LT3446B

LT3446B - Fucolsylated glycosides as inhibitor of bacterial adherence

Info

Publication number: LT3446B
Application number: LTIP1978A
Authority: LT
Inventors: Karin Eklind; Hans Loenn; Anna-Karin Tiden
Original assignee: Astra Ab
Priority date: 1993-06-25
Filing date: 1994-06-27
Publication date: 1995-10-25
Also published as: IL110074A0; CA2164961A1; IS4181A; AU7089194A; DK76193D0; JPH08512026A; LTIP1978A; WO1995000527A1; EP0706528A1

Description

Šis išradimas susijęs su L-fukozę turinčių glikozidinių darinių panaudojimu, ruošiant farmacines kompozicijas; skirtas gydyti bei atlikti profilaktiką ligų, sukeltų skrandžio ir žarnyno Helicobacter pylori infekcijomis, panaudojant šiuos darinius, o taip pat su naujais glikozidiniais dariniais.

Helicobater pylori tai mikroaerofilinis spiralinės formos organizmas (pagal kilmę priskiriamas Campylobacter genčiai), kuris randamas skrandyje ir, pasirodo, paprastai gyvena išimtinai žmogaus skrandžio gleivinėje. Įvertinta, kad ši bakterija užkrėtusi skrandžio gleivinę daugiau kaip 60 % suaugusių žmonių, kai jiems sukanka 60 metų. Be to, numanoma, kad H. pylori dalyvauja sukeliant daugeli patologinių negalavimų, tarp jų ūmini (B tipo) gastritą, skrandžio ir dvylikapirštės žarnos opą, atrofini, gastritą ir skrandžio adenokarcinomą.

Bakterijų audinių tropizmas dalinai gali būti kontroliuojamas bakterijų štamo sugebėjimu prisitaikyti prie jų gyvenimo vietos lokalios cheminės aplinkos. Be to, kad jų nepašalintų iš naujos gyvenimo vietos, pvz., dėl peristaltinių virškinimo trakto judesių, būtina sąlyga Įsikurti yra sukibimas. Žinduoliuose bakterijos prilimpa prie proteinų arba glikojunginių (glikosfingolipidų, glikoproteidų) ant bei aplink epitelinių ląstelių paviršius (gleivės), literatūroje aprašyta keletas specifinių bakterinių baltymų bei angliavandenių sukibimo sąveikų.

H. pylori atžvilgiu, tyrimai modelinėse sistemose, kaip antai pelių antinksčių Y-l ląstelėse (žiūrėk D. G. Evans, D. J., Jr. Evans ir D. Y. Graham, (1989) Infect. Immun. 57, 2272-2278) pateikė minti, kad susietos su paviršiumi lanksčios pluoštinės struktūros, apjuosiančios šią bakteriją, tarnauja kaip rišikliai arba kolonizacijos faktorių antigenai, kad tarpininkautų prisirišant H. pylori prie ląstelės glikoproteidinio receptoriaus, turinčio sialo rūgšties.

Išradimas skirtas mono-, di-, tri- arba oiigosacharidų glikozidinių darinių, turinčių bent vieną galinę grupę Y, kaip apibrėžta žemiau, išvestų iš L-fukozės, kai minėtieji dariniai yra junginiai, aprašomi bendromis formulėmis Ia, Ib, Ic, Id, Ie ir If:

Y-Z^R A-Z₂-R a-z₃-b-z₄-r

Ia Ib Ic

A-Z₅-B-Z₆-C-Z₇-R A-Z₈-B-Z₉-C-Z₁₀-D-Z_n-R

Id Ie

A — Zį₂~B~Zį -j ^- C ^- Z14 - D ^- Z, E — Zį8—R

If kuriose

Ζ_η Z₂, Z₃, Z₄, Z₅, Z₆, Z₇, Z₈, Zg, Z₁₀, Z_n, Z₁₂, Z_l3, Z₁₄, Z,₅ ir Z₁₆ nepriklausomai yra O, S, CH₂ arba NR₂₅, kur R₂₅yra vandenilis, C, ₂₄-alkilas, C₂.₂₄-alkenilas, C_r24alki1karbonilas arba benzoilas, kuris pasirink-tinai gali turėti hidroksilo, aminogrupės, C! ₄-alkilo, C, ₄alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-Cj ₄-alkilo pakaitą;

kuriose

Y, A, B, C, D ir E formulėse vingiuota linija pažymėtas ryšys, kuris yra arba a- arba β- konfigūracijoje;

R_x, R₂ ir Rj kiekvienas nepriklausomai yra H, halogeno, azido, guanidinilo, šakota ar nešakota C₁.₂₄-alkilo, C₂.₂₄-alkenilo, C₂_₂₄-alkinilo, C₃_g-cikloalkilo, C₃__s-cikloalkil-C₁_₂₄-alkilo arba C₁_₁₂-alkoksi-C₁_₁₂-alkilo grupė, kuri pasirinktinai gali turėti hidroksilo, amino, halogeno ar oksogrupės pakaitą; arilas arba arilC, ^-alkilas, kuris pasirinktinai gali turėti arilo grupėje hidroksilo, amino, C₁.₄-alkilo, C, _₄-alkoksilognitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-C₁.₄-alkilo pakaita; tri (Cj_₄-alkil) sililetilas; oksogrupė;=SR₄R₅ grupė, kur

R₄ ir R₅ nepriklausomai yra H arba C_x ,₄-alkilas; arba XR,_;, grupė, kur

X yra O, S, NR₂₀ arba=N- ir

R₁₀ yra H, šakota ar nešakota C₁_₂₄-alkilo, C₂.₂₄-alkenilo, C₂_₂₄-alkinilo, C₃_₈-cikloalkilo, C₃_₈-cikloalkil-C₁_₂₄-alkilo arba C_l_₁₂-alkoksi-C₁_₁₂-alkilo grupė, kuri pasirinktinai gali turėti hidroksilo, amino, halogeno ar oksogrupės pakaitą; arilas, aril-C^-alkilas arba heterociklil-C₁.₄-alkilas, kuris pasirinktinai gali turėti arilo arba heterociklilo grupėje hidroksilo, amino, C₁_₄-alkilo, C₁.₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-Cj^-alkilo pakaitą; tri (Cj^-alkil) sililetilas; tri (C₁.₄-alkil) siūlas; tri (C^₄-alkil)sililetoksimetilas; natūraliai egzistuojančių aminorūgščių acilo liekanos; C₁_₂₄-alkilkarbonilas; C₂_₂₄-alkenilkarbonilas; C₃_₈-cikloalkil-C₁_₂₄-alkilkarbonilas; arilkarbonilas; arba terpenilas; ir

R₂₀ yra H, C₁.₂₄-alkilas, C₂_₂₄-alkenilas, C₁_₂₄-alkilkarbonilas arba pasirinktinai benzolo žiede turintis hidroksilo, amino, C₁_₄-alkilo, C₁_₄-alkoksilo, nitrogrupės, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-C₁_₄-al kilo pakaitą benzoilas ar ftaloilas;

RlA' ^R2Ar ^R3A< R4az R-1B' ^R2B' ^R3B' RflBr RlC' ^R2C ' ^R3C' ^R4C' ^ĮD' R2D, R_3D, R’.e, ^R2e/ ^R3e, ^R4e kiekvienas nepriklausomai yra kaip apibrėžti aukščiau R_lz R₂ ir R₃ arba yra grupė, turinti VII formulę

YZi VII kur Y ir Z· yra apibrėžti aukščiau;

su	sąlyga,	kad	vienas iš R_1B,	^R2B,	^R3B	arba	^R4B	yra	Z₃1
	Z₈ arba	z₁₂,	kad vienas iš	^R1C'	^R2Cf	^R3C	arba	^R4C	yra
z₆<	Z, arba	Zl3f	kad vienas iš	Rid,	^R2D'	^R3D	arba	^R4D	yra
Zio	arba Z₁₄,	kad	vienas iš R_1E,	^R2Ef	^R3E	arba	^R4E	yra	^15'

kad bent vienas ir ne daugiau kaip penki iš R_1A, R_2A, ^R3A» ^R4Ar R-ib, ^R2B» ^R3B' R4b, R1c, R2cz ^R3c< ^R4Cr ^R1D' ^R2D' ^R3D' R4D, Rie/ ^R2e, ^R3e +^{r R}4e yra grupė, turinti VII formulę,

ir kad A grupės R_1A,	^R2A' 1	^3A	ir R_4aCH₂	pakaitų	konf i-
gūracijos, B grupės R	1B/ ^R2h/	^R3B	ir R_4BCH₂	pakaitų	konfi-
gūracijos, C grupės R	1C' ^R2C!	^R3C	ir R_4cCH₂	pakaitų	konfi-
gūracijos, D grupės	R_1Dz	^R2D'	R_3d ir	R_4DCH₂	pakaitų

konfigūracijos, E grupės R_1E, R_2E, R_3E ir R_4ECH₂ pakaitų konfigūracijos nepriklausomai yra D-gliukozės, L-gliukozės, D-galaktozės, L-galaktozės, D-manozės, L-manozės, D-tolozės, L-tolozės, D-alozės, L-alozės, D-altrozės, L-altrozės, D-gulozės, L-gulozės, D-idozės ir L-idozės konfigūracijos;

R yra vandenilis, šakota ar nešakota Cj .₂₄-alkilo, C₂_₂₄alkenilo, C₂.₂₄-alkinilo, C₃.₈-cikloalkilo, C₃_₈-cikloalkil-C₁.₂₄-alkilo, Cj.^-alkoksiCj.^-alkilo, C₁,₂₄-alkilkarbonilo, C₂.₂₄-alkenilkarbonilo arba C₃.₈-cikloalkil-C₁_₂₄alkilkarbonilo grupė, kuri pasirinktinai gali turėti hidroksilo, amino, halogeno ar oksogrupės pakaitą; arilo arba aril-Cj .₄-alkilo, arilkarbonilo ar aril-Ci^alki1karbonilo grupė, kuri pasirinktinai arilo grupėje gali turėti hidroksilo, amino, C₁.₄-alkilo, C^-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogenCj^-alkilo pakaitą; terpenilas; tri (C,_₄-alkil) sililetilas; heterociklilas; heterociklil-C^-alkilas; arba heterociklil-C, _₄-alkilkarbonilas;

grupė, turinti formulę II arba Ha

R₃₀-(CH₂)_q-S (O)_m-CH₂CH₂- II [ R_3o- (CH₂)_q-S (O)_m-CH₂] 2CH-CH₂- Ha kur R₃₀ yra H, karboksilas, C_w-alkoksikarbonilas, hidroksilas, aminogrupė arba MA matrica, q yra sveikas skaičius nuo 1 iki 24 ir m yra 0 arba 2; arba grupė, turinti formulę III arba Illa

Phe-S (O)_m-CH₂CH₂[ Phe-S (0) _m-CH₂] ₂CH-CH₂III

Illa kur m apibrėžtas aukščiau, o kiekvienas Phe yra fenilas, kuris pasirinktinai gali turėti hidroksilo, amino, C^-alkilo, C₁_₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-C₁.₄-alkilo pakaitą; arba fenilCi^-alkilas, kuris pasirinktinai fenilo grupėje gali turėti vieną hidroksilo, amino, C₁-₄-alkilo C₁.₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogenC₁_₄-alkilo pakaitą;

grupė, turinti formulę IV

R₄₀CH₂CH (CH₂R₅₀)CH₂IV kur R₄₀ ir R₅₀ nepriklausomai yra halogenas; arba

Q-(tarpiklis)_r-grupė, kur r sveikas skaičius 0 arba 1, o Q yra MA matrica arba -COO-MA grupė;

panaudojimu terapijoje, ypač žmonių gydymui ir profilaktikai tais atvejais, kai skrandžio gleivinė užsikrėtusi Helicobacter pylori. Iš kitos pusės, išradimas susijęs su minėtųjų junginių panaudojimu gaminti farmaciškai priimtinas kompozicijas, skirtas gydyti aukščiau paminėtas ligas.

Išradimo kontekste terminai C₁_₄-alkilas , C₁__g-alkilas , C₁_₂₄-alkilas kaip atskira grupė ar grupės dalis reiškia alkilo grupes su 1-4, 1-8 arba 1-24 anglies atomais, kurie gali sudaryti tiesią ar šakotą grandinę, kaip antai metilą, etilą, propilą, izopropilą, butilą, izobutilą, tret.butilą, dimetilbutilą, pentilą, heksilą, heptilą, oktilą, nonilą, decilą, undecilą, dodecilą, heksadecilą, oktadecilą, ir t.t.

Pažymėti anglies grandinę čia vartojamas apibrėžimas C₁_₂₄-alkilas , bet taip pat anglies grandinėje gali būti mažesnis anglies atomų skaičius, kaip C_l.₄-alkilas , Cį.g-alkilas . Terminas C₁_₄-alkilas čia vartojamas kai apibrėžiami pakaitai.

Terminas C₃_g-cikloalkilas kaip grupė arba grupės dalis žymi ciklinę alkilo grupę su 3-8 anglies atomais, pavyzdžiui, ciklopropilą, ciklobutilą, ciklopentilą, cikloheksilą, cikloheptilą arba ciklooktilą.

Terminas C₂_₂₄-alkenilas , žymi nesočias alkilo grupes su 2-24 anglies atomais, kurios gali turėti linijinę ar šakotą grandinę, geriau linijinę, kurioje dviguba jungtis gali būti bet kurioje grandinės vietoje, pavyzdžiui, vinilas, 1-propenilas, 2-propenilas, heksenilas, decenilas. heksadecenilas, oktadecenilas. Terminas C₂_₂₄-alkinilas žymi alkilo grupę su 2-24 anglies atomais, turinčią trigubą ryšį, pavyzdžiui, etinilas,

I-propinilas, 2-propinilas, 2-butinilas ir 1.1. Terminas halogenas reiškia Cl, Br, I ir F, labiau priimtini F ir Cl. Terminas C₁.₄-alkoksilas ir C₁.₂4^_alkoksilas žymi grupę sudarytą iš okso funkcinės grupės, substituotos alkilo grupe, apibrėžta aukščiau.

Terminai arilas ir ariloksilas kaip atskira grupė arba kaip grupės dalis žymi fenilą arba naftilą, labiau priimtinas fenilas.

Terminas arilamidas apibrėžia arba aril-NH-C(O)-, pvz., anilidai, arba aril-C(O)-NH-, pvz. benzamidas.

Terminas terpenilo grupė žymi grupes, išvestas iš kelių skirtingų nesočiųjų angliavandenilinių junginių, paprastai vadinamų terpenais, būtent monoterpenų ir seskviterpenų, o taip pat jų hidroksi arba okso dariniai. Mircenilas, (-)-limonenilas, terpineolilas, (+)-α-pinenilas, geraniolilas, (-)-mentolilas, (-)-kamparilas, farnesolilas, β-eudesmolilas ir manoolilas yra šių grupių pavyzdžiai.

Šiame kontekste terminas oligosacharidas žymi oligosacharidą, turinti, 4-10 monosacharidų, labiau priimtina 4-7 monosacharidai, monosacharidai parenkami iš aldoheksozių (t.y. D-gliukozė, L-giiukozė, D-galaktozė, L-galaktozė, D-manozė, L-manozė, D-talozė, L-talozė, D-alozė, L-alozė, D-altrozė, L-altrozė, D-gulozė, L-gulozė, D-idozė arba L-idozė) arba jų dariniai, kur oligosachridai gali būti linijiniai arba šakoti, su sąlyga, kad ilgiausioje oligosacharido grandinėje yra ne daugiau kaip septyni monosacharidai.

Kaip nurodyta aukščiau, vingiuotos linijos ties šalia žiedo deguonies atomo, kurie yra glikozidiniai, gūracijose. Aišku, kad konkrečioje Y, A, B, C, a- arba β-konfigūracijoje jungčių kitose grupėse.

Y, A, B, C, D ir anglies atomais, reiškia, kad šie

E grupėse esančiais ryšiai, yra arba a- arba β-konfikiekviena iš šių jungčių D ir E grupėje gali būti nepriklausomai nuo atitinkamų

Mono- ar di-halogen-C₁₄-alkilo grupė gali turėti pakaitą bet kurioje pozicijoje ir jeigu yra dvi halogenų pakaitos, tai halogenų atomai gali būti tie patys arba skirtingi.

Terminas heterocikliias žymi monociklinę 5- arba 6narę arba kondensuotą biciklinę (kiekvienas žiedas 5arba 6-naris), aromatinę dalinai arba pilnai įsotintą heterociklinę grupę, turinčią nuo 1 iki 4 heteroatomų kiekviename žiede, kur heteroatomai gali būti nepriLT 3446 B klausomai pasirenkami iš O, S ir N bei sujungti arba per anglies atomą, arba per azoto atomą. Pirolilas, pirazolilas, piridinilas, tienilas, tiazolilas, oksazolilas, imidazolilas, izoksazolilas, izotiazolilas, furilas, pirazinilas, pirimidinilas, piridazinilas, 2H-1,3-oksazinilas, 4H-1,3-oksazinilas, 6H-1,3oksazinilas, 2H-1,3-tiazinilas, 4H-1,3-tiazinilas, 6H1,3-tiazinilas, 1H-1,2,3-triazolilas, 2H-1,2,3-triazolilas, 1H-1,2, 4-triazolilas, 4H-1,2,4-triazolilas, indolilas, purinilas, piperidilas arba piperidinas, morfolinilas arba morfolinas, piperazinilas, tetrahidrofurilas, tiazolidinilas, oksazolidinilas, imidazolidinilas, izoksazolidinilas, izotiazolidinilas, pirolidinilas, lH-tetrazolilas arba 2H-tetrazolilas yra tipiški, bet ne vieninteliai šios grupės pavyzdžiai.

Terminas natūraliai egzistuojančių aminorūgščių acilo liekana žymi L-aminorūgščių, esančių gamtiniuose proteinuose acilo liekanas, pvz., alanilas, valilas, leucilas, izoleucilas, prolinilas, fenilalanilas, triptofanilas, metionilas, glicilas, serilas, treonilas, cisteinilas, tirozilas, asparagilas, gliutamilas, lizilas, arginilas, histidilas ir asparagino bei gliutamino acilo liekana nurodo tiek tuoj pat už funkcinės amino grupės, tiek ir karboksilo grupę, esančią atitinkamų šoninių grandinių gale, tačiau labiau priimtinos karboksilo grupės, esančios šalia amino funkcinės grupės.

rūgščių acilinės liekanos, karboksilo grupę, esančią

Terminas sfingoidas nurodo į D-eritro-2-amino-l,3oktadekandiolą, jo homologus ir stereoizomerus bei jo hidroksilinius ir nesočiuosius darinius, tame tarpe ceramidą (žr. tolimesnius apibrėžimus Journ. of Lipid Research, vol. 19, (1978), 617-631).

io

Terminas steroidas nurodo į tokius gerai žinomus steroidus kaip cholesterolis, kortizonas, hidrokortizonas, kortikosteronas, betametazonas, prednozolonas, prednizonas ir kt.

Terminas matrica, kaip čia naudojamas ir žymimas MA, reiškia bet kokią organinę ar neorganinę, polimerinę ar makromolekulinę struktūrą, prie kurios kovalentiškai arba, pvz., sąvaikaudama hidrofobiškai, prisijungia 0-, S-, C- arba N- glikozidinio junginio, pagal formules Ia, Ib, Ic, Id, Ie arba lf, aglikoninė dalis. Tokių matricų pavyzdžiais yra proteinų, glikoproteinų, polipeptidų, polisacharidų, liposomų, emulsijų, plastikinių polimerų liekanos ir neorganinės medžiagos. Geriau kai proteinų liekanos prisiriša per nukleofilines proteinų grupes, pvz., amino, hidroksilo ir merkaptano grupes. Patys proteinai ir polipeptidai gali būti bet kurie iš įvairiausių medžiagų, ypač biologiškai suderinami proteinai, kaip antai globulinai, albuminai, pavyzdžiui, žmogaus serumo albuminas (HSA), jaučio serumo albuminas (BSA) arba avies serumo albuminas (SSA), ovalbuminas, fibrinai arba rakto skylutės geldelės hemocianinas (KLH), glikoproteinai, kaip antai jaučio arba žmogaus nepakeistas kazeinas ar lecitinai, bei panašiai. Sintetiniai polimerai, kuriuose viena ar kelios aminorūgštys prijungtos prie apibrėžto dydžio(ių), polimero, pvz., polizinas arba oligolizinas, yra kitais tokių matricų pavyzdžiais. Skirtinguose proteinuose ar polipeptiduose gali būti prisirišama prie R grupės liekanos per amino arba karboksilinę grupę. Polisacharidai, prie kurių prisijungia 0-, S-, C- arba N-glikozidiniai junginiai, taip pat gali būti įvairiausiais polisacharidais. Junginio, aprašomo formulėmis Ia, Ib, Ic Id, Ie arba lf, aglikoninė dalis gali būti prijungta prie paprastų polisacharidų, kaip antai celiuliozės, sefarozės, krakmolo ar glikogeno, hidroksilo grupių, prie aminoLT 3446 B n

sacharidų, tokių kaip chitozanas arba amininta sefarozė, amino grupių ir prie polisacharidų, modifikuotų siera, merkaptano grupių.

Liposomomis gali būti bet kokia biologiškai, biologiškai suardoma mikrovezikulinė sistema, sudaryta iš vieno ar kelių bisluoksnių, apjuosiančių vandeniu užpildytas kameras, kuriose gali būti įvairiausi reagentai: hidrofobiniai reagentai lipidinių bisluoksnių viduje, o hidrofiliniai reagentai vidinėje vandeninėje ertmėje. Liposomų fizikinės ir cheminės savybės pagrinde priklauso nuo lipidų sudėties.

Liposomos sudarytos iš fosfolipidų, kaip antai kiaušinio trynio fosfolipidų, sojos fosfolipidų, sintetinio fosfotidilcholino, pvz., dimiritoilfosfatidilcholinas (DMPC) ir/arba dipalmtoilfosfatidilchlorinas (DMPC), arba išvalyti augalinės kilmės fosfatidilcholinai arba kiti lipidai, kaip antai galaktolipidai, sfingolipidai arba glikosfingolipidai.

Emulsijos tai heterogeniniai dviejų ar daugiau nesusimaišančių skysčių mišiniai. Kad šios sistemos stabilizuotųsi, pridedami emulgatoriai. Emulgatorius išsidėsto tarp nesusimaišiusių skysčių ir paprastai išlieka tik viena fazė lašelinėje formoje.

Emulsijos būna dviejų pagrindinių tipų. Heterogeninės sistemos, pasižyminčios organinio skysčio lašelių pasiskirstymu ištisinėje vandens fazėje, vadinamos aliejaus vandenyje emulsijomis (o/w). Iš kitos pusės, heterogeninės sistemos, pasižyminčios vandens lašelių pasiskirstymu ištisinėje aliejinėje fazėje, vadinamos vandens aliejuje emulsijomis (w/o).

Bet koks augalinis aliejus, toks kaip sojos pupelių aliejus, dygminų aliejus, sezamo aliejus, žemės riešutų aliejus, medvilnės aliejus, borago aliejus, saulėgrąžų aliejus, kukurūzų aliejus, alyvų aliejus, trigliceridai su vidutinio ilgio grandinėmis (kaip Miglyol¹®) ar acetilinti monogliceridai gali būti panaudoti kaip disperguotoj i fazė arba dispersinė terpė.

Aminintas lateksas, substituotas siera, aminintas arba hidroksilintas polistirolas, poliakrilamidas ir polivinilo alkoholis tai pavyzdžiai plastikų, prie kurių gali prisijungti aglikoninės dalys junginių, aprašomų formulėmis la, lb, lc, ld, Ie ir If. Tarp kitų galimų nešiklių yra angliavandeninės kilmės rutuliukai ir geliai arba polimerai, kuriuose angliavandeniai naudojami drauge su kitomis polimerinėmis medžiagomis, kaip sefakrilas. Šiuose geliuose toliau atliekamos pakaitos su tokiomis grupėmis kaip amino, tiolių, ciano, aktyvuotų esterių ir disulfidų grupėmis. Aptariamieji plastikai gali būti rutuliukų arba plėvelės pavidalo.

Tarp neorganinių medžiagų, prie kurių gali būti prijungta junginių, aprašomų formulėmis la, lb, lc, ld, Ie ir If, aglikoninė dalis yra silicio dioksido medžiagos, tokios kaip: silikagelis, ceolitas, diatomitas arba ^vairių stiklo ar silikagelio tipų, kaip antai substituotų siera ar aminintų stiklų, paviršiai, kur silikagelis ar stiklas gali būti, pavyzdžiui, rutuliukų formoje. Kitu neorganinės medžiagos pavyzdžiu gali būti aliuminio oksidas.

Ypač priimtinomis MA matricomis yra žmogaus serumo albuminas (HSA), jaučio serumo albuminas (BSA) ir poliakrilamidas (PAA).

Įdomus šio išradimo įgyvendinimas yra kai junginys, atitinkantis formulę la, lb, lc, ld, Ie arba If, turi MA matricą, kurioje įjungta daug (t.y 2 ar daugiau, pavyzdžiui 10-100, kai matrica yra proteinas, kaip antai: BSA ar HSA, arba 10-10000, kai matrica yra polimeras, toks kaip poliakrilamidas) grupių, atitinkančių formules Ia, Ib, Ic, Id, Ie ir If. Pastebėta, kad esant kelioms tokioms grupėms žymiai pagerėja viso junginio slopinamasis efektas, dėl daugiavalentinio jo poveikio i bakterijas. Taip pat gali būti, kad esant kelioms grupėms, atitinkančioms formules Ia, Ib, Ic, Id, Ie arba If, bakterijos gali net agliutinuotis.

