KR880000471A - 신규한 폴리펩티드 - Google Patents

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KR880000471A
KR880000471A KR1019870006259A KR870006259A KR880000471A KR 880000471 A KR880000471 A KR 880000471A KR 1019870006259 A KR1019870006259 A KR 1019870006259A KR 870006259 A KR870006259 A KR 870006259A KR 880000471 A KR880000471 A KR 880000471A
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polypeptide
ala
tyr
pro
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쥰이찌 야마기시
히또시 가와시마
류우지 후루다
히로다다 고다니
가쯔히사 나까다
Original Assignee
후지와라 도미오
다이닛뽄 세이야꾸 가부시끼가이샤
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Abstract

내용 없음

Description

신규한 폴리펩티드
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 사람 TNF를 코드하는 클론화 cDNA의 제한효소매핑(mapping)을 나타내고,
제2도와 제3도는 형질발현플라스미드 pHNy-32를 구축하는 단계를 나타내며(실시예 1),
제4도는 형질발현플라스미드 pHPL-115의 구축을 위한 PL-DNA 단편을 제조하는 단계를 나타내고(실시예 2),
제5도는 폴리페비드 TNF-115L 을리실엔도펩티다제로 소화시켜 얻은 펩티드단편의 고성능 액체크로마토 그래피에 의한 용출패턴을 나타내며(실시예 2),
제6도는 형질발현 플라스미드 pHPL-147을 구축하는 단계를 나타내고(실시예 3),
제7도는 형질발현 플라스미드 pHPL-Ser 67을 구축하는 단계를 나타내며(실시예 4),
제8도는 형질발현 플라스미드 pHPL47S67을 구축하는 단계를 나타내고(실시 예 4),
제9도는 형질발현 플라스미드 pHTR91을 구축하는 단계를 나타내며(참고실시 예 1),
제10도는 형질발현플라스미드 pHT147을 구축하는 단계를 나타내고(참고실시예 2),
제11도는 형질발현플라스미드 pHT392를 구축하는 단계를 나타낸다(참고실시예 3).

Claims (26)

