KR20240019074A - 분변 검체의 검사 방법 및 그것을 위한 이뮤노크로마토그래피 시험편 - Google Patents
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Abstract
분변 검체에 포함되는 이뮤노크로마토그래피법에 있어서의 방해 물질에 의한 영향을 억제하고, 피검시료 중의 피검출 물질을, 정확하게, 특이적으로 측정하는 것을 가능하게 하는, 분변 검체의 검사 방법 및 그것을 위한 이뮤노크로마토그래피 시험편이 개시되어 있다. 분변 검체의 검사 방법은, 분변 검체를, 타우로데옥시콜산 또는 그 염의 존재하에서 이뮤노크로마토그래피법에 의해 검사하는 것을 포함한다. 분변 검체의 검사용 이뮤노크로마토그래피 시험편은, 검체 적가 부위에 타우로데옥시콜산 또는 그 염을 포함한다.
Description
본 발명은, 분변 검체의 검사 방법 및 그것을 위한 이뮤노크로마토그래피 시험편에 관한 것이다.
최근, 바이러스나 세균 등의 병원체 감염의 유무, 임신의 유무 등의 여러 가지 검사를 단시간 동안에 실시하는 간이 검사 시약이나 키트가 개발되고 있다. 병원체 구성 성분, 인간 융모성 고나도트로핀 등이 검출 혹은 정량의 대상이다. 간이 검사 시약의 대부분은, 특별한 설비를 필요로 하지 않고 조작도 간단하고 저렴하다는 특징을 갖고 있고, 예를 들어, 임신 진단을 위한 간이 검사 시약은 일반 약국에서 판매되고 있다. 또, 병원체의 감염을 검사하는 간이 검사 시약은, 다른 검사 시약과 달리, 큰 병원이나 의료 검사 센터 이외에도 일반 병원이나 진료소에서 널리 사용되고 있다. 이들 시설은 환자가 최초로 방문하는 의료 기관인 경우가 많아, 환자로부터 채취한 검체에 대해 그 자리에서 감염의 유무가 판명되면, 빠른 단계에서 치료 조치를 실시할 수 있기 때문에, 간이 검사 시약의 의료에 있어서의 중요성은 더욱 더 높아지고 있다.
현재, 간이 검사 방법으로서, 항원 항체 반응을 이용한 면역 측정법, 특히 이뮤노크로마토그래피법이 일반적으로 알려져 있다. 이뮤노크로마토그래피법은 피검출물에 특이적으로 결합하는 포착체 (포착 물질), 및 피검출물에 특이적으로 결합하는 표지체의 복합체를 멤브레인 상에 형성시키고, 표지를 검출/정량함으로써, 피검출물의 검출 (측정 혹은 정량) 을 실시한다. 이뮤노크로마토그래피법은 측정 장치가 간단하고, 또 비용의 점에서도 우수하기 때문에, 다종다양한 피검출물의 검출에 널리 사용되고 있다.
이뮤노크로마토그래피법의 하나의 형태에 있어서는, 니트로셀룰로오스 등의 멤브레인 스트립 상에 피검출물에 특이적으로 결합하는 항체를 포착 물질로서 고상화한 검출부, 및 피검출물에 특이적으로 결합하는 표지체를 포함하는 표지체부를 구비한 검사 디바이스에, 피검출물을 포함하는 검체 시료를 적가 (滴加) 하여, 피검출물-표지체의 복합체를 형성시키면서 전개하고 검출부에서 이 복합체를 포착함으로써 표지를 검출 혹은 정량한다 (예를 들어, 특허문헌 1 및 특허문헌 2).
본 발명의 목적은, 분변 검체에 포함되는 이뮤노크로마토그래피법에 있어서의 방해 물질에 의한 영향을 억제하고, 피검시료 중의 피검출 물질을, 정확하게, 특이적으로 측정하는 것을 가능하게 하는, 분변 검체의 검사 방법 및 그것을 위한 이뮤노크로마토그래피 시험편을 제공하는 것이다.