Kai, ryšium su formulių Ia, Ib, Ic, Id, Ie arba If apibrėžimu, teigiama, kad A grupės R_1A, R_2A, R_3A ir R_4ACH₂ pakaitų konfigūracijos, B grupės R_1B, i\_2B,

R-2B > ^3b R4BCH2

R20 ^30 ir R_4cCH₂ pakaitų konfigūracijos, C grupės R_lc, pakaitų konfigūracijos, D grupės R_1D, R_2D, R_3D ir R_4DCH₂pakaitų konfigūracijos ir E grupės R_1E, R_2E, R_3E ir R_4ECH₂pakaitų konfigūracijos nepriklausomai yra D-gliukozės, L-gliukozės, D-galaktozės, L-galaktozės, D-manozės, L-manozės, D-tolozės, L-tolozės, D-alozės, L-alozės, D-altrozės, L-altrozės, D-gulozės, L-gulozės, D-idozės ir L-idozės konfigūracijos, tai norima pasakyti, kad stereocheminis substitucinis išsidėstymas, kurį gali igyti Įvairios R-grupės ar grupės, turinčios R-grupes, esančios ciklinėse A, B, C, D ir E grupėse, atitinka

2-, 3- ir 4-hidroksigrupių ir 5-hidroksimetilo grupės stereochemini išsidėstymą D-gliukozėje, L-gliukozėje, D-galaktozėj e, L-galaktozėje, D-manozėje, L-manozėje, D-tolozėje, L-tolozėje, D-alozėje, L-alozėje, D-altrozėje, L-altrozėje, D-gulozėje, L-gulozėje, D-idozėje ir L-idozėje, atitinkamai.

Akivaizdu, kad grupės R_lz R₂, R₃ ir CH₃ grupėje Y sudaro tokią konfigūraciją, kad gaunasi L-galaktopiranozinis junginys ir todėl Y grupė yra L-fukozė arba jos darinys.

Geriau, kai junginiuose, aprašomuose formulėmis Ia, Ib,

Ic, Z₁₀z	Id, Zii t	Ie arba If, Z_lf Z₂, Ζχ₂, Z₁₃, Z₁₄, Z₁₅ ir	Z₃, Z₄, Z₅, Z₆, Z₇, z₈, Z₁₆ yra 0.	Z₈,
Taip	pat	labiau priimtina,	kai ne daugiau kaip keturi,
dar	geriau ne daugiau kaip	trys, ypač vienas ar du	iš
R-lAz	R-2 A i	^3Az P-4AZ ^1Β» ^2Bz P-3B z ^4Bz H-lCz ^2Cz &3CZ ^4Cz	R-1DZ
^2Dz	RaD/	^4DZ RlE' ^2Ez f^3E ^ar	R_4E yra grupė, aprašoma	VII
formule.

Taip pat geriau, kai R_1A yra VII grupė a konfigūracijoje .

Taip pat geriau, kai A dalies R_1A, R_2A, R_3A ir R_4ACH₂ turi D-galaktozės konfigūraciją, esant A β konfigūracijoje.

Ypač priimtini junginiai, kuriuose R_1A yra VII grupė a konfigūracijoje ir A dalies R_1A, R_2A, R_3A ir R_4ACH₂ turi D-galaktozės konfigūraciją, esant A β konfigūracijoje, ypač kai A yra Fucal-2Ga^.

Taip pat labiau priimtina, kai R_2B yra Z₃, Z₅, Z₈ arba

Z₁₂ ir B dalies R_1B, R_2B, R_3B ir R_4BCH₂ turi D-gliukozės konfigūraciją, esant B β konfigūracijoje.

Taip pat labiau priimtina, kai R_1B yra acetamido grupė.

Ypač priimtini junginiai, kuriuose R_1A yra VII grupė a konfigūracijoje; A dalies R_1A, R_2A, R_3A ir R_4ACH₂ turi Dgalaktozės konfigūraciją, esant A β konfigūracijoje; R_2Byra Z₃, Z₅, Z₈ arba Z₁₂; ir B dalies R_1B, R_2B, R_3B ir R_4BCH₂ turi D-gliukozės konfigūraciją, esant B β konfigūracijoje, bei R_1B yra acetamido grupė.

Ypač įdomūs junginiai, kuriuose A-Z₃-B yra Fucotl-2ΰ3ΐβ1-30ΐοΝΑοβ arba Fucal-2Ga^l-3 (Fucal-4) ΰΙοΝΑοβ, junginiai, kuriuose A-Z₅-B-Z₆-C yra Εηοα1-2α3ΐβ1-3Θ1οΝΑοβ1LT 3446 B

3Gaip arba Fucal-2Gaipi-3 (Fucal-4) GlcNAcpl-3Gaip, junginiai, kuriuose A-Zg-B-Z₉-C-Z₁₀-D yra GalNAcal-3(Fucal2)Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAc3l-3Gaip arba Fucal-2Galpl3(Fucal-4)GlcNAcpi-3Gaipi-4GlcP, ir junginiai, kuriuose A-Z₁₂-B-Z₁₃-C-Z₁₄-D-Z₁₅-E yra GalNAcal-3 (Fucal-2) Galpl3(Fucal-4)GlcNAcpl-3Gaipi-4Glc3.

Taip pat labiau priimtina, kai R_3B yra grupė, pagal VII formulę, α konfigūracijoje.

Ypač priimtini junginiai, kuriuose A dalies R_1A, R_2A, R_3Air R_4aCH₂ bei B dalies R_1B, R_2B, R_3B ir R_4BCH₂ turi Dgalaktozės konfigūraciją ir C dalies R_lc, R_2C, R_3C ir R_4cCH₂ turi D-gliukozės konfigūraciją, esant A α konfigūracijoje bei esant B ir C β konfigūracijoje, ir kuriuose R_1B bei R_3C yra grupės, atitinkančios VII formulę α konfigūracijoje, kuriuose R_1A, bei R_1C yra acetamido grupės, ir R_2B yra Z₅, Z₈ arba Z₁₂ bei R_2C yra Z₆, Z₉ arba Z₃₃.

Ypač įdomi junginių klasė, kurioje angliavandenio dalis turi Y-Z_t-A- struktūrą, kurioje Z_: yra O ir L-fukozės junginys Y prijungtas prie A 2 pozicijos. Šioje klasėje Įdomios bazinės angliavandenės struktūros, turinčios formules, kuriose pakaitai R_lf R₂, R₃, R_1A, R_2A, R_3A ir R_4Akiekvienas yra pažymėtas kaip OH, nors tai nereikėtų laikyti R-pakaitų apibrėžimo apribojimu šiuo atveju; greičiau reiktų sakyti, kad R_lz R₂, R₃, R_1A, R_2A, R_3A, ir

R_4A gali įgyti visas reikšmes, apibrūžtas aukščiau ryšium su formulėmis Ia, Ib, Ic, Id, Ie arba lf. Taigi struktūra Y-Z^A- gali būti:

Fucal-2Alipi ->

Fucal-2Altpl

Fucal-2Glcpi

Fucctl-2Man3l —»

Fucotl-2Guipi —>

Fucal-2IdoPl —>

Fucal-2Galpl

Fucal-2Taipi

Kai Y, A, B, C, D ir	E dalių	Ri,	r₂, r₃, R_1a, R_2a,	R3A,
R4A, R-1B, ^2B, ^3Β' R-4B<	RlO R2C,	R3C,	R4C, Rid, R2D, R3D,	R4D,
R].E< ^2E' ^3E bei R_4E	grupės	yra	ne hidroksilai,	tai
geriau jas pasirinkti	iš šių:

H, Cl, F, azidas guanidilas, metilas, etilas, propilas, vinilas, aūlas, prop-1-enilas, etinilas, prop-2inilas, prop-l-inilas, acetilas, ciklopropilas, ciklopropilmetilas, metoksimetilas, hidroksimetilas, fenilas oksogrupė, metilenas, tiolis, aminas, metoksi-, etoksi-, propoksi-, butoksi-, heksiloksi-, deciloksi-, tetradeciloksi-, oktadeciloksi-, viniloksi-, aliloksi-, 1-propen-l-iloksi-, krotiloksi-, 3-buten-l-iloksi-, 2-heksen-l-iloksi-, 5-heksen-l-iloksi-, 5-decen-l-iloksi-, 9-decen-l-iloksi, 11-tetradecen-l-iloksigrupė, oleolilas, etiniloksi-, 2-propin-l-iloksi-, 1-propin-l-iloksi-, metiltiogrupė, metilaminas, dimetilaminas, ciklopropoksi-, ciklopropilmetoksi-, metoksimetoksi-, fenoksi-, benziloksi-, 2-furilmetoksi-, 2-tienilmetoksi-, 2-piridilmetoksi-, trimetilsililoksi-, trimetilsililetiloksi-, acetoksi-, propioniloksi-, butiriloksi-, heksanoiloksi-, dekanoiloksi-, tatradekanoiloksi-, oktadekanoiloksigrupė, acetamidas, N-metilacetamidas, acetiltio-, gliciloksi- ar alaniloksigrupė.

Tarp R grupių anglikonų įdomus šie:

metilas, etilas, propilas, izopropilas, butilas, sec. butilas, izobutilas, tert.butilas, pentilas, izopentilas, 2-metilbutilas, 1-metilbutilas, 1-etilpropilas, heksilas, izoheksilas, 3-metilpentilas, 2-metilpentilas, 1-metilpentilas, 2-etilbutilas, 1-etilbutilas, heptilas, izoheptilas, 4-metilheksilas, 3-metilheksilas, 2-metilheksilas, 1-metilheksilas, 3-etilpentilas, 2-etilpentilas, 1-etilpentilas, 1-propilbutilas, oktilas, decilas, dodecilas, tetradecilas, heksadecilas, oktadecilas, tetrakosilas, ciklopropilas, ciklopropiletilas, ciklobutilas, ciklobutilmetilas, ciklopentilmetilas, cikjlopentilprop-3-ilas, cikloheksilas, cikloheksilmetilas, cikloheksilprop-3-ilas, cikloheptilas, fenilas, 4-nitrofenilas, benzilas, 4-fenilprop-l-ilas, 3-heksiltio-2-(heksiltio)metilprop-1ilas, 3-heksilsulfonil-2-(heksilsulfonil)metilprop-1-ilas,

3-deciltio-2-(deciltio)metilprop-1-ilas, 3-decilsulfonil-2(decilsulfonil)metilprop-1-ilas, 8-amino-3 grupė,

6-dioksaokt-l-ilas, 1,3-dihidroksiprop-2-ilas, 1,3-diaminprop-2-ilas, 3-hidroksi-2-(hidroksimetil)prop-l-ilas,

2-feniltioetilas, arba trimetilsililetilas .

Grupėje R, kuri turi MA matricą ryšys tarp šios MA matricos ir likusios R dalies paprastai gali būti sudaromas panaudojant tarpiklius, kurie gerai žinomi sudėtinių baltymų srityje, palygink, pavyzdžiui,

J.H. Pazur, Adv. Carbohydr. Chem. Biochem., Vol 39, (1980), 405-447; Y.C. Lee & R. T. Lee, Glycoconjugates , Vol. 4 Part B, 57-83, Ed. Horowitz, Academic Press, N. Y. (1982); ir G. Magnusson, FEMS Symposium, 215-228 (1986). Šiame kontekste, terminas tarpiklis reiškia molekulės grupę, kuri jungia aktyviąją medžiagą su nešikliu. Tarpiklio molekulė sukonstruota taip, kad turėtų dvi skirtingas funkcines grupes, kurių kiekviena specifiškai reaguoja su kita funkcine grupe, o tarp šių dviejų funkcinių grupių yra linijinė grupė. Prijungus aktyviąją medžiagą prie nešiklio per tarpikli, aktyLT 3446 B vioji medžiaga pasidaro labiau prieinama, pvz., H. pylori adhezinėms medžiagoms ar kolonizavimo faktorių antigenams.

Tarpiklis gali būti apibrėžtas kaip (W)_v-S'-P*, kur S' yra C! ₂₄alkilo, C_{2 24}alkenilo, C₁₂₄alkilarilo, arilC_l_₂₄alkilarilo, C, ^alkilarilCj ₂₄alkilo grupė, kurios gali būti pertrauktos karbonilo, tiokarbonilo, oksikarbonilo, karboniloksi, karbonilamino, aminokarbonilo, azo-, okso-, arba tiogrupėmis; arilo grupė, ariloksi, C,.₂₄-alkoksilo, polietilenglikolio grupė, steroidinė grupė, sfingoidinė grupė; visos grupės gali turėti karboksilo, C, _₄alkilkarbonilo, amido, hidroksilo, alkoksi, ariloksi, fenoksi pakaitą;

P' yra NH-C(S), NH-C(O), C(O), NH, C(S), C(O)0, (O)CO, SO, SO ₂, SO ·,, SO ₄, PO j, PO ą ;

W yra NH-C(S), NH-C(O), C(O), C(S), C(O)O, (O)CO, SO,

SO₂, SO₃, SO₄, PO₂, PO₃, PO₄, su sąlyga, kad tai Z_lz Z₂, Z₄, Z₇, Z,, arba Z₁₆ yra CH₂ tai W negali būti PO₂, su sąlyga, kad kai Z,, Z₂, Z₄, Z₇, Z_n arba Z₁₆ yra O ar S, tai W negali būti (O)CO, SO₄, ar PO₄, ir su sąlyga, kad kai Z., Z₂, Z₄, Z,, Z,, arba Z-₍. yra NH, tai W negali būti NH-C(S), NH-C(O), (O)CO, (O)CO, SO₄ ar PO₄, ir v yra sveikas skaičius 0 arba 1.

Cukraus grupės atomas, kuris jungia su tarpikliu, pasirenkamas tarp -0-, -S-, -NH-, CH₂-, geriau -O-.

Junginiuose, apršomuose formulėmis la, lb, lc, ld, Ie arba If, įvairios R grupės, turinčios MA matricą, gali pačios turėti tarpiklį ir ryšį. Būdingais ir įprastiniais sujungimo būdais yra sujungiamas per matricas, turinčias aminogrupės arba ketogrupes . Tokie sujungimai tarp tarpiklio ir matricos gali turėti šias bendras struktūras:

-NH-C (S)-NH- arba -C(O)-NH, arba -NH-CfOj-, kur atomai, pažymėti ryškesniu ir kursyviniu šriftu, priklauso duotajai matricai.

Struktūrų, aprašomų formulėmis Ia, Ib, lc, Id, le arba If, skaičius ant kiekvieno matricos vieneto gali būti mono- ar multivalentinis ir gali kisti nuo 1 iki 10000, priklausomai nuo matricos prigimties.

Žemiau pateiktas neapriboj antis tarpiklių pavyzdžių, tinkančių tarp Q ir likusios R dalies, sąrašas:

Sąrašuose, pateiktuose pažymėti storesniu ir atitinkamai matricai.

aukščiau ir žemiau, atomai, kursyviniu šriftu, priklauso Vertikali vingiuota linija kairiajame ir dešiniajame tarpiklio, pateikto aukščiau, galuose, žymi, kad galuose yra ryšiai. Tarp junginių, aprašomų formulėmis Ia, lb, lc, Id, Ie arba If ir turinčių matricinę dalį, galima paminėti šiuos:

S

O

CNH-8SA

o

Kai aukščiau pateiktuose pavyzdžiuose naudojama Kaltai reiškia mono-, di-, tri- arba oligosacharidas, kaip paminėta tekste, ir m' yra sveikas skaičius 0-5, o p yra sveikas skaičius 0-13.

Kai aukščiau pateiktos matricos iliustruojamos BSA, HSA ir poliakrilamido (PAA), jų vietoje gali būti bet kuris proteinas ar peptidas arba kita matrica, pažymėta tekste.

Būdingais naudingų junginių, aprašomų formulėmis Ia, lb, lc, Id, Ie arba If, pavyzdžiais yra šie:

Fucal-2Gal3l-O-propilas

Fucctl-2GaiP 1-0-izopropilas

Fucal-2Gaipi-O-butilas

Fucal-2Gaipi-O-tert-butilas

Fucal-2Galpl-O-heksilas

Fucal-2Gaipi-O-oktilas

Fucal-2Gaipi-O-decilas

Fucal-2Gaipi-O-tetradecilas

Fucal-2Gal3l-O-oktadecilas

Fucal-2Gaipi-O- (C₆bissulfidas)

Fucal-2Gaipi-O- (C₁₀bissulf idas)

Fucal-2Gaipi-O- (C_febissulfonas)

Fucal-2Gaipi-O- (C₁₀bissulfonas)

Fucal-2Gaipi-O-(8-amino-3, 6-dioksaokt-l-ilas)

Fucal-2Ga1β1-3GlcNAcPl-0-propilas

Fucal-2Galβl-3Gl·cNAcβl-O-izopropilas

Fucal-2Gal^l-3GlcNAcpl-O-butilas

Fucal-2Gaipi-301οΝΑοβ1-0-1θΓΐ.butilas

Fucal-2Galpl-3GIοΝΑοβ1-0-heksilas

Fucal - 2Ga^l -3β1οΝΑοβ1 -O-okt ilas

Fucal - 2Ga^l - 3GlcNAcPl-O-decilas

Fucαl-2Galβl-3GlcNAcβl-O-tetradecilas

Fucotl -2Gaipi-3GlcNAcPl-0-oktadecilas

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcP-l-O- (C₆bissulfidas)

Fucotl - 2Gaipi -3GlcNAcP~ 1-0- (C₆bissulfonas)

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcP-l-O-(8-amino-3,6-dioksaokt-l-ilas)

Fucal-2Gaipi-3Glc3l-0-propilas

Fucotl - 2Galpl -3GlcP 1-0-i zopropilas

Fucotl - 2Gaipi -3GlcPl-O-butilas

Fucotl-2Gaip 1 -3Glcpi-O-tert.butilas

Fucal-2Gaipi-3Glc3l-O-heksilas

Fucotl - 2Gaipi -3GlcPl-O-okt i las

Fucal-2Gal3l-3GlcPl-O-tetradecilas

Fucal-2Gaipi-3GlcPl-O-oktadecilas

Fucal-2Gal3l-3GlcPl-O-(C₆bissulfidas)

Fucotl-2Gaipi-3GlcP-1-0- (C₆bissulfonas)

Fucctl-2Gal3l-3Glc0-l-O- (8-amino-3, 6-dioksaoktilas) kur

C₆bissulfidas = 3-heksiltio-2-(heksiltio)metilprop-l-il·C₁₀bissulf idas = 3-deciltio-2-(deciltio)metilprop-l-ilCgbissulfonas = 3-heksilsulfonil-2- (heksilsulfonil)metilprop-l-ilC₁₀bissulfonas = 3-deciisulfonil-2- (decilsulfonil) metilprop-l-ilToliau įdomūs šie junginiai:

Fucotl-2Galpl -O-Me

Fucotl -3G Ιοβΐ -O-Me

Fucotl-3GlcNAcPl-O-Me

Fucotl-3GlcNAcPl-tarpiki is 1-BSA

Fucotl-3GlcNAcPl -O tetradecilas

Fucotl -4GlcNAc3l -O-Me

Fucotl-4GlcNAc3l- tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucotl-4GicNAcPl-O tetradecilas

Fucotl - 4Gaipi -O-Me

Fucotl -6Gaipi-O-Me

Fucal-6Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2Gaipi-tarpiklis 1-HSA

Fucal-2Gaipi-tarpiklis 4-BSA

Fucal-2Galpl-tarpiklis 4-HSA

Fucal-2Gaipi-tarpiklis 5-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-0 tetradecilas

Fucal-2Galpl-3GlcNAcPl-tarpiklis 5-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 4-BSA

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 4-HSA

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 1-HSA

Fucal-2Galpl-3GlcNAc3l-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2Galpl-3GlcNAcpl-O-tetradecilas

Fucal-2Gal3l-3GlcPl-tarpiklis 1-HSA

Fucal-2Gaipi-3GlcPl-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2Gal3l-3Glc3l-tarpikiis 4-HSA

Fucal-2Gaipi-3GlcPl-tarpiklis 4-BSA

Fucal-2Gaipi-3Glc3l-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-3Glc3l-tarpikiis-5-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcPl-tarpiklis 1-HSA

Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcPl-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcPl-tarpiklis 4-HSA

Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcPl-tarpiklis 4-BSA

Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcPl-tarpiklis 2-oliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcPl-tarpiklis 5-poliakrilamidas

Fucal-2GaiPl-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Gaipi-tarpiklis 3-BSA

Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fuoal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Gaipi-tarpiklis 5-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Gaip1-0-tetradecilas

Fucal-2Gaipi-4Glcpl-tarpiki is 1-BSA

Fucal-2Gaipi-3GlcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-4GlcPl-O-tetradecilas

Galpl-4(Fucal-3)GlcNAcpl-tarpiklis 1-BSA

Gaipi-4(Fucal-3)GlcNAcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Gaipi-4(Fucal-3)GlcNAcPl-O-tetradecilas

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcPl-3Gaipi-tarpiklis 3-BSA

Fucal-2Galpl-3GlcNAcpl-3Galpl-tarpiklis 3-HSA

Fucal-2Galpl-3GlcNAcpl-3Galpl-tarpiklis 5-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcPl-3Gaipi-tarpiklis 1-HSA

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcpl-3Gaipi-tarpiklis 5-BSA

Fucal-2Galpl-3GlcNAc3l-3Galpl-tarpiklis 4-HSA

Fucal-2Gaipi-3GlcNAc3l-3Gaipi-tarpiklis 4-BSA

Fucal-2Gaipi-3GlcNAcPl-3Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2Galpl-3GlcNAcpl-3Galpl-O-tetradecilas

GalNAcal-3 (Fucal-2) 3Gaipi-3 (EUaal-4) GlcNAcpl-3Gaipi-tarpiklis 3-BSA

GalNAcal-3(Fucal-2)3Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

GalNAcal-3 (Fucal-2) 3Galpl-3 (Fuaal-4)GlcNAcpi-3Galpl-O-tetradecilas

Fucal-2Gaipi-4(Fucal-3)GlcPl-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2Galpl-4(Fucal-3)GlcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-4(Fucal-3)GlcPl-O-tetradecilas

Fucal-2(3-O-metil)Gaipi-O-tetradecilas

Fucal-2(3-O-metil)Gaipi-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2(3-O-metil)Galpl-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-O-tetradecilas

Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-tarpiklis 1-HSA

Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-tarpiklis 4-HSA

Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-tarpiklis 4-BSA

Fucal-2 (3-O-propil)Gaipi-tarpiklis 5-poliakrilamidas

Fucal-2(3-O-butil)Gaipi-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2 (3-O-butil)Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2(3-O-butil)Gaipi-O-tetradecilas

Fucal-2(3-O-metil)Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2 (3-O-metil)Galpl-3GlcNAcpl-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2(3-O-metil)Gaipi-3GlcNAcPl-O-tetrdecilas

Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-3GlcNAcPl-O-tetradecilas

Fucal-2(3-O-propil)Galpl-3GlcNAcPl-tarpiklis 1-HSA Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA Fucal-2 (3-O-propil) Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2 (3-O-propil)Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 4-HSA Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 4-BSA Fuoal-2 (3-O-propil) Gaipi-3GlcNAcpl-tarpiklis 5-poliakrilamidas Fucal-2(3-O-butiį)Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA Fuoal-2 (3-O-butil) Gaipi-3GlcNAcpl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2(3-0-būtii)Gaipi-3GleNAcPl-O-tetradecilas Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-tarpiklis 1-HSA Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA Fucal-2 (3-O-propil) Galpl-3 (Fucal-4)GlcNAcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-tarpiklis 4-HSA Fucal-2(3-O-propil)Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-tarpiklis 4-BSA Fucal-2 (3-O-propil) Galpl-3 (Fucal-4)GlcNAcPl-tarpiklis 5-poliakrilamidas Fucal-2(3-O-metil)Gaipi-4GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA Fucal-2 (3-O-metil)Galpl-4GlcNAcpl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2(3-O-metil)Gaipi-4GlcNAcpl-O-tetradecilas Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-4GlcNAcpl-tarpiklis 1-BSA Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-4GlcNAcpl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2 (3-O-alil)Gaipi-4GlcNAcPl-O-tetradecilas Fucal-2(3-O-butil)Gaipi-4GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA Fucal-2(3-O-butil)Galpl-4GlcNAcpi-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2(3-O-butil)Gaipi-4GlcNAcPl-O-tetradecilas Fucal-2(3-O-metil)Gaipi-3GlcPl-tarpiklis 1-BSA Fucal-2 (3-O-metil)Gaipi-3GlcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2(3-O-metil)Gaipi-3GlcPl-O-tetradecilas Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-3GlcPl-tarpiklis 1-BSA Fucal-2 (3-O-alil)Gaipi-3GlcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2(3-O-alil)Gaipi-3GlcPl-O-tetradecilas Fucal-2(3-O-butil)Gaipi-3GlcPl-tarpiklis 1-BSA Fucal-2(3-O-butil)Galpl-3GlcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Fucal-2(3-O-butil)Gaipi-3Glcpi-O-tetradecilas Fucal-2Gaipi-4GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA

Fucal-2Gaipi-4GlcNAcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Fucal-2Gaipi-4GlcNAcPl-O-tetradecilas

Galal-3(Fucal-2)Galpl-tarpiklis 1-BSA

Galal-3(Fucal-2)Gaipi-tarpiklis 2-poliakrilamidas

Galal-3(Fucal-2)Galpl-O-tetradecilas

GalNAcal-3(Fucal-2)Galpl-4Glcpl-tarpiklis 1-BSA

GalNAcal-3(Fucal-2)Gaipi-4GlcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas GalNAcal-3(Fucal-2)Gaipi-4Glcpi-O-tetradecilas Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcpi-3Galpl-4Glc3l-tarpiklis 1-BSA Gaipi-3 (Fucal-4)GlcNAcpl-3Ga^l-4GlcPl-tarpiklis 2-poliakrilamidas Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcβl-3Galβl-4Glcβl-O-tetradecilas ΰβ1β1-3 (Fucal-4) GlcNAcPl-tarpiklis 1-BSA Ga^l-3 (Fucal-4) ΰΙσΝΑοβΙ-ΐΒΓρΐ^ΪΒ 2-poliakrilamidas Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcβl-O-tetradecilas

Šioje paraiškoje sąraše, pateiktame aukščiau, konkretūs junginiai ar jų dalys gali būti pavadinti ar pateikti glaustoje formoje, pagal glikoproteinų, glikopeptidų ir peptidoglikanų nomenklatūros rekomendacijas, pasiūlytas Tarptautinės grynosios ir taikomosios chemijos bei Tarptautinės biochemijos sąjungos Jungtinės komisijos dėl biocheminės nomenklatūros (palygink Pure & Applied Chem., Vol. 60, Nr. 9, pp 1389-1988).

