nach Umkristallisation aus Aceton bei 168-173°> [a]^5 = -11° (c - 1,0, ch3oh).

20 Beispiel 6

Das Verfahren von Beispiel 5 wird unter Verwendung von Aether-THF 10,5:1 an Stelle von THF wiederholt. Man erhält 2,0 g (64,8%) Ια,3ß,25-Trihydroxy-cholest-5-en.

Beispiel 7 25 Zu 2,7 1 trockenem Ammoniak 'werden unter Argon vorerst . in 30 Portionen 1,373 g (0,27 g-At.) Lithium und nach 2,5 , Minuten zur tiefblau gewordenen Lösung tropfenweise eine Lösung von 33,6 g (ca. 67,7 mMol) la, 2a-Epoxy-25-tetra-' hyçropyranyloxy-cholèsta-4,6-dien-3-on in 1,6 1 Aether Ξ0 zugegeben. Nach Zugabe von 3/4 der Epcxydlcsung wird da:»

Zutropfen unterbrochen, in mehreren Portionen 'werden 0, ·**'»7 c (0,067 g-At.) Lithium zugefügt und das Zutropfen 'wird i- ) 1 -gesetzt. Nach Zugabe von 120 ml Aether 'wird die Reaktiv'1 · iösur.g noch 15 Minuten gerührt und dann -werden 2 ml Iso: - n /} - 12 - zugetropft. Unter Rühren werden dann in Portionen von 1 g 18,04 g (0,337 Mol) Ammoniumchlorid zugefügt. In gleicher Weise werden weitere 20,672 g (0,38 Mol) Ammoniumchlorid und dann in 5-6 Portionen 2,681 g (0,38 g-At.) Lithium zugefügt, 5 wobei jeweils eine neue Portion erst dann zugegeben wird, wenn die vorangehende durchreagiert hat. Die Zugabe von 20,672 g Ammoniumchlorid und 2,681 g Lithium wird in der angegebenen Reihenfolge noch viermal wiederholt, wofür insgesamt 62,016 g (1,14 Mol) Ammoniumchlorid und 8,043 g 10 (1,14 g-At.) Lithium benötigt werden. Nach Beendigung der letzten Lithiumzugabe werden 50,0 g Ammoniumchlorid zugefügt. Nach Abkühlung des Reaktionsgemisches auf 0° werden 250 ml ges. Ammoniumchloridlösung und dann 1 1 Wasser zugefügt. Nach Zugabe von 2,5 1 Aether und Durchschütteln wird 15 die wässrige Phase abgetrennt und zweimal mit je 3 1 Essigester extrahiert. Die organischen Phasen werden zweimal mit je 500 ml ges. NaCl-Lösung gewaschen, diese Waschlösung mit Essigester gewaschen, die organischen Phasen vereinigt und getrocknet. Nach Einengen und Trocknen resultieren 37 g 20 oranges Harz. Zur Reinigung wird eine Lösung des Harzes in Benzol auf Kieselgel mit Aether als Eluierungsmittel chroma-tographiert. Man erhält 22,0 g (83,8%) la, 3/3-Dihydroxy-25-tetrahydropyranylcxy-cholest-5-en als weisse kristalline Masse. Die Substanz schmilzt nach Umkristallisation "aus 25 Aether bei 130-132°; [a]^5 = -31,3° (c - 1,0, CHClg).

Das im obigen Verfahren verwendete lot, 2a-Epoxy-25-tetrahydropyranyicxy-cholesta-4,6-dien-3-on kann wie folgt hergestellt werden:

Aus einer Lösung von 0,7 g lo,2a-Epoxy-25-hydroxy-50 cholesta-4,6-di5r.-3-on in 33 ml Benzol werden 13 ml Benzol abdestilliert und der Rückstand mit 0,4 ml 3,4-Dihydro-2H-pyran und 3,9 mg vasserfreier p-Toluolsulfonsäure versetzt. Nach 4 Stunden Belassen bei Raumtemperatur wird mit 50 ml Aether verdünnt, die Lesung mit 30 ml ges. NaHCO^-Lösung und 55 60 n.i ges. NaCl-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat ge- uruckr.eu und eingeengt. Der gelbe, ölige Rückstand liefert / 1 · --- bei der Chromatographie an 30 g Kieselgel mit Hexan-Aether. 4:1 0,79 g (93,71) la,2a-Epoxy-25-tetrahydropyranyloxy-cholesta-4,6-dien-3-on. Das Produkt schmilzt nach Umkristallisation aus Hexan bei 67-69°, [a]^5 = +154° (c = 1,0, 5 CHC13).

' Beispiel 8 : Zu 6,2 1 trockenem Ammoniak werden bei -31° bis -33° ; * unter Rühren in Ar-Atmosphäre 10,77 g (1,55 g-At.) Lithium ; ' gegeben. Nach 10 Minuten wird zur dunkelblauen Lösung eine ilO Lösung von 154,6 g 90%igem rohem (0,31 Mol) la,2a-Epoxy-25-tetrahydropyranyloxy-cholesta-4,6-dien-3-on in 7,4 1 abs. Aether getropft, mit 0,5 1 abs. Aether nachgespült und | anschliessend weitere 15 Minuten gerührt. Zur noch dunkel- ] blauen Lösung werden bis zum Farbumschlag nach orange, 23,5 I 15 ml Isopren getropft und portionenweise 82,97 g (1,55 Mol) j Ammoniumchlorid zugefügt. 16,59 g (0,31 Mol) Ammoniuiachlorid j j werden zugegeben und dann 2,15 g (0,31 g-At.) Lithium zuge- ! fügt. Sobald sich das Lithium gelöst hat, wird dieser Vor- ! gang, d.h.·Zugabe von 0,31 Mol Ammoniumchlorid gefolgt von | 20 o,31 g-At. Lithium, noch fünfzehnmal wiederholt, wofür noch 1 248,85 g (4,65 Mol) Ammoniumchlorid und 32,25 g (4,65 g-At.) • Lithium benötigt werden. Sobald sich das Lithium der letzten , Zugabe gelöst hat, werden 100 g (1,87 Mol) Ammoniumchlorid : zugegeben. 5 1 Aether werden zum Reaktionsgemisch getropft.

