KR890701605A - Dna 서열, 재조합 dna 분자 및 용해성 t4 단백질의 제조방법 - Google Patents

Dna 서열, 재조합 dna 분자 및 용해성 t4 단백질의 제조방법

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KR890701605A
KR890701605A KR1019890700813A KR890700813A KR890701605A KR 890701605 A KR890701605 A KR 890701605A KR 1019890700813 A KR1019890700813 A KR 1019890700813A KR 890700813 A KR890700813 A KR 890700813A KR 890701605 A KR890701605 A KR 890701605A
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에이.피셔 리차드
길버트 월터
엘.사토 비키
에이.플라벨 리차드
엠.마르가노 죤
알.류 테레사
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원본미기재
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Abstract

내용 없음

Description

DNA 서열, 재조합 DNA 분자 및 용해성 T4 단백질의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 면역친화 크로마토 그래피에 의해 U937 세포로부터 T4 단백질을 정제하는데 관한 자동 방사능 사진이다. 제2도는 면역친화 정제된 용해성 고유 T4단백질이 HIV 엔벨로프 단백질에 결합한다는 것을 입증해주는 자동 방사능 사진 및 웨스턴 불롯을 나타낸 것이다.

Claims (52)

  1. (a) P199-7, pBG377, pBG380, pBG381, p203-5, pBG391, pBG392, pBG393, pBG394, pBG395,pBG396, pBG397, p211-11, p214-7 의 DNA삽입체, (b) 전술한 DNA삽입체 일종이상의 하이브리되며 용해성 T4류 폴리펩티드 표현을 암호하는 DNA서열과, (c) 전술한 DNA삽입체 및 서열중 어느 하나에 의해 표현이 암호된 용해성 T4류 폴리펩티드 표현을 암호하는 DNA서열로 구성된 군에서 선택된 DNA 서열.
  2. 제1항에 있어서, 상기 DNA서열(b)는 T4+임파구와 T4+임파구를 타겟으로 하는 감염원간의 접착력을 억제하고 T4+임파구 및 항원 존재 세포와 T4+임파구로 매개된 킬링의 타겟간의 상호 인력을 억제하는 용해성 T4류 폴리펩티드 표현을 암호하는 DNA 서열.
  3. 제1항 또는제2항의 DNA 서열로 구성된 군으로 부터 선택된 DNA서열을 포함하는 제조합 DNA분자에 있어서, 상기 DNA서열은 상기 재조합 분자 내의 표현 조절 서열에 조작적으로 연결되어 있는 재조합 DNA 분자.
  4. 제3항에 있어서, 상기 표현 조절서열은 SV 40 또는 아데노 비루스의 초기 또는 말기 프로모터, lac 시스템, trp 시스템, TAC 시스템, TRC 시스템, 파이지 입의 주요 오퍼레이터와 프로모터, fd 코트 단백질의 조절영역, 3-포스포글리세레이트 키나제 또는 해당 작용 효소에 대한 프로모터, 산 포스파타제의 프로모터, 백클로 비루스 시스템의 폴리헤드린 프로모터와 효모 α-메이팅 인자의 프로모터로 구성된 군에서 선택된 재조합 DNA분자.
  5. 제3항 또는 제4항의 재조합 DNA분자들로 구성된 군에서 선택된 재조합 DNA분자로 형성전환된 단세포 숙주.
  6. 제5항에 있어서, 상기 숙주는 에스케리키아 콜리, 수도모나스, 바실러스, 스트렙토마이시스, 진균류, 동물세포, 식물세포, 곤충세포 및 조직 배양체내의 인체세포로 구성된 군에서 선택된 숙주.
  7. 제1항 또는 제2항의 DNA서열로 구성된 군에서 선택된 DNA서열에 의해 표현이 암호된 폴리펩티드에 있어서, 이 폴리펩티드는 필수적으로 다른 인체 유래 단백질이 없는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
  8. 제7항에서 있어서, 상기 폴리펩티드는 제3도의 식 A-23-AA362로 표시되는 폴리펩티드, 제3도의 식 A1-362로 표시되는 포릴펩티드, 제3도의 식 Met-AA1-362로 표시되는 폴리펩티드, 제3도의 식 AA1-74로 표시되는 폴리펩티드, 제3도의 식 Met-AA1-374로 표시되는 폴리펩티드, 제3의 식 AA1-377로 표시되는 폴리펩티드, 제3도의 식 Met-AA1-377로 표시되는 폴리펩티드, 제3도의 식 AA-23-AA374로 표시되는 폴리펩티드, 제3도의 식 AA-23-AA377로 표시되는 폴리펩티드로 구성된 군에서 선택된 폴리펩티드.
