JP2023078370A - 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 - Google Patents
疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2023078370A JP2023078370A JP2023045690A JP2023045690A JP2023078370A JP 2023078370 A JP2023078370 A JP 2023078370A JP 2023045690 A JP2023045690 A JP 2023045690A JP 2023045690 A JP2023045690 A JP 2023045690A JP 2023078370 A JP2023078370 A JP 2023078370A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- region
- immunochromatographic test
- reagent
- nitrite
- test strip
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims abstract description 131
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 title claims abstract description 107
- 239000007787 solid Substances 0.000 title claims abstract description 102
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 82
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 82
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 82
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 title claims abstract description 70
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000011161 development Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 title abstract description 30
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 title abstract description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 107
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims abstract description 79
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 27
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 15
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 19
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 claims description 14
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 claims description 13
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 10
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 claims description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- -1 polyoxyethylene octylphenyl ether Polymers 0.000 claims description 9
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 claims description 6
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 claims description 6
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 claims description 5
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 claims description 5
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 claims description 5
- 241000606701 Rickettsia Species 0.000 claims description 5
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 claims description 5
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 claims description 5
- 229920002114 octoxynol-9 Polymers 0.000 claims description 5
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 claims description 5
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 claims description 5
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 4
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 abstract description 3
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000011973 solid acid Substances 0.000 abstract 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 93
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 20
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 18
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 15
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 14
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 11
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 9
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 9
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 5
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 5
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 5
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 4
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 3
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 3
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 3
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 3
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 3
