KR890000651B1

KR890000651B1 - 은행잎으로부터 고농도의 푸라보노이드의 추출방법

Info

Publication number: KR890000651B1
Application number: KR1019860002534A
Authority: KR
Inventors: 안병준
Original assignee: 동방제약 주식회사; 박화목
Priority date: 1986-04-03
Filing date: 1986-04-03
Publication date: 1989-03-22
Also published as: KR870009725A

Abstract

내용 없음.

Description

은행잎으로부터 고농도의 푸라보노이드의 추출방법

본 발명은 은행잎으로부터 푸라보노이드의 추출방법에 관한 것이다. 더 상세히 설명하면 본 발명은 건조, 분쇄한 은행잎을 초음파 추출기로 추출한 후 여과 또는 원심분리하여 수용액을 얻고, 이 수용액을 감압하 일정량으로 만든 후, 용매로 추출하여 비푸라본 성분을 제거한 다음 용매를 제거한 다음 염을 가하여 푸라보노이드를 침전시키는 방법과 극성용매를 사용하여 푸라보노이드를 추출하는 방법에 관한 것이다.

은행나무는 은행나무과에 속하며 지구상에서 발견되는 목본 중 가장 오래된 나무이다. 한방에서는 그 열매를 진해거담, 소화촉진, 진정 등의 목적으로 사용하고 있으나 그 잎의 약용에 대해서는 언급된 바 없다.

은행잎을 약용의 목적으로 처음 연구한 사람들은 독일 연방공화국의 피이터, 피젤, 바이서[Arzneimittel for schung 16,719(1966)]로 그들은 주성분이 푸라보노이드인 은행잎 엑기스가 모르모트의 혈액순환을 촉진시킨다로 발표했다. 이 연구 결과가 발표된 이후 혈액순환장애가 원인이 되는 생리 및 임상에 관한 연구가 다양하게 수행되어 왔다. 현재까지 얻어진 결과를 종합해 보면 은행잎 엑기스제제는 말초혈액순환장애로 인한 버거씨증, 노인성난시, 난청 및 보행장애, 사지 냉감 등 뇌혈관 순환장애로 인한 뇌졸증, 노망현상, 사지마비 등 그리고 혈관 경화와 이로 인한 순환계 질환에 사용되고 있다.

본 발명의 목적은 경구용 또는 주사제용 약용제제에 사용될 수 있는 고농도의 푸라보노이드를 공정이 용이하고 경제성 있게 추출하는 방법을 제공하는 것이다.

종래의 문헌에서도 은행잎으로부터 약용제제를 만드는 방법을 개시하고 있으나, 푸라보노이드의 추출공정이 복잡하고, 푸라보노이드의 함량 및 엑기스의 순도가 본 발명이 의도하는 푸라보노이드의 추출방법, 그의 함량 및 엑기스의 순도와 상이하다. 상기 피이터 등의 문헌에 따르면 푸라본 및 푸라본 글리코사이드가 작용물질인 것이 개시되어 있으므로 제제중 푸라보노이드 함량이 많으면 많을수록 양질의 제제임은 자명하다.

종래의 방법에 따라 만든 푸라보노이드제제에 대하여 암모니아의 검출시험을 행하는 경우, 암모니아 이외에 여러가지 아민류가 다량 함유되어 있음을 발견하였으며, 이러한 제제를 쥐에게 투여하면 수면효과 등 신경계에 작용하는데 이와 같은 효과는 은행잎이 함유하는 푸라보노이드의 생리작용을 고려할때 푸라보노이드가 아닌 물질에 기인하는 것으로 생각된다. 위에서 얻은 아민류는 예비연구 결과를 분석해 볼때 피리딘 유도체, 시클로헥실아민 유도체로서 이들이 신경계에 작용하는 물질일 가능성이 크다. 종래의 방법에서는 푸라보노이드의 함량을 높이기 위하여 납염을 사용하기도 하였는데, 엑기스 중에 아민류가 공존하거나 납염이 혼입된다면 이는 약용의 목적에 부적합하다.

