KR880012754A - 신규의 모노글리세라이드 리파제와 그 제조방법 및 이것을 이용한 분석방법 - Google Patents

신규의 모노글리세라이드 리파제와 그 제조방법 및 이것을 이용한 분석방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

신규의 모노글리세라이드 리파제와 그 제조방법 및 이것을 이용한 분석방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제 1 도는 본 발명의 모노글리세라이드 리파제에 대한 최적 PH곡선이다, 제 2 도는 상기 효소의 최적온도 곡선이다, 제 3 도는 상기 효소의 PH안정성에 대한 곡선이다.

Claims (24)

  1. 모노글리세라이드에는 작용할 수 있으나 다이글리세라이드 및 트리글리세라이드에는 작용할 수 없는 기질 특이성을 갖고 있으며, 적어도 반응식(a)의 효소반응을 촉매화할 수 있는 신규의 모노글리세라이드리파제.
    모노글리세라이드+H20→글리세롤+지방산 (a)
  2. 제 1 항에 있어서, 다음과 같은 물리학적 특성을 갖는 모노글리세라이드 리파제. (1) 분자량: 27.000±2.700, (2) 최적 PH:PH5 부근, (3)최적온도: 75℃ 부근에서 최대활성 나타냄, (4) PH안정성: PH7-8(75℃에서 10분간 처리), (5) 열적안정성: 70℃까지 안정(PH7.5에서 10분간 처리), (6) 등전점: PH46±0.4
  3. 모노글리세라이드에는 작용할 수 있으나 다이글리세라이드 및 트리글리세라이드는 작용할 수 없는 기질특이성을 갖고 있으며, 적어도 반응식(a)의 효소반응을 촉매화할 수 있는 모노글리세라이드 리파제를 생산하는 미생물인 바실러스(Bacillus)를 배지중에서 배양한 다음 그 배양물로부터 상기의 모노글리세라이드를 모으는 것으로 이루어지는 신규의 모노글리세라이드 리파제의 제조방법.
    모노글리세라이드+H2O→글리세롤+지방산 (a)
  4. 제 3 항에 있어서, 모노글리세라이드 리파제를 생산하는 미생물인 바실러스(Bacillus)가 바실러스 스티로더모필러스(Bacillus stearothermophilus)인 모노글리세라이드 리파제의 제조방법.
  5. 제 4 항에 있어서, 모노글리세라이드 리파제를 생산하는 미생물인 바실러스 스티로더모필러스(Bacillus stearothermophilus)가 바실러스스티로더모필러스(Bacillus stearothermophilus) H-165(FERM-BP-1673)인 모노글리세라이드 리파제의 제조방법.
  6. 시료용액내의 모노글리세라이드의 함량을 측정하기 위하여 모노글리세라이드에는 작용할 수 있으나 다이글리세라이드 및 트리글리세라이드에는 작용할 수 없는 기질특이성을 갖고 있으며, 적어도 반응식(a)의 효소반응을 촉매화할 수 있는 모노글리세라이드 리파제를 시료용액 내의 모노글리세라이드에 작용시킨 다음 반응에 의해서 생성된 글리세롤과 지방산의 어느 하나를 측정하는 것으로 이루어지는 시료용액중에 함유된 모노글리세라이드의 분석방법.
    모노글리세라이드+H20→글리세롤+지방산 (a)
  7. 제 6 항에 있어서, 시료용액내의 모노글리세라이드가 시료용액내의 1,2-다이글리세라이드에 췌장 리파제를 작용시켜서 유리시킨 모노글리세라이드인 모노글리세라이드의 분석방법.
  8. 제 6 항에 있어서, 글리세롤의 측정이 글리세롤에 글리세롤옥시다제, 글리세로키나제 또는 글리세로포스페이트옥시다제를 작용시켜 생성되는 H202를 측정하는 것으로 이루어지는 모노글리세라이드의 분석방법.
  9. 제 8 항에 있어서, H2O2의 측정이 H2O2의 존재하에서 비색변화를 나타낼수 있는 적어도 한종류 이상의 색소 시약을 함유하는 염료조성물을 사용하여 이루어지는 모노글리세라이드의 분석방법.
  10. 제 9 항에 있어서, 염료조성물이 퍼록시다제를 포함하는 모노글리세라이드의 분석방법.
  11. 제10항에 있어서, 퍼록시다제가 0.5-10U의 양으로 사용되는 모노글리세라이드의 분석방법.
  12. 제 9 항에 있어서, 염료조성물의 색소시약이 4-아미노안티피리딘, N-에틸-N-(2-하이드록시-3-술포프로필)-메타-톨루이딘 또는 페놀과 퍼록시다제로 이루어지는 모노글리세라이드의 분석방법.
