KR950018455A - 대장균에서 가용성 인간 인터루킨-1베타의 생산 및 정제방법 - Google Patents

대장균에서 가용성 인간 인터루킨-1베타의 생산 및 정제방법 Download PDF

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KR950018455A
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KR1019930029364A
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최인성
박순희
이영희
Original Assignee
김은영
한국과학기술연구원
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Abstract

본 발명은 인간 인터루킨-1베타 유전자를 포함하는 발현벡터, 상기 발현 벡터로 형질전환된 미생물, 상기 미생물을 배양하여 가용성의 인터루킨-1베타를 대량 생산하는 방법, 및 인터루킨-1베타가 생산된 배양액으로부터 얻은 조추출물을 양이온 교환 컬럼 크로마토그래피 및 젤 여과 컬럼 크로마토그래피함을 포함하는 가용성 인간 인터루킨-1베타의 신속하고 효율적인 정제방법에 관한 것이다.

Description

대장균에서 가용성 인간 인터루킨-1베타의 생산 및 정제방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 플라스미드 pHP1에 포함되어 있는 인터루킨-1베타를 코드하는 cDNA의 제한효소 지도를 나타낸 것이다.
제2도는 인터루킨-1베타의 염기서열의 일부를 결정한 겔 사진을 나타낸 것이다.
제3도는 인간 인터루킨-1베타 발현용 플라스미드 pYH-7의 제조전략을 나타낸 것이다.
제4도는 본 발명의 벡터로 형질전환된 대장균에서 인터류킨-1베타의 대량생산을 SDS 폴리아크릴아미드 젤 전기영동으로 확인한 결과를 나타낸 것이다.
제5도는 인터루킨-1베타의 발현을 웨스턴 블롯팅(Western blotting)으로 확인한 결과를 나타낸 것이다.

Claims (9)

  1. 인간 인터루킨-1베타를 코드하는 유전자를 포함하며, 대장균내에서 상기 유전자를 발현시켜 가용성 인간 인터루킨-1베타를 생성시키는 발현벡터.
  2. 제1항에 있어서, pHP1 또는 pYH-7인 발현벡터.
  3. 제1항 또는 제2항의 발현벡터로 형질전환된 대장균.
  4. 제3항에 있어서, 대장균 HB101/pHP1 (KCTC 8523P) 또는 대장균 BL21(DE3)/pYH-7(KCTC 8524P).
  5. 인간 인터루킨-1베타를 코드하는 유전자를 포함하며, 대장균내에서 상기 유전자를 발현시켜 가용성 인간 인터루킨-1베타를 생성시키는 발현벡터로 형질전환된 대장균을 배양함을 포함하는, 인간 인터루킨-1베타의 생산방법.
  6. 제5항에 있어서, 상기 대장균이 대장균 HB101/pHP1 또는 대장균 BL21(DE3)/pYH-7인 방법.
  7. 인간 인터루킨-1베타가 생산된 대장균을 파쇄시킨 후 원심분리하여 얻은 상층액으로부터 가용성 인간 인터루킨-1베타를 정제함에 있어서, 상기 상층액을 양이온 교환 컬럼 크로마토그래피시키는 단계와 젤 여과 컬럼 크로마토그래피시키는 단계를 포함하는, 가용성 인간 인터루킨-1베타의 정제방법.
  8. 제7항에 있어서, 상기 양이온 교환 컬럼으로 에스-세파로즈(S-S epharose) 컬럼을 사용하는 방법.
  9. 제7항에 있어서, 상기 젤 여과 컬럼으로 울트로젤(Ultrogel)AcA 44 컬럼을 사용하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019930029364A 1993-12-23 1993-12-23 대장균에서 가용성 인간 인터루킨-1베타의 생산 및 정제방법 KR950018455A (ko)

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