LT3614B - Peptide compounds, method for the preparation and use thereof - Google Patents
Peptide compounds, method for the preparation and use thereof Download PDFInfo
- Publication number
- LT3614B LT3614B LTIP607A LTIP607A LT3614B LT 3614 B LT3614 B LT 3614B LT IP607 A LTIP607 A LT IP607A LT IP607 A LTIP607 A LT IP607A LT 3614 B LT3614 B LT 3614B
- Authority
- LT
- Lithuania
- Prior art keywords
- mmol
- group
- solution
- acid
- nmr
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 76
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 6
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 135
- -1 hydroxy, amino Chemical group 0.000 claims description 73
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 45
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 25
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 19
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 10
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 10
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 10
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 7
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 claims description 6
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- FCFWEOGTZZPCTO-QMMMGPOBSA-N (2s)-3,6-dimethoxy-2-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazine Chemical compound COC1=N[C@@H](C(C)C)C(OC)=NC1 FCFWEOGTZZPCTO-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims description 4
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 3
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 claims description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 claims description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims 2
- 102400000675 Chondrosurfactant protein Human genes 0.000 claims 1
- 101800000362 Chondrosurfactant protein Proteins 0.000 claims 1
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000004836 hexamethylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:1] 0.000 claims 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 claims 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 230000032823 cell division Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 117
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 92
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 80
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 79
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 68
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 58
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 45
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 39
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 24
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 23
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 21
- FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N hexamethyldisilazane Chemical compound C[Si](C)(C)N[Si](C)(C)C FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 17
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 16
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 16
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 15
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 14
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 14
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 13
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N fluorenylmethyloxycarbonyl chloride Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)Cl)C3=CC=CC=C3C2=C1 IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 13
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 13
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 12
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 10
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 9
- IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N chlorotrimethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)Cl IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- CEMZBWPSKYISTN-YFKPBYRVSA-N methyl (2s)-2-amino-3-methylbutanoate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)C(C)C CEMZBWPSKYISTN-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 9
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 8
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 8
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 8
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- FCFWEOGTZZPCTO-MRVPVSSYSA-N (2r)-3,6-dimethoxy-2-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazine Chemical compound COC1=N[C@H](C(C)C)C(OC)=NC1 FCFWEOGTZZPCTO-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 7
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 7
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 7
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 7
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 7
- OJURWUUOVGOHJZ-UHFFFAOYSA-N methyl 2-[(2-acetyloxyphenyl)methyl-[2-[(2-acetyloxyphenyl)methyl-(2-methoxy-2-oxoethyl)amino]ethyl]amino]acetate Chemical compound C=1C=CC=C(OC(C)=O)C=1CN(CC(=O)OC)CCN(CC(=O)OC)CC1=CC=CC=C1OC(C)=O OJURWUUOVGOHJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 7
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 7
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 6
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-DYCDLGHISA-M Sodium hydroxide-d Chemical compound [Na+].[2H][O-] HEMHJVSKTPXQMS-DYCDLGHISA-M 0.000 description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- NEHMKBQYUWJMIP-UHFFFAOYSA-N chloromethane Chemical compound ClC NEHMKBQYUWJMIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012045 crude solution Substances 0.000 description 4
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 3
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 3
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 3
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- WMMKLGOAKIPZJN-YTFOTSKYSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-3-carboxy-2-[[(2s)-4-carboxy-2-[[(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carbonyl]amino]butanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 WMMKLGOAKIPZJN-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 2
- JDQCIYZUBDZDNE-CGBICUDZSA-N (2s,5r)-2-[(e)-4-[(2s,5r)-3,6-dimethoxy-5-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazin-2-yl]but-2-enyl]-3,6-dimethoxy-5-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazine Chemical compound COC1=N[C@H](C(C)C)C(OC)=N[C@H]1C\C=C\C[C@H]1C(OC)=N[C@H](C(C)C)C(OC)=N1 JDQCIYZUBDZDNE-CGBICUDZSA-N 0.000 description 2
- RMXLHIUHKIVPAB-OWOJBTEDSA-N (e)-1,4-dibromobut-2-ene Chemical compound BrC\C=C\CBr RMXLHIUHKIVPAB-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- FQDIANVAWVHZIR-UPHRSURJSA-N (z)-1,4-dichlorobut-2-ene Chemical compound ClC\C=C/CCl FQDIANVAWVHZIR-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- FZEXWQSUEVTZEC-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(benzylamino)butanedioic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNC(C(O)=O)C(C(=O)O)NCC1=CC=CC=C1 FZEXWQSUEVTZEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WDYVUKGVKRZQNM-UHFFFAOYSA-N 6-phosphonohexylphosphonic acid Chemical compound OP(O)(=O)CCCCCCP(O)(O)=O WDYVUKGVKRZQNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- GKQLYSROISKDLL-UHFFFAOYSA-N EEDQ Chemical compound C1=CC=C2N(C(=O)OCC)C(OCC)C=CC2=C1 GKQLYSROISKDLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 238000000023 Kugelrohr distillation Methods 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 125000003435 aroyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003180 beta-lactone group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000001273 butane Substances 0.000 description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 2
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010005788 hemoregulatory peptide 5b Proteins 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- DLEDOFVPSDKWEF-UHFFFAOYSA-N lithium butane Chemical compound [Li+].CCC[CH2-] DLEDOFVPSDKWEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000001465 metallisation Methods 0.000 description 2
- CEMZBWPSKYISTN-UHFFFAOYSA-N methyl 2-amino-3-methylbutanoate Chemical compound COC(=O)C(N)C(C)C CEMZBWPSKYISTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940050176 methyl chloride Drugs 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 230000003525 myelopoietic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000006884 silylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 2
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 2
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 2
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- OTWYBSRVEXFNNW-RGVONZFCSA-N (2s)-2-amino-3-[(2s)-2-amino-2-carboxyethoxy]propanoic acid;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.OC(=O)[C@@H](N)COC[C@H](N)C(O)=O OTWYBSRVEXFNNW-RGVONZFCSA-N 0.000 description 1
- FJWGRXKOBIVTFA-XIXRPRMCSA-N (2s,3r)-2,3-dibromobutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](Br)[C@@H](Br)C(O)=O FJWGRXKOBIVTFA-XIXRPRMCSA-N 0.000 description 1
- IEXPZNGIMYZNDG-UDQQYNLZSA-N (2s,5r)-2-[(e)-4-[(2s,5r)-2,5-dihydroxy-3,6-dimethoxy-5-propan-2-ylpyrazin-2-yl]but-2-enyl]-3,6-dimethoxy-5-propan-2-ylpyrazine-2,5-diol Chemical compound COC1=N[C@@](O)(C(C)C)C(OC)=N[C@]1(O)C\C=C\C[C@]1(O)C(OC)=N[C@@](O)(C(C)C)C(OC)=N1 IEXPZNGIMYZNDG-UDQQYNLZSA-N 0.000 description 1
- JDQCIYZUBDZDNE-BLMSNKCKSA-N (2s,5r)-2-[(z)-4-[(2s,5r)-3,6-dimethoxy-5-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazin-2-yl]but-2-enyl]-3,6-dimethoxy-5-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazine Chemical compound COC1=N[C@H](C(C)C)C(OC)=N[C@H]1C\C=C/C[C@H]1C(OC)=N[C@H](C(C)C)C(OC)=N1 JDQCIYZUBDZDNE-BLMSNKCKSA-N 0.000 description 1
- FJOXJWRDMLCQIU-INDMIFKZSA-N (2s,5r)-2-[5-[(2s,5r)-3,6-dimethoxy-5-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazin-2-yl]pentyl]-3,6-dimethoxy-5-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazine Chemical compound COC1=N[C@H](C(C)C)C(OC)=N[C@H]1CCCCC[C@H]1C(OC)=N[C@H](C(C)C)C(OC)=N1 FJOXJWRDMLCQIU-INDMIFKZSA-N 0.000 description 1
- CSWLJKJMGUPZDE-VNTMZGSJSA-N (2s,5r)-2-[6-[(2s,5r)-3,6-dimethoxy-5-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazin-2-yl]hexyl]-3,6-dimethoxy-5-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazine Chemical compound COC1=N[C@H](C(C)C)C(OC)=N[C@H]1CCCCCC[C@H]1C(OC)=N[C@H](C(C)C)C(OC)=N1 CSWLJKJMGUPZDE-VNTMZGSJSA-N 0.000 description 1
- CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinon Chemical compound CN1CCN(C)C1=O CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RCHDLEVSZBOHOS-UHFFFAOYSA-N 1,4-dichlorobut-2-yne Chemical compound ClCC#CCCl RCHDLEVSZBOHOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IBODDUNKEPPBKW-UHFFFAOYSA-N 1,5-dibromopentane Chemical compound BrCCCCCBr IBODDUNKEPPBKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGRHVVLXEBNBDV-UHFFFAOYSA-N 1,6-dibromohexane Chemical compound BrCCCCCCBr SGRHVVLXEBNBDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSDTXRUIZMTBNV-UHFFFAOYSA-N 2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NC(CC(=O)O)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 KSDTXRUIZMTBNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 2H-benzotriazol-4-ol Chemical group OC1=CC=CC2=C1N=NN2 JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FCFWEOGTZZPCTO-UHFFFAOYSA-N 3,6-dimethoxy-2-propan-2-yl-2,5-dihydropyrazine Chemical compound COC1=NC(C(C)C)C(OC)=NC1 FCFWEOGTZZPCTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- DWYWJUBBXKYAMY-IBGZPJMESA-N 4-o-tert-butyl 1-o-(2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)butanedioate Chemical compound O=C([C@@H](NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)CC(=O)OC(C)(C)C)OC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1F DWYWJUBBXKYAMY-IBGZPJMESA-N 0.000 description 1
- AIDYQYOPUBOMTR-FQEVSTJZSA-N 5-o-tert-butyl 1-o-(2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanedioate Chemical compound O=C([C@@H](NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)CCC(=O)OC(C)(C)C)OC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1F AIDYQYOPUBOMTR-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- LQVMZVKOVPITOO-UHFFFAOYSA-N 9h-fluoren-1-ylmethyl carbonochloridate Chemical compound C1C2=CC=CC=C2C2=C1C(COC(=O)Cl)=CC=C2 LQVMZVKOVPITOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYWAJZOLAWJXIX-UHFFFAOYSA-N 9h-fluoren-9-ylmethyl n-[4-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-2,5-dioxooxolan-3-yl]carbamate Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)NC1C(=O)OC(=O)C1NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 DYWAJZOLAWJXIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059616 Activins Proteins 0.000 description 1
- 102000005606 Activins Human genes 0.000 description 1
- 201000010000 Agranulocytosis Diseases 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 241001167018 Aroa Species 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 101100493710 Caenorhabditis elegans bath-40 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N D-valine Chemical compound CC(C)[C@@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- 229930182831 D-valine Natural products 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 1
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241001538234 Nala Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 229920000037 Polyproline Polymers 0.000 description 1
- 101100293693 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) STO1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000978776 Senegalia senegal Species 0.000 description 1
- 241000534944 Thia Species 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- IUHFWCGCSVTMPG-UHFFFAOYSA-N [C].[C] Chemical class [C].[C] IUHFWCGCSVTMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- PMZXXNPJQYDFJX-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound CC#N.OC(=O)C(F)(F)F PMZXXNPJQYDFJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- IVHKZGYFKJRXBD-UHFFFAOYSA-N amino carbamate Chemical compound NOC(N)=O IVHKZGYFKJRXBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005002 aryl methyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005110 aryl thio group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- HRQGCQVOJVTVLU-UHFFFAOYSA-N bis(chloromethyl) ether Chemical compound ClCOCCl HRQGCQVOJVTVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100001018 bone marrow damage Toxicity 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 101150050497 cbc1 gene Proteins 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N chloro formate Chemical compound ClOC=O FZFAMSAMCHXGEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000027288 circadian rhythm Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001944 cysteine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005982 diphenylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000036046 immunoreaction Effects 0.000 description 1
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000893 inhibin Substances 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 1
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 1
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 150000002668 lysine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- CEMZBWPSKYISTN-RXMQYKEDSA-N methyl (2r)-2-amino-3-methylbutanoate Chemical compound COC(=O)[C@H](N)C(C)C CEMZBWPSKYISTN-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 108010026466 polyproline Proteins 0.000 description 1
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 1
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 125000001749 primary amide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 230000001012 protector Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 125000005030 pyridylthio group Chemical group N1=C(C=CC=C1)S* 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000030871 regulation of stem cell division Effects 0.000 description 1
- 102000037983 regulatory factors Human genes 0.000 description 1
- 108091008025 regulatory factors Proteins 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009492 tablet coating Methods 0.000 description 1
- 239000002700 tablet coating Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000005051 trimethylchlorosilane Substances 0.000 description 1
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Šis išradimas yra apie ląstelių proliferaciją skatinančių peptidų panaudojimą ir naujus peptidus, pasižyminčius specifiniu ir/ar bendru ląsteles stimuliuojančiu poveikiu.
Žinduolių kūnas sudarytas iš ląstelių, itin stipriai besiskiriančių struktūra ir funkcijomis, todėl ląstelių diferencijacijos ir vystymosi mechanizmai buvo daugelio tyrinėjimų objektu. Žinoma, kad nuolat atsinaujinančių ląstelių sistemoje paprastai būna rezervuaras daugiavaisių (pliuripotentinių) kamieninių ląstelių, kurios dalijasi ir pastoviai tiekia sistemai naujas ląsteles. Nors patiektos iš rezervuaro kamieninės ląstelės pradžioje yra vienodos, tačiau netrukus jos patiria vienoką ar kitokį morfologinį pakitimą ir vėliau išsivysto į ląsteles, atliekančias reikiamą funkciją.
Minėtų kamieninių ląstelių sistemų pavyzdžiais yra kraujodaros sistema kaulų čiulpuose bei epitelio ir epidermio sistemos.
Kamieninių ląstelių dalijimosi valdymas ar reguliavimas yra labai perspektyvi terapijos sritis, todėl daugelio tyrimų tikslas tebėra mechanizmų išaiškinimas ir specifinių cheminių mediatorių suradimas. Iki šiol buvo nustatytos kelios tikrai dalyvaujančios ląstelių gamyboje ir diferencijacijoje molekulės, kurios skatina arba slopina tam tirkrą proceso grandą. Tuo požiūriu itin gerai ištirta mielopoezė, nustatytos joje dalyvaujančios molekulės: kolonijas stimuliuojantys faktoriai (KSF), kaip antai, granulocitų kolonijas stimuliuojantis faktorius (G-KSF),' makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (M-KSF), granulocitų-makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (GM-KSF), ąvairiakilmes kolonijas stimuliuojantis faktorius (multi-KSF; IL-3)
11.
[ žiūr. Metcalf, Science 2_29: 16 (1985)1 , interleukinas (IL-11) [ žiūr. Paul et. ai, Proc. Natl. Acad Sci.,
USA, 87 : 7521 (1990)] , Laktoferinas [ žiūr. Broxmeyer et ai, Blood Cells, 11: 429 (1989)], prostaglandinai [ žiūr. Pelus et ai, J. Immunol. 140: 479 (1988)] , rūgštinis (H-subvienetas) feritinas [ žiūr. Broxmeyer et ai, Blood 68: 1257 (1986)], interferonai (α, β ir γ) [ žiūr.
Pelus et ai aukščiau, ir Broxmeyer et ai, J. Inununol., 131: 1300 (1983)] , auglio nekrozės faktoriai (a ir β) [ žiūr. Broxmeyer et ai, J. Immunol. 136: 4487 (1986)] , transformuojantis augimą faktorius - β [ žiūr. Ottrnan et ai, J. Immunol., 140: 2661 (1988)] , ir aktivinas bei inhibinas [ žiūr. Broxmeyer et ai., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 86: 779 (1989)] .
Taip pat buvo rasta, kad hemoreguliacinis pentapeptidas (pEEDCK) selektyviai inhibuoja mielopoezės ląstelių proliferaciją [ žiūr. Paukovits et ai, Z. Naturforsch 37: 1297 (1982)] , ir buvo atskleisti kiti peptidai, atitinkantys siaurą bendrą formulę, duodantys panašų inhibicinį poveikį hemopoezėje [ žiūr. EP-A-112656 ir W090/02753] . Peptido monomerų oksidacija davė dimerines molekules, sujungtas cisteino tilteliu, ir buvo rasta, kad tos dimerinės molekulės stimuliuoja mielopoezę [ žiūr. Laerum et. ai, Exp. Heinatol., 16: 274 (1988)] .
(pEEDCK)2 dimeras ir kiti panašūs junginiai yra atskleisti WO-A-88/03535. Kiti dimeriniai peptidų junginiai yra atskleisti EP-A-408371, kuriame disulfidinė jungtis buvo pakeista anglimi arba anglies/sieros tilteliu, jungiančiu parinktas peptidines grandines. Tiltelis tuo būdu yra santykinai atsparus hidrolizei, bet pats yra inertinis ir negali dalyvauti receptoriaus dimero sąveikose.
Nors mes nenorime būti surišti teorinių svarstymų, bet dabar manoma, kad tokie peptidiniai junginiai sąveikauja su stromos ląstelėmis i n vivo ir kad stromos ί ι t
ląstelės atsakingos už ląstelinio dalijimosi stimuliaciją arba inhibiciją per kitus išaiškinamus faktorius. Tuo būdu manoma, kad dimerai indukuoja arba pagreitina stimuliuojančių ląstelinių reguliuojančių faktorių stromos gamybą, tuo tarpu kai monomeriniai peptidai gali arba inhibuoti šį procesą, arba sukelti faktorių, kurie užkerta kelią ar trukdo ląstelės dalijimuisi, gamybą. Tuo būdu pagal tokią galvoseną stromos ląstelės gali sustiprinti dimerų ir monomerinių peptidų atitinkamai stimųliacinį arba inhibicinį poveikį.
Yra nuolatinis dimerinių peptidinių junginių, galinčių stimuliuoti ląstelės proliferaciją iki įprasto lygio in vivo, poreikis. Šiuo atžvilgiu reikėtų pastebėti, kad skirtingi stimuliavimo laipsniai gali būti labiau tinkami tam tikroms klinikinėms situacijoms negu kitoms, ir ypač yra svarbus individualių ląstelių tipų selektyvus stimuliavimas.