  13. 제 6 항에 있어서, 지방산의 측정이 (a)지방산이 아실 -CoA로 변환되고, (b) 상기의 아실 -CoA가 데하이드로아실 -CoA로 변환되며, (c) 상기의 데하이드로아실 -CoA가 하이드록시아실 -CoA로 변환되고, (d) 상기의 하이드록시아실 -CoA가 케토아실 -CoA로 변환된 다음, (e) 상기의 케토아실 -CoA가 아실 -CoA로 변환되는 것으로 구성되는 반응단계 (a)(b)(c)(d) 및 (e)로 부터 검출가능한 반응생성물에 대한 양적 변화의 측정으로 이루어지는 모노글리세라이드의 분석방법.
  14. 제14항에 있어서, 반응단계(a)가 아실-CoA·신테타제의 활성은 물론 지방산 CoASH 및 ATP 또는 GTP에 근거하며, 반응단계(b)가 아실-CoA 옥시다제의 활성은 물론, 아실 -CoA 및 산소에 근거하고, 반응단계(c)가 에노일-CoA·하이드라타제의 활성은 물론, 데하이드로아실-CoA 및 물에 근거하여 반응단계 (d)가 3-하이드록시아실-CoA·데하이드로게나제의 활성은 물론 하이드록시아실-CoA 및 NAD에 근거하고, 반응단계(e)가 3-케토아실 -CoA·티올타제의 활성은 물론 케토아실-CoA 및 CoASH에 근거하고 있는 모노글리세라이드의 분석방법.
  15. 제13항에 있어서, 검출가능한 반응생성물에 대한 양적변화의 측정이 반응단계에서 생성된 환원된 NAD를 정량적으로 측정하여 수행되는 모노글리세라이드의 분석방법.
  16. 제15항에 있어서, 환원된 NAD의 정량분석이 NAD에는 특이적이지 아니하나 환원된 NAD에는 특이적인 흡수파장을 나타내는 320-360nm 부근에서 분광광도법으로 수행하여 이루어지는 모노글리세라이드의 분석방법.
  17. 제15항에 있어서, 환원된 NAD의 정량분석이 환원된 NAD의 수소원자에 대한 수용성을 갖으며, 수소전달계에 참여하는 색소에 의해서 발색되는 것에 근거하여 수행되는 모노글리세라이드의 분석방법.
  18. 제17항에 있어서, 환원된 NAD의 수소원자에 대한 수용성을 갖는 색소가 수용성테트라졸름염 및 다이아포라제를 함유하고, 수소전달계에 참여하는 색소인 모노글리세라이드의 분석방법.
  19. 시료용액중의 췌장 리파제를 적어도 1.2-다이글리세라이드를 함유하는 시약에 작용시켜 모노글리세라이드를 유리시키고, 모노글리세라이드에는 작용할 수 있으나, 다이글리세라이드 및 트리글리세라이드에는 작용할 수 없는 기질 특이성을 갖고 있으며, 적어도 반응식(a)의 효소반응을 촉매화할 수 있는 모노글리세라이드 리파제를 상기에서 유리된 모노글리세라이드에 작용시킨 다음 상기 반응에서 모노글리세라이드의 성분으로 생성된 글리세롤과 지방산의 어느 하나를 측정하는 것으로 이루어지는 시료용액중의 췌장 리파제의 활성에 대한 분석방법.
    모노글리세라이드+H20→글리세롤+지방산 (a)
  20. 제19항에 있어서, 글리세롤의 측정이 글리세롤에 글리세롤 옥시다제, 글리세로키나제 또는 글리세로 포스페이트 옥시다제를 작용시켜 생성되는 H2O2를 측정하는 것으로 이루어지는 췌장 리파제의 활성에 대한 분석방법.
  21. 제20항에 있어서, H2O2의 측정이 H2O2의 존재하에서 비색변화를 나타낼수 있는 적어도 한종류 이상의 색소 시약을 함유하는 염료조성물을 사용하여 이루어지는 췌장 리파제의 활성에 대한 분석방법.
  22. 제21항에 있어서, 염료조성물이 퍼록시다제를 포함하는 췌장 리파제의 활성에 대한 분석방법.
  23. 제22항에 있어서, 퍼록시다제가 0.5-10u의 양으로 사용되는 췌장 리파제의 활성에 대한 분석방법.
  24. 제11항에 있어서, 염료. 조성물이 색소시약이 4-아미노안티피리딘, N-에틸-N-(2-하이드록시-3-술포프로필)-메타-톨루이딘 또는 페놀과 퍼록시다제로 이루어지는 췌장 리파제의 활성에 대한 분석방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019880003676A 1987-04-01 1988-04-01 신규의 모노글리세라이드 리파제를 이용한 모노글리세라이드의 분석방법 KR960015263B1 (ko)

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