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=CC=C1OCCO IDOQDZANRZQBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000297 Rayon Polymers 0.000 description 2
- 229920004929 Triton X-114 Polymers 0.000 description 2
- AZFNGPAYDKGCRB-XCPIVNJJSA-M [(1s,2s)-2-amino-1,2-diphenylethyl]-(4-methylphenyl)sulfonylazanide;chlororuthenium(1+);1-methyl-4-propan-2-ylbenzene Chemical compound [Ru+]Cl.CC(C)C1=CC=C(C)C=C1.C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)[N-][C@@H](C=1C=CC=CC=1)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 AZFNGPAYDKGCRB-XCPIVNJJSA-M 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 2
- 210000000746 body region Anatomy 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 2
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000004304 potassium nitrite Substances 0.000 description 2
- 235000010289 potassium nitrite Nutrition 0.000 description 2
- 239000002964 rayon Substances 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 2
- NLMKTBGFQGKQEV-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-hexadecoxyethoxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethanol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO NLMKTBGFQGKQEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEQAICDLOKRSRL-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-dodecoxyethoxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethanol Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO IEQAICDLOKRSRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 229920002799 BoPET Polymers 0.000 description 1
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 239000006173 Good's buffer Substances 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000589248 Legionella Species 0.000 description 1
- 208000007764 Legionnaires' Disease Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241001505901 Streptococcus sp. 'group A' Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 150000003868 ammonium compounds Chemical class 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical class C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- GVGUFUZHNYFZLC-UHFFFAOYSA-N dodecyl benzenesulfonate;sodium Chemical compound [Na].CCCCCCCCCCCCOS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 GVGUFUZHNYFZLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N nitrous oxide Inorganic materials [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920001470 polyketone Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 229940080264 sodium dodecylbenzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical group 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Chemical class 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
- G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
- G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
- G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56911—Bacteria
- G01N33/56944—Streptococcus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Abstract
【課題】本発明は、イムノクロマト試験片上での検体の展開を制御し、酸性試薬と亜硝酸塩と中和試薬による処理を適切に制御するためのイムノクロマト試験片及び該試験片を用いたイムノクロマト方法を提供することを目的とする。【解決手段】亜硝酸塩又は酸性溶液と混合した検体を添加するサンプルパッド、糖鎖抗原に対する抗体を標識した標識抗体を含む標識体領域及び前記糖鎖抗原に対する抗体を固相化した検出領域を含み、検出領域において抗体-糖鎖抗原-標識抗体の複合体を形成させ、糖鎖抗原を測定するイムノクロマト試験片であって、前記標識体領域の上流に中和試薬を含浸させた領域を有し、さらに該中和試薬を含浸させた領域の上流に、亜硝酸塩と混合した検体を用いるときには固形状酸性試薬を含浸させた領域を有し、酸性溶液と混合した検体を用いるときには亜硝酸塩を含浸させた領域を有する、検体中の糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片であって、亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させた領域に疎水性の素材を用いることを特徴とする、イムノクロマト試験片。【選択図】なし
Description
本発明は、イムノクロマト試験片上で糖鎖抗原の亜硝酸抽出処理をすることが可能な、
糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片に関する。
糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片に関する。
イムノクロマト法を原理とする迅速診断薬の多くは、ウイルス又は細菌感染症を迅速・
簡便に測定し、治療方針を決定する一つの手段として広く使用されている。
簡便に測定し、治療方針を決定する一つの手段として広く使用されている。
一般的なイムノクロマト法を原理とする迅速診断薬は、検体を検体浮遊液に浮遊させた
後、その浮遊液をイムノクロマト試験片に供給することで迅速・簡便に測定できる。
後、その浮遊液をイムノクロマト試験片に供給することで迅速・簡便に測定できる。
Ａ群β溶血性レンサ球菌（Ａ群β溶連菌）、口腔内レンサ球菌等ストレプトコッカス属
