KR890003953A - deo 프로모터를 함유하는 형질발현 플라스미드 및 플라스미드를 함유하는 세균숙주 - Google Patents

deo 프로모터를 함유하는 형질발현 플라스미드 및 플라스미드를 함유하는 세균숙주 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

deo 프로모터를 함유하는 형질발현 플라스미드 및 플라스미드를 함유하는 세균숙주
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 pJBF-5401의 구조. 제2도는 pJBF-5401의 특정부위 지향성 변이발생. 제3도는 pMF-5516의 구조.

Claims (122)

  1. 적당한 에스케리키아콜리 숙주세포내에 도입할 경우, 숙주세포로 하여금 천연 폴리팹티드의 그것과 상이하긴 하도 실질적으로 도일한 아미노산 서열 및 생물학적 활성을 갖는 목적하는 천연 진핵 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 코오딩하는 DNA를 형질발현할 수 있도록 하며, 그리하여, 5′으로부터 3′방향으로 다음과 같은 것들:A) 5′으로부터 3′방향으로 프로모터deoP1 및deoP1를 직렬로 함유하는 DNA: b) 숙주세포내에서 리보솜과 결합할 수 있는 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 코오딩하는 DNA로 부터 mRNA가 전사되도록 하는 리보솜 결합부위를 갖는 DNA: c) ATG개시 코오돈; 및 d)ATG개시 코오돈과 함께 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 코오딩하는 DNA; 를 함유하며, 아울러 부가적으로 숙주세포내에서 자기복제를 일으킬 수 있는 세균 플라스미드로 부터의 복제기원을 갖는 DNA서열 및 플라스미드가 숙주세포내에 존재할 경우 나타나는 선택적인 또는 확인가능한 표현형 특성과 관련된 유전자를 함유하는 DNA서열을 포함하는 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체가 생산되도록함을 특징으로 하는 이중-가닥 DNA플라스미드.
  2. 제1항에 있어서, 에스캐리키아콜리 숙주세포가 S732, S744, MC 1061, S928, S929, S930 또는 야생형 균주(ATCC 수탁번호 12435)를 포함하는 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  3. 제1항에 있어서, 폐환형 플라스미드.
  4. 제1항에 있어서, 리보솜 결합부위가deo오페론으로 부터 유래된 천연deo리보솜 결합부위인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  5. 제1항에 있어서, 리보솜 결합부위가deo오페론으로 부터 유래된 천연deo리보솜 결합부위의 변이주인 것을 특징으로 하는 플라스미드
  6. 제1항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 서열을 갖는박테리오파지로부터 유래된 CII인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
    TAAGGAAATACTTACAT
    ATTCCTTTATGAATGTA
  7. 제1항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 서열을 갖는 박테리오파지로부터 유래된 CII변이주인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
    TAAGGAAGTACTTACAT
    ATTCCTTCATGAATGTA
  8. 제1항에 있어서, 리보솜 결합부위가 pBR 322로부터 유래된 천연-락타마제 리보솜 결합부위인 것을 특징으로 하는 플라스미드
  9. 제1항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 소열을 갖는 합성 올리고뉴클레오티드인 것을 특징으로 하는 플라스미드
    AATTCGAGCGCAAGGAAACAGGCTCA
    GCTCGCGTTCCTTTGTCCGAGTAT
  10. 제1항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 소열을 갖는 합성 올리고뉴클레오티드인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
    AATTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAG
    GTTATTATAACTTTTTCCTTCTCAT
  11. 제1항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 소열을 갖는 합성 올리고뉴클레오티드인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
    GACAAGCCTAGGTTTGTTTAACTTTAAGGAGAAATCATA
    CTGTTCGGATCCAAACAAATTGAAATTCCTCTTTAGTAT.
  12. 제1항에 있어서, 복제기원이 pBR 322 또는 pOP 16으로부터 유래된 것임을 특징으로 하는 플라스미드.
