LU79902A1

LU79902A1 - Procede de preparation d'une composition pharmaceutique a base de certains acides phenylglyoxyliques ou de leurs derives

Info

Publication number: LU79902A1
Application number: LU79902A
Authority: LU
Inventors: P Cross; J Danilewicz; I Barnish; M Morville; M Page
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1977-07-01
Filing date: 1978-06-30
Publication date: 1980-01-22
Also published as: DE2828620C2; FR2395753A1; BE868665A; NL7807091A; PT68239A; ZA783746B; DE2828620A1; IE781321L; JPS5414522A; GR70238B; CA1118353A; IT1096860B; IT7825152A0; NL175030C; US4219566A; GB2000441B; FR2395753B1; NL175030B; AU507286B1; GB2000441A

Description

1 La présente invention concerne certains acides phénylglyoxyliques, leurs esters et leurs sels, qui peuvent être appliqués au traitement de maladies et d'états se caractérisant par une réduction du débit sanguin, de la disponibilité 5 en oxygène ou du métabolisme des glucides dans le système cardio-* vasculaire, par exemple les maladies cardiaques dues à l'ischémie (notamment l'angine de poitrine et l'infarctus du myocarde), la défaillance cardiaque et l'insuffisance cérébrale ou d'autres maladies impliquant des défauts du métabolisme des glucides, 10 par exemple l'obésité et le diabète.

L'invention concerne une composition pharmaceutique contenant un composé de formule : o o /X, b - c - II'1 fi T -(i) Λ Av R i λ η (dans laquelle R est un atome d’hydrogène ou un radical alkyle infé- 15 rieur, hydroxy, alkoxy inférieur, alkylthio inférieur, a]canoyloxy inférieur ou halogéno; R1 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle inférieur ou un halogène et 2 R est un groupe hydroxy ou alkoxy inférieur) 2 20 ou, lorsque R est un groupe hydroxy, un sel acceptable du point de vue pharmaceutique d'un métal, d'ammonium, d'amine ou d'amino-acide de ce composé, en association avec un diluant ou véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique, cette composition étant sous la forme posologique unitaire (comme défini ci-dessus) 25 Dans le présent mémoire, le terme "halogène" désigne le fluor, le chlore, le brome ou l'iode.

Le terme "inférieur" appliqué à un groupe alkyle ou alkoxy signifie que ce groupe peut avoir 1 a 6 atomes de carbone et, lorsqu'il est appliqué à un groupe alcanoyle, 2 à 5 30 atomes de carbone. Les groupes alkyle, alkoxy ou alcanoyle acceptables peuvent être des groupes à chaîne droite ou ramifiée.

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Les groupes alkyle, alkoxy et alcanoyle préférés ont jusqu'à Λ atomes de carbone. Les sels acceptables du point de vue pharmaceutique de composés de formule I dans laquelle R2 est un j groupe OH sont de préférence les sels de sodium, potassium, : 5 calcium ou ammonium ou les sels formés avec l’arginine, la mé- j ’ glumine, 1 ' éthanol amine ou la choline.

| Les composés préférés de formule I sont ceux dans les- t o 1

J quels R'1 est un groupe hydroxy, R·1 est. un atome d'hydrogène et R

| est un radical hydroxy, méthoxy, méthylthio, éthylthio, méthyle 10 ou chloro.

Les composés de l'invention permettent le traitement d'un animal ou d'un être humain dont la maladie ou l'état peut être attribué à une réduction du débit sanguin, de la disponibilité en oxygène ou du métabolisme des glucides dans le système ! 15 cardiovasculaire, ou atteint d’une autre maladie ou présentant un autre état qui implique une anomalie du métabolisme des glu-j cides, par administration à l'animal ou à l'être humain d'une | quantité efficace d'un composé de formule I ou bien, lorsque j R2 est un groupe hydroxy, d'un sel acceptable du point de vue ! 20 pharmaceutique de métal, d'ammonium, d'amine ou d ' amino-acide de j ' ce composé ou d1 une composition pharmaceutique contenant ledit j composé ou un sel, en association avec un diluant ou support acceptable du point de vue pharmaceutique. La composition pharmaceutique est de préférence sous une forme posologique unitaire 25 (comme défini ci-après).