Šis išradimas pateikia peptidinį junginį, sudarytą iš dviejų vienos grandinės hemoreguliacinių, ypač inhibuojančių hemopoezę, peptidų, prijungtų kartu prie negalinių amino rūgščių Ca atomų ekvivalentiškose vietose kiekviename iš minėtų peptidų per jungtį anglis-anglis arba per terminaliai prijungtą dvivalentę jungiančią tilteliu grupę -A-, natyvios α-šoninės grandinės nėra prie minėtų Ca atomų, kur A yra Οχ_6 anglies grandinė, kuri yra
1) a) mono- arba poli-pakeista grupe -RA, -ORA, -SRA, -NRRa arba -COORA arba halogeno atomu, tokiu kaip fluoras, chloras, bromas arba jodas (kur kiekvienas RA nepriklausomai reiškia vandenilio atomą ar Ο7_6 -alkilo, -alkanoilo arba -alkoksialkilo grupę, kuri gali būti mono- arba poli-hidroksilinta) ir/arba
b) į kurią įterpta viena ar daugiau dvigubų arba trigubų jungčių anglis-anglis ir/arba
c) į kurią įterpta viena ar daugiau grupių -Z-, kur kiekviena -Z- yra nepriklausomai -0-, -CO-, - NRB arba -NRB- (kur kiekvienas RB yra nepriklausomai vandeilio atomas arba C,_6 alkilo arba C6_10 arilo grupė) , arba kur vienas ar daugiau pakaitalų ar neprisotintų jungčių anglis-anglis yra grupėje -A-, -Z- gali taip pat būti -S- arba ii); (CH;)„, kur y yra 1, 5 arba 6.
Geriau, kai jungiančioje tilteliu grupėje -A- bendras atomų skaičius yra ne didesnis už 6.
Kur grupė RA reiškia alkilo, alkoksi arba alkanoilo grupę, kiekviena iš jų gali būti linijinė arba šakota grandinė. Tinkamos alkilo grupės apima metilą, etilą, 2-hidroksietilą, propilą, butilą, 1,3-dihidroksibutilą, 2-meti1-3-hidroksibutilą ir pentilą. Metoksi, etoksi, propoksi ir 2-bidroksipropoksi visos yra tinkamos alkoksi grupės grupei RA, tuo tarpu alkanoilo grupė, pvz., gali būti formilas, acetilas, propionilas.
Grupei R , kaip alkilo grupei, alkilo anglies grandinė gali būti linijinė arba šakota., ir grupės, paminėtos aukščiau grupei R'1, čia yra tinkamos taip pat.
Tuo būdu tinkamos grupės A skeleto struktūros (kurios gali būti toliau pakeistos, kaip išdėstyta aukščiau) apima:
-CH2-ch2ch2ch2ch2ch2LT 3614 B
-ch2ch2ch2ch2ch2ch2-HC=CH-HC=C=CH-ch2-ch=ch-ch2—ch2 _c=c—ch2—
-ch2-ch=ch-ch=ch-ch2-ch2-ch2-c=c-ch2-ch2-ch2-c=c-c=c-ch2ch3 ch3
I I
-ch-ch=ch-ch2-chOH OH
I I ~CH-CH=CH-CH-CH2-O-CH2-ch2-nh-ch2ch2-ch2ch2-co-ch2ch2
-CH-CH=CH-CHI I och3 och3
-ch2-ch=ch-ch2-s-ch2-CH2-CsC-CH2-NH-CH2CH2- arba
-CH2-CH=CH-CH (COOH) ch2Bet kuris vienos grandinės peptidas, kuris parodo hemoreguliacinį poveikį, yra tinkamas kaip peptidas, kuris yra tiltelinis pagal šį išradimą.
Alternatyviai išreikštas, šis išradimas pateikia junginius pagal ši, išradimą, kuriuose minėtos hemoreguliacinės peptido grandinės apima šias formules:
Ra - Rb - Rc - Rd - (Pe)n - Rf kurioje Ra reiškia
arbe r nh — c:: — co.
<ch > i 2 p con aroa
CH---Cū
I
CH OH
R reiškia • NH -CH —
CO cch^>
2 ‘ I A COR . NU- CH--CO .
I
CH . OH arba
R reiškia . ni: —-- ch —. co tCH >
ί V
COR . NH -— CH--CO
I cn, on arba
R reiškia
--NH
CH ~— CO
-NH ·
CH- CO
I
CH.
• NH
CH SR arbi
CH CO —
I
CH OH
Re reiškia
-NH- CH- COF
R* reiškia
GOK
I
CH, ,>
-NH · arba
- CH
I (CH J
CCS
NH CH- CCRi0
NH
NH ai'ba
NH
NH (kuriose n ir m nepriklausomai reiškia 0 arba 1;
p, q ir r nepriklausomai reiškia 1 arba 2;
s reiškia 3 arba 4;
R1 ir R2 abu yra vandenilio atomai arba kartu reiškia okso grupę;
R3 ir R4 abu yra vandenilio atomai arba kartu reiškia jungtį anglis- anglis;
R5 yra vandenilis arba acilo grupė;
kiekvienas R6 ir R7 nepriklausomai reiškia hidroksilo grupę arba amino grupę, bet tinkamesnės yra hidroksilo grupės;
J I;
g
R8 reiškia vandenilį, C2,.6 alkilo grupę, C7.2o aralkilo grupę, kuri gali turėti vieną arba daugiau hidroksilo, amino arba metoksi pakaitalą, arba metaboliškai labilią S-apsauginę grupę;
R reiškia vandenilį arba metilo grupę; ir
RJ° reiškia hidroksilo arba amino grupę, aminorūgšties glutamino liekaną arba peptidą, turintį N-galinį glutamino fragmentą).
Visos minėtos amino rūgšties liekanos gali būti arba D, arba L formos. Tačiau aminorūgščių L forma yra tinkamesnė.
Kur yra N-galinė apsauginė grupė R°, tai gali būti, kaip pažymėta aukščiau, acilo grupė, turinti 1-20 anglies gtotnų, pvz., žemesniojo alkanoilo grupė, turinti 1-5 anglies atomų, tokia kaip acetilo grupė, arba aroilo ar aralkanoilo grupė, turinti nuo 7 iki 20 anglies atomų, tekia kaip benzoilo arba fenilacetilo grupė.
R5 gali taip pat būti acilo grupė, išvesta iš aminorūgšties arba peptido grandinės. Konkrečiai, R5 gali būti acilo grupė, išvesta iš serino, arba iš bet kurio iš peptidų, išvestų iš tokios aminorūgšties sekos, pašalinant einančias iš eilės N-galines amino rūgštis:
Lys-Ile-Ile-His-Glu-Asp-Gly-Tyr-Ser.
Yra geriau, kai bendros (į) formulės peptido galinė amino grupė yra apsaugota, pvz., acilinant alkanoilo, aralkanoilo arba aroilo grupe.
Kur R8 yra C2_6 alkilo grupė, tai gali būti, pvz., etilo, butilo arba hek? o grupė. Kai R yra aralkilo grupė, tai gali patogia; būti arilmetilo grupė, tokia i
kaip benzilas, difenilmetilas arba trifenilmetilas. Kur R8 yra metaboliškai labili grupė, tai gali, pvz., būti ariltio grupė, turinti nuo 5 iki 10 anglies atomų, pvz., piridiltio arba acilo grupė, kaip apibrėžta aukščiau.
Tinkamesni šio išradimo junginiai yra pentapeptidai, t.y. n yra geriau 0.
Geriau, kai ciklinės grupės Ra liekanoje yra penkių narių, t.y. m yra geriau 0.
Nors bet kuris iš peptidų, apibrėžtų (I) formule aukščiau, yra žemo arba nereikšmingo hemoreguliacinio aktyvumo, nepaisant to, jie pagal ši, išradimą, gali būti efektyvūs tiltelio formos, stimuliuojant ląstelių proliferaciją.
Dimeriniuose peptiduose, sudarytuose iš peptidinių grandinių, kaip pavaizduota (I) formulėje, jungiantis grandinės taškas yra pageidaujamas ties Rd.
Ypač tinkami peptidiniai junginiai pagal šį išradimą yra tie (II) formulės junginiai
Ra - Rb - Rc - NH - CH - CO- (Re)n - Rf
I
A (II),
Ra - Rb - Rc - NH - CH - CO - (Re)n - Rf kuriuose Ra, Rb, Rc, Re, Rf, A' ir n visi yra tokie, kaip apibrėžta aukščiau, ir grupė -NH-CH-CO- yra Rd išvestinė forma, kuri yra prijungta prie jungiančios tilteliu grupės -A- tokiu būdu, kad jos nuosavos šoninės grandinės nėra.
n
Vienas ypač tinkamas peptidinis (II) formulės junginys yra pGlu-Glu-Asp-NH-CH-CO-LysOH
I
A (II),
I pGlu-Glu-Asp-NH-CH-CO-LysOH, kurioje grupė -A- yra dvivalentė jungianti tilteliu grupė, kaip svarstyta aukščiau.
Šis išradimas ypatingai tinkamas stimuliuoti mielopoezę pacientams, kurie kenčia nuo sumažinto mieiopoetinio aktyvumo, iškaitant kaulų čiulpų pažeidimą, agranuliocitozę ir aplastinę anemiją. Į tai įeina gydymas pacientų, turinčių sumažintą kaulų čiulpų funkciją dėl imunosupresinio gydymo slopinti audinių reakciją,- t.y. kaulų čiulpų transplantavimo chirurgijoje.
Junginiai taip pat gali būti panaudoti pagreitinti kaulų čiulpų regeneraciją po citostatinės chemoterapijos ir radiacinės terapijos neoplastinėms ir virusinėms ligoms.
Be to, nauji junginiai gali būti labai vertingi, kur pacientai turi rimtas infekcijas dėl imunoreakcijos trūkumo po kaulų čiulpų pažeidimo.
Kitas klinikinis taikymas bus kartu su atitinkamais monomerais arba susijusiais mielopoezės inhibitoriais, kaip atskleista EP-A-112656. arba W0-A-90/02753, indukuoti kintamus aukšto ir žemo aktyvumo pikus kaulų čiulpų ląstelėse, tuo būdu sustiprinant natūralų cirkadinį hemopoezės ritmą. Taip citostatinė terapija gali būti panaudota žemo kaulų čiulpų aktyvumo periodais, tuo būdu sumažinant kaulų čiulpų pažeidimo riziką, tuo u
tarpu kai regeneracija bus pagreitinta iš eilės einančiais aktyvumo pikais.
Apskritai, kad būtų pasiektas stimųliacinis poveikis, šio išradimo peptidai gali būti paskirti pacientui oreliai arba injekcijomis 0.001-100 mg, pvz., 1-5 mg 70 kg kūno svoriui, dienos doze. Jei paskyrimas intraveninis arba paodinis, dozė gali būti 1-10 mg ribose 70 kg kūno svoriui per dieną, pvz., apie 6 mg, iki 10 dienų. Nazalinis, vietinis (transdermalinis) arba rektalinis paskyrimas taip pat yra, žinoma, lankstus. Iš esmės rei-13 -5 kia pagaminti peptido koncentracijas apie 10 M - 10 M neląsteliniame paciento skystyje.
Pagal tolimesnius šio išradimo požymius, pateikiamos farmacinės kompozicijos, turinčios savyje kaip aktyvią komponentę vieną arba daugiau (I) formulės junginių, kaip čia apibūdinta anksčiau, arba fiziologiškai suderinamų jų druskų, kartų sų farmaciniu nešikliu arba užpildu. Kompozicijos pagal ši, išradimą gali būti pateiktos, pvz., tokio pavidalo, kad tiktų oraliniam, nazaliniam, parenteraliam arba rektaliniam paskyrimui.
Čia naudojamas terminas farmacinis apima ir veterinarinius šio išradimo taikymus.
Junginiai pagal šį išradimą gali būti įprastų vaistų formų, tokių kaip tabletės, apvilktos tabletės, aerozoliai nosiai, tirpalai, emulsijos, milteliai, kapsulės arba ilgalaikio atpalaidavimo formos. Įprasti farmaciniai užpildai, kaip ir įprasti gamybos būdai, gali būti panaudoti šių formų paruošimui. Tabletės gali būti pagamintos, pvz., sumaišant aktyvią komponentę arba komponentes su žinomais užpildais, kaip, pvz., skiedikliais, tokiais kaip kalcio karbonatas, kalcio fosfatas arba laktozė, skaidytojais, tokiais kaip grūdų krakmolas arba algininė rūgštis, rišikliais, tokiais
II kaip krakmolas arba želatinas, tepa! 3c s magnio stearatas arba ta Iko mūreliai, laikio s i poli m· a o e t a t o ei spalaįdavimo agentais, tokiais i i e n a s, ka rbo ks ino 111 c e 1 i u 11 o z ė talatas arba polivinilacetatas.
tokiais kaip i r / a i b a ilga— Kaip karbokceiiuliozės
Tabletės, jeigu reikia, gali susidėti is Kelių sluoksnių. Apvilktos tabletės gali būti pagamintos, apvelkant vidurį, gautą panašiai kaip tabletės, su agentais, paprastai naudojamais tablečių apvilkimui, pvz., polivinilo pirolidonu arba belaku, gumiarabiku, talko milteliais, titano dioksidu arba cukrumi. Tam, kad būtų gautas ilgalaikis atpalaidavimas arba išvengta nesuderinamumu, vidurys gali susidėti iš kelių sluoksnių taip pat. Tablečių apvalkalas taip pat gali susidėti iš kelių sluoksnių, kad būtų gautas ilgalaikis atpalaidavimas, ir tuo atveju gali būti panaudoti anksčiau paminėti užpildai tabletėms.
Organinės specifinės nešiklių sistemos taip pat gali būti panaudotos.
Injekcijų tirpalai gali būti, pvz., pagaminti įprastu būdu, tokiu kaip konservavimo agentų, tokių kaip phidroksibenzoatai, arba stabilizatorių, tekių kaip EDTA, pridėjimas. Tirpalais paskui užpildomi injekcijų buteliukai arba ampulės.
Neazaliniai aerozoliai gali būti sudaryti panašiai vandens tirpale ir supakuoti į purškimo konteinerius arba su aerozoliniu išstūmėju, arba su priemonėmis rankiniam spaudimui. Kapsulės, turinčios vieną arba kelias aktyvias komponentes, gali būti pagamintos, pvz., sumaišant aktyvias komponentes su inertiniais nešikliais, tokiais kaip laktozė arba sorbitoiis, ir užpildant mišinį į želatino kapsules.
Tinkamos žvakutės gali, pvz., būti pagamintos, sumaišant aktyvią komponentę arba aktyvių komponenčių kombinacijas su Įprastais nešikliais, numatytais šiam tikslui, tokiais kaip natūralūs riebalai arba polietileno glikolis ar jo dariniai.
Tinkami dozavimo vienetai, turintys savyje šio išradimo junginius, turi 0.1-10 mg, pvz., 1-5 mg (I) formulės peptido arba jo druskos.
Taigi šis išradimas pateikia peptidinius junginius ir mišinius aprašytus aukščiau, skirtus naudoti ląstelės dalijimosi stimuliavimui. Peptidinių junginių pagal šį išradimą panaudojimas medikamentų, skirtų ląstelės dalijimosi stimuliavimui, gamyboje yra tolesnis šio išradimo aspektas. Mielopoezės ir kaulų čiulpų regeneracija turi ypatingą reikšmę.
Tačiau kitas svarbesnis naujų peptidų panaudojimas yra medžiagų, skirtų imunologinių tyrimų technikos gamybo-. je. Tada peptidas gali būti kovalentiškai prijungtas prie tinkamo didelio molekulinio nešiklio, tokio kaip albuminas, polilizinas arba poliprolinas tam, kad būtų įvestas antikūnus gaminantiems gyvuliams (pvz., triušiams, jūros kiaulytėms arba ožkoms) . In vitro imunizacijos metodai taip pat gali būti panaudoti. Aukšto specifiškumo antiserumai yra gaunami, naudojant gerai žinomus absorbcijos metodus, panaudojant didelį molekulinį nešiklį. įvedant radioaktyvumą (3H, 125I, 14C, 35S) į peptido molekulę, radioimuninis tyrimas gali būti suprojektuotas ir panaudotas peptido nustatymui įvairiuose biologiniuose skysčiuose, tokiuose kaip serumas (plazma), šlapimas ir cerebrospinalinis skystis.
Šio išradimo peptidai gali būti sintezuoti bet kuriuo patogiu būdu. Tinkami metodai aminorūgšties vienetų sudarymui yra aprašyti, pvz., Synthesis of Optically
II .1.
Active α-Amino Acids (Optiškai aktyvių α-Amino rūgščių sintezė), Robert M. Williams (Pergamon Press, 1989) . Apskritai, esančios reaktyvios šoninių grandinių grupės (amino, tiolo ir/arba karboksilo) bus apsaugotos per visos sintezės prijungimo reakcijas, bet galima palikti kai kurias šoninių grandinių grupes neapsaugotas (hidroksilo grupes, imidazolo grupes, pirmines amido grupes, amido grupes ciklinėse aminorūgštyse kaip piroGlu) per visą sintetinę procedūrą.
Tuo būdu galutinė stadija bus visiškai apsaugoto arba iš dalies apsaugoto I bendros formulės peptido darinio blokavimas, ir šie procesai sudaro tolimesnį šio išradimo aspektą.
Schollkopf ir kt. aprašė įvairių aminorūgščių gavimą bis-laktimo eterių metalinimu ir po to alkilinimu (žiūr,, pvz., Tetrahedron 39: 2085 (1983) ir Topics
Curr. CHEM., 109: 65 (1983)). Šio metodo pritaikymas pasirodė ypač naudingas tiltelinių amino rūgščių, kurios sudaro šio išradimo pagrindą, gavimui. Konkrečiai, bis-laktimo eteris, išvestas iš valinoglicino dipeptido, sudaro naudingą pradinį junginį jungimo tilteliu reakcijoje, kuri gali būti reziumuota taip:
OCH,,
NH.
NH^
I
CH
I
CH.
-Α-Χ
HG---Λ
COOH
COOH
-78°C
CH..
CH
A ι ι
Ii, ι
(kurioje X yra nueinanti grupė, tokia kaip halogeno atomas, pvz., bromas).
Tiltelines (S,S)-α,α'-diaminorūgštys gali būti gautos šiuo metodu, jei D-valinas yra iš pradžių naudojamas sudaryti bis-laktimo eterį. Lygiai taip pat (R,R)-α,α'diaminorūgštys gali būti sudarytos, panaudojant Lvaliną.
Alternatyvi metodika, naudinga tiltelinių α,α'-diamino rūgščių, kurios sudaro šio išradimo tiltelinių dipeptidinių junginių pagrindą, gamybai yra metodo, išvystyto Vederas ir kt., pritaikymas (J. Am. Chem. Soc. 107: 7105 (1985) ir J. Am. Chem. Soc. 110: 2237 (1988)). Ši alternatyvi metodika paremta β-laktonų, išvestų iš serino, žiedo atidarymo reakcijomis, β-laktonai gali būti paveikti visa eile švelnių nukleofilų, kurie sukelia laktoninės alkilo-deguonies jungties skilimą. Aza-pakeistos tiltelines aminorūgštys, apimančios oksa- ir tia-analogus, gali būti susintetintos pagal metodiką, kuri iliustruota tokia schema:
II f
Tiit-eliniams dipeptidiniams junginiams pagal šį išradimą,, kur —A— yra -CH2-, galima nuoroda į Belokon et ai·.,, Izv. Akad. Nauk. SSSR. Ser Khim, (1987), 852 (Chemi na.! -Abstracts 108 : 132255v) .