; 25 Durch Rühren über Nacht bei Raumtemperatur wird Ammoniak ; verdampft. Zur verbleibenden Suspension werden 6 1 Wasser und dann 8 1 Aether gegossen. Nach Durchrühren wird die organische Phase abgerrernt ur.d die wässrige zweimal mit je 10 1 Essigester extrahiert. Die organischen Extrakte werden ! 30 der Reihe nach zweimal mit je 4 1 ges. NaCl-Lcsung ge- j ”* j waschen. Der Aether- und der Essigesterextrakt werden ge- | „ trennt über Natriumsulfat getrocknet, konzentriert, ver- ! einigt und vom restlichen Lösungsmittel befreit. Nach 16

Stunden Trocknen bei Raumtemperatur unter Wasserstrahlvakuum ΖΞ werden 165,5 g rohes ls, 3-2-Dihyaroxy-25-tetrahydropyrar.yl-cxy-cnolest-5-en in Form eines gelbbraunen Harzes erhalten.

ή - 14 -

Das Rohprodukt wird an einer in Hexan-Aether zubereiteten Säule von 3,1 kg Kieselgel chromatographiert. Durch Eluierung mit Aether-Hexan 1:1 und Aether werden vorerst apolare Anteile entfernt. Anschliessende Eluierung mit 5 Aether und Aether-Essigester 9:1, Einengen und 16 Stunden Trocknen bei 0,01 Torr/25° liefern 105,6 g (75,3%) la,3j3-Dihydroxy-25-tetrahydropyranyloxy-cholest-5-en. Anschliessende Eluierung mit Aether-Essigester 1:1 und Essigester liefert 9,8 g Rückstand, aus welchem nach saurer Hydrolyse * IO und Kristallisation 5,6 g (4%) Ια,3(3,25-Trihydroxy-cholest- 5-en vom Smp. 170-172°, [a]^5 = -11,4° (c = 0,5, CH30H) resultieren.

Beispiel 9

Zur Lösung von 1,453 g (0,21 g-At., 4 Aequivalente) Li 15 in 2,1 1 NH^ wird unter Rühren in Ar-Atmosphäre bei -33° eine Lösung von 22,4 g (52 mMol, 1 Aeguivalent) (20S)-la,2ct-Epoxy-20-methyl-21-tetrahyd? opyranyloxy-pregna-4,6-dien-3-on in 1,25 1 abs. Aether innert 45 Minuten zugetropft. Dabei wird, wenn die Mischung rar noch hellblau gefärbt ist, das 20 Zutropfen kurz unterbrochen und 0,363 g (52,3 mg-At., 1 Aequivalent) Li zugefügt. Nach beendetem Zutropfen wird 15 Minuten gerührt, die blaue Farbe der Mischung durch‘Zufügen von 2 ml Isopren zum Verschwinden gebracht. Unter Rühren werden portionenweise total 13,98 g (0,26 Mol, 5 Aequiva-25 lente) NH^Cl zugefügt. Die Mischung wird unter Ar bei -33° portionenweise mit 16,048 g (0,30 Mol, 5,7 Aequivalente) NH4C1 versetzt, dann 2,082 g (0,3 g-At., 5,7 Aequivalente)

Li zugefügt, und sobald dieses reagiert hat, das gleiche Vorgehen, d.h. Zugabe von 16,048 g NH.CI gefolgt von 2,082 g 20 Li noch viermal wiederholt. Die Mischung wird mit 75 g NH^Cl versetzt und NH^ solange verdampft, bis die Innentemperatur 0° erreicht hat. Der Rückstand wird mit 0,2 1 ges. NaCl-Lösung und 1 1 Wasser versetzt, mit 3 1 Aether und zweimal mit je 2,5 1 Essigester extrahiert. Dia Extrakte werden 3 5 zweimal mit je 0,5 1 ges. NaCl-Lösur.g gewaschen, vereinigt, nrer Na_bO. gerrocknet und bei 40°/ll Torr einceenct. Der

A

— 15 - Rückstand wird in 75 ml Benzol gelöst und auf eine in Hexan-Aether 9:1 zubereitete Säule von 340 g Kieselgel π , gegeben. Die Eluierung liefert a) mit 3 1 Hexan-Aether ! 4:1 und 14 1 Hexan-Aether 1:1 2,39 g apolare Anteile, b) i | 5 mit 19 1 Aether 19,7 g (86,78%) rohes (20S) -la, 3/3-Di- I: !i hydroxy-20-methyl-21-tetrahydropyranyloxy-pregn-5-en.