L'invention concerne en outre un composé de formule I ou bien, lorsque R es(|un groupe hydroxy, un sel acceptable du point de vue pharmaceutique d'un métal, d'ammonium, d'amine oü d'amino-acide de ce composé ou une composition pharmaceutique 30 éventuellement sous la forme posologique unitaire renfermant un composé ou un sel de ce composé en association avec un diluant ou véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique, cette forme posologique étant destinée à dire utilisée dans le traitement d'un animal, y compris un être humain, atteint d'une maladie 35 ou présentant un état comme défini ci-dessus.

L'expression "for.ne posologique" unitaire utilisée dans le présent mémoire désigne une unité physiquement distincte contenant une quantité individuelle du composant actif en ( 3 » y . * - i associ ration avec un di luant ou véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique, la quantité de composant actif étant choisie d'une manière qu'au moins une unité ou une fraction de cette unité soit nécessitée par une administration thérapeutique in-5 dividuelle. Dans le cas d’unités divisibles, par exemple dans t le cas de comprimés sécables, au moins une fraction telle que la moitié ou le quart de l'unité peut représenter la quantité que nécessite une administration thérapeutique individuelle.

Il y a lieu de remarquer que l'expression "forme posologique

S

10 unitaire" ne couvre pas de simples solutions, excepté lorsque les solutions sont emballées dans des récipients qui peuvent être ingérés par exemple des capsules molles, ou bien lorsqu’elles ont été préparées de manière à pouvoir être administrées par » [ voie parentérale, par exemple des ampoules de solution qui con- ! 15 viennent pour une injection parentérale.

! Les composés de formule I sont en général des composés ' connus. On connaît bien leurs procédés de préparation. Toutefois, ; aucune application médicale n'avait encore été proposée pour ces I ✓ : composes· ! j 20 Los composés de formule I peuvent être administrés ! à des patients en mélange avec un support ou en solution dans j __ un véhicule acceptable du point de vue pharmaceutique, choisi j compte tenu de la voie désirée d'administration et de la pratique pharmaceutique normale.

25 Par exemple, on peut les administrer par voie orale sous la forme de comprimés ou de capsules contenant une dose unitaire du composé de formule I en association avec des excipient i tels que l'amidon de mais, le carbonate de calcium, le phosphate dicalcique, l'acide alginiquo, le lactose, le stéarate de mayiG-30 sium, le produit "Primogel" (marque déposée) ou le talc. Les comprimés sont habituellement préparés par formation de granules des ingrédients et compression du mélange résultant de manière à former des comprimés au diamètre désiré. Les capsules sont ordinairement préparées par formation de granules des ingrédients 35 puis introduction des granules obtenus dans des capsules en gélatine dure de diamètre convenablement choisi pour qu'elles contiennent les ingrédients.

L

; 4 ,. · ί • Ί. «. ,

Los composés peuvent aussi être administrés par parentérale, par .exemple par injection intramusculaire, ir.’-:*. veineuse ou sous-cutanée. Pour une administration parentér -a.'-r ( on les utilise de la meilleure façon sous la forme d'une 5 tion aqueuse stérile qui peut contenir d'autres corps disso.

par exemple des quantités suffisantes de sels (tels que 1 ' ? c·,· | ( de sodium, le lactate de sodium, le citrate de sodium, le ^ nate de sodium ou le chlorure de sodium) ou de dextrose (ρ,ϊ, exemple 5 % de dextrose anhydre "B.P." pour 10 injectables), de manière à rendre la solution isotonique, v. >· solvant organique acceptable du point de vue pharmaceutique j, ^ que le polyéthylèneglycol ou l'éthanol peut aussi remplacer ^ partie de l'eau. Un agent antioxydant tel que le métabisulx \ ; i; I de sodium peut aussi être présent, par exemple en quantité 15 atteignant 0,1 % en poids. Ces formulations parentérales y, être préparées par des opérations classiques. Par exemple, une opération impliquant la préparation d'une formulation | veineuse contenant un succinate, on peut mélanger une solux\%N(^