본 발명에서는 주된 용매로 증류수를 사용하고 무해한 무기염으로 주로 푸라보노이드를 침강시키는 방법 또는 필요없는 물질이 제거되는 유기용매 추출법을 택하기 때문에 은행잎이 함유하는 아민류와 기타 불필요한 극성물질의 대부분이 제거된다. 이와 같이 은행잎이 함유하는 불필요한 물질은 제거하면서 추출과정 중 유해성 물질의 첨가없이 엑기스를 제조하므로 이는 약품으로 더욱 적합하다.

본 발명의 특징은 제제에 인위적으로 물질을 가하지 않고 불필요한 물질을 제거함으로서 푸라보노이드의 총함량을 최고 34.8%를 함유하는 은행잎 엑기스를 얻을 수 있다.

이하 본 발명을 상세히 기술한다.

건조한 은행잎을 30∼70 메쉬로 분쇄한 1㎏을 물 3∼5l가 들어있는 초음파 추출기에 넣고 20∼50KHz의 초음파로 실온에서 1∼3시간 추출한다. 추출이 끝난 후 여과 또는 원심분리하여 수용액을 얻고 이 수용액을 50℃이하의 온도에서 감압하 증발시켜 500ml로 만든다. 여기에 클로로포름, 에틸아세테이트, 에테르, 벤젠, 톨루엔 등의 용매중에서 선택된 1종 이상을 500∼1000ml가하여 클로로필, 알러지성 불포화탄화수소, 비푸라본성분을 제거한 다음 감압하 증발시켜 잔존하는 유기 용매를 제거한다. 이렇게 하여 얻어진 수층을 경구용제, 액제 등을 만드는데 그대로 사용할 수 있다. 더욱, 정제된 제제를 얻기 위하여 상기 수층에 부탄올(또는 부탄온)을 2∼5배량씩 가하여 2회 추출한다. 얻은 부탄올(또는 부탄온)을 합하고 물 1000∼2000ml씩으로 2회 여과하여 아민류 등의 불순물을 제거한 다음 활성탄 100∼200g을 가한 후 30∼90분간 실온에서 흔들어 주어서 탄닌류, 기타 불필요한 고분자 물질을 제거한다. 활성탄을 제거한 후 40℃이하의 온도에서 감압 건고한다. 이렇게하여 얻은 엑기스는 은행잎의 산지, 건조상태 등에 따라 15∼25%의 총푸라보노이드를 함유한다.

또 다른 방법은 상기의 클로로포름을 제거하고 남은 수용액에 황산암모늄, 염화마그네슘, 염화암모늄, 염화나트륨 등의 염류를 가하여 용액의 이온 강도를 조정함으로써 푸라보노이드 화합물을 침강시키는 것이다. 즉 상기에서 얻은 수용액을 감압하 증발하여 500ml로 만들고, 여기에 상기의 염류중의 1종 또는 2종 이상을 가하여 포화시키거나 포화량보다 20% 적게한다. 이 조작으로 인하여 아민의 염류 등 수용성물질을 제거한다. 침강물을 70∼80% 에탄올에 용해시킨후 방치하여 생성되는 불용분을 제거한다. 이때 얻은 용액은 경구용제제를 만드는데 직접 사용해도 좋다. 상기 용액을 건고하면 8.33∼10.10g을 얻는다. 이 엑기스 중에는 18.7∼14.8%의 총푸라보노이드가 함유되어 있다. 이 침강물을 더욱 정제하기 위하여 침강물을 다시 증류수에 가온 용해시킨 후 실온에 방치하여 생성된 불용분은 여과하여 제거한 다음 상기의 염류중의 1종 또는 2종 이상으로 포화시킨 후 침강물을 얻는다. 이 침강물을 70∼80% 에탄올에 용해시킨 후 활성탄으로 처리하여 탄닌, 고분자물질 등을 제거한다. 활성탄으로 여과한 용액을 건고한다. 이렇게 하여 얻은 엑기스 중의 총푸라보노이드 함량은 34.8∼20.0%이다. 상기의 정제한 푸라보노이드는 고단위 경구용 제제는 물론 주사제의 제조에 적합하다.

상기에서 초음파 추출기의 주파수는 20∼50KHz가 바람직하나 더욱 바람직하기로는 25∼30KHz이다. 상기 추출용매는 클로로포름, 에틸아세테이트, 에테르, 벤젠, 톨루엔 등이 적합하나, 클로로포름이 가장 바람직하며, 또한 상기 염류는 황산암모늄, 염화마그네슘, 염화암모늄, 염화나트륨이 바람직하나 사용의 편의성, 경제성에 있어서 황산암모늄이 가장 바람직하다.