본원 발명자들은, 예의 연구의 결과, 타우로데옥시콜산의 존재하에서 이뮤노크로마토그래피법을 실시함으로써, 방해 물질에 의한 영향을 억제하고, 분변 검체 중의 피검출 물질을, 분변 검체의 시험에 제공되는 양에 관계없이, 정확하게, 특이적으로 측정하는 것이 가능한 것을 알아내어, 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명은, 이하의 것을 제공한다.
(1) 분변 검체를, 타우로데옥시콜산 또는 그 염의 존재하에서 이뮤노크로마토그래피법에 의해 검사하는 것을 포함하는, 분변 검체의 검사 방법.
(2) 타우로데옥시콜산 또는 그 염이, 분변 검체의 부유액 또는 추출액 중에 포함되는, (1) 에 기재된 방법.
(3) 이뮤노크로마토그래피법에 사용되는 이뮤노크로마토그래피 시험편의, 검체 적가 부위에 타우로데옥시콜산 또는 그 염이 포함되는, (1) 에 기재된 방법.
(4) 이뮤노크로마토그래피법에 사용되는 이뮤노크로마토그래피 시험편이, 항노로 바이러스 항체를 갖고, 분변 검체 중의 노로 바이러스를 검출하는, (1) ∼ (3) 중 어느 한 항에 기재된 방법.
(5) 검체 적가 부위에 타우로데옥시콜산 또는 그 염을 포함하는, 분변 검체의 검사용 이뮤노크로마토그래피 시험편.
본 발명의 방법에 의하면, 분변 검체 중의 방해 물질에 의한 영향을 억제하고, 분변 검체 중의 피검출 물질을, 분변 검체의 시험에 제공되는 양에 관계없이, 정확하게, 특이적으로 측정하는 것이 가능하다.
도 1 은, 전형적인 이뮤노크로마토그래피 시험편의 바람직한 일 형태를 나타내는 도면이다.
본 발명은, 분변 검체에서 발생하는 위음성을 방지하고, 피검출 물질을 정확하게 측정하는 것을 가능하게 하는 검사 방법 및 그것을 위한 이뮤노크로마토그래피 시험편에 관한 것이다. 여기서, 위음성이란, 검체 중에 피검출 물질이 포함되어 있음에도 불구하고, 어세이에 있어서 양성을 나타내는 시그널이 발생하지 않는 것을 말한다. 예를 들어, 이뮤노크로마토그래피법에 있어서는, 검체 중에 피검출 물질이 존재하는 경우, 고정화한 물질-피검출 물질-표지 시약의 복합체가 고상 지지체 상에 형성되고, 그 복합체로부터 발하는 표지 시약의 시그널이 발생하지만, 위음성에 있어서는, 상기의 복합체가 형성되지 않는 등의 이유에 의해 시그널의 발생이 저해되어 버린다.
이뮤노크로마토그래피 시험편은, 측정 대상물 (항원 등) 을 포착하는 항체 (항체 1) 가 고정화된 검출 영역을 갖는 지지체, 이동 가능한 표지 항체 (항체 2) 를 갖는 표지체 영역, 검체를 적가하는 샘플 패드, 전개된 검체액을 흡수하는 흡수대, 이들 부재를 하나로 첩합하기 위한 배킹 시트를 구비한다.
또한, 검출 영역의 수 및 표지체 영역에 포함되는 표지 항체의 종류는 1 개에 한정되는 것은 아니고, 복수의 측정 대상물에 대응하는 항체를 사용함으로써, 2 개 이상의 항원을 동일한 시험편으로 측정할 수 있다.
도 1 은, 전형적인 이뮤노크로마토그래피 시험편의 바람직한 1 형태를 나타낸 도면이다. 또한, 이뮤노크로마토그래피 시험편은, 도 1 에 나타내는 것에 한정되는 것은 아니다. 도 1 중, 가가 지지체, 나가 표지체 영역, 다가 검출 영역, 라가 샘플 패드, 마가 흡수대, 바가 배킹 시트를 가리키고 있다.