| 0, 2M d'acide succinique avec une solution Ο, 2M d'hydroxyde ôsV

i 20 sodium pour obtenir une solution de pH égal à 5. Le compose ; formule I est ensuite dissous par exemple dans une solution succinate en quantité de 1 à 2 % sur base poids/volurne. i solution résultante peut ensuite être stérilisée conformér;.o··« à la méthode décrite dans la pharmacopée britannique de 1977 ^ 25 par filtration sur un filtre retenant les bactéries, dans o‘oN conditions aseptiques, la solution étant reçue dans des réc \ stériles répondant à la norme de stérilité définie dans la PhrTrmacoi'ée. britannique de 1973, annexe 121. Des récipients . vonables sont par exemple des fioles en verre stérilisées dn 30 dimensions propres a contenir le volume désiré de solution, „ volume correspondant par exemple à une dose unitaire du oc:t··,« x >* de formule I. Les composés de formule I peuvent aussi être administrés par infusion d'une formulation parentérale défini ci-dessus, dans une veine.

35 Pour une administration orale à des patients huri-a·. * » la dose quotidienne d'un composé de formule I va de 5 à 70 de préférence de 20 à 50 rng/kg par jour pour un adulte moyen , (70 kg). Pour une administration parentérale, la dose quotio'

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* , « f“ 5 ’ d’un composé de formule I doit être de 1 à 10 et de préférence de 2 à 5 mg/kg par jour, pour un adulte moyen. Ainsi, des comprimés ou capsules peuvent généralement contenir 150 mg à 1 g du composé actif en vue d'une administration orale, jusqu'à 5 5 fois par jour. Des unités posologiques destinées à l'adminis-• r tration parentérale peuvent contenir 70 à 750 mg de composé actif. Une ampoule représentative pourrait être une ampoule de 50 ml contenant 70 à rJ50 mg de composé actif dans 30 à 50 ml de solution.

10 Naturellement, il y a lieu de remarquer que c'est le médecin qui, dans chaque cas, déterminera la posologie réelle qui convient le mieux à l'individu et qui varie avec l'âge, le poids et la réaction du patient. Les doses indiquées ci-dessus conviennent pour un hôte moyen. Il peut naturellement exister 15 des cas individuels qui nécessitent des plages posologiques plus grandes ou plus faibles.

L'activité potentielle des composés de formule I dans le traitement de maladies caractérisées par une réduction du débit sanguin, de la disponibilité en oxygène ou du métabolisme 20 dos glucides dans le système cârdiovasculaire ou d’une autre maladie ou d'un autre état impliquant une anomalie du métabolisme des glucides, se détermine par leurs aptitudes à : (1) favoriser l'oxydation in vitro du glucose et/ou des pyruvates par des prépai’ations de muscles prélevés 25 sur le rat; (2) accroître la proportion de la forme active de pyruvate-déshydrogénase (PDH) dans des organes d'animaux (par exemple le rat) in vivo; (3) réduire la demande en oxygène et influencer l'utilisa- 30 tion relative des métabolites glucidiques et lipidi ques par le coeur, rythmé par des moyens électriques, d'un chien anesthésié en présence ou en l'absence d'une excitation par l'isoprénaline; et (4) à réduire les taux de glycémie chez des animaux rendus 35 diabétiques par une lésion chimique du pancréas.

L'existence d'une activité dans des tests portant sur le point (1) est l'indice de la possibilité d'utilisation des fl composés dans le traitement d'une maladie cardiaque par ischémie, lr 6 *1 »

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d'une défaillance cardiaque, d'une insuffisance cérébra]/··, du diabète débutant à la maturité, ou de l'obésité.

Une activité dans des tests portant sur le poi.-.t (2) est en outre l'indice de leur utilisé potentielle dans 1¾ trai-5 tement des maladies ou des états indiqués et, notamment, l’exis-' tence d'une activité dans le coeur d'un animal in vivo est l'indice de la possibilité d’utilisation dans le traitement d'une maladie cardiaque par ischémie et d'une défaillance cardiaque.