Tuo dudu šis išradimas taip pat pateikia peptidinio junginio gavimo būdą, susidedantį iš dalinai arba visiž-kai apsaugoto jo darinio blokavimo.
Kitu aspektu, šis išradimas pateikia peptidinio .junginio gavimo būdą, kuris apima:
a) bis—laktimo eterio metalinimą ir nuoseklų alkilinimą·, kad būtų sudarytas bis-laktimo dipeptidinis
-eteris;
b) bis-laktimo eterio iš žingsnio a) hidrolizę, kad būtų gauta tiltelinė a,a’-dramino rūgštis;
oj pasiliekančių amino rūgščių įvedimą į peptidihes grandines; ir
d) bet kurios apsauginės grupės deblokavimą.
bis-laktimo dipeptidiniai eteriai ir tiltelinė rūgštis ©c,,ct''-diaminorūgštis, pagaminta pagal šį metodą, sudaro tolesnį šio išradimo aspektą.
Kai tilteliniai dipeptidai yra sudaryti,, pasiliekahčios aminorūgštys peptidinėje grandinėje gali būti įvestos Įprastais metodais.
Sudarant peptidines grandines, galima pradėti arba nuo C-galo, arba nuo N-galo, nors tik nuo C-galo pra35 sidedanti procedūra yra visuotinai naudojama.
,ι
Tuo būdu, galima pradėti nuo tinkamai apsaugoto C-galo, pvz., lizino, darinio reakcija su tinkamai apsaugotu cisteino dariniu. Lizino darinys turės laisvą a-amino grupę, tuo tarpu kitas reagentas turės arba laisvą, arba aktyvuotą karboksilo grupę ir apsaugotą amino grupę. Po prijungimo, tarpiniai produktai gali būti išgryninti, pvz., chromatografija, ir tada selektyviai N-apsaugoti, kad galima būtų pridėti laisvą arba aktyvuotą aminorūgšties liekaną. Ši procedūra yra tęsiama, kol sudaroma reikalinga amino rūgščių seka.
Karboksilinę rūgštį aktyvuojantys pakaitalai, kurie gali, pvz., būti naudojami, apima simetrinius arba mišrius anhidridus arba aktyvuotus esterius, tokius kaip, pvz., p-nitrofenilo esteris, 2,4,5-trichlorofenil-esteris, N-hidroksibenzotriazolo esteris (OBt), N-hidroksisukcinimidilesteris (OSu) arba pentafluoro-fenilesteris (OPFP) .
Laisvų amino ir karboksilo grupių prijungimas gali, pvz., būti atliktas, panaudojant dicikloheksilkarbodiimidą (DCC). Kitas prijungimo agentas, kuris gali, pvz., būti naudojamas, yra N-etoksikarbonil-2-etoksi1,2-dihidrochinolinas (EEDQ).
Apskritai yra patogu atlikti prijungimo reakcijas žemose temperatūrose, pvz., nuo -20°C iki kambario temperatūros, patogiai tinkamoje tirpiklio sistemoje, pvz., tetrahidrofurane, dioksane, dimetilformamide, metileno chloride arba šių tirpilių mišinyje.
Gali būti patogiau vykdyti sintezę ant kietos fazės dervos nešiklio. Chlorometilintas polistirenas (susiūtas su 1 % divinilo benzenu) yra vienas naudingas nešiklio tipas; tuo atveju sintezė prasidės nuo C-galo, pvz., prijungiant N-apsaugotą liziną prie nešiklio.
r
Eilė tinkamų kietos fazės metodų yra aprašyta Eric Atherton, Christopher J. Logan, and Robert C. Sheppard, J. Chem. Soc. Perkin I, 533-46 (1981); James P. Tam,
Foe S. Tjoeng, and R.3. Merrifield, J. Am. Chem. Soc., 102, 6117-27 (1980); James P. Tam, Richard D. Dimarchi and R.3. Merrifield, Int. J. Peptide Prctein Res 16, 412-25 . (1980); .Manfred Mutter and Dieter Bellof, Helvetica Chimica Actą, 67, 2009-16 (1984).
Prijungimo reakcijos taip pat gali būti atliktos tirpale .
Yra žinomas platus apsauginių grupių amino rūgštims pasirinkimas ir pateikta pavyzdžių Schroder, E. and Lubke, K., The Peptides, Vols. 1 and 2, Academic Press, New York and London, 1965 and 1966; Pettit, G. R., Synthetic Peptides, Vols. 1-4, Van Nostrand, Reinhold, New York 1970 1971, 1975 and 1976; Houben~Weyl,
Methoden der organischen Chemie, Synthese von Peptiden, Band 15, Georg Thieme Verlag Stuttgart, NY, 1983; The Peptides, Analysis, synthesis, biology 1-7, Ed: Erhard Gross, Johannes Meienhofer, Academic Press, NY, San Fransisco, London; Solid phase peptide synthesis 2nd ed., John M. Stewart, Janis D. Young, Pierce Chemical Company.
Tuo būdu, pvz., amino apsauginės grupės, kurios gali būti panaudotos, apima apsaugines grupes, tokias kaip karbobenzoksi (Z-), t-butoksikarbonilas (Boc-), 4-metoksi-2,3,6-trimetilbenzolo sulfonilas (Mtr-) ir 9-fluorenilmetoksikarbonilas (Fmoc-).
Bus suprantama, kad kai peptidas sudarytas nuo C-galo, amino apsauginė grupė bus kiekvienos naujos pridedamos liekanos α-amino grupėje ir ją reikės pašalinti selektyviai prieš kitą jungimo stadiją. Kietos fazės sistemoms viena ypač naudinga grupė tokiai laikinai
I ί amino apsaugai yra Fmoc grupė, kuri gali būti pašalinta selektyviai, paveikiant piperidinu organiniame tirpiklyje. Sintezei tirpale Boc- yra tinkamesnė apsauginė grupė, kuri gali būti įvesta ir pašalinta įprastu būdu.
Aminorūgštys arba peptidai dažnai reikalauja sililinimo prieš apsaugojimą, pvz., pridedant Fmoc, kad būtų pagerintas jų tirpumas organiniuose tirpikliuose. Sililinimas ir Fmoc apsaugos reakcijos yra reziumuotos žemiau
COOH
A CGH3>3S 1 HN-CH-GOOS1 <CH,)3
A -—
I CCHiSICl v >
H2N-CH-COOH
Pmoc-Cl <li> H^O
FmocN-CH-COOH
FmocN-CH-COOH
Karboksilo apsauginės grupės, kurios gali, pvz., būti panaudotos, apima suskaldytas esterio grupes, tokias kaip benzilas (-OBZI), p-nitrobenzilas (-ONB) arba tbutilas (-tOBu), kaip ir jungimus ant kieto nešiklio, pvz., metilo grupes, prijungtas prie polistireno.
Tiolo apsauginės grupės apima p-metoksibenzilą (Mob), tritilą (Trt) ir acetamidometilą (Acm).
Bus suprantama, kad egzistuoja daug kitų tokių grupių, kaip, pvz., detaliai aprašyta aukščiau nurodytoje liτ
T
T
II teratūroje, ir visų tokių grupių panaudojimas čia ankščiau aprašytuose procesuose įeina į šio išradimo sritį.
Egzistuoja daug procedūrų amino- ir karboksil-apsauginių grupių pašalinimui. Tačiau jos turi būti suderintos su naudojama sintezės strategija. Šoninės grandinės apsauginės grupės turi būti atsparios sąlygoms, naudojamoms pašalinti laikinas «-amino apsaugines grupes prieš kitą jungimo stadiją.
Amino apsauginės grupės, tokios kaip Boc, ir karboksilo apsauginės grupės, tokios kaip toBu, gali būti pašalintos vienu metu, paveikiant rūgštimi, pvz., trifluoracto rūgštimi. Tiolc apsauginės grupės, tokios kaip Trt, gali būti pašalintos selektyviai, panaudojant
| oksidavimo agentą, | tokį kaip | j odas. | |
| Cisteino | turintys | peptidai | gali būti sintezuoti mė- |
| todais, | aprašytais | tekste, | sų visų apsauginių grupių |
pašalinimu, įskaitant tiolc apsaugines grupes kaip paskutinę sintezės stadiją.
Toliau einantys pavyzdžiai pateikiami tik kaip iliustracijos .
PAVYZDYS (S,S)-2,7-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)- (E) okt-4-eno-l,8-dikarboksirūgštis
a) 1,4-Bis((2R,5S)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropil-5-pirazinil)-(E)-but-2-enas į maišomą (2R)-2,5~dihidro-3, 6-dimetoksi.i zopropilpirazino (5.53 g, 30 mmol) tirpalą THE (100 ml) , esant
-78~C, su švirkštu pridėta 1.55 M butilličio (19.62 ml,
TT ί ι
II mmol) tirpalo heksane, ir maišymas buvo tęsiamas 1 valandą, esant -78°C. Tada pridėta (E)-1,4-dibromobut-2-eno (3.21 g; 15 mmol) tirpalo THF (20 ml), ir maišymas buvo tęsiamas per naktį. Tirpiklis pašalintas sumažintame slėgyje, o likutis buvo ištirpintas dietilo eteryje bei ekstrahuotas vandeniu. Organinis sluoksnis išdžiovintas magnio sulfatu, eteris išgarintas ir likutis išgrynintas impulsine chromatografija (etilo acetatas/heksanas 1/4; silikagelis).
Išeiga 4.73 g (75 %), blyškiai geltonas skystis.
XH BMR (CDC13): δ
0.67 (d, 6H), 1.04 (d, 6H) , 2.1-2.4 (m, 2H) , 2.48 (dd, 4H) , 3.67 (s, 6H) , 3.68 (s, 6H) , 3.93 (dd, 2H) , 4.03 (dd, 2H), 5.35 (dd, 2H).
13C BMR (CDC13): δ
16.52, 19.07, 31.65, 37.09, 52.16, 52.23, 55.62, 60.60, 127.50
C22H35N4O4 (420)
Pask.%: C: 62.86; H: 8.57 N: 13.33
Rasta %: C: 62.65; H: 8.62 N: 12.91
b) (S,S)-2,7-Diamino-(E)-okt-4-eno-l,8-dikarboksirūgšties dimetilo esteris
Į 1,4-bis((2R,5S)-2,5-dihidroksi-3,6-dimetoksi-2-izopropil-5-pirazinil)-(E)-but-2-eno (4.02 g, 9.9 mmol) ir 0.5 N HCl (40 ml, 20 mmol) mišinį pridėta 40 ml dioksano, ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje 4 valandas. Jis ekstrahuotas dietilo eteriu, į vandeninį tirpalą buvo pridėta vandeninio amonio, kol buvo i
pasiektas pH 9. Tada vandens fazė ekstrahuota chloroformu ir organinis sluoksnis išdžiovintas magnio sulfatu. Pašalinus tirpiklį, perdisti.liuota 30-40°C (0.04 mbar), atskiriant valino metilo esteri. Nedistiliuotas pavadinimo junginys buvo naudojamas be tolesnio gryninimo.
Išeiga 1.92 g (84.3 %), geltonas aliejus.
XH BMR (CDC13):5
1.70 (s, 4H), 2.20-2.60 (m, 4H) , 3.51 (dd, 2H) , 3.69 (s, 6H), 5.46 (dd, 2H).
13C BMR (CDC13):6
37.99, 52.00, 54.11, 128.84, 175.32
c) (S, S) -2,7-Diamino- (E) .-okt-4-eno-l, 8-dikarboksirūgšties dihidrochloridas (S, S)-2,7-Diamino-(E)-okt-4-eno-l,8-karboksirūgšties dimetilo esteris (1.65 g, 7.17 mmol) virinamas su grįžtamu šaldytuvu su 6 N HCl (10 ml, 60 mmol) , dvi valandas. Tada tirpiklis išgarintas, likutis ištirpintas vandenyje (10 ml) , ir pridėta etanolio (100 ml) . Balti kristalai nufiltruoti ir išdžiovinti vakuume, esant 40°C.
Išeiga 1.32 g (67 %); balti kristalai.
XH BMR (D2O):5
2.53 (dd, 4H), 3.93 (dd, 2H), 5.49 (dd, 2H).
13C BMR (ϋ2Ο):δ ι
.11.
I
33.57, 53.07, 128.49, 171.49
C8H16N2O4C12 (275)
| Pask. %: | C: | 34.91; | H: | 5.81; | N: | 10.18; |
| Cl: | : 25.78 | |||||
| Rasta %: | C: | 36.58; | H: | 5.80; | N: | 9.70; |
| Cl: | : 26.01 |
FAB-MS signalas prie m/z
405.3(11), 203.2(100), 157.1(19), 130.1(7), 93.0 (18),
73.9(13) .
d) (S,S)-2,7-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)-E)okt-4-eno-l,8-dikarboksirūgštis
Rūgšties hidrochloridas - (S, S)-2,7-diamino-E-okt-4eno-1,8-dikarboksirūgšties dihidrochloridas (1.59 g, 5.8 mmol) suspenduotas heksametildisilazane (20 ml), ir buvo pridėta 1 ml trimetilsililo chlorido. Tada suspensija virinama su grįžtamu šaldytuvu per naktį. Tirpiklis pašalintas sumažintame slėgyje ir likutis ištirpintas bevandeniame metileno chloride. Šis tirpalas atšaldytas iki 0°C, ir pridėtas 9-fluorenilmetilo chloroformiato (3.10 g, 12 mmol) tirpalas metileno chloride. Prieš pašalinant šaldymo vonią, tirpalas buvo maišomas 1 valandą. Kitą rytą tirpiklis išgarintas ir likutis ištirpintas THF. Tada mišinys užgesintas 1 N vandeniniu HCl, ir tirpalas buvo maišomas 2 valandas. Organinis tirpiklis pašalintas ir vandens fazė ekstrahuota chloroformu. Organinis sluoksnis išdžiovintas magnio sulfatu ir išgarintas. Likutis ištirpintas metileno chloride ir nusodintas eteriu.
Išeiga 2.50 g (67 %); balti kristalai.
Ti
II
| BMR | (DMSO):δ | |||||
| 2.2-2.4 | (s, 4H) , 3.6 (s, 2H), 1 | 5.9-4 | i. 5 | (m, 8H), | 5.55 | (s, |
| 2H) , 7 . | 2-8.1 (m, 16H). | |||||
| 13C BMR | (DMSO):δ | |||||
| 33.98, | 46.56, 53.93, 65.43, | 119. | 66, | 124.81, | 126. | .61, |
| 127.17, | 127.98, 140.19, 143.28, | 155 | .43 | , 172.59 |
^33^34^2θε (646)
Pask. %: C: 70.59; H: 5.26; N: 4.33
Rasta %: C: 70.17; H: 5.58; N: 4.08
FAB-MS signalas prie m/z
661.3(3), 647.4(3), 191.2(17), 179.2(100), 165.1(18),
78.9(31).
PAVYZDYS (S, S) -2,7-Bis (9-fluorenilmet.iloksikarbonilamino) - (Z) okt-4-eno-l,8-dikarbcksirūgštis
a) 1,4-Bis((2R,5S)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropil-5-pirazinil)-(Z)-but-2-enas (2R)-(-)-2,5-Dihidrc-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazinas (1.3 ml, 6.4 mmol) ištirpintas sausame THF (20 ml) ir atšaldytas iki -78°C. Lašinant pridėta BuLi (1.6 M heksane, 3.9 ml, 6.4 mmol), ir tirpalas maišomas 30 minučių. Cis-1,4-dichlor-2-butenas (0.32 ml, 3 mmol) ištirpintas sausame THF (10 ml) ir sudėtas visas iš karto, esant -78°C. Reakcijos mišinys maišomas per naktį N2 atmosferoje. Reakcija užgesinta amonio chlo-. ridu (3 ml) , mišinys išgarintas. Likutis ekstrahuotas ι
1!
dietilo eteriu, ir organinė fazė dukart išplauta vandeniu. Tada išdžiovinta MgSO4 ir išgarinta. Gryninimas atliekamas silikageliu (heptanas: EtOAc/2:l).
Išeiga: 0.81 g (60 %), gelsvas aliejus.
PSG (plonasluoksnė chromatografija) (heptanas: EtOAc/2/1): Rf= 0.39
HPLC (aukšto slėgio skystinė chromatografija) (50-100 % MeOH, 10 minučių): Rt = 6.75 minučių.
XH BMR (CDC13):5
| 0.66 | (d, | 6H) , | 1.02 | (d, | 6H) , | 2.55 | (m, | 2H) , | 2.66 | (m, | 4H) , |
| 3.66 | (s, | 6H) , | 3.70 | (s, | 6H) , | 3.90 | (t, | 2H) , | 4.01 | (m, | 2H) , |
| 5.39 | (t, | 2H) |
b) (S,S)-2,7-Diamino-(Z)-okt-4-eno-l,8-dikarboksirūgšties dimetilesteris
1,4-Bis((2R,5S)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropil5-pirazinil)- (Z)-but-2-enas (0.58 g, 1.23 mmol) ištirpintas dioksane (8 ml), ir pridėta 0.25 M HCl (8 ml, 2.5 mmol) bei maišoma per naktį kambario temperatūroje. PSG (plonasluoksnė chromatografija) (MeCN:MeOH:H2O/4:1:1). Tirpalas ekstrahuotas dietilo eteriu, ir vandens fazė išgarinta. Likutis ištirpintas mažame kiekyje vandens, vandeninis amoniako tirpalas dedamas, kol buvo pasiektas pH 9. Vandens fazė dukart ekstrahuota dietilo eteriu, ir organinė fazė išdžiovinta MgSO4 bei išgarinta .
Išeiga: 0,6 g, geltonas aliejus
I
T ι
i.
c) (S, S) -2,7-Diamino- (Z) -okt~4-eno-l8-karboksirūgšties dihidrochloridas
Į (S,S)-2,7-Diamino-(Z)-okt--4-eno-l,8-karboksirūgšties dimetilo esterio mišinį (0.6 g, 1.3 mmol) pridėta kone. HCI (1 ml) ir dioksano (10 ml) , ir tirpalas buvo deflegmuojamas 2 valandas, tada išgarintas.
Išeiga 0.6 g, balta kieta medžiaga.