Kitu aspektu išradimas susijęs su farmacine kompozicija, turinčia junginį, pagal formules Ia, Ib, Ic, Id, Ie ir If kaip apibrėžta aukščiau, ar jų mišinį su bent vienu antiopiniu medikamentu arba bent vienu antibakteriniu junginiu ar jų mišiniu, o taip pat su farmaciškai priimtinu nešikliu.

Terminas antiopinis medikamentas reiškia medžiagą ar kompoziciją, kuri gali sumažinti arba dalyvauti sumažinant opų susidarymą virškinimo trakte, ypač opų susidarymą skrandyje ir dvylikapirštėje žarnoje. Farmacinė kompozicija pagal šį išradimą, turinti tokias medžiagas ar kompozicijas, yra potencialiai pranašesnė, kadangi gali duoti dvigubą efektą: iš vienos pusės mažina opų susidarymą, o iš kitos pusės kartu mažina skrandžio užkrėtimo H. pylori laipsnį, neleisdama bakterijoms prilipti ar mažindama jų lipnumą prie skrandžio ir dvylikapirštės žarnos gleivinės, kas toliau gerina opaligės gydymą. Tinkamais antiopiniais medikamentais yra skrandžio sekreciją slopinantys junginiai (pirmiausia rūgšties sekreciją slopinantys junginiai) ir antacidai.

Pagal labiau priimtiną šio išradimo panaudojimo aspektą paruošta farmacinė kompozicija pritaikoma įvesti kartu su preparatu, paprastai naudojamu gydant gastritą ar opaligę, tokiu kaip preparatai, turintys antiopinius ar antigastritinius medikamentus, pvz., iš skrandžio sekreciją slopinančių junginių tarpo, kaip antai: omeprazolis, cimetidinas, ranitidinas, lansoprazolis, pantoprazolis, sukralfatas, famotidinas ar nizatidinas, arba antacidai, kaip antai: magnio hidroksidas, aliuminio hidroksidas, kalcio karbonatas, natrio karbonatas, natrio hidrokarbonatas, simetikonas arba aliuminio magnio hidroksidas ar jo hidratas (toks kaip monohidratas, žinomas kaip magaldratas).

Pagal kitą labiau priimtiną šio išradimo panaudojimo aspektą paruošta farmacinė kompozicija pritaikoma įvesti kartu su preparatu, naudojamu gydymo kursuose su antikabteriniu preparartu, tokiu kaip antibakteriniai preparatai, pateikti aukščiau, konkrečiai preparatai, turintys β laktaminių antibiotikų, tokių kaip amoksicilinas, ampicilinas, cefalotinas, cefakloras ar cefiksimas; arba makrolidų, kaip antai: eritromicinas ar klaritromicinas; arba tetraciklinų, kaip antai: tetraciklinas ar doksiciklinas; arba aminoglikozidų, kaip antai: gentamicinas, kanamicinas ar amikacinas; arba chinolonų, kaip antai: norfloksacinas, ciprofloksacinas ar enoksacinas; arba kitų medžiagų, kaip antai: metronidazolis, nitrofurantoinas ar chioramfenikolis; arba preparatų, turinčių bismuto druskų, tokių kaip bismuto subcitratas, bismuto subsalicilatas, bismuto subkarbonatas, bismuto subnitratas ar bismuto subgalatas.

Dar kitu aspektu junginiais, kurie Ib, Ic, Id, le ir išradimas aprašomi

If formulėmis.

susijęs aukščiau su visais naujais apibrėžtomis Ia,

Junginiai, aprašomi Ia, Ib, Ic, Id, le ir If formulėmis, gali būti pagaminti pagal kelis bendrus būdus, panaudojant monosacharidus ar oligosacharidus kaip pradines medžiagas. Funkcinių grupių transformacijos gali būti atliktos prieš arba po glikozidinių jungčių suformavimo. Kad būtų transformuojamos funkcinės grupės tam tikrose vietose, pasirinktinai gali tekti vykdyti reakcijas, kurios specifinės tam tikroms vietoms, arba panaudoti blokavimą su blokuojančiomis grupėmis. Blokuojančios grupės gali būti pašalintos arba gali sudaryti dali, aptariamo junginio.

Šio išradimo junginiai gali būti gauti, pavyzdžiui, pagal schemą pateiktą žemiau. Nors šioje schemoje gali būti parodyti konkretūs pakaitai ar konfigūracija, reikia ją suvokti su atitinkamu bendrumo laipsniu, įvairios grupės gali įgyti reikšmes iš pilno diapazono, kaip apibrėžta bendrose Ia, Ib, Ic, Id, le ir If formulėse.

MONOSACHARIDAI stadija

OH OH stadija

Ra stadija

Pirmoje stadijoje monosacharidas, pvz., L-fukozė, D-galaktozė, D-gliukozė, 2-dezoksi-2-ftalimid-D-gliukozė,

2-dezoksi-2-ftalimid-D-galaktozė, D-manozė, paverčiamas glikozidu, su aglikonais (Ra) pvz., SEt, SPh, OTMSEt, O-alilas ar OBn (žinomi aglikonai šioje srityje), kad gautų R_a-glikozidinį darinį taip, kad šį R_a-glikozidą būtų galima transformuoti i glikozido donorą aktyvuojant anomerini centrą. Ši R_a-glikozidą galima paruošti taip: aukščiau aprašytas monosacharidas per-Oacilinamas su acetanhidridu piridine arba su acetanhidridu-natrio acetatu arba su benzoilo chloridu piridine. Per-O-acilintas monosacharidas veikiamas su, pvz., vandenilio bromidu ar vandenilio chloridu tinkamame tirpiklyje, pavyzdžiui, acto rūgštyje ar dichlormetane, kad susidarytų per-O-acilinto glikozido bromidas ar chloridas (pvz., apie O-acilinimą ir glikozidų halogenidų sintezę žr. M. L. Wolfrom ir A. Thompson, Methods in Carbohydrate Chemistry, Vol. 2, 211-215, red. R.I.Whistler ir M.L. Wolfrom, Academic Press, New York, 1963, G. Hewit ir G. Fletcher Jr., ten pat, 226-228, ir R.U.Lemieux, ten pat, 223-224). Aglikonas (Ra) prijungiamas prie monosacharido reaguojant tinkamam tioalkoholiui ar alkoholiui, pvz., HSEt, HSPh, HSPh, HOTMSEt, HO-alilas ar HOBn, su per-Oacilintu monosacharidu, panaudojant Liuiso rūgšti, kaip antai boro trifluorido eteris (žr. pvz., R.J. Ferrier ir R.H. Furneaux, Carbohydr. Res. 52(1976), 63-68,

J. Dahmen, T. Frejd, G. Gronberg, T. Lave, G. Magnusson, ir G. Noori, Carbohydr. Res. 116(1983), 303-307), ar trimetilsililo trifluormetansulfonatas (žr. T. Ogawa, K. Beppu, S. Nakabayshi, Carbohydr. Res. 93 (1981), C6-C9), kaip promotorius. Reakcija vykdoma tinkamuose tirpikliuose, tokiuose kaip chloroformas, dichlormetanas ir/arba toluolas. Kai aptariamas monosacharido darinys yra per-O-acilintas glikozido bromidas ar chloridas, gali būti panaudoti tokie promotoriai, kaip sidabro trifluormetansulfonatas ar gyvsidabrio(II) druskos (žr. pvz., H. Paulsen, Angew, Chem. Int. Ed. Engi. 21 (1982), 155-173), ir reakcijos vykdomos tinkamuose tirpikliuose, kaip antai dichlormetane ir/arba toluole.

Monosacharido R_a-glikozidai gaunami po dez-O-acilinimo, panaudojant natrio metoksidą (žr. pvz., Thompson, M. L. Wolfrom, ir E. Pascu, Methods in Carbohydrate Chemistry, Vol. 2, 215-220, red. R.L. Vihistler ir M.L. Wolfrom, Academic Press, New York, 1963) metanolyje arba metanolyje, turinčiame papildomų tirpiklių, kaip antai dichlormetano ar tetrahidrofurano.

Antroje stadijoje monosacharido R_a-glikozidas toliau modifikuojamas. Įvedamos naujos funkcinės grupės (Rb) , kurios sudarys dali, galutinio produkto arba veiks kaip blokuotės tolesniuose giikozilinimo žingsniuose. Funkcinių grupių transformacijų pavyzdžiai yra: OH-grupes i, eterius ar esterius (žr. pvz., Protective Groups in Organic Synthesis red. T.W. Greene ir P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons INC., New York, 1991), OH-grupes i, karbonatus (žr. pvz., J.March, Advanced Organic Chemistry Reaction Mechanisms, ir Structure, 347, 3-čias leidimas, John Wiley & Sons, New York, 1985, ir ten esančias nuorodas), redukcinis OH-grupių pašalinimas per halogenidus, sulfonatus ar kitais keliais (žr. pvz., J.March, Advanced Organic Chemistry - Reaction Mechanisms and Structure, 389-392, 394, 3-čias leidimas, John Wiley & Sons, New York, 1985, ir ten esančias nuorodas ir H.H. Baer, Pure Appl. Chem. 61(7) (1989), 1217-1234, ir ten esančias nuorodas), OH-grupes į halogenus (žr. pvz., J. March, Advanced Organic Chemistry - Reaction Mechanisms, and Structure, 381-286, 3-čias leidimas, John Wiley & Sons, New York, 1985, ir ten esančias nuorodas), OH-grupes i azidogrupes (žr. pvz., J. March, Advanced Organic Chemistry - Reaction Mechanisms, and Structure, 380, 3-čias leidimas, John Wiley & Sons, New

York, 1985, ir ten esančias nuorodas, ir H.H. Baer, Pure Appl. Chem. 61(7) (1989), 1217-1234, ir ten esančias nuorodas), OH-grupes į aminogrupės per azidus ar kitais keliais (žr. pvz., J. March, Advanced Organic Chemistry - Reaction Mechanisms, and Structure, 798800, 1106, 3-čias leidimas., John Wiley & Sons, New York, 1985 ir ten esančias nuorodas, ir H.H. Baer, Pure Appl. Chem. 61(7) (1989), 1217-1234, ir ten esančias nuorodas) OH-grupes į ketogrupes (oksogrupes) (žr. pvz., J. March, Advanced Organic Chemistry - Reaction Mechanisms, and Structure, 1048-1120, 3-čias leidimas, John Wiley & Sons, New York, 1985, ir ten esančias nuorodas). OH-grupes į eksometileno darinius per ketogrupes ar kitais keliais (žr. pvz. J. March, Advanced Organic Chemistry - Reaction Mechanisms, and Structure, 400-404, 407, 845-854, 3-čias leidimas, John Wiley & Sons, New York, 1985, ir ten esančias nuorodas), OH-grupes į alkilų grupes per eksometileno darinius ir vėlesni, hidrinimą arba per kitus kelius (žr. pvz., H. O. House, Modern Synthetic Reactions,

1-130, 2-as leidimas, W. A. Benjamin, Ine., Menlo Park.

C.A., 1972, ir ten esančias nuorodas, arba J. Yoshimura, Adv. Carbohydr. Chem. Biochem. 42 (1984), 69-134), ir OH grupių pakeitimas heterociklinėmis grupėmis per skirtingus kelius (žr. pvz., A. R. Katrizky, Handbook of Heterocyclic Chemistry, Pergamon Press, Oxford, 1985) .

Trečioje stadijoje atliekama R_a-glikozidų, kurie turi aprašytų aukščiau funkcinių grupių (Rb) (blokuojančios grupės, žinomos šioje srityje) pakaitus, kondensacija. O-glikozidinio ryšio atveju: vienas R_a-glikozido darinys transformuojamas į glikozilo donorą, aktyvuijant jo anomerinį centrą, ir veikiamas kitu R_a-glikozidu, kuris buvo transformuotas į glikozilo akceptorių, pašalinant vieną ar kelias blokuotes (žr. pvz., H. Paulsen, Angew. Chem. Int. Ed. Engi. 21 (1982), 155-173, R.R. Schmidt,

Angew, Chem. Int. Ed. Engi. 25 (1986), 212-235, P. Fugedi, P. J. Garegg, H. Lonn, ir T. Norberg, Glycoconj. J. 4 (1987),97-108, Protective Groups in Organic Synthesis, red., T. W. Greene ir P. G. M. Wuts, John Wiley & Sons, Ine., New York, 1991). Apie C-glikozidinius ryšius žr., R. R. Smidth, ir G. Effenberger, Liebigs Ann. Chem. (1987), 825-831, S. Czernecki, ir G. Ville, kompozit medžiag (1989), 610-612, R. Preuss, ir R. R. Schmidt

Carbohydr. Chem. 10(5) (1992), 887-900, O. Martin, ir

W. Lai, J. Org. Chem 58 (1993), 176-185, arba C. R. Bertozzi, P. D. Hoeprich, Jr., ir M.D. Bednarski, <7. Org. Chem 57 (1992), 6092-6094. Apie S-glikozidinius ryšius žr., pvz., L-X Wang, N. Sakairi, ir H. Kuzuhars, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 (1990), 1677-1982, arba

M. Blanc-Meusser, L. Vigne, H. Driguez, J. Lehman, J. Streck, ir K. Urbahns, Carbohydr. Res. 224 (1982),

59-71. Tolimesni glikozidiniai ryšiai gali būti įvesti pakartojant trečią žingsnį.

Ketvirtojoje stadijoje įvedami pakaitai (R_c) redukuojančiame gale. Rc apibrėžiamas kaip (Ζχ-Ζ₁₆)-R, kur R ir Ζχ-Ζ₁₆ apibrėžimai duoti junginiuose Ia, Ib, Ic, Id, Ie ir If. Terminas (Ζχ-Ζ₁₆)-R turi būti interpretuojamas kaip Ζχ-R, Z₂-R, Z₃-R, . . . Z₁₆-R. Aktyvuojant oligosacharido R_a-glikozido darinį, gautą 3 žingsnyje, redukuojančio galo anomeriniame centre ir veikiant su tinkamu nukleofilu gaunami 0-, C-, S- ar N- glikozidiniai dariniai, atitinkamai. Jei reikia, galutinis produktas gaunamas pašalinus blokuojančias grupes. Kai išradimo junginys yra junginyje su tam tikra matrica, tai R_cglikozido darinys toliau transformuojamas įvairiais keliais į galutinį produktą (žr. pvz., Y. G. Lee, ir R. T. Lee, Glycoconjugatęs, 121-164, redaguota H. J. Allen, ir E. C. Kisailus, Dekker, New York, 1992, R. Roy, F. D. Tropper, ir A. Romanowska, J. Soc. Chem. Commun. (1992), 1611-1613, arba C. P. Sotwell ir Y. C. Lee,

Adv. Carbohydr. Chem. Biochem., Vol. 37 (1980), 225-281).

Kopolimerizacijos reakcijos ruošiant kopolimerus iš akrilamido ir mono-, di-, tri- ar oligosacharidų glikozidų su ar be tarpiklio pagal žinomus būdus, pavyzdžiui, aprašytus E. Kallin, H. Lonn, T. Norberg ir M. Elofsson, J. Carbohydr. Chemistry S (4), 597-611 (1989) arba M. Andersso ir S. Oscarsson, Bioconjugate Chemistry, vol. 4 (3), 246-247 (1993). Pagal bendrą strategiją ruošiant šiuos junginius prie angliavandenilio buvo prijungiama olefininė grupė ir tada šis darinys buvo kopolimerizuojamas su akrilamidu. Olefinė grupė buvo įstatoma į angliavandenį arba kaip alilglikozidas ankstyvoje stadijoje akriloilinant mono-, di-, tri- ar oligosacharidų darinių amino funkcines grupes arba kitais žinomais būdais.

Kaip pažymėta aukščiau farmaciniai preparatai, turintys junginius, aprašomus bendromis Ia, Ib, lc, Id, Ie ir If formulėmis, sudaro kitą išradimo aspektą.

Šio išradimo junginiai gali būti skirti bendram ar vietiniam organizmo poveikiui ir labiau priimtini jų įvedimo būdai yra oralinis, injekcijų, rektalinis, per odą, infuzinis ar inhaliacinis, vartojami kaip farmaciniai preparatai, turintys veikliuosius ingredientus pradinių junginių ar jų farmaciškai priimtinų druskų pavidale kartu su farmaciškai priimtinu nešikliu, kuris gali būti kieto, pusiaukieto ar skysto būvio arba praryjama kapsulė, ir tokie preparatai sudaro kitą išradimo aspektą. Farmaciškai priimtini nešikliai, žinoma, turi būti pakankamai didelio grynumo ir pakankamai mažo toksiškumo, kad tiktų įvesti žmonėms ir gyvūnams, kuriuos reikia gydyti. Junginiai taip pat gali būti vartojami be nešiklių. Kaip pavyzdžiai farmacinių preparatų gali būti paminėtos tabletės, kapsulės, dražetės, tirpalai, lašeliai, kaip lašeliai i nosį, aerozoliai inhaliacijoms, purkštuvas į nosį, liposomos ir kt. Paprastai veiklioji medžiaga turi preparato tarp 0,01 ir 99% pagal svori,, pvz., tarp 0,05 ir 20% pagal svori, preparatuose, skirtuose injekcijoms ir tarp 0,1 ir 50% pagal svori, preparatuose, skirtuose oraliniuam vartojimui.

Geriau, kai preparatai yra dozuoti, ar tai būtų vienos dozės preparatai ar kelių dozių preparatai.

Gaminant dozuotus farmacinius preparatus, skirtus oraliniam vartojimui ir turinčius išradimo jungini,, veiklusis ingredientas gali būti sumaišomas su Įprastai naudojamais kietais dulkių pavidalo nešikliais, pvz., laktoze, sacharozė, sorbitu, manitu, krakmolu, kaip antai: bulvių krakmolas, grūdinis krakmolas, amilopektinas, laminarijos milteliai ar citrusinės masės milteliai, celiuliozės dariniu arba želatina ir taip pat gali turėti tepalų, kaip magnio ar kalcio stearatas arba Carbowax® ar kitų polietilenglikolio vaškų, ir suslėgtas, kad suformuotų tabletes ar dražečių šerdą. Jei reikalingos dražetės turinys gali būti padengtas, pvz., koncentruotais cukrų tirpalais, kurie gali turėti gumiarabiką, talką, ir/arba titano dioksidą, ar, kitu atveju, plėvelę formuojančiu reagentu, ištirpintu lakiuose organiniuose tirpikliuose ar organinių tirpiklių mišiniuose. Į šiuos apvalkalus gali būti pridėti dažai, pvz., kad būtų galima atskirti skirtingos veikliosios medžiagos turinius. Ruošiant minkštas želatinines kapsules, sudarytas iš želatinos ir, pvz., glicerino bei plastifikato, arba panašiai padengtas kapsules, veiklioji medžiaga gali būti sumaišoma su Carbowax® arba tinkamais aliejais, pvz., sezamo, alyvų arba arachiso aliejus. Kietos želatinines kapsulės gali turėti veikliosios medžiagos granules su kietais dulkių pavidalo nešikliais, pvz., laktoze, sacharozė, sorbitu, manitu, krakmolais, kaip antai: bulvių krakmolas ar grūdinis krakmolas, ar amilopektinas, celiuliozės dariniais arba želatina ir taip pat gali turėti tepalų, kaip magnio stearatas arba stearino rūgštis.

Šio išradimo preparatai gali būti ruošiami taip, kad atpalaiduotų veikliąją medžiagą greitai, ištęstai ar po tam tikro laiko Įvedus pacientui preparatą, pagal gerai žinomas procedūras.

Panaudojant kelis veikliųjų vaistų sluoksnius, atskirtus lėtai tirpstančiais apvalkalais, gaunamos tabletės su ištęstu atpalaidavimu. Kitas tablečių, su ištęstu atpalaidavimu, gamybos būdas - tai sudalinti veikliosios medžiagos dozę į granules su skirtingo storumo apvalkalais ir suslėgti granules į tabletes kartu su nešikliu.

Veiklioji medžiaga taip pat gali būti įjungiama i lėtai tirpstančias tabletes, padarytas, pvz., iš riebalinių ir vaškinių medžiagų ar tolygiai paskirstytos tabletės iš netirpios medžiagos, kaip antai fiziologiškai inertiškos plastikinės medžiagos.

Skysti preparatai, skirti vartoti orališkai, gali būti eliksyro, syrupo ar suspensijos pavidale, pvz., tirpalų, turinčių apytiksliai nuo 0,1% iki 20% pagal svorį veikliosios medžiagos, cukraus, o taip pat etanolio, vandens, glicerino, propilglikolio mišinio bei pasirinktinai kvepiančiųjų medžiagų, sacharino ir/arba karboksimetilceliuliozės, kaip disperguojančio agento. Preparatai papildomai gali turėti drėkinančių medžiagų, emulgatorių ir suspenduojančių junginių, konservantų ir saldinančių medžiagų.

Preparatai, skirti parenterialiniam Įvedimui įšvirščiant, gali turėti aktyviosios medžiagos vandeniną tirpalą ar jo fiziologiškai priimtiną druską, pageidautina 0,5-20% koncentracijos ir taip pat pasiLT 3446 B rinktinai stabilizuojantį agentą ir/arba buferinę medžiagą vandeniniame tirpale. Geriausia, kai dozuoti tirpalo vienetai uždaryti ampulėse.

Turimos ribotos žinios, apie junginius, kurie slopina Helicobacter pylori lipnumą prie gleivinės paviršiaus, ir kurie yra naudingi apsaugant ar gydant virškinimo trakto sutrikimus ir ligas, sukeltus ar skatintus Helicobacter pylori. Dėl šių ribotų žinių įvedamos veikliosios medžiagos dozės gali kisti plačiu mastu ir priklausyti nuo įvairių faktorių, pvz., infekcijos stiprumo, paciento amžiaus ir t.t., ir gali tekti jas pritaikyti individualiai.

Labiau priimtina, kai farmacinės kompozicijos pagal išradimą turi nuo 1 mg iki apytiksliai 50 g, geriau nuo apytiksliai 10 mg iki apytiksliai 5 g veikliosios medžiagos per dieną ir gali būti sudalintos i daug dozių.

Toliau išradimas iliustruojamas neapribojančiais pavyzdžiais.