L'existence d'une activité dans des tests portant sur 10 le point (3) est en outre l'indice de leur utilité potentielle (tans le traitement d’une maladie cardiaque par ischémie et d'une défaillance cardiaque. L'existence d'une activité dans des tests portant sur le point (4) est l'indice de leur utilité potentielle dans le traitement du diabète.

15 L'invention est illustrée par les exemples suivants : EXEMPLE 1

On dissout 12,0 g d'acide acétique cristallisable dans de l'eau fraîchement distillée, pour former 1000 ml d'un«.* solution 0, 2M.

20 On dissout 16,4 g d'acétate de sodium anhydre dans de l'eau fraîchement distillée pour former 1000 ml d’une solution 0,2M.

On mélange ensuite 148,0 ml de la solution d'acide acétique (0,2M) avec 352,0 ml de la solution d'acétate de sodium 25 (0,2M), et on complète le volume du mélange à 1000 ml par addi tion d'eau fraîchement distillée. La solution résultante a un pH égal à 5 et on ajoute à cette solution 10,0 g (0,056 inole) d ' acide p-hydroxyphénylglyoxylique.

Cette solution finale est ensuite stérilisée confor— 30 méinent à la méthode de la Pharmacopée britannique (1973) par filtration sur un filtre convenable retenant les bactéi’ic.*! dans des conditions aseptiques, la solution arrivant dans des réci-pients stérilisés de manière à satisfaire à la norme de tcSri — lité définie dans l'annexe 121 de la Pharmacopée britannique 35 de 1973. Des récipients convenables sont des ampoules en verre stérilisées de 50 ml de capacité qui sont remplies avec 30 ml de la solution finale, c'est-à-dire que les empoules résu 1 tar. res / i · · ' .

7 contiennent 300 mg d'ingrédient actif.

EXEMPLE 2

On dissout 23,62 g d'acide succinique dans de l’eau fraîchement distillée de manière à obtenir 1000 ml d'une solu-k 5 tion 0,2M. On dissout 8 g d'hydroxyde de sodium dans de l'eau fraîchement distillée pour obtenir 1000 ml d'une solution O, 2M-

On mélange ensuite 250 ml de la solution d'acide succinique 0,2M avec 267,0 ml de la solution d'hydroxyde de sodium 0,2M, le volume du mélange étant ajusté à 1000 ml par addition 10 d'eau fraîchement distillée. La solution résultante a un pH

égal à 5, et on y dissout 10,0 g (0,056 mole) d'acide p-hydroxy-phénylglyoxylique. La solution résultante est stérilisée conformément à la méthode décrite dans la pharmacopée britannique de 1973 par filtration sur un filtre retenant les bactéries, dans 15 des conditions aseptiques, la solution étant reçue dans des récipients stériles de manière à satisfaire à la norme de stérilité définie dans l'annexe 121 de la pharmacopée britannique de 1973. Des récipients convenables sont des ampoules en verre stérilisées qui sont remplies avec 40 ml de la solution finale.

20 Les ampoules résultantes contiennent donc 400 mg d'ingrédient actif.

EXEMPLE 3

On dissout 21,0 g d'acide citrique monohydraté dans 200,0 ml de NaOH 0,1M (4 g/1) et on ajuste le volume de la solu-25 tion résultante a 1000 ml par addition d'eau fraîchement distillée et refx'oidie. On ajuste ensuite le volume des 963,0 ml de solution à 1000 ml par addition d'acide chlorhydrique 0,IM puis on ajoute 10,0 g (0,056 mole) d'acide p-hydroxyphc-nylglyoxy-1ique.

30 Cette solution finale est ensuite stérilisée confor mément à la méthode décrite dans la Pharmacopée britannique de 1973 par filtration dans des conditions aseptiques sur un filtre retenant les bactéries, de composition convenable, la solution arrivant dans des récipients stériles, de manière à satisfaire 35 à la norme de stérilité définie dans l'annexe 121 de la Phar-! macopée britannique de 1973. Des récipients convenables sont l- ; ö j · v i ides ampoules en verre stérilisées de 50 ml de capacité» qui sont remplies avec 50 ml de la solution finale; les ampoules ré-" sultantes contenant 500 mg d'ingrédient actif.