BMR (D2O):3
0.88 (2d, 6H), 2.15 (m, 1H) , 2.57 (2d, 4H) , 3.68 (m,
1H), 3.86 (m, 2H), 5.51 (m, 2H).
d) (S ,S) -2,7-Bis (9-fluoren.ilmetiloksikarbonilaniino) (Z) -ok.t-4-eno-l, e-dikarboksirūgštis
Rūgšties hidrochloridas, gautas c) stadijoje (0.6 g, 2 mmol), suspenduotas heksametildisilazane (HMDS) (12 ml) ir trimetilsililo chloride. (TMS-Cl) suspensija deflegmuojama per naktį, azoto atmosferoje. HMDS ir TMS-Cl perteklius nudistiliuotas vakuume. Likutis buvo ištirpintas sausame metilchloride ir atšaldytas iki 0°C. Buvo pridėtas fluorenilmetilo chloroformiato (712 mg, 2.8 mmol) tirpalas sausame metilchloride, mišinys maišomas 2 valandas, tada išgarintas. Likutis ištirpintas THF, užgesintas i M HCI, ir maišomas 2 valandas. Organinis tirpiklis pašalintas, ir vandens fazė ekstrahuota chloroformu. Organinis sluoksnis išdžiovintas MgSO4 ir išgarintas. Gryninimas atliktas silicio dioksidu (heptanas: EtOAc:AcOH/3:6 :1) .
HPLC (40-70 % MeCN 0.1 % TFA, 10 minučių): Rt = 4.75 min.
XH BMR (CDC13) : δ
I I
2.4-2.7 (s, 4H) , 3.7 (s, 2H) , 4.0-4.5 (m, 8H) , 5.5 (s, 2H), 7.1-7.8 (m, 16H) .
PAVYZDYS (S ,S) -2,7-Bis (9-fluorenilmetiloksikarbonilaniino) -okt-4ino-1,8-dikarboksirūgštis
a) 1,4-Bis((2R,5S)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropil-5-pirazinil)-but-2-inas (2R)-(-)-2,5-Dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazinas (2.76 g, 15 mmol) ištirpintas 100-e ml sauso THF ir atšaldytas iki -78°C, tada lašinant ir maišant pridėta 9.5 ml 1.6 M BuLi (15 mmol) tirpalo. Po valandos lėtai įvesta 0.92 g (7.5 mmol) 1,4-dichlor-2,3-butino. Reakcijos mišinio PSC (plonasluoksnė chromatografija) ir DC (dujinė chromatografija) po valandos parodė esminius nesureagavusio 2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazino ir monoalkilinto produkto kiekius. Reakcijai buvo leista tęstis per naktį ir palaipsniui pasiekti kambario temperatūrą. THF išgarintas, esant sumažintam slėgiui, ir likutis padalintas tarp eterio ir vandens. Vandens fazė dukart ekstrahuota eteriu, išdžiovinta (MgSO4) ir išgarinta. Reakcijos mišinio Kugelrohr'o distiliacija davė 2.3 g (77 %) gryno produkto.
3H BMR (CDC13):8
4.03 (m, 4H, žiedas H’s), 3.68 (m, 12H, 4 x OCH3) , 2.63 (pi.AB q, 4H, 2 x CH2) , 2.27 (m, 2H, 2 x CH(CH3)2), 1.05 (d, J=6.8Hz, 6H, 2 x CH3) , 0.64 (d, J=6.8Hz, 6H, 2 x CH3) .
13C BMR (CDC13): δ τ
τ π
II
I i:
163.9, 161.0, 77.4, 60.6,
52.2, 31.6 (31.20), 25.5 (6.9) .
(60.68), 54.6 (25.6), 19.3 (54.2), 52.3, (19.5), 16.7
MS (Cl) 419 (M++, 55), 403 (4), 391 (7), 279 (15), 236 (17), 183 (44), 167 (34), 149 (100), 141 (41), 113 (44).
b) (S, S)-2,7-Diamino-okt-4-in-l,8-karboksirūgšties dimetilesteris
Į a) stadijos produktą pridėta 20 ml 1.0 M HCl ir 60 ml MeOH, kad būtų gauta 0.25 M HCl H2O/MeOH. Reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį, ir, nustačius, kad nebeliko pradinės medžiagos, visas tirpiklis pašalintas. Likutis ištirpintas vandenyje, ekstrahuotas eteriu> ir vandens fazė neutralizuota iki pH 8 kone. NH-OH. Tirpalas išplautas eteriu ir ekstrahuotas kelis kartus EtOAc, kol visas produktas perėjo į EtOAc fazę. Tada išdžiovinta, tirpiklis pašalintas ir valino metilo esteris atskirtas iš tirpalo Kulgelrohr'o distiliacija, kad duotų 0.97 g (78 %) metilo esterio pavadinimo junginio.
*H BMR (D2O) : δ
4.0 (m, 2H, HC-α) , 3.6 (d, 6H, 2 x OCH3) , 2.6 (m, 4H, 2 x CH2) .
13C BMR (D2O) : δ
171, 81.6, 61.6, 56.6, 20.5
c) (S , S) -2,7-Diaxnino-okt-4-ino-l, 8-dikarboksirūgštis
Pakankamai MeOH, kad ištirptų b) stadijos produktas, ir ml 6 M HCl sumaišyta ir maišoma kambario temτ
II
I peratūroje per naktį. PSC, panaudojant
1:1:1:1/nBuOH: EtOAc :MeOH:H,O mišinį ir ninhidrino pulverizatorių, parodė metilo esterio buvimą. Reakcijos mišinys deflegmuoj amas 60°C temperatūroje 24 valandas, kol buvo suhidrolizuotas visas metilo esteris. Tirpalas buvo išgarintas iki sausumo, likutis išdžiovintas aukštu vakuumu ir panaudotas be tolesnio gryninimo.
13C BMR (D2O):8
172.3, 81.1, 55.0, 24.3
d) (S, S)-2,7-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)okt-4-ino-l,8-dikarboksirūgštis ml HMDS ir 1 ml TMSC1 pridėta į produktą iš aukščiau, ir mišinys buvo deflegmuoj amas, esant 120°C azoto atmosferoje, kol buvo gautas skaidrus tirpalas maždaug po 24 valandų. HMDS perteklius nudistiliuotas, o gautas produktas ištirpintas 50-tyje ml· sauso CH2C12 ir atšaldytas iki 0°C. Maišant, palaipsniui pridėti 3 g FMOC-C1, ištirpinto 20-tyje ml sauso CH2C12, ir reakcija vyko per naktį. Tirpiklis pašalintas sumažintame slėgyje, o produktas padalintas tarp prisotinto vandeninio NaHCO3 tirpalo ir eterio, kad būtų pašalintas nesureagavęs FMOC-C1 ir kiti FMOC skilimo produktai. Vandeninis tirpalas buvo atšaldytas iki 0°C bei parūgštintas 2 M HCl iki pH 3, produktas ekstrahuotas 5 kartus EtOAc, tada perplautas, išdžiovintas ir išgarintas. Chromatografija, panaudojant CHC13: MeOH/96:4, davė 2.35 g (66 %) pavadinimo junginio. Nors PSC parodė, kad jis grynas, atvirkštinės fazės HPLC parodė priemaišų buvimą, kas beveik sutapo su pagrindinio produkto piku. Produktas, ištirpintas 40 % MeCN su 0.1 % TFA išgrynintas preparatyvine HPLC, panaudojant Beckman'o ODC C-18 kolonėlę bei 0.1 % TFA H2O, ir 0.1 % TFA MeCN buvo kaip eliuentas.
T
T
T
| 3H BMR (DMSO):δ | 30 | |
| 7.9 (d, J 7.3 Hz, | 4H, arom. H), 7.7 (d, J=7 Hz, | 4H, |
| arom. H) , 7.3 (d | tripletas, J 7.2 Hz, 8H, arom. | H) , |
| 4.26 (m, 8H, OCH2, | 2 x CH) , 2.5 (m, 4H, CH2) . |
13c BMR (DMSO): δ
170.4, 154.5, 142.5, 139.4, 126.5, 125.9, 124.2, 119.0,
77.6, 65.5, 53.0, 46.5, 21.7.
PAVYZDYS (S,S) -2,4-Bis (9-fluorenilmetiloksikarbonilaniino) - (E) pentano-1,5-dikarboksirūgštis
a) 1,1-Di((2R,5S)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropil-5-pirazinil)-(E)-metanas
Į maišomą (2R)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-izopropilpirazino (5.53 g, 30 mmol) tirpalą THF (100 ml), esant -78°C, per švirkštą pridedamas 1.55 M butilličio (19.62 ml, 31 mmol) tirpalas heksane, ir maišymas tęsiamas 1 valandą,· esant -78°C. Tada pridedamas (E)-bromochlorometano (15 mmol) tirpalas THF (20 ml) , ir maišymas tęsiamas per naktį. Tirpiklis pašalinamas sumažintame slėgyje ir likutis ištirpinamas dietilo eteryje bei e-kstrahuoj amas vandeniu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas magnio sulfatu, eteris išgarinamas, o likutis gryninamas impulsine chromatografija (etilo acetatas/heksanas 1/4; silikagelis) .
b) (S,S)-2,4-Diamino-(E)-pentan-1,5-dikarboksirūgšties esteris
Į 1,1-di((2R,5S)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropil5-pirazinil)-(E)-metano (4.02 g, 9.9 mmol) ir 0.5 N HCl
T' (40 ml, 20 mmol) mišinį pridedama 40 ml dioksano, ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje 4 valandas. Po to ekstrahuojama dietilo eteriu, vandeninis amoniakas pilamas į vandeninį tirpalą, kol pasiekiamas pH 9. Tada vandeninė fazė ekstrahuojama chloroformu ir organinis sluoksnis išdžiovinamas magnio sulfatu. Pašalinus tirpiklį, valino metilo esteris pašalinamas distiliacija iš kolbos į kolbą, esant 30-40°C (0.04 mbar).
Nedistiliuotas pavadinimo junginys yra naudojamas be tolesnio gryninimo.
c) (S,S)-2,4-Diamino(E)-pentan-1,5-dikarboksirūgšties dihidrochloridas (S,S)-2,4-Diamino-(E)-pentano-1,5-dikarboksirūgšties dimetilo esteris (1.65 g, 7.17 mmol) virinamas su grįžtamu šaldytuvu su 6 N HCl (10 ml, 60 mmol) 2 valandas. Tada tirpiklis išgarinamas, likutis ištirpinamas vandenyje (10 ml) ir pridedama 100 ml etanolio. Balti kristalai nufiltruojami ir išdžiovinami vakuume, esant 40°C.
d) (S,S)-2,4-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)(E)-pentan-1,5-dikarboksirūgštis
Rūgšties hidrochloridas - (S,S)-2,4-Diamino-(E)-pentano-1 , 5-dikarboksirūgšties dihidrochloridas (1.59 g, 5.8 mmol) yra suspenduojamas heksametildisilazane (20 ml) ir pridedamas 1 ml trimetilsililo chlorido. Tada suspensija deflegmuojama per naktį. Tirpiklis pašalinamas sumažintame slėgyje, o likutis ištirpinamas bevandeniame metileno chloride. Šis tirpalas atšaldomas iki 0°C, ir pridedamas 9-fluorenilmetilchloroformiato (3.10 g, 12 mmol) tirpalas metileno chloride. Tirpalas maišomas 1 valandą, prieš pašalinant šaldymo vonią. Kitą rytą tirpiklis išgarinamas ir likutis ištirpinamas THF. Tada mišinys paveikiamas 1 N vandenine HCl ir tirpalas maiT ~T ί '“ΊΓ
T somas 2 valandas. Organinis tirpiklis pašalinamas ir vandens fazė ekstrahuojama chloroformu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas magnio sulfatu ir išgarinamas. Likutis ištirpinamas metileno chloride ir nusodinamas eteriu.
PAVYZDYS (S,S)-2,9-Diamindekandikarboksirūgštis
a) 1,6-Bis[(2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5-dihidro-5-pirazinil]heksanas (R)-2,5-Dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazinas (4.12 g, 22.4 mmol) ištirpintas bevandeniame THF, ir tirpalas atšaldytas iki -78°C. Buvo pridėtas BuLi tirpalas heksane (22.42 mmol, 14.0 ml) . Po 30 minučių, esant -78°C, 1.6-dibromoheksano (11.2 mmol, 2.73 g) tirpalas THF sulašintas, ir tirpalas įgijo kambario temperatūrą per naktį. Po hidrolizės su fosfato buferiu (pH=7) mišinys ekstrahuotas dietilo eteriu, ir organinis sluoksnis plautas vandeniu ir sūrymu. Po išdžiovinimo (MgSO4) tirpiklis išgarintas, o likutis išgrynintas impulsine chromatografija (heksanas/etilo acetatas 9/1) .
Išeiga: 2.57 g (51 %) .
XH BMR (CDC13): δ
| 0.67 | (d, 6H), 1.04 (d, | 6H) , 1.10-1.30 (m, 8H) , 1. | 60- |
| 1.85 | (m, 4H), 2.15-2.35 | (m, 2H), 3.66 (s, 6H), 3.67 | (s, |
| 6H) , | 3.91 (dd, 2H), 3.95 | -4.05 (m, 2H). | |
| 13C BMR (CDC13): δ |
“T---—·r· i
I 1
16.54, 19.08, 24.44, 29.46, 31.63, 34.15, 52.27,
52.28, 55.47, 60.68, 163.41, 163.96.
FAB-MS signalai prie m/z 451.2(80), 407.2(33),
141.0(100). C24H42N4O4 (450).
b) (S,S)-2,9-Diamindekandikarboksirūgšties dimetilo diesteris
1,6-Bis[ (2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5-dihidro5-pirazinil] -heksano tirpalas 40-tyje ml dioksano ir 22.8 mmol HCl (1.90 ml) 36-iuose ml vandens buvo maišoma kambario temperatūroje 6 valandas, tirpiklis pašalintas ir tirpalas ekstrahuotas dietilo eteriu. Vandeninis amoniako tirpalas pridedamas, kol pasiektas pH 9, ir tada tirpalas ekstrahuotas chloroformu. Organinis sluoksnis išdžiovintas (MgSO4) . Valino metilo esteris nudistiliuotas vakuume (0.03 torų, kambario temperatūra).
Išeiga: 1.48 g (100 %) .
XH BMR (CDC13): δ
1.20-1.70 (m, 16H), 3.36 (dd, 2H), 3.65 (s, 6H).
13C BMR (CDC13):6
25.40, 29.06, 34.77, 51.76, 54.30, 176.51.
c) (S,S)-2,9-Diaminodekandikarboksirūgštis·2HC1
Dimetilo diesteris iš b) stadijos (1.40 g, 5.38 mmol) ištirpintas 6 N HCl (40 ml, 240 mmol) ir maišomas, N2 atmosferoje, 60°C temperatūroje 12 valandų. Tirpiklis išgarintas, likutis ištirpintas EtOH ir kristalizuotas, pridedant dietilo eterio. Kristalai nufiltruoti.
Išeiga: 0.700 g, balti kristalai (42.7 %) .
:H BMR (D2O): δ
1.07-1.37 (m, 8H) , 1.60-1.90 (m, 4H), 3.85 (m, 2H) .
I3C BMR (D2O):6
23.81, 27.65, 29.61, 53.09, 172.55.
FAB-MS signalai prie m/z 439.3(15), 340.3(100),
233.2 (11) .
C10H22N2Cl2O4 (450): Pask., %: N, 9.18.
Rasta, %: N, 9.13.
d) (S,S)-2,9-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)-dekandikarboksirūgštis (S, S) -2, 6-Diam.inodekandikarboksirūgšties dihidrochloridas (0.50 g, 1.64 mmol) suspenduotas HMDS bei TMSC1 ir deflegmuoj amas azoto atmosferoje per naktį. Tirpikliai pašalinti, likutis ištirpintas bevandeniame CH2C12. Tirpalas atšaldytas iki 0°C, ir pridėta FmocCl (1.69 g, 6.56 mmol) tirpalo CH2C12. Tirpalas maišomas per naktį, tirpalas pašalintas ir likutis ištirpintas THF. Pridėjus 5 ml 0.5 M HC1, mišinys maišomas 2 valandas, ekstrahuotas chloroformu ir išdžiovintas (MgSO4) . Likutis išgrynintas impulsine chromatografija (heptanas/etilo acetatas/acto rūgštis 4/6/1).
Išeiga: 0.580 g (52.5 %).
XH BMR (DMSO):δ
1.00-1.44 (m, 8H) , 1.44-1.80 (m, 4H) , 3.90 (s, 2H) ,
4.13-4,43 (m, 4H), 7.25-8.05 (m, 16H);
I 13C BMR (DMSO): δ
21.29, 25.63, 28.62, 31.08, 46.86, 54.17, 65.70, 120.25, 125.44, 127.20, 127.77, 140.86, 143.96, 144.04, 156.21, 174.28
FAB-MS signalai prie m/z 699.5(6), 677.4(2), 603.6(4),
409.3(4), 339.3(4); 179.1(55), 72.9(100).
PAVYZDYS (S,S)-2,8-Diaminononandikarboksirūgštis
a) 1,5-Bis[(2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5-dihidro-5-pirazinil]-pentanas
Į (R)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazino (3.68 g, 20 mmol) tirpalą THF (68 ml) lašinant (10 minučių) pridėta 1.6 M n-BuLi tirpalo heksane (12.8 ml, 20.4 mmol), ir maišymas buvo tęsiamas, esant -78°C, 1 valandą. Tada sulašintas 1,5-dibromopentano (2.3 g, 10 mmol) tirpalas THF (13.2 ml), ir mišiniui buvo leista įsigyti kambario temperatūrą per naktį. Reakcija užgesinta, pridedant 50 ml NaHCO3, ir mišinys padalintas tarp eterio (50 ml) ir vandens (20 ml). Po atskyrimo, vandens sluoksnis dukart ekstrahuotas eteriu (50 ml) , ir sujungti organiniai sluoksniai išdžiovinti (MgSO4), nufiltruota, sukoncentruota ir išgryninta impulsine chromatografija (silikagelis, heksanas: etilo acetatas = 12:1).
Išeiga: 3.68 g (8.43 mmol, 84.3 %).
XH BMR (300 MHz, CDC13): δ
4.02 (kv. 2H, J. 2.1 Hz), 3.92 (t, 2H, J 3.3 Hz), 3.68 (s, 12H), 2.28 (d sept, 2H, J 3.3, 6.8 Hz), 1.71 (m,
II
J
4H) , 1.21 (m, 6H), 1.05 (d, 6H, J 6.8), 0.68 (d, 6H, J 6.8) ;
i3C BMR (75 MHz, CDC13): δ
163.89, 163.31, 60.62, 55.40, 52.22. 52.19, 34.02,
34.56, 29.31, 24.33, 19.01, 16.48.
FAB-MS m/z 437 (M+l).
C23H40N4O4 (436.59): Pask., %: C, 63.28; H, 9.23; N, 12.83.
Rasta %: C, 62.95; H, 9.01; N, 129.91
b) (S,S)-2,8-Diaminononandikarboksirūgšties dimetilo diesteris
1,5-Bi s[ (1S, 4R) -3, 6-4 -izopropi1-2,5-dihidropirazinil] pentanas (2.8 g, 6.4 mmol) ištirpintas dioksane (51.2 ml) bei 0.5 M HCl (51.2 ml) ir maišomas 4 valandas kambario temperatūroje. Šis mišinys plautas dietilo eteriu (100 ml) , pH padarytas 9, pridedant 25 % amoniako vandenyje, ir greitai ekstrahuotas CHC'l3 (3 x 75 ml) . Organinis sluoksnis buvo išdžiovintas MgSO4, nufiltruotas ir sukoncentruotas. Metilo valinatas buvo pašalintas Kulgelrohr'o distiliacija (25-50°C, 0.01 torų), ir gauta 1.505 g (0.11 mmol, 95.5 %) išeiga.