  13. 제1항에 있어서, 표현형 특성이 약제 내성인 것을 특징으로 하는 플라스미드
  14. 제12항에 있어서, 약제 내성이 암피실린 또는 테트라사이클린에 대한 내성인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  15. 제1항에 있어서, 천연 폴리팹티드가 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소, 인체 망간 과산화물 분자변위보효소, 인체 글라타티온 퍼옥시다제, 인체 성장호르몬, 돼지 성장호로몬, 인체 아포지방 단백질, E 또는 피브로넥틴 도메인을 포함함을 특징으로 하는 플라스미드.
  16. 제15항에 있어서, 제4도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMF 5531로 명명한 인체 구리/아연 과산화물의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  17. 제15항에 있어서, 제5도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMF 5519로 명명한 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  18. 제15항에 있어서, 제6도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMF-558-26으로 명명한 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  19. 제15항에 있어서, pMF-5536으로 명명한 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보호효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  20. 제15항에 있어서, 제7도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMF-5520으로 명명한 인체 구리/아연 과산화물 분자벼뉘보효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  21. 제15항에 있어서, 제9도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMF-2005로 명명된 ATCC에 수탁번호 67362로 기탁되어 있는 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보호효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  22. 제15항에 있어서, 제17도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMFS-5533A로 명명한 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보호효소의 폴리팹티드 동족체를제조하기 위한 플라스미드.
  23. 제15항에 있어서, 제18도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMFS-5538로 명명한 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보호효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  24. 제15항에 있어서, 제11도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pTVR 568-4로 명명한 인체 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  25. 제15항에 있어서, 제12도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMFS-5600으로 명명한 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를제조하기 위한 플라스미드.
  26. 제15항에 있어서, 제40도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMFS-5627로 명명한 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체 제조하기 위한 플라스미드.
  27. 제15항에 있어서, 제41도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMFS-5603으로 명명한 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체 제조하기 위한 플라스미드.
  28. 제15항에 있어서, 제42도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMFS-5605로 명명한 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체 제조하기 위한 플라스미드.
  29. 제15항에 있어서, 제38도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMFS-5605로 명명한 돼지 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체 제조하기 위한 플라스미드.
  30. 제15항에 있어서, 제39도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, PEFF-920으로 명명한 돼지 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체 제조하기 위한 플라스미드.
  31. 제15항에 있어서, 제48도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pMFS 2006으로 명명한 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체 제조하기 위한 플라스미드.
  32. 제10도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pDGE 4-3으로 명명한 망간 과산화물 분자변위보효소-글루타티온 퍼옥시다제 융합 폴리팹티드를 제조하기 위한 플라스미드.
  33. 제19도에 나타낸 제한효소를 갖는, pTVR 580-35로 명명한 인체 성장호르몬-아포지방 단백질 E융합 폴리팹티드를 제조하기 위한 플라스미드.
  34. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제1항의 플라스미드를 함유하는 천연 진핵 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  35. 제34항에 있어서, 에스케리키아콜리 숙주가 S744, S732 야생형 균주(ATCC 수탁번호 12435),S540, S928, S929, MC 1061 및 S930으로 구성된 군으로부터 선택된 숙주 플라스미드계.
  36. 제34항에 있어서, 숙주균주가 F←균주인 숙주 플라스미드계.
  37. 제36항에 있어서, F←균주가 F←MG 1655로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  38. 제36항에 있어서, F←규주가 F←W 3110(ATCC 수탁번호 67705)으로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  39. 제36항에 있어서, F←균주가 F←W 2637로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  40. 제36항에 있어서, F←균주가 F←MM 294로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  41. 제36항에 있어서, F←균주가 F←1000으로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  42. 제36항에 있어서, F←균주가 F←1100으로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  43. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제16,17,18,19,20,21,22 또는 23항의 플라스미드를 함유하는 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보호효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  44. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제32항의 플라스미드를 함유하는 망간 과산화물 분자변위보효소-글루타티온 퍼옥시다제 유합 폴리팹티드를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  45. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제24항의 플라스미드를 함유하는 인체 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조학 위한 숙주 플라스미드계.