EXEMPLE 4 1 5 On prépare de l'eau désoxygénée pour injectables a:r.

purgeant de l'eau fraîchement distillée à l'azote pendant ?C minutes. Pendant toutes les opérations suivantes, une coucha d'azote est maintenue au-dessus de la solution exposée. On c: s-' perse ensuite 200 mg de chlorure de sodium et 750 mg d'acide 10 hydroxyphénylglyoxy1ique en agitant dans 20 ml de l'eau pour injectables ainsi préparée. On ajoute ensuite 4,0 ml de sol ut:.- ο" diluée d'hydroxyde de sodium (l,0]-j). On ajuste le pH de la solution a 7,0 + 0,2 par l'addition d'une solution d'hydroxyde s-"1 sodium 0,lN, puis on ajuste le volume de la solution à 50 ml 15 avec l'eau pour injectables qui a été indiquée. Cette solut.1- ::r finale est ensuite stérilisée conformément à la méthode décri. r-'· dans la Pharmacopée britannique de 1973 par filtration dans des conditions aseptiques à travers un filtre convenable retenant les bactéries, en faisant' arriver la solution dans des r é-20 cipients stériles, do manière à satisfaire à la nonne de sté " lité définie dans l'annexe 121 de la Pharmacopée britannique de 1973. Des récipients convenables sont des ampoules on verr = stérilisées de 50 ml de capacité, qui sont remplies avec 50 r -de solution, les ampoules résultantes contenant 750 mg de 1' \." -25 grédient actif.

EXEMPLES 5 à 7

Des ampoules contenant 50 ml des formulations suivra. ' sont préparées de la môme manière que dans l'exemple 4, à la différence que dans les exemples 6 et 7, du métnbisulfite de 30 sodium (5,0 ml de .solution à 3,0 mg/ml ) est ajouté après l'action de la .soude caustique déci nor male- . < V.

t v.r.·: / :·.% V ; \* “ ;; ·. Γ / · * Hî y ..

9 N d'exem- . Formulation pie 5 Acide p-hydroxyphénylglyoxylique 750 mg

Chlorure de sodium 200 rng ! \ 5 Solution diluée d'hydroxyde de Quantité suffi- sodium santé pour un pH de 5,0 + 0,2

Eau pour injectables Complément à 50 ml 10 6 Acide p-hydroxyphénylglyoxylique 750 mg

Chlorure de sodium 200 mg Métabisulfite de sodium 15 mg

Solution diluée d'hydroxyde de Quantité suffi- sodium santé pour un 15 pH de 7,0+0,2

Eau pour injectables Complément à 50 ml 7 Acide p-hydroxyphénylglyoxylxque 750 rng

Chlorure de sodium 200 mg 20 Métabisulf ite de ‘sodium 15 mg

Solution diluée d'hydi'oxyde de Quantité suffi- sodium santé pour un pH de 5,0 + 0,2

Eau pour injectables Complément à 25 50 ml EXEMPLE 8

On prépare de l'eau désoxygénée pour injectables en purgeant de l'eau fraîchement distillée à l'azote pendant 30 minutes. On maintient une atmosphère d'azote sur la solution 30 pendant toute la durée des opérations suivantes. On disperse ensuite 500 mg d'acide L-aspartique et 150 mg de chlorure de sodium par agitation dans 30 ml de l'eau pour injectables ainsi préparée. On ajoute ensuite une solution diluée d'hydroxyde de sodium (1,0N) jusqu'à ce que le pH soit égal à é,5 + 0,1. En-35 suite, on ajoute 750 mg d'acide p-hydroxyphénylglyoxylique en agitant, et on ajuste le volume de la solution résultante à j · 50 rnl avec l'eau pour injectables préparée ci-dessus.

La solution est stérilisée et chargée dans une ampoule t ; de 50 ml comme décrit dans l'exemple 4.

Λ / I* ’ · 1 A- % 10 ; · ’ EXEMPLE 9 i On répète le mode opératoire de l’exemple 6 en ajow tant 5,0 ml d'une solution à 3,0 mg/ml de métabisulfite de su ' dium immédiatement après l'addition de l'acide glyoxylique.