žemiau einančiais

R = OMe

NH₂ χ CH₃COOh

15-18

OBn I OBn

H₃C

OBn ^SEl

OBn = OCHjPh

OBn

R = °^^z^Si(CH₃)3

O

Οθζ e O Ph

R ^β θ'^νΖ^ Si(CH₃)₃

NHAc =

O

CH₃ ₀Bn= OCHjPh

R =

R = SEt •SEt

O

OAc =

O

OBn

H₃C

19 R = SEt	21 R = OMe
20 R = OMe	OBn= OCH₂Ph
23 ^R =	0 Jį NHAc = HN i
OBn = OCH₂Ph
0 OAc= o^ACH₃	OH Įho H₃C O

NHAc

R = OMe

R «

^Bn?^OBn 8nO -K»»· SEt OR,	^Bn?<^OBn OR,
25 R, = Ac	27 R, = Bz. R₂ = -CH₂CH₂N₃
26 R, = Bz	28 R, = H. R₂ = -CH₂CH₂N₃ 32 R, = Bz. R₂ = -(CH₂CH₂O)₂CH₂CH₂N₃ 33 R, = K, R₂ = -(CH₂CH₂O)₂CH₂CH₂N₃

r₂ = -ch₂ch₂nh₂r₂ = -CH₂CH₂NHCOCH₂R₂ = -(CH₂CH₂O)₂CH₂CH₂N₃R₂ = -(CH₂CH₂O)₂CH₂CH₂NH₂R₂ = -(CH₂CH₂O)₂CH₂CH₂NHCOCHCH₂

o

NPhth = n'jT j

R, = Ac R₂ = NPhth

R, = OH R₂ = NHAc

46	R, = Bn	r₂ = n₃	R₃ = CHPh
47	R, = Bn	R₂ = NHCOCFj	Rj = CHPh
48	R, = H	R₂ = NHCOCFj	Rj = H
49	R, =H	r₂ = nhcochch₂	R₃ = H

R, = H 51 R, =H

R₂ = NHAc R₃ . R₄ = CHPh R₂ = NHAc R₄ = H R₃ = OBn

52	R, = Bn	r₂ = n₃ r₄ =	Bn
53	R, = Bn	R₂ = NHCOCFa	R₄ =Bn
54	R, =H	r₂ = nhcocf₃	r₄ = h
55	fi, = H	r₂ = nhcoch₂	r₄ = h

OH

Fucal -2Gaipi -3(Fuca1 -4)GlcNAcpi -3Gaipi -4Glcp-R,

Ri = OH

R, = NH₂

R, = NHCOCHCH₂

42	r₂₌ Fucal -2Galp1-3(Fuca1-4)GlcNAcpi-3Gaipi-4Glcpi -NH	H₂N-i J
38	R₂ = Fucal-2Gaipi-O(CH₂CH₂O)₂CH₂CH₂NH
58	R₂ = Fucal-2Gaipi-CH₂CH₂NH	1 h₂n-< ^c 1
50	R₂ « Fucal-2Gaipi-3GlcNAcpi-CH₂CH₂NH	< h₂n—(
56	R₂ = Fucal -2Gaipi -3(Fuca1 -4)GlcNAcpi -CH₂CH₂NH	(

0=0 0=0 0=0 0=0

Bendri metodai ¹H ir ¹³C BMR spektrai 1-6 pavyzdžiuose buvo užregistruoti su Varian Gemini 300 spektrometru ir su Varian Unity 400 MHz spektrometru. 1-6 pavyzdžiuose buvo panaudoti šie atraminiai signalai: CHC13, δ 7,25 (^XH iš CDC13); CHC1₃, δ 77,9 (¹³C iš CDC1₃) ; (CH₃)₂CO, δ

2,24 ar CHD₂OH δ 3,31 (^XH iš D₂O) ; (CH₃)₂CO, δ 33,19 ar

CHD₂OH δ 51,89 (¹³C iš D2O) ; CHD2OH δ 3,31 (^TH iš CD3OD) .

H ir C BMR spektrai visuose kituose pavyzdžiuose buvo registruojami prie 25°C CDC1₃ terpėje (naudojant tetrametilsilaną kaip ³H vidinį standartą, o CDC1₃ δ 77,9 dėl ¹³C) . Visiems junginiams užregistruoti BMR spektrai atitiko postuluotas struktūras ir pateikti tik atrinkti duomenys. Masės spektrai, skirti nustatyti angliavandenių komponentų pakeitimo laipsnį prieš proteinus, buvo gauti su VG TOFSPEC tiesinės skriejimo trukmės masės spektrometru. FAB-MS buvo atliekamas su Nergman 1010L, su Iontech FAB patranka ir tioglicerolio matrica. Poliarizacijos plokštumos sukimas buvo matuojamas panaudojant Perkin Elmer 241 poliarimetrą. Plonasluoksnė chromatografija (TLC) buvo atliekama su Merk DC-Fertigplatten (Kiselgel 60 F254 0,25 mm) ir dėmės buvo vizualizuojamos UV arba apipurškiant 10% sieros rūgštimi ir po to pašildant arba apipurškiant fosfomolibdeno rūgštimi ar ninhidrinu n.butanolyje (0,5%). Kolonėlių chromatografijoje buvo naudojami silikagelis 60 (40-63 λτη) ir Amicon Matrex® Silicia Si 0,35-0,70 m.

Atskyrimas buvo taip pat atliekamas su Chromatotron® sukamuoju TLC, panaudojant 1-2 mm silikagelio 60 PF254 sluoksnį su gipsu. Visos Biogel® P-2 kolonos buvo išplaunamos su 1% n.butanoliu dejonizuotame vandenyje, jei nepasakyta kitaip.

PAVYZDYS

Metilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0-a-L-fukopiranozil-p-Dgliukopiranozidas (4) (i) Metilo 4,6-O-benziliden-3-O-(tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-2-dezoksi-2-ftalimid-P-D-gliukopiranozidas (2)

Trifluormetansulfoninė rūgštis (2 μΐ 0,023 mmol) pridedama prie sumaišyto etilo 3-0-(tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-4,6-0-benziliden-2-dezoksi-2-ftalimid-l-tioβ-D-gliukopiranozido (1) (100 mg, 0,117 mmol), (paruošto pagal H. Lonn, Carbohydr. Res. 139 (1985), 105-113), metanolio (7 μΐ, 0,175 mmol), N-jodsukcinimido (40 mg, 0,175 mmol) ir sutrintų molekulinių sietų (100 mg, 3 A) mišinio dichlormetano-dietilo eteryje (3 ml, 2:1) prie -30°C. Po 45 min, reakcijos mišinys nufiltruojamas per Celito sluoksnį į vandeninį natrio hidrokarbonato ir natrio bisulfito tirpalą. Organinis sluoksnis atskirtas, praplautas vandeniniu natrio chloridu ir koncentruojamas. Kolonėlių chromatografijos (toluolasetilacetatas, 20:1) liekana davė amorfinį (2) (93 mg,

97%), [a] „-16,2° (c 1,0, CHClj) .

H BMR duomenys (CDC1·,, δ) : 7,80 iki 7, 0 (24H, benzilas ir ftaloilas), 5,29 (d, 1H, J 8,6 Hz, H-l), 4,84 iki 4,25 (5H, CH₂Ph), 4,84 pis, 1H, H-l), 4,66 (dd, 1H, J 8,5 ir 10,3 Hz, H-3) , 4,48 iki 4,43 (m, 1H, H-3' ) , 4,35 (dd, 1H, J 8,6 ir 10,3 Hz, H-2), 4,08 (pldd, 1H, J 6,4 ir 13,0 Hz, H-5') , 3,91 iki 3,81 (2H) , 3,78 iki 3,66 (4H), 3,51 iki 3,47 (1H), 3,48 (s, 3H, OCH₃) , 0,90 (d, 3H, CH₃) .

C BMR duomenys (CDC1,, δ) :168,0 (CO), 138,8 iki 123,0 (benzilas), 101,1 (CHPh), 99,7 (C-l ' ), 99,4 (C-l),

82,1, 79, 5, 78,0, 75,7, 75,5, 74,6, 73,0, 72,5, 68,6,

67,2 (C-5'), 66,1, 56,9 (OCH₃) , 55,5(C-2), 16,3(CH₃).

(ii) Metilo 2-acetamid-3-0-(2, 3, 4-tri-O-benzil-a-fukopiranozil)-4,6-0-benziliden-2-dezoksi-p-D-gliukopiranozidas (3)

Tirpalas, sudarytas iš (2) (1,13 g, 1,36 mmol) ir hidrazino hidrato (3,3 ml, 68 mmol) vandeniniame 59% etanolyje, virinamas su grįžtamuoju šaldymu 20 h, atšaldomas ir koncentruojamas. Likutis acetilinamas acetanhidridu-piridinu (50 ml, 1:1) per naktą. Tirpalas sukoncentruojamas ir kolonėlių chromatografijos (heptanas-etilacetatas, 1:1 likutis davė neapdorotą (3), kuris buvo naudojamas tiesiog kitoje stadijoje.

³H BMR duomenys (CGC1₃, δ) : 7,50 iki 7,23 (20H, benzilas), 5,71 (d, 1H, J 7,4,NH), 5,52 (s, 1H, CH₂Ph), 5,09 (d, 1H, H-l'), 4,85 iki 4,58 (6h, CH₂Ph) , 4,82 (d, 1H, H-l), 4,37 (dd, 1H, J 4,6 ir 10,4 Hz, H-6), 4,28 (bt, 1H, H-3), 4,12 iki 4,05 (2H, H-2' ir H-5' ) , 3,95 (dd, 1H,

J 2,6 ir 10,2 Hz, H-3'),	3,78	(bt, 1H, H-6), 3,63 (bs, 1H,
H-4'), 3,60 (bt, 1H,	H-4)	, 3,53 (m,1H, H-5),	3, 48
(s, 3H, OCH₃), 3,42 (ddd,	1H,	J 7,2, 8,2 ir 9,5 Hz.,	H-2) ,
1,67 (s, 3H, NHAc), 0,84	(d,	3H, CH₃) .
¹³C BMR duomenys (CDC1₃) ,	δ) :	170,6 (CO), 138,6 iki	126,2
(benzilas), 101,8 (C-l),	101,	6 (CHPh), 98,4 (C-l'),	80, 8

(C-4), 79,8 (C-3'), 77,6 (C-4' ) , 77,0 (C-2 ' ar C-5' ) ,

75.1 (C-3), 74,9 (CH₂Ph) , 72,5 (CH₂Ph) , 68,8 (C-6) , 66,9 (C-2' ar C-5'), 66,2 (C-5), 58,1 (C-2), 57,0 (OCH₃) ,

23.2 (NHAc) , 16,3 (CH₃) .

(iii) Metilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0-a-L-fukopiranoζίΙ-β-D-gliukopiranozidas (4)

Tirpalas, sudarytas iš neapdoroto (3) (1,05 g) acto rūgštyje-etilo acetate-vandenyje (9:5:1, 120 ml) hidrogenolizuo j amas prie 200 kPa 10% Pd/C (1 g) per naktį. Mišinys nufiltruojamas per Celio sluoksnį ir sukonLT 3446 B centruojamas. Kolonėlių chromatografijos (chloroformasmetanol is-vanduo, 65:35:6) likutis davė amorfini, (4) (469 mg, 90% skaičiuojant nuo (2), [ a] _n - 116, O¹ ¹ (c 1,0, vanduo).

H BMR duomenys (D_?O, acetonas atramin.	δ,): 4,99	(d,
1H, J 4,0 Hz, H-l'), 4,46 (d, 1H, J 8,7	Hz, H-l),	4, 33
(bdd, 1H, H-5'), 3,98 iki 3,45 (9H),	3,51 (s,	3H,
OCH,), 2,03 (s, 3H, NHAc), 1,17 (d, 3H, CH-,) .

'’c BMR duomenys (D₂0, acetonas atramin., δ)177,6 (CO), 104,7 (C-l), 102,9 (C-l'), 83,5, 78,8, 74,7, 72,5,

71,6, 70,9, 69,9, 63,7, 60,0, 59,1 (C-2) , 25,2 (NHAc) ,

18, 1 (CH-,) .

PAVYZDYS

3,3-Dimetilbutilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0-a-L-fukopiranozil-p-D-gliukopiranozidas (7) (i) 3,3-Dimetilbutilo 3-0-(2,3,4-tri-O-benzil-a-fukopiranozii)-4,6-O-benziliden-2-dezoksi-2-ftalimid-3-D-gliukopiranozidas (5)

Tri fluormetansulfoninė rūgštis (30 μΐ 0,35 mmol) pridedama prie sumaišyto (1), 3,3-dimetil-butan-l-olio (317 μΐ, 2,62 mmol), N-jodsukcinimido (602 mg, 2,62 mmol) ir sutrintų molekulinių sietu (1,5 mg, 3 A) mišinio dichlormetano -dietilo eteryje (2:1, 45 ml) prie -30°C. Po 45 min, reakcijos mišinys buvo filtruojamas per Celito sluoksnį į vandeninį natrio hidrokarbonato ir natrio bisulfido tirpalą. Organinis sluoksnis atskirtas, praplautas vandeniniu natrio chroridu ir koncentruojamas. Kolonėlių chromatografija (heptanasetilacetatas, 6:1) likutis davė amorfinį (5) (1,42 g,

90%) , [ a] -22,2 (c, 1, 0, CHC1-,) .

^ΤΗ BMR duomenys (CDC1₃, δ) : 7,80 iki 7,0 (24H, benzilas

ir ftaloilas), 5,57 (s, 1H, CHPh), 5,35	(d,	1H, J	8,5
Hz, H-l), 4,84 (bs, 1H,	H-l'), 4,83	iki	4,24	(5H,
CH₂Ph) , 4, 65 (dd, 1H, J 8,3	ir 10,3 Hz,	H-3), 4,34	(dd,
1H, J 8,5 ir 10,4 Hz, H-2),	4,07 (dd, 1H	, J 5,5 ir	10,4

Hz, H-5'), 3,96 iki 3,66 (7H, persiklojantis OCH₂) ,

3,53 iki 3,45 (2H, persiklojantis OCH₂) , 1,46 iki 1,29 (m, 2H, CH₂C(CH₃)₃), 0,88 (d, 3H, J 6,4 Hz., CH₃) , 0,73 (s, 9H, CH₂C(CH₃)₃).

¹³C BMR duomenys (CDC1₃, δ): 168,0 (CO), 138,8 iki 123,0 (benzilas ir ftaloilas), 101,1 (CHPh), 99,4 (C-l'),

98,9 (C-l), 82,1, 79, 5 76, 0 75,7 (C-3) , 75,6, 74, 6, 73,0, 72,6, 68,7, 67,3 (OCH₂) , 6,72 (C-5) , 66,2, 55,8 (C-2), 42,4 (CH₂C(CH₃)₃) , 30,8 (CH₂C (CH₃) ₃) , 29,4 (CH₂C(CH₃)₃, 16,3 (CH₃) .

(ii) 3,3-Dimetilbutilo 3-0-(2,3,4-tri-O-benzil-a-Lfukopiranozil)-2-acetamid-4,6-0-benziliden-2-dezoksi-pD-gliukopiranozidas (6)

Tirpalas, sudarytas iš (5) (1,42 g, 1,58 mmol) ir hidrazino hidrato (3,9 ml, 79 mmol) vandeniniame 90% etanolyje (100 ml) , virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu 20 h, atšaldomas ir koncentruojamas. Likutis acetilinamas acetanhidridu-piridinu (50mi, 1:1) per naktį.

Tirpalas sukoncentruojamas. Kolonėlių chromatografija (heptanas-etilacetatas, 3:1, turintis 1% metanolio) likutis davė amorfinį (6) (1,16 g, 90%), [d]_D-74,7° (c,

1, 0, CH₃C1₃) .

*H BMR duomenys (CDC1₃, δ): 7,50 iki 7,20 (20H,

benzilas), 5,63 (d, 1H,	J 7,3 Hz, NH) , 5,51	(s,	1H,
CH₂Ph) , 5,07 (d, 1H, J	3,1 Hz, H-l'), 4,93	iki	4,57
(6H, CH₂Ph) , 4,92 (d, 1H	, H-l), 4,39 iki 4,29	(2H,	H-6
ir H-3), 4,11 iki 4,04	(2H, H-2' ir H-5’),	3, 98	iki
3, 85 (2H, H-3 ' ir OCH₂) ,	3,77 (bt, 1H, H-6), 3	, 61	(pis,

1H, H-4'), 3,55 (bt, 1H, H-4), 3,59 iki 3,44 (2H, H-5 ir OCH₂), 3,33 (pldd, 1H, H-2) , 1,63 (s, 3H, OAc) , 1,56 iki 1,40 (m, 2H, CH_?C(CH₃)₃), 0,89 (s, 9H, CH₂C(CH₃)J,

0,82 (d, 3H, CH₃) .

¹³C BMR duomenys (CDC1₃, δ): 170,4 (CO) , 138,6 iki 126,0 (benzilas), 101,6 (CHPh), 100,7 (C-l), 98,1 (C-l'),

80,9 (C-4), 79,8 (C-3'), 77,6 (C-4' ) , 77,0 (C-2' ar C5'), 74,9 (C-3), 74,8 (CH₂Ph) , 74,0 (CH₂Ph) , 72,5 (CH₂Ph) , 68,9 (OCH₂ arba H-6), 67,5 (OCH₂ arba H-6),

66,8 (C-5’ ar C-2'), 66,2 (C-5' ) , 58,6 (C-2), 42,7 (CH₂C(CH₃)₃) , 29,7 (CH₂C(CH₃)₃) , 29,6 (C(CH₃)₃), 23,2 (NHAc), 16,2 (CH₃) .

(iii) 3, 3-Dimetilbutilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0-ct-Lfukopiranozil-β -D-gliukopiranozidas (7)

Tirpalas, sudarytas iš junginio (6) (1,08 g, 1,33 mmol) acto rūgštyje:etilo acetate:vandenyj e, 9:5:1 (120ml), buvo hidrogenolizuo j amas prie 200 kPa 10% Paladžiu ant medžio anglies (Pd/C) (1 g) per naktį. Mišinys nufiltruojamas per Celito sluoksnį ir sukoncentruojamas. Kolonėlių chromatografijos (chloroformasmetanolis-vanduo, 100:30:3) likutis davė amorfinį (7) (566 mg, 94%0, [a]_D-109,7° (c, 1,0, vanduo).

^ΧΗ BMR duomenys (D₂O, acetonas atramin., δ):4,99 (d, 1H, H-l')4,84 (s, 1H, CHPh), 4,34 (bdd, 1H, H-5'), 4,02 iki

3,43 (11H), 2,01 (s, 3H, NHAc), 1,57 iki 1,41 (m, 2H,

CH₂C(CH₃)₃), 1,17 (d, 3H, CH₃) , 0,90 (s, 9H, C(CH₃)₃).

¹³C BMR duomenys (D₂O, acetonas atramin., δ) :177,3 (CO),

103,6 (C-l), 102,8 (C-l'), 83,6, 78,8, 74,8, 72,5,

71,6, 70, 9, 69, 8, 63, 7, 58, 1 (C-2), 44,9 (CHC(CH₃)₃),

31,9 (C(CH₃)₃), 31,9 (C (CH₃) ₃) , 25,2 (NHAc), 18,1 (CH₃) .

PAVYZDYS

Fucal-3GlcNAcpi-O-tarpiklis 1-BSA-junginys (11) (i) S-Azid-3,6-dioksaoktilo 3-O-tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-4,6-0-benziliden-2-dezoksi-2-ftalimid-3-D-gliukopiranozidas (8) bisulfito praplautas

Trifluormetansulfoninė rūgštis (24 μΐ, 0,27 mmol) pridedama prie sumaišyto (1) (1,15 g, 1,34 mmol), 8-azid3,6-dioksaoktan-l-olio (352 μΐ, 2,01 mmol) (paruoštas pagal P.H. Amvam-Zollo ir P. Sinai, Carbohydr. Res. 150 (1986), 199-212), N-jodsukcinimido (461 mg, 2,01 mmol) ir sutrintų molekulinių sietų (1,15 g, 3 A) mišinio dichlormetane-dietilo eteryje (30 ml, 2:1) prie -30°C. Po 1 h, reakcijos mišinys filtruojamas per Celito sluoksnį į vandeninį natrio hidrokarbonato ir natrio tirpalą. Organinis sluoksnis atskirtas, vandeniniu natrio chloridu centruojamas. Kolonėlių chromatografijos etilacetatas, 2:1) likutis davė amorfinį (8)

79%), [a]_D-21,7° (c, 1,0, CHC1₃) .

ir sukon(heptanas(1,03 g, ^:H BMR duomenys (CDC1₃, δ) :7,80 iki 7, 05 (24H, bzl,

Phth), 5,59 (S, 1H, CHPh), 5,44 (d, 1H, J 8,6 Hz, H-l),

4,83 (bs, 1H, H-l'), 4,83 iki 4,24 (5H CH₂Ph) , 4,65

(dd, 1H, J 8,5 ir 10,3 Hz,	H-3) ,	4,45 iki 4,41 (1H,
H-3' ) , 4,39 (dd, 1H, J 8,6 ir	10,3	Hz, H-2), 4,09 (dd,
1H, J 6,4 ir 12,6 Hz, H-5' ) ,	3, 99	iki 3,83 (3H, per-
siklojantis OCH₂) , 3,81 iki	3, 68	(5H, persiklojantis
OCH₂) , 3,61 iki 3,30 (11H,	persiklojantis OCH₂ ir
CH₂N₃), 0,90 (d, 3H, J 6,4 Hz,	CH₃) .

^l3C BMR duomenys (CDC1₃, δ): 169,0 (CO) , 138,9 iki 123,1 (Bzl, Phth), 101,1 (CH₂Ph), 99,4 (C-l') , 98,9 (C-l),

82, 1, 79, 6, 78,0, 75, 6, 75, 5, 74,7, 73, 1, 72,6, 70,5

70,4, 70,1, 69, 9 69, 1 68,7 67,2, 66, 2, 55, 7 (C-2),

50, 6 (CH₂N3) , 16,4 (CH₃) .

(ii) 8-Azid-3,6-dioksaoktilo 2-acetamid-3-O-(2,3,4-triO-benzil-ot-L-fukopiranozil) -4, 6-0-benziliden-2-dezoksiβ-D-gliukopiranozidas (9)

Tirpalas, sudarytas iš (8) (633 mg, 0,65 mmol) ir hidrazino hidrato (1,6 ml, 33 mmol) vandeniniame 90% etanolyje (45 ml) , virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu 24 h, atšaldomas ir koncentruojamas. Likutis acetilinamas acetanhidridu-piridinu (50ml, 1:1) per naktį.

Tirpalas sukoncentruojamas. Kolonėlių chromatografija (chloroformas-acetonas, 9:1) ir pakartotina chromatografija (etilacetatas-heptanas, 3:1) davė amorfinį (9), (440 mg, 77%), [a]_D-72,6° (s, 1,0, CHC1₃) .

³H BMR duomenys (CDC1₃, δ) :7,50 iki 7,25 (20H, benzilas), 7,92 (d, 1H, J 5,9 Hz, NH) , 5,51 (s, 1H, CHPh),

5,16 (d, 1H, J 3,5 Hz, H-l'), 4,93 (d, 1H, J 7,7, H-l),

4,95 iki 4,56 (6H, CH₂Ph) , 4,34 (dd, 1H, J 4,9 ir 10,4 Hz, H-6), 4,26 (bt, 1H, H-3), 4,12(pldd, 1H, H-5'), 4,06 (dd, 1H, J 3,6 ir 10,1 Hz, H-2' ) , 3,95 (dd, 1H, J 2,7 ir 10,1 Hz, H-3'), 3,90 (bt, 1H, H-6), 3,81 iki 3,45 (14H, persiklojantis OCH₂) , 3,40 (m, 2H, CH₂N3) , 1,74 (s, 3H, NHAc), 0,84 (d, 3H, J 6, 4 Hz, CH₃) .

¹³C BMR duomenys (CDC1₃, 5):170,4 (CO) , 138,7 iki 126,1 (benzilas), 101,5 (CHPh), 101,2 (C-l), 97,8 (C-l'),

80,6 (C-4), 79,6 (C-3'), 77,7 (C-4' ) , 76,7 (C-2' ar

C-5'), 74,9 (C-3), 74,6 (CH₂Ph) , 73,7 (CH₂Ph) , 72,2 (CH₂Ph), 70,6 (CH₂O), 70,6 (CH₂O) , 70,4 (CH₂O) , 69,9 (CH₂O), 68,8 (CH₂O), 68, 8 (H-6), 66,7 (C-2' ar C-5'),

66.2 (C-5), 57,8 (C-2), 50,6(CH₂N₃), 23,2 (NHAc),

16.2 (CH₃) .

(iii) 8-Amin-3,6-dioksaoktilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0a-L-fukopiranozil-3-D-gliukopiranozido acto rūgšties druska (10)

Tirpalas, sudarytas iš (9) (57 mg, 0,065 mmol), ištirpinto rūgštyje-vandenyje (9:1, 30 ml) buvo hidrogenolizuojamas prie 200 kPa su 10% Pd/C (100 mg) per naktį. Mišinys filtruojamas per Celito sluoksnį ir koncentruojamas. Kolonėlių chromatografija ant silikagelio (chloroformas-metanolis-vanduo, 4:4:1), ir po to ant Al₂O₃ (Merck, bazinis, 0, 063-0, 200 mm, chlorof ormas-metanolis-vanduo, 4:4:1) davė amorfinį (10) (18 mg, 51%), [ a] _D-70, 6° (c, 0,2 vanduo).

BMR duomenys (D₂O, acetonas atramin., 5):4,98 (d, 1H, J 4,0 Hz, H-l;), 4,53 (d, 1H, J 8,6 Hz, H-l) , 4,32 (pldd, 1H, H-5'), 4,05 iki 3,42 (19H), 3,19 (m, 2H, CH₂NH₂) , 2,01 (s, 3H, NHAc), 1,88 (CH₃COOH) , 1,14 (d, 3H,

J 6, 6 Hz, CH₃) .

C BMR duomenys (D₂O, acetonas atramin., δ) : 184,2 (CH₃COOH), 103,8 (C-l), 102,8(C-l'), 83, 3, 78,8, 74,8,

72, 6, 72,5, 72,4, 72, 0, 71,5, 70, 9, 69, 8, 69, 4, 63, 7, 58,1 (C-2), 42, (CH₂NH₂) , 2 6, 3 (CH₃COOH) , 25, 2 (NHAc), 25,2 (NHAc), 18,1 (CH₃) .