に属する微生物を検出するためには糖鎖抗原を抽出し、糖鎖抗原を測定する必要がある。
に属する微生物を検出するためには糖鎖抗原を抽出し、糖鎖抗原を測定する必要がある。
例えば、イムノクロマト試験片に予め亜硝酸ナトリウムと中和試薬を含ませることによ
り、検体を酢酸等の酸性溶液に浮遊してイムノクロマト試験片に供給する操作のみで亜硝
酸抽出処理をイムノクロマト試験片上で行う方法が報告されている（特許文献１）。
り、検体を酢酸等の酸性溶液に浮遊してイムノクロマト試験片に供給する操作のみで亜硝
酸抽出処理をイムノクロマト試験片上で行う方法が報告されている（特許文献１）。
また、イムノクロマト試験片に予め酸性試薬と中和試薬を含ませておき、検体を亜硝酸
塩に浮遊してイムノクロマト試験片に供給する方法もある。
塩に浮遊してイムノクロマト試験片に供給する方法もある。
さらに、イムノクロマト試験片上で効率的に糖鎖抗原の亜硝酸抽出処理を行う方法が報
告されている（特許文献２～４）。
告されている（特許文献２～４）。
しかし、デバイス上で抽出させる機構を用いる際、目標とする性能を達成するためには
、デバイス上で一定の抽出時間を担保する必要があった。
、デバイス上で一定の抽出時間を担保する必要があった。
現在市販されているイムノクロマト法を原理とするＡ群β溶連菌(Strep A)抗原検出試
薬の多くが亜硝酸塩溶液（R1）と酸溶液（R2）を混合して発生させた酸性の亜硝酸を、イ
ムノクロマト法用検出試薬（試験片）上にある乾燥状態の中和剤（R3）で中和し反応させ
る技術を採用しているが、R1もしくはR2をパッドに塗布することで、R1とR2の用事調製及
び抽出工程を省く、1ステップ化の技術も知られている。1ステップのStrep A抗原検出試
薬においては、テストデバイス上で抽出工程を行うため、サンプル滴下後、一定の抽出時
間を担保することが必須である。しかし、デバイス上で抽出させる機構を用いる際、目標
とする性能を達成するためには、デバイス上で一定の抽出時間を担保する必要があった。
一定の抽出時間を担保するためには、含浸させるパッドに親水性があり、厚みのある素材
を使うことも可能であるが、検体の粘性によっては保持出来る時間にバラツキが生じ、コ
ントロールが難しかった。また、疎水性の高いパッド上に試料を保持することで抽出時間
を確保することも可能であるが、やはり、検体の粘性によっては、抽出時間にバラツキが
生じ、いつまで経っても検体が展開せず、5分の判定時間内に液が展開しきらないという
問題があった。
薬の多くが亜硝酸塩溶液（R1）と酸溶液（R2）を混合して発生させた酸性の亜硝酸を、イ
ムノクロマト法用検出試薬（試験片）上にある乾燥状態の中和剤（R3）で中和し反応させ
る技術を採用しているが、R1もしくはR2をパッドに塗布することで、R1とR2の用事調製及
び抽出工程を省く、1ステップ化の技術も知られている。1ステップのStrep A抗原検出試
薬においては、テストデバイス上で抽出工程を行うため、サンプル滴下後、一定の抽出時
間を担保することが必須である。しかし、デバイス上で抽出させる機構を用いる際、目標
とする性能を達成するためには、デバイス上で一定の抽出時間を担保する必要があった。
一定の抽出時間を担保するためには、含浸させるパッドに親水性があり、厚みのある素材
を使うことも可能であるが、検体の粘性によっては保持出来る時間にバラツキが生じ、コ
ントロールが難しかった。また、疎水性の高いパッド上に試料を保持することで抽出時間
を確保することも可能であるが、やはり、検体の粘性によっては、抽出時間にバラツキが
生じ、いつまで経っても検体が展開せず、5分の判定時間内に液が展開しきらないという
問題があった。
本発明は、イムノクロマト試験片上での検体の展開を制御し、酸性試薬と亜硝酸塩と中
和試薬による処理を適切に制御するためのイムノクロマト試験片及び該試験片を用いたイ
ムノクロマト方法を提供することを目的とする。
和試薬による処理を適切に制御するためのイムノクロマト試験片及び該試験片を用いたイ
ムノクロマト方法を提供することを目的とする。
本発明者らは、イムノクロマト試験片上での検体の展開を制御し、酸性試薬と亜硝酸塩
と中和試薬による処理を適切に制御する方法について鋭意検討を行った。
と中和試薬による処理を適切に制御する方法について鋭意検討を行った。
その結果、固形状酸性試薬又は亜硝酸塩を含浸させる素材に疎水性を有する素材を用い
ることで反応時間を向上させることを見出した。
ることで反応時間を向上させることを見出した。
また、素材に塗布する界面活性剤の濃度を調節することで、最適な亜硝酸抽出時間をコ
ントロールでき、シグナルの強さを調節することが可能であることを見出した。
ントロールでき、シグナルの強さを調節することが可能であることを見出した。
すなわち、本発明は以下のとおりである。
[１] 亜硝酸塩又は酸性溶液と混合した検体を添加するサンプルパッド、糖鎖抗原に対す
る抗体を標識した標識抗体を含む標識体領域及び前記糖鎖抗原に対する抗体を固相化した
検出領域を含み、検出領域において抗体-糖鎖抗原-標識抗体の複合体を形成させ、糖鎖抗
原を測定するイムノクロマト試験片であって、前記標識体領域の上流に中和試薬を含浸さ
せた領域を有し、さらに該中和試薬を含浸させた領域の上流に、亜硝酸塩と混合した検体
を用いるときには固形状酸性試薬を含浸させた領域を有し、酸性溶液と混合した検体を用
いるときには亜硝酸塩を含浸させた領域を有する、検体中の糖鎖抗原を抽出し測定するた
めのイムノクロマト試験片であって、
亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させた領域に疎水性の素材を用いることを特徴とす
る、イムノクロマト試験片。
[２] 亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させた疎水性の素材に界面活性剤を含浸させる
、[１]のイムノクロマト試験片。
[３] 界面活性剤がポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルである、[２]のイムノ
クロマト試験片。
[４] ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルがTriton X-100である、[３]のイム
ノクロマト試験片。
[５] 亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させた疎水性を有する素材が、ポリエステル、
ポリエチレン、レーヨン、ナイロン、及びそれらのいずれか２種以上の混合物からなる群
から選択される、[１]～[４]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[６] サンプルパッド上に固形状酸性試薬若しくは亜硝酸塩を含浸させた領域が存在する
、[１]～[５]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[７] 固形状酸性試薬が、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、クエン酸及び酒石酸からな
る群から選択される、[１]～[６]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[８] 中和試薬が、トリスヒドロキシルメチルアミノメタン又は水酸化ナトリウムである
、[１]～[７]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[９] 糖鎖抗原が、原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、リケッチア、クラミジア又
はウイルスの糖鎖抗原である、[１]～[８]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[１０] [１]～[９]のいずれかのイムノクロマト試験片と亜硝酸塩溶液若しくは酸性溶液
を含むイムノクロマト試験キット。
[１１] [１]～[１０]のいずれかのイムノクロマト試験片を用いてイムノクロマト法によ
り検体中の糖鎖抗原を測定する方法であって、
イムノクロマト試験片が固形状酸性試薬を含浸させた領域を有するときには検体を亜硝
酸溶液と混合し、イムノクロマト試験片が亜硝酸塩を含浸させた領域を有するときには検
体を酸性溶液と混合し、前記イムノクロマト試験片のサンプルパッドに添加することを含
み、
固形状酸性試薬を含浸させた領域又は亜硝酸塩を含浸させた領域において、亜硝酸塩と
固形状酸性試薬の反応により発生した亜硝酸の作用により検体から糖鎖抗原が抽出され、
中和試薬を含浸させた領域において、前記糖鎖抗原を含む酸性溶液が中和され、
検出領域において、抗体-糖鎖抗原-標識抗体の複合体が形成される、イムノクロマト法
により、イムノクロマト試験片上での検体の展開のスピードや方向を制御し、酸性試薬と
亜硝酸塩と中和試薬による処理を制御して、検体中の糖鎖抗原を測定する方法。
