KR960031617A - 사이클로스포린 a 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 톨리포클레이디엄 에스피.에서 발효배지를 구성하여 사이클로스포린 A를 제조하는 방법에 관한 것이다. 균류 집단체는 상기 발효배지에서 추출하여 메탄올 추출물을 얻고, 이를 증발하여 메탄올을 제거한 후 최초의 잔류물을 얻는다. 에틸아세트산 추출물은 상기 최초의 잔류물의 수용액에서 얻어지며 이를 변색.농축시켜서 두 번째 잔류물을 얻게 되며 이를 정제시켜서 사이클로스포린 A를 제조하는 것이다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
Claims (17)
- 톨리포클레이디엄 에스피.에서 사이클로스포린 A를 제조하는 방법에 있어서, 상기 톨리포클레이디엄 에스피.를 영양배지에서 발효시켜 발효된 배지를 얻고, 상기 발효된 배지에서 균류집단을 메탄올로 추출하여 그 메탄올 추출액을 얻은 후 상기 추출액을 증발시켜서 메탄올을 제거하고 최초의 잔류물을 얻으며, 상기 수용액의 에틸아세트산 추출물을 제조한 후, 이를 변색 . 농축시킴으로써 두 번째의 잔류물을 얻으며, 이를 두가지 단계 즉, 첫 번째 단계는 고체상의 실라카겔 컬럼과 이동상의 헥산, 클로로포롬 및 메탄올의 용매혼합물이며, 두 번째 단계는 고체상의 수지컬럼과 이동상의 메탄올에서 크로마토그래피로 두 번째 전류물을 정제함을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 있어서, 발효방법은 정적인 발효방법으로 시행함을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 있어서, 발효방법은 고체기질 발효방법으로 시행함을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 있어서, 영양배지에 접종되는 상기 톨리포클레이디엄 에스피.를 시험균주로 함을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제4항에 있어서, 본 발명의 톨리포클레이디엄 에스피.는 pH 4~6에서 유지시킨 포도당, 펩톤, 카제인산 가수분해물과 멸균수를 함유하고 있는 영양배지속에서 성장시키고 나서, 고리형의 포자현탁액인 톨리포클레이디엄 에스피.를 pH 4~6의 맥아추출물, 효모추출물과 한천을 함유하는 한천 슬로프에 접종시킴으로써 시험균주를 얻을 때까지 한천 슬로프에서 배양을 계속함을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 있어서, 발효배지에 접종하고자 두단계의 방법으로 접종물을 증감함을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제6항에 있어서, 상기 첫번째 단계는 시험균주를 pH 4~6에서 포도당, 펩톤, 카제인산 가수분해물 및 멸균수로 구성된 배지에 옮겨서 3~4일 동안 성장하게 함을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제6항에 있어서, 상기 두번째 단계는 첫번째 단계에서 얻어진 배양물을 pH 4~6에서 포도당, 펩톤, 카제인산 가수분해물 및 멸균수로 구성된 배지에 옮겨서 2~3일 동안 성장하게 함을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제5항에 있어서, 배양단계가 10~14일 동안 배양을 행해짐을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항과 2항에 있어서, 영양배지는 pH 4~6에서 포도당, 글리세롤, 카제인산 가수분해물, 맥아 추출물, 펩톤 DL-알파 아미노부탄산과 멸균수로 구성됨을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 배지는 2~6%의 포도당, 2~5.5%의 글리세롤, 1.5~5.5%의 카제인산 가수분해물, 0.5~4.5%의 맥아 추출물, 0.25~2.5%의 펩톤, 0.1~3%의 DL-알파아미노 부탄산 및 멸균수로 구성됨을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 변색공정이 중탄산나트륨과 함께 에틸아세트산으로 세척하고 이어서 물로 세척됨을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 균집단체의 메탄올 추출물은 균집단체를 메탄올로 진탕하고 얻어진 메탄올 추출물을 순간 증발시켜서 끈전끈적한 잔류물을 얻음을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제13항에 있어서, 메탄올 추출물을 증류수에 용해시켜 수용액을 만든 후 에틸아세트산으로 추출하여 에틸아세트산 분획을 얻고 이를 중탄산나트륨과 물로 세척됨을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제14항에 있어서, 에틸아세트산 분획의 농축물은 순간 증발로부터 얻어짐을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 용매혼합물은 헥산, 클로로포롬과 메탄올의 구성비가 각각 10:9:1로 구성됨을 특징으로 하는 사이클로스포린 A 제조방법.
- 제1항에 따른 제조방법으로 제조되는 사이클로스포린 A.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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| KR1019950004023A KR100360675B1 (ko) | 1995-02-28 | 1995-02-28 | 사이클로스포린a제조방법 |
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Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
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| KR960031617A true KR960031617A (ko) | 1996-09-17 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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1995
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| KR100360675B1 (ko) | 2003-01-14 |
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