KR820000002B1 - 비피도 박테리아를 함유하는 음식물의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
내용 없음.
Description
본 발명은 비피도 박테리아(Bifido bacteria)를 우유배지 또한 반합성배지에 접종하여 배양하고, 얻어진 배양물을 적당히 가공하여 상기한 비피도 박테리아를 함유하는 음식물을 제조하는 방법의 개량에 관한 것이다.
비피도 박테리아는 모유 영양아의 장내 세균층(Intestinal Flora)의 거의 대부분을 차지하는 세균으로서 잘 알려져 있다.
이 균의 생리학적의의에 관해서는 많은 연구보고가 있으며, 부패균에 의한 부패의 억제작용, 독성아민의 산출 저지작용, 포스포프로테인 포스파타아제(Phosphoprotein Phosphatase)의 작용에 의한 모유 카세인의 소화 작용, 유산, 초산, 개미산 등의 유당 기원유기산의 산출에 수반되는 장내 pH 의 저하에 의한 병원균의 생장 억제작용등이 명백하게 되어 있다.
그런데 이와 같이 유용한 비피도 박테리아가 인공 영양아의 장내에는 대단히 적으며 이것이 모유 영양아와 비교하여 인공영양아가 장내질환에 걸리기 쉬운 원인의 하나로 사료되고 있다.
그래서 인공영양아의 장내 세균층을 모유 영양아의 그것에 가까운 것으로 바꾸기 위해서 비피도 박테리아를 함유하는 육아용 분유등을 제조하여 투여하는 것이 시도 되었으며, 또한 유아(젖먹이) 이외의 유아(소아)나 성인에 대해서도 보건 효과가 기대되는 여러 가지의 비피도 박테리아를 이용한 발효유 제품을 제조하는 것이 시도되어 왔다.
그러나 비피도 박테리아는
(ㄱ) 본래 편성혐기성이며, 생장환경으로서 엄격한 혐기조건을 필요로 한다.
(ㄴ) 효모 엑기스나 CSL(코온 스팁리커)등의 생장 촉진물질을 함유하지 않는 순수한 우유 배지에서는 증식이 현저하게 나쁘다.
(ㄷ) 우유 배지에 생장촉진물질이나 환원제를 첨가하면 유산균의 배양조건과 동일한 호기조건에서도 증식하나, 이들 첨가물은 일반적으로 고가이며, 또 얻어지는 배양물의 풍미를 나쁘게 한다는 등의 이유에 의하여 유산균에 비하면 현저하게 배양이 곤란하기 때문에 이균을 함유하는 음식물 등의 공업적 생산은 아직 행하여지지 않고 있다.
본 발명자들은 상술한바와 같은 현상에 비추어, 비피도 박테리아의 실용적 배양방법을 확립하여 그 균을 함유하는 음식물등을 염가로 제공하기 위해서 각종 연구를 거듭하여 왔다.
그런데 그 과정에 있어서, 비피도 박테리아로서는 극히 특이한 성질을 가지고 있는 그 균의 변이균주, 비피도 박테리아 비피이덤(Bifidum) YIT－4002(미공연균기 제3371호, FARM－p3371), 비피덤 YIT－4005(미공연균기제3372호, FARM－p3372) 및 비피도 박테리아 브리이베(Breve) YIT－4006(미공연균기 수리제3906호, FARM－p3906)을 발견하고 이들을 사용하는 발효유 제품등의 제조법의 발명에 관하여 먼저 특허출원한 바 있다. (일본 특허출원 소화 51－295호 등)
상기한 변이균주는 호기적 조건하에서 순수한 우유 배지중에서도 증식이 가능하며, 또한 YIT4005는 내산성이 높고 보존중에 쉽게 사멸하지 않는 특징을 가지고 있으나, 본 발명자등은 이들의 변이균주에 대하여서 또다시 연구를 진행한 결과 다음과 같은 흥미 있는 결과를 얻었던 것이다.
즉 상기한 변이균주와 보통의 편성혐기성 비피도 박테리아를 혼합 배양할때에도 호기적 조건의 순수한 우유배지이더라도 편성혐기성 균이 잘 증식하도록 되는 것이다. (후기 실험에 참조)
본 발명은 상기한 연구결과에 따라서 완성된 것이며, 유배지 또는 반합성 배지에서 편성 혐기성 비피도 박테리아를 배양해서 얻어진 배양물을 적당히 가공하여 상기한 균을 함유하는 음식물을 제조함에 있어서 상기한 균과 아울러 비피도 박테리아 산소내성 변이균주를 배지에 접종하여 혼합배양을 행하는 것을 특징으로 하는 것이다.