[１] 亜硝酸塩又は酸性溶液と混合した検体を添加するサンプルパッド、糖鎖抗原に対す
る抗体を標識した標識抗体を含む標識体領域及び前記糖鎖抗原に対する抗体を固相化した
検出領域を含み、検出領域において抗体-糖鎖抗原-標識抗体の複合体を形成させ、糖鎖抗
原を測定するイムノクロマト試験片であって、前記標識体領域の上流に中和試薬を含浸さ
せた領域を有し、さらに該中和試薬を含浸させた領域の上流に、亜硝酸塩と混合した検体
を用いるときには固形状酸性試薬を含浸させた領域を有し、酸性溶液と混合した検体を用
いるときには亜硝酸塩を含浸させた領域を有する、検体中の糖鎖抗原を抽出し測定するた
めのイムノクロマト試験片であって、
亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させた領域に疎水性の素材を用いることを特徴とす
る、イムノクロマト試験片。
[２] 亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させた疎水性の素材に界面活性剤を含浸させる
、[１]のイムノクロマト試験片。
[３] 界面活性剤がポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルである、[２]のイムノ
クロマト試験片。
[４] ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルがTriton X-100である、[３]のイム
ノクロマト試験片。
[５] 亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させた疎水性を有する素材が、ポリエステル、
ポリエチレン、レーヨン、ナイロン、及びそれらのいずれか２種以上の混合物からなる群
から選択される、[１]～[４]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[６] サンプルパッド上に固形状酸性試薬若しくは亜硝酸塩を含浸させた領域が存在する
、[１]～[５]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[７] 固形状酸性試薬が、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、クエン酸及び酒石酸からな
る群から選択される、[１]～[６]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[８] 中和試薬が、トリスヒドロキシルメチルアミノメタン又は水酸化ナトリウムである
、[１]～[７]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[９] 糖鎖抗原が、原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、リケッチア、クラミジア又
はウイルスの糖鎖抗原である、[１]～[８]のいずれかのイムノクロマト試験片。
[１０] [１]～[９]のいずれかのイムノクロマト試験片と亜硝酸塩溶液若しくは酸性溶液
を含むイムノクロマト試験キット。
[１１] [１]～[１０]のいずれかのイムノクロマト試験片を用いてイムノクロマト法によ
り検体中の糖鎖抗原を測定する方法であって、
イムノクロマト試験片が固形状酸性試薬を含浸させた領域を有するときには検体を亜硝
酸溶液と混合し、イムノクロマト試験片が亜硝酸塩を含浸させた領域を有するときには検
体を酸性溶液と混合し、前記イムノクロマト試験片のサンプルパッドに添加することを含
み、
固形状酸性試薬を含浸させた領域又は亜硝酸塩を含浸させた領域において、亜硝酸塩と
固形状酸性試薬の反応により発生した亜硝酸の作用により検体から糖鎖抗原が抽出され、
中和試薬を含浸させた領域において、前記糖鎖抗原を含む酸性溶液が中和され、
検出領域において、抗体-糖鎖抗原-標識抗体の複合体が形成される、イムノクロマト法
により、イムノクロマト試験片上での検体の展開のスピードや方向を制御し、酸性試薬と
亜硝酸塩と中和試薬による処理を制御して、検体中の糖鎖抗原を測定する方法。
1ステップのStrepA抗原検出試薬において、亜硝酸塩又は固形状の酸性試薬を含浸させ
る素材として疎水性の素材を使用する際、界面活性剤濃度を調節することにより、固形状
酸性試薬と亜硝酸塩による処理にかかる時間を最適なものに調節することを可能にし、結
果として、目標とする性能（ライン発色時間が早く、感度が高い）を出せるイムノクロマ
ト試験片を提供する。
る素材として疎水性の素材を使用する際、界面活性剤濃度を調節することにより、固形状
酸性試薬と亜硝酸塩による処理にかかる時間を最適なものに調節することを可能にし、結
果として、目標とする性能（ライン発色時間が早く、感度が高い）を出せるイムノクロマ
ト試験片を提供する。
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明は、糖鎖抗原の亜硝酸抽出処理をイムノクロマト試験片上で行えるように簡便化
し、被検出物質である糖鎖抗原を迅速かつ正確に測定することを可能にするイムノクロマ
ト試験片又は該イムノクロマト試験片と亜硝酸溶液又は酸性溶液を含むキットに係る。
し、被検出物質である糖鎖抗原を迅速かつ正確に測定することを可能にするイムノクロマ
ト試験片又は該イムノクロマト試験片と亜硝酸溶液又は酸性溶液を含むキットに係る。
イムノクロマト試験片は、被検出物質（抗原等）を捕捉する抗体（抗体１）が固定化さ
れた検出領域を有する支持体、移動可能な標識抗体（抗体２）を有する標識体領域、検体
を添加するサンプルパッド、展開された検体液を吸収する吸収帯、これら部材を１つに貼
り合わせるためのバッキングシート等を具備する。
れた検出領域を有する支持体、移動可能な標識抗体（抗体２）を有する標識体領域、検体
を添加するサンプルパッド、展開された検体液を吸収する吸収帯、これら部材を１つに貼
り合わせるためのバッキングシート等を具備する。
本発明のイムノクロマト試験片は、格納容器内に収められていてもよく、該格納容器に
より、例えば紫外線や空気中の湿気による劣化を防ぐことができる。また、汚染性、感染
性の有る検体試料を用いる場合、格納容器によりアッセイを行う試験者が汚染又は感染す
るのを防止することができる。例えば適当な大きさの樹脂製ケースを格納容器として用い
、該ケース中に本発明の装置を収納すればよい。また、抗原又は抗体を固定化した試験片
の表面を樹脂製フィルム等（PETシート）で覆ってもよい。格納容器とその中に納められ
た試験片を、一体としてイムノクロマトデバイスという場合がある。
より、例えば紫外線や空気中の湿気による劣化を防ぐことができる。また、汚染性、感染
性の有る検体試料を用いる場合、格納容器によりアッセイを行う試験者が汚染又は感染す
るのを防止することができる。例えば適当な大きさの樹脂製ケースを格納容器として用い
、該ケース中に本発明の装置を収納すればよい。また、抗原又は抗体を固定化した試験片
の表面を樹脂製フィルム等（PETシート）で覆ってもよい。格納容器とその中に納められ
た試験片を、一体としてイムノクロマトデバイスという場合がある。
なお、検出領域の数及び標識体領域に含まれる標識抗体の種類は１つに限られるもので
はなく、複数の被検出物質に対応する抗体を用いることで、２つ以上の抗原を同一の試験
片にて測定することができる。
はなく、複数の被検出物質に対応する抗体を用いることで、２つ以上の抗原を同一の試験
片にて測定することができる。
支持体は、被検出物質（抗原）を捕捉するための抗体を固定化する性能を持つ材料であ
り、かつ液体が水平方向に通行することを妨げない性能を持つ。好ましくは、毛細管作用
を有する多孔性薄膜（メンブレン）であり、液体及びそれに分散した成分を吸収により輸
送可能な材料である。支持体を成す材質は特に限定されるものではなく、例えばセルロー
ス、ニトロセルロース、セルロースアセテート、ポリビニリデンジフルオライド（ＰＶＤ
Ｆ）、ガラス繊維、ナイロン、ポリケトンなどが挙げられる。このうちニトロセルロース
を用いて薄膜又はメンブレンとしたものがより好ましい。抗体を固定化したメンブレンを
抗体固定化メンブレンと呼ぶ。
り、かつ液体が水平方向に通行することを妨げない性能を持つ。好ましくは、毛細管作用
を有する多孔性薄膜（メンブレン）であり、液体及びそれに分散した成分を吸収により輸
送可能な材料である。支持体を成す材質は特に限定されるものではなく、例えばセルロー
ス、ニトロセルロース、セルロースアセテート、ポリビニリデンジフルオライド（ＰＶＤ
Ｆ）、ガラス繊維、ナイロン、ポリケトンなどが挙げられる。このうちニトロセルロース
を用いて薄膜又はメンブレンとしたものがより好ましい。抗体を固定化したメンブレンを
抗体固定化メンブレンと呼ぶ。
標識体領域は、標識抗体を含む多孔性基材から成り、基材の材質は一般的に用いられて
いるガラス繊維（グラスファイバー）や不織布等を用いることができる。該基材は、多量