I Umkristallisation aus Methanol ergibt weisse Kristalle vom Smp. 138-141°, [a]p5= -48,8° (c = 0,5, CHClj).

j | * Beispiel 10 10 Herstellung des Ausgangsmaterials 1,0 g (2,42 mMol) la,2a-Epoxy-25-hydroxy-cholesta- 4,6-dien-3-on werden in 60 ml abs. Toluol, enthaltend 5,0 mg wasserfreie p-Toluolsulfonsäure, gelöst, im Vakuum f 10 ml Lösungsmittel entfernt und der Rückstand bei ! 15 Raumtemperatur mit 2 ml (1,5 g, 20 mMol) Aethylvinyl- t [ äther versetzt. Das Gemisch wird 1 Stunde bei Raumtempera- i tur belassen, 0,3 ml Triäthylamin zugefügt und im f \ Vakuum eingedampft. Der teils kristalline Rückstand er- » I gibt an 15 g Kieselgel mit Hexan/Aether 4:1 chromato- ί 20 graphiert 1,134 g (96%) reines 25-(1-Aethoxyäthoxy)- | la,2a-epoxy-cholesta-4,6-dien-3-on. Die analytische'Probe wird durch Umkristallisation aus Methylenchlorid-Hexan, enthaltend 0,1% Triäthylamin, gewonnen: Smp. 113-120°,

[a]J5 = +161° (c = 0,5, CHC1-,), UV (Aethanol): λ 292 nm D *3 IFlclX

25 (ε 20600).

Verfahren

Eine bei -31 bis -33° bereitete Lösung von 0,277 g (40 mg-At) Lithium in 150 ml trockenem Ammoniak wird nach 10 Minuten Rühren innert 40 Minuten in Ar-Atmosphäre 30 unter Rühren tropfenweise mit einer Lösung von 3,52 g (7,27 mMol) 25-(1-Aethoxyäthoxy)-Io,2c-epoxy-cholesta- 4,6—âien-3-on in 170 ml abs. Aether versetzt. Mach 15 Minuten Rühren wird zur blauen Lesung Isopren (3 Tropfen) — \ f, — zugefügt und die nun rosa gefärbte Mischung unter Rühren und Ar-Begasung vorerst portionenweise mit 2,521 g (47,2 mMol) Ammoniumchlorid und dann mit 0,050 g (7,27 mg-At) Lithium versetzt. Sobald sich das Lithium gelöst hat, 5 werden 0,389 g (7,27 mMol) Ammoniumchlorid und dann weitere 0,0504 g (7,27 mg-At) Lithium zugegeben. Dieser Vorgang, Zugabe von 7,27 mMol Ammoniumchlorid gefolgt von 7,27 mg-At Lithium, wird noch vierzehnmal wiederholt, wofür total 5,446 g (101,8 mMol) Ammoniumchlorid und 1-0 0,706 g (101,8 mg-At) Lithium benötigt werden. Sobald sich das Lithium der letzten Zugabe gelöst hat, werden 5,0 g (93 mMol) Ammoniumchlorid, dann 70 ml Aether zugegeben und Ammoniak unter Rühren verdampft. Die verbleibende Suspension wird mit Wasser versetzt und mit 15 Aether extrahiert. Die organischen Phasen werden mit ges. NaCl-Lösung gewaschen, über Na2S0^ getrocknet und im Vakuum abgedampft. Der Rückstand wird an einer Säule von 60 g Kieselgel, zubereitet mit Hexan/Aether 9:1 enthaltend 0,4% Pyridin, chromatographiert. Eluierung mit Hexan/ 20 Aether 1:1 und Aether liefert 2,621 g (73,4%) reines 25-(1-Aethoxyäthoxy)-la,3ß-dihydroxy-cholest-5-en in Form eines farblosen Pulvers vom Smp. 128-130°, [a]j^ = -30,5° (c = 1,0, CHC13 mit 0,1% N(C2H5)3).

Beispiel 11 25 Herstellung des Ausgangsmaterials

In zu Beispiel 10 analoger Weise erhält man aus 0,215 ç (0,62 mMol) (20S)-la,2a-Zpoxy-21-hyöroxy-20-methylpregna-4,6-dien-3-on 0,234 g (30% d.Th.) (203)-21-(1-Aethoxyäthoxy)-la,2a-epoxy-20-methyl-pregna-4,6-20 äien-3-on·, Smp. 91-93°, [a]^3 = +177° (c = 0,5, CHC13 ir.it 0,1% N(C_H_)J, UV (Aethanol) : Xr 292 nm (ε 21080) .

À D ô IΠ c: X

Verfahren

Line bei -31 bis -33° bereitete Lesung von 0,3C8 g (44 r.r-At) Lithium in 170 ml trockenem Ammoniak wird nach — X / — # 10 Minuten Rühren innert 40 Minuten in Ar-Atmosphäre unter Rühren tropfenweise mit einer Lösung von 3,67 g (8,87 mMol) (20S)-21-(l-Aethoxyäthoxy)-la,2a-epoxy-20-raethyl-pregna-4,6-dien-3-on in 210 ml abs. Aether ver-5 setzt. Nach 15 Minuten Rühren werden zur blauen Lösung 0,2 ml Isopren zugefügt und die nun fast farblose Mischung wird unter Rühren und Ar-Begasung vorerst portionenweise mit 2,849 g (52,9 mMol) Ammoniumchlorid und dann mit 0,061 g (8,8 mg-At) Lithium versetzt. Sobald sich das 10 Lithium gelöst hat, werden 0,475 g (8,8 mMol) Ammoniumchlorid und dann weitere 0,061 g (8,8 mg-At) Lithium zugegeben. Dieser Vorgang, Zugabe von 8,8 mMol Ammoniumchlorid, gefolgt von 8,8 mg-At Lithium, wird noch vier-zehnmal wiederholt, wofür total 6,65 g (124,3 mMol) ! 15 Ammoniumchlorid und 0,854 g (124 mg-At) Lithium benötigt werden. Sobald sich das Lithium der letzten Zugabe gelöst ; hat, werden 5,0 g (93 mMol) Ammoniumchlorid, dann 80 ml I Aether zugegeben und Ammoniak unter Rühren verdampft. Die j zurückbleibende Suspension wird mit Wasser verdünnt und i \ 20 mit Aether extrahiert. Der Extrakt wird mit ges. NaCl- I Lösung gewaschen, über Na2S04 getrocknet und im Vakuum ! abgedampft. Der Rückstand wird auf 60 g Kieselgel (aufge- ! zogen mit Hexan-Aether 9:1 enthaltend 0,4% Pyridin) chromatographiert. Eluierung mit Aether ergibt 2,877 g 1 25 (76,8%) (20S)-21-(l-Aethoxyäthoxy)-Ια, 3/E-dihydroxy-20- j methyl-pregn-5-en in Form eines farblosen amorphen Pul- ! vers, Smp. 124-126°, [α]^5 = -43,3° (c = 1,0, CHCl3 mit 0,1% N(C2H5)3) .

