KR940000117A - 에이치 아이 브이(hiv) 항원 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 C 말단에서 Env 펨티드와 융합된 Gag 펩티드로 구성된 Gag-Env 융합 단백질을 함유하는 실질적으로 순수한 HIV 항원에 대한 것이며, 여기서 Gag 펩티드는 Gag(308-437)로 나타낸 아미노산 서열 중 적어도 10개 아미노산의 연속 서열을 함유하며 Env 펩티드는 Env(512-699)로 나타낸 아미노산 서열 중 HIV 항체와 반응성인 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 적어도 한 부분의 연속 서열을 함유한다.
본 발명의 HIV항원에 대응하는 gag-env 융합 DNA는 목적하는 고 항원성의 HIV 항원을 고수율로 제조하게 한다.
따라서, 본 발명의 HIV 항원은 AIDS의 진단 시약, 백신, 항체 제조 및 치료제의 호라성 성분으로서 유리하게 사용될 수 있다. 또한 전체 gag 유전자에 의해 코팅된 Gag 단백질을 함유하는 실질적으로 순수한 HlV 항원도 기재되어 있다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1-(1) 및 1-(2)도는 전체 HIV-1 게놈을 함유하는 플라스미드 PNL 4-3에 함유된 gag 유전자의 전체 영역에 의해 코딩된 Gag단백질의 전체 아미노산서열을 나타낸다.
제2-(1) 2-(3)도는 전체 HIV-1게놈을 함유하는 플라스미드 PNL 4-3에 함유된 enc유전자의 전체 영역에 의해 코팅된 Env단백질의 전체 아미노산 서열을 나타낸다.
Claims (14)
- 그 말단에서 Env 펩티드와 융합된 Gag 펩티드로 구성된 Gag-Env 융합 단백 질을 함유함을 특징으로 하는 실질적으로 순수한 HlV 항원.(상기에서, Gag펩티드는 Gag(308-437)로 나타낸 아미노산 서열 중 적어도 10개의 아미노산의 연속 서열을 함유하고, 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제1-(1) 내지 1-(2)도는 나타낸 Gag단백질의 전테 아미노산 서열중의 아미노산의 위치 를 나타네는 번호이고, Eny 펩티드는 Env (512-699)로 나타낸 아미노산 서열중 HIV항체와 반음성인 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 적어도 한 부분을 함유하고, 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제2-(1)내지 2-(3)에도 나타낸 Env 단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이다)
- 제 1항에 있어서, Env 펩티드 부분중에 함유된 에피토프가 Env (512-699)로 나타낸 아미노산 서열중 적어도 5개의 아미노산의 연속 서열인 HIV 항인.
- 제1-(1) 내지 1-(2)도에 나타낸 Gag 단백질의 전체 아미노산 서열인 Gag(1-500)로 나타낸 아미노산 서열을 함유하는 Gag 단백질 및 제1항에 따른 HIV 항원의 혼합물을 포함함을 특징으로 하는 HIV 항원.(상기에서, 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제1-(1) 내지 1-(2)도의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이다)
- 제1- (1) 내지 1-- (2)도에 나타낸 Gag 단백질의 전테 아미노산 서열인 Gag(1-500)로 나타낸 아미노산 서열을 함유하는 실질적으로 분리된 형태의 Gag 단백질을 포함함을 특징으로 하는 실질적으로 순수한 HIV 항원.