? I ' 5 EXEMPLE 10

{ On prépare de la même manière que dans l'exemple A

I des formulations contenant de l'acide phény1gyoxylique, du p- ί î hydroxyphénylglyoxylate d'éthyle, de l'acide p-hydroxy-m-rnéth/( ] phénylgyloxyl ique, de l'acide p-hydroxy-m-i odophénylglyoxylïq·./.

10 de l'acide p-rnéthoxyphénylglyoxjrlique, de l'acide p-éthoxy- phénylglyoxylique, du p-éthoxyphénylglyoxylate d'éthyle, de l'acide rn-chloro-p-méthoxyphénylglyoxylique, de l'acide p-; (méthylthio)phényl glyoxylique, de l'acide p-(isopropylthio)- î phénylglyoxylique, de l'acide p-(n-butylthio)phénylglyoxyliqut^ 15 de l'acide p-(éthylthio)phénylglyoxylique, du (néopentylthio)-phénylglyloxylate de sodium, de l'acide p-méthylphénylglyoxyl j c ou de l'acide p-chlorophénylglyoxylique comme ingrédient actif en utilisant ledit ingrédient à la place de l’acide p-hydroxy- ; ; phénylglyoxylique et en omettant d'ajouter le chlorure de sod; _ > ‘ t ! * r I 20 EXEMPLE 11 \ 'r i ^ _ i Des comprimés sont formulés à partir des ingrédient?, j i .suivants : i mg/ccT,rl rné

Acide p-hydroxyphénylglyoxylique 510 25 Lactose 10 i ; ! Amidon de maïs 10 ; Stéarate de magnésium __5__ | :ll mg j Les ingrédients sont mélangés jusqu'à consi ; :ir,ce ho i 30 rnogène, granulés puis transformés en comprimés de d i a ~: r e dé'..

| EXEMPLE 12 , On formule des comprimés à partir des ingré:.ts [ ; suivants :

" L-, I

L

.· . ’,· c i 11 mq/comprimé

Acide p-méthoxyphénylglyoxylique 500

Lactose 30

Amidon de maïs 50 5 Stéarate de magnésium 5 * "595 mg

Les ingrédients sont mélangés jusqu'à consistance homogène, granulés puis transformés en comprimés de diamètre désiré Il peut être avantageux de dragéifier des comprimés 10 conformes à l'invention avec un revêtement kératinisé, par exemple un revêtement d'une matière telle que 1'acétàte-phtalate de cellulose ou le phtalate d'hydroxypropylméthylcellulose qui ne se dissout pas dans l'estomac, mais se dissout dans l'intestin, et/ou d'inclure dans la composition du comprimé une matière 15 effervescente, par exemple du bicarbonate de sodium et un acide comestible tel que l'acide tartrique, afin d'éviter la désactivation de l'ingrédient actif dans l’estomac et/ou dans l'intestin et de favoriser la concentration de l'ingrédient actif dans le sang.

20 II peut être désirable d'enrober les comprimés d'un revêtement sucré, pour en améliorer le goût.

On peut tester l'aptitude des composés de formule I à favoriser l'oxydation du glucose et/ou des pyruvates, par les méthodes d'essai suivantes : 25 (1) (a) On prélève le tissu du diaphragme de rats auxquels on fait absorber un régime à forte teneur en matière grasse semblable au "régime B" défini par Zaragoza et Felber ("Horm. Metab. Res." 1970, 2, 323). L'oxydation des pyruvates par ce tissu est déterminée par mesure de la vitesse d'incorporation 30 de carbone-14 provenant de pyruvate marqué au carbone-14, à ’· de l'anhydride carbonique in vitro, comme décrit par Bringolf ("Kur. J. Biochem. 1972, 2S_, 360). La vitesse d'oxydation des pyruvates est abaissée de 50 à 75 % comparativement a l'oxydation par le tissu d'un diaphragme prélevé sur des rats absorbant 35 un régime normal. Lorsque les composés de formule I sont ajoutés au milieu, on constate qu'ils stimulent l'oxydation des pyruvates par le tissu du diaphragme de rats absorbant des matières grasses d'une manière qui dépend de la dose.