  46. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제25,26,27,28 또는 31항의 플라스미드를 함유하는 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  47. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제29 또는 제30항의 플라스미드를 함유하는 돼지 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  48. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제33항의 플라스미드를 함유하는 인체 성장호르몬-아포지방 단백질 E융합 폴리팹티드를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  49. 제34항의 숙주 플라스미드계를 폴리팹티드 또는 그의 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 폴리팹티드 또는 그의 동족체를 수거함을 특징으로 하는 천연 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 제조하는 방법.
  50. 제43항의 숙주 플라스미드계를 인체 구리/아연 과산화물 분자변우보호효소의 폴리팹티드 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하는 방법.
  51. 제44항의 숙주 플라스미드계를 융합 폴리팹티드가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 망간 과산화물 분자변위보효소-글루타티온 퍼옥시다제 융합 폴리팹티드를 제조하는 방법.
  52. 제45항의 숙주 플라스미드계를 폴리팹티드 또는 그의 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 폴리팹티드 또는 그의 동족체를 수거함을 특징으로 하는 인체 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하는 방법.
  53. 제46항의 숙주 플라스미드계를 폴리팹티드 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하는 방법.
  54. 제47항의 숙주 플라스미드계를 폴리팹티드 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 돼지 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하는 방법.
  55. 제48항의 숙주 플라스미드계를 인체 성장호르몬-아포지방 단백질 E융합 폴리팹티드가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 융합 폴리팹티드를 수거함을 특징으로 하는 인체 성장호르몬 아포지방 단백질 E융합 폴리팹티드를 제조하는 방법.
  56. 제49항에 있어서, 생산조건이 낮은 호기성 조건을 포함함을 특징으로 하는 방법.
  57. 제49항에 있어서, 생산조건이 비-글루코오스 탄소원을 함유하는 배지상에서 성장시키는 조건을 포함함을 특징으로 하는 방법.
  58. 제57항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 글리세롤 또는 프룩토오스인 것을 특징으로 하는 방법.
  59. 제57항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 숙시네이트인 것을 특징으로 하는 방법.
  60. 제57항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 소듐락테이트인 것을 특징으로 하는 방법.
  61. 제57항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 소듐말레이트인 것을 특징으로 하는 방법.
  62. 제49항에 있어서, 생산조건이 초기에는 글루코오스내에서 에스케리키아콜리 세포들을 성장시키고, 이어서 글루코오스가 소모된후, 비-글루코오스 탄소원을 첨가하는 것을 포함함을 특징으로 하는 방법.
  63. 제62항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 글리세롤인 것을 특징으로 하는 방법.
  64. 제62항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 숙시네이트인 것을 특징으로 하는 방법.
  65. 제62항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 소듐락테이트인 것을 특징으로 하는 방법.
  66. 제62항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 프룩토오스인 것을 특징으로 하는 방법.
  67. 제62항에 있어서, 비-글루코오스 탄소원이 소듐말레이트인 것을 특징으로 하는 방법.
  68. 제49항에 있어서, 2가 금속이온을 성장배지에 첨가하여 숙주 플라스미드계를 성장시킨 배지내에서 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체가 분비됨을 특징으로 하는 방법.
  69. 제68항에 있어서, 2가 금속이온이 Cu+2인 것을 특징으로 하는 방법.
  70. 제68항에 있어서, 2가 금속이온이 Zn+2인 것을 특징으로 하는 방법.
  71. 제68항에 있어서, 2가 금속이온이 Cu+2와 Zn+2인 것을 특징으로 하는 방법.
  72. 제68항에 있어서, 숙주 플라스미드계를 약 30℃에서 성장시키는 것을 특징으로 하는 방법.