도 1 상측이 상면도, 하측이 절단 단면도이다. 도면의 예에서는, 배킹 시트 상에 2 개의 검출 영역이 형성된 지지체, 흡수대, 표지체 영역, 샘플 패드들이 각각 적층되어 있다. 그리고 도시와 같이, 흡수대의 일방의 단부와 지지체의 일방의 단부, 지지체의 타방의 단부와 표지체 영역의 일방의 단부, 표지체 영역의 타방의 단부와 샘플 패드의 일방의 단부가 각각 중첩되어 있고, 이로써 연속적인 래터럴 플로의 유로가 형성되어 있다.
지지체는, 피검물질 (항원) 을 포착하기 위한 항체를 고정화하는 성능을 가지는 재료이고, 또한 액체가 수평 방향으로 통행하는 것을 방해하지 않는 성능을 가진다. 바람직하게는, 모세관 작용을 갖는 다공성 박막이고, 액체 및 그것에 분산된 성분을 흡수에 의해 수송 가능한 재료이다. 지지체를 이루는 재질은 특별히 한정되는 것은 아니고, 예를 들어, 셀룰로오스, 니트로셀룰로오스, 셀룰로오스아세테이트, 폴리비닐리덴디플루오라이드 (PVDF), 유리 섬유, 나일론, 폴리케톤 등을 들 수 있다. 이 중 니트로셀룰로오스를 사용하여 박막으로 한 것이 보다 바람직하다.
표지체 영역은, 표지 항체를 포함하는 다공성 기재로 이루어지고, 기재의 재질은 일반적으로 사용되고 있는 유리 섬유나 부직포 등을 사용할 수 있다. 그 기재는, 다량의 표지 항체를 함침시키기 위해서, 두께 0.3 ㎜ ∼ 0.6 ㎜ 정도의 패드상인 것이 바람직하다.
검출 영역은, 피검물질 (항원) 을 포착하는 항체가 고정화된 지지체의 일부의 영역을 가리킨다. 검출 영역은, 항원을 포착하기 위한 항체를 고정화한 영역을 적어도 1 개 형성한다.
샘플 패드는, 검체 또는 검체를 사용하여 조제된 시료를 적가하는 부위이고, 흡수성을 가지는 다공성 재료이다. 그 재료에는 일반적으로 사용되는 셀룰로오스, 유리 섬유, 부직포 등을 사용할 수 있다. 다량의 검체를 면역 측정에 사용하기 위해, 두께 0.3 ㎜ ∼ 1 ㎜ 정도의 패드상인 것이 바람직하다. 또한, 샘플 패드와 전술한 표지체 영역은 어디까지나 기능적인 구별로서, 반드시 개별의 재료일 필요는 없다. 즉, 샘플 패드로서 설치한 재료의 일부 영역이 표지체 영역의 기능을 갖는 것도 가능하다.
흡수대는, 지지체에 공급되어 검출 영역에서 반응에 관여하지 않았던 성분을 흡수하기 위한 부재이다. 그 재료에는, 일반적인 천연 고분자 화합물, 합성 고분자 화합물 등으로 이루어지는 보수성이 높은 여과지, 스펀지 등을 사용할 수 있는데, 검체의 전개 촉진을 위해서는 흡수성이 높은 것이 바람직하다.
배킹 시트는, 전술한 모든 재료, 즉 지지체, 샘플 패드, 표지체 영역, 흡수대 등이, 부분적인 중첩을 갖고 첩부·고정되기 위한 부재이다. 배킹 시트는, 이들 재료들이 최적인 간격으로 배치·고정되는 것이라면, 반드시 필요하지 않지만, 제조상 혹은 사용상의 편리성으로부터, 일반적으로는 사용하는 편이 바람직하다.
도 1 에서 설명한 형태의 시험편에 있어서, 검체는, 샘플 패드, 표지체 영역, 지지체, 검출 영역, 흡수대 등의 일련의 접속에 의해 형성된 다공성 유로를 통과한다. 따라서 본 형태에 있어서는, 이들 모두가 검체 이동 영역이 된다. 각 구성 재료의 재질이나 형태에 의해, 검체가 재료 내부를 침투하지 않고 계면을 통행하는 형태도 있을 수 있지만, 본 명세서에서 정의하는 검체 이동 영역은 재료의 내부인지 계면인지를 묻지 않기 때문에, 그 형태의 시험편도 본 명세서의 범위에 포함된다.