(iv) Fucal-3GlcNAcPl-O-tarpiklis 1-BSA-junginys (11)

Tiofosgenas (67 μΐ, 0,0856 mmol) acetone (6 ml) sulašinamas į šaldomą ledu tirpalą, sudarytą iš (10) (120 mg,

0,214 mmol) ištirpintą vandenyje-etanolyje-0,1M fosfato buferyje pH 7 (1:1:1, 30 ml). Reakcijos metu pH palaikomas netoli 6-7 vandeniniu natrio hidroksidu (1 M). Po 20 min mišinys ekstrahuojamas dietilo eteriu (30 ml), koncentruojamas iki 10 ml tūrio, ir sudedamas į tirpalą, sudarytą iš jaučio serumo albumino (695 mg,

10,7 mmol) vandeniniame natrio hidrokarbonate (15 ml,

0,1 M, pH 9,3) . Sudedant pH palaikomas apie 9 vandeniniu natrio šarmu (1M). Po 24 h iš reakcijos mišinio pašalinamos druskos uitrafiltruoj ant (Filtron, omegacell 150, 10 K) ir išdžiovinus šaldant, gautas (11) (672 mg) . Substitucijos laipsnis buvo nustatytas analizuojant cukrus (žr. M.A. Jermyn, Anai, Chem. 68 (1975), 332-335) iki 15-18 mol disachridų/mol proteinų.

PAVYZDYS

2-Trimetilsililetilo 2-acetamid-2-dezoksi-4-0-a-L-fukopiranozil-p-D-gliukopiranozidas (16) (i) Trimetilsililetilo 3,6-di-0-benzoil-2-dezoksi-2ftalimid-p-d-D-gliukopiranozidas (13)

2-Trimetilsililetil-2-dezoksi-2-ftalimid-p-D-gliukopiranozidas (12) (1,64 g, 4,0 mmol) susintetintas pagal

K. Jansson, S. Ahlfors, T. Frejd, J. Kilhberg, G. Magnusson, J. Dahmen, G. Noori ir K. Stenvall, J. Org. Chem. 53 (1988), 5629-5647) ištirpintas piridine-dichlormetane (3:1, 24 ml) ir atšaldytas iki -45°C. Per minučių pridedamas benzoilchlorido (1060 ml, 9,1 mmol) ir piridino (900 ml·) mišinys. Reakcija užbaigta po 3 valandų ir pridėta metanolio (40 ml). Tirpikliai nugarinti ir likutis garinamas kartu su toluolu 3 kartus. Likučio chromatografija (SiO₂, heptanas/etilacetatas 2:1—>1:1) davė gryną (13) (2,38 g, 96%). [ a] _D ²⁰ + 69, 4° (c, 1,2, CHC1₃) .

^LH BMR duomenys (CDC1₃, δ) : d 7,3-8,2 (m, 14H, 2 O-benzilas, N-ftalamoilas), 5,88 (dd, 1H, J 7,1, 8,3 Hz, H-3),

5,46 (d, 1H, J 8,5 Hz, H-l), 4,79 (dABq, 1H, J 4,2,

12,4 Hz, H-6), 4,67 (dABq, 1H, J 1,9 11,7, Hz, H-6) ,

4,45 (dd, 1H, J 8,4, 10,8 Hz, H-2) , 3,8-4,1 (m, 3H, H-4, H5, OCH₂CH₂), 3,57 (dt, 1H, J 7,2, 9,7 Hz, OCH₂CH₂) , 0,71,0 (m, 2H, CH₂Si), -0,15 (s, 6H, SiMe₃).

(ii) 2-Trimetilsililetilo 3,6-di-0-benzoil-4-0-(2,3,4tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-2-dezoksi-2-ftalimid-βD-gliukopiranozidas (15)

Junginys (13) ištirpintas dichlormetan-N,N-dimetilformamide (8 ml, 5:3) ir pridėti tetrabutilamonio bromidas (664 mg, 2,06 mmol) ir molekuliniai sietai (3 A, 4 g, aktyvuoti). Prie tioetilo 2,3,4-tri-O-benzil-l-tio^-Lfukopiranozido (14) (986 mg, 2,06 mmol) susintetinto pagal H. Lonn, Carbohydr. Res. 139 (1985), 105-113) dichlormetane (8 ml) tirpalo pridedamas bromas (122 ml, 2,37 mmol) dichlormetane (2 ml) . Po 15 min maišymo sulašintas cikloheksanas (distiliuotas) kol dingo bromo spalva. Šis tirpalas po to sudedamas į aukščiau aprašytą mišinį, turintį (13) junginį, ir maišomas 48 h. Mišinys filtruojamas pro Celitą, tirpikliai išgarinami ir likutis garinamas kartu su toluolu 3 kartus. Likučio kolonėlių chromatografija (heptanas/etilacetatas, 5:1—>1:1) davė (15) (896 g, 85%), [ a] ™ + 14,6° (c 1,2, CH3CI3) .

BMR duomenys (CDC1₃, 6):5,44 (d, 1H, J 8,5 Hz, H-l), 4,80 (d, 1H, J 3,6 Hz, H-l').

(iii) 2-Trimetilsililetilo 2-acetamid-2-dezoksi-4-0-(aL-fukopiranozil)-β-D-gliuokopiranozidas (16)

Junginys (15) (760 mg, 0,74 mmol) ištirpintas metanolyje (7 ml) ir pridėta natrio metoksido (220 ml, 2M metanolyje). Tirpalas maišomas per naktį kambario temperatūroje ir neutralizuotas Amberlitu IR-120(H). Nufiltravus ir išgarinus tirpiklius, gautas sirupas. Šis sirupas ištirpints acto rūgštyje (15 ml) ir pridėta 10% Pd/C (860 mg). Po 1,5 h hidrinimo (100 kPa), mišinys filtruojamas ir išgarinami tirpikliai. Gautas sirupas ištirpintas etanolyje (18 ml) ir pridėtas hidrazino hidratas. Tirpalas kaitinamas su grįžtamuoju šaldytuvu 3 h. Išgarinus tirpiklius ir 5 kartus išgarinus kartu su etanoliu, gautas sirupas, kuris ištirpintas metanolio-vandens mišinyje (5:1, 60 ml) . Pridedama acto anhidrido (5 ml) ir tirpalas maišomas 1,5 h. Tirpikliai išgarinami. Kolonėlių chromatografija (SiO₂, dichlormetanas/metanolis, 5:1) davė (16) (100 mg, 29%), [ a] ^-113,5° (c 0,7, H₂O) .

BMR duomenys (D₂O, δ) : d 4,93 (d, 1H, J 3,66 Hz,

H-l'), 4,52 (d, 1H, J 8,06 Hz, H-l).

PAVYZDYS

Metilo 2-acetamid-2-dezoksi-6-0-a-L-fukopiranozil-3-Dgliukopiranozidas (22) (i) Etilo 2-dezoksi-2-ftalimid-l-tio-p-D-gliukopiranozidas (18)

Etilo 3,4,6-tri-0-acetil-2-dezoksi-2-ftalimid-l-tio-pD-gliukopiranozidas (17) (5,79 g, 12 mmol) (gautas pagal H. Lonn, Carbohydr. Res. (1985) 139, 105-112) ištirpintas metanolyje (250 ml) ir pridėta metanolio natrio metoksido (0,2 M, 2,5 ml) . Tirpalas maišomas 15 h. Po neutralizacijos rūgštine katijonine derva (Bio-Rad AG® 50W-X8), filtravimo, garinimo ir iškristalinimo iš vandens, gautas (18) (3,83 g, 89%), lyd. t. 96°C; lyd. t. po pakartotinos kristalizacijos 159-161°C; [ a] & + 9,8° (c 0,9, metanolis) .

¹H BMR duomenys (CD₃OD, CHD₂OD stand., δ) d: 7,91-7,79 (5H), 5,32 (d, 1H, J 10,5, Hz, H-l), 4,28 (dd, 1H, J 10 ir 8 Hz, H-3), 4,05 (t, 1H, J 10,5 Hz, H-2), 3,93 (dd, 1H, J 12 ir 2 Hz, H-6), 3,73 (dd, 1H, J 12 ir 5,5 Hz, H-6) ,

3,46 (ddd, 1H, J 10, 5,5 ir 2 Hz, H-5) , 3,40 (dd, 1H, J 10 ir 8 Hz, H-4), 2,74 (dkv, 1H, J 12,5 ir 7,5 Hz,

SCH), 2,63 (dkv, 1H, J 12,5 ir 7,5 Hz, SCH) , ir 1,17 (t, 3H, J 7, 5 Hz, CH₃CH₂) .

(ii) Etilo 3,4-di-O-acetil-6-O-(2,3,4-tri-O-benzil-a-Lfukopiranozil)-2-dezoksi)-2-ftalimid-l-tio-p-D-gliukopiranozidas (19)

Prie 0°C į etilo 2,3,4-tri-O-benzil-l-tio-a-L-fukopiranozido (14) (4,5 g, 9,4 mmol) dichlormetane (70 ml) tirpalą pridėtas bromas (0,485 ml, 9,4 mmol). Mišinys maišomas 35 min ir po to du kartus garinamas su benzolu. Pridėtas cikloheksanas (0,5 ml) ir mišinys vėl garinamas su benzolu. Likutis ištirpdomas dichlormetane (25 ml) ir po to per 1 h sudedamas i maišomą mišinį, sudarytą iš junginio (18) (3,32 g, 9,4 mmol), susmulkintų molekulinių sietų (20 g. 4 A) ir tetraetilamonio bromido (3,5 g) dimetilformamide (75 ml) . Reakcijos mišinys maišomas 2 h prie 0°C, po to 2 h prie kambario temperatūros, ir vėliau filtruojamas per Celitą. Filtratas paskirstomas tarp dichlormetano ir sotaus natrio hidrokarbonato vandeninio tirpalo. Vandeninė fazė ekstrahuojama dichlormetanu ir apjungtos organinės fazės praplaunamos vandeniu bei sukoncentruojamos. Likutis buvo chromatografuoj amas (etilacetatas/heptanas; 1:1—>3:1) , kad gautųsi neapdorotas produktas, kuris buvo O-acetilinamas maišant acetananhidride (50 ml) ir piridine (75 ml) 17 h prie kambario temperatūros.

Išgarinus su toluolu ir chromatograf avus (etilacetatasheptanas; 1:2—>1:3) buvo gautas (19) (3,3 g, 40%), [ a]

4,6° (c 1,4, chloroformas).

^TH BMR duomenys (CHC1₃, δ): 7,90-7,83 (2H) , 7,79-7,71 (2H), 7, 45-7,24 (15H) , 5,83 (dd, 1H, J 10 ir 9,5 Hz, H-3) ,

5,43 (d, 1H, J 10,5 Hz, H-l), 5,09 (dd, 1H, J 10 ir 9,5

Hz, H-4), 4,99 ir	4,67 (2H, AB-sistema, J	11	,5	Hz,	ben-
žilo H) , 4,97 (d,	1H, J 3,5 Hz, H-l'),	4,	89	ir	4,77
(2H, AB-sistema,	J, 12 Hz, benzilo H) ,	4,	79	ir	4,73

(2H, AB-sistema, J, 12 Hz, benzilo H), 4,39 (t, 1H,

J 10,5 Hz), 4,06 (dd, 1H, J 10 ir 3,5 Hz), 3,97-3,87 (3H), 3,76 (dd, 1H, J 12 ir 6 Hz), 3,70-3, 62 (2H) , 2,67 (dkv, 1H, J 12 ir 7,5 Hz, SCH), 2,56 (dkv, 1H, J 12 ir

7,5 Hz, SCH), 1,98 (s, 3H) , CH₃CO), 1,87 (s, 3H, CH₃CO),

1,15 (1, 3H, J 7,5 Hz, CH₃CH₂) , 1,13 (d, 3H, J 7,5 Hz,

Fuc-CH₃) .

Apskaičiuota, %: C₄₇H₅₁NO₁₂S junginiai: C 66,1; H 6,02; N 1,64; S 3,75. Rasta; %: C 66,4; H 6,1; N 1,55; S 3,25.

(iii) Metilo 3,4-di-O-acetil-6-O-(2,3,4-tri-O-benzil-aL-fukopiranozil)-2-dezoksi-2-ftalimid-p-D-gliukopiranozidas (20)

Trifluormetansulfoninė rūgštis (0,030 ml, 0,3 mmol) pridedama prie mišinio, sudaryto iš (19) (853 mg, mmol) metanolio (0,102 ml, 2,5 mmol), N-jodsukcinimido (344 mg, 1,52 mmol) ir sutrintų molekulinių sietų (0,9 g, 4 A) dichlormetane-dietilo eteryje (2:1, 25 ml) prie -30°C. Po 2,5 h, reakcijos mišinys filtruojamas pro Celitą į vandeninį natrio hidrokarbonato ir natrio bisulfito tirpalą. Organinė fazė atskirta, praplauta įsotintu vandeniniu natrio chloridu ir sukoncentruojama. Likučio chromatografija (etilacetatas-heptanas, 2:3) davė (20) (778 mg, 94%), [a] ^-2,8° (c, 1,1, chloroformas).

^TH BMR duomenys (CHC1₃, δ): 7, 90-7, 82 (2H) , 7,78-7,70 (2H), 7,45-7,24 (15H), 5,79 (dd, 1H, J 11 ir 9 Hz, H-3),

5,26 (d, 1H, J 8,5	Hz,	H-l), 5,08	(dd,	1H, J 10 ir
9 Hz, H-4), 4,99 ir	4,67	(AB-sistema	, 2H,	J 11,5 Hz,
benzilo H) , 4,96 (d,	1H,	J 3,5 Hz, H-	1') ,	4,88 ir 4,77
(AB-sistema, 2H, J 12	Hz,	benzilo H),	4, 81	ir 4,69 (AB-

sistema, 2H, J 12 Hz, benzilo H), 4,28 (dd 1H, J 11 ir

8,5 Hz, H-2), 4,07 (dd, 1H, J 10 ir 3,5 Hz), 3,99-3,85 (3H), 3,77 (dd, 1H, J 12 ir 6 Hz), 3,71-3,64 (2H), 3,34 (s, 3H, CH₃CO), 2,00 (s, 3H, CH₃CO), 1,86 (s, 3H, CH₃CO), 1,14 (d, 3H, J 6,5 Hz, Fuc-CH₃) .

Apskaičiuota, %: C₄₆H₄₉NO₁₃ junginiui: C 67, 06; H 5,99; N 1,70. Rasta, %: C 67,0; H 6,1; N 1,65.

(iv) Metilo 2-acetamid-6-O-(2,3,4-tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-2-dezoksi~P-D-gliukopiranozidas (21)

Junginys (20) deacetilinamas 1,5 h ntrio metoksido (9,5 mM,

31,5 ml) metanolio tirpale. Po neutralizacijos rūgštine katijonine derva (Bio-Rad AG® 50W-X8), filtravimo ir koncentravimo, gautas likutis, kuris ištirpintas metanolyje (20 ml). Pridėta hidrazino monohidrato (0,8 ml) ir mišinys kaitinamas su grįžtamuoju šaldytuvu 4 h ir po to atšaldomas iki 10°C. Pridėjus vandens (15 ml) ir acetanhidrido (5 ml) , reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje. Po 20 min gautos baltos nuosėdos. Metanolio (10 ml) pridėjimas pagerino maišymą. Po papildomų 2,5 h, pridėta piridino (2 ml) , kuris praskaidrino tirpalą. Tada tirpalas maišomas dar 30 min. Metanolis išgarintas ir vandeninis likutis ekstrahuojamas dichlormetanu. Organinė fazė perplauta su 1 M HCl ir įsotintu vandeniniu natrio hidrikarbonatu ir koncentruojamas. Likučio chromatografija (etil10:1) davė (21) (435 mg, 77%).

buvo iškristalinti iš etanolio, acetatas-metanolis, Pavyzdžiai analizei lyd. t. 224-226Ύ (d), [ et] ₀ ^Ώ-75,4 (c, 0,9, CHC1₃) .

‘H BMR duomenys (CDC1₃-CD₃OD, 3:1, CHD₂OD stand. δ) d: 7,41-7,20 (15H), 4,91 ir 4,61 (AB-sistema, 2H, J 11,5 Hz,

benzilo	H) ,	4, 80	ir 4,70	(AB-sistema,	2H, J 11,5	Hz,
benzilo	H) ,	4,78	(d, 1H,	J 3 Hz, H-l'	) , 4,75 (s,	2H,
benzilo	H) ,	4,24	(d, 1H,	J 8,5 Hz,	H-l), 4,09-	3, 97

(2H), 3,92 (dd, 1H, J 10 ir 2,5 Hz), 3,86 (dd, 1H, J 11 ir 2 Hz), 3,77-3,56 (3H) , 3,42 (dd, 1H, J 9,5 ir 8,5 Hz),

3,36 (s, 3H, CH-jCO) , 1,97 (s, 3H, CH₃CO) , 1,07 (d, 3H,

J 6,5 Hz, Fuc-CH₃) .

(v) Metilo 2-acetamid-2-dezoksi-6-0-a-L-fukopiranozilβ-D-gliukopiranozidas (22)

Junginio (21) (362 mg, 0,56 mmol) acto rūgštyje (50 ml) tirpalas hidrinamas prie 230 kPa su 10% Pd/C (160 mg) per naktį. Mišinys filtruojamas pro Celito sluoksnį ir koncentruojamas. Likučio kolonėlių chromatografija (chloroformas-metanolis-vanduo, 65:40:10) davė amorfinį (22) (192 mg, 90%), [ 0^-106° (c, 1,1,H₂O).

³H BMR duomenys (D₂O, CH₃OH stand. δ): 4,95 (d, 1H, J 4 Hz,

H-l'), 4,46 (d, 1H, J 8,5 Hz, H-l), 4,15 (kv, 1H, J 6,5 Hz), 4,02(dd, 1H, J 12 ir 1,5 Hz), 3, 92 (dd, 1H, J 10,5 ir

3,5 Hz), 3,84-3,67 (4H) , 3,62-3,49 (6H), 3,51 (s, CH₃0), 1,24 (d, 3H, J 6, 5 Hz, Fuc-CH₃) .

¹³C BMR duomenys (D₂O, CH₃OH stand., δ): 177,7, 105,0,

102, 4, 78,0, 76,9, 74, 8, 72,9, 72,5, 71,2, 70,3, 69, 7,

60,0, 58,5, 25,2, 18,3.

PAVYZDYS

3,3-Dimetilbutilo 2-acetamid-2-dezoksi-6-0-a-L-fukopiranozil^-D-gliukopiranozidas (24) (i) 3,3-Dimetilbutilo 3,4-di-O-acetil-6-O-(2,3,4-tri-Obenzil-a-L-fukopiranozil) -2-dezoksi-2-f talimid^-D-gliukopiranozidas (23)

Trifluormetansulfoninė rūgštis (0,017 ml, 0,19 mmol) buvo pridedama prie mišinio, sudaryto iš (19) (853 mg, mmol), 3,3-dimetilbutan-l-olio (0,182 ml, 1,5 mmol), N-jodsukcinimido (344 mg, 1,52 mmol) ir sutrintų molekulinių sietų (0,9 g, 4 A) dichlormetane-dietilo eteryje (2:1, 25 ml) prie -30°C. Po 1 h papildomai pridedama 3,3-dimetilbutan-l-olio (0,100 ml, 0,82 mmol) ir trifluormetansulfoninės rūgšties (0,015 ml, 0,17 mmol) ir maišymas tęsiamas 2,5 h. Reakcijos mišinys filtruojamas pro Celitą į vandeninį natrio hidrokarbonato ir natrio bisulfito tirpalą. Organinė fazė praplauta vandeniniu natrio chloridu ir koncentruojama. Likučio chromatografija (etilacetatas-heptanas, 2:1) davė (23) (740 mg, 83%), [aj_D ²²-8,5° (c, 1,3, CHC1₃) .

BMR duomenys (CHC1₃, δ): 7,89-7,82 (2H) , 7,78-7,70 (2H), 7,44-7,24 (15H), 5,79 (dd, 1H J 11 ir 9 Hz, H-3),

5,32 (d, 1H, J 8,5 Hz, H-l), 5,08 (dd, 1H, J 10 ir 9 Hz, H-4), 4,99 ir 4,66 (AB-sistema, 2H, J 11,5 Hz, benzilo

H), 4,91 (d, 1H, J 3,5 Hz, H-l'), sistema, 2H, J 12 Hz, benzilo H) , sistema, 2H, J 12 Hz, benzilo H), 4,29 (dd 1H, J 11 ir

8,5 Hz, H-2), 4,05 (dd, 1H, J 10 ir 3,5 Hz), 3,99-3,73 (6H), 3,70-3,63 (2H) , 3,38 (m, 1H) , 1,98 (s, 3H,

CH₃CO), 1,87 (s, 3H, CH₃CO) , 1,30 (m, 2H, OCH₂CH₂) , 1,13

4,88 ir 4,77 (AB4,80 ir 4,69 (AB(d, 3H, J 6,5 Hz, Fuc-CH

0, 69

9H) .

Apskaičiuota, %:C₅₁H₄₉NO₁₃ junginiai: C 69,3; H 5,59; N 1,59. Rasta; %; C 68,4; H 6,65; N 1,75.

(ii) 3,3-Dimetilbutilo 2-acetamid-2-dezoksi-6-0-a-L-fukopiranozil-p-D-gliukopiranozidas (24)

Junginys (23) (680 mg, 76 mmol) ištirpintas metanolyje (25 ml). Buvo pridėtas metanolinis natrio metoksidas (0,2 M 1 ml) ir tirpalas maišomas 3,5 h. Po neutralizacijos rūgštine katijonine derva (Bio-Rad AG 50W-X8), filtravimo ir garinimo, gautas likutis, kuris ištirpintas metanolyje (20 ml) . Buvo pridėtas hidrazino monohidratas (0,5 ml, 10,3 mmol) ir mišinys virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu 3,5 h ir po to atšaldomas iki 10°C. Pridedami: vanduo (10 ml) , metanolis (2 ml) ir acto rūgšties anhidridas (2,5 ml) ir mišinys maišomas kambario temperatūroje 2,5 h, kurių metu pridedamos papildomos porcijos acto rūgšties anhidrido (2,0 ir 0,5 ml) . Metanolis išgarinamas ir vandeninis likutis paskirstomas tarp dichlormetano ir vandens. Vandeninė fazė ekstrahuojama dichlormetanu ir organinė fazė sukoncentruojama. Likučio chromatografija (etilacetatas/metanolis; 20:1) davė produktą, kuris ištirpintas acto rūgštyje (50 ml) . Buvo pridėta 10% Pd/C (160 mg) ir mišinys hidrinamas 4 h prie 230 kPa kambario temperatūroje. Mišinys filtruojamas pro Celito sluoksnį ir sukoncentruojamas. Likučio kolonėlių chromatografija (chloroformas-metanolis-vanduo, 150:40:3—>65:40:10) davė amorfinį (24) (275 mg, 80%), [ α]θ22-87,2° (c 0,95, H₂O) .

^XH BMR duomenys (D₂O Hz, H-l'), 4,54 (d, 6,5 Hz), 4,03-3,88 1,40 (2H, OCH₂CH₂), (s, 9H) .

, CH₃OH stand., δ): 4,94 (d, 1H, J 4

1H, J 8,5 Hz, H-l), 4,15 (kv, 1H, J (8H), 2,03 (s, 3H, CH₃CON) , 1,581,24 (d, 3H, J Hz, Fuc-CH₃), 0,90 ¹³C BMR duomenys (D₂O, CH₃OH stand., 102,4, 77, 9, 76, 9, 74,9, 73, 0, 72, 6, 45,0, 31,9, 25,2, 18,4.

δ): 177,5, 104,0,

71,0, 69, 7, 58,6,

Apskaičiuota, %: C₂₀H₃₇NO₁₀ junginiai: C 53,2; H 8,26;

N 3,10. Rasta; %: C 51,2; H 8,25; N 3,2.

PAVYZDYS

Fucal-2Gaipi-O-tarpiklis 4-HSA (31) (i) Etilo 2-O-acetil-3,4,6-tri-0-benzil-l-tio-p-D-galaktopiranozidas (25) (25) Junginys gaminamas iš acetbromgalaktozės (70,73 g, 0,172 mmol), pagal metodiką, aprašytą S. Nilsson, H.

Lonn ir T. Norberg, Glycoconjugate J., 1989, 6, 21-34.

(25) išeiga buvo 26,13 g (28%).

TLC:R_f0,33 (heptanas:etilacetatas, 9:2).

¹³C BMR (CDC1₃, δ): 170,2 (CO) , 139, 2, 138, 6 138, 4, (aromatinis C), 84,2, 82,1, 78,1, 75,0, 74,1, 73,6,

72, 6, 70,3, 69,2, (C-l, 2,3, 4,5, 6, 3xCH₂Ph), 24,1 (SCH₂CH₃), 21,6 (OCOCH₃), 15,4 (SCH₂CH₃) .

^ΤΗ BMR (CDC1₃) δ: 5,43 (plt, 1H, J₂,₃ 9,7 Hz, H-2), (d, 1H,

J_1>2 11,9 Hz, H-l), 4,01 (pld, 1H, J₃,₄ 2,9 Hz, H-4),

3,55 (dd 1H, H-3) .

(ii) Etilo 2-0-benzoil-3,4,6-tri-O-benzil-l-tio-p-D-galaktopiranozidas (26)

Etilo 2-O-acetil-3,4,6-tri-O-benzil-l-tio-p-D-galaktopiranozidas (25) buvo deacetilinamas natrio metoksidu metanolyje (50 ml, pH 12) ir po to benzoilinamas benzoilchloridu (1,96 g, 14 mmol) piridine (20 ml) pagal standartines metodikas.

Kristalinis (26) gaunamas beveik kiekybine išeiga (3,44 g, 97%) .

BMR	(CDC1₃) ³H: δ 5,70	(1H, t, 9,8	Hz, H-2)	r	2,60-2,80
(2H,	m, CH₂CH₃) .
¹³C:	δ 14,8 23, 6(SEt),	68, 6, 70,2,	71,7,	72	,8, 73,6,
74,4	, 76,6, 127,5-138,6	(aromatinis	C), 165,	4	(C=O).