  9. 제7항에 있어서, 상기 폴리펩티드는 제16도의 식 AA-23-A182로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA1-AA182로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 Met-AA1-187로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식AA-23-AA182로 표시되는 아미노산 아스파라긴-로이신-클루타민-히스티딘-세린-로이신이 연결된 폴리펩티드, 제16도의 식 AA1-AA182로 표시되고 아스파라긴-로이신-글루타민-히스티딘-세린-로이신의 연결된 폴리펩티드, 제16도의 식 Met-AA1-187로 표시되고 아스파라긴-로이신-글루타민-히스티딘-세린-로이신의 연결된 폴리펩티드, 제16도의 식AA-23-AA113으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA1-AA113으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 Met-AA1-113으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA-23-AA111으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA1-AA111으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 Met-AA1-111으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA-23-AA131으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA1-AA131으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 Met-AA1-131으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA-23-AA145으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA1-AA145으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식Met-AA1-45으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA-23-AA166으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 AA1-AA166으로 표시되는 폴리펩티드, 제16도의 식 Met-AA1-166으로 표시되는 폴리펩티드 또는 그들의 일부로 구성된 군으로부터 선택된 폴리펩티드.
  10. 제7항에 있어서, 상기 폴리펩티드는 성숙한 T4단백질의 식 AA-23-AA362로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA1-382로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4단백질의 식 Met-AA1-382로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA1-374로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 Met-AA1-374로 표시되는 펠리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA1-377로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 Met-AA1-377로 표시되는 풀리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA-23-AA374로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA-23-AA377로 표시되는 폴리펩티드 또는 그들의 일부로 구성된 군으로부터 선택된 폴리펩티드.