본 발명은 검체 부유액 혹은 검체 추출액, 또는 이뮤노크로마토그래피 시험편 상에 타우로데옥시콜산 또는 그 염을 포함시킨다. 타우로데옥시콜산의 염으로는, 나트륨염 및 칼륨염이 바람직하다. 또한, 이하의 설명에 있어서, 문맥으로부터 명확하게 그렇지 않은 경우를 제외하고,「타우로데옥시콜산 또는 그 염」을 간단히「타우로데옥시콜산」또는「TDOC」라고 부르는 경우가 있다.
검체 부유용 완충액 또는 추출용 완충액 중의 타우로데옥시콜산의 농도는, 통상적으로 0.005 질량％ ∼ 10 질량％, 바람직하게는, 0.05 질량％ ∼ 5 질량％ 이다.
이뮤노크로마토그래피 시험편 상에 타우로데옥시콜산을 실시하는 방법으로는, 타우로데옥시콜산의 용액, 바람직하게는, 물 또는 수계 완충액을 용매로 하는 수용액을, 함침이나 적가 등에 의해 첨가하는 방법이 바람직하다. 또, 이뮤노크로마토그래피 시험편 상으로의 타우로데옥시콜산의 첨가량은, 통상적으로 0.01 mg ∼ 10 mg 정도, 바람직하게는, 0.05 mg ∼ 5 mg 정도이다.
분변 검체는, 완충액으로 희석한 것이나 희석하지 않고 그대로 사용할 수 있다. 피검출물도 전혀 한정되지 않고, 검출하고자 하는 어떠한 물질이어도 된다. 구체예로서, 인플루엔자 바이러스, 아데노 바이러스, RS 바이러스, HAV, HBs, HIV, 노로 바이러스 등의 바이러스 항원, MRSA, A 군 용련균, B 군 용련균, 레지오넬라속균 등의 세균 항원, 세균 등이 산생하는 독소, 마이코 플라즈마, 클라미디아·트라코마티스, 인간 융모성 고나도트로핀 등의 호르몬, C 반응성 단백질, 미오글로빈, 심근 트로포닌, 각종 종양 마커, 농약, 환경 호르몬 등의 항원을 들 수 있고, 또한 상기 세균, 바이러스 등에 대한 항체를 들 수 있다.
본 발명은, 상기와 같이 하여 형성되는 이뮤노크로마토그래피 시험편도 제공한다. 검체 부유용/추출용 완충액에 상기의 계면 활성제를 실시하는 점을 제외하고, 검사 디바이스의 구성 자체는, 공지된 것이어도 된다. 본 발명의 이뮤노크로마토그래피 시험편의 구체예의 모식도를 도 1 에 나타내는데, 본 발명의 시험편은 이것에 한정되는 것은 아니다.