  1. 하기식〔Ⅰ〕로 표시되는 아미노산 배열에 있어서, 16번째, 31번째 내지 34번째, 36번째, 48번째, 73번째, 82번째, 85번째, 89번째, 94번째, 97번째, 98번째, 103번째, 113번째, 115번째, 117번째, 118번째, 131번째, 132번째, 141번째, 146번째, 153번째 아미노산 잔기들중의 최소한 한개가 다른 아미노산으로 변환되며, 115번째 아미노산 잔기가 다른 아미노산 잔기로 변환되는 조건하에 67번째 아미노산잔기 및/또는 99번째 아미노산잔기가 다른 아미노산 잔기로 변환될 수 있는 아미노산 배열을 갖는 폴리펩티드, 또는 상기 폴리펩티드의 N말단으로부터 한개 또는 많아야 8개의 연속된 아미노산 잔기를 삭제한 결과 생긴 폴리펩티드.
  2. 제1항에 있어서, (A)식 〔Ⅰ〕의 아미노산 배열에서 다음 아미노산 변환들중의 최소한 하나가 실행되는 폴리펩티드;
    16번째 Ala이 Val으로,
    31번째 Ala이 Thr으로,
    32번째 Asn이 Ala,Cys,Asp,Hip,Ile,Arg,Ser,Thr,Val 또는 Tyr으로,
    34번째 Leu이 Ile으로,
    36번째 Ala이 Val으로,
    48번째 VaL이 Met으로,
    73번째 Leu이 Pro으로,
    82번째 Ala이 Asp으로,
    85번째 Tyr이 His으로,
    89번째 Val이 Ile으로,
    94번째 Ala이 Thr으로,
    97번째 Ser이 Asn으로,
    98번째 Pro이 His 또는 Leu으로,
    103번째 Thr이 Pro으로,
    113번째 Tyr이 Cys으로,
    115번째 Pro이 Leu,His,Gln,Ser,Ala,Phe,Asn,Gly,Tyr,Val,Glu,Met,Ile,Asp,Trp,Lys, Arg 또는 Thr으로,
    117번째 Tyr이 His으로,
    118번째 Leu이 Gln으로,
    131번째 Ser이 Ile으로,
    132번째 Ala이 Thr으로,
    141번째 Asp이 Tyr으로,
    143번째 Ala이 Val으로,
    144번째 Glu이 Lys으로,
    145번째 Ser이 Cys으로,
    146번째 Gly이 Glu으로, 그리고
    153번째 Ile이 Leu으로의 변환들
    (B)식 〔Ⅰ〕로 표시되는 아미노산 배열에서 67번째 Cys 및/또는 99번째 Cys이 Ser으로 변환되고 115번째 Pro이 Pro과는 다른 아미노산으로 변환되는 폴리펩티드 ; 또는 (C) N말단으로부터 한개 또는 많아약 8개의 연속된 아미노산 잔기를 삭제시킨 폴리펩티드(A) 또는 (B)
  3. 제1항에 있어서, 식〔Ⅰ〕로 표시되는 아미노산 배열에서 다음 아미노산 변환들중의 최소한 하나가 실행되는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드:
    16번째 Ala이 Val으로,
    36번째 Ala이 Val으로,
    73번째 Leu이 Pro으로,
    98번째 Pro이 His 또는 Leu으로,
    103번째 Thr이 Pro으로,
    115번째 Pro이 His 또는 Gln으로,
    131번째 Ser이 Ile으로, 그리고
    143번째 Ala이 VaL으로의 변환들.
  4. 제1항에 있어서, 식〔Ⅰ〕의 아미노산 배열에서 다음 아미노산 변환들중의 최소한 하나가 실행되는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드:
    31번째 Ala이 Thr으로, 32번째 Asn이 Ala,Cys,Asp,His,Ile,Arg,Ser,Thr,Val 또는 Tyr으로, 115번째 Pro이 Ser,Ala,Phe,Asn,Thr,Gly,Tyr,Val,Glu,Met,Ile,Asp,Trp,Leu 또는 Lys으로,그리고 117번째 Tyr이 His으로의 변환들.
  5. 제1항에 있어서, 식〔Ⅰ〕의 아미노산 배열에서 다음 아미노산 변환들중의 최소한 하나가 실행되는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드:
    32번째 Asn이 Tyr,His,Asp 또는 Ser으로, 115번째 Pro이 Leu,Ser,Asp 또는 Gly으로, 그리고 117 Tyr이 His으로의 변환들.
  6. 제1항에 있어서, 식〔Ⅰ〕의 아미노산 배열에서 32번째 Asn 또는 115번째 Pro, 또는 두개 모두가 다른 아미노산들로 변환되는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
  7. 제1항에 있어서, 식〔Ⅰ〕의 아미노산 배열에서 32 번째 Asn이 Tyr으로 변환되는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
  8. 제1항에 있어서, 식〔Ⅰ〕의 아미노산 배열에서 115번째 Pro이 Leu으로 변환되는 것을 특징으로하는 폴리펩티드.
  9. 제1항 내지 제8항중 어느 하나에 있어서, Met이 아미노산 배열의 N말단에 결합되는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
  10. 제1항 내지 제9항중 어느 하나에 따르는 폴리펩티드를 코드하는 염기배열을 가진 것을 특징으로 하는 DNA.
  11. 다음 식〔A〕로 표시되는 염기배열에 있어서 32번째 코돈 AAT 및/또는 115번째 코독 CCC가 다른 아미노산을 코드하는 코돈으로 변환되는 것을 특징으로 하는 DNA:
  12. 제11항에 있어서, 식〔A〕의 염기배열에서 32번째 코돈 AAT가 다른 아미노산을 코드하는 코돈으로 변환되는 것을 특징으로 하는 DNA.
  13. 제11항에 있어서, 식〔A〕의 염기 배열에서 115번째 코돈 CCC가 다른 아미노산을 코드하는 코돈으로 변환되는 것을 특징으로 하는 DNA.