の標識抗体を含浸させるために、厚さ0.3mm～0.6mm程度のパッド状であることが好ましい
。標識抗体を含浸させ乾燥させた多孔性基材を乾燥パッドとも呼ぶ。
いるガラス繊維（グラスファイバー）や不織布等を用いることができる。該基材は、多量
の標識抗体を含浸させるために、厚さ0.3mm～0.6mm程度のパッド状であることが好ましい
。標識抗体を含浸させ乾燥させた多孔性基材を乾燥パッドとも呼ぶ。
標識抗体の標識には、アルカリフォスファターゼや西洋ワサビペルオキシダーゼのよう
な酵素、金コロイドのような金属コロイド、シリカ粒子、セルロース粒子、磁性粒子、蛍
光粒子、着色ポリスチレン粒子及び着色ラテックス粒子等が用いられることが多い。金属
コロイド粒子、着色ポリスチレン粒子や着色ラテックス粒子等の着色粒子を用いる場合に
は、これらの標識試薬が凝集することによって着色が生じるので、この着色を測定する。
抗体を固定化した粒子を抗体固定化粒子と呼ぶ。
な酵素、金コロイドのような金属コロイド、シリカ粒子、セルロース粒子、磁性粒子、蛍
光粒子、着色ポリスチレン粒子及び着色ラテックス粒子等が用いられることが多い。金属
コロイド粒子、着色ポリスチレン粒子や着色ラテックス粒子等の着色粒子を用いる場合に
は、これらの標識試薬が凝集することによって着色が生じるので、この着色を測定する。
抗体を固定化した粒子を抗体固定化粒子と呼ぶ。
検出領域は、被検出物質（抗原）を捕捉する抗体が固定化された支持体の一部の領域を
指す。検出領域は、抗原を捕捉するための抗体を固定化した領域を少なくとも１つ設ける
。検出領域は支持体に含まれていればよく、支持体上に抗体を固定化すればよい。
指す。検出領域は、抗原を捕捉するための抗体を固定化した領域を少なくとも１つ設ける
。検出領域は支持体に含まれていればよく、支持体上に抗体を固定化すればよい。
サンプルパッドは、検体を添加するための部位であり、多孔性材料である。サンプルパ
ッドはイムノクロマト試験片の最も上流にある部位である。該材料には一般的に用いられ
る濾紙、ガラス繊維、不織布等を用いることができる。多量の検体を免疫測定に用いるた
めに、厚さ0.3mm～1mm程度のパッド状であることが好ましい。検体には、検体を他の溶液
に浮遊して得られる試料等、検体を用いて調製された試料も含む。
ッドはイムノクロマト試験片の最も上流にある部位である。該材料には一般的に用いられ
る濾紙、ガラス繊維、不織布等を用いることができる。多量の検体を免疫測定に用いるた
めに、厚さ0.3mm～1mm程度のパッド状であることが好ましい。検体には、検体を他の溶液
に浮遊して得られる試料等、検体を用いて調製された試料も含む。
吸収帯は、支持体に供給され検出領域で反応に関与しなかった成分を吸収するための部
材である。材料には、一般的な天然高分子化合物、合成高分子化合物等からなる保水性の
高い濾紙、スポンジ等を用いることができるが、検体の展開促進のためには吸水性が高い
ものが好ましい。
材である。材料には、一般的な天然高分子化合物、合成高分子化合物等からなる保水性の
高い濾紙、スポンジ等を用いることができるが、検体の展開促進のためには吸水性が高い
ものが好ましい。
バッキングシートは、前述の全ての材料、すなわち支持体、サンプルパッド、標識体領
域、吸収帯等が、部分的な重なりをもって貼付・固定されるための部材である。バッキン
グシートは、これらの材料が最適な間隔で配置・固定されるのであれば、必ずしも必要で
はないが、製造上あるいは使用上の利便性から、一般的には用いた方が好ましい。
域、吸収帯等が、部分的な重なりをもって貼付・固定されるための部材である。バッキン
グシートは、これらの材料が最適な間隔で配置・固定されるのであれば、必ずしも必要で
はないが、製造上あるいは使用上の利便性から、一般的には用いた方が好ましい。
本発明のイムノクロマト試験片には、さらに対照表示領域（部材）が存在していてもよ
い。対照表示領域は試験が正確に実施されたことを示す部位である。例えば、対照表示領
域は、検出領域の下流に存在し、検体試料が検出領域を通過し、対照表示領域に到達した
ときに着色等によりシグナルを発する。対照表示領域には、標識担体を結合させた抗体に
結合する物質を固相化しておいてもよいし、検体が到達したときに色が変化するpHインジ
ケーター等の試薬を固相化しておいてもよい。標識担体を結合させた抗体がマウスモノク
ローナル抗体の場合、抗マウスIgG抗体を用いればよい。
い。対照表示領域は試験が正確に実施されたことを示す部位である。例えば、対照表示領
域は、検出領域の下流に存在し、検体試料が検出領域を通過し、対照表示領域に到達した
ときに着色等によりシグナルを発する。対照表示領域には、標識担体を結合させた抗体に
結合する物質を固相化しておいてもよいし、検体が到達したときに色が変化するpHインジ
ケーター等の試薬を固相化しておいてもよい。標識担体を結合させた抗体がマウスモノク
ローナル抗体の場合、抗マウスIgG抗体を用いればよい。
イムノクロマト試験片の大きさは限定されないが、例えば、縦の長さ数cm～十数cm、横
の長さ数mm～数cm程度である。
の長さ数mm～数cm程度である。
上記の形態の試験片において、検体は、サンプルパッド、標識体領域、支持体、検出領
域、吸収帯等の一連の接続により形成された多孔性流路を通過する。よって本形態におい
ては、これら全てが検体移動領域となる。各構成材料の材質や形態によって、検体が材料
内部を浸透せず界面を通行する形態もありうるが、本明細書で定義する検体移動領域は材
料の内部か界面かを問わないため、該形態の試験片も本明細書の範囲に含まれる。
域、吸収帯等の一連の接続により形成された多孔性流路を通過する。よって本形態におい
ては、これら全てが検体移動領域となる。各構成材料の材質や形態によって、検体が材料
内部を浸透せず界面を通行する形態もありうるが、本明細書で定義する検体移動領域は材
料の内部か界面かを問わないため、該形態の試験片も本明細書の範囲に含まれる。
本発明のイムノクロマト試験片を用いて検体中の糖鎖抗原を測定する場合、最初に検体
中の糖鎖抗原を抽出する必要がある。糖鎖抗原の抽出は、糖鎖抗原を含む検体を亜硝酸で
処理することにより行う。亜硝酸は亜硝酸ナトリウム等の亜硝酸塩を酸と混合することに
より発生させることができ、このようにして発生させた亜硝酸で糖鎖抗原を含む検体を処
理すればよい。抽出した抗原はイムノクロマト試験片上に固相化した抗体に抗原抗体反応
により結合されるが、この際、反応系に酸が残っていると反応系は酸性になり、抗原抗体
反応が阻害される。そこで、反応系の酸を中和する必要がある。
中の糖鎖抗原を抽出する必要がある。糖鎖抗原の抽出は、糖鎖抗原を含む検体を亜硝酸で
処理することにより行う。亜硝酸は亜硝酸ナトリウム等の亜硝酸塩を酸と混合することに
より発生させることができ、このようにして発生させた亜硝酸で糖鎖抗原を含む検体を処
理すればよい。抽出した抗原はイムノクロマト試験片上に固相化した抗体に抗原抗体反応
により結合されるが、この際、反応系に酸が残っていると反応系は酸性になり、抗原抗体
反応が阻害される。そこで、反応系の酸を中和する必要がある。
本発明において、亜硝酸塩と酸を混合し亜硝酸を発生させて、該亜硝酸により検体中の
糖鎖抗原を抽出して、酸を中和した上で、イムノクロマト試験片上に固相化した抗体に糖
鎖抗原を結合させ、糖鎖抗原を測定する方法において、糖鎖抗原を抽出して測定する方法
として以下の方法が挙げられる。いずれの方法においても、亜硝酸による糖鎖抗原の抽出
と中和はイムノクロマト試験片上で行う。亜硝酸による糖鎖抗原の抽出をイムノクロマト
試験片上で行うためには、イムノクロマト試験片上に酸性試薬又は亜硝酸塩を含ませてお
けばよい。中和をイムノクロマト試験片上で行うためには、イムノクロマト試験片上に中
和試薬を含浸させておけばよい。
糖鎖抗原を抽出して、酸を中和した上で、イムノクロマト試験片上に固相化した抗体に糖
鎖抗原を結合させ、糖鎖抗原を測定する方法において、糖鎖抗原を抽出して測定する方法
として以下の方法が挙げられる。いずれの方法においても、亜硝酸による糖鎖抗原の抽出
と中和はイムノクロマト試験片上で行う。亜硝酸による糖鎖抗原の抽出をイムノクロマト
試験片上で行うためには、イムノクロマト試験片上に酸性試薬又は亜硝酸塩を含ませてお
けばよい。中和をイムノクロマト試験片上で行うためには、イムノクロマト試験片上に中
和試薬を含浸させておけばよい。
（Ａ）予め検体と酸性溶液を混合し、亜硝酸塩と中和試薬を含浸させたイムノクロマト試
験片のサンプルパッドに添加する。混合液が亜硝酸塩を含浸させた領域に達すると亜硝酸
塩と酸が反応し、亜硝酸が発生し、検体中の糖鎖抗原が抽出される。糖鎖抗原の抽出液は
イムノクロマト試験片上の中和試薬を含浸させた領域で中和され、糖鎖抗原はイムノクロ
マト試験片上に固相化した抗体に結合し、検出できる。該方法において、用いる酸性溶液
としては、酢酸、塩酸、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、クエン酸、酒石酸等が挙げら