JH BMR (300 MHz, CDC13):5
3.71 (s, 6H) , 3.43 (t, 2H, . J 6.0 Hz), 1.70 (m, 2H)
1.57-1.34 (m, 8H).
13C BMR (75 MHz, CDC.U): δ
176.40, 54.33, 51.86, 34.79, 29.08, 25.42.
I) : ιι
c) (S,S)-2,8-Diaminononandikarboksirūgštis
Esteris iš b) stadijos buvo maišomas deflegmuojant 6 M HCl (7.2 ml) 2 valandas azoto atmosferoje. Lakūs junginiai išgarinti. Likutis ištirpintas vandenyje (5 ml) , pridėta etanolio (20 ml), ir lėtas eterio įdėjimas davė baltas, kristalines nuosėdas. Šis mišinys laikomas 12 valandų šaldytuve, nufiltruotas, plautas eteriu ir išdžiovintas vakuume.
| Išeiga 1.37 g (4.71 mmol, 77 | .4 %) . | |
| XH BMR (300 MHz, CDC13): δ | ||
| 3.74 (m, 2H), i.80-1.63 (m, | 4H), 1.38- | -1.15 (m, 6H). |
| 13C BMR (75 MHz, CDC13): δ | ||
| 173.35, 53.62, 29.71, 27.65, | 23.65. | |
| FAB-MS m/z 437 (M+ -72). | ||
| C9H20Cl12N2O4 (291.17): Pask., | %: C, | 37.13; H, 6.92 |
| Rasta | %: C, | 37.90; H, 7.21 |
d) (S,S)-2,8-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)-nonandikarboksirūgštis (S,S)-2,8-Diaminononano dirūgštis (291 mg, 1 mmol) TMSC1 (260 mg; 2.4 mmol) ir HMDS (3.5 ml) deflegmuojama azoto atmosferoje per naktį. Atšaldžius iki kambario temperatūros, lakios dalys pašalintos (iki 50°C, 0.01 torų), likutis ištirpintas CH2C12 (6.6 ml), atšaldytas iki 0°C, ir lašinant pridėta FmocCl (905 mg, 3.5 mmol) CH2C12 (6.6 ml). Mišiniui leista įgyti kambario temperatūrą per naktį. Tirpiklis išgarintas, likutis ištirpintas THF (7.5 ml) , ir pridėta 1 M HCl (7.5 ml) .
I III
Šis mišinys maišomas 4 valandas kambario temperatūroje. Tada pridėta chloroformo (50 ml) ir sūrymo (40 ml) , ir fazės atskirtos. Vandens sluoksnis ekstrahuotas 2 x CHC13 (50 ml) . Sujungti organiniai sluoksniai išdžiovinti (MgSO4) , sukoncentruoti ir išgryninti impulsine chromatografija (silikagelis, heksanas: etilo acetatas: acto rūgštis = 50 : 50 : 5) . Produktą turinčios frakcijos buvo sukoncentruotos ir liofilizuotos, gauta 615 mg (0.928 mmol, 92.8 %) išeigą.
BMR (300 MHz, d6-DMSO):5
| 7.86 | (d, 4H, J 7.2 | Hz), 7.70 | (d, 4H, J | 7.5 Hz), 7.41- |
| 7.27 | (m, 8H) , 4.24 | (m, 6H) , | 3.86 (kv, | 2K, 0' 4.5 Hz), |
| 1.62 | (m, 4H), 1.24 | (m, 6H). |
13C BMR (75 MHz, CDC13) : 5
| 174.40, 172.39, 156.30, | 144.31, 144.22, | 141.10, | 129.31, |
| 127.99, 127.68, 127.44, | 125.67, 121.77, | 120.46, | 65.91, |
| 54.66, 47.12, 31.40, 28. | 68, 25.57, 21.53 | ||
| FAB-MS m/z 663 (M+ +1); | |||
| C39H38N2O8 (662.73). Pask., | %: C, 70.68; H, | 5.78; N, | 4.23. |
| Rasta, | %: C, 71.20; H, | 5.62; N, | 4.07. |
PAVYZDYS
2,3-Diaminogintaro rūgštis
a) 2,3-Bis(benzilamino)gintaro rūgštis
Į mechaniškai maišomą mezo-2,3-dibrom.ogintaro rūgšties (27.6 g, 0.1 mol) tirpalą alkoholyje (200 ml) lėtai pridėta benzilamino (85 g, 0.8 mol) kambario temperatūroje. Sudėjus viską, mišinys deflegmuoj amas per nakII ί .1 jjj :
tį. Pasirodė sunkios druskų nuosėdos. Mišinys atšaldytas iki 50°C, ir pridėta koncentruotos hidrochloro rūgšties, kol pH pasiekė 4-5. Nuosėdos nufiltruotos, kelis kartus vandeniu bei alkoholiu ir išdžiovintos.
Išeiga 24.5 g (75 %).
BMR (300 MHz, D2O/NaOD); δ
3.08 (2H, s), 3.30 (2H, d, J 13 Hz), 3.55 (2H, d, J 13 Hz), 7.2 (10H, m).
13C BMR (75 MHz, D2O/NaOD); δ
50.9, 64.7, 127.1, 128.5 (br), 139.2, 179.0.
b) Mezo-2,3-diaminogintaro rūgštis
Mezo-2,3-bis(benzilamino)gintaro rūgštis (9.5 g, 0.029 mol) ištirpinta ledinės acto rūgšties (50 ml) ir koncentruotos hidrochloro rūgšties (50 ml) mišinyje. Hidro atliekama kambario temperatūroje 10 % paladžiu/medžio anglies (1.0 g) kaip katalizatoriumi. Reakcija vyko, kol BMR parodė, kad daugiau nėra nesureagavusios pradinės medžiagos. Buvo pridėta vandens (100 ml) , ir katalizatorius pašalintas filtruojant. Filtratas sukoncentruotas (rotaciniu garintuvu), o likutis ištirpintas atskiestame vandeniniame natrio hidrokside. pH sureguliuotas iki apytikriai 5, įdedant ledinės acto rūgšties. Kristalai nufiltruoti ir perplauti.
Išeiga 3.8 g (88 %), balta kieta medžiaga.
XH BMR (300 MHz, D2O/NaOD):8
3.21 (s).
IIHU.I 33C BMR (75 MHz, D2O/NaOD):6
60.3, 180.0.
C4H8N2O4
Pask. %: C, 32.44; H,
Rasta %: C, 31.51; H,
5.44; N, 18.91.
5.41; N, 18.32.
c) Mezo~2,3~bis(trimetilsililamino)gintaro rūgšties di(trimetilsilil)esteris
Reakcija buvo atliekama azoto atmosferoje. Mezo-2,3diaminogintaro rūgšties (296 mg, 2.00 mmol) suspensija heksametildisilazane (10 ml) ir trimetilchiorsilane (1 ml) maišoma, esant 100°C per naktį, davė skaidrų tirpalą. Sililinančių reagentų perteklius nudistiliuotas sumažintame slėgyje. Kietas baltas likutis tiesiai panaudotas acilin.imo reakcijose.
2H BMR (300 MHz, CDC13):5
0.03 (18H, s), 0.28 (18H, s), 3.5 (2H, m).
13C BMR (75 MHz, CDC13):0
-0.3, 0.03, 60.9, 174.1.
d) Mezo-2,3-bis[(9-fluorenilmetoksikarbonil)amino)gintaro rūgštis
Reakcija atliekama azoto atmosferoje. Sililinta dramino gintaro rūgštis, gauta c) stadijoje, ištirpinta sausame dichlormetane (10 ml) ir atšaldyta iki 0°C. Buvo pridėtas 9-fluorenilmetilo chloroformiato (1.14 g, 4.4 mmol) tirpalas sausame dichlormetane (4 ml) . Reakcijos mišinys maišomas per naktį rr po to sukoncentruotas. Likutis ištirpintas THF (10 ml), ir buvo pridėta vandens (apytikriai 1 ml) . Mišinys maišomas 10 minučių ir tada sukoncentruotas. Produktas ekstrahuotas etilo acetatu, tirpalas plautas vandeniu, išdžiovintas (MgSO4) ir nufiltruotas. Buvo pridėta heksano, ir nuosėdos nufiltruotos bei plautos heksanu. Galiausiai produktas gryninamas kolonėlės chromatografija (silicio dioksidas, heksanas/etilo acetatas/acto rūgštis 1:3:1).
Išeiga 0.85 g (72 %), balti kristalai.
2H BMR (300 MHz DMSO-d6):8
4.1-4.3 (6H, m), 4.5 (2H, d), 7.2-7.4 (12H, m), 7.6-7.7 (4H, 7.8-7.9 (4H, m).
13C BMR (75 MHz DMSO-d6): δ
47.0, 56.1, 66.5, 120.5, 125.9, 127.5, 128.0, 141.0,
144.1, 156.4, 171.1.
FAB-MS signalai prie m/z 637.2(3), 631.1(5), 615.2(21),
593.2, 435.1(9), 326.3(15), 179.1(100).
e) Raceminis-2,3-bis[(9-fluorenilmetoksikarbonil)amino] gintaro rūgšties anhidridas
Mezo-2, 3-bis[ (9-fluorenilmetoksikarbonil)-amino] gintaro rūgšties (150 mg, 0.25 mmol) suspensija acto rūgšties anhidride maišoma, esant 120°C, kol ištirpo visa medžiaga (1-2 minutes) . Anhidrido perteklius atskirtas vakuume. Žalias produktas buvo panaudotas peptido sintezėje be tolesnio gryninimo.
XH BMR (300 MHz DMSO-d6): δ
4.25 (2H, t), 4.39 (4H, d), 4.80 (2H, d), 7.2-7.4 (8H, m), 7.66 (4H, d), 7.88 (4H, d), 8.30 (2H, d).
II 13C BMR (75 MHz DMSO-d6):8
46.8, 55.6, 66.9, 120.6, 125.5, 127.5, 128.1, 141.1,
143.9, 156.4, 168.2.
PAVYZDYS (S,S)-2,7-Diamino-E-okt-4-endikarboksirūgštis
a) 1,4-Bis[(2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5-dihidro-5-pirazinil]-E-but-2-enas (2R)-2,5-Dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazinas (5.53 g, 30 mmol) ištirpintas bevandeniame THF ir tirpalas atšaldytas iki -78°C. Buvo pridėtas BuLi tirpalas heksane (19.62 ml, 31.0 mmol). Po 60 minučių -78°C temperatūroje lašinant buvo pridėtas E-l,4-dibromobut2-eno (3.21 g, 15 mmol) tirpalas 30-tyje ml THF, ir tirpalas per naktį įgijo kambario temperatūrą. Po hidrolizės su fosfato buferiu (pH 7) mišinys ekstrahuotas dietilo eteriu, organinis sluoksnis plautas vandeniu ir sūrymu. Po išdžiovinimo (MgSO4) , tirpiklis išgarintas ir likutis išgrynintas impulsine chromatografija (heksanas/etilo acetatas 4/1).
Išeiga 4.73 (75 %).
3H BMR (CDC13) : δ
| 0.67 | (d, 6H) , | 1.04 | (d, 6H), 2.1-2.4 | (m, 2H), | 2.48 (dd, | |
| 4H) , | 3.67 (s, | 6H) , | 3.68 (s, 6H) , | 3. | 93 (dd, | 2H), 4.03 |
| (dd, | 2H), 5.35 | (dd, | 2H) . | |||
| 13C - | • (CDC13):6 | |||||
| 16.52, 19.07, | 31.61 | , 37.09, 52.16, | 52 | .23, 55. | 62, 60.60, | |
| 128. | 50 |
I!
.i j:
C33H36N,O„ (420) :
Pask., %: C, 62.86; H, 8.57.
Rasta %: C, 62.65; H, 8.62.
b) (S,S)-2,7-diamino-E-okt-4-enodikarboksirūgšties dimetilo diesteris
1,4-Bis[ (2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5-dihidro5-pirazinil] -E-but-2-eno (4.02 g, 9.9 mmol) tirpalas 40-tyje ml dioksano ir 20.0 mmol HCl (1.67 ml) 38-iuose ml vandens maišomas kambario temperatūroje 4 valandas, po to tirpalas ekstrahuotas dietilo eteriu. Buvo pridėta vandeninio amoniako tirpalo, kol buvo pasiektas pH 9, ir tirpalas ekstrahuotas chloroformu. Organinis sluoksnis išdžiovintas (MgSO4) . Valino metilo esteris nudistiliuotas vakuume (0.04 torų, kambario temperatūra).
Išeiga: 192 g (84.3 %).
3H BMR (CDC13):5
1.70 (s, 4H) , 2.2-2.6 (m, 4H) , 3.51 (dd, 2H), 3.69 (s, 6H), 5.46 (dd, 2H) .
13C - (CDC13):5
37.99, 52.00, 54.11, 128.84, 175.32.
c) (S,S)-2,7-Diamino-E-okt-4-enodikarboksirūgštis · 2 HCl
Dimetilo diesteris iš b) stadijos (1.65 g, 7.17 mmol) ištirpintas 6N HCl (10 ml, 60 mmol) ir def legmuo j amas azoto atmosferoje 2 valandas. Tirpiklis išgarintas, likutis ištirpintas 10-tyje ml vandens ir kristalizuotas, pridedant EtOH (100 ml). Kristalai nufiltruoti .
Išeiga 132 g = 67 %.
ιι
BMR (D2O) : δ
2.53 (dd, 4H) , 3.97 (dd, 2H), 5.52 (dd, 2H).
13C - (D2O):6
33.57, 53.07, 128.85, 171.49.
FAB-MS signalai prie m/z 405.3(11), 203.2(100),
157.(19), 130.1(7), 93.0(18), 73.9(13).
C8H16N2O4C12 (275) :
Pask. %: C, 34.91; H, 5.81; N, 10.18; Cl, 25.78.
Rasta %: C, 36.58; H, 5.80; N, 9.70; Cl, 26.01.
d) (S,S) -2,7-Bis (9‘-fluorenilrietiloksikarbonilamino) -Eokt-4-enodikarboksirūgštis (S, S) -2,7-Diamino-E-oct-4-enodikarboksirūgšt.ies dihidrochloridas (1.59 g, 5.8 mmol) suspenduotas HMDS (20 ml) bei TMSC1 ir deflegmuojamas per naktį. Tirpikliai pašalinti, likutis ištirpintas bevandeniame dichlormetane. Šis tirpalas atšaldytas iki 0°C, ir pridėtas FmocCl (3.10 g, 12 mmol) tirpalas dichlormetane. Tirpalas buvo maišomas 1 valandą, esant šiai temperatūrai, ir per naktį, esant kambario temperatūrai. Tirpiklis išgarintas, likutis ištirpintas THF. Pridėjus 1 N vandeninio HCl, tirpalas maišomas dvi valandas, ekstrahuotas chloroformu ir išdžiovintas (MgSO4) . Likutis ištirpintas dichlormetane ir kristalizuotas, pridėjus dietileterio.
Išeiga: 2.50 g (66.8 %).
3H - (DMSO):δ
Ml.G
2.2-2.4 (s, 4H), 3.6 (s, 2H) , 3.9-4.5 (m, 8H) , 5.55 (s, 2H), 7.2-8.1 (m, 16H).
C - (DMSO):δ
33.98, 46.56, 53.93, 65.49, 119.66, 124.81, 126.61,
127.17, 127.98, 140.19, 143.28, 155.43, 172.59 ^38^34^2^8 (646) :
Pask.
C, 70.59; N, 5.26; N, 4.33,
Rasta %: C, 70.17; N, 5.58; N, 4.08.
FAB-MS signalas prie m/z 661.3(3), 647.4(3), 191.2(17), 179.2(100), 165.1(18), 78.9(31).
PAVYZDYS (S,S)-2,7-Diamino-Z-okt-4-enodikarboksirūgštis
a) 1,4-Bis[(2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5-dihidro-5-pirazinil]-Z-but-2-enas (2R)-2,5-Dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazinas (7.3 g, 39.2 mmol) ištirpintas bevandeniame THF, ir tirpalas atšaldytas iki -78°C. Buvo pridėtas BuLi tirpalas heksane (24.5 ml, 39.2 mmol). Po 15 minučių, esant -78°C temperatūrai, pridėta 16.9 ml 1,3-dimetil2-imidazolindikarboksi rūgšties (156 mmol), o po 5 minučių lašinant pridėtas Z-l, 4-dichlorobut-2-eno (2.45 g,
19.6 mmol) tirpalas 10-tyje ml THF, ir tirpalas maišomas 6 valandas bei laikomas -20°C, per naktį. Po hidrolizės su fosfato buferiu (pH=7), mišinys ekstrahuotas dietilo eteriu, o organinis sluoksnis plautas vandeniu bei sūrymu. Po išdžiovinimo (MgSO4) , tirpiklis išgarintas, o likutis išgrynintas impulsine chromatografija (heksanas/etilo acetatas 9/1) .
Išeiga: 710 mg (10.2 %) .
*H BMR (CDC13) : δ
0.67 (d, 6H), 1.03 (d, 6H), 2.25 (m, 2H), 2.55 (m, 4H), 3.66 (s, 6H) , 3.68 (s, 6H) , 3.91 (dd, 2H) , 4.07 (m,
2H), 5.38 (dd, 2H) .
13C BMR (CDC13): δ
16.50, 19.01, 31.57, 32.01, 52.22, 52.31, 55.46, 60.67, 127.30, 163.19, 163.66.
b) (S,S)-2,7-Dianinc-Z~okt-4-endikarboksirūgšties dimetilo diesteris
1,4-bis[ (IS,4R)-3,6-dimetoksi-4-izopropil-2, 5-dihidro5-pirazinil]-Z-but-2-eno (0.23 g, 0.55 mmol) tirpalas 30-tyje ml dioksano ir 2.2 mmol HCl (0.183 ml) 10-tyje ml vandens maišoma kambario temperatūroje 12 valandų. Tirpalas ekstrahuotas dietileteriu. Buvo pridėta vandeninio amoniako tirpalo, kol pasiektas pH 9, ir tirpalas ekstrahuotas chloroformu. Organinis sluoksnis išdžiovintas (MgSO4) . Valino metilo esteris nudistiliuotas (0.02 torų, kambario temperatūra).
Išeiga: 0.127 g (85 %).
3H BMR (CDC13):6
1.54 (s, 4H) , 2.3-2.6 (m, 4H) , 3.52 (dd, 2H) , 3.71 (s,
6H) , 5.54 (m, 2H) .