  73. 적당한 에스케리키아콜리 숙주세포내에 도입할 경우, 숙주세포로 하여금, 열에 불안정한 cI억제제를 불활성화시키는 온도로 숙주세포의 온도를 상승시킴에 따라, 천연 폴리팹티드의 그것과 상이하긴 하되 실질적으로 동일한 생물학적 활성 및 아미노산 서열을 갖는 목적하는 천연 진핵 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 코오딩하는 DNA를 형질발현할 수 있도록하며, 그리하여 5′으로부터 3′방향으로 다음과 같은 것들: a)박테리오파지로부터의 프로모터 및 오퍼레이터 PLOL을 함유하는 DNA; (b) 숙주세포내에서 리보솜과 결합할 수 있는 폴리팹티드 또는 상기 폴리펩티드의 동족체를 코오딩하는 DNA로부터 mRNA가 전사되도록하는 리보솜 결합부위를 갖는 DNA; c) ATG개시 코오돈; 및 d) ATG개시 코오돈과 함께 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 코오딩하는 DNA를 함유하며; 아울러, 부가적으로 5′으로부터 3′방향으로deoP1프로모터 또는 그의 일부를 함유하는 DNA 서열 및deoP1프로모터 또는 그의 일부의 통제하에 있는 억제제를 형질발현하는 P L프로모터의 열에 불안정한 cI억제제를 코오딩하는 DNA를 함유하며; 또한 숙주세포내에서 자기복제를 일으킬 수 있는 세균 플라스미드로 부터의 복제기원을 갖는 DNA 서열 및 플라스미드가 숙주세포내에 존재할 경우 나타나는 선택적인 또는 확인가능한 표현형 특성과 관련된 유전자를 포함하는 폴리펩티드 또는 상기 폴리펩티드의 동족체가 생산되도록 함을 특징으로 하는 이중-가닥 DNA플라스미드.
  74. 제73항에 있어서, 열에 불안정한 cI억제제가 cI 857인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  75. 제73항에 있어서, 에스케리키아콜리가 야생형 균주(ATCC 수탁번호 12435)또는 에스케리키아콜리 MC1061균주인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  76. 제73항에 있어서, 폐환형 플라스미드.
  77. 제73항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 서열을 갖는박테리오파지로부터 cII인 것을 특징으로 하는 플라스미드:
    TAAGGAAATACTTACAT
    ATTCCTTTATGAATGTA
  78. 제73항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 서열을 갖는박테리오파지로부터의 변이주 cII인 것을 특징으로 하는 플라스미드:
    TAAGGAAGTACTTACAT
    ATTCCTTCATGAATGTA
  79. 제73항에 있어서, 리보솜 결합부위가 pBR 322로부터 유래된 천연 β-락타마제 리보솜 결합부위인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  80. 제73항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 서열을 갖는 합성 올리고뉴클레오티드인 것을 특징으로 하는 플라스미드:
    AATTGGAGCGCAAGGAAACAGGCTCA
    GCTCGCGTTCCTTTGTCCGAGTAT
  81. 제73항에 있어서, 리보솜 결합부위가 다음과 같은 서열을 갖는 합성 올리고뉴클레오티드인 것을 특징으로 하는 플라스미드:
    AATTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAG
    GTTATTATAACTTTTTCCTTCTCAT
  82. 제73항에 있어서, 복제기원이 pBR 322 또는 pOP16으로부터 유래된 것임을 특징으로 하는 플라스미드.
  83. 제73항에 있어서, 표현형 특성이 약제 내성인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  84. 제73항에 있어서, 약제 내성이 암피실린 또는 테트라사이클린에 대한 내성인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  85. 제73항에 있어서, 천연 폴리팹티드가 인체 성장호르몬, 소 성장호르몬, 돼지 성장호르몬, 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소, 아포지방 단백질 E 또는 피브로넥틴을 포함함을 특징으로 하는 플라스미드.