  11. 제7항에 있어서, 상기 폴리펩티드는 성숙한 T4 단백질의 AA-23-AA182로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA1-AA182로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 Met-AA1-182로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA-23-AA182로 표시되는 아스파라긴-로이신-글루타민-히스티딘-세린-로이신이 연결된 폴리펩티드, 성숙한 T4단백질의 식 AA1-AA182로 표시되고 아스파라긴-로이신-글루타민-히스티딘-세린-로이신이 연결된 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 Met-AA1-145로 표시되고 아스파라긴-로이신-글루타민-히스티딘-세린-로이신이 연결된 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA23-AA113으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA1-AA113으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4단백질의 식 Met-AA1-113으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA-23-AA111으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA1-AA111으로 표시되는 포릴펩티드, 성숙한 T4단백질의 식Met-AA1-111으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA-23-AA131으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 R4 단백질의 식 AA1-AA131으로 표시되는 포릴펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 Met-AA1-131으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA-23-AA145으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식AA1-AA145으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 Met-AA1-145으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA-23-AA168으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 AA1-AA168으로 표시되는 폴리펩티드, 성숙한 T4 단백질의 식 Met-AA1-166으로 표시되는 폴리펩티드 또는 그들의 일부로 구성된 군에서 선택된 폴리펩티드.
  12. 제3항 또는 제4항의 재조합 DNA분자로 구성된 군에서 선택된 재조합 DNA 분자로 형질전환된 단세포 숙주를 배양하는 단계로 구성된 제7항 내지 제11항중 어느 한항의 폴리펩티드로 구성된 군에서 선택된 폴리펩티드의 제조방법.
  13. 제7항 내지 제11항중 어느 한항의 폴리펩티드로 구성된 군에서 선택된 폴리펩티드의 면역치료학적 또는 면역 억제적 유효량 및 약학적 이용 담체로 구성된 약학적 조성물.
  14. 제13항의 조성물로 구성된 군에서 선택된 조성물을 사용하여 약학적으로 허용 가능한 방법으로 환자를 치료하는 단계로 구성된 환자 치료방법.
  15. 제14항에 있어서, 환자가 조성물의 근육내 주사법으로 치료되는 방법.
  16. 제7항 내지 제11항중 어느 한항의 폴리펩티드로 구성된 군에서 선택된 폴리펩티드를 진단학적 유효량으로 포함하는 HIV 감염 과정의 검출 또는 모니터용 진단 조성물.
  17. 제16항의 조성물로 구성된 군으로부터 선택된 진단용 조성물을 사용하는 단계로 구성된 HIV 감염과정의 검출 또는 모니터의 방법.
  18. 제16항의 조성물로 구성된 군으로부터 선택된 조성물을 포함하는 HIV 감염 과정의 검출 또는 모니터 수단.
  19. 제7항 내지 제11항중 어느 한항의 포릴펩티드로 구성된 군에서 선택된 폴리펩티드에 대한 면역 치료학적 또는 면역 억제학적 유효량의 항체와 약학적 허용 담체를 포함하는 약학적 조성물.
  20. 제19항에 의한 조성물을 사용하여 약학적 허용 방법으로 환자를 치료하는 단계로 구성된 환자의 치료방법.
  21. HIV 비루스를 정제하기 위해 제7항 내지 제11항중 어느 한항의 폴리펩티드로 구성된 군으로부터 선택된 폴리펩티드를 사용하는 방법.
  22. 제20항에 있어서, HIV 비루스가 생물학적 샘플로부터 정제되는 것을 특징으로 하는 방법.
  23. 샘플을 제7항 내지 제11항중 어느 한항의 폴리펩티드로 구성된 군으로부터 선택된 폴리펩티드에 노출하는 단계로 구성된 상기 샘플로부터 HIV 비루스를 정제하는 방법.
  24. 제22항에 있어서, 상기 샘플은 생물학적 샘플인 방법.
  25. T4류 폴리펩티드의 표현을 암호하여 p170-2DNA 삽입체를 포함하는 DNA 서열.