れる。
（Ｂ）予め検体と亜硝酸塩溶液を混合し、酸性試薬と中和試薬を含浸させたイムノクロマ
ト試験片のサンプルパッドに添加する。混合液が酸性試薬を含浸させた領域に達すると亜
硝酸塩と酸が反応し、亜硝酸が発生し、検体中の糖鎖抗原が抽出される。糖鎖抗原の抽出
液はイムノクロマト試験片上の中和試薬を含浸させた領域で中和され、糖鎖抗原はイムノ
クロマト試験片上に固相化した抗体に結合し、検出できる。
験片のサンプルパッドに添加する。混合液が亜硝酸塩を含浸させた領域に達すると亜硝酸
塩と酸が反応し、亜硝酸が発生し、検体中の糖鎖抗原が抽出される。糖鎖抗原の抽出液は
イムノクロマト試験片上の中和試薬を含浸させた領域で中和され、糖鎖抗原はイムノクロ
マト試験片上に固相化した抗体に結合し、検出できる。該方法において、用いる酸性溶液
としては、酢酸、塩酸、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、クエン酸、酒石酸等が挙げら
れる。
（Ｂ）予め検体と亜硝酸塩溶液を混合し、酸性試薬と中和試薬を含浸させたイムノクロマ
ト試験片のサンプルパッドに添加する。混合液が酸性試薬を含浸させた領域に達すると亜
硝酸塩と酸が反応し、亜硝酸が発生し、検体中の糖鎖抗原が抽出される。糖鎖抗原の抽出
液はイムノクロマト試験片上の中和試薬を含浸させた領域で中和され、糖鎖抗原はイムノ
クロマト試験片上に固相化した抗体に結合し、検出できる。
上記の（Ａ）又は（Ｂ）の方法を行うための本発明のイムノクロマト試験片では、標識
体領域よりも上流（検体の流れの上流でありサンプルパッドが存在する側）に、すなわち
、サンプルパッド内又はサンプルパッドと標識体領域の間に亜硝酸塩が含浸されているイ
ムノクロマト試験片は上記（Ａ）の方法に用いることができる。また、サンプルパッド内
又はサンプルパッドと標識体領域の間に酸性試薬が含浸されているイムノクロマト試験片
は上記（Ｂ）の方法に用いることができる。なお、酸性試薬としては、固形状酸性試薬が
用いられる。これらの方法により、被検試料中の被検出物質を被検試料の試験に供される
量によらず、正確に、特異的に測定することが可能になる。
体領域よりも上流（検体の流れの上流でありサンプルパッドが存在する側）に、すなわち
、サンプルパッド内又はサンプルパッドと標識体領域の間に亜硝酸塩が含浸されているイ
ムノクロマト試験片は上記（Ａ）の方法に用いることができる。また、サンプルパッド内
又はサンプルパッドと標識体領域の間に酸性試薬が含浸されているイムノクロマト試験片
は上記（Ｂ）の方法に用いることができる。なお、酸性試薬としては、固形状酸性試薬が
用いられる。これらの方法により、被検試料中の被検出物質を被検試料の試験に供される
量によらず、正確に、特異的に測定することが可能になる。
固形状酸性試薬が含浸された領域を固形状酸性試薬領域と呼び、酸性試薬が含浸された
領域を酸性試薬領域と呼び、中和試薬が含浸された領域を中和試薬領域と呼ぶ。
領域を酸性試薬領域と呼び、中和試薬が含浸された領域を中和試薬領域と呼ぶ。
前記固形状酸性試薬又は亜硝酸塩は、サンプルパッドに含浸させてもよいし、サンプル
パッドとは別の不織布等の多孔性材料からなるパッドに含浸させて、得られた固形状酸性
試薬含浸多孔性材料又は亜硝酸塩含浸多孔性材料を、サンプルパッドと標識体領域との間
、すなわち標識体領域の上流側に配置してもよい。ここで、固形状酸性試薬又は亜硝酸塩
を含浸させた領域とサンプルパッド又は標識体領域は接触していても、いなくてもよい。
本発明において、試薬を含浸させた領域を試薬を含浸させたパッドともいう。
パッドとは別の不織布等の多孔性材料からなるパッドに含浸させて、得られた固形状酸性
試薬含浸多孔性材料又は亜硝酸塩含浸多孔性材料を、サンプルパッドと標識体領域との間
、すなわち標識体領域の上流側に配置してもよい。ここで、固形状酸性試薬又は亜硝酸塩
を含浸させた領域とサンプルパッド又は標識体領域は接触していても、いなくてもよい。
本発明において、試薬を含浸させた領域を試薬を含浸させたパッドともいう。
前記中和試薬は、固形状酸性試薬又は亜硝酸塩を含浸させる領域よりも下流に配置する
。中和試薬は、支持体に含浸させてもよいし、支持体とは別の不織布等の多孔性材料から
なるパッドに含浸させて、得られた中和試薬含浸多孔性材料を、固形状酸性試薬又は亜硝
酸塩を含浸させた領域と標識体領域との間に配置してもよい。すなわち、標識体領域の上
流に中和試薬を含浸させた領域を有し、さらに該中和試薬を含浸させた領域の上流に固形
状酸性試薬又は亜硝酸塩を含浸させた領域を有する。
。中和試薬は、支持体に含浸させてもよいし、支持体とは別の不織布等の多孔性材料から
なるパッドに含浸させて、得られた中和試薬含浸多孔性材料を、固形状酸性試薬又は亜硝
酸塩を含浸させた領域と標識体領域との間に配置してもよい。すなわち、標識体領域の上
流に中和試薬を含浸させた領域を有し、さらに該中和試薬を含浸させた領域の上流に固形
状酸性試薬又は亜硝酸塩を含浸させた領域を有する。
ここで、中和試薬を含浸させた領域と固形状酸性試薬又は亜硝酸塩を含浸させた領域又
は標識体領域は接触していても、いなくてもよい。
は標識体領域は接触していても、いなくてもよい。
固形状酸性試薬又は亜硝酸塩を含浸させる領域に多孔性材料の素材としては、疎水性を
有する素材を用いる。具体的にはポリエステルでできた不織布、ポリエチレンでできた不
織布等、レーヨンでできた不織布等、ナイロンでできた不織布等又はそれらのいずれか２
種以上の疎水性を有する素材の混合物である不織布等、あるいはそれらのいずれか２種以
上の疎水性を有する素材と親水性を有する素材との混合物である不織布が挙げられる。
有する素材を用いる。具体的にはポリエステルでできた不織布、ポリエチレンでできた不
織布等、レーヨンでできた不織布等、ナイロンでできた不織布等又はそれらのいずれか２
種以上の疎水性を有する素材の混合物である不織布等、あるいはそれらのいずれか２種以
上の疎水性を有する素材と親水性を有する素材との混合物である不織布が挙げられる。
また、疎水性を有する素材には界面活性剤を含浸させることが好ましい。界面活性剤は
限定されないが、非イオン系界面活性剤、陽イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤のい
ずれも用いることができる。具体的には、Triton X-100、Triton X-114等のポリオキシエ
チレンオクチルフェニルエーテル；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム等の第４
級アンモニウム化合物；Tween 20、Tween 80等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エ
ステル；Brij-35、Brij-58等のポリオキシエチレンアルキルエーテル；コール酸ナトリウ
ム、デオキシコール酸等のステロイド骨格を有するコール酸系；ラウリル硫酸ナトリウム
、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム等の陰イオン系界面活性剤などの界面活性剤が
挙げられる。この中でも、Triton X-100、Triton X-114等のポリオキシエチレンオクチル
フェニルエーテルが好ましい。界面活性剤の濃度は種類によって至適濃度が異なるが、高
すぎると感度が低下し（抽出時間が短すぎて、感度が低下）、低すぎると効果が見られな
い。Triton X-100の場合は、0.1～2%で効果があり、0.2～0.5%が更に良い。ただし、この
数値は、1テストあたりの塗布する量と界面活性剤の種類、塗布する素材の疎水度により
異なる。
限定されないが、非イオン系界面活性剤、陽イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤のい
ずれも用いることができる。具体的には、Triton X-100、Triton X-114等のポリオキシエ
チレンオクチルフェニルエーテル；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム等の第４
級アンモニウム化合物；Tween 20、Tween 80等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エ
ステル；Brij-35、Brij-58等のポリオキシエチレンアルキルエーテル；コール酸ナトリウ
ム、デオキシコール酸等のステロイド骨格を有するコール酸系；ラウリル硫酸ナトリウム
、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム等の陰イオン系界面活性剤などの界面活性剤が
挙げられる。この中でも、Triton X-100、Triton X-114等のポリオキシエチレンオクチル
フェニルエーテルが好ましい。界面活性剤の濃度は種類によって至適濃度が異なるが、高
すぎると感度が低下し（抽出時間が短すぎて、感度が低下）、低すぎると効果が見られな