다음으로 이 이뮤노크로마토그래피 시험편을 사용한 면역 측정법의 바람직한 예에 대해 설명한다. 먼저, 분변 검체를 검체 부유용 또는 추출용 완충액에 부유 또는 추출시킨 검체 시료를 조제한다. 플라스틱판 (바) 상에 적층된 니트로셀룰로오스 멤브레인 (가) 상에, 피검출물과 항원 항체 반응하는 항체를 착색 라텍스 입자로 표지한, 상기 방법에 의해 형성되는 안정화 건조 표지체 패드를 포함하는 표지체부 (나) 를 구비하고, 추가로 피검출물과 항원 항체 반응하는 항체를 포착 물질로서 라인상으로 고상화된 검출부 (다) 를 구비한 검사 디바이스의 시료 첨가부 (라) 에 상기 검체 시료를 적가한다. 피검출물을 포함하는 검체 시료는, 멤브레인 상를 수평 방향으로 이동하면서 표지체를 전개하므로, 피검출물이 존재하면, 피검출물-표지체의 복합체를 형성하고, 또한 검출부 (다) 에 도달하면 그 라인 상에, 포착 항체-피검출물-표지체의 복합체가 형성되고, 이 복합체 중의 착색 라텍스 입자에 의해, 복합체의 존재를 검출함으로써 검체 중의 피검출물의 유무를 판정한다. 또한, 검출부 (다) 는, 피검출 물질과 항원 항체 반응하고, 또한, 착색 라텍스 입자 상의 항체 또는 그 항원 결합성 단편과 동시에 피검출물에 결합하는 것이 가능한, 항체 또는 그 항원 결합성 단편을 라인상으로 고상화한 영역이다. 반응에 관여하지 않은 다른 성분 등은, 흡수 패드부 (마) 에 흡수된다. 또한, 도 1 에 나타내는 예에서는, 검출부 (다) 가 2 개 존재하지만, 이것은, 예를 들어, A 형 인플루엔자 바이러스와 B 형 인플루엔자 바이러스와 같은 2 종류의 피검출물을 각각 포착하기 위한 것이다. 이와 같은 검출부 (다) 를 복수 형성함으로써, 복수 종류의 피검출물을 동시에 면역 측정하는 것이 가능하다.
피검출물과 항원 항체 반응하는 항체 또는 그 항원 결합성 단편을 결합시킨 라텍스 입자를 안정화 건조 표지체로서 사용하는 본 발명의 이뮤노크로마토그래피 시험편을 사용함으로써, 신속 또한 간편하게 피검출물을 측정할 수 있다.
실시예
이하, 본 발명을 실시예 및 비교예에 기초하여 보다 구체적으로 설명한다. 단, 본 발명은 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 하기 실시예 및 비교예에 있어서, ％ 는 질량 기준이다.
실시예 1 TDOC 검체 부유액에 첨가
1. 항노로 바이러스 항체의 니트로셀룰로오스 멤브레인으로의 고정화
항노로 바이러스 항체를 1.0 mg/mL 가 되도록 정제수로 희석한 액 및 항마우스 IgG 항체를 준비하고, PET 필름으로 배접된 니트로셀룰로오스 멤브레인의 샘플 패드측에 항노로 바이러스 항체, 흡수체측에 항마우스 IgG 항체를 각각 선상으로 도포하였다. 그 후, 니트로셀룰로오스 멤브레인을 45 ℃, 30 분간 건조시켜, 항노로 바이러스 항체 고정화 멤브레인을 얻었다. 이 멤브레인을 본 실시예에 있어서「항체 고정화 멤브레인」이라고 부른다.
2. 항노로 바이러스 항체의 착색 폴리스티렌 입자로의 고정화
항노로 바이러스 항체를 0.5 mg/mL 가 되도록 정제수로 희석하고, 이것에 착색 폴리스티렌 입자를 0.1 ％ 가 되도록 첨가하고, 교반 후, 카르보디이미드를 1 ％ 가 되도록 첨가하고, 추가로 교반한다. 원심 조작에 의해 상청을 제외하고, 50 mM Tris (pH9.0), 3.0 ％ BSA 에 재부유하여, 항노로 바이러스 항체 결합 착색 폴리스티렌 입자를 얻었다. 이 입자를, 본 실시예에 있어서「항체 고정화 입자」라고 부른다.
3. 항노로 바이러스 항체 결합 착색 폴리스티렌 입자의 도포·건조
2 에서 제작한 항체 고정화 입자를 글라스 파이버 부직포의 소정량 1.0 ㎍ 을 도포하고, 45 ℃, 30 분간 건조시켰다. 얻어진 부직포를, 본 실시예에 있어서「건조 패드」라고 부른다.
4. 노로 바이러스 시험편의 제작
1 에서 제작한 항체 고정화 멤브레인, 3 에서 제작한 건조 패드를 타부재 (샘플 패드, 배킹 시트, 흡수대) 와 첩합하여 5 ㎜ 폭으로 절단하고, 노로 바이러스 시험편으로 하였다. 또한, 시험편은, 검체의 흐름을 따라, 상류로부터, 샘플 패드, 건조 패드 (표지체 영역), 항체 고정화 멤브레인 (검출 영역), 흡수대를 구비하는 것이다.