  26. 제25항의 DNA 서열로 구성된 군에서 선택된 DNA 서열을 포함하는 재조합 DNA 분자에 있어서, DNA 서열이 상기 재조합 DNA 분자내의 표현 조절 서열에 조작적으로 연결되는 것을 특징으로 하는 재조합 DNA 분자.
  27. 제26항에 의한 재조합 DNA 분자로 형질전환된 단세포 숙주.
  28. 제25항의 DNA 서열에 의해 표현이 암호된 폴리펩티드에 있어서, 이 폴리펩티드는 필수적으로 인체 유래의 폴리펩티드가 없는 것을 특징으로 하는 폴리 펩티드.
  29. 면역 치료학적 또는 면역 억제학적 유효량의 용해성 단백질 수용체와 약학적 허용담체로 구성된 약학적 조성물.
  30. 제29항의 약학적 조성물을 약학적 허용 방법으로 사용하여 환자를 치료하는 단계로 구성된 환자의 치료방법.
  31. 용해성 단백질 수용체를 진단학적 유효량으로 함유하고 있는 비루스 감염 과정의 검출 또는 모니터용 진단학적 조성물.
  32. 진단학적 유효량의 용해성 단백질 수용체를 진단체로 사용하는 단계로 구성된 비루스 감염 과정의 검출 또는 모니터 방법.
  33. 용해성 단백질 수용체를 함유하는 비루스 감염 과정의 검출 또는 모니터용 수단.
  34. (a) pBiv. 1의 DNA 삽입체; (b) 상기 pBiv.1의 DNA 삽입체에 하이브리드되며 다가(polyvalent)용해성 T4류 폴리펩티드의 표현을 암호하는 DNA 서열; 및 (c) 상기 pBiv.1의 DNA 삽입체에 의해 암호된 다가의 용해성 T4류 폴리펩티드의 표현을 암호하는 DNA 서열로 구성된 군에서 선택된 DNA 서열.
  35. 제34항의 DNA서열로 구성된 군에서 DNA 서열을 포함하는 재조합 DNA 분자에 있어서, 상기 DNA 서열은 상기 재조합 DNA분자내의 표현 조절 서열에 조작적으로 연결된 것을 특징으로 하는 재조합 DNA 분자.
  36. 제35항에 의한 재조합 DNA 분자로 형질전환된 단세포 숙주.
  37. 제34항에 의한 DNA 서열로 구성된 군에서 선택된 DNA 서열에 의해 표현이 암호된 폴리펩티드에 있어서, 이 폴리펩티드는 필수적으로 다른 인체 유래 단백질이 없는 것을 특징으로 하는 풀리펩티드.
  38. 제7항에 있어서, 상기 폴리펩티드는 다가인 폴리펩티드
  39. (a) 폴리펩티드를 생산하기 위해 제3항 또는 제4항에 의한 재조합 DNA 분자로 형질전환된 단세포 숙주를 배양하고(b) 산출된 폴리펩티드를 캐리어에 연결하여 다가의 폴리펩티드를 제조하는 단계로 구성된다가 폴리펩티드의 제조방법.
  40. (a) 면역 글로불린의 경쇄(light chain) 의 불연 영역(constnat region) 을 암호하는 DNA 서열을 포함하는 일차부분 및 (b) 제1항 또는 제2항에 의한 DNA 서열 또는 그들의 일부를 포함하며, 상기 일차 부분의 상부에 연결되어 있는 이차부분으로 구성된 DNA 서열.
  41. (a) 면역 글로불린 중쇄( heavy chain) 의 불변 영역을 암호하는 DNA 서열을 포함하는 일차부분 및 (b) 제1항 또는 제2항에 의한 DNA 서열 또는 그들의 일부를 포함하며, 상기 일차부분의 상부에 연결되어 있는 이차부분으로 구성된 DNA 서열.
  42. 제40항에 의한 DNA 서열을 포함하고 있는 표현 백터.
  43. 제42항에 의한 DNA 서열을 포함하고 있는 표현 벡터.
  44. 제40항에 의한 DNA 서열및 제41항에 의한 DNA 서열을 포함하고 있는 표현 벡터.
  45. 제42항에 의한 표현벡터와 제43항에 의한 표현 벡터를 사용해 숙주 세포를 공감염(Co-transfection)시킨 단계로 구성된 키메라성 rsT4/IgG1의 제조방법.
  46. 숙주 세포를 제44항에 의한 표현 벡터로 감염시키는 단계로 구성된 키메라성 rsT4/IgG1의 제조방법.
  47. 제45항 또는 제46항에 의한 방법으로 키메라성 rsT4/IgG1.
  48. 제37항 또는 제38항에 의한 폴리펩티드를 면역 치료학적 또는 면역 억제학적 유효량으로 함유하고 있는 약학적 조성물.
  49. 제48항에 의한 조성물을 약학적 허용 방법으로 사용하여 환자를 치료하는 단계로 구성된 환자의 치료 방법.
  50. 제37항 또는 제38항에 의한 폴리펩티드를 진단학적 유효량으로 함유하고 있는 HIV 감염과정의 검출 또는 모니터용 진단 조성물.
  51. 제47항에 의한 키메라성 rsT4/IgG1를 면역 치료학적 또는 면역 억제학적 유효량으로 함유하고 있는 약학적 조성물.
  52. 제51항에 의한 조성물을 약학적 허용 방법으로 사용하여 환자를 치료하는 단계로 구성된 환자의 치료방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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