KR940000117A - 에이치 아이 브이(hiv) 항원 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 C 말단에서 Env 펨티드와 융합된 Gag 펩티드로 구성된 Gag-Env 융합 단백질을 함유하는 실질적으로 순수한 HIV 항원에 대한 것이며, 여기서 Gag 펩티드는 Gag(308-437)로 나타낸 아미노산 서열 중 적어도 10개 아미노산의 연속 서열을 함유하며 Env 펩티드는 Env(512-699)로 나타낸 아미노산 서열 중 HIV 항체와 반응성인 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 적어도 한 부분의 연속 서열을 함유한다.
본 발명의 HIV항원에 대응하는 gag-env 융합 DNA는 목적하는 고 항원성의 HIV 항원을 고수율로 제조하게 한다.
따라서, 본 발명의 HIV 항원은 AIDS의 진단 시약, 백신, 항체 제조 및 치료제의 호라성 성분으로서 유리하게 사용될 수 있다. 또한 전체 gag 유전자에 의해 코팅된 Gag 단백질을 함유하는 실질적으로 순수한 HlV 항원도 기재되어 있다.

Description

에이치 아이 브이 (HIV) 항원
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1-(1) 및 1-(2)도는 전체 HIV-1 게놈을 함유하는 플라스미드 PNL 4-3에 함유된 gag 유전자의 전체 영역에 의해 코딩된 Gag단백질의 전체 아미노산서열을 나타낸다.
제2-(1) 2-(3)도는 전체 HIV-1게놈을 함유하는 플라스미드 PNL 4-3에 함유된 enc유전자의 전체 영역에 의해 코팅된 Env단백질의 전체 아미노산 서열을 나타낸다.

Claims (14)