(iii) 2-Azidetilo-3,4,6-tri-0-benzil~3-D-galaktopiranozidas (28)

Trifluormetansulfoninė rūgštis (TfOH); 35 mg, 0,23 mmol·; pagal būdą aprašytą G. H. Veeneman, S.H.Van

Leeuwen, J.H. Boom, Tetraherdron Lett., 1990, 31, 1331) pridedama prie suspensijos, sudarytos iš tioglikozido (26) (700 mg, 1,17 mmol), 2-aziaetanolio (204 mg, 2,34 mmol;

paruoštas pagal A. Ya. Chernyak ir

Rao, Carbohydr. Res., 1992, 223, mmol) kt. ir A.V. Rama 303-309), N-jodir sutrintų reakcija sustabdoma Tirpalas filtruojamas dichlormetanu ir Na₂S₂O₃ (10%) ir džiovinama magnio sukcidinimido (395 mg, 1,75 molekulinių sietų (3 A, 400 mg) dichlormetane (25 ml) prie °C. Kai TLC (toluenas:etilo acetatas, 6:1) parodė pilną konversiją (< 15 min), pridedant trietilamino prie 0 °C.

pro Celito sluoksnį atskiedžiamas praplaunamas du kartus vandeniniu galiausiai vandeniu. Organinė fazė sulfatu, filtruojama ir koncentruojama, o liekanai tuojau pat buvo atliekama TLC (toluolas:acetilacetatas, 15:1). Pašalinus tirpiklį, gauti 672 mg 2-azidetilo 2O-benzoil-3,4,6-tri-0-benzil-p-D-galaktopiranozido (27), bespalvio aliejaus (92%) pavidale, kuris veikiamas natrio metoksidu metanolyje (pH 11) kambario temperatūroje 6 valandas. Tirpalas neutralizuotas Dowex 50 H⁺derva, nufiltruotas ir sukoncentruotas. Kris-talinis produktas (28) (540 mg, 89% iš 2) naudojamas be tolesnio valymo gaminant disacharidą (29).

Junginys (27) : (CDC1₃) 1H: δ 5,66(1H, dd, 10,0, 7,9 Hz,

H-2), 4:57 (1H, d, 7,8 Hz H-l).

¹³C : δ 50,7 (CH₂N₃), 67, 3, 68,7, 71, 9, 72,5, 73, 6, 73, 9, 74,5, 101,4 (C-l), 127,6-137,8 (aromatinis C), 165,3 (C=O).

Junginys (28):¹³C: δ 50,7 (CH₂N₃) , 68,4, 68,7, 71,4,

72, 6, 73, 0, 73, 6, 73, 9, 74,5, 81,7, 103, 4 (C-l), 125,3138,4 (aromatinis C).

(iv) 2-Azidetilo 3,4,6-tri-O-benzil-2-O-(2,3,4-tri-Obenzil-a-L-fukopiranozil)-β-D-galaktopiranozidas (29)

Prie tioetilglikozido (14) 400 mg, 0,836 mmol) dichlormetano (10 ml) tirpalo pridėtas bromas (134 mg, 0,836 mmol) prie 0°C. Po apytiksliai 5 min prie 0 °C tirpalui leista pasiekti kambario temperatūrą ir tirpiklis išgarintas. Po išgarinimo su toluenu likutis buvo ištirpintas dichlormetane (2 ml) ir sudėtas prie kambario temperatūros į suspensiją, sudarytą iš tetraetilamonio bromido (176 mg, 0,836 mmol; paruošto pagal R.U. Lemieux, K.B. Hendriks, R.V. Stiek, K. James, J. Am. Chem. Soc. 1975, 97:14, 4056), (28) junginio (290 mg, 0,558 mmol) ir sutrupintų molekulinių sietų (3 A, 300 mg), esančių CH₂C1₂:DMF (4:1,7 ml). TLC (toluenas:etilo acetatas, 6:1) parodė pilną konversiją po 20 h maišymo. Mišinys filtruojamas, atskiestas dichlormetanu ir praplautas vandeniu. Organinė fazė

išdžiovinta	magnio	sulfatu,	filtruoj ama	ir kon-
centruoj ama	vakuume.	Preparatyvinė TLC davė junginį
(29), tiršto	aliejaus	pavidale	(407 mg, 78%)	•
BMR (CDC1₃)	^L3C: δ 16,	5, 33,6,	50, 9, 66, 4,	66,9, 68,8,
71,4, 72,0,	72,8, 72,	9, 73,5,	73, 6, 74,4,	74,8, 75, 7,

78,1, 79, 6, 84,3, 97,3, 102,0, 125, 3,-129, 0 (aromatinis C), 138, 0, 138, 3, 139, 0.

(v) 2-Aminetii-2-Ο-α-L-fukopiranozil-β-D-galaktopiranozidas (30)

Užblokuotas disacharido darinys (29) (80 mg, 85 ųmol) ištirpintas etanolyje (abs., 10 ml) ir pridėta vandens (1 ml) bei Pd/C (10%, 100 mg). Mišinys hidrinamas ir greitai maišomas kambario temperatūroje prie 50 PSI. Kai reakcija nepasibaigė po 60 h, tirpalas buvo nufiltruotas ir produktas išskirtas (TLC, etilo acetatas:metanolis:acto rūgštis:vanduo, 5:3:3:1,

R_f=0,15). Po koncentravimo vakuume, likutis ištirpintas vandeniniame piridino/acto rūgšties (2,5%/l%, pH5,4) buferyje ir išplautas pro Bio Gel P-2 kolonėlę. Po išgarinimo ir džiovinimo šaldant, gauta 14 mg (44%) (30) junginio, baltų miltelių pavidale.

BMR (CDC1₃) ¹³C: δ 16,8, 39, 8, 61,1, 66,4, 67,1, 68,7,

69,6, 71, 9, 73,0, 75, 0, 78,4, 100, 0, 101,7.

(vi) Fucal-2Gaipi-O-tarpiklis 4-HSA (31)

Prie išmaišyto šaldomo ledu tiofosgeno (10 eq.) tetrahidrofurane (2 ml) tirpalo pridėtas (30) junginio amino darinys (30 ųmol) natrio borato buferyje (0,85 M, pH 8,5). Tirpalas maišomas kambario temperatūroje 10 min ir po to ekstrahuojamas dietilo eteriu (3x2 ml) . Vandeninė fazė, turinti izotiocianato darinį, sudėta į žmogaus serumo albumino (HSA) (1/30 ekv.) tirpalą toje pačioje buferinėje sistemoje (0,5 ml) . pH sukoreguotas iki 8,5 vandeniniu natrio šarmu (0,25 M) ir mišinys maišomas kambario temperatūroje 48 valandas. Po reakcijos mišinio džiovinimo šaldant, atliekamas gryninimas ultracentrifuguojant Centriprep mėgintuvėliuose (10KO). Išgrynintą tirpalą išdžiovinus šaldant, gautas HSAjunginys (31) su puikia išeiga (18 mg). Substitucijos laipsnis buvo nustatomas naudojant skriejimo trukmės masės spektroskopiją iki 8 mol disacharidų/mol proteinų.

PAVYZDYS

Fucal-2Gal/l-O-tarpiklis 1-IISA (36) (i) 8-Azid-3,6-dioksaoktilo 3,4,6-tri-O-benzil-p-D-galaktopiranozidas (33) (33) junginio azidodarinys gaminamas iš tioglikozido (26) (1004 mg, 1,68 mmol) ir l-azid-8-hidroksi-3,6dioksaoktano (686 mg, 3,35 mmol; gauto pagal C.R. Bertozzi, M.D. Bednarski, J. Org. Chem., 1991, 56, 4326LT 3446 B

4329), pagal metodiką, kuri panaši į naudotą (28) junginio darinio sintezėje. TLC (toluenas:EtOAc 6:1), parodė visišką koncersiją per 40 min. Panašus 8-azid3,6-dioksaoktilo 2-0-benzoil-3,4,6-tri-O-benzil-P-Dgalaktopiranozido (32) apdorojimas ir dezacilinimas davė 933 mg (78% iš 26) (33) junginio, tiršto aliejaus pavidale.

Junginys (32):BMR (CDC1₃) :1H: δ 5,64 (1H, dd, 10,0, 7,9, Hz, H-2) .

¹³C: δ 50,6 (CH₂N₃) , 68, 7, 68, 9, 69, 8, 70,3, 70,5, 70,7,

71,8, 71, 9, 72, 6, 73, 6, 73, 8, 74, 6, 80, 0, 101, 6 (C-l).

Junginys (33):¹³C: δ 50,6 (CH₂N₃), 68,7, 68, 8, 70,0,

70,2, 70,5, 71,4, 72, 6, 73,3, 73, 5, 73, 8, 74,5, 81,9,

103,8 (C-l).

(ii) 8-Azid-3,6-dioksaoktilo 3,4,6-tri-O-benzil-2-O(2,3,4-tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-β-D-galaktopiranozidas (34)

Disacharidas (34) buvo sintetinamas iš (33) junginio (500 mg, 82 mmol) ir tioetilglikozido (14) (512 mg,

1,07 mmol), pagal metodiką, aprašytą atitinkamam (29) dariniui. Preparatyvinė TLC davė 683 mg (81%) (34) junginio, aliejaus.

BMR (CDC1₃) ¹³C : δ 18,3, 50,2, 66,2, 68, 2, 68,8, 70,0,

70,2, 70,3, 70,6, 71,2, 72, 0, 72,3, 72,5, 73, 0, 73, 3, 73, 6, 74,4, 74, 6, 75, 8, 78,0, 79, 7, 84,2, 98,6 102, 0.

(iii) 8-Amin-3,6-dioksaoktilo 2-0-a-L-fukopiranozil^D-galaktopiranozidas (35)

8-Azid-3,6-dioksaoktilo 3,4,6-tri-O-benzil-2-O-(2, 3, 4tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-β-D-galaktopiranozidas (34) (35 mg, 34 μιηοΐ) ištirpintas etilo acetato:etanolio:vandens mišinyje santykiu 1:2:2 (tūris, 12 ml) ir parūgštintas 20 μΐ HOAc )pagal būdą, apršytą S. Nilsson, daktarinė disertacija, Lundo universitetas, 1992, balandis). Tirpalas hidrinamas prie 50 PSI ant 10% Pd/C (140 mg) prie kambario temperatūros per naktį ir kai TLC (etilo acetatas:metanolis:acto rūgštis:vanduo, 5:3:3:1) parodė visišką deblokavimą, mišinys filtruojamas ir garinamas. Valymas Bio-Gel P-2 kolonėlėje (vanduo:piridinas:acto rūgštis, 25:1 pagal tūrį, pH 5,4), koncentravimas ir džiovinimas šaldant davė (35) junginį, baltų miltelių pavidale (14 mg, 90%).

BMR (CDC1₃) 68,1, 68,5,

74,8, 76, 6, ¹³C: δ 15,2,

68,7, 69,2,

99,2 (C-l'), (CH₃), 38,9,

69,3, 69, 4,

101,4 (C-l) .

60,7, 66,1,

69,6, 71,7,

66, 5, 73,4, (iv) Fucal-2Gaipi-O-tarpiklis 1-HSA (36)

Prie maišomo šaldomo ledu tiofosgeno (10 ekv.) tetrahidrofurane (2 ml) tirpalo pridėtas (35) junginio amino darinys (30 ųmol) natrio borato buferyje (0,85 M, 2 ml, pH 8,5). Tirpalas maišomas kambario temperatūroje 10 min ir po to ekstrahuojamas dietilo ateriu (3 x 2 ml) . Vandeninė fazė, turinti izotiocianato darinį, sudėta į žmogaus seumo albumino (HSA) (1/30 ekv.) tirpalą toje pačioje buferinėje sistemoje (0,5 ml) pH sukoreguotas iki 8,5 vandeniniu natrio šarmu (0,25 M) ir gautas mišinys maišomas kambario temperatūroje 48 valandas. Po reakcijos mišinio džiovinimo šaldant, atliekamas gryninimas ultracentrifūguoj ant Centriprep mėgintuvėliuose (10KO). Išgrynintą tirpalą išdžiovinus gautas HSA-junginys (36) su puikia išeiga (33 mg) .

Substitucijos laipsnis buvo nustatomas naudojant skriejimo trukmės masės spektroskopiją iki 5 mol disacharidų/mol proteinų.

PAVYZDYS

Fucal-2Galp-O-tarpiklis 2-PAA (38) (i) 8-N-akrilamid-3,6-dioksaoktilo 2-O-a-L-fukopiraηοζίΙ-β-D-galaktopiranozidas (37)

0,8 ml deaeruoto 0,5 M natrio borato vandeninio buferio (pH 8,5) ir 2,4 ml deaeruoto metanolio sudėta 15mg (35) junginio. Reakcijos mišinys prapučiamas azotu ir atšaldomas iki 0°C. Buvo pridedama 3,3 μΐ akriloilchlorido ir maišoma 10 min. Reakcijos mišinys koncentruojamas kambario temperatūroje iki apytiksliai trečdalio jo pradinio tūrio. Valymas Bio-Gel® P-2 kolonėlėje ir liofilizacija davė (37) jungini, (14 mg, 83%) .

BMR duomenys ¹³C (D₂O) : δ

60,51, 66,31, 67,87, 69,12, 69,43, 71,50,

C-2,3,4,5; 5CH₂O) ,

68,19, 73,25, 98,88,

15,0, 68,30, 74,55 (C-l’), (CH₃) , 38,54 (CH₂N),

68,50, 68, 98, 69,10, 76, 08 (C-2, 3,4,5,6;

101,16(C-l), 126,92 ir 129,43 (CH₂=CH₂) .

(ii) Fucal-2Gaipi-O-tarpiklis 2-PAA (38)

Į tirpalą, sudarytą iš (37) junginio (14 mg, 0,027 mmol) ir akrilamido (9,7 mg, 0,14 mmol) deaeruotame vandenyje (1 ml) pridėta pirma N,N,N'N'-tetrametilendiamino (6 μΐ) ir po to amonio persulfato (3,5 mg). Mišinys maišomas kambario temperatūroje visą naktį. (38) polimeras gaunamas valant gelio chromatografijos būdu Bio-Gel P2 kolonėlėje. Išvalyto tirpalo džiovinimas šaldant davė PPA junginį su puikia išeiga (17,9 mg) . ^-BMR parodė, kad vidutiniškai prijungiamas 1 oligosacharidas 7 akrilamido vienetams.

PAVYZDYS

Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcp-3Gaipi-4GlcPl-NII-PAA (42) (i) Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcpl-3Galpl-4Glcpl-NH₂ (40)

Į Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Galpl-4GlcP-l-OH tirpalą (Liuiso B heksacharidas (39), pirktas iš įso Sep AB, 25 mg vandenyje (1,25 ml) dedamas kietas amonio bikarbonatas iki įsisotinimo. Mišinys maišomas atidarytame inde 6 dienas. Amonio bikarbonatas dedamas intervalais, įsisotinimas stebimas pastoviai laikant mišinyje tam tikrą dali, kietos druskos. Kai TLC parodė, kad konversija daugiau nebevyksta, mišinys praskiedžiamas vandeniu ( 5 ml) ir koncentruojamas iki pusės pradinio tūrio. Likutis skiedžiamas vandeniu iki 20 ml ir koncentruojamas iki 5 ml. Šis procesas buvo pakartotas dar 1 kartą, ir tada likutis praskiedžiamas iki 10 ml ir liofilizuotas. Naepdorotas produktas sudėtas į Bio-gel P2 kolonėlę ir surinkta frakcija, turinti Liuiso B glikozilaminą (40) (20 mg, 80%).

BMR duomenys: ¹³C(D₂O): δ 84, 66 (C-NH₂) , 97,54, 99, 33,

100,39, 100,72, 102,98, (C-l) anglies atomai iš neredukuojančių cukrų vienetų), 15,08, 15,13 (2xCH₃-fukozė), 21,95 (CH₃-CON-GlcNAc) .

(ii) Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Galpl-4Glcpl-NHC0-CH=CH₂ (41)

Natrio karbonatas (50 mg) ir deaeruotas metanolis (0,5 ml) sudėti į glikozilamino (40) (20 mg, 0,02 mmol) vandeninį (0,5 ml) tirpalą. Mišinys maišomas prie 0°C, kol buvo sudėtas per 5 min akriloilchloridas (60 μΐ, 0,74 mmol) tetrahidrofurane (0,5 ml) . Po 10 min tirpalas atskiestas vandeniu (3 ml) ir koncentruotas iki 2 ml. Tirpalas buvo vėl praskiestas vandeniu (2 ml), buvo pridėta 200 μΐ tetrahidrofurano (tirpalo inhibitoriaus) ir gautas tirpalas koncentruojamas iki 1-2 ml. Šis tirpalas gryninamas gelfiltracijos būdu Bio-Gel® P2 kolonėlėje. Atitinkamos frakcijos buvo apjungtos ir liofilizavus gautas (41) junginys (14 mg, 67%).

BMR guomenys: ¹³C (D₂O) : δ 81,28 (C-NHCOCHCH₂) , 97,42,

99,18, 100,25, 102,59, 102,85, (C-l anglies atomai iš neredukuojančių cukrų vienetų), 14,99, 15,06, (2xCH₃fukozė), 21,92 (CH₃-CON-GlcNAc) , 125, 93, 130, 32, (CH₂=CH₂) .

Fab ms: pseudomolekulinis jonas m/z; 1053 (M+H) ir 1075 (M+Na)⁺.

(iii) Fucal-2Gal01-3(Fucal-4)GlcNAcp-3Gaipi-4Glcpl-NHPAA (42)

N-akriloilglikozilamino kopolimerizacij a su akrilamidu. N-akriloilglikozilamino (41) (13 ųmol) ir akrilamido (53 ųmol, 3,7 mg) tirpalas distiliuotame vandenyje (200 μΐ) deaeruojamas prapučiant azotu 20 min. Po to tirpalas maišomas prie 0 °C ir pridedama N,N,N',N ¹-tetrametilendiamino (2 μΐ) ir amonio persulfato (1 mg). Mišinys lėtai maišomas prie 0°C 2 valandas, o po to kambario temperatūroje visą naktį. Tirštas tirpalas praskiestas vandeniu (1 ml) ir gryninamas gelfiltracijos būdu Bio-Gel® P2 kolonėlėje, išplaunant su vandeniniu n.butanoliu (1%). Frakcijos, turinčios polimero buvo apjungtos ir liofilizuotos. Išeiga: 3 mg.

¹H-BMR parodė, kad apytiksliai 1 Liuiso-B vienetas atitinka 5 CHCH₂ vienetams.

PAVYZDYS

Fucal-2Galpl-3GlcNAcpi-O-tarpiklis 5-PAA (50) (i) 2-Azidetilo 4,6-0-benziliden-2-dezoksi-2-ftalimidβ-D-gliukopiranozidas (43)

Etilo 4,6-0-benziliden-2-dezoksi-2-ftalimid-l-tio-^-Dgliukopiranozidas susintetintas pagal H. Lonn, Carbohydr. Res. 139 (1985), 105-113) (0,5 g, 1,1 mmol) ištirpintas 20 ml dichlormetano ir pridėta 2-azidetanolio (gauto pagal A. Ya. Chernyak ir kt. Carbohydr. Res., 1992, 223, 303-309) (0, 148 g, 1,7 mmol) sutrumpintų 4 A molekulinių sietų ir mišinys maišomas 30 min. Buvo pridėta dimetil(metiltio)suifonio triflato (DMTST) (0,439 g, 1,7 mmol); gauto pagal P. Fugedi and P.J. Gregg, Carbohydr. Res., 149 (1989), 9-12) kambario temperatūroje ir maišymas buvo tęsiamas 4 valandas. TLC analizė (toluenas-etilo acetatas) parodė, kad nebėra pradinės medžiagos ir į reakcijos mišinį pridėta 1 ml trietilamino ir maišoma dar 30 min. Reakcijos mišinys perkeltas į silikagelio kolonėlę ir išplaunamas su toluenu:etilo acetatu 6:1, kad gautųsi (372 mg, 72%). (43) junginio.

BMR duomenys: ¹³C (CDC1₃) : δ 50,38, (CH₂-N) ; 56, 42 (CH-N);

66,2 (CH-O); 68,44, (CH₂O) ; 68,50 (CH-O) ; 68,53 (CH₂-O) ; 82,05 (CH-O); 98,89 (C-l); 101,83 (PhCH).

(ii) 2-Azidetilo 3-0-(2-O-acetil — 3,4,6-tri-O-benzil^D-galaktopiranozil)-4,6-0-benziliden-2-dezoksi-2-ftalimid^-D-gliukopiranozidas (44)

Etilo 2-O-acetil--3,4,6-tri-0-benzil-l-tio^-D-galaktopiranozidas (25) (818 mg, 1,5 mmol) ir (43) junginys (395 mg, 0,85 mmol) ištirpinti 30 ml dichlormetano ir pridėta sutrupintų 4 A molekulinių sietų ir gautas mišinys maišomas 20 min. Reakcijos mišinys prapūstas su azotu ir prie reakcijos mišinio sulašinta DMTST (787 mg, 3,05 mmol, ištirpdyto 5 ml dichlormetano) ir per piltuvėlį praskalautas 6 ml dichlormetano. Po 2 valandų pridėtas 1 ml trietilamino ir maišoma 30 min., filtruojama, koncentruojama ir kolonėlių chromatografija (toluenas:etilo acetatas, 10:1) davė tris frakcijas. Frakcija 1 a-produktas (97,32, 98,89; (C-l ir C-l'). Frakcija 2 beveik grynas (44) (306 mg, 39%).

BMR duomenys: ¹³C (CDC1₃) atramin. tetrametilsilano 0 ppm) : δ 20,32 (CH₃CO) , 50,47 (CH₂N) ; 55,13, (CH-N) ;

66,57, 68,15, 68,20, 68,65, 71,58, 71,71, 72,17, 72,94, 73, 46, 74,38, 75, 15, 80, 47, 81,08 (C-3,4,5,6; C2,3,4,5,6; 3xCH₂Ph; CH₂-O) , 98,86 (C-l), 100,75, 101,23 (C-l ir CHPh), 168,84 (C=O).

(iii) 2-azidetilo 2-acetamid-3-O-(3,4,6-tri-O-benzil-pD-galaktopiranozil)-4,6-0-benziliden-2-dezoksi-p-D-gliukopiranozidas (45)

Prie (44) junginio (525 mg, 0,56 mmol) pridėta 50 ml etanolio ir virinama su grįžtamuoju šaldytuvu su 1,1 ml hidrazinhidrato per naktį ir TLC (toluenas:etilacetatas 1:2) parodė naujo produkto susidarymą. Po koncentracijos ir išgarinimo kartu su toluenu, ištirpinta 45 ml dichlormetano ir praplaunama vienodu kiekiu vandens, vėl garinant kartu su toluenu gautas neapdorotas monohidroksiaminas. Šis neapdorotas produktas ištirpdytas dichlormetane:metanolyje (1:1, 15 ml) , ir pridėta

1,5 ml acto anhidrido. Po 3 valandų nebuvo aptikta pradinių medžiagų (TLC). Koncentravimas ir chromatografija (toluolas:etilo acetatas, 1:2) davė (204 mg, 45%) (45) junginiBMR duimenys: ¹³C (CDC1₃) : δ 23,59 (NHCOCH₃) , 50,59 (C-N), 56,89 (C-N); 66,40, 68,28, 68,56, 70,55, 72,44, 73,21,

73,40, 73,53, 74,60, 76,08, 79,75, 81,71, (C-3, 4, 5,

6; C-2', 3’, 4', 5', 6'; 3xCH₂Ph; CH₂O) , 100, 97, 101,25, 103,48 (C-l, C-l¹ ir CHPh), 171,67 (C=O).

(iv) 2-azidetilo 2-acetamid-3-O-(3,4,6,-tri-O-benzil-20-(2,3,4-tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-β-D-galaktopiranozil)-4,6-0-benziliden-2-dezoksi^ -D-gliukopiranozidas (46) (45) junginys (137 mg, 0,17 mmol), (14) junginys (162 mg, 0,34 mmol) ištirpinti dichlormetane (75 ml) ir pridėta molekulinių sietų (4 A) ir mišinys maišomas 20 min. Buvo pridėtas DMTST (96 mg, 0,37 mmol) ir maišoma 1,5 valandos. Buvo pridėtas 1 ml trietilamino ir maišoma dar 20 min. Nufiltravus pro Celitą, atlikus koncentravimą ir kolonėlių chromatografiją (toluolas:etilo acetatas. 1:1), gautas (46) junginys (101 mg, 49%).

13.

BMR duomenys: “C (NHCOCH₃), 50,66

fukozė),	23, 30
66,55,	67,17,
73,10,	73,51,
79, 43,	79,53,
',3,4'	’,5;
102,13,	(C-l,

(CDC1₃) : δ 16,83, (CH₃(CH₂-N), 57,40 (C-2);

67,96, 68,60, 72,31, 72, 91, 72, 99, 73, 04, 74,48, 74, 65, 76, 05, 76, 29, 76, 62, 77, 60, 83,21 (C-3,4,5,6; C-2',3',4',5',6'; C-2'

6xCH₂Ph), 97,67 (C-l''), 100,94, 101,07,

C-l ' , CHPh), 170, 92 (C=O) .