13C BMR (CDC13):0
32.55, 52.02, 54.17, 127.94, 175.67.
c) (S,S)-2,7-Diamino-Z-okt-4-endikarboksirūgštis · HCl
Į dimetilo diesterio iš b) stadijos (0.108 g, 0.47 mmol) tirpalą 0.7 ml metanolio pridėtas 2N LiOH tirpalas vandenyje (1.41 mmol, 0.71 ml) . Mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį, tada parūgštintas, lašinant pridėjus 1 N HCl. Kristalai nufiltruoti.
Išeiga 50 mg (38.7 %).
3H BMR (ϋ20):δ
2.58 (m, 4H), 3.99 (m, 2H), 5.51 (m, 2H).
13C BMR (ϋ2Ο):δ
27.59, 52.20, 126.84, 171.10.
d) (S,S)-2,7-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)-Zokt-4-endikarboksirūgštis (S,S)-2,7-Diamino-Z-okt-4-endikarboksirūgštis (0.050 g, .0.25 mmol) ir Na2CO3 (0.21 g, 20.0 mmol) ištirpinta 3juose ml vandens ir 2-juose ml dioksano. Tirpalas atšaldytas iki 0°C, ir pridėtas FmocCl (0.26 g, 1.0 mmol) tirpalas 1-ame ml dioksano. Šis mišinys maišomas 0°C 3 valandas, ir įgijo kambario temperatūrą per naktį. Po ekstrahavimo dietilo eteriu, jis parūgštintas, pridėjus hidrochloro rūgšties. Tirpalas ekstrahuotas chloroformu, o aminorūgštis kristalizuota iš chloroformo/heksano. Junginys toliau gryninamas impulsine chromatografija (chloroformas/acto rūgštis 9/1).
Išeiga: 90.0 mg (55.9 %) .
XH BMR (DMSO):δ
I!
2.12-2.64 (m, 4H) , 3.88 (s, 2H) , 4.04-4.37 (m, 6H) ,
5.42 (s, 2H), 7.02 (s, 2H>, 7.20-8.00 (m, 16H).
13C BMR (DMSO): δ
29.77, 46.88, 55.53, 65.66, 120.23, 125.43, 127.23,
127.74, 129.08, 140.84, 144.11, 155.59, 174.10.
FAB-MS signalai prie m/z 676.2(2), 587.5(5), 447.4(10), 419.3(45), 391.3(100), 363.3(38), 261.2(45), 233.2(29).
PAVYZDYS (S,S)-2,7-Diamino-okt-4-indikarboksirūgštis
a) 1,4-Bis-{(2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5-dihidro-5-pirazinil)but-2-inas
Į (2R)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazino (4.605 g, 25 mmol) ir 1,3-dimetil-2-imidazolidinono (11.4 g, 102 mmol) tirpalą THF (48 ml) lašinant pridėta
1.6 M n-BuLi (16 ml, 25.5 mmol). Po 1 valandos lašinant pridėtas 1,4-dichlor-2-butino (1.54 g, 12.5 mmol) tirpalas THF. Mišiniui leista įgyti kambario temperatūrą per naktį, ir jis užgesintas 1 M fosfato buferiu (pH 7). Mišinys ekstrahuotas dietilo eteriu (150 ml) bei vandeniu (40 ml) , ir sluoksniai atskirti. Vandens sluoksnis dukart ekstrahuotas eteriu (2 x 150 ml), ir sujungti organiniai sluoksniai išdžiovinti (MgSO4) , nufiltruoti, sukoncentruoti ir išgryninti impulsine chromatografija (silikagelis, heksanai: eteris = 7:1).
Išeiga 3.325 g (7.94 mmol, 63.6 %).
XH BMR (300 MHz, CDC13) : δ
4.05-3.99 (m, 4H) , 3.68 (s, 6H) , 3.67 (s, 6H) , 2.70 (dd, 2H, J -14.1, 3.0 Hz), 2.57 (dd, 2H, J -14.1, 3.0
Hz), 2.26 (d sept, 2H, J 6.9, 3.0 Hz), 1.05 (d, 6H, J
6.9 Hz), 0.64 (d, 6H, J 6.9 Hz).
13C BMR (75 MHz, CDC13) : δ
164.56, 161.53, 77.52, 60.51, 54.46, 52.34, 52.22,
31.43, 25.26, 19.07, 16.40.
FAB-MS m/z 419 (M+ +1) .
C22H34N4O4 (418.53):
Pask. %: C, 63.14; H, 8.19; N, 13.39.
Rasta %: C, 63.27; H, 8.12; N, 13.54.
b) (S,S)-2,7-Diamino-okt-4-indikarboksirūgšties dimetilo diesteris
1,4-Bis-((2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5-dihidro5-pirazinil)but-2-inas (920 mg, 2.2 mmol) ištirpintas dioksane (18 ml) bei 0.5 M HCl (18 ml) ir maišomas kambario temperatūroje 12 valandų. Šis mišinys plautas dietilo eteriu (30 ml), pridėjus 25 % amoniako vandenyje, vandens sluoksnio pH padarytas 9, ir greitai ekstrahuotas CHC13 (3 x 75 ml) . Organinis sluoksnis išdžiovintas MgSO4, nufiltruotas ir sukoncentruotas. Metilo valinatas pašalintas Kugelrohr’o distiliacija (25-50°C, 0.01 torų).
Išeiga 486 mg (2.13 mmol, 96.8 %) geltonas aliejus.
XH BMR (300 MHz, CDC13): δ
3.74 (s, 6H) , 3.59 (t, 2H, J 5.4 Hz), 2.60 (d, 4H, J
5.4 Hz) .
nc BMR (75 MHz, CDC13): δ
174.46, 78.31, 53.31, 52.22, 25.15.
c) (S,S) -2,7-Diainino-Z-okt-4-indikarboksirūgštis · 2 HC1
Dimetilo diesterio iš b) stadijos (450 mg, 1.97 mmol) tirpalas šildomas su 6 M HC1 (7.2 ml) iki 50-60°C 12 valandų, azoto atmosferoje. Lakūs junginiai išgarinti (rotacinis garintuvas, vandens vonia 40°C). Likutis ištirpintas vandenyje (1 mi, drumstas), pridėta etanolio (20 ml) , ir lėtas eterio pridėjimas davė baltas kristalines nuosėdas. Šis mišinys laikomas 12 valandų šaldytuve, nufiltruotas, plautas eteriu ir išdžiovintas vakuume.
Išeiga 399 mg (1.46 mmol, 74.2 %) 3H BMR (300 MHz, D2O/DC1):0
4.18 (t, 2H, J 4.8 Hz), 2.85 (m, ΑΑ’Χ, 4H);
13C BMR (75 MHz, D2O/DC1):6
172.62, 79.88, 53.75, 22.60.
FAB-MS m/z 201 (M+ -72) .
d) (S,S)-2,7-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)okt-4-indikarboksirūgštis (S,S)-2,7-Diamino-Z-okt-4-indikarboksirūgšties · 2 HC1 (400 mg, 1.46 mmol) tirpalas dioksane ir 1 M Na2CO3 tirpalas (10.22 ml, 10.22 mmol) atšaldyti iki 0°C, ir pridėta FmocCl (1.14 g, 4.39 mmol) tirpalo 4-iuose ml dioksano. Šis mišinys maišomas 0°C temperatūroje 1 valandą, ir jam leista igyti kambario temperatūrą per
ι.ι.
naktį. Po ekstrahavimo dietilo eteriu, (2 x 50 ml) vandens sluoksnis parūgštintas, pridėjus atskiestos HCl. Tirpalas ekstrahuotas chloroformu (3 x 50 ml), išdžiovintas (MgSO4) ir sukoncentruotas. Likutis išgrynintas impulsine chromatografija (silikagelis, heksanas: etilo acetatas: acto rūgštis = 10:10:1).
Išeiga 376 mg (0.58 mmol, 39 %) JH BMR (300 MHz, DMSO): δ
7.87 (d, 4H, J 7.5 Hz), 7.73 (d, 4H, J 7.5 Hz), 7.41 (t, 4H, J 7.5 Hz), 7.33 (d, 4H, J 7.5 Hz), 4.26 (m, 8H), 2.52 (m, 4H).
13C(DMSO):6
170.43, 154.62, 124.35, 119.12,
FAB-MS m/z 645 (M+ ^-38^32^2^8 (644.67) :
Pask. %: C, 70.80;
Rasta %: C, 69.20;
152.58, 142.32. 139.47, 77.68, 65.45, 53.08, 46 + 1) ·
H, 5.00; N, 4.35.
H, 5.34; N, 4.13.
126.22, 125.94, 57, 21.77.
PAVYZDYS (2S,4R,5R,7S)-2,7-Diamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilidenoktandikarboksirūgštis
a) (2R,3R,)-1,4-Bis(2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil2,5-dihidro-5-pirazinil)-2,3-dihidroksi-2,3-0,0izopropilidenbutanas (2R)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazinas (7.36 g, 40 mmol) ištirpintas vandeniniame THF, ir tirLT 3614 B palas atšaldytas iki ~76°C. Buvo pridėtas BuLi tirpalas heksane (40.0 mmol, 25 ml) . Po 20 minučių, esant -78°C, (2R, 3R)-1,4-dibrom-2,3-dihidroksi-2,3-O-izopropilidenobutano (3.78 g, 13.1 mmol) tirpalas 10-tyje ml THF pridėtas lašinant, ir tirpalas laikomas 4°C temperatūroje 36 valandas. Po hidrolizės fosfato buferiu (pH 7), mišinys ekstrahuotas dietilo eteriu, organinis sluoksnis išplautas vandeniu ir sūrymu. Po išdžiovinimo (MgSO4) , tirpiklis išgarintas, ir likutis išgrynintas pakartotinu kristalizavimu iš acetonitrilo.
Išeiga: 3.70 g (57 %).
| 3K BMR | (CDC13): | δ | ||||||
| 0.68 (d, 6H), | 1.03 | (d, 6H), | 1.34 (s, | 6H) , | 1.95-2. | .15 | (m, | |
| 4H), 2’. | 24 (m, | 2H) , | 3.65 (s, | 6H), 3.67 | (s, | 6H), 3. | . 94 | (m, |
| 2H), 4. | 0 4 (m, | 211) , | 4.11 (m, | 2H) . | ||||
| 13C BMR | (CDCI3) | :δ | ||||||
| 16.91, | 19.05, | 27.39 | , 31.73, | 38.32, 52 | .27, | 52.36, | 52. | .70, |
| 60.60, | 77.89, | 108.1 | 9, 163.66 | , 163.70. | ||||
| FAB-MS | m/z sig | nalas | prie 495 | .4 (100) . |
C25H42N4O (494):
Pask. %: C, 60.71; H, 8.56; N, 11.33.
Rasta %: C, 60.76; H, 8.32; N, 11.36.
b) (2S, 4R,5R,7S) -2,7-diamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilidenoktandikarboksirūgšties dimetilo diesteris (2R,3R,)-1,4-Bis((2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5dihidro-5-pirazinil)-2,3-dihidroksi-2,3-0,0-izopropilidenobutanas (1.22 g, 2.47 mmol) ištirpintas 10-tyje ml dioksano ir 20-tyje ml MeOH. Buvo pridėta 9.88 mmol HCI
II .JI ί tirpalo vandenyje, ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje per naktį. Tirpikliai pašalinti, likutis ištirpintas vandenyje ir ekstrahuotas dietilo esteriu, į vandeninį sluoksnį pridėta amoniako, kol pasiektas pH 9, ir šis sluoksnis ekstrahuotas chloroformu. Po išdžiovinimo (MgSO4), tirpiklis pašalintas ir valino metilo esteris nudistiliuotas (30-40°C, 0.04 torų).
Išeiga: 0.67 g (89.3 %).
7H BMR (CDC13): δ
1.34 (s, 6H), 1.64 (pi s, 4H), 1.72-1.84 (m, 2H), 1.992.08 (m, 2H), 3.65 (m, 2H), 3.71 (s, 6H), 3.80 (m, 2H).
13C BMR (CDC13):6
27.17, 37.54, 52.04, 52.74, 78.78, 108.99, 175.51.
c) (2S,4R,5R,7S)-2,7-Diamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilidenoktandikarboksirūgštis
Dimetilo diesteris iš b) stadijos (0.62 g, 2.04 mmol) ištirpintas 2.5 ml dioksano ir pridėta 2.1 ml 2N LiOH tirpalo vandenyje (4.1 mmol), ir tirpalas maišomas argono atmosferoje per naktį. PSC parodė kiekybinį pavadinimo junginio susidarymą. Nevalytas reakcijos tirpalas buvo panaudotas kitoje stadijoje.
d) (2S,4R,5R,7S)-2,7-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino)-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilidenoktandikarboksirūgštis
Nevalytas (2S,4R,5R,7S)-2,7-diamino-4,5-dihidroksi-4,535 0,O-izopropilidenoktandikarboksirūgšties (2.04 mmol) tirpalas atšaldytas iki 0°C ir pridėta 10 ml dioksano bei IN NaOH (10 mmol) tirpalo. Tada pridėta 2.07 g
K ι , .ui·.
FmocCl (8.0 mmol) maišomas, esant 0°C, per naktį. Mišinys mažomis porcijomis, ir mišinys 5 valandas kambario temperatūroje ekstrahuotas dietilo eteriu ir parūgštintas, pridedant KHSO4.
Iš ekstrahavus C'HC13, organinis sluoksnis išdžiovintas (MgSO4) , tirpiklis pašalintas. Nesureagavusio FmocCl perteklius atskirtas filtracija ant silikagelio acetonu/MeOH, ir likutis buvo išgrynintas, nusodinant iš CHCl3/EtOEt.
Išeiga: 0.49 g (33.6 %)
BMR (DMSO/D2O) δ:
1.20 (s, 6H), 1.73 (m, 2H), 1.99 (m, 2H), 3.87 (m, 2H) , 4.14-4.2Φ (m, 6H) , 7.23-7.82 m, 16H) .
13C BMR (DMSO) δ:
27.78, 36.21, 47.27, 53.75, 66.19, 78.82, 107.89, 120.67, 125.81, 127.76, 128.32, 141.24, 144.39, 156.12, 175.96.
FAB-MS signalas prie m/z 563.2(2), 179.1 (100)
C41H40N2O10 (720): Pask.: N, 3.89
Rasta: N, 3.81.
PAVYZDYS (2S,4S,5S,7S)-2,7-Diamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0izopropilidenoktandikarboksirūgštis
a) (2S,3S)-1,4-Bis((2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropiI
2,5-dihidro-5-pirazinil)-2,3-dihidroksi-2,3-0,O-izopr pilidenbutanas ιι .11 (2R)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazinas (9.59 g, 52.1 mmol) ištirpintas bevandeniame THF, ir tirpalas atšaldytas iki -78°C. Buvo pridėta BuLi tirpalo heksane (52 mmol, 32.5 ml) . Po 60 minučių, esant -78°C, lašinant pridėta (2S,3S)-1,4-dibrom-2,3-dihidroksi-2,3-0,O-izopropilideno-butano (6.0 g, 20.83 mmol) tirpalo 10-tyje ml THF, .ir tirpalas įgijo kambario temperatūrą per naktį, bei buvo maišomas dar 24 valandas. Po hidrolizės fosfato buferiu (pH 7), mišinys ekstrahuotas dietilo eteriu, o organinis sluoksnis plautas vandeniu bei sūrymu. Po išdžiovinimo (MgSO4) , tirpiklis išgarintas, o likutis išgrynintas pakartotinu kristalizavimu iš MeCN.
Išeiga: 3.43 g (33.3 %
| JH BMR (CDC13) | 5: | ||||
| 0.70 (d, 6H), | 1.03 | (d, 6H), 1.44 (s, | 6H) , | 2.15-2.30 | (m, |
| 4Η), 3.66 (s, | 6H) , | 3.69 (s, 6H), 3.92 | (m, | 2H), 4.04 | (m, |
| 2H), 4.09-4.20 | (m, | 4H) . | |||
| 13C BMR (CDC13) | δ: | ||||
| 16.78, 19.11, | 27.67, 31.88, 38.38, 52 | .37, | 52.44, 52. | . 83, | |
| 60.84, 77.65, | 108 . | 57, 163.15, 163.88 |
FAB-MS signalas prie m/z 495.4(53), 253.2(40),
197.2(58), 141.1(100)
C25H42N4O (494) :
Pask. %: C, 60.71; H, 8.56; N, 11.33
Rasta %: C, 60.89; H, 8.42; N, 11.45.
I !. IHJ·
b) (2R,4S,5S,7S)-2,7-Dramino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilidenoktandikarboksirūgšties dimetilo diesteris (2S,3S)-1,4-Bis((2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil-2,5dihidro-5-pirazinil)-2,3-dihidroksi-2,3-0,0-izopropilidenbutanas (2.5 g, 5.06 mmol) ištirpintas 40-tyje ml dioksano. Buvo pridėta 20.0 mmol HC1 tirpalo 40-tyje ml vandens, ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje per naktį. Tirpikliai pašalinti, likutis ištirpintas vandenyje ir ekstrahuotas dietilo eteriu. į vandeninį sluoksnį pridėta amoniako, kol buvo pasiektas pH 9, ir šis sluoksnis ekstrahuotas chloroformu. Po išdžiovinimo (MgSOJ , tirpiklis atskirtas ir valino metilo esteris nudistiliuotas (30-40°C, 0.04 torų).
Išeiga: 1.507 g (98.0 %).
hl BMR (CBC13) δ:
1.32 (s,6H), 1.53 (br s,4H) 1.60-1.68 (m,2H), 1.85-1.94 (m,2H), 3.63 (m,2H), 3.67 (s,6H), 3.80 (m,2H).
13C BMR (CDC13) δ:
27.25, 37.20, 51.96, 52.74, 77.58, 108.80, 176.10.
c) (2S,4S,5S,7S)-2,7-Diamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilideno-oktandikarboksirūgštis
Dimetilo diesteris iš b) stadijų (1.51 g, 4.96 mmol) ištirpintas 5-iuose ml dioksano, buvo pridėta 4.95 ml 2N LiOH tirpalo vandenyje (9.91 mmol), ir tirpalas maišomas argono atmosferoje per naktį. PSC parodė kiekybinį (2S, 4S, 5S, 7S)-2,7-diamino-4,5-dihidroksi-4,50,0-izopropilidenoktandikarboksirūgšties susidarymą. Nevalytas tirpalas buvo panaudotas kitoje stadijoje.
.11
d) (2S,4S,5S,7S)-2,7-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,O-izopropilidenoktandikarboksirūgštis (2S,4S,5S,7S)-2,7-diamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilidenoktandioinės rūgšties nevalytas tirpalas (4.96 mmol) atšaldytas iki 0°C ir pridėta 16 ml 1 N NaOH tirpalo (16 mmol). Tada mažomis porcijomis pridėta 3.89 g FmocCl (15.0 mmol) tirpalo 16-yje ml dioksano, ir mišinys maišomas kambario temperatūroje 90 minučių. Tirpalas parūgštinamas, pridedant KHSO4. Po ekstrahavimo CHC13, organinis sluoksnis išdžiovintas (MgSO4) , tirpiklis pašalintas. Likučio mėginys išgrynintas impulsine chromatografija (heksanas/etilo acetatas/acto rūgštis 5/5/1) .