  86. 제85항에 있어서, 제24도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pFSAL-13-B27로 명명된 및 ATCC 수탁번호 67071로 기탁되어 있는 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  87. 제85항에 있어서, 제37도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pEFF-902로 명명한 돼지 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  88. 제85항에 있어서, 제37도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pEFF-9021로 명명한 돼지 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  89. 제85항에 있어서, 제52도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pEFF-929로 명명한 및 ATCC 수탁번호 67705로 기탁되어 있는 돼지 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  90. 제85항에 있어서, 제25도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pSODβMAX-12-cI로 명명한 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  91. 제85항에 있어서, 제26도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pTVR 700-2로 명명한 아포지방 단백질 E의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  92. 제85항에 있어서, 제27도에 나타낸 제한효소지도를 갖는, pTVR 590-4로 명명한 아포지방 단백질 E의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  93. 제85항에 있어서, pTVR 714(또한 pTVR 721-4)로 명명한 아포지방 단백질 E의폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 플라스미드.
  94. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제85항의 플라스미드를 함유하는 천연 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드이 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  95. 제94항에 있어서, 에스케리키아콜리 숙주가 F←균주인 숙주 플라스미드계.
  96. 제94항에 있어서, F←균주가 F←MG1655로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  97. 제95항에 있어서, F←균주가 F←W3110으로 명명된 것으로서 ATCC 수탁번호 67705로 기탁되어 있는 숙주 플라스미드계.
  98. 제95항에 있어서, F←균주가 F←W2637로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  99. 제95항에 있어서, F←균주가 F←MM294로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  100. 제95항에 있어서, F←균주가 F←1000으로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  101. 제95항에 있어서, F←균주가 F←1100으로 명명된 것인 숙주 플라스미드계.
  102. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제86항의 플라스미드를 함유하는 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  103. 제102항에 있어서, 숙주가 ATCC 수탁번호 67071로 기탁되어 있는 에스케리키아콜리 ATCC 수탁번호 12435인 숙주 플라스미드계.
  104. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제87,88 또는 89항의 플라스미드를 함유하는 돼지 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  105. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제90항의 플라스미드를 함유하는 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  106. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제91,92 또는 93항의 플라스미드를 함유하는 아포지방 단백질 E의 동족체를 제조하기 위한숙주 플라스미드계.
  107. 제106항에 있어서, 아포지방 단백질 E 폴리팹티드 동족체가 met-아포지방 단백질 E이고, 및 숙주는 ATCC 수탁번호 67360으로 기탁되어 있는 에스케리키아콜리 ATCC 수탁번호 12435인 숙주 플라스미드계.
  108. 제102 또는 103항의 숙주 플라스미드계를 소 성장호르몬 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 소 성장호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하는 방법.
  109. 제104항의 숙주 플라스미드계를 돼지 성장호르몬 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 돼지 성자호르몬의 폴리팹티드 동족체를 제조하는 방법.
  110. 제105항의 숙주 플라스미드계를 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 인체 구리/아연 동족체를 제조하는 방법.
  111. 제106 또는 107항의 숙주 플라스미드계를 아포지방 단백질 E 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 아포지방 단백질 E의 폴리팹티드 동족체를 제조하는 방법.