(v) 2-trifluoracetamidetilo 2-acetamid-3-O-(3,4,6-triO-benzil-2-O-(2,3,4-tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-βD-galaktopiranozil)-4,6-0-benziliden-2-dezoksi^-Dgliukopiranozidas (47) (46) junginys (135 mg, 0,11 mmol) ištirpintas 11 mol etanolio ir pridėta 10% Pd/C (140 mg). Reakcijos mišinys hidrinamas atmosferiniame slėgyje 15 min. TLC analizė (etilo acetatas:metanolis:acto rūgštis:vanduo, 12:3:3:1) parodė, kad nebėra pradinės medžiagos, išskyrus vieną ninhidrinimui teigiamą produktą. Mišinys filtruojamas per Celitą, koncentruojamas ir ištirpinamas dichlormetane (7 ml) bei piridine (3,5 ml) , prapučiamas azotu ir atšaldomas iki 0°C. Buvo pridėta trifluoracto anhidrido (31 ml, 0,22 mmol). Po vienos valandos mišinys sukoncentruojamas ir išgarinamas du kar-

tus kartu su 2 ml tolueno. Kolonėlių chromatografija
(toluenas:etilo acetatas, 1:3) 52%) .	davė (47)	junginį	(73 mg,
BMR duomenys: ¹³C (CDC1₃) : δ	17,06 (CH₃	fukozė)	, 22,66
(NHCOCH₃), 39, 59 (CH₂-N) , 54	,83 (C-2);	65,56,	66, 77,

67,78, 68,44, 68,69, 72,80, 73,05, 73,24, 2x73,46,

74,46, 74, 66, 76, 38, 77, 08, 77,80, 78, 91, 79, 96, 80,01, 82, 07 (C-3,4,5,6; C-2',3’,4 ', 5', 6’; C-2'',3 ' ',4 ” 5 ’ ' ;

6xCH₂Ph), 98,61 (C-l ’ ’ ), 101,22, 101, 99 102,35, (C-l,

C-l’, CHPh), 171, 64(NHCOCH3) .

(vi) 2-trifluoracetamidetilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0(2-0-(a-L-fukopiranozil)-β-D-galaktopiranozil)-β-Dgliukopiranozidas (48) (47) trisacharidas (73 mg, 56,2 μπιοί) ištirpintas absoliučiame etanolyje (7 ml) su vandeniu (0,25 ml) ir ledine acto rūgštimi (2 μΐ). Tirpalas hidrinamas 10% Pd/C (152 mg) prie 50 PSI kambario temnperatūroj e vieną valandą. Kai TLC (etilo acetatas:acto rūgštis:metanolis:vanduo, 12:3:3:1; R_f=0,14 junginiui (48) parodė konversijos pabaigą, reakcijos mišinys perfiltruojamas per Celito sluoksnį ir sukoncentruojamas. Neapdorotas, kietas likutis (46 mg) buvo naudojamas tolesnėje reakcijoje be papildomo valymo.

BMR duomenys: ¹³C (NHCOCH₃), 39,44 (C3,4,5,6; C2 ’ , 4 ' 99, 92, 101,28 (C-l, (D₂O) : δ 16,59 (CH₃ fukozė) , 21,85 (CH₂-N), 54,56 (C-2); 60,45-76, 95 ,5,'6'; 2'',3'',4'',5''), 99,29, C-l', C-l''), 173,48 (NHCOCH₃) .

(vii) 2-akrilamidetilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0-2-0-aL-fukopiranozil-β-D-galaktopiranozii-β-D-gliukopiranozidas (49)

Neapdorotas (48) junginys (46 mg) ištirpintas vandeniniame amoniake (25%, 4 ml) ir maišomas kambario temperatūroje. Reakcija užbaigta po valandos ir davė tik laisvą amino darinį. (TLC etilo acetatas:acto rūgštis:metanolis:vanduo, 5:3:3:1). Po koncentravimo ir garinimo kartu su toluenu, gryninama Bond-Elut® (SCX, H⁺-forma) katijoninės dervos 0,5 g užtaisu. Pavyzdžiai ištirpinti 3 ml vandens ir pH sukoreguotas iki pH 6 vandenine acto rūgštimi. Pavyzdžiai buvo sudėti į kolonėlę ir išplauti 2 M amoniako metanolyje:vandeniu 1:1 (5 ml) . Frakcijos, turinčios laisvą aminą (teigiamos ninhidrinimui) , buvo apjungtos, sukoncentruotos, liofilizuotos ir davė (30 mg, 0,05 mmol) neapdoroto amino.

į neapdorotą aminą pridėta 1 ml deaeruoto 0,5 M natrio borato vand. buferis (pH 8,5) ir deaeruoto metanolio (3 ml) . Reakcijos mišinys prapūstas azotu ir atšaldytas iki 0°C, pridėti 6,4 μΐ (0,078 mmol) akriloilchlorido ir maišymas tęsėsi 10 minučių. Reakcijos mišinys koncentruojamas kambario temperatūroje iki trečdalio savo pradinio tūrio, Išgryninus Bio-Gel® P-2 kolonėlėje ir liof ilizavus, gautas (49) junginys (30 mg, 86% iš (47) junginio).

BMR duomenys; ¹³C (D₂O) : δ 14,99 (-CH₃, fukozė) , 21,99 (NHCOCH₃), 39,10 (CH₂N) , 54,58 (C-2); 99,25, 99,93,

101,39 (C-l, C-l', C-l), 127,27, 129, 65 (CH₂=CH₂) .

(vii) Ευσα1-203ΐβ1-30ΐοΝΑοβ1-0-ΐ3Γρχ^Ϊ3 5-PAA (50)

2-akrilamidetilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0-2-0-a-L-fukopiranozil-p-D-galaktopiranozil-3-D-gliukopiranozido sudėtas trisachrido

su akrilamidu.
14 4 ųmo 1)	kambario temperatūroje
(49) (18	mg,	29	ųmol) tirpalas
(1 ml) .	Prie	šio	lėtai maišomo

peraturoje visą naktį, rūgštis:metanolis:vanduo, tirpalo (laikomo tamsoje ir azoto atmosferoje) prie 0°C pridėti N,N,NN'-tetrametilendiaminas (6 μΐ) ir amonio persulfatas (3,5 mg) . Mišinys maišomas kambario temTLC (etilo acetatas;acto 5:3:3:2) parodė, kad beveik visas (49) junginys buvo sunaudotas ir kad susiformavo sukepęs pagrindinis produktas. Polimeras gryninamas gelio chromatografijos būdu Bio-Gel® P-2 išplaunant vandeniniu n.butanoliu (1%) kolonėlėje, Išplauta tuščiame tūryje polimerinė frakcija džiovinama šaldant ir gauta 13,1 mg (50) polimero, kurio ¹H BMR analizė parodė,kad vidutiniškai 1 atitinka trisacharidas

7,6 akrilamido vienetus, ir 11,9 mg (50) polimero, kurio BMR analizė parodė, kad vidutiniškai 1 trisacharidas atitinka 10,3 akrilamido vienetus.

PAVYZDYS

Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAc3l-O-tarpiklis 5-PAA (55) (i) 2-azidetilo 2-acetamid-6-O-benzil-3-O-(3,4,6-tri-Obenz i1-β-D-galaktopiranoz i1)-2-dezoks ί-β-D-gliukopiranozidas (51)

Dietilo eteris, įsotintas vandenilio chloridu, kambario temperatūroje pridedamas prie maišomo 2-azidetilo-2acetamid-3-Ο-(3,4,6-tri-0-benzil-3-D-galaktopiranozil)4,6-O-benzi 1iden-2-dezoksi-β-D-gliukopiranozido (45) (420 mg, 0,52 mmol), natrio cianborhidrido (200 mg,

3,2 mmol) ir 3 A molekulinių sietų mišinio tetraLT 3446 B hidrofurane (20 ml), kol mišinys buvo rūgštinis (kaip parodė popierinis indikatorius; būdas pagal M. Nilsson ir T. Norberg Carbohydr. Res. 76 183 (1988) 71-82) .

Mišinys maišomas 20 min kambario temperatūroje ir po to buvo pridedamas trietilaminas (0,30 ml). Mišinys filtruojamas pro Celitą, plaunamas vandeniu, džiovinamas ir garinamas. Neapdorotas produktas gryninamas kolonėlių chromatografija (toluolas:etilo acetatas, 6:1) ir gautas grynas (51) junginys (266 mg, 0,32 mmol, 65%).

BMR duomenys: ¹³C(CDC1₃): δ 23,41, (NHCOCH₃) , 50,30 (CH₂N), 56,81 (C-N) ; 66,3-81,9 (C-3,4,5,6; C-2 ', 3 ', 4 ', 5', 6' ;

4xCH₂Ph; CH₂O) , 100, 90, 103, 21 (C-l, C-l'), 173,4 (CO).

(ii) 2-azidetilo 2-acetamid-2-dezoksi-4-O-(2,3,4-tri-Obenzil-a-L-fukopiranozil)-3-O-[ 3,4,6,-tri-O-benzil-2-O(2,3,4-tri-O-benzil-a-L-fukopiranozil)-β-D-galaktopiranozil]-β-D-gliukopiranozidas (52) (51) junginys (157 mg, 0,19 mmol) ir (14) junginys (362 mg, 0,76 mmol) buvo ištirpinti dichlormetane (100 ml) ir pri-dėti 3 g molekulinių sietų (MS) 4 A, bei maišoma 20 min, po to pridėtas dimetil(metiltio)sulfonio triflatas (DMTST) (207 mg, 0,80 mmol) ir maišoma 1,5 valandos. Po to pridėti 2 ml trietilamino ir maišoma dar 20 min. Nufiltravus per Celitą, atlikus koncentravimą ir kolonėlių chromatografiją (toluenas:etilo acetatas, 1:1) gautas (52) junginys (142 mg, 0,086 mmol, 45%).

BMR duomenys: ¹³C(CDC1₃): δ 17,01, 16,81 (2xCH₃ fukozė),

23,20 (NHCOCH₃), 50,35 (CH₂-N) , 57,21 (C-2); 98,31,

99,70, 101,14, 102,30 (Cl, Cl', 2xCl-fukozė), 170,30 (C=O).

(iii) 2-trifluoracetamido 2-acetilamid-2-dezoksi-4-0(2,3,4, -tri-O-benzil-ct-L-fukopiranozil) -3-O-[ 3,4,6,tri-O-benzil-2-O-(2,3,4-tri-O-benzil-a-L-fukopiranoζί1)-β-ϋ- galaktopiranozil] -β-D-gliukopiranozidas (53) (52) junginys (140 mg, 0,084 mmol) ištirpintas 11 ml etanolio ir pridėta 10% Pd/C (150 mg). Reakcijos mišinys hidrinamas atmosferiniame slėgyje 15 minučių. TLC (etilo acetatas:metanolis:acto rūgštis vanduo, 12:3:3:1) parodė, kad nebėra pradinės medžiagos, išskyrus vieną teigiamą ninhidrinui produktą. Mišinys filtruojamas per Celitą, koncentruojamas ir ištirpdomas dichlormetane (10 ml) ir piridine (3,5 ml), prapučiamas azotu ir atšaldomas iki 0°C.

Buvo pridėtas trifluoracto rūgšties anhidridas (31 μΐ, 0,22 mmol). Po vienos valandos mišinys koncentruojamas ir išgarinamas kartu su 2 ml tolueno du kartus. Kolonėlių chromatografija (toluolas:etilo acetatas, 1:2) davė (53) junginį (82,8 mg, 0,053 mmol, 63%).

BMR duomenys: ¹³C(CDC1₃): δ 17,33, 16, 93 (2xCH₃ fukozė) , 22,30 (NHCOCHj), 39,25 (CH₂-N) , 54,48 (C-2); 99, 03, 99,98, 101,63, 102,75 (C-l, C-l', 2xCl-fukozė), 171,73 (NHCOCH₃) .

(iv) 2-trifluoracetamidetilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0(2-0-a-L-fukopiranozil-p-D-galaktopiranozil)-4-O-a-Lfukopiranozil-p-D-gliukopiranozidas (54) (53) tetrasacharidas (78 mg, 0,05 mmol) ištirpintas absoliučiame etanolyje (8 ml) su vandeniu (0,25 ml) ir ledine acto rūgštimi (2 μΐ) . Tirpalas buvo greitai maišomas su 10% Pd/C (150 mg) vandenilyje (50 PSI) kambario temperatūroje vieną valandą. Kai TLC (etilo acetatas:acto rūgštis:metanolis:vanduo, 12:3:3:1) parodė konversijos pabaigą, reakcijos mišinys nufiltruojamas pro Celito sluoksnį ir sukoncentruojamas. Neapdorotas (54) junginys (35 mg) buvo naudojamas tolesnėje reakcijoje be papildomo valymo.

81
BMR duomenys: ¹³C(CDC1₃) : δ	16, 91,	16,53 (	2xCH₃	fukozė),
22,15 (NHCOCH₃), 39,14 (	CH₂N) ,	54,20	(C-2)	; 99, 33,
100,03, 101,73, 102,95	(C-l,	C-l', 2xC-l	fukozė),
173,30 (NHCOCH3) , nebuvo	aptiktas joks	¹³c	s ignalas
aromatinėje srityje.

(v) 2-akrilamidetilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0-(2-0-(ctL-fukopiranozil-3-D-galaktopiranozil)-4-O-a-L-fukopiraηοζίΙ-β-D-gliukopiranozidas (55) ištirpinti 3 ml vandens vandenine acto rūgštimi.

mg neapdoroto (54) junginio ištirpinta vandeniniame amoniake (25%, 4 ml) ir maišoma kambario temperatūroje.

Reakcija buvo užbaigta po valandos ir davė tik laisvą amino darinį. Po TLC (etilo acetatas:acto rūgštis:metanolis:vanduo, 5:3:3;2), koncentravimo ir garinimo kartu su toluenu atliekamas gryninimas Bond-Elut® užtaisu (SCX, H⁺-forma) katijonine derva. Pavyzdžiai ir pH sukoreguotas iki pH 6 Pavyzdžiai sudėti į kolonėlę ir išplauti 2 M amoniako metanolyje:vandeniu, 1:1 (5 ml).

Frakcijos, turinčios laisvą aminą (teigiamos ninhidrinui) buvo apjungtos, sukoncentruotos, liofilizuotos ir davė neapdorotą aminą (20 mg) .

Į neapdorotą aminą buvo pridėta 1 ml deaeruoto 0,5 M natrio borato vand. buferio (pH 8,5) ir deaeruoto metanolio (3 ml) . Reakcijos mišinys prapūstas azotu ir atšaldytas iki 0 °C. Buvo pridėti 6,0 μΐ akriloilchlorido ir maišymas tęsiamas 10 minučių. Reakcijos mišinys sukoncentruojamas kambario temperatūroje iki apytiksliai trečdalio savo pradinio tūrio. Išgryninus Bio-Gel' P2 kolonėlėje ir liofiiizavus, buvo gautas grynas (55) junginys (15 mg).

BMR duomenys: ‘'C(D₂O) : δ 16, 90, 16, 45 (2xCH₃, fukozė),

21,95 (NHCOCH3), 39,51(CH₂N), 54,31 (C-2); 99,21, 99,95,

101,56, 102,87, (C-l, C-l', 2xC-l fukozė), 127,21,

129,57 (CH=CH₂), 173, 27 (NHCOCH₃) .

(vi) Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcPl-O-tarpiklis 5-PAA (56)

2-akrilamidetilo 2-acetamid-2-dezoksi-3-0-2-0-a-L-fukopiranozil-p-D- galaktopiranozil-4-a-L-fukopiranozil-3D-gliukopiranozido (55) kopolimerizacij a su akrilamidu.

Į akrilamidą (8,3 mg, 120 ųmol) kambario temperatūroje sudėtas tetrasachrido (54) (15 mg, 20 ųmol) tirpalas deaeruotame vandenyje (1 ml). Prie šio lėtai maišomo tirpalo (laikomo tamsoje ir azoto atmosferoje) prie 0°C pridėti N,N,N',N'-tetrametilendiaminas (6 μΐ) ir po to amonio persulfatas (3,5 mg) . Mišinys maišomas kambario temperatūroje visą nakti. TLC (etilo acetatas:acto rūgštis:metanolis:vanduo, 5:3:3:2) parodė, kad visas (49) junginys buvo sunaudotas ir kad susiformavo sukepęs pagrindinis produktas. Polimeras gryninamas gelio chromatografijos būdu Bio-Gel® P2 kolonėlėje, išplaunant su vandeniniu n.butanoliu (1%). Išplauta tuščiame tūryje polimerinė frakcija buvo džiovinama šaldant ir gauta 20 mg (56) polimero.

BMR analizė, parodė kad vidutiniškai 1 trisachridas atitinka 6 akrilamido vienetus.

PAVYZDYS

Fucal-2Galpl-O-tarpiklis 5-PAA (58) (i) 2-akrilamidetilo 2-C-oc-L-fukopiranozil-p-D-galaktopiranozidas (57)

Į 6,4 mg (30) junginio pridėta 0,3 ml deaeruoto 0,5 M natrio borato vand. buferio (pH 8,5) ir metanolio (0,9 ml). Reakcijos mišinys prapūstas azotu ir atšaldytas iki °C. Buvo pridėti 2 μΐ akriloilchlorido ir maišymas tęsiamas 10 minučių. Reakcijos mišinys koncentruojamas kambario temperatūroje iki apytiksliai trečdalio savo pradinio tūrio. Išgryninus Bio-Gel® P2 kolonėlėje ir liofilizavus, gautas (57) junginys (4 mg, 57%) .

BMR duomenys: ⁷Η (D₂O) : δ 1,2 (d, CH₃ fukozė) , 4,52 (dd, H-l), 5,22 (m, H-l'), 5,80 (dd, CH=CH₂) , 6,25 (m, CH=CH₂) .

(ii) Fucal-2Gaipi-O-tarpiklis 5-PAA (58)

Į tirpalą, sudarytą iš (57) junginio (4 mg, 9 ųmol) ir akrilamido (3,3 mg, 47 μιηοΐ) deaeruotame vandenyje (0,75 ml) pridėta pirma N,N,N',N'-tetrametilendiamino (2 μΐ) ir po to amonio persulfato (1,5 mg). Mišinys maišomas kambario temperatūroje visą naktį. (58) polimeras buvo valomas Bio-Gel® P-2 kolonėlėje (9,1 mg).

BMR duomenys: ³H (D₂O) parodė, kad 1 prijungtas oligosacharidas vidutiniškai atitinka 12,3 akrilamido vienetams.

BIOLOGINIAI EKSPERIMENTAI

Medžiagos ir būdai

In situ Helicobacter pylori lipnumo bandymas

Neužkrėsti mėginiai iš normalių suaugusių žmonių skrandžio audinio (gauti iš Huddinge Sjukhus, Švedija) buvo naudojami tiriant Helicobacter pylori lipnumą. Visi pavyzdžiai buvo fiksuoti 4% formaline ir vėliau pamerkti į parafiną.

Pjūviai, 4 ųm storio, padėti ant stiklinių plokštelių ir nudažyti Steinerio sidabravimo būdu (kad būtų galima nustatyti skrandžio ląstelių tipus ir patikrinti, jog nėra patologinių pakitimų audinių mėginiuose) ir/arba vėliau išbandytas lipnumas.

Buvo naudojami keturi klinikiniai Helicobacter pylori izoliatai, A4, A5, A7 ir A8 (gauti iš Huddinge Sjukhus) . Helicobacter pylori buvo auginama prie 37°C ant Brucella agaro, papildyto 10% jaučio krauju ir 1% įso Vitalex (Becton Dickinson Microbiology System, Cockeyville, MD) mikroearofilinėse sąlygose (5% O₂, 10%CO₂, 85%N₂) ir 98% drėgmės. Praėjus 5 dienoms po užsėjimo, bakterijos iš vienos pilnai sužėlusios lėkštelės buvo atsargiai suspenduotos pipete 25 ml 0,1 M NaCl/0,1 M natrio karbonato, pH 9,0. Prie bakterijų suspensijos pridėta 250 μΐ šviežiai paruošto 10 mg/ml fluoresceino izotiocianato (FITC, Sigma Chemical Co.) tirpalo dimetilsulfokside, ir buvo laikoma 1 valandą kambario temperatūroje tamsoje. Bakterijos išgautos centrifuguojant prie 3000 x g 10 minučių ir vėl suspenduotos, švelniai pipetuojant, fosforu buferizuotame fiziologiniame tirpale (PBS) + 0,05% polioksietileno sorbito monolaurate (Tween 20) ir vėl išgautos kaip nuosėdos po centrifugavimo, aprašyto aukščiau. Plovimo procedūra buvo pakartota 3 kartus ir suspensija galiausiai pakartotinai suspenduota, pasiekiant optinį tankį 0,2. FITCžymėjimo stiprumas visuose kamienuose buvo vienodas, kaip galima spręsti apžiūrėjus panašų skaičių organizmų fluorescensiniu mikroskopu. Vienodo 1 ml dydžio mėginiai paimti iš galutinių suspensijų ir tuojau pat panaudojami arba saugomi prie -20 °C iki panaudojimo. Nebuvo aptikti skirtumui tarp surišimo pobūdžio tarp kamienų pažymėtų ir tuoj pat panaudotų bei kamienų, kurie buvo užšaldyti ir vieną kartą atitirpdyti prieš panaudoj imą.

Audinių pjūviai, uždėti ant objektinių stiklelių, buvo deparafinuoti Bio-Clear (Bio-Optica SpA) ir absoliučiu alkoholiu, 95% alkoholiu, bei po to 70% alkoholiu, praskalauti vandeniu po to su PBS ir tada laikomi 45 min, blokuojančiame buferyje (1% želatinos/0,05% Tween 20, esantys PBS). FITC-žymėtų bakterijų suspensija (optinis tankis apie 0,200-0,250) buvo sumaišoma su tokiu pat junginio koncentruoto tirpalo kiekiu. Mišinys laikomas 2 valandas kambario temperatūroje tamsoje, 200 μΐ šio mišinio buvo uždėti ant audinių pjūvių, esančių ant objektinių stiklelių, ir buvo laikoma 1 valandą kambario temperatūroje drėkinamoje kameroje. Po to objektiniai stikleliai buvo 6 kartus plaunami su PBS prieš jų peržiūrą su fluorescentiniu mikroskopu.

Analizė

In situ lipnumo bamdymai buvo atliekami nustatyti Helicobacter pylori lipnumą prie žmogaus skrandžio audinio ir parodyti Helicobacter pylori slopinimą su junginiais, turinčiais galinę L-fukozę, pvz., LNF1-HSA.

Kad būtų galima nustatyti galinę L-fukozę turinčių junginių sugebėjimą inhibuoti prisirišimą, FITC-žymėtų bakterijų suspensija (optinis tankis apie 0,200-0,250) sumaišoma su koncentruotu junginio tirpalu. Mišinys buvo iš pradžių laikomas 2 valandas kambario temperatūroje tamsoje. 200 μΐ šio mišinio buvo uždėti ant audinio pjūvio, esančio ant objektinio stiklelio, ir buvo laikoka 1 valandą kambario temperatūroje. Po inkubacijos, paveikti audinio pjūviai buvo 6 kartus plaunami su PBS prieš jų analizę.

Audinių pjūviai, paveikti su bandomuoju junginiu, bei nepaveikti audinių pjūviai buvo palyginti panaudojant fluorescentinę mikroskopiją ir vaizdų ananlizę (Neotech Image Grabber 24/1.1 buvo naudojamas perduoti regimąjį mikroskopo vaizdą į kompiuterio ekraną ir Optilab 24/2.1.1 Grafted - suskaičiuoti prilipusias bakterijas.

Gautos reikšmės lentelėje yra vidurkiai iš prilipusių 5 bakterijų trijose skirtingose ploteliuose kiekviename pjūvyje, lyginant paveiktus (su junginiu) ir nepaveiktus audinių pjūvius.