12 t

Le degré de stimulation par les composés de formule I a une concentration de 2,0 mM (sauf spécification contraire) est illustré par le tableau suivant : o o Il ' Il 2

v C —G —R

0 R R1 i ' R R1 R2 % Stimulation H H OH 25 ( à 1 rn.M) OH II OH 104 OH H OC' Ilr 03 A 5 OCH H OH . 127 ocu 3-cl oh 52 OC' !)r H OU 91 2 5 OH 3-CH3 OH 21 OH 3-1 OH 55 CL 11 011 71 CH H 011 71 SCH3 H OH 123 SC JL H OH 150 A. b S. i.sojji opyle H OH 200 S.n-Lutyle H OH 113 .

SCH . tertiô- h OH 67 2 butyle

X

i i 13 (1) (b) On mesure la vitesse d'oxydation du glucose par des ' coeurs prélevés sur des rats à jeun dans un circuit de perfu sion oxygénée avec recyclage, par mesure de la vitesse d'incorporation du carbone-14 provenant de glucose marqué au carbone 5 14 à de l’anhydride carbonique par une méthode semblable à celle qui a été décrite par Morgan et collaborateurs dans "J. Biol. Chem." 1961, 236, 253 et par Rändle et collaborateurs dans "Biochem. J." 1964, 93_, 652. Le liquide de perfusion contient du glucose, un palmitate, de l'insuline et de la sérum -10 albumine de boeuf. On trouve que la vitesse normale d'oxydation du glucose est égale à 1,27 + 0,32 micromole/heure (moyenne de 9 observations).

L'aptitude de composés de formule (I) à accroître la proportion de la forme active de l'enzyme appelée pyruvate-15 déshydrogénase peut être mesurée par la méthode suivante : (2) Des rats absorbant un régime à forte teneur en matière grasse comme dans le test (l)(a) sont traités avec un placebo ou avec le composé de formule I, par injection sous-cutanée ou intraveineuse ou par administration orale, et à divers moments 20 après le traitement, les coeurs des rats sont prélevés et homogénéisés dans des conditions qui minimisent les variations de la proportion de la pyruvate-déshydrogénase présente sous la ferme active, comme décrit par Whitehouse and Rändle ("Biochem.

J." 1973, 134, 651). La quantité totale d'enzyme qui est présente 25 (PDHt ) et la quantité qui est présente sous la forme active (PDHa) sont déterminées par une méthode semblable à celle qui a été décrite par Taylor et collaborateurs dans "J. Biol. Chem." 1973, 248, 73. On note que l'absorption de matière grasse abaisse le rapport PDHa/PDHt d'une valeur normale d’environ 0,7 à 30 une valeur comprise dans la plage de 0,05 à 0,2.

L’élévation du rapport PDHa/PDHt produite par les composés de formule I aux doses mentionnées est illustrée sur le tableau suivant : ΙΛ 1*

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Aukland et collaborateurs dans "Circulation Res. 1964, 14, 164.

t | Le rythme cardiaque est réglé électriquement sur 155 battements j à la minute et des enregistrements des paramètres hémodynamiques I , , ? (pression sanguine, pression ventriculaire gauche et derivee | 15 première de cette pression) sont effectués continuellement, j Des mesures témoins du débit sanguin coronaire sont effectuées ] et des échantillons de sang sont prélevés à des intervalles j de 40 minutes, tant chez un animal non traité que chez le même animal traité par infusion d'isoprénaline (60 ng/kg/min), ce 20 qui dans les deux cas stimule la contraction cardiaque et élève le taux des acides gras libres dans le plasma. Le composé de formule I est ensuite administré par voie intraveineuse et des I mesures sont effectuées et des échantillons sont de nouveau prélevés 40 et 90 minutes plus tard. Les échantillons de sang 25 artériel et de sang du sinus coronaire sont analysés en vue de déterminer la teneur en oxyhémoglobine,en pyruvate et en acides gras libres, les différences entre les valeurs obtenues pour le sang artériel et piour le sang du sinus coronaire, multipliées par le débit sanguin coronaire, donnant une mesure de 30 la consommation d'oxygène, de l'absorption de pyruvate et respectivement de l'absorption d'acides gras libres par le myocarde .