い。Triton X-100の場合は、0.1～2%で効果があり、0.2～0.5%が更に良い。ただし、この
数値は、1テストあたりの塗布する量と界面活性剤の種類、塗布する素材の疎水度により
異なる。
中和試薬を含浸させる領域に用いる多孔性材料の素材としては、具体的には、セルロー
スの綿繊維でできた濾紙やガラス繊維でできたガラス濾紙等が挙げられる。
スの綿繊維でできた濾紙やガラス繊維でできたガラス濾紙等が挙げられる。
固形状酸性試薬領域若しくは亜硝酸塩領域と中和試薬領域を有するイムノクロマト試験
片は、支持体上に上流からサンプルパッド、固形状酸性試薬領域若しくは亜硝酸塩領域、
中和試薬領域、標識体領域、検出領域及び吸収帯を有し、固形状酸性試薬領域又は亜硝酸
塩領域はサンプルパッド上にあってもよい。また、サンプルパッド、固形状酸性試薬領域
若しくは亜硝酸塩領域、中和試薬領域、標識体領域、検出領域及び吸収帯は、隣合う領域
どうしで接触していても、いなくてもよい。
片は、支持体上に上流からサンプルパッド、固形状酸性試薬領域若しくは亜硝酸塩領域、
中和試薬領域、標識体領域、検出領域及び吸収帯を有し、固形状酸性試薬領域又は亜硝酸
塩領域はサンプルパッド上にあってもよい。また、サンプルパッド、固形状酸性試薬領域
若しくは亜硝酸塩領域、中和試薬領域、標識体領域、検出領域及び吸収帯は、隣合う領域
どうしで接触していても、いなくてもよい。
本発明で用いられる固形状酸性試薬は常温において固形状のものであり、高温において
揮発しないものである。
揮発しないものである。
本発明に用いられる好ましい固形状酸性試薬としては、マロン酸、リンゴ酸、マレイン
酸、クエン酸、酒石酸を挙げることができる。
酸、クエン酸、酒石酸を挙げることができる。
また、本発明で用いられる好ましい固形状酸性試薬としては、例えばクエン酸のような
価数の多い酸を用いればより少ない量で抽出できる。また同じ価数ならより酸解離定数が
小さい、例えばマレイン酸、酒石酸は効率が良い。
価数の多い酸を用いればより少ない量で抽出できる。また同じ価数ならより酸解離定数が
小さい、例えばマレイン酸、酒石酸は効率が良い。
また、本発明で用いられる好ましい固形状酸性試薬としては、イムノクロマト試験片上
で着色されないような試薬、具体的には乾燥状態で白色又は乾燥熱や酸化で着色されにく
い試薬が好ましい。
で着色されないような試薬、具体的には乾燥状態で白色又は乾燥熱や酸化で着色されにく
い試薬が好ましい。
本発明で用いられる亜硝酸塩としては、亜硝酸ナトリウム、亜硝酸カリウム等が挙げら
れる。
れる。
本発明に用いられる固形状酸性試薬又は亜硝酸塩の使用量、すなわちイムノクロマト試
験片に含浸させる量は、特に限定されないが、通常、イムノクロマト試験片の一試験片あ
たり0.01μg～1mg程度であり、好ましくは0.1μg～0.1mg程度である。もっとも、使用す
る固形状酸性試薬又は亜硝酸塩の種類、検体浮遊液の組成や添加量などにより効果が得ら
れる最適な量を選択することが好ましい。
験片に含浸させる量は、特に限定されないが、通常、イムノクロマト試験片の一試験片あ
たり0.01μg～1mg程度であり、好ましくは0.1μg～0.1mg程度である。もっとも、使用す
る固形状酸性試薬又は亜硝酸塩の種類、検体浮遊液の組成や添加量などにより効果が得ら
れる最適な量を選択することが好ましい。
固形状酸性試薬又は亜硝酸塩をサンプルパッド又は多孔性材料に含浸させるには、固形
状酸性試薬又は亜硝酸塩を一度溶解させて塗布し乾燥させる。例えば、0.1～数Mの固形状
酸性試薬又は亜硝酸塩溶液を塗布し乾燥させればよい。
状酸性試薬又は亜硝酸塩を一度溶解させて塗布し乾燥させる。例えば、0.1～数Mの固形状
酸性試薬又は亜硝酸塩溶液を塗布し乾燥させればよい。
本発明に用いられる中和試薬は常温において固形状のものであり、高温において揮発し
ないものである。中和試薬を塩基性試薬ともいう。
ないものである。中和試薬を塩基性試薬ともいう。
本発明に用いられる好ましい中和試薬としては、トリス塩基（トリスヒドロキシメチル
アミノメタン）、水酸化ナトリウム、リン酸水素二カリウム、クエン酸三ナトリウム、ア
ルカリ領域に緩衝能を持つグッドバッファーを挙げることができる。
アミノメタン）、水酸化ナトリウム、リン酸水素二カリウム、クエン酸三ナトリウム、ア
ルカリ領域に緩衝能を持つグッドバッファーを挙げることができる。
本発明に用いられる中和試薬の使用量、すなわちイムノクロマト試験片に含浸させる量
は、特に限定されないが、通常、イムノクロマト試験片の一試験片あたり0.01μg～1mg程
度であり、好ましくは0.1μg～0.1mg程度である。もっとも、使用する中和試薬の種類、
検体浮遊液の組成や添加量などにより効果が得られる最適な量を選択することが好ましい
。
は、特に限定されないが、通常、イムノクロマト試験片の一試験片あたり0.01μg～1mg程
度であり、好ましくは0.1μg～0.1mg程度である。もっとも、使用する中和試薬の種類、
検体浮遊液の組成や添加量などにより効果が得られる最適な量を選択することが好ましい
。
中和試薬を多孔性材料に含浸させるには、中和試薬を一度溶解させて、溶液を多孔性材
料に塗布し、その後乾燥させればよい。例えば、0.1～数M、好ましくは0.5～数Mの中和試
薬溶液を塗布し乾燥させればよい。
料に塗布し、その後乾燥させればよい。例えば、0.1～数M、好ましくは0.5～数Mの中和試
薬溶液を塗布し乾燥させればよい。
図１～３は、典型的なイムノクロマト試験片の好ましい１形態を示した図である。図１
に示すイムノクロマト試験片は、固形状酸性試薬及び中和試薬を含浸させたイムノクロマ
ト試験片であるが、固形状酸性試薬の代りに亜硝酸塩を含浸させてもよく、この場合は、
亜硝酸塩及び中和試薬を含浸させたイムノクロマト試験片となる。すなわち、以下の試験
片の説明において、固形状酸性試薬領域の代わりに亜硝酸塩試薬領域を設けることがある
。当業者ならば、亜硝酸塩及び中和試薬を含浸させたイムノクロマト試験片を適宜設計し
製造することができる。なお、イムノクロマト試験片は、図１～３に示すものに限定され
るものではない。図１中、１が支持体、２が標識体領域、３が検出領域、７が吸収帯、８
がバッキングシートを指している。
に示すイムノクロマト試験片は、固形状酸性試薬及び中和試薬を含浸させたイムノクロマ
ト試験片であるが、固形状酸性試薬の代りに亜硝酸塩を含浸させてもよく、この場合は、
亜硝酸塩及び中和試薬を含浸させたイムノクロマト試験片となる。すなわち、以下の試験
片の説明において、固形状酸性試薬領域の代わりに亜硝酸塩試薬領域を設けることがある
。当業者ならば、亜硝酸塩及び中和試薬を含浸させたイムノクロマト試験片を適宜設計し
製造することができる。なお、イムノクロマト試験片は、図１～３に示すものに限定され
るものではない。図１中、１が支持体、２が標識体領域、３が検出領域、７が吸収帯、８
がバッキングシートを指している。
図１及び２は、固形状酸性試薬領域５がサンプルパッド１０を兼ねている試験片を示す
。図１Ａが上面図、図１Ｂが切断断面図である。図１の例では、標識体領域２の上流に固
形状酸性試薬領域５及び／又は中和試薬領域６が存在し、これらが重ね合わされており、
これにより連続したラテラルフローの流路が形成されている。図１に示す試験片において
は、固形状酸性試薬領域５がサンプルパッド１０を兼ねている。すなわち、固形状酸性試
薬領域５がサンプルパッド１０上に存在する。この試験片においては、固形状酸性試薬領
域５及び中和試薬領域６が別々の２枚の多孔性材料（パッド）上に設けられているので、
２枚パッド試験片と呼ぶことがある。固形状酸性試薬領域の上流にさらにサンプルパッド
が存在してもよい。固形状酸性試薬領域とサンプルパッドが別々に存在していてもよい。
。図１Ａが上面図、図１Ｂが切断断面図である。図１の例では、標識体領域２の上流に固
形状酸性試薬領域５及び／又は中和試薬領域６が存在し、これらが重ね合わされており、
これにより連続したラテラルフローの流路が形成されている。図１に示す試験片において
は、固形状酸性試薬領域５がサンプルパッド１０を兼ねている。すなわち、固形状酸性試
薬領域５がサンプルパッド１０上に存在する。この試験片においては、固形状酸性試薬領
域５及び中和試薬領域６が別々の２枚の多孔性材料（パッド）上に設けられているので、
２枚パッド試験片と呼ぶことがある。固形状酸性試薬領域の上流にさらにサンプルパッド
が存在してもよい。固形状酸性試薬領域とサンプルパッドが別々に存在していてもよい。
図２の試験片は、サンプルパッド１０が固形状酸性試薬領域５及び中和試薬領域６を兼
ねており、固形状酸性試薬領域５及び中和試薬領域６がサンプルパッド１０上に存在する
。図２Ａが上面図、図２Ｂが切断断面図であり、図２Ｃが中和試薬領域６と固形状酸性試
薬領域５若しくは亜硝酸試薬領域の位置関係を示す。この試験片においては、固形状酸性
試薬領域５及び中和試薬領域６が１枚の多孔性材料（パッド）上に設けられているので、
１枚パッド試験片と呼ぶことがある。