! j * Beispiel 12 i j 30 Unter Rühren und Ar-Begasung werden zu 170 ml | trockenem Ammoniak bei -31 bis -33° vorerst 0,334 g (48 ! · mg-At) Lithium gegeben und die dunkelblaue Mischung nach ! 15 Minuten Rühren innert 40 Minuten tropfenweise mit einer Lösung von 3,0 g (8,76 mMol) (20S)-la,2α-Ξ?οχγ-21-: 3Ξ hyircxy-2C-methyl-pregna-4,6-äien-3-on in 208 ml Aether/ I »~Prokuren 4,2:1 versetzt. Nach 15 Minuten Bühren / - 15 - werden zur blauen Lösung 0,2 ml Isopren gegeben und die nun rosa gefärbte Mischung anschliessend unter Rühren und Ar-Begasung vorerst portionenweise mit 3,045 g (57 mMol) Ammoniumchlorid und dann mit 0,0608 g (8,7 mg-At) Lithium 5 versetzt. Sobald sich das Lithium gelöst hat, werden 0,468 g (8,7 mMol) Ammoniumchlorid und dann weitere 0,0608 g (8,7 mg-At) Lithium zugegeben. Dieser Vorgang, Zugabe von 8,7 mMol Ammoniumchlorid gefolgt von 8,7 mg-At Lithium, wird noch vierzehnmal wiederholt, wofür total - lo 6,552 g (122 mMol) Ammoniumchlorid und 0,851 g (122 mg-At) Lithium benötigt werden. Sobald sich das Lithium der letzten Zugabe gelöst hat, werden 10,0 g (180 mMol) Ammoniumchlorid, dann 150 ml Aether zugegeben und Ammoniak wird unter Rühren verdampft. Die resultierende 15 Suspension wird bei 0° mit 200 ml Wasser verdünnt und mit • Essigester extrahiert. Der Extrakt wird mit ges. NaCl-Lösung gewaschen, über Na2S04 getrocknet und bei 40°/ll Torr eingedampft. Chromatographie des Rückstandes an 90 g Kieselgel mit Benzol/Essigester 1:1 und Essigester liefert 20 1, 93 g (63%) einheitliches, kristallines (20S)-lct,3ß,21-Trihydroxy-20-methyl-pregn-5-en vom Schmelzpunkt 205-207°, [a]^ = -25,8° (c = 0,5, CH^OH). Die analytische Probe wird durch Umkristallisation aus Aceton gewonnen:

Smp. 206-208°, [a]^5 = -27° (c = 0,5, CI-^OH) .

25 Beispiel 13

Herstellung des A.usgangsmaterials

Eine Lösung von 3,42 g (10 mMol) (20S)-la,2a-Epoxy-21-hydroxy-20-methvl-pregna-4,6-dien-3-on in 100 ml .

Toluol wird im Wasserstrahlvakuum auf 50 ml konzentriert. 30 Die resultierende Suspension wird bei 0° mit 2 ml einer aus 50 ml Toluol, 0,172 g p-Toiuolsulfonsäure und 0,2 ml Pyridin zubereiteten Suspension versetzt, dann 3 ml Isopropenylmethyläther zugefügt und das Gemisch 3 Stunden bei 0" gerührt. Wach Zugabe von 1 ml Triäthylamin wird cei unä Torr eingedampft. Der kristalline Rückstand ! _ - 1 * ergibt durch Lösen in wenig Methylenchiorid, enthaltend 0,1% Triäthylamin, und Zusatz von Aether 2,91 g (70%) (20S)-Ια,2a-Epoxy-21-(1-methoxy-l-methyläthoxy)-20- ' methyl-pregna-4,6-dien-3-on vom Schmelzpunkt 150-151°, 5 [alß5 = +185,8° (c = 1,0, CHCl3 mit 0,1% N(C2H5)3).