  112. 적당한 에스케리키아콜리 숙주세포내에 도입할 경우, 숙주세포로 하여금 천연 폴리팹티드의 그것과 상이하긴 하되 실질적으로 동일한 아미노산 서열 및 생물학적 활성을 갖는 목적하는 천연 진핵 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드 동족체를 코오딩하는 DNA를 형질발현할 수 있도록하며, 그리하여 5′으로부터 3′방향으로 다음과 같은 것들: a) 5′으로부터 3′방향으로 프로모터deoP1 및deoP2를 직렬로 함유하는 DNA; b) AT 풍부 서열 번역 인헨서; c)Ndel 제한 효소 부위; d)ATC개시 코오돈; 및 e)ATG개시 코오돈과 함게 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드으 동족체를 코오딩하는 DNA를 함유하며, 아울러, 부가적으로 숙주세포내에서 자기복제를 일으킬 수 있는 세균 플라스미드로부터의 복제기원을 갖는 DNA서열 및 플라스미드가 숙주세포내에 존재할 경우 나타나는 선택적인 또는 확인가능한 표현형 특성과 관련된 유전자를 함유하는 DNA서열을 포함하는 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체가 생산되도록 함을 특징으로 하는 이중-가닥 DNA플라스미드.
  113. 제112항에 있어서, 천연 폴리팹티드가 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소인 것을 특징으로 하는 플라스미드.
  114. 제112항에 있어서, 천연 폴리팹티드가 인체 망간 과산화물 분자변위보효소, 인체 글루타티온 퍼옥시다제, 인체 성장호르몬, 소 성장호르몬, 돼지 성장호르몬, 인체 아포지방 단백질 E 또는 피브로넥팅 도메인을 포함함을 특징으로 하는 플라스미드.
  115. 제113항에 있어서, ATCC 수탁번호 67703하에 에스케리키아콜리 균주 S930(F←)으로 기탁되어 있는,pMF 5534로 명명된 플라스미드.
  116. 적당한 에스케리키아콜리 숙주내에서 제113항의 플라스미드를 함유하는 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하기 위한 숙주 플라스미드계.
  117. 제116항에 있어서, 숙주가 S744, S732 및 야생형 균주(ATCC 수탁번호 12435), S540, S928, S929,MC 1061 및 S930으로 구성된 군으로부터 선택된 것인 숙주 플라스미드계.
  118. 제116항에 있어서, 숙주가 F←균주인 숙주 플라스미계.
  119. 제116항의 숙주 플라스미드계를 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소 동족체가 생산될 수 있는 조건들하에서 성장시키고, 이어서 생성된 동족체를 수거함을 특징으로 하는 인체 구리/아연 과산화물 분자변위보효소의 폴리팹티드 동족체를 제조하는 방법.
  120. 제119항에 있어서, 숙주 플라스미드를 약 30℃에서 성장시키는 것을 또한 특징으로 하는 방법.
  121. 적당한 에스케리키아콜리 숙주세포내에 도입할 경우, 수주세포로 하여금 천연 폴리팹티드의 그것과 상이하긴 하되 실질적으로 동일한 아미노산 서열 및 생물학적 활성을 갖는 목적하는 천연 진핵 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드 동족체를 코오딩하는 DNA를 형질발현할 수 있도록하며, 그리하여 5′으로부터 3′방향으로 다음과 같은 것들: a) 5′으로부터 3′방향으로 프로모터deoP2 를 함유하는 DNA; b) 숙주세포내에서 리보솜과 결합할 수 있는 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 코오딩하는 DNA로부터 mRNA가 전사되도록하는 리보솜 결합부위를 갖는 DNA; c) ATG개시 코오돈 ; 및 d)ATG 개시 코오돈과 함께폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체를 코오딩하는 DNA; 를 함유하며, 아울러, 부가적으로 숙주세포내에서 자기복제를 일으킬 수 있는 세균 플라스미드로부터 복제기원을 갖는 DNA서열 및 플라스미드가 숙주세포내에 존재할 경우 나타나는 선택적인 또는 확인가능한 표현형 특성과 관련되 유전자를 함유하는 DNA서열을 포함하는 폴리팹티드 또는 상기 폴리팹티드의 동족체가 생산되도록하는 것을 특징으로 하는 이중-가닥 DNA플라스미드.
  122. 제121항에 있어서, 부가적으로 AT 풍부 서열 번역 인헨서를 함유함을 특징으로 하는 플라스미드.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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