Išeiga: 1.69 (46%).
XH BMR (DMSO/D2O) δ:
1.23 (s,6H), 1.7-2.0 (m,4H) , 3.62 (m,2H), 4.02 (m,2H),
4.1-4.35 (m,6H), 7.2-7.9 (m,16H).
13C BMR (DMSO) δ:
27.94, 34.59, 47.39, 52.29, 66.45, 77.49, 109.13, 120.90, 125.91, 127.97, 128.59, 141.44, 144.44, 157.02, 174.75.
FAB-MS signalas prie m/z 743.3(28), 563.2(58),
502.2 (72) .
C41H40N2O10 (720) :
Pask. %: N, 3.89.
Rasta %: N, 4.09.
I L ium
PAVYZDYS (2S,4R,5S,7S)-2,7-Diamino-4,5-dihidroksi-4,5-izopropilidenoktandikarboksirūgštis
a) (2R,3S)-1,4-Bis[(2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropil2,5-dihidro-5-pirazinil]-2,3-dihidroksi-2,3-0,0-izopropilidenobutanas (2R)-2,5-dihidro-3, 5-dimetoksi-2-izopropilpirazinas (6.08 g, 33.0 mmol) ištirpintas bevandeniame THF, ir tirpalas atšaldytas iki -78°C. Buvo pridėta BuLi tirpalo heksane (33.0 mmol, 20.6 ml). Po 45 minučių, esant -78°C, lašinant pridėta (2R,3S)-1,4-dibromo-2,3dihidroksi-2,3-0-izopropilidenobutano (4.52 g 15.7 mmol) tirpalo 10-tyje ml THF. Per naktį tirpalas įgavo kambario temperatūrą bei buvo maišomas dar 24 valandas. Po hidrolizes fosfato buferiu (pH 7), mišinys ekstrahuotas dietilo eteriu, o organinis sluoksnis plautas vandeniu ir sūrymu. Po išdžiovinimo (MgSCų) , tirpiklis išgarintas ir likutis išgrynintas impulsine chromatografija (heksanas/etilo acetatas 9/1).
Išeiga: 0.77 g (10 %).
XH BMR (CDC13) δ:
0.68 (m,6H), 1.03 (m, 6H) , 1.32 (s,3H), 1.45 (s,3H),
1.30-1.55 (m,lH), 1.85-2.30 (m,5H), 3.62 (s,3H), 3.66 (s,3H), 3.68 (s, 6H), 3.92 (m,2H), 4.06-4.26 (m,3H),
4.45 (m,1H).
13C BMR (CDC13) δ:
16.62, 16.77, 19.04, 19.08, 26.20, 28.49, 31.71, 31.91, 33.69, 35.07, 52.21, 52.27, 52.32, 52.35, 52.40, 52.98, „!,E
60.58, 60.80, 74.31, 74.66, 107.16, 163.03, 163.40,
163.91, 164.30.
b) (2S,4R,5S,7S)-2,7-Diamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilidenoktanodikarboksirūgšties dimetilo diesteris (2R,3S)-1,4-Bis((2R,5S)-3,6-dimetoksi-2-izopropii-2,5dihidro-5-pirazinil)-2,3-dihidroksi-2,3-0,0-izopropilidenbutanas (0.77 g, 1.55 mmol) ištirpintas 12-oje ml dioksano. Buvo pridėta 6.0 mmol HCl tirpalo 12-oje ml vandens, ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje 5 valandas. Buvo pridėta amoniako, kol pasiektas pH 9, ir tirpalas ekstrahuotas chloroformu. Po išdžiovinimo (MgSO4) , tirpiklis pašalintas ir valino metilo esteris
| buvo nudistiliuotas (30-40°C, 0.05 | torų). | |||
| Išeiga 0.36 g (77 | %) . | |||
| yH BMR (CDC13) δ: | ||||
| 1.30 (s,3H),1.41 | (s,3H), 1.40-1.48 | (m,1H), | 1.72 | (s,4H) , |
| 1.75-2.00 (m,3H), 4.40 (m,2H). | 3.60-3.67 (m,2H) | , 3.70 | (s,6H) | , 4.20- |
| 13C BMR (CDCI3) δ: | ||||
| 25.81, 28.26, 34. | 69, 34.89, 51.55, | 52.00, | 52.02, | 52.66, |
74.26, 75.20, 108.23, 175.43, 176.51.
c) (2S,4R,5S,7S)-2,7-Diamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,0-izopropilidenoktandikarboksirūgštis
Dimetilo diesteris iš b) stadijos (0.36 g, 1.19 mmol) ištirpintas 5-iuose ml dioksano, pridėta 1.19 ml 2 N
LiOH tirpalo vandenyje (2.38 mmol), ir tirpalas maišomas argono atmosferoje per naktį. PSC kontrolė parodė kiekybinį (2S,4R,5S,7S)-2,7-diamino-4,5-dihidroksi-4,5I L 1111·.
0,O-izopropilidenoktandioinės rūgšties susidarymą. Žalias reakcijos tirpalas panaudotas kitoje stadijoje.
d) (2S,4R,5S,7S)-2,7-Bis(9-fluorenilmetiloksikarbonilamino-4,5-dihidroksi-4,5-0,O-izopropilidenoktandikarboksirūgštis
Nevalytas (2S,4R,5S,7S)-2,7-diamino-4,5-dihidroksi-4,50,O-izopropilidenoktandikarboksirūgšties tirpalas (1.19 mmol) atšaldytas iki 0°C ir pridėta 4.0 ml 1 N NaHC03 tirpalo (4.0 mmol). Tada mažomis porcijomis pridėta 1.03 g FmocCl (4.0 mmol) tirpalo 4-iuose ml dioksano ir mišinys maišomas kambario temperatūroje 60 minučių. Tirpalas parūgštintas, pridedant KHSO4. Po ekstrahavimo CHC13, organinis sluoksnis išdžiovintas (MgSO4) ir tirpiklis pašalintas. Likutis išgrynintas impulsine chromatografija, (heksanas/etilo acetatas/acto rūgštis 5/5/1).
Išeiga: 0.566 (66 %).
2H BMR (DMSO, D2O) δ:
1.16 (s,3H), 1.30 (s, 3H), 1.50-2.05 (m,4H), 3.80-4.40 (m,8H), 7.15-8.0 (m,16H).
| BMR | (DMSO, D2O) δ: | |||
| 63, | 29.05, 31.50, 31 | -94, | 47.43, 51.52, 52.19, | , 66.50, |
| 10, | 75.10, 108.36, | 120. | 88, 125.93, 127.98, | 128.60, |
| .48, | 144.39, 144.76, | 156 | ..82, 157.12, 174.11, | 175.11. |
u
PAVYZDYS (S,S)-2,6-Diamino-4-oksaheptandikarboksirūgštis
a) Bis[(2R,5S)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropil-5pirazinil]metilo eteris
Butillitis heksane (1.6 M, 6.25 ml, 10 mmol) pridėtas į (2R)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropilpirazino (1.84 g, 10.0 mmol) tirpalą sausame THF (8 ml), esant -78°C. Mišinys maišomas 15 minučių. Buvo pridėta bis(chlormetil)eterio (0.67 g, 5.0 mmol) tirpalo sausame THF (2 ml) . Reakcijos mišiniui leista įgyti kambario temperatūrą per naktį. Tirpiklis išgarintas, o likutis užpiltas dietilo eteriu. Eterio tirpalas plautas vandeniu, išdžiovintas (MgSOJ ir išgarintas. Produktas išgrynintas chromatografija (silikagelis, heksanas/etilo acetatas 2:1).
Išeiga: 0.65 g (32 %), gelton JH BMR (300 MHz, CDC13) δ:
s aliejus.
| 0.63 | (6H, | d), 1.05 (6H, | d) , |
| dd) , | 3.63 | (6H, s) , 3.64 | (6H, |
| (2H, | t) , 3. | ,98 (6H, m) . | |
| 13C BMR (75 | MHz, CDC13) δ: |
2.25 (2H, m), 3.58 (2H,
s), 3.76 (2H, dd) , 3.83
16.4, 19.1, 30.1, 52.1, 52.2,
165.0.
56.9, 60.3, 72.5, 161.0,
b) (S,S)-2,6-Diamino-4-oksaheptandikarboksirūgšties dimetilo diesteris
Bis[ (2R,5S)-2,5-dihidro-3,6-dimetoksi-2-izopropil-5-pirazinil] metilo eteris (0.65 g, 1.49 mmol) ištirpintas
I ui metanolyje (5 ml), ir pridėta 0.25 M hidrochloro rūgšties (23.8 ml, 5.96 mmol). Mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį. Vandens/metanolio tirpalas ekstrahuotas dietilo eteriu. Tada pH sureguliuotas iki pH 10, pridedant amoniako, ir D-valino metilo esteris ekstrahuotas eteriu. Didžioji vandens dalis išgarinta. Likutis buvo naudojamas kitoje stadijoje be tolesnio gryninimo.
BMR (300 MHz, DMSO-d6) δ:
3.72 (6H, s), 3.85 (4H, m), 4.23 (2H, t).
13C BMR (75 MHz, CDC13) δ:
52.8, 53.2, 68.9, 168.4.
c) (S,S)-2,6-Diarttino~4-oksahepfcandikarboksirūgštis · 2HC1
Dimetilo esteris, aprašytas aukščiau, deflegmuojamas 6M hidrochloro rūgštyje (5 ml) 3 valandas. Tirpalas išgarintas ir išdžiovintas užšaldant.
Išeiga: 420 mg baltos kietos medžiagos.
3K BMR (300 MHz, D2O) δ:
3.87 (2H, dd, J 10.8 Hz, J 3.2 Hz), 3.95 (2H, dd, J
10.8 Hz J 4.6 Hz), 4.13 (2H, dd J 3.2 ir 4.6 Hz).
13C BMR (75 MHz, CDC13) δ:
53.4, 68.40, 170.3.
u
JI !
d) (S,S)-2,6-Bis[(9-fluorenilmetoksikarbonil)amino]-4oksaheptandikarboksirūgštis (5 ml) . Tir9-fluorenilReakcija buvo atliekama azoto atmosferoje. (S,S)-2,6diamino-4-oksaheptandioinės rūgšties dihidrochlorido (200 μς, 0.75 mmol) suspensija heksametildisilazane (10 ml) ir chlorotrimetilsilane (1 ml) šildoma, esant 120°C, tris valandas ir gautas skaidrus tirpalas. Sililinančių reagentų perteklius atskirtas vakuume, o likutis ištirpintas sausame dichlormetane palas atšaldytas iki 0°C ir pridėta chloroformiato (425 mg, 1.65 mmol) tirpalo sausame dichlormetane (2 ml). Mišinys maišomas 2 valandas ir tada išgarintas. Likutis užpiltas THF (5 ml), ir pridėta 1 ml 0.1 M hidrochloro rūgšties. Mišinys maišomas 15 minučių ir tada išgarintas. Likutis užpiltas etilo acetatu. Organinė fazė plauta vandeniu, išdžiovinta (MgSO4) ir išgarinta. Produktas išgrynintas kolonėlės chromatografija (silicio dioksidas, chloroformas/ metanolis/ acto rūgštis 85:10:5).
Išeiga: 310 mg (65 %), balta kieta medžiaga.
XH BMR (300 MHz, DMSO-d6) δ:
3.7 (4H, m), 4.1 (2H, m), 4.25 (6H, m), 7.2-7.4 (10H,
m) , 7.7 (4H, d) , 7.8 (4H, d) .
PAVYZDYS (S,S)-2,7-Diamino-4-azaoktandikarboksirūgštis
a) (S,S)-2,7-Bis(tret-butiloksikarbonilamino)-4-azaoktandikarboks irūgš ti s (S)-4-Amino-2-tret-butiloksikarbonilamino sviesto rūgšties (1.03 g, 4.70 mmol) tirpalas acetonitrile (50 ml) .11 pridėtas į (S)-boc-serino-p-laktono (0.8 g, 4.27 mmol) tirpalą acetonitrile (50 ml) ir degazuotame HZO. Reakcijos terpės pH palaikomas apie 5,5 lašinant 1 M NaHCO3 ir maišant. Mišinys buvo maišomas 5 dienas kambario temperatūroje. pH buvo reguliuojamas, pridedant NaHCO3, ir reakcija valdoma PSC. Tirpikliai nudistiliuoti, likutis sutrintas į miltelius su chloroformu (5 ml), į kurį pridėta acto rūgšties, kad būtų gautas pH 5. Chloroformo tirpalas išgarintas, o produktas atskirtas chromatografija ant silikagelio ((CHCI3: MeOH 2:1).
Išeiga: 0.92 g (53 %) baltos kietos medžiagos.
BMR (DMSO-d6, 300 MHz): 6
7.33 (d, J 6.3 Hz; 1H) , 6.27 (d, J 5.7 Hz; 1 H), 4.42 (d, J 7.5 Hz; 1 K), 4.15 (dd, Ji 10.5 Hz, J2 3.9 Hz; 1 H), 4.01 (d, J 6.3 Hz; 1H), 3.87 (pi s; 1 H), 2.78 (pi s;l H), 1.78-2.21 (m; 4H), 1.36 ir 1.35 (2 s; 18 H).
13C NMR {DMSO-d6, 75.43 MHz): δ
174.95, 155.74, 155.25, 79.58, 78.22, 78.04, 62.97,
56.42, 56.00, 51.17, 48.99, 38.14, 28.62, 28.46.
C17H31N3Os (405.45).
b) (S,S)-2,7-Bis(tret-butiloksikarbonilamino)-4-(benziloksikarbonil)-4-azaoktandikarboksirūgštis
M NaHCO3 (5.9 ml, 5.92 mmol) ir benziloksikarbonilo chloridas (0.5 g, 0.42 ml, 2.96 mmol) pridėtas į (S,S)2,7-bis(tret-butiloksikarbcnilamino)-4-azaoktandikarboksirūgšties (0.6 g, 1.48 mmol) tirpalą dioksane (40 ml) ir H2O (30 ml), esant 0°C. Mišinys buvo maišomas, esant 0°C, tris valandas kambario temperatūroje - 6 valandas, išgarintas, likutis sutrintas į miltelius su chlon i .iu roformu (5 ml) ir acto rūgštimi iki pH 5. Chloroformo tirpalas išgarintas, o produktas atskirtas chromatografija ant silikagelio (CHCl3:MeOH 4:1).
Išeiga: 0.39 g (50 %) baltos kietos medžiagos.
XH BMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ
| -7.37 | (m, 5H), 7.18 (d | , J 7.8 Hz; 1 | H) , | 6.23 (d, J |
| Hz; 1 | H), 4.98 (s, 2H) | , 4.43 (dd, J | 10. | 8 Hz, J 3.3 |
| 1 H), | 4.09 (dd, J 10.2 | Hz, J 6.3 Hz; | 1H) | , 3.88-4.02 |
| 2H), | 3.01 (d, J 5.7 | Hz; 2H) , 1.7 | 4-1 | .88 (m,1H), |
| -1.72 | (m, 1H), 1.35 ir | 1.33 (2d, 18H) |
13C BMR (DMSO-d6, 75.43 MHz): δ
177.42, 177.38, 161.20, 160.63, 160.16, 142.20, 133.48, 132.91, 132.78, 83.55, 83.14, 70.76, 70.40, 59.39,
56.44, 53.61, 42.30, 36.01, 33.28.
C25H37N3O10 (539.58) .
c) (S,S)-2,7-Diamino-4-benziloksikarbonil-4-azaoktandikarboksirūgštis (S,S)-2,7-Bis(tret-butiloksikarbonilo)-4-benzoloksikarbonil-4-azaoktandikarboksirūgštis (0.29 g, 0.37 mmol) ištirpinta THF (10 ml), tirpalas maišomas kambario temperatūroje 2 valandas, ir TFA buvo nudistiliuotas, gautas pavadinimo junginys, kuris naudojamas kitoje stadijoje be tolesnio gryninimo.
d) (S,S)-Benziloksikarbonil-2,7-bis(9-fluorenil-metoksi-karbonil)-4-azaoktandikarboksirūgštis (S, S)-2,7-Diamino-4-benziloksikarbonil-4-azaoktandikar~ boksirūgštis (0.2 g, 0.37 mmol) ištirpinta dioksane (10 ml) ir H2O (10 ml), pridėta 9-fluorenilmetilchloroformiato (0.29 g,
1.11 mmol) ir 1M NaHCO3 (2.96 ml, 2.96 mmol), maišant 0°C temperatūroje, ir maišymas tęsiamas 10 valandų kambario temperatūroje, po to tirpikliai nugarinti. Likusi kieta medžiaga buvo sutrinta į miltelius su chloroformu (5 ml), o pH buvo palaikomas apie 5, pridedant acto rūgšties. Tirpalas paskui išgarintas ir produktas atskirtas chromatografija ant silikagelio (AcOEt:heksanas:AcOH 10:10:1).
Išeiga: 0.1 g (35 %) kaip balta medžiaga.
2H BMR (DMSO-dg, 300 MHz): δ
7.21-7.44, 7.61-7.91 (m, 22H), 6.88 (d, J 6.3 Hz; 1H),
4.96 (s, 2H), 4.56'(dd, J 10.8 Hz, J 3.3 Hz; 1H), 3.944.28 (m, 8H), 3.08 (d, J 5.7 Hz; 2H) , 1.86-1.98 (m,
1H)., 1.69-1.82 (m; 1H) .
| 13c BMR | (DMSO-d6, | 75.43 | MHz):δ | |||
| 172.98, | 172.49, | 156.49, | 156.04, | 144.32, | 144.24, | 144.17, |
| 142.97, | 141.07, | 139.81, | 137.82, | 137.55, | 129.30, | 128.66, |
| 128.06, | 127.99, | 127.66, | 127.46, | 125.68, | 121.75, | 120.39, |
| 110.06, | 66.22, | 65.60, | 55.26, | 52.20, | 47.08, | 47.04, |
36.63, 37.74.
C45H41N3O10 (783.83).