Verfahren

Eine bei -31 bis -33° bereitete Lösung von 0,416 g ' (60 mg-At) Lithium in 200 ml trockenem Ammoniak wird nach 10 Minuten Rühren innert 40 Minuten in Ar-Atmosphäre 10 unter Rühren tropfenweise mit einer Lösung von 4,14 g (10 ïïiMol) (20S)-la,2a-Epoxy-21-(1-methoxy-l-methyläthoxy)-20-i methyl-pregna-4,6-dien-3-on in 240 ml Aether/THF 1,6:1 versetzt. Nach 15 Minuten Rühren werden zur blauen Lösung •i | 0,5 ml Isopren gefügt und die nun rosa gefärbte Mischung | 15 unter Rühren und Ar-Begasung vorerst portionenweise mit j 3,744 g (70 mMol) Ammoniumchlorid und dann mit 0,069 g 1 (10 mg-At) Lithium versetzt. Sobald sich das Lithium gelöst hat, werden 0,535 g (10 mMol) iurimoniumchlorid und dann weitere 0,069 g (10 mg-At) Lithium zugegeben. Dieser 20 Vorgang, Zugabe von IO mMol Ammoniumchlorid gefolgt von 10 mg-At Lithium, wird noch vierzehnmal wiederholt, wofür | total 7,49 g (140 mMol) Ammoniumchlorid und 0,966 g‘(140 mg-At) Lithium benötigt werden. Sobald sich das Lithium der letzten Zugabe gelöst hat, werden 10 g (180 mMol) 25 Ammoniumchlorid, dann 100 ml Aether zugegeben und Ammoniak unter Rühren verdampft. Die verbleibende Suspension wird bei 0° mit Wasser versetzt und mit Essigester extra-i · hiert. Der Extrakt wird mit ces. NaCl-Lösung gewaschen, über Na^SO^ getrocknet und nach Versetzen mit 1 ml Tri-30 äthyiamin bei 30°/ll Torr eingedampft. Chromatographie des Rückstandes an 1Ί0 g neutralem Aluminiumoxid mit Benzol/Essigester 1:1 und Essigester liefert 3,01 g (71,6%) einheitliches, kristallines (2GS)-la,33-Dihydroxy-21-(1-methoxy-l-methyläthoxy)~20~methyl-pregn-5-en. Die 33 2nalyrische Probe wird durch Umkristallisation aus Metha- ----1 -rrnarrend 0,1¾ Trramylamin, gewonnen: Schmelzounkt / / /1 156-157°, [α]^5 = -46° (c = 1,0 CHC13 mit 0,1% N(C2H5)3).

_ ~>r\ _ #

Beispiel 14

Herstellung des Ausgangsmaterials

Eine Lösung von 34,8 g (0,11 Mol) (20R)-20-Hydroxy-5 pregn-4-en-3-on in 300 ml Dimethylsulfoxid wird mit 18,7 g (0,16 Mol) Kalium-t-butoxid versetzt und 4 Stunden bei Raumtemperatur unter Argon gerührt. Das rotbraun gefärbte Gemisch wird in 1 kg Eis gegossen und das Produkt mit Methylenchlorid extrahiert. Der Extrakt wird mit Wasser 10 gewaschen, über Na2S0^ getrocknet und im Wasserstrahlvakuum eingedampft.. Der Rückstand wird an 1 kg Kieselgel mit Hexan/Aether/Methylenchlorid 7:2:1 chromatographiert und ergibt 7,3 g (21%) einheitliches, kristallines (20R)-20-Hydroxy-pregn~5-en-3-on. Die analytische Probe wird 15 durch Umkristallisation aus Aethanol-Methylenchlorid λ r erhalten: Schmelzpunkt 171-175°, [a]p ~ -33,2° (c = 0,5, CHClg).

Ein aus 6,7 g (21,1 mMol) (20R)-Hydroxy-pregn-5-en- 3-on, 11,9 g (52,4 mMol) 2,3-Dichlor-5,6-dicyano-benzo-20 chinon und 200 ml Dioxan bereitetes Gemisch wird 6 Stunden am Rückfluss gekocht. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird genutscht, der Rückstand mit Dioxan gewaschen und die vereinigten Filtrate über 100 g neutralem Aluminiumoxid filtriert. Das Eluat wird eingedainpft 25 und der Rückstand, an 200 g Kieselgel mit Aether chromatographiert. Dabei resultieren 2,94 c (44,0¾) (20R)-20- * Hydroxy-pregna-1,4,6-trien-3-on in Form gelblich getarnter

Kristalle vom Schmelzpunkt 162-164°.

Eine Lösung von 2,79 g (8,92 mMol) (20R)-20-Kydroxy- 23 pregna-1,4,6-trien-3-on in 27 ml Methanol wird mit 0,83

Q

ml lOliger methanolischer Natronlauge versetzt, auf 0 angekohlt und während 10 Minuten unter Rühren 5,4 ml 31lige Wasserstoffperoxid-Lösung zugetropft. Die Lösung U J_ — wird 45 Minuten bei 0° und 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die gebildete Suspension wird portionenweise mit total 60 ml Wasser versetzt, auf 0° abgekühlt und überschüssiges Peroxid durch Zugabe von Natriumbisulfit-5 Lösung vernichtet. Das Gemisch wird im Wasserstrahlvakuum vom Methanol befreit und der Rückstand mit Essigester extrahiert. Der Extrakt wird mit ges. NaCl-Lösung gewaschen, über Na2S04 getrocknet und eingedampft. Chromatographie des Rückstandes an 80 g Kieselgel mit Hexan/ 10 Aether 1:1 ergibt 1,77 g (60,4%) einheitliches (20R)-la,2a-Epoxy-20-hydroxy-pregna-4,6-dien-3-on in Form farbloser Kristalle. Die analytische Probe wird durch Um-j Kristallisation aus Methylenchlorid-Aether erhalten: ! Schmelzpunkt 206-207°, [a]^~* = +231,6° (c = 0,5, CHCl^),.