5. 검체 부유액
검체 부유액 (퀵나비-검체 부유액 (분변용) ; 덴카사 제조) 에 TDOC (실시예 및 비교예에서는 타우로데옥시콜산나트륨) 를 0.33 ％ 가 되도록 첨가하여 개량 검체 부유액 (실시예 1) 을 조제하였다. 비교로서 아무것도 첨가하지 않은 종래 검체 부유액을 조제하였다 (비교예 1).
6. 분변 검체 처리
면봉의 면구를 가볍게 덮는 정도로 노로 바이러스 양성의 분변 검체를 채취하고, 이것을 검체 부유액 (퀵나비-검체 부유액 (분변용) ; 덴카사 제조) 에 부유하였다 (분변 검체 처리 검체). 또, 면봉의 면구를 가볍게 덮는 정도로 변 검체를 채취하고, 이것을 개량 검체 부유액에 부유하였다 (개량 분변 검체 처리 검체).
7. 측정
노로 바이러스 양성의 분변 검체 처리 검체와 개량 분변 검체 처리 검체를, 각각 검체 부유액과 개량 검체 부유액으로 희석하고, 그 중 50 ㎕ 를 시험편에 적가하였다. 15 분후에 항노로 바이러스 항체를 고정화한 소정 위치 상의 착색 폴리스티렌 입자의 퇴적 유무와 그 정도를 육안 판정에 의해 실시하였다. 그 선상의 퇴적을 확인할 수 있는 것을 ＋ 로 하고, 퇴적이 보이지 않았던 것을 ― 로 하였다.
표 1 로부터 노로 바이러스 양성의 분변 검체를 10 배로 희석함으로써 항노로 바이러스 항체를 고정화한 소정 위치 상에서 착색 폴리스티렌 입자의 퇴적이 보이지 않았던 비교예 1 과 비교하여, 본 발명의 실시예 1 에서는, 입자의 퇴적을 용이하게 확인할 수 있었다.
실시예 2, 3, 비교예 2 분변 검체에 의한 시험
1. 항노로 바이러스 항체의 니트로셀룰로오스 멤브레인으로의 고정화
항노로 바이러스 항체를 1.0 mg/mL 가 되도록 정제수로 희석한 액 및 항마우스 IgG 항체를 준비하고, PET 필름으로 배접된 니트로셀룰로오스 멤브레인의 샘플 패드측에 항노로 바이러스 항체, 흡수체측에 항마우스 IgG 항체를 각각 선상으로 도포하였다. 그 후, 니트로셀룰로오스 멤브레인을 45 ℃, 30 분간 건조시켜, 항노로 바이러스 항체 고정화 멤브레인을 얻었다. 이 멤브레인을 본 실시예에 있어서「항체 고정화 멤브레인」이라고 부른다.
2. 항노로 바이러스 항체의 착색 폴리스티렌 입자로의 고정화
항노로 바이러스 항체를 0.5 mg/mL 가 되도록 정제수로 희석하고, 이것에 착색 폴리스티렌 입자를 0.1 ％ 가 되도록 첨가하고, 교반 후, 카르보디이미드를 1 ％ 가 되도록 첨가하고, 추가로 교반한다. 원심 조작에 의해 상청을 제외하고, 50 mM Tris (pH9.0), 3.0 ％ BSA 에 재부유하여, 항노로 바이러스 항체 결합 착색 폴리스티렌 입자를 얻었다. 이 입자를, 본 실시예에 있어서「항체 고정화 입자」라고 부른다.
3. 항노로 바이러스 항체 결합 착색 폴리스티렌 입자의 도포·건조
2 에서 제작한 항체 고정화 입자를 글라스 파이버 부직포의 소정량 1.0 ㎍ 을 도포하고, 45 ℃, 30 분간 건조시켰다. 얻어진 부직포를, 본 실시예에 있어서「건조 패드」라고 부른다.