- (a)제1데옥시리보핵산 서열을 복제 가능한 형질발현 헥터와 결착시켜, 숙주 세포 중에서 복제 가능하며 상기의 형질 발현 벡터 및 그 안에 삽입된 상기의 제1데옥시리보핵산을 함유하는 제1재조합 DNA분자를 수득하고, (상기의 제1데옥시리보핵산 서열은 Gag(300-437)로니타낸 아미노산 서열중 적어도 10개의 아미노산의 연 속 성열을 함유하는 Gag펩티드를 코딩하며, 상기의 괄호안에 나타낸 각숫자는 제1- (1) 내지 1-(2)도에 나타낸 Gag단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이다) , (b)제2데옥시리보핵산 서열을 제1데옥시리보핵산 서열의 하류에서 제1재조합 DNA분자에 결찰시켜 제2서열을 제1서열에 융합시키구 (상기의 제2데옥시리보핵산 서열은 Eny(512-699)로 나타낸 아기노산 서열중 HIV항체와 반응성인 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 적어도 한 부분을 함유하는 Env 펩티드를 코딩하구 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제2-(7) 내지 7-(3)도에 나타낸 Env 단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이다) 상기 방법에 의해 숙주 세포 중에서 복제 가능하며, 형질 발현 벡터, 제1데옥시리보핵산 서열, 및 제1서열의 하류에서 융합된 제2데옥시리보핵산 서열을 람유하는 제2재조합 DNA 분자를 순득하고 ; (c)원핵 세포 또는 진핵세포를 제2재조합 DNA 분자로 형질전환시켜 형질 전환체를 수득하고; (d)형질 전환되지 않은 원핵세포 또는 진핵 세포로부터 형질 전환체를 선택하고; (e)형질 전환체를 배양하여 C-말단에서 Env 펩티드와 융합된 Gag 펩티드로 구성된 Gag-Env 융할 단백질을 함유하는 HIV 항원을 제조하고 ; (f) 배양된 형질 전환체로부터 Gag-Env 융합 단백질을 함유하는 HIV 항원을 분리함을 특징으로 하는, C-말단에서 Env 펩티드와 융합된 Gag 펩티드로 구성된 Gag-Env 융합 단백질을 함유하는 실질적으로 순수한 HIV 항원의 제조방법.
- 제5항에 있어서. 제2데옥시리보핵산 서열이 Env(512-697)로 나타낸 아미노산 서열 중 적어도 5개의 아미 노산의 연속 서열을 코딩하는 제조방법.
- 제5항 또는 6항에 있어서, 형질 발현 벡터가 pT7 계열 또는 pUR 290 계열 벡 터로부터 유래한 것인 제조방법.
- 제7항에 있어서, pT7 계열 릭터로부터 유래한 형질 발현 벡터가 pT7-7인 제조방법.
- 제 1 데옥시리보핵산 서열, 및 제1서열의 하류에서 제1서열과 융합된 제2데옥시리보핵산 서열이 삽입된 복재 가능한 형질 발현 벡터를 함유함을 특징으로 하는, 숙주 세포중에서 복제 가능한 재조합 DNA 분자. (상게이세 제1데옥시리보핵산 서열은 Gag(308-437)로 나타낸 아미노산 서열중 적어도 10개의 아미노산의 연속 서열을 함유하는 Gag 펩티드를 코딩하며, 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제 1-(1) 내지 1-(2)도에 나타낸 Gag 단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이고, 제2데옥시리보핵산 서열은 Env(512-679)로 나타낸 아미노산 서열중 HIV항체와 반응성인 적어도 하나외 에피토프를 포함하는 적어도 한 부분을 함유하는 Env펩티드를 코딩하고, 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제2-(1)내지 2-(3)도에 나타낸 Env 단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산 위치를 나타내는 번호이다)
- 제5항에 있어서, 제2데옥시리보핵산 서열이 Eny (512-697)로 나타낸 아미노산 서열 중 적어도 5개의 아미노산의 연속 서열을 코딩하는 재조합 DNA 분자.
- 제9항 또는 10항에 있어서, 형질 발현 벡터가 pT7 계열 또는 pUR 290 계열 벡XJ로 부터 유래된 것인 재조합 DNA 분자.
- 제11항에 있어서, pT7 계얼 벡터로 부터 유래된 형질 발현 벡터가 pT7-7인 재조합 DNA 분자.
- 제1항 내지 4항중 어느 한 항에 따른 HIV 항원의 면역 반응 유효량을 함유함을 특징으로 하는, 면역 반응에 의한 후천성 면역 결핍증 진단용 시약.
- 재1항 내지 4항중 어느 한 항에 따른 HIV 항원의 유효 면역량과, 적어도 하나의 약제학적으로 허용 가능한 보조제, 희석재 또는 부형제를 함유함을 특징으로 하는, 후천성 면역 결핌증용 백신.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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