\ 15 UV (Aethanol): λ 292 nm (ε 21050).

j max · i j | Eine Lösung von 2,67 g (8,1 rnMol) (20R)-la, 2a-Epoxy- j 20-hydroxy-pregna-4,6-dien-3-on in 120 ml Benzol wird im i Wasserstrahlvakuum bei 40° auf 60 ml eingeengt, auf Raum- I temperatur abgekühlt und zur Suspension werden 1,6 ml j \ 20 3,4-Dihydro-2H-pyran sowie 16 mg wasserfreie p-Toluolsul- j • fonsäure gegeben. Das Gemisch wird 2,5 Stunden bei Raum- Î temperatur gerührt. Die entstandene Lösung wird mit ! Aether verdünnt, vorerst mit ges. NaHCO^-Lösung, dann mit ; ges. NaCl-Lösung gewaschen, über Na2S04 getrocknet und | 25 eingedampft. Es resultieren 3,3 g kristallines (20R)- I la,2a-Epoxy-20-[(tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy]-pregna- i ] 4,6-dien-3-on. Umkristallisation aus Aether enthaltend i j 0,1% Triäthylamin liefert farblose Prismen vom Schmelz- i * ----.>·«· 1 -30-1 iD° r.^125 = -2'^ 6° (c = Ο," Γ-Γ1 ) rrv 1/ ^ so -'Aethanol) : λ 291 nm (ε 20940) .

^ max

Verfahren

Zu 150 ml trockenem Ammoniak werden bei -31 bis -33° 0,316 g (45 mg-At) Lithium gegeben. Wach 15 Minuten Rührer. in Ar-Atmosphäre wird die dunkelblaue Mischung 15 Innern 45 Minuten tropfenweise mit einer Lesung von 3,23 / •1 «m g (7,8 mMol) (20R)-la,2a-Epoxy-20-[(tetrahydro-2H~pyran-2-yl)oxy]-pregna~4,6-dien-3-on in 180 ml Aether versetzt. Die blaue Lösung wird 15 Minuten in Ar-Atmosphäre bei der obigen Temperatur gerührt und 0,15 ml Isopren werden 5 zugefügt. Die nun rosa gefärbte Mischung wird vorerst portionenweise mit 2,84 5 g (53 mMol) Ammoniumchlorid und dann mit 0,0527 g (7,6 mg-At) Lithium versetzt. Sobald sich das Lithium gelöst hat, werden 0,4065 g (7,6 mMol) Ammoniumchlorid und anschliessend weitere 0,0527 g (7,6 10 mg-At) Lithium zugegeben. Dieser Vorgang, Zugabe von 7,6 mMol Ammoniumchlorid gefolgt von 7,6 mg-At Lithium, wird noch vierzehnmal wiederholt, wofür total 5,691 g (106 mMol) Ammoniumchlorid und 0,7378 g (106 mg-/^t) Lithium benötigt werden. Nach Auflösung des Lithiums der letzten 15 Zugabe werden 10,0 g (180 mMol) Ammoniumchlorid und 200 ml Aether zugefügt und Ammoniak unter Rühren verdampft.

Die resultierende Suspension wird bei 0° mit 200 ml Wasser verdünnt und mit Essigester extrahiert. Der Extrakt wird mit ges. NaCl-Lösung gewaschen, über Na^SO^ getrock-20 net und bei 40°/ll Torr eingedampft. Chromatographie des Rückstandes an 65 g Kieselgel mit Bexan/Aether 1:1 ergibt 2,52 g (78%) einheitliches (20R)-la, 3i3-Dihydroxy-20-[ (tetrahyöro-2H-pyran-2-yl)oxy]-pregn-5-en vom Schmelzpunkt 122-124°, [a]^ = -42° (c - 1,0, CHCl^) . Durch 25 Verseifung erhält man (20R) -la, 3ß-20-Tri?iydroxy--pregn-5-en vom Schmelzpunkt 235-237°, [a]^" ~ ^3° (c ·- 0,5, CH30H).

Beispiel __1_5

Herstellung des Aus zar.csmateri als 30 Eine Lesung von 1,0 g 17,lT-Aethylencioxy-ändrcsta- 1,4,c-trien-3-on in 40 ml Methanol wird bei Raumtemperatur mit 0,28 ml lOtiger mathuroliseher Mat rer. I auge und 1,3 ml 30vigen Wasserstoz ::ve.·. exi d vers izzx. erd 4 1 / 2 *

A

( I abgenutscht und an 30 g Kieselgel chromatographiert.

[1 Eluierung mit Hexan/Aether 3:2 liefert 0,793 g (75%) Ï kristallines 17,17-Aethylendioxy-la,2a-epoxy-androsta- 4,6-dien-3-on. Die analytische Probe wird durch Umkristal-jl 5 lisation aus Aether gewonnen, Smp. 181-186°, [cc]^ = +167° I (c = 0,5, Dioxan), UV (Aethanol): λ 291 nm (ε 19270).

j IuclX

| Verfahren [ * Zu 1,3 1 trockenem Ammoniak werden bei -31 bis -33° unter Rühren in Ar-Atmosphäre 1,543 g (0,22 g-At) Lithium 10 gegeben. Nach 5 Minuten wird zur dunkelblauen Mischung eine Lösung von 10,83 g (0,0316 Mol) 17,17-Aethylendioxy-la,2a-epoxy-androsta-4,6-dien-3-on in 765 ml Aether/Tetra-| hydrofuran 2:1 während 40 Minuten getropft. Nach 15

Minuten Rühren werden zur tiefblauen Lösung tropfenweise 15 5,3 ml Isopren gegeben. Die gelbe Reaktionsmischung wird unter Rühren portionenweise mit 13,49 g (0,252 Mol) Ammoniumchlorid versetzt und dann werden 0,22 g (0,0316 g-At) Lithium zugefügt. Sobald sich das Lithium gelöst hat, werden 1,69 g (0,0316 Mol) Ammoniumchlorid und 20 anschliessend weitere 0,22 g (0,0316 g-At) Lithium zugegeben. Dieser Vorgang, d.h. Zugabe von 0,0316 Mol Ammonium-chlorid und 0,0316 g-At Lithium, wird noch vierzehnmal wiederholt, wofür noch total 23,66 g (0,442 Mol) Ammoniumchlorid und 3,08 g (0,442 g-At) Lithium benötigt werden.