본 발명을 하기 실시예에 의해 더욱 상세히 설명한다.

[실시예 1]

충남 대덕군 진잠면 방동리에서 1983.9.13에 수집한 은행잎을 음건한 후 분쇄기로 30∼70 메쉬로 분쇄한다. 분쇄한 은행잎 1kg을 4l의 증류수가 들어있는 초음파 추출기에 가한다. 주파수를 28KHz로 조정하여 1시간 추출한후 여과하여 여액과 식물잔체을 분리한다. 추출액을 40℃ 이하에서 감압하 증발시켜 500ml로 만든 다음 클로로포름 1000ml를 가하고 5분간 진탕 후 수층을 분리한다. 수층을 감압증류하여 클로로포름을 제거한 후 다시 증류수를 가하여 500ml로 만든다(이하 이 수층을 원액이라 칭함). 이 원액을 감압 증류기에서 건고하여 35g의 엑기스를 얻는다. 이를 70% 에탄올에 용해시켜 보관한다.

[실시예 2]

원액에 부탄올 1000ml씩 3회 추출하여 부탄올층을 합한 후 여기에 물 1000ml씩을 가하여 2회 세척한다. 부탄올층을 취한 후 활성탄 150g을 가하고 흔들어 준 다음 활성탄을 여과하여 제거한다. 부탄올층을 회전식 감압 증류기에서 건고한다.

엑기스 수율 : 11.7g

[실시예 3]

원액에 황산암모늄 310g을 가하고 10분간 진탕한 후 12시간 정치한다. 생성침전물을 원심분리한다. 여기에 75% 에탄올 500ml를 가하고 50℃에서 용해시킨다. 1시간 방치 후 불용분을 원심분리 또는 여과하여 제거한다.

건고 엑기스 수율 : 17.7g 총 푸라보노이드 함량 : 22.6%

[실시예 4]

실시예 3에서 얻은 1차 침강물을 다시 증류수 350ml에 가하고 50℃에서 용해시킨 다음 실온에서 2시간 방치한다. 생성된 불용분을 여과하고 여액에 황산암모늄 290g을 가한후 12시간 방치한다. 생성된 침강물을 여과하여 75% 에탄올 500ml에 용해시킨 다음 활성탄 50g을 가하고 50℃에서 1시간 교반한다. 활성탄을 제거하고 남은 여액을 건고한다.

엑기스량 : 5.70g 총 푸라보노이드 함량 : 34.8%

[실시예 5]

실시예 1에서 얻은 원액 500ml를 감압 증발시켜 350ml로 만든 다음 상기 실시예 3과 동일하게 수행한다.

엑기스량 : 10.97g 총푸라보노이드 함량 : 18.3%

Claims

음건, 분쇄한 은행잎을 증류수가 들어있는 초음파 추출기에 넣고, 실온에서 추출한 다음 여과하여 얻은 수용액을 클로로포름, 에틸아세테이트, 에테르, 벤젠 및 톨루엔으로 구성된 군에서 선택된 유기용매로 지용분을 제거한 후, 남은 수용액을 추출용매류의 용매로 추출하든지 또는 무기염류를 가하여 푸라보노이드를 침강시켜 공지의 방법으로 정제함을 특징으로 하는 고농도 푸라보노이드 엑기스의 추출방법.
제1항에 있어서, 초음파 주파수를 20∼50KHz로 조정함을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 알코올류가 부탄올 또는 부탄온인 것이 특징인 방법.
음건, 분쇄한 은행잎을 증류수가 들어있는 초음파 추출기에 넣어 추출하고, 여액을 클로로포름, 초산에틸, 에테르, 벤젠 및 톨루엔으로 구성된 군에서 선택된 유기 용매로 지용분을 추출 제거하고 남은 수용액에 황산암모늄, 염화마그네슘, 염화암모늄 또는 염화나트륨을 가하여 푸라보노이드를 침강시킨 후 원심분리하여 침강물을 얻은 후 여기에 알콜성 수용액으로 처리하여 불용분을 제거한 후 증발건고시키는 것을 특징으로 하는 고농도 푸라보노이드 엑기스의 추출방법.