ねており、固形状酸性試薬領域５及び中和試薬領域６がサンプルパッド１０上に存在する
。図２Ａが上面図、図２Ｂが切断断面図であり、図２Ｃが中和試薬領域６と固形状酸性試
薬領域５若しくは亜硝酸試薬領域の位置関係を示す。この試験片においては、固形状酸性
試薬領域５及び中和試薬領域６が１枚の多孔性材料（パッド）上に設けられているので、
１枚パッド試験片と呼ぶことがある。
図３の試験片は、サンプルパッド１０が固形状酸性試薬領域５及び中和試薬領域６と別
々に存在し、固形状酸性試薬領域５が中和試薬領域６を兼ねており、サンプルパッドが別
に存在する。サンプルパッド１０には試薬は含浸されておらず、サンプルパッドのみとし
て機能する。図３Ａが上面図、図３Ｂが切断断面図であり、図３Ｃが中和試薬領域６と固
形状酸性試薬領域５若しくは亜硝酸試薬領域の位置関係を示す。図３の試験片は、固形状
酸性試薬領域及び中和試薬領域を兼ねる多孔性材料（パッド）とサンプルパッドが別々の
２枚の多孔性材料（パッド）として設けられているので、２枚パッド試験片と呼ぶことが
できる。図には示していないが、サンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５及び中和試
薬領域６の３つが別々に存在していてもよい。
々に存在し、固形状酸性試薬領域５が中和試薬領域６を兼ねており、サンプルパッドが別
に存在する。サンプルパッド１０には試薬は含浸されておらず、サンプルパッドのみとし
て機能する。図３Ａが上面図、図３Ｂが切断断面図であり、図３Ｃが中和試薬領域６と固
形状酸性試薬領域５若しくは亜硝酸試薬領域の位置関係を示す。図３の試験片は、固形状
酸性試薬領域及び中和試薬領域を兼ねる多孔性材料（パッド）とサンプルパッドが別々の
２枚の多孔性材料（パッド）として設けられているので、２枚パッド試験片と呼ぶことが
できる。図には示していないが、サンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５及び中和試
薬領域６の３つが別々に存在していてもよい。
測定は、検体又は検体を用いて調製された試料を亜硝酸塩溶液と接触混合させ、検体を
亜硝酸塩溶液に浮遊させ、サンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプル
パッド１０、又は中和試薬領域６と固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプルパッド１０に
添加して供することにより開始される。この際、検体5～100μLと0.1M～8Mの亜硝酸塩0.0
1～2mLを混合し、5～200μLをサンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５を兼ねるサン
プルパッド１０、又は中和試薬領域６と固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプルパッド１
０に供すればよい。亜硝酸塩として、亜硝酸ナトリウム、亜硝酸カリウム等が挙げられる
。
亜硝酸塩溶液に浮遊させ、サンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプル
パッド１０、又は中和試薬領域６と固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプルパッド１０に
添加して供することにより開始される。この際、検体5～100μLと0.1M～8Mの亜硝酸塩0.0
1～2mLを混合し、5～200μLをサンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５を兼ねるサン
プルパッド１０、又は中和試薬領域６と固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプルパッド１
０に供すればよい。亜硝酸塩として、亜硝酸ナトリウム、亜硝酸カリウム等が挙げられる
。
サンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプルパッド１０、又は中和試
薬領域６と固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプルパッド１０に供された被検出物質であ
る糖鎖抗原を含む検体は毛管作用によって、サンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５
を兼ねるサンプルパッド１０、若しくは中和試薬領域６と固形状酸性試薬領域５を兼ねる
サンプルパッド１０及び中和試薬領域６へ展開される。この際、固形状酸性試薬領域５と
中和試薬領域６の間には、PETシートであるトップラミネートシートが存在する。このた
め、固形状酸性試薬領域５から中和試薬領域６への検体の流れは抑制され、かつ、一旦中
和試薬領域６に入った検体が固形状酸性試薬領域５に逆流するのを妨げることができる。
次いで、検体は標識体領域２、支持体１、吸収帯７へと順次、水平方向に展開される。固
形状酸性試薬領域５において、検体に混合した亜硝酸塩と固形状酸性試薬領域５上の固形
状酸性試薬が反応し、遊離の亜硝酸が発生し、その亜硝酸の作用によって検体から糖鎖抗
原が抽出される。抽出された糖鎖抗原は酸性の展開溶液と共に中和試薬領域６に展開移動
し、中和試薬領域６で糖鎖抗原を含む酸性の展開溶液のpHが中和され中性域に調整される
。その結果、糖鎖抗原は中性条件下においてさらに下流に展開移動する。標識体領域２で
は検体試料の展開と共に標識抗体が液中に放出され支持体１へと展開される。検体試料中
に糖鎖抗原が存在する場合において、支持体１の検出領域３では捕捉抗体により糖鎖抗原
が特異的に捕捉され、なおかつ糖鎖抗原は標識抗体とも特異的反応により複合体を形成す
る。これにより検出領域３では糖鎖抗原を介した抗体のサンドイッチが成立し、標識抗体
－糖鎖抗原複合物を検出領域３にて測定することができる。
薬領域６と固形状酸性試薬領域５を兼ねるサンプルパッド１０に供された被検出物質であ
る糖鎖抗原を含む検体は毛管作用によって、サンプルパッド１０、固形状酸性試薬領域５
を兼ねるサンプルパッド１０、若しくは中和試薬領域６と固形状酸性試薬領域５を兼ねる
サンプルパッド１０及び中和試薬領域６へ展開される。この際、固形状酸性試薬領域５と
中和試薬領域６の間には、PETシートであるトップラミネートシートが存在する。このた
め、固形状酸性試薬領域５から中和試薬領域６への検体の流れは抑制され、かつ、一旦中
和試薬領域６に入った検体が固形状酸性試薬領域５に逆流するのを妨げることができる。
次いで、検体は標識体領域２、支持体１、吸収帯７へと順次、水平方向に展開される。固
形状酸性試薬領域５において、検体に混合した亜硝酸塩と固形状酸性試薬領域５上の固形
状酸性試薬が反応し、遊離の亜硝酸が発生し、その亜硝酸の作用によって検体から糖鎖抗
原が抽出される。抽出された糖鎖抗原は酸性の展開溶液と共に中和試薬領域６に展開移動
し、中和試薬領域６で糖鎖抗原を含む酸性の展開溶液のpHが中和され中性域に調整される
。その結果、糖鎖抗原は中性条件下においてさらに下流に展開移動する。標識体領域２で
は検体試料の展開と共に標識抗体が液中に放出され支持体１へと展開される。検体試料中
に糖鎖抗原が存在する場合において、支持体１の検出領域３では捕捉抗体により糖鎖抗原
が特異的に捕捉され、なおかつ糖鎖抗原は標識抗体とも特異的反応により複合体を形成す
る。これにより検出領域３では糖鎖抗原を介した抗体のサンドイッチが成立し、標識抗体
－糖鎖抗原複合物を検出領域３にて測定することができる。
本発明のイムノクロマト試験片を用いた方法によれば、検体中の糖鎖抗原の抽出はイム
ノクロマト試験片上で行われるため、イムノクロマト試験片を用いた測定の前にあらかじ
め検体中の糖鎖抗原を抽出する必要はなく、１ステップで検体中の糖鎖抗原を測定するこ
とができる。
ノクロマト試験片上で行われるため、イムノクロマト試験片を用いた測定の前にあらかじ
め検体中の糖鎖抗原を抽出する必要はなく、１ステップで検体中の糖鎖抗原を測定するこ
とができる。
本発明のイムノクロマト試験片を用いた方法において、検体となる生体試料は、特に限
定されないが、血清、血漿、血液、尿、便、唾液、組織液、髄液、拭い液等の体液等又は
その希釈物が挙げられる。
定されないが、血清、血漿、血液、尿、便、唾液、組織液、髄液、拭い液等の体液等又は
その希釈物が挙げられる。
本発明のイムノクロマト試験片を用いた方法において、測定対象となる被検出物質はイ
ムノアッセイ、すなわち抗原抗体反応を利用したアッセイで測定し得る糖鎖抗原である。
抗原としては亜硝酸抽出処理によって抽出される細菌の細胞壁に存在する糖鎖抗原である
多糖体等が挙げられる。これらの物質を含む原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、リ
ケッチア、クラミジア、ウイルス等も測定し得る。本発明のイムノクロマト試験片を用い
た