25 Sobald sich das Lithium der letzten Zugabe gelöst hat, werden 24 g (0,44 Mol) Ammoniumchlorid zugegeben und das Gemisch vorsichtig mit 1 1 .Aether verdünnt. Unter Rühren wirc ms zu einer Ir.nentemperatur von 0 Ammoniak ver-• dampft und die verbleibende Suspension mit 1 1 Wasser 30 versetzt. Die organische Phase wird abgetrennt, die wässerige Phase mit Essigester nachextrahiert, die organischen Phasen vereinigt, mit ges. NaCi-Lösung gewaschen, über ^a2S04 9et^°-knet und bei 40°/ll Torr eincedamOft Cnromatographie des Rückstandes an 300 c Kieselael mit 3Ξ Benzol,'Essigester 3:2 und Benzol/Essigester 2:3 ergibt S,3 g ,30¾) einheitliches, kristallines 17,17-Aethvlen- - 24 - d±oxy~la,3|3-dihydroxy-androst-5-en. Die analytische Probe wird durch Umkristallisation aus Methanol erhalten: weisse Nadeln vom Smp. 205-206°, [a]^5 = -89,8° (c = 0,5, chci3).

5 Beispiel 16

Herstellung des Ausgangsmaterials

Eine Lösung von 50,0 g 20,2O-Aethylendioxy-30-hydroxy-pregn-5-en in 900 ml Dioxan wird mit 95 g 2,3-Dichlor-5,6-dicyano-l,4-benzochinon versetzt und 20 10 Stunden unter Rückfluss gekocht. Die entstandene Suspension wird genutscht, der Rückstand mit Dioxan gewaschen und die vereinigten F.iltrate im Vakuum auf ein Volumen von 200 ml konzentriert. Das Konzentrat wird über 900 g neutralem Aluminiumoxid filtriert, mit Dioxan nachge-15 waschen und die vereinigten Filtrate bei 40° am Wasserstrahlvakuum eingedampft. Der Rückstand liefert durch Chromatographie an 900 g neutralem Aluminiumoxid mit Hexan/Aether 1:1 9,2 g (18,7%) 20,20-Aethylendioxy-pregna-1,4,6-trien-3-on. Umkristallisation aus Methanol, 20 enthaltend 0,5% Pyridin liefert 6,2 g hellgelbe Nadeln vom Smp. 162-163°, [a]j^5 = +13,6° (c = 0,5, CHC13), UV

(Aethanol): λ 222 (ε 11750), 258 (ε 9600) und 300 nm ' max (ε 13200).

In zu Beispiel 15 analoger Weise werden aus 8,2 g 25 20,20-Aethylendioxy-pregna-l,4,6-trien-3-on 5,28 g (60%) 20,20-Aethylendioxy-la,2a-epoxy-pregna-4,6-dien-3-on erhalten: Smp. 137-138°, [o]^ = +235° (c = 0,5, CHC10) , UV (Aethanol): λ 292 nm (ε 20900). max .

Verfahren 30 Eine Lösung von 0,594 g (0,G356 g-At) Lithium in 500 ml trockenen Ammoniak von -31 bis -33° wird nach ihrer Herstellung 5 Minuten gerührt und unter Argon 'mährend 40 .

__ τ: —

Minuten eine Lösung von 4,535 g (0,0122 Mol) 20,20-Aethylendioxy-la,2a-epoxy-pregna-4,6-dien-3-on in 300 ml ; . Aether/Tetrahydrofuran 2:1 zugetropft. Die -33° kalte tiefblaue Lösung wird noch 15 Minuten gerührt und bis zum | 5 Farbumschlag nach gelb mit 2 ml Isopren versetzt. Unter S Rühren werden portionenweise total 4,579 g (0,0856 Mol)

Ammoniumchlorid zugefügt. Zur Mischung werden dann 0,654 j; g (0,0122 Mol) Ammoniumchlorid und gerade anschliessend ; 0,0849 g (0,0122 Mol) Lithium gegeben. Sobald sich das * 10 Lithium gelöst hat, wird dieser Vorgang, d.h. Zugabe von 0,0122 Mol Ammoniumchlorid gefolgt von der dazu äquiva-; lenten Menge Lithium noch fünfzehnmal wiederholt, wofür total 9,81 g (0,183 Mol) Ammoniumchlorid und 1,273 g (0,183 g-?At) Lithium benötigt werden. Sobald sich das 15 Lithium der letzten Zugabe gelöst hat, werden vorerst 9,5 g (0,17 Mol) Ammoniumchlorid und dann 500 ml Aether zugegeben. Unter Rühren wird bis zu einer Innentemperatur I von 0° Ammoniak verdampft und die verbleibende Suspension mit 500 ml Wasser und 500 ml Aether versetzt. Die orga-! 20 nische Phase wird abgetrennt und die wässerige Phase mit

Essigester nachextrahiert. Die organischen Phasen werden vereinigt, mit ges. NaCl-Lösung' gewaschen, über Na2S0^ getrocknet und bei 40° im Wasserstrahlvakuum eingedampft.

; Der Rückstand liefert dui~ch Chromatographie an 150 g 25 Kieselgel mit Aether/Tetrahydrofuran 19:1 und 4:1 3,9 g (85%) einheitliches 20,20-Aethylendioxy-la, 3j3-dihydroxy-pregn-5-en. Die analytische Probe wird durch Umkristalli-sation aus Methanol erhalten: Snp. 203-207°, [a]^ = “47° (c = 0,5, CHC13).