i On trouve que l'acide p-hydroxyphénylglyoxylique, à des doses de 0,02 à 0,1 mil 1 irnole/kg élève l’absorption de 35 pyruvate au niveau du myocarde tant en présence qu'en 1'absence d'isoprénaline pendant une période d'au moins 90 minutes après l'administration de la dose, ce qui est conforme à son action h i ·.· ’y 16 ψ * principale comme stimulant de la pyruvato-déshydrogcnase. Le débit sanguin myQcardiaque est également élevé et la consommation d’oxygène au niveau du myocarde est réduite tant en présence qu'en l'absence d’isoprénaline.

5 L’aptitude des composés de formule X à réduire les taux de glucose dans le sang peut être déterminée par mesure de l'effet qu'ils exercent sur la glycémie chez des rats chez lesquels le diabète a été provoqué par traitement à la streptoxo-tocine (85 mg/kg). Quatre jours après ce traitement, on admi-10 nistre à plusieurs rats une quantité de 1 millimole/kg du composé par injection intrapéritonéale et on administre un placebo à un même nombre d'animaux. Les doses sont de nouveau administrées 24 heures et 48 heures plus tard. Des échantillons de sang sont prélevés par une veine caudale immédiatement avant chaque 15 administration (c'est-à-dire 2 heures après que les animaux ont été privés de nourriture) et 1, 2 et 3 heures après la troisième dose. Après 2 jours de traitement à l'acide p-hydroxy-phénylglyoxylique (c'est-à-dire immédiatement avant la troisième administration de 1 millimole/kg), on note que les taux de 20 glycémie se sont abaissés de 376 + 6 mg/100ml à 358 + 9 mg/lOO ml comparativement à une légère élévation de 373 -f 8 mg/100 ml à 383 + 10 mg/100 ml pour des animaux traités avec le placebo; tandis que 3 heures après la troisième dose, les taux sanguins se sont abaissés encore davantage, atteignant 344 + 9 mg/100 ml, 25 comparativement à une valeur de 369 + 9 mg/100 ml pour des animaux traités avec un placebo (toutes les valeurs indiquées sont les moyennes de 8 animaux).

Claims

1. Px'occdé do préparation d'une composition pharmaceutiquej caractérisé en ce qu’on mélange un composé de formule : 5 0 0 t C - C - R (I) 10 clans laquelle R est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle inférieur, un radical hydroxy, un groupe alcoxy inférieur, un groupe alkyl infcrieur-thio, un gi’oupe alcanoyl inférieur-oxy ou un atome d'halogène ; R1 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle 2 15 inférieur ou un atome d'halogène ; et R est un radical hydroxy ou un groupe alcoxy inférieur ; 2 ou, lorsque R est un radical hydroxy, un sel pharmaceuti.qucmcnt acceptable d'un métal, d'ammonium, d'une amine ou d'un amino-acide de ce composé, 20 avec un diluant ou un support pharmaceutiquement acceptable.

2. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que R est un radical hydroxy, un groupe méthoxy, un groupe méthylthio, un gi’oupe éthylthio, un groupe méthyle ou 1 v 2 un atome de chlore, R est un atome d'hydrogene et R est un 25 radical hydroxy.

3. Composition suivant la revendication 1, caractérisée en ce que le composé (l) est 1'acide p-hydroxyphényl-glyoxylique.

4. Procédé suivant l'une quelconque des re-30 vendications 1 à 3, caractérisé en ce qu'on mélange le composé (1) ou un de ses sels avec un excipient solide, le mélange ainsi obtenu étant transformé en comprimés ou versé dans des capsules, chacun de ces comprimés ou chacune de ces capsules contenant 150 mg à 1 g de ce composé ou d'un de ses sels. • 35

5. Procédé suivant l'une quelconque des re vendications 1 à 3: caractérisé en ce qu'on dissout le composé I ou un de ses sels dans une solution stérile appropriée pour une administration parentérale, la solution ainsi formée étant ensuite versée dans des fioles stériles, chaque fiole contenant 70 40 à 750 mg de ce composé ou d'un de ses sels.