본 발명의 방법에 의하면 편성 혐기성인 비피도 박테리아를 산소내성 변이균주 혹은 유산균과 동일한 호기적 조건하에서 용이하게 배양한 다음 사용된 복수의 비피도 박테리아를 함유하는 음식물을 얻을수가 있다. 그뿐 아니라 생리학적작용, 배양중의 산 산출능력(酸産出能力) 제품의 풍미에 대한 영향력등의 모든점에 있어서 각각 다른 특성을 보유하는 비피도 박테리아군 중에서 제품의 종류나 용도에 따라서 가장 적합한 것을 선택하여 결합시키는 것에 의하여 생리학적작용, 풍미등의 점에서 종합적으로 우수한 제품을 제공하는 것이 가능하므로 보통의 비피도 박테리아 또는 그 산소내성 변이균주만을 사용하는 배양법과 비교해서도 유리한 방법이다.
본 발명의 방법에 있어서 사용하는 비피도 박테리아 산소내성 변이균주라함은, 전기한 YIT－4002, YIT－4005 및 YIT－4006과 같이 호기적 조건의 순수한 유배지에서 증식 가능한 비피도 박테리아 변이균주를 총칭한 것이다.
호기적 조건하에서의 편성 혐기성균주의 증식을 촉진하는 작용은 산소내성변이균주에 공통적인 것으로 상기 3종류의 변이균주에 한정하는 것은 아니다.
편성혐기성 균주와 산소내성변이균주를 혼합배양함에 있어서 사용하는 배지조성에 제한은 없으며, 또 특별한 것도 불필요하다.
예컨데 보통 유산균 배양에 공여되는 유고형분농도(乳固型分濃度) 10－20%정도의 유(전유, 탈지유 또는 이들 분유에서의 환원유등)는 모두 사용 가능하며, 유를 함유하지 않은 반합성배지를 사용할 수도 있다. 또한 종래 비피도 박테리아의 배지에 대하여 종종 첨가되고 있었던 효모엑기스, 코온스팁리거, 펩톤등의 생장촉진 물질이나 ㄴ－아스코르빈산, ㄴ－시스테인 등의 환원제는 본 발명의 방법에 있어서는 본래 필요하지 않은 것이나, 제품의 풍미에 대한 영향이 허용되는 범위에서 혹은 제품의 성격으로부터에서 장해가 되지 않는 경우에, 상기한 첨가물을 사용하여 균의 증식을 촉진하는 것은 조금도 지장이 없는 것이다. 스타아터(Starter)는 편성혐기성 균주와 산소 내성변이균주의 각 스타아터를 1:1－3:1의 비율로서 혼합한 것을 배지에 대하여 1－3%(중량)접종한다.
배양중, 배지를 혐기상태로 할 필요는 없으며, 따라서 배양장치로서는 유산균 배양에 보통 사용되는 장치와 동일한 것을 사용할 수 있다. 배양을 37℃에서 행하면 보통 18－24시간으로서 각 균종이 모두 최고 생균수에 달한다.
또 증식에 병행하여서 유산, 초산등의 유기산을 산출한다. 또한 배양을 계속하면 균수는 감소하기 시작하나, 산의 산출은 계속되며 40－50시간으로서 포화값에 달한다.
이와 같은 배양경과를 고려하면서 배양물의 사용용도에 따라서 적당한 시기에 배양을 중지한다.
얻어진 배양물은 그대로 비피도 박테리아를 함유하는 식품으로서 식용으로 제공해도 좋고, 또 감미료, 과즙, 물, 향료 등을 적당하게 가하여 농도와 풍미를 조정하여 제공해도 좋다.
또한 배양물을 건조하여 비피도 박테리아를 함유하는 분말상 혹은 정제 모양의 식품 또는 제제로 해도 좋다.
이들의 배양물 가공수단 및 최종제품의 형태에는 그들이 비피도 박테리아를 사멸시키는 것이 아니한 하등의 제한이 없으며, 본 발명에 있어서의 음식물이라함은 기호서 음식물로부터 보건약적인 제제까지 음식되는 모든 것을 포함하는 것이다.
전기한 산소내성변이주 3종의 주요 균학적 성상에 대하여 설명한다.
비피도 박테리아 산소내성변이주의 주요 균학적성상
(1)분류학적 성상
그램양성무홀씨간균(Gram Positive Asporogenic Bacillus)으로서, 세포 내부에 메틸렌블루에 친화성을 보유하는 과립이 존재한다. 현미경으로 관찰하면 간봉상의 단간균으로서 간혹 분기한 것이 확인된다.
