KR860008286A - 단백질 발현을 증가시키기 위한 trp 오페론의 샤인-달가노 서열과 개시 코돈 사이 DNA 서열의 변형 - Google Patents

단백질 발현을 증가시키기 위한 trp 오페론의 샤인-달가노 서열과 개시 코돈 사이 DNA 서열의 변형 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

단백질 발현을 증가시키기 위한 trp 오페론의 샤인-달가노 서열과 개시 코돈 사이 DNA 서열의 변형
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 플라스미드 ptrpl 1으로부터 플라스미드 pH 131/5의 제조를 나타내고,
제2도는 플라스미드 p 159/6 및 플라스미드 pH 131/5로부터 인터루킨 -2를 암호화하는 플라스미드 pH 185/11의 제조를 보여주며,
제3도는 β-인터페론을 암호화하는 플라스미드 pH 192/5를 나타낸다.

Claims (3)

  1. 5'ATGG 3'가 뒤따르는 DNA 서열(I) (암호화 본쇄 : coding strand)을 함유하는 이. 콜라이(E.coli) 벡터를 제한효소 NcoI으로 절단하고,
    a) 절단 부위에 DNA 서열(Ⅱ)의 유전자 구조를 연결시키거나, 또는
    b) 절단 부위를 효소학적으로 채우고 서열(Ⅲ)의 DNA를 서열(Ⅳ)의 DNA로 연결시키거나, 또는
    c) 절단 부위의 돌출 서열을 효소학적으로 분해하고, 서열(Ⅵ)의 DNA를 서열(Ⅶ)의 DNA로 열결시킴을 특징으로하여, 이. 콜라이의 trp 발현 시스템을 갖는 벡터를 제조하는 방법.
    5' GTATCGACC 3' (Ⅰ)
    5' CATGX… 3' (Ⅱ)
    3' Y… 5'
    5' GTA TCG ACC ATG 3' (Ⅲ)
    3' CAT AGC TGG TAC 5'
    5' X… 3' (Ⅳ)
    3' Y… 5'
    5' GTA TCG AC 3' (Ⅵ)
    3' CAT AGC TG 5'
    5' Z ATG X… 3' (Ⅶ)
    3' Z'TAC Y… 5'
    상기 서열에서, X 및 Y는 구조 유전자 개시 코돈(start codon)의 하향적으로 첫번째 상보적인 누클레오티드 쌍을 나타내고, Z 및 Z'는 어느 목적하는 누클레오티드 쌍을 나타내나 또한 없을 수도 있다.
  2. 제1항에 있어서, 샤인-달가노 서열(shine-Dalgarno sequence) AAGG에 5' 말단이 연결되고, 3' 말단의 G가 개시 코돈의 하향 구조 유전자의 첫번째 누클레오티드인 서열(암호화 본쇄) (Ia)를 서열(I)의 위치에 삽입시킨 방법.
    5' GTATCGACCATGG 3' (Ia)
  3. 이. 콜라이 세포에서 제1 또는 2항에서 정의한 벡터의 발현을 유도하여 유전적으로 암호될 수 있는 아미노산으로 이루어진 폴리펩티드를 제조하는 방법.
    .※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019860003040A 1985-04-19 1986-04-19 이.콜라이의 trp 발현 시스템을 갖는 벡터를 제조하는 방법 KR940004543B1 (ko)

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