  14. 제12항에 있어서, 다른 아미노산을 코드하는 코돈이 Tyr을 코드하는 TAT인 것을 특징으로 하는 DNA.
  15. 제13항에 있어서, 다른 아미노산을 코드하는 코돈이 Leu을 코드하는 CTC인 것을 특징으로 하는 DNA.
  16. 제10항 내지 제15항중 어느 하나에 있어서, 번역개시코돈이 염기 배열의 5′ 말단에 결합 및/또는 종코돈이 염기 배열의 3′ 말단에 결합된 것을 특징으로 하는 DNA.
  17. 제10항 내지 제16항중 어느 하나에 의한 DNA를 삽입시킨 것을 특징으로 하는 벡터.
  18. 제10항 재지 16항중 어느 하나에 의한 DNA를 형질발현벡터로 삽입시킨 결과 생긴 것을 특징으로 하는 벡터.
  19. 제17항 또는 제18항의 벡터로 형질전환된 것은 특징으로 하는 숙주.
  20. 제19항에 있어서, 미생물인 것을 특징으로 하는 숙주.
  21. 제19항 또는 제20항에 있어서, 대장균인 것을 특징으로 하는 숙주.
  22. 제19항 내지 제20항중 어느 하나의 숙주를 배양하고, 결과 생긴 폴리펩티드를 배양물로부터 분리하는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 제1항 내지 제9항 중 어느 하나에 따르는 폴리펩티드의 제조방법.
  23. 제1항 내지 제9항중 어느하나에 따르는 폴리펩티드 또는 그것의 염으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 의약 조성물.
  24. 하기식〔Ⅰ〕에 해당하는 아미노산 배열에 있어서, 16번째, 31번째 내지 34번째, 36번째, 48번째, 73번째, 82번째, 85번째, 89번째, 94번째, 97번째, 98, 번째, 103번째, 113번째, 115번째, 117번째, 118번째, 131번째, 132번째, 141번째 내지 146번째와 153번째 아미노산 잔기들중의 최소한 한개가 다른 아미노산잔기로 변환되며, 115번째 아미노산잔기가 다른 아미노산잔기로 변환되는 조건하에 67번째 아미노산잔기 및/또는 99번째 아미노산잔기가 다른 아미노산잔기로 변환될 수 있는 아미노산 배열을 갖는 폴리펩티드, 또는 상기 폴리펩티드의 N말단으로부터 한개 또는 많아야 8개의 연속된 아미노산 잔기를 삭제한 결과 생긴 폴리펩티드, 또는 상기 폴리펩티드의 N말단에 Met을 결합시킨 결과 생긴 폴리펩티드의 제조방법에 있어서, 상기 폴리펩티드를 코드하는 염기 배열을 가진 DNA를 형질발현 벡터내로 삽입시키고, 결과 생긴 형질발현벡터를 숙주에 도입시켜, 숙주를 배양하는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
  25. (A)제24항의 식〔Ⅰ〕의 아미노산 배열에서 다음 아미노산 변환들중의 최소한 하나가 실행되며;
    16번째 Ala이 Val으로,
    31번째 Ala이 Thr으로,
    32번째 Asn이 Ala,Cys,Asp,His,Ile,Ars,Ser,Thr,Val 또는 Tyr으로,
    34번째 Leu이 Ile으로,
    36번째 Ala이 Val으로,
    48번째 Val이 Met으로,
    73번째 Leu이 Pro으로,
    82번째 Ala이 Asp으로,
    85번째 Tyr이 HiS으로,
    89번째 Val이 Ile으로,
    94번째 Ala이 Thr으로,
    97번째 Ser이 Asn으로,
    98번째 Pro이 His 또는 Leu으로,
    103번째 Thr이 Pro으로,
    113번째 Tyr이 Cys으로,
    115번째 Pro이 Leu,His,Gln,Ser,Ala,Phe,Asn,Gly,Tyr,Val,Glu,Met,Ile,Asp,Trp,Lys, Arg ,또는 Thr으로,
    117번째 Tyr이 His으로, 118번째 Leu이 Gln으로, 131번째 Ser이 Ile으로, 132번째 Ala이 Thr으로, 141번째 Asp이 Tyr으로, 143번째 Ala이 Val으로, 144번째 Glu이 Lys으로, 145번째 Ser이 Cys으로, 146번째 Gly이 Glu으로, 그리고 153번째 Ile이 Leu으로의 변환들.
    (B)식〔Ⅰ〕로 표시되는 아미노산 배열에서 67번째 Cys 및/또는 99번째 Cys이 Ser으로 변환되고 115번째 Pro이 Pro와는 다른 아미노산으로 변환되는 제24항의 식〔Ⅰ〕에 해당하는 아미노산 배열을 갖는 폴리펩티드 또는 (C) N말단으로 부터 한개 또는 많아야 8개의 연속된 아미노산잔기를 삭제시킨 폴리펩티드(A), 또는 (B)의 제조방법에 있어서, 상기 폴리펩티드를 코드하는 염기배열을 갖는 DNA를 형질발현 벡터내로 삽입시키고 결과 생긴 형질발현벡터를 숙주에 도입시켜 숙주를 배양하는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
  26. 다음 아미노산변환들, 32번째 Asn이 Tyr,His,Asp 또는 Ser으로, 115번째 Pro이 Leu,Ser,Asp 또는 Gly으로, 그리고 117번째 Tyr이 His으로의 변환들중의 최소한 하나가 실행되는 제24항의 식〔Ⅰ〕에 해당하는 아미노산 배열을 갖는 폴리펩티드의 제조방법에 있어서, 상기 폴리펩티드를 코드하는 염기배열을 갖는 DNA를 형질발현플라스미드로 삽입시키고, 결과 생긴 형질별현 플라스미드를 대장균에 도입시켜 결과 생긴 형질전환체를 배양하는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019870006259A 1986-06-20 1987-06-20 신규한 폴리펩티드 KR880000471A (ko)

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