콜로니(Colony)는 원통상, 철상(凸狀), 레스상을 나타낸다. 12% 환원탈지유로서 배양하면, 주로 초산과 유산을 산출한다.
카탈라아제(─), 밀크응고성(┼), 제라틴액화성(─),
황화수소산출(─), 인돌(Indole)산출(─), 질산환원성(─),
탄산개스산출(─)
(2) 당 발효성
(ㄱ) YIT－4002, TIT－4005,
글루코오스, 프락토오스, 랙토오스, 갤랙토오스의 각 당이 양성, 아라비노오스, 키실로오스, 살리신, 매노오스, 매니톨, 멜레지토오스, 셀로베오오스, 소르비톨, 이눌린, 트레할로오스, 램노오스, 말토오스, 리보오스, 소르보오스의 각 당은 음성이다.
(ㄴ)YIT－4006
글루코오스, 프락토오스, 랙토오스, 갤랙토오스, 살리신, 멜레지토오스, 셀로비오오스, 말토오스, 리보오스, 매노오스의 각당이 양성, 아라비노오스, 키실로오스, 매니톨, 소르비톨, 이놀린, 트레할토오스, 램노오스, 소르보오스의 각당이 음성이다.
(3)증식할 수 있는 조건
(ㄱ)YIT－4002, TIT－4005 (ㄴ)YIT－4006
25－45℃, pH 5－7 25－42℃, pH5－9
(최적조건 36－38℃, pH6－7) (최적조건 36－38℃, pH 6－7)
이상의 성상에서
(ㄱ) YIT－4002, YIT－4005
(ㄴ) YIT－4006은 바아지이스 맨유얼(Bargey's manual)
(1974년)의 분류 기준을 참조하여
(ㄱ) 비피도 박테리아, 비피덤,
(ㄴ) 비피도 박테리아, 브리이베 인것으로 인정되나 전술한 바와 같은 공지의 비피도 박테리아의 변이균주에는 없는 특성도 보유하고 있는 것이므로 비피도 박테리아의 변이균주인 것으로 판단된다.
이하 실험예 및 실시예에 따라서 본 발명을 설명한다.
또한 산도는 배양액 10ml를 중화함에 소요되는 0.1N 카세이소오다 용액의 ml수이다.
[실험예]
16% 환원탈지유 150ml를 300ml 용량의 삼각 플라스크에 주입하고, 솜마개를 한후 120℃로서 15분간 멸균한다.
다음에 배지를 유수중에서 37℃까지 교반 냉각한 후 제 1 표에 표시한 비피도 박테리아의 각 스타아터를 2%(중량) 접종하여 37℃에서 정치하여 배양하고 그 사이에 시간 경과에 따른 생균수와 산도의 변화를 측정 하였다.
그 결과를 제 1 표에 표시한다.
(본 발명에서 말하는 호기적 조건이라 함은, 상기한 바와 같은 배양 조건을 지칭한다. 이 배양 조건은 발효유, 치이즈, 유산균 음료의 제조에 사용되는 소위 낙농 유산균의 기본적인 배양 조건과 동일하다) 비피도 박테리아의 산소내성변이균주인 YIT－4002, YIT－4005 및 YIT－4006은 어느 것이나 호기적 조건의 우유 배지중에서 왕성한 증식을 나타내며, 배양 17시간에서 2.3－5.0×109/ml의 생균수를 나타내었다.
이것에 대하여 다른 비피도 박테리아(어느 것이나 편성혐기성인 표준균주)는 생균수의 증가가 거의 없으며, 균종에 따라서는 산도의 증가도 현저하게 완만하며, 접종 후 급속하게 사멸되는 것도 있다.
다음에 상기한 바와 같은 방법으로서 조제한 배지에 제 2 표에 표시한 비피도 박테리아의 각종균과 상기한 변이균주의 어느 것인가를 같은 량씩 혼합한 스타아터를 2%(중량)접종하여 37℃에서 정치 배양을 행하고 그 동안의 시간 경과에 따른 생균수와 산도를 측정하였다.
결과를 제 2 표에 표시한다.
비피도 박테리아의 상기한 변이균주를 혼합 배양하면 호기적 조건의 순수한 유배지에 있어서도 비피도 박테리아는 균종에 따라서 다소의 차는 있기는 하나, 생균수 및 산도는 상기한 변이균주와 동일한 정도로 증가한다.
