KR970042593A - 재조합 알파-인터페론의 정제방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 재조합 알파-인터페론을 함유하는 대장균을 배양하여 얻어진 알파-인터페론-함유 배양액으로 부터 알파-인터페론을 정제하는 방법을 제공하고, 이 방법은 (a) 배양액에 대해 pH 분획을 실시하여 침전물을 얻는 단계; (b) 상기 a단계에서 얻은 침전물을 QAE-세파로스 크로마토그래피 시키는 단계; (c) 상기 b단계에서 얻은 용출액을 sp-세파로스 크로마토그래피 시키는 단계; (d) 상기 c단계에서 얻은 용출액을 OctyL-세파로스크로마토그래피 시키는 단계; 및 (e) 상기 d단계에서 얻은 겔여과 크로마토그래피 시키는 단계를 포함함을 특징으로 한다.

Description

재조합 알파-인터페론의 정제방법

본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

제5도는 최종 정제된 알파-인터페론의 모세관 전기영동 결과

Claims (7)

1. 대장균 배양에 의해 생산된 제조함 인간 알파-배양액으로부터 정제하는 방법에 있어서,

   (a) 배양액에 대해 pH 분획을 실시하여 침전물을 얻는 단계;

   (b) 상기 (a)단계에서 얻은 침전물을 QAE-세파로스 크로마토그래피 시키는 단계;

   (c) 상기 (b)단계에서 얻은 용출액을 SP-세파로스 크로마토그래피 시키는 단계;

   (d) 상기 (c)단계에서 얻은 용출액을 octyl-세파로스 크로마토그래피 시키는 단계; 및

   (e) 상기 (d)단계에서 얻은 겔여과 크로마토그래피 시키는 단계를 포함함을 특징으로 하는 재조합 알파-인터페론의 정제 방법.
2. 제1항에 있어서, 상기 (a)단계의 pH 분획은 pH 4.0 내지 5.0의 범위내에서 수행함을 특징으로 하는 방법.
3. 제1항에 있어서, 상기 (b)단계에 있어서, (a)단계의 알파-인터페론 침전물을 완충용액으로 완전히 용해시킨 뒤, 농축과 투석 공정의 실시없이 곧바로 QAE-세파로스 크로마토그래피를 수행함을 특징으로 하는 방법.
4. 제1항에 있어서, 상기 (b)단계의 QAE- 세파로스 크로마토그래피 실시에 있어서 알파-인터페론의 용출은 pH4.0 내지 6.5의 완충용랙을 사용하여 실시함을 특징으로 하는 방법.
5. 제1항에 있어서, 상기 (c)단계의 SP-세파로스 크로마토그래피 실시에 있어서, 알파-인터페론의 용출은 0-0.4M 염화나트륨 선형 농도 구배로 실시함을 특징으로 하는 방법.
6. 제1항에 있어서, 상기 (d)단계의 Octyl-세파로스 크로마토그래피에 있어서 알파-인터페론의 용출은 0.5-0M 황산암모늄 역선형 농도 구배로 실시함을 특징으로 하는 방법.
7. 제1항에 있어서, 상기 (e)단계의 겔여과 크로마토그래피는 세파크릴 S-200을 사용하여 실시함을 특징으로 하는 방법.