II
:..11
Kietos fazės peptidų sintezė
Kietos fazės peptido sintezė atliekama iš esmės pagal fluorenilmetoksi karbonilo (Fmoc)-poliamido sintezės principus (Atherton and Sheppard, Solid phase peptide synthesis: a practical approach, Oxford: IRL Press at Oxford University Press, 1989). Buvo panaudotos prekyboje turimos sintetinės dervos; periodine sinteze arba rankomis, arba naudojant pusiau automatinį prietaisą (Labortec Peptide Synthesizer 5P 650) jos buvo polistireno su rūgšties labilaus (Wang, J. Amer. Chem. Soc., 95, 1328-1333, 1973) arba rūgšties hiperlabilaus ryšio agentais (Merger et ai., Tetrahedron Letters 29, 4005-4008, 1988) . Alternatyviai, peptidai sukonstruoti visiškai automatiškai ant takių dervų (Atherton et ai., J. Chem. Soc.. Chem. Commun., 1151-2, 1981), panaudojant LKB Biolynx 4170 automatinį peptidų sintezatorių. Buvo įsigytos dervos, kurios jau turėjo apsaugotą reikalingą C-galinę Fmoc-aminorūgšties liekaną. Grandinės pailginimas pasiektas įvairiai su šoninės grandinės apsaugotais Fmoc-aminorūgšties pentafluorenilo esteriais (Kisfaludy and Schoen, Synthesis. 325-327,
1983), panaudojant aktyvaciją su dicikloheksil’karbodiimido (DDC)/1-hidroksibenzotriazolu (HOBt) (Koenig and Geiger, Chem Ber., 103, 2034-2040, 1970) arba panaudojant prijungimo reagentą PyBOP (Coste et <1,, Tetrahedron Lett. 31, 205-208, 1990). Lizino šoninės grandinės amino grupė buvo apsaugota t-butiloksikarbonilu, glutamino arba asparagino rūgšties šoninės grandinės karboksilo grupės buvo apsaugotos kaip t-butilo esteriai.
Sintetinės dervos, nešančios reikalingą N-deblokuotą Cgalinę liekaną, buvo acilintos 1/2 ekvivalento, Fmocapsaugota diaminokarboksilo rūgštimi, pridedant DCC ir
KGBt, Reakciją užbaigus, reagentų perteklius buvo nuplautas. Peptidilinė derva paveikta dar kartą DCC/HOBt, if f . IU.· kad būtų prijungtos karboksilo grupės, kurios galėjo likti laisvos. Po šios stadijos derva nuplauta metanoliu, kad būtų dezaktyvuotos bet kurios karboksilo grupės, negalinčios susijungti su derva sujungtomis amino grupėmis. Galiausiai, amino grupių perteklius acetilinamas. Peptido sintezė paskui buvo tęsiama kaip įprasta.
Po visiško reikalingų sekų ant kietos fazės sudarymo, 10 peptidai skaldomi iš sintezės dervų su kartu einančiu šoninės grandinės deblokavimu, panaudojant trifluoracto rūgštį, į kurią buvo pridėti tinkami valantys chemikalai (King et ai., Int. J._Peptide Protein Res., 35,
255-268, 1990). Po išgarinimo, peptidai atskirti, nusodinant dietilo eteriu ir išdžiovinant. Gryninimas atliktas preparatyvine atvirkščios fazės skystine chromatografija
Lentelė
Bendros struktūros peptidų (Pyr-Glu-Asp)2-tiltelio liekana- (Lys-OH)2 analizės duomenys
| Tiltelio liekanos tipas a | AVSC metodas b (Užlaikymo laikas, min.) | Grynumas c (%) | FAB-MS [ M+H] + |
| 1 | 2 | 3 | 4 |
| C-6 | 10-40-20(16) | 95 | 1199.5 |
| C-5 | 0-30-20(17) | 95 | 1185 |
| C-l | |||
| C-0(mezo) | 0-20-20(19) | 98 | 1115.4 |
| C-0(1 izomeras) | 0-20-20(19) | 98 | 1115.4 |
| C-0(2 izomeras) | 0-20-20 (19) | 97 | 1115.4 |
| C-4-trans-enas | 0-30-20 (12) | 98 | 1169.4 |
JI H
I Lentelė (tęsinys)
| 1 | 2 | 3 | 4 |
| C-4-cis-enas | 10-40-20(13) | 100 | 1170.6 |
| C-4-inas | 0-30-20(10) | 98 | 1167.5 |
| C-4-vic-glikolis | 0-30-20 (14) | 98 | 1203.2 |
| (1 izomeras) | |||
| C-4-vic-glikolis | 0-30-20(13) | 98 | 1203.4 |
(2 izomeras) C-4-vic-glikolis (3 izomeras) C-3-Aminas
C-3-Eteris aNurodo pavyzdžius bMetodai yra išreikšti kaip mobilios fazės B A 5 gradientai per laiką, pvz., 10-40-20 nurodo gradientą, prasidedanti ties 10 ir besibaigiantį ties 40 % B per .20 minučių. Mobilios fazės: A) 0.1 % TFA B) 0.1 % TFA % MeCN. Kolonėlė: Vydac TP54, O.x25 cm, 5 μιη dalelės, 100A pora; srautas 1 ml/min.
cNurodo HPLC pikų integraciją (λ=215 nm)
II
I
1UJ·
Lentelė
Bendros struktūros peptidų (Pyr-Glu-Asp)2-tiltelio liekana-(Lys-OH)2 aminorūgšties analizės duomenys
| Tiltelio liekanos tipas | Asp rasta (teor.) | Glu rasta (teor.) | Lys rasta (teor.) |
| C-6 | 1.0(1) | 2.15(2) | 0.93 (1) |
| C-5 | 1.0(1) | 2.18(2) | 0.94 (i) |
| C-l | |||
| C-0 (mezo) | 1.0(1) | 2.15(2) | 0.93 (1) |
| C-0 (1 izomeras) | 1.0(1) | 2.18 (2) | 0.93 (1) |
| C-0 (2 izomeras) | |||
| C-4-trans-enas | 1.0(1) | 2.15(2) | 0.93 (1) |
| C-4-cis-enas | 1.0(1) | 2.17 (2) | 0.93 (1) |
| C-4-inas | 1.0(1) | 2.17(2) | 0.95 (1) |
| C-4-vic-glikolis (1 izomeras) C-4-vic-gi ikolis (2 izomeras) C-4-vic-glikolis (3 izomeras) C-3-Aminas C-3-Eteris | 1.0(1) | 2.15(2) | 0.93 (1) |
aNurodo pavyzdžius
PAVYZDYS
Peptido sintezė: (pGlu-Glu-Asp)2-(E)-DHs(Lys)2
Peptidas sintezuotas, panaudojant Labortec peptidų sintezatorių. Fmoc-Lys(Boc)-Sasrino polimeras (1.0 g, 0.6 mmol; BAchem A.G.; pakeitimas 0.6 mmol/g) sudėtas į 100 ml reakcijos kolbą. Fmoc-DHs (150 mg; 0.23 mmol), DCC (290 mg, 1.4 mmol) ir HOBt (211 mg, 1.4 mmol) DMF'e (20 ml) pridėta į polimerą, ir reakcijai leista vykti 9 valandas. Papildomai buvo pridėta DCC (1.4 mmol) ir HOBt (1.4 mmol), ir reakcijai leista vykti dar 2 valandas. Tada polimeras nuplautas CH2C12, 30 % MeOH/CH2Cl2 ir DMF. Laisvos amino grupės polimere acetilintos, panaudojant 10 % Ac2O / DMF (3x per 1 valandą; neigiamas Kaiser'io testas).
Likusi sintezė buvo atliekama pagal standartinę metodiką panaudojant Fmoc-Asp (OtBu)-Opfp (1.35 g, 2.3 mmol), Fmoc-Glu (OtBu)-Opfp (1.35 g, 2.3 mmol) ir pGlupentachlorfenilo esterį (0.86 g, 2.3 mmol). HOBt (35 mg,
2.3 mmol) pridėta kiekvienoje prijungimo stadijoje, kuriai leista vykti 1 valandą. Prijungimo pabaiga nustatyta neigiamu Kaiser'io testu. Po sujungimo su Fmocamino rūgštimi, polimeras nuplautas DMF'u, apsauginė grupė atskelta 20 % piperidino tirpalu DMF'e ir polimeras vėl nuplautas DMF'u. Po galutinio prijungimo, polimeras nuplautas MeOH/CH2Cl2 ir CH2C12. Išdžiovinto polimero-peptido svoris buvo 1 g. Peptidas atskeltas nuo polimero TFA: CH2C12 1:1, tirpalas išdžiovintas vandenyje, filtruotas užšaldant; išeiga mg šio produkto nukreipta prepaužšaldant, likutis ištirpintas (0.45 μ), o filtratas išdžiovintas
430 mg. Tolesniam gryninimui 100 ištirpinta vandenyje (0.5 ml) ir ratyvinei AVSC, panaudojant 2.1x15 cm Beckman Ultrasphere ODS kolonėlę ir tirpalus A 0.1 % TFA H2O, B 0.1 %
TFA MeCN:H2O 40:60. Gradientas buvo 0-15 % B, 120 miII
I
ΙΙίίΗ nučių, srauto greitis 5 ml/min. 19 mg gryno peptido (>95 %) buvo gauta po išdžiovinimo šaldant. FAB-MS:
[M+H] 1169.3.
HOBt = Hidroksibenzotriazolas
Pfp = Pentafluorfenilas
Fmoc = 9-Fluorenilmetoksikarbonilas
Boc = t-Butoksikarbonilas
DCC = Dicikloheksilkarbodiimidas (E)-DHs = (S,S)-2,7-Diamino-(E)-okt-4-eno-l,8-dikarboksilo rūgštis
I JUK
Claims (8)
- IŠRADIMO APIBRĖŽTIS1. Peptidinis junginys, sudarytas iš dviejų vienos grandinės hemoreguliacinių peptidų, prijungtų kartu prie negalinių aminorūgščių C atomų ekvivalentiškose vietose kiekviename minėtame peptide per anglis- anglis jungtį arba per dvivalentę jungiančią tilteliu grupę -A-, kur A yra C1_6 anglies grandinė, kuri yrai) a) mono- arba poli-pakeista grupe -RA, -ORA, -SRA, -NRaRa arba -COORA, arba halogeno atomu, tokiu kaip fluoras, chloras, bromas arba jodas (kur kieviena RA nepriklausomai reiškia vandenilio atomą arba C1_6-alkilo, -alkanoilo arba -alkoksialkilo grupę, kuri gali būti mono- arba polihidroksilinta) ir/arbab) į kurią įterpta viena arba daugiau anglis-anglis dvigubų arba trigubų jungčių ir/arbac) į kurią įterpta viena arba daugiau grupių -Z-, kur kiekviena -Z- yra nepriklausomai -0-, -CO-,J>C = NR arba -NR - (kur kiekvienas R yra nepriklausomai vandenilio atomas arba Cį-g-alkilo arba cl_6-arilo grupė) arba kur vienas arba daugiau pakaitalų, arba neprisotintų anglisanglis jungčių yra grupėje -A-, -Z- taip pat gali būti -Sarba ii) (CH2)y, kur y yra 1, 5 arba 6,III prie kiekvieno iš minėtų Ca atomų nėra ninės grandinės.
- 2. Peptidinis junginys pagal 1 punktą, b 5 r i a n t i s tuo, kad minėta jungianti-A- yra parenkama iš-ch2-ch2ch2ck2ch2ch210 -CH2CH2CH2CH2CH2CK2-HC=CH-HC=C=CH~-CH2-CH=CH-CH2-ch2-c=c-ch215 Clb-CH-CH- ''H-CH-CH·?”-CH-CH2-CsC-CH2-CH2-ch2-c=c-c=c-ch2ch3 ch3 ! ί20 -CH-CH=CH-CH2-CHOH OHI I-CH-CH=CH-CH25-CH2-O-CH2-CH2-NH-CH2CH2-ch2ch2-co-ch2ch2-CH-CK=CH-CH30 ! | och3 och3 natyvios a-šoesiskitiiteliu grupė-ch2-ch=ch-ch2-s-ch21Š1J-CH2-CsC-CH2- NH-CH2CH2- arba-CH2-CH=CH-CH (COOH) CH2-.
- 3. Peptidinis junginys pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėta jungianti tilteliu grupė -A- yra parenkama iš (E)-buten-2-enileno, (Z)-buten-2-enileno, buten-2-inileno, metileno, n-pentileno ir heksileno.
- 4. Peptidiniai junginiai pagal bet kurį 1-3 punktą, b esiskiriantys tuo, kad minėti vienos grandinės homoreguliaciniai peptidai yra aprašomi I formuleRa - Rb - Rc - Rd -(Re)n -Rf (I), kurioje Ra reiškia li’Nii - CH--COI <Cii iR NH arbaClf--CO iCI1..OHR reiškia--NH- CH co-- nu- CH-- COCCH > CH,OHI YCOR arbaIIIBBR reiškia- NH CH--co , tt'CH _ >I VCOR'R reiškia . NH-----Cil--CO ·ICH SP?' arbaR reiškiaR reiškia • NilCH —— CORIC1I >I sNH_ . NH -— CH---CO ~ICH,OH-----Ni i CH -— COICil .— Nll ------- CH ---co —Alba ch2ohOj . nh -— ch — co · R9 . NH - CH- CORI -3NH ai'ba . NH--CIU- CORNH NH2 1 (kuriose n ir m nepriklausomai reiškia 0 arba 1II jtm p, q, ir r nepriklausomai reiškia 1 arba 2; s reiškia 3 arba 4;R1 ir R2 abu yra vandenilio atomai arba kartu reiškia 5 okso grupę;R3 ir R4 abu yra vandenilio atomai arba kartu reiškia anglis-anglis jungtį;10 R5 yra vandenilis arba acilo grupė;kiekvienas R6 ir R7 nepriklausomai reiškia hidroksilo grupę arba amino grupę , bet geriau -hidroksilo grupė;15 R8 reiškia vandenilį; C2_6-alkilo grupę; C7_20-aralkilo grupę, kuri gali turėti vieną arba daugiau hidroksilo, amino arba metoksi pakaitalų; arba metaboliškai labilią S-apsauginę grupę;20 R9 reiškia vandenilį arba metilo grupę; irR10 reiškia hidroksilo arba amino grupę, aminorūgšties glutamino liekaną arba peptidą, turintį N-galo glutamino fragmentą.
- 5. Peptidiniai junginiai pagal 4 punktą, besiskiriantys tuo, kad jie aprašomi II formuleRa - Rb - Rc - NH - CH - CO- (Re)n - Rf30 |A (II),Ra - Rb - Rc - NH - CH - CO - (Re) n - Rf35 kurioje -A- yra tokia, kaip apibrėžta 1 punkte, o Ra, Rb, Rc, Re, Rf ir n yra tokie, kaip apibrėžta 4 punkte.it
- 6. Farmacinė kompozicija, kurią sudaro peptidinis junginys kartu su farmaciniu nešikliu arba užpildu, b esiskirianti tuo, kad peptidinis junginys yra junginys pagal bet kurį iš 1-5 punktų.
- 7. Peptidinis junginys pagal bet kuri iš 1-5 punktų, skirtas panaudoti stimuliuojant mielopoezę arba kaulų čiulpų regeneraciją.
- 10 8. Peptidinio junginio pagal bet kurį iš 1-5 punktų gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kada) bis-laktimo eterį metalina ir po to alkilina, kad sudarytų bis-laktimo dipeptidinį eterį;b) bis-laktimo dipeptidinį eterį iš a) stadijos hidrolizuoja, kad sudarytų tiltelinę α,α'-diaminorugštį;20 c) likusias aminorūgštis Įveda i peptidines grandines; ird) bet kurią apsaugotą grupę deblokuoja.25 9. Tiltelinės a,a'-diaminorūgštys pagal formulęNH_ NH _ i ~ 1 ~HG-A -GH1 I ,λ HOOG GOGU kurioje -A- yra tokia, kaip apibrėžta 1 punkte.35 10. Bis- laktimo dipeptidiniai eteriai pagal formulęII .IIJHI
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB929211674A GB9211674D0 (en) | 1992-06-02 | 1992-06-02 | Peptide compounds |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| LTIP607A LTIP607A (en) | 1995-01-31 |
| LT3614B true LT3614B (en) | 1995-12-27 |
Family
ID=10716407
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| LTIP607A LT3614B (en) | 1992-06-02 | 1993-06-02 | Peptide compounds, method for the preparation and use thereof |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| GB (1) | GB9211674D0 (lt) |
| LT (1) | LT3614B (lt) |
| ZA (1) | ZA933868B (lt) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0112656A2 (en) | 1982-11-26 | 1984-07-04 | Nycomed As | Peptide compounds |
| WO1988003535A1 (en) | 1986-11-06 | 1988-05-19 | Nycomed As | Peptide compounds |
| WO1990002753A1 (en) | 1988-09-16 | 1990-03-22 | Hafslund Nycomed Bioreg As | Peptide compounds |
| EP0408371A1 (en) | 1989-07-14 | 1991-01-16 | Smithkline Beecham Corporation | Hemoregulatory peptides |
-
1992
- 1992-06-02 GB GB929211674A patent/GB9211674D0/en active Pending
-
1993
- 1993-06-02 ZA ZA933868A patent/ZA933868B/xx unknown
- 1993-06-02 LT LTIP607A patent/LT3614B/lt not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0112656A2 (en) | 1982-11-26 | 1984-07-04 | Nycomed As | Peptide compounds |
| WO1988003535A1 (en) | 1986-11-06 | 1988-05-19 | Nycomed As | Peptide compounds |
| WO1990002753A1 (en) | 1988-09-16 | 1990-03-22 | Hafslund Nycomed Bioreg As | Peptide compounds |
| EP0408371A1 (en) | 1989-07-14 | 1991-01-16 | Smithkline Beecham Corporation | Hemoregulatory peptides |
Non-Patent Citations (11)
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA933868B (en) | 1994-06-14 |
| GB9211674D0 (en) | 1992-07-15 |
| LTIP607A (en) | 1995-01-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| GB2208294A (en) | Cyclosporins | |
| IE56362B1 (en) | Peptide compounds | |
| FI92209B (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidiyhdisteiden valmistamiseksi | |
| JPH01151598A (ja) | ペプタイド | |
| US4438029A (en) | Synthetic peptides | |
| JPS61143399A (ja) | 塩基性ｖ↓１‐バソプレシン拮抗剤 | |
| EP0673388B1 (en) | Double chain peptide compounds having hemoregulatory activity | |
| LT3614B (en) | Peptide compounds, method for the preparation and use thereof | |
| LT3613B (en) | Peptide compounds, method for the preparation and use thereof | |
| CN100381461C (zh) | 具有抗整合素活性的氟-烷基-环肽衍生物 | |
| US5731289A (en) | Double-chain hemoregulatory peptides | |
| LT3615B (en) | Peptide compounds, method for the preparation and use thereof | |
| EP0722459B1 (en) | Hemoregulatory penta- or hexapeptides | |
| JP3190758B2 (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH06298797A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| GB1568195A (en) | Synthetc peptides | |
| JPH05320191A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| JPH0717999A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPS63303999A (ja) | バソプレシン拮抗剤 | |
| JPH0597890A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| JPH06321987A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH06321985A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH04217693A (ja) | ペプチド含有ポリエチレングリコール誘導体とその用途 | |
| JPH0641193A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| JPH0770183A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM9A | Lapsed patents |
Effective date: 19960602 |