LENTELĖ

JUNGINYS	KONC.	SLOP. (vidur- kis)
t Fucal-2Gaipi-ta.rpiklis 1] ₅-HSA	2 mM	34%
[ Fucal-2Gaipi-tarpiklis 4]₈-HSA	2 mM	35%
[ Fucal-2Gaipi-tarpiklis 2] _n-PAA n=112,3 akrilamido vienetams	2 mM	45%
[ Fucal-2Gaipi-tarpiklis 5]_n-PAA n=15 akrilamido vienetams	1 mM	53%
[ Fucal-2Gaipi-3GlcNAcPl-tarpiklis 2] _n-PAA n=17,6 akrilamido vienetams	2 mM	40%
[ Fucal-2Gaipi-3GlcNAcpl-Galpl-tarpiklis 3] ₃₅-HSA(LNFI-SA) (Pirktas iš įso Sep AB, Švedija)	0,2 mM	72%
[ Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcpl-Galpltarpiklis 3] ₃₂-HSA (LND1-HSA) (Pirktas iŠ įso Sep AB, Švedija)	0,2 mM	71%
[ Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcpi-Gaipitarpiklis 3] _n-PAA n=118 akrilamido vienetų	0,2 mM	67%
n=15 akrilamido vienetams	0,2 mM	84%
n=16 akrilamido vienetams	0,2 mM	93%
[ GlcNAcal-3(Fucal-2)Gaipi-3(Fucal-4)GIcNAcPlGaipi-tarpiklis 3] ₂₂-HSA (A-hepta-HSA)	0,2 mM	80%

(Pirktas iš įso Sep AB, Švedija)

Claims

IŠRADIMO APIBRĖŽTIS

1. Junginio, aprašomo bendromis formulėmis Ia, lb, lc, Id, Ie arba If:

Y-Z_x-R A-Z₂-R A-Z3-B-Z4-R

Ia lb lc

A-Z₅-B-Z₆-C-Z₇-R A-Z₈-B-Z₉-C-Z₁₀-D-Z_n-R

10 Id Ie

A Z₁₂ B Z₁₃ C Z₁₄-D Z₁₅ E Z₁₆ R,

If

15 kuriose

Z_x, Z₂, Z₃, Z₄, Z₅, Z₆, Z₇, Z_a, Z₉, Z₁₀, Z_1X, Z₁₂, Z₁₃, Z₁₄,

Z₁₅ ir Z₁₆ nepriklausomai yra O, S, CH₂ arba NR₂₅, kur R₂₅yra vandenilis, C₁.₂₄-alkilas, C₂_₂₄-alkenilas, C₁.₂₄-alkilkarbonilas arba benzoilas, kuris pasirinktinai gali

20 turėti hidroksilo, aminogrupės, C₁_₄-alkilo, C₁_₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogenC₁_₄-alkilo pakaitą;

kuriose

Y, A, B, C, D ir E formulėse vingiuota linija pažymėtas ryšys, kuris yra arba a - arba β - konfigūracijoje;

R_x, R₂ ir R₃ kiekvienas nepriklausomai yra H, halogeno, azido, guanidinilo, šakota ar nešakota C₁_₂₄-alkilo, C₂.₂₄-alkenilo, C₂-₂4^-alkinilo, C₃_₈-cikloalkilo, C₃.₈-cikloalkil-C₁_₂₄-alkilo arba C₁.₁₂-alkoksi-C₁_₁₂-alkilo grupė, kuri pasirinktinai gali turėti hidroksilo, amino, halogeno ar oksogrupės pakaitą; arilas arba aril-C₁.₄-alkilas, kuris pasirinktinai gali turėti arilo grupėje hidroksilo, amino, C_y_₄-alkilo, C_y_₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-C₁.₄-alkilo pakaitą; tri (C_y_₄-alkil) sililetilas; oksogrupė; =SR₄R₅grupė, kur

R₄ ir R₅ nepriklausomai yra H arba C_x.₄-alkilas; arba XR₁₀ grupė, kur

X yra O, S, NR₂₀ arba =N- ir

R₁₀ yra H, šakota ar nešakota C₁_₂₄-alkilo, C₂.₂₄-alkenilo, C₂_₂₄-alkinilo, C₃.₈-cikloalkilo, C₃_₈-cikloalkilC₁_₂₄-alkil° arba C₁_₁₂-alkoksi-C₁.₁₂-alkilo grupė, kuri pasirinktinai gali turėti hidroksilo, amino, halogeno ar oksogrupės pakaitą; arilas, aril-C^-alkilas arba heterociklil-C₁_₄-alkilas, kuris pasirinktinai gali turėti arilo arba heterociklilo grupėje hidroksilo, amino, C₁.₄-alkilo, C₁_₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-C^-alkilo pakaitą; tri (C_y.₄alkil) sililetilas; tri (C₁.₄-alkil) siūlas; tri (C_y_₄alkil)sililetoksimetilas; natūraliai egzistuojančių aminorūgščių acilo liekanos; Cy.^-alkilkarbonilas; C₂-₂₄alkenilkarbonilas; C₃_ ₈-ei kloalkil-C^-g -alkilkarbonilas; arilkarbonilas; arba terpenilas; ir

R₂₀ yra H, C₁.₂₄-alkilas, C₂_₂₄-alkenilas, C₁.₂₄-alkilkarbonilas arba pasirinktinai benzolo žiede turintis hidroksilo, amino, C₁_₄-alkilo, C₁.₄-alkoksilo, nitrogrupės, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-C^alkilo pakaitą benzoilas ar ftaloilas;

RlAz R-2A' R-3Af ^4A' RlB' R’

R9

R.

R3

R4

R,
2Az ^Λ3Αζ ^IX4Az ^Λ1Βζ ^lx2Bz ^Bz ^4 B > ^ĮCZ ^2C' ^3(7 ^IX4Cz ^lxlDz

R_2D, R_3d, R_4d, R_1e, R_2e, R_3e ir R_4E kiekvienas nepriklausomai yra kaip apibrėžti aukščiau R_x, R₂ ir R₃ arba yra grupė, turinti VII formulę

YZ_X

VII, kur Y ir Z_x yra apibrėžti aukščiau;

su sąlyga, kad vienas iš R arba Z

14, kad vienas iš R

1EZ lBz

R:

Bz R3B arba R4B yra Z₃z lCz R2C arba R4C yra Z₆z ėūz R3D arba R4D yra Z10 ^3E arba R4E yra Zl5z kad

2Az bent vienas ir ne daugiau kaip penki iš R_1A, R

4AZ ^lEz kad ibz

R2EZ 'ZBz
3Bz

R4BZ R

1CZ

2C r

3C z
4CZ

R_Xq, R

2DZ ^3Dz

R3AZ

R4DZ

3E ir R_4e yra grupė, turinti VII formulę, ir

A grupės R_1a, R_2a, figūracijos, B grupės R₁₀, figūracijos, C grupės R_1C,

R_3A ir R_4ACH₂ pakaitų konR_2B, R3B ir R4b^CH2 pakaitų konR_2C, R3C R_4CCH₂ pakaitų konfigūracijos, D grupės R_1D, R_2D, R_3d ir R_4DCH₂ pakaitų konfigūracijos, E grupės R_1E, R_2E, R_3E ir R_4ECH₂ pakaitų konfigūracijos nepriklausomai yra D-gliukozės, L-gliukozės, D-galaktozės, L-galaktozės, D-manozės, L-manozės, D-tolozės, L-tolozės, D-alozės, L-alozės, D-altrozės, L-altrozės, D-gulozės, L-gulozės, D-idozės ir L-idozės konfigūracijos;

R yra vandenilis, šakota ar nešakota C₁_₂₄-alkilo, C₂.₂₄alkenilo, C₂_₂₄-alkinilo, C₃_₈-cikloalkilo, C₃._B-cikloalkil-C₁.₂₄-alkilo, C₁.₁₂-alkoksi-C₁_₁₂-alkilo, C_x.₂₄-alkilkarbonilo, C₂.₂₄-alkenilkarbonilo arba C3.8-cikloalkil-Cx.24LT 3446 B alkilkarbonilo grupė, kuri pasirinktinai gali turėti hidroksilo, amino, halogeno ar oksogrupės pakaitą; arilo arba aril-C^-alkilo, arilkarbonilo ar aril-C_L_₄alkilkarbonilo grupė, kuri pasirinktinai arilo grupėje gali turėti hidroksilo, amino, C^-alkilo, C₁_₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogenC₁.₄-alkilo pakaitą; terpenilas; tri (C₁_₄-alkil) sililetilas; heterociklilas; heterociklil-C₁.₄-alkilas; arba heterocikli 1-C_L_₄-alkilkarbonilas;

grupė, turinti formulę II arba Ha

R₃₀-(CH₂)_q-S(O)_m-CH₂CH₂- II [ R₃₀- (CH₂) _q-S (O) _m-CH₂] ₂CH-CH₂- Ha, kur R₃₀ yra H, karboksilas, C^-alkoksikarbonilas, hidroksilas, aminogrupė arba MA matrica, q yra sveikas skaičius nuo 1 iki 24 ir m yra 0 arba 2; arba grupė, turinti formulę III arba Illa

Phe-S (O) _m-CH₂CH₂- III [ Phe-S (O)_m-CH₂] ₂CH-CH₂- Illa, kur m apibrėžtas aukščiau, o kiekvienas Phe yra fenilas, kuris pasirinktinai gali turėti hidroksilo, amino, C,.₄-alkilo, C₁_₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogen-Cį^-alkilo pakaitą; arba fenilC₁.₄-alkilas, kuris pasirinktinai fenilo grupėje gali turėti vieną hidroksilo, amino, C^-alkilo, C_x.₄-alkoksilo, nitro, halogeno, fenoksi arba mono- ar dihalogenC^-alkilo pakaitą;

grupė, turinti formulę IV

R₄₀CH₂CH(CH₂R₅₀)CH₂IV, kur R₄₀ ir R₅₀ nepriklausomai yra halogenas; arba

Q-(tiltelis)_r-grupė, kur r yra sveikas skaičius 0 arba

1. o Q yra MA matrica arba -COO-MA grupė;

panaudojimas farmacinės kompozicijos, skirtos gydyti ar naudoti profilaktiškai prieš žmonių ligas, sukeltas žmogaus skrandžio gleivinės užkrėtimo su Helicobacter pylori, gamyboje.

2. Panaudojimas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad Z_x, Z₂, Z₃, Z₄, Z₅, Z₆, Z₇, Z₈, Z₉, Z₁₀,

Ζχχ, Z₁₂, Z₁₃, Z₁₄, Z₁₅ ir Z₁₆ yra O.

3. Panaudojimas pagal 1 arba 2 punktą, besiski-r i a n t i s tuo, kad jame daugiausia keturi, geriau daugiausia trys, ypač vienas arba du iš R_1A, R_2A, R_3A,

R-4AZ RlBZ E_2b, R_3b, R_4b, R_1c, R_2c, R-3CZ ^4CZ ^ĮDZ ^2Dz ^3Dz ^4DZ R_1E, ^r2ez R-3E arba R_4E yra grupė pagal formulę VII.

4. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-3 punktų, besiskiriantis tuo, kad R_7A yra VII grupė a konfigūracijoj e.
5. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-3 punktų, besiskiriantis tuo, kad A dalies R_1A, R_2A, R_3A ir R_4aCH₂ turi D-galaktozės konfigūraciją, esant A β konfigūracijoje.
6. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-3 punktų, besiskiriantis tuo, kad R_1a yra VII grupė a konfigūracijoje ir A dalies R_1A, R_2A, R_3a ir R_4ACH₂ turi D-galaktozės konfigūraciją, esant A β - konfigūracijoje .
7. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-3 punktų, besiskiriantis tuo, kad R_2B yra Z₃, Z₅, Z₈ arba Z₁₂ ir B dalies R_1B, R_2B, R_3B ir R_4BCH₂ turi D-gliukozės konfigūraciją, esant B β - konfigūracijoje.
8. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-3 punktų, besiskiriantis tuo, kad R_1B yra acetamido grupė.
9. Panaudojimas pagal bet kuri iš 1-3 punktų, besikiriantis tuo, kad R_1A yra VII grupė α - konfigūracijoje; A dalies R_1A, R_2A, R_3A ir R_4ACH₂ turi Dgalaktozės konfigūraciją, esant A β - konfigūracijoje; R_2B yra Z-., Z₅, Z₈ arba Z₁₂; ir B dalies R_1B, R_2B, R_3B ir R_4hCH₂ turi D-gliukozės konfigūraciją, esant B β - konfigūracijoje, bei R_1B yra acetamido grupė.
10. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-9 punktų, besiskiriantis tuo, kad R_3b yra grupė pagal VII formulę, α - konfigūracijoje.
11. Panaudojimas pagal bet kuri iš 1-10 punktų, b e -

siskiriantis tuo , kad A dalies R_1A, ^3A ir R_4aCH₂ bei B dalies R ^3B R4bCH₂ turi D- galaktozės konfigūraciją ir C dalies R_1C, R_2C, R_3C ir

R₄₍-CH₂ turi D-gliukozės konfigūraciją, esant A α konfigūracijoje bei esant B ir C β - konfigūracijoje, ir kuriame R_1B bei R_3C yra grupės, atitinkančios VII formulę α - konfigūracijoje, kuriame R_1A bei R_1C yra acetamido grupės, ir kuriame R_2B yra Z₅, Z_s arba Z₁₂, o

R , yra Z., Z, arba Z₁₃. 12 . Panaudojimas pagal 6 t i s tuo, kad A yra Fuc 13 . Panaudojimas pagal 9 t 1 s tuo, kad A-Zj-B

punktą, besiskiri α1-2Θ3ΐβ.

punktą, besiskiri yra Fucal-2Ga^l-3ΰ1οΝΑοβ a na narba

Fucal-2ΰβ1β1-3(Fucal-4)ΰΙοΝΑοβ.
14. Panaudojimas pagal 9 punktą, besiskiriantis tuo,kad A-Z₅-B-Z₆-C yra Fucal-2Gaip l-3GlcNAca 13Gaip arba Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Gaip.
15. Panaudojimas pagal 9 arba 11 punktą, besiskiriantis tuo, kad A-Z₈-B-Z₉-C-Z₁₀-D yra GalNAcal3(Fucal-2)Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3GaiP arba Fucal2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcpl-3Galpl-4Glcp.
16. Panaudojimas pagal 11 punktą, besiskiriantis tuo, kad A-Z₁₂-B-Z₁₃-C-Z₁₄-D-Z₁₅-E yra GalNAcal-3(Fucal-2)Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcpl-3Gaipi-4Glcp.
17. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-16 punktų, besiskiriantis tuo, kad R yra grupė Q(tiltelis) _r-, kur r yra sveikas skaičius 0 arba 1, o Q yra matrica (MA).
18. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-17 punktų, besiskiriantis tuo, kad tiltelis apibrėžiamas kaip (W)_v-S'-P’, kur S’ yra C₁.₂₄-alkilo, C₂_₂₄-alkenilo, C₁.₂₄-alkilarilo, arilC₁_₂₄alkilo, arilC₁.₂₄alkilarilo, C₁.₂₄alkilarilC₁_₂₄alkilo grupė, šios grupės gali būti pertrauktos karbonilo, tiokarbonilo, oksikarbonilo, karboniloksi, karbonilamino, aminokarbonilo, azo, okso arba tio grupėmis; arilo grupė, ariloksi, C₁.₂₄-alkoksilo, polietilenglikolio grupė, steroidinė grupė, sfingoidinė grupė; visos grupės gali turėti karboksilo, C₁.₄alkilkarbonilo, amido, hidroksilo, alkoksi, ariloksi, fenoksi pakaitą;

P’ yra NH-C(S), NH-C(O), C(O), NH, C(S), C(O)O, (0)C0, SO, SO₂, SO₃, SO₄, PO ₃, PO ₄;

W yra NH-C(S), NH-C(O), C (O), C (S), C (0)0, (0)C0, SO,

S0₂, S0₃, SO₄, PO₂, PO₃, PO₄, su sąlyga, kad kai Z_lz Z₂, Z₄, Z₇, Z_n arba Z₁₆ yra CH₂, tai W negali būti PO₂, su sąlyga, kad kai Z_T, Z₂, Z₄, Z₇, Z_u arba Z₁₆ yra O ar S,

tai W negali būti (O)CO, so₄ ar PO₄, ir su sąlyga, kad kai Z,, Z₂, Z₄, Z ,, Z_u arba Zie yra NH, tai W negali būti NH-C (S ), NH-C(O), (0) CO, so₄ ar PO₄, ir v yra sveikas

skaičius 0 arba 1.
19. Panaudojimas, pagal bet kurį vieną iš 18 punktų, besiskiriantis tuo, kad tiltelis pasirinktas iš
20. Panaudojimas pagal bet kurą iš 1-17 punktų, besiskiriantis tuo, kad matrica (MA) yra žmogaus serumo albuminas (HSA), jaučio serumo albuminas (BSA) arba poliakrilaminas (PAA).
21. Panaudojimas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad junginys yra pasirinktas iš [ Fucal-2Gaipi -1 i 1 tel is] _n-MA;

[ Fucal-2Gaipi-3GlcNAcP-tiltelis]_n-MA;

[ Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcp-tiltelis] _n-MA;

[ Fucal-2Galpl-3GlcNAcpl-3Galpl-tiltelis] _n-MA;

[ Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcP-3Galpl-tiltelis]_n-MA;

[ GalNAcal-3 (Fucal-2)Galpl-3 (Fucotl-4) GlcNAcpl-3Galpltiltelis] _n-MA;

[ Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcpl-3Galpl-4Glcpl-NH] _n-MA; [ GalNAcal-3(Fucal-2)Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcpl-3Gaipi4GlcPl-[ tiltelis] _n-MA;

kur tiltelis yra išrinktas iš grupės, apibrėžtos 19 punkte, n yra sveikas skaičius 1-40, kai MA yra HSA ar BSA, bei n yra sveikas skaičius 10-10000, kai MA yra PAA.
22. Panaudojimas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad junginys yra pasirinktas iš [ Fucal-2Gaipi-tiltelis 1] _n-HSA;

[ Fucal-2Gal01-tiltelis 2]_n-PAA;

[ Fucal-2Gaipi-tiltelis 4]_n-HSA;

[ Fucal-2Gal3l-tiltelis 5]_n-PAA;

[ Fucal-2Galpl-3GlcNAcp-tiltelis 5]_n-PAA;

[ Fucctl-2Gaipi-3 (Fucal-4) GlcNAcP-tiltelis 5] _n-PAA;

[ Fucal-2Gaipi-3GlcNAcpi-3Gaipi-tiltelis 3]_n-HSA;

[ Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcP-3Gaipi-tiltelis 3]_n-HSA;

[ Fucal-2Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcpl-3Galpl-4Glc 1-NH] _n-PAA;

[ GalNAcal-3(Fucal-2)Galpl-3(Fucal-4)GlcNAcPl-3Galpltiltelis 3] _n-HSA;

kur tiltelis 1, tiltelis 2, tiltelis 3, tiltelis 4 ir tiltelis 5 yra apibrėžti 19 punkte, n yra sveikas skaičius 1-40, kai MA yra HSA, bei n yra sveikas skaičius 10-10000, kai MA yra PAA.
23. Panaudojimas, pagal bet kuri iš 1-22 punktų, b e sikiriantis tuo, kad junginys pagal formules Ia, Ib, Ic, Id, Ie arba lf yra pritaikytas įvesti kartu su preparatu, paprastai vartojamu terapiškai gydant gastritus arba opaligės, ypač su preparatais, turinčiais omeprazolio, cimetidino, ranitidino, lansoprazolio, pantoprazolio, sukralfato, famotidino, nizetidino, magnio hidroksido, aliuminio hidroksido, kalcio karbonato, simetikono arba magaldrato.
24. Panaudo j imas_T pagal bet kurį iš 1-23 punktų, besiskiriantis tuo, kad junginys pagal formules Ia, Ib, lc, Id, le arba If yra pritaikytas įvesti kartu su preparatu, vartojamu gydymo kursuose su antimikrobiniais vaistais, ypač su preparatais, turinčiais :

β laktaminių antibiotikų, kaip antai: amoksicilino, ampicilino, cefalotino, cefakloro ar cefiksimo; arba makrolidų, kaip antai, eritromicino ar klaritromicino; arba tetraciklinų, kaip antai, tetraciklino ar doksiciklino; arba aminoglikozidų, kaip antai, gentamicino, kanamicino ar amikacino; arba chinolonų, kaip antai: norfloksacino, ciprofloksacino ar enoksacino; arba kitų medžiagų, kaip antai: metronidazolio, nitrofurantoino ar chloramfenikolio;

arba preparatų, turinčių bismuto druskų, tokių kaip bismuto subcitrato, bismuto subsalicilato, bismuto subkarbonato, bismuto subnitrato ar bismuto subgalato.
25. Junginys formulės Ia, Ib, lc, Id, le ir If, kaip apibrėžta punktuose 1-22, skirtas gydyti ar vartoti profilaktiškai prieš žmonių ligas, sukeltas žmogaus skrandžio gleivinės užkrėtimo Helicobacter pylori.
26. Junginys formulės Ia, Ib, lc, Id, le ir If, kaip apibrėžta punktuose 1-22 junginyje su bent vienu antiopiniu ar antigastritiniu medikamentu, arba su bent viena antimikrobine medžiaga arba jų mišiniu, skirtas pydyti ar vartoti profilaktiškai prieš žmonių ligas, sukeltas žmogaus skrandžio gleivinės užkrėtimo Helicobacter pylori.
27. Farmacinė kompozicija, besiskirranti tuo, kad turi jungini,, pagal formules Ia, Ib, Ic, Id, Ie arba If kaip apibrėžta 1-22 punktuose, arba tokių junginių mišinį, kartu su bent vienu antiopiniu ar antigastritiniu medikamentu arba su bent viena antimikrobine medžiaga arba jų mišiniu ir su farmaciškai priimtinu nešikliu.
28. Farmacinė kompozicija pagal 27 punktą, besiskirianti tuo, kad antiopinis ar antigastritinis medikamentas pasirinktas iš skrandžio sekreciją slopinančių junginių ir antacidų.
29. Farmacinė kompozicija pagal 28 punktą, besiskirianti tuo, kad skrandžio sekreciją slopinantis junginys pasirinktas iš cimetidino, ranitidino, famotidino, nizatidino, omeprazolio, lansoprazolio, pantoprazolio ir sukralfato.
30. Farmacinė kompozicija pagal 28 punktą, besiskirianti tuo, kad antacidas pasirinktas iš A1(OH)₃, Mg(OH)₂, CaCO₃, Na₂CO₃, NaHCO₃, aliuminio magnio hidroksido arba jo hidrato, simetikono.
31. Farmacinė kompozicija pagal 27 punktą, besiskirianti tuo, kad antimikrobine medžiaga pasirinkta iš laktaminių antibiotikų, kaip antai: amoksicilino, ampicilino, cefalotino, cefakloro ar cefiksimo; makrolidų, kaip antai: eritromicino ar klaritromicino; tetraciklinų, kaip antai: tetraciklino ar doksiciklino; aminoglikozidų, kaip antai: gentamicino, kanamicino ar amikacino; chinolonų, kaip antai: norfloksacino, ciprofloksacino ar enoksacino; bismuto druskų, tokių kaip bismut trato, bismuto subsalicilato, bismuto subke bismuto subnitrato ar bismuto subgalato; heterc antibiotikų, kaip antai: metronidozolio, rantoino, ir benzolo darinių, kaip chloramfenik
32. Naujas junginys [ Fucal-2Gal3l-tiltelis kuriame tiltelis 1 yra

1] _n-HSA, o n yra sveikas skaičius 1-40.
33. Naujas junginys [ Fucal-2Galpl-tiltelis kuriame tiltelis 2 yra

2] _n-PAA, o n yra sveikas skaičius 10-10000.
34. Naujas junginys [ Fucal-2Galpl-ti1telis kuriame tiltelis 4 yra

4] _n-HSA, o n yra sveikasis skaičius 1-40.
35. Naujas junginys [ Fucal-2Gaipi-tiltelis kuriame tiltelis 5 yra

5] _n-PAA, o n yra sveikasis skaičius 10-10000.
36. Naujas junginys [ Fucal-2Gaipi-3GlcNAcpi-tiltelis

5] _n-PAA, kuriame tiltelis 5 ir n yra tokie, kaip apibrėžta 35 punkte.
37. Naujas junginys [ Fucal-2Gaipi-3(Fucal-4)GlcNAcPltiltelis 5] _n-PAA, kuriame tiltelis 5 ir n yra tokie, kaip apibrėžta 35 punkte.
38. Nauji junginiai pagal bet kurį iš 32-37 punktų, besiskiriantys tuo, kad tas junginys skirtas vartoti gydant gastritą ar opaligę kartu su įprastu preparatu turinčiu omeprazolo, cimetidino, ranitidino, lansoprazolo, pantoprazolo, sukralfato, famotidino, nizetidino, magnio hidroksato, aliuminio hidroksato, kalcio karbonato, simetikono arba magaldrato.
39. Nauji junginiai pagal bet kurį iš 32-37 punktų, besiskiriantys tuo, kad tas junginys yra pritaikytas vartoti derinyje su preparatu, vartojamu gydymo kurse su antimikrobiniu agentu, ypač su preparatais, turinčiais:

β -laktaminių antibiotikų, kaip antai: amoksicilino, ampicilino, cefalotino, cefakloro ar cefiksimo; arba makrolidų, kaip antai: eritromicino ar klaritromicino; arba tetraciklinus, kaip antai tetracikliną ar doksicikliną; arba aminoglikozidus, kaip antai, gentamiciną, kanamiciną ar amikaciną; arba chinolinus, kaip antai norfloksaciną, ciprofloksaciną ar enoksaciną; arba kitų medžiagų, kaip antai metronidazolą, nitrofurantoiną ar chloramfenikolą; arba su preparatais, turinčiais bismuto druskų, kaip antai, bismuto subcitrato, bismuto subsalicilato, bismuto subkarbonato, bismuto subnitrato ar bismuto subgalato.

100
40. Nauji junginiai pagal bet kuri, iš 32-37 punktų, skirti vartoti terapijoje.
41. Naujų junginių pagal bet kurį iš 32-37 punktų gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad panaudojami žinomi šioje srityje būdai.
42. Naujų junginių, turinčių Ia, Ib, Ic, Id, Ie ir lf formules pagal 1 punktą, gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad

i) paverčia monosacharidą į glikozidą su aglikoninė R_agrupe, kad susidarytų R_a-glikozido darinys, taip, kad tą R_a-glikozidą būtų galima tranformuoti į glikozilo donorą, aktyvuojant anomerinį centrą, ii) po to Įveda naujas funkcines grupes R_b, iii) kondensuoja R_b-pakeistus R_a-glikozidus, jei reikia kelių glikozidinių jungčių, ši iii) stadija pakarto j ama, iv) po to įveda pakaitą R_c, apibrėžtą kaip (Z₁-Z₁₆)-R, redukuojančiame gale, ir, jei būtina, pašalina blokuojančias grupes.