A

Claims

1. Verfahren zur Herstellung von la,3j3-Dihydroxy-Ä -Steroiden der Teilformel Lb- A B I 4 dadurch gekennzeichnet, dass man in einer ersten Stufe ein 5 Steroid der Teilformel AB II in einem Lösungsmittel mit der stöchiometrischen Menge oder einem geringfügigen Ueberschuss Lithium in flüssigem Ammo-niak in Abwesenheit eines Protonendonators zu einem Steroid 10 der Teilformel -\ LiO ___ ! ch3F^—v reduziert, gegebenenfalls unverbrauchtes Reduktionsmittel mit einem nicht proionierenden Mittel vernichtet ur.c aas Steroid der Teilformel III mit einer zur zugegebenen Menge 1Ξ Lithium äquivalenten Menge eines Protonendonators 2U einem Stereid der Teilformel - ÿ-7 - « *— è ] HO — jj j A B IV umsetzt und in einer zweiten Stufe das Steroid der Teil-I formel IV durch mehrmalige alternierende Zugabe eines Pro- 'Ï * il tonendonators, jeweils gefolgt von der zur Menge des Pro- ,j 5 tonendonators äquivalenten Menge Lithium zum Steroid der ' Teilformel I reduziert.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, jj dass man eine Lösung .des Steroids der Teilformel II in Î! absolutem Diäthyläther mit Lithium in flüssigem Ammoniak : 10 reduziert und unverbrauchtes Reduktionsmittel mit Isopren vernichtet.

3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadui'ch gekennzeichnet, dass man es in einer Argonatmosphäre, bei einer Temperatur zwischen -30 und -55°, vorzugsweise zwischen -31 15 und -33°, durchführt.

4. Verfahren nach Anspruch 1, 2 oder 3, dadurch gekenn- 1 zeichnet, dass man in der ersten Stufe 4 bis 7 Aequivalente, vorzugsweise 4,5 bis 5 Äquivalente Lithium bzw. Protonendonator verwendet und in der zweiten Stufe fünfmal bis 20 dreissigmal 0,3 bis 6 Aequivalente, insgesamt 9 bis 30 Aequivalente, vorzugsweise zehn- bis zwanzigmal, insbesondere sechzehnmal ein .-.équivalent Protonendor.ator, jeweils gefolgt von der äquivalenten Menge Lithium zugibt.

5. Verfahren nach einem, der Ansprüche 1-4, dadurch 25 gekennzeichnet, dass man ein Ammoniirr.salz, vorzugsweise Ammoniumchlorid, als Protonenconator verwendet. L / 0 "23 "

6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1-5/ dadurch gekennzeichnét, dass man als Ausgangssteroid der Teilformel II ein solches der Formel R ^CH3 CH3 5 worin R eine gegebenenfalls durch eine oder mehrere Sauerstoffunktionen substituierte Cholesterin-Seitenkette, eine gegebenenfalls geschützte Keto- oder Acetylgruppe oder ein Rest CH_ 3 der Formel -CHt^ darstellt, worin Y Bydroxy, Y

7. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass R ein Rest der Formel CH3 .. ,CH 3 ch3 ist, worin X Wasserstoff, Hydroxy oder leicht spaltbares veräthertes Hydroxy ist.

8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, cass man lo, 2c—Hpoxy—croresra—4,6 —eien—3—on als A-uscancs —

20 Steroid verwenden. u i - 23 - i «

9. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass man la,2a-Epoxy-25-hydroxy~cholesta-4,6-dien-3-on ' als Ausgangssteroid verwendet. *

10. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, 5 dass X leicht spaltbares veräthertes Hydroxy ist.

10 Hydroxymethyl oder leicht spaltbares veräthertes Hydroxy oder Hydroxymethyl ist, verwendet.

11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, ] dass man la,2a-Epoxy-25-tetrahydropyranyloxy-cholesta- 4 4,6-äien-3-on oder 25-(1-Aethoxyäthoxy)-la,2a-epoxy- cholesta-4,6-dien-3-on als Ausgangsmateroid verwendet. j

12. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass man ein Steroid der Formel Ha, worin R ein Rest der CH3 Formel ist, und Y Hydroxymethyl oder leicht ! Y t i spaltbares veräthertes Hydroxymethyl ist, als Ausgangs- ; material verwendet.

13. Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass man (20S)-la,2a-Epoxy-20-methyl-21~tetrahydropyranyl- oxy-pregna-4,6-dien-3-on, (20S)-21-(1-Aethoxyäthoxy)-1 la,2a-epoxy-20-methyl-pregna-4,6-dien~3-on oder (20S)~ I la,2a-Epoxy-21-(1-raethoxy-l-methyläthoxy)-20-methyl- ; 20 pregna-4,6-dien-3-on als Ausgangssteroid der Formel II verwendet.

, 14. la,2a-Epoxy-cholesta-4,6dien-3-one der Formel * CH3 C Hg . CH. ^OZ Â CH3 III II b CH3 « * — -, mJ ^ * worin -OZ leicht spaltbares veräthertes Hydroxy darstellt.

15. 1er, 2a-Epoxy-25-tetrahydropyranyloxy-cholesta- 4,6-dien-3-on. 5 16. 25-(1-Aethoxyäthoxy)-la, 2cc-epoxy-cholesta-4,6- dien-3-on. 17. la,3J3-Dihydroxy-25-tetrahydropyranyloxy~cholest- 5-en. 18. 25-(1-Aethoxyäthoxy)-la,3ß-dihydroxy~cholest- 5-en. * * * 4