4. 함침 부직포의 제작
TDOC 를 소정량이 되도록 부직포에 도포, 건조시켜, 함침 부직포를 얻었다 (1 시험편당, 0.25 mg ∼ 0.5 mg TDOC) (실시예 2, 3).
5. 노로 바이러스 시험편의 제작
1 에서 제작한 항체 고정화 멤브레인, 3 에서 제작한 건조 패드, 4 에서 제작한 함침 부직포를 타부재 (배킹 시트, 흡수대) 와 첩합하여 5 ㎜ 폭으로 절단하고, 노로 바이러스 시험편으로 하였다. 함침 부직포를 샘플 패드로서 사용한 시험편을 본 실시예에 있어서「개량 시험편」이라고 부른다. 또한, 시험편은, 검체의 흐름을 따라, 상류로부터, 샘플 패드, 건조 패드 (표지체 영역), 항체 고정화 멤브레인 (검출 영역), 흡수대를 구비하는 것이다.
6. 분변 검체 처리
노로 바이러스 양성의 분변 검체를 3 검체 준비하였다. ((i) ∼ (iii)) 면봉의 면구를 가볍게 덮는 정도로 노로 바이러스 양성의 분변 검체를 채취하고, 이것을 검체 부유액 (퀵나비-검체 부유액 ; 덴카 생연사 제조) 에 부유하였다 (분변 검체 처리 검체).
7. 측정
노로 바이러스 양성의 분변 검체 처리 검체를 종래 시험편 (비교예 2) 과 개량 시험편 (실시예 2, 3) 에 각각 50 ㎕ 적가하였다. 15 분후에 항노로 바이러스 항체를 고정화한 소정 위치 상의 착색 폴리스티렌 입자의 퇴적 유무와 그 정도를 육안 판정에 의해 실시하였다. 그 선상의 퇴적의 정도가 강한 것을 ＋ 로 하고, 퇴적이 약간 보이는 것을 ± 로 하고, 퇴적이 보이지 않았던 것을 ― 로 하였다. 결과를 하기 표 2 에 나타낸다.
표 2 로부터 비교예 2 가 되는 종래 시험편에서는 착색 폴리스티렌 입자의 퇴적이 적었지만, TDOC 를 함침시킨 함침 부직포를 사용한 본 발명의 실시예가 되는 개량 시험편에서는, 입자의 퇴적을 용이하게 확인할 수 있었다.
이상의 결과로부터, TDOC 에 의해 분변 검체 중의 방해 물질에 의한 영향을 억제하고, 분변 검체 중의 피검출 물질을, 분변 검체의 시험에 제공되는 양에 관계없이, 정확하게, 특이적으로 측정하는 것이 가능하였다.
가 : 지지체
나 : 표지체 영역
다 : 검출 영역
라: 샘플 패드
마 : 흡수대
바 : 배킹 시트
나 : 표지체 영역
다 : 검출 영역
라: 샘플 패드
마 : 흡수대
바 : 배킹 시트
Claims (5)
- 분변 검체를, 타우로데옥시콜산 또는 그 염의 존재하에서 이뮤노크로마토그래피법에 의해 검사하는 것을 포함하는, 분변 검체의 검사 방법.
- 제 1 항에 있어서,
타우로데옥시콜산 또는 그 염이, 분변 검체의 부유액 또는 추출액 중에 포함되는, 방법. - 제 1 항에 있어서,
이뮤노크로마토그래피법에 사용되는 이뮤노크로마토그래피 시험편의, 검체 적가 부위에 타우로데옥시콜산 또는 그 염이 포함되는, 방법. - 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
이뮤노크로마토그래피법에 사용되는 이뮤노크로마토그래피 시험편이, 항노로 바이러스 항체를 갖고, 분변 검체 중의 노로 바이러스를 검출하는, 방법. - 검체 적가 부위에 타우로데옥시콜산 또는 그 염을 포함하는, 분변 검체의 검사용 이뮤노크로마토그래피 시험편.
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