[제 1 표]
B. 아돌리스(B.Adoles) 3.4 3.4×1074.4 1.8×1074.6 1.2×1075.1 6.4×106
B. 인판티스(B.Infantis) 3.5 6.0×1074.5 4.6×1064.8 1.2×1065.3 6.4×105
B. 비피덤(B.Bifidum) 3.4 4.0×1075.9 6.0×1076.6 3.9×1077.5 2.4×107
[제 2 표]
[실시예 1]
16% 전지유 배지에 비피도 박테리아 론검(I), 동(同) 비피덤 YIT－4002(Ⅱ)의 각 스타아터를 1%접종하고, 27℃에서 30시간, 호기적조건에서 배양하였다.
얻어진 배양물 중의 생균수는 총균수 2.5×109/ml(Ⅰ)이 6.5×108/ml, (Ⅱ)가 2.0×109/ml)이며, 산도는 24.5이었다.
이 배양물을균질기(均質機)로서 균질화하고, 그 110부에 대하여
서크로오스 3부
소르비톨(Sorbitol) 3부
당근즙 3부 및 물 80부를 혼합하여서 상기한 2종의 균을 함유하는 발효유를 얻었다.
[실시예 2]
10% 탈지유 배지에 비피도 박테리아 비피덤(Ⅲ), 비피도 박테리아 브리이베 YIT－4006(Ⅳ)의 각 스타아터를 각 1% 접종하고, 37℃에서 20시간 호기적 조건에서 배양하였다. 얻어진 배양물 중의 생균수는, 총균수 2.5×109/ml((Ⅲ)이 1.4×109/ml, (Ⅳ)이 1.9×109/ml)이었다.
이 배양물을 그대로 동결시키고, 2mmHg 이하의 감압하에서 약 6시간 건조하는 것에 의하여 상기 2종류의 균을 함유하는 유발효물 건조 분말을 얻었다.
[실시예 3]
하기와 같이 조성된 반합성 배지에 비피도 박테리아 론검(Ⅴ), 비피도 박테리아 비피덤 YIT－4005(Ⅵ) 및 락토바칠루스애시도 필러(Ⅶ)의 각 스타아터를 각 1.0% 접종하고, 37℃에서 20시간, 호기적 조건으로서 배양하였다.
얻어진 배양물 중의 생균수는 총균수 3.6×109/ml(Ⅳ)가 4.0×109/ml, (Ⅵ)이 1.0×109/ml, (Ⅶ)이 1.7×109/ml)이었다.
이 배양물을 냉동원심 분리기에 도입하여, 배양물에서 균체를 분리 접근하고 이 균체를
탈지분유 10%, 글루타민산 소오다 1.0%, 비타민 C 1%를 함유하는 분산매질 30ml에 균일하게 현탁시켜서 동결 건조하고, 상기한 3종류의 균을 함유하는 건조물을 얻었다.
다음에 얻어진 건조물을 20배량의 건조 전분과 혼합하여 정제제조기를 사용정제로 만들었다.
[배지조성]
CSL 처리물*70
글루코오스 20
KH2PO41
K2HPO42
물 927
(pH7.0)
*; CSL에 구연산 10%를 용해한후 가성소오다로서 pH 8.0로 하고 이어서 1만 rpm으로서 10분간 원심분리하여 침전물을 제거한 것.
Claims (1)
- 우유 또는 반합성 배지에서 편성 혐기성 비피도 박테리아를 배양하여서 얻어진 배양물을 적당하게 가공하여, 상기한 균을 함유하는 음식물을 제조함에 있어서, 상기한 균과 함께 비피도 박테리아의 산소내성변이균주를 배지에 접종하여 호기적조건에서 혼합 배양을 행하는 것을 특징으로하는 비피도 박테리아를 함유하는 음식물의 제조방법.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR7702592A KR820000002B1 (ko) | 1977-11-07 | 1977-11-07 | 비피도 박테리아를 함유하는 음식물의 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
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|---|---|---|---|
| KR7702592A KR820000002B1 (ko) | 1977-11-07 | 1977-11-07 | 비피도 박테리아를 함유하는 음식물의 제조방법 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR820000002B1 true KR820000002B1 (ko) | 1982-01-25 |
Family
ID=19205189
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR7702592A KR820000002B1 (ko) | 1977-11-07 | 1977-11-07 | 비피도 박테리아를 함유하는 음식물의 제조방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR820000002B1 (ko) |
-
1977
- 1977-11-07 KR KR7702592A patent/KR820000002B1/ko active
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