  1. 그 말단에서 Env 펩티드와 융합된 Gag 펩티드로 구성된 Gag-Env 융합 단백 질을 함유함을 특징으로 하는 실질적으로 순수한 HlV 항원.
    (상기에서, Gag펩티드는 Gag(308-437)로 나타낸 아미노산 서열 중 적어도 10개의 아미노산의 연속 서열을 함유하고, 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제1-(1) 내지 1-(2)도는 나타낸 Gag단백질의 전테 아미노산 서열중의 아미노산의 위치 를 나타네는 번호이고, Eny 펩티드는 Env (512-699)로 나타낸 아미노산 서열중 HIV항체와 반음성인 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 적어도 한 부분을 함유하고, 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제2-(1)내지 2-(3)에도 나타낸 Env 단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이다)
  2. 제 1항에 있어서, Env 펩티드 부분중에 함유된 에피토프가 Env (512-699)로 나타낸 아미노산 서열중 적어도 5개의 아미노산의 연속 서열인 HIV 항인.
  3. 제1-(1) 내지 1-(2)도에 나타낸 Gag 단백질의 전체 아미노산 서열인 Gag(1-500)로 나타낸 아미노산 서열을 함유하는 Gag 단백질 및 제1항에 따른 HIV 항원의 혼합물을 포함함을 특징으로 하는 HIV 항원.(상기에서, 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제1-(1) 내지 1-(2)도의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이다)
  4. 제1- (1) 내지 1-- (2)도에 나타낸 Gag 단백질의 전테 아미노산 서열인 Gag(1-500)로 나타낸 아미노산 서열을 함유하는 실질적으로 분리된 형태의 Gag 단백질을 포함함을 특징으로 하는 실질적으로 순수한 HIV 항원.
  5. (a)제1데옥시리보핵산 서열을 복제 가능한 형질발현 헥터와 결착시켜, 숙주 세포 중에서 복제 가능하며 상기의 형질 발현 벡터 및 그 안에 삽입된 상기의 제1데옥시리보핵산을 함유하는 제1재조합 DNA분자를 수득하고, (상기의 제1데옥시리보핵산 서열은 Gag(300-437)로니타낸 아미노산 서열중 적어도 10개의 아미노산의 연 속 성열을 함유하는 Gag펩티드를 코딩하며, 상기의 괄호안에 나타낸 각숫자는 제1- (1) 내지 1-(2)도에 나타낸 Gag단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이다) , (b)제2데옥시리보핵산 서열을 제1데옥시리보핵산 서열의 하류에서 제1재조합 DNA분자에 결찰시켜 제2서열을 제1서열에 융합시키구 (상기의 제2데옥시리보핵산 서열은 Eny(512-699)로 나타낸 아기노산 서열중 HIV항체와 반응성인 적어도 하나의 에피토프를 포함하는 적어도 한 부분을 함유하는 Env 펩티드를 코딩하구 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제2-(7) 내지 7-(3)도에 나타낸 Env 단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이다) 상기 방법에 의해 숙주 세포 중에서 복제 가능하며, 형질 발현 벡터, 제1데옥시리보핵산 서열, 및 제1서열의 하류에서 융합된 제2데옥시리보핵산 서열을 람유하는 제2재조합 DNA 분자를 순득하고 ; (c)원핵 세포 또는 진핵세포를 제2재조합 DNA 분자로 형질전환시켜 형질 전환체를 수득하고; (d)형질 전환되지 않은 원핵세포 또는 진핵 세포로부터 형질 전환체를 선택하고; (e)형질 전환체를 배양하여 C-말단에서 Env 펩티드와 융합된 Gag 펩티드로 구성된 Gag-Env 융할 단백질을 함유하는 HIV 항원을 제조하고 ; (f) 배양된 형질 전환체로부터 Gag-Env 융합 단백질을 함유하는 HIV 항원을 분리함을 특징으로 하는, C-말단에서 Env 펩티드와 융합된 Gag 펩티드로 구성된 Gag-Env 융합 단백질을 함유하는 실질적으로 순수한 HIV 항원의 제조방법.
  6. 제5항에 있어서. 제2데옥시리보핵산 서열이 Env(512-697)로 나타낸 아미노산 서열 중 적어도 5개의 아미 노산의 연속 서열을 코딩하는 제조방법.
  7. 제5항 또는 6항에 있어서, 형질 발현 벡터가 pT7 계열 또는 pUR 290 계열 벡 터로부터 유래한 것인 제조방법.
  8. 제7항에 있어서, pT7 계열 릭터로부터 유래한 형질 발현 벡터가 pT7-7인 제조방법.
  9. 제 1 데옥시리보핵산 서열, 및 제1서열의 하류에서 제1서열과 융합된 제2데옥시리보핵산 서열이 삽입된 복재 가능한 형질 발현 벡터를 함유함을 특징으로 하는, 숙주 세포중에서 복제 가능한 재조합 DNA 분자. (상게이세 제1데옥시리보핵산 서열은 Gag(308-437)로 나타낸 아미노산 서열중 적어도 10개의 아미노산의 연속 서열을 함유하는 Gag 펩티드를 코딩하며, 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제 1-(1) 내지 1-(2)도에 나타낸 Gag 단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산의 위치를 나타내는 번호이고, 제2데옥시리보핵산 서열은 Env(512-679)로 나타낸 아미노산 서열중 HIV항체와 반응성인 적어도 하나외 에피토프를 포함하는 적어도 한 부분을 함유하는 Env펩티드를 코딩하고, 상기의 괄호안에 나타낸 각 숫자는 제2-(1)내지 2-(3)도에 나타낸 Env 단백질의 전체 아미노산 서열 중의 아미노산 위치를 나타내는 번호이다)
  10. 제5항에 있어서, 제2데옥시리보핵산 서열이 Eny (512-697)로 나타낸 아미노산 서열 중 적어도 5개의 아미노산의 연속 서열을 코딩하는 재조합 DNA 분자.
  11. 제9항 또는 10항에 있어서, 형질 발현 벡터가 pT7 계열 또는 pUR 290 계열 벡XJ로 부터 유래된 것인 재조합 DNA 분자.
  12. 제11항에 있어서, pT7 계얼 벡터로 부터 유래된 형질 발현 벡터가 pT7-7인 재조합 DNA 분자.
  13. 제1항 내지 4항중 어느 한 항에 따른 HIV 항원의 면역 반응 유효량을 함유함을 특징으로 하는, 면역 반응에 의한 후천성 면역 결핍증 진단용 시약.
  14. 재1항 내지 4항중 어느 한 항에 따른 HIV 항원의 유효 면역량과, 적어도 하나의 약제학적으로 허용 가능한 보조제, 희석재 또는 부형제를 함유함을 특징으로 하는, 후천성 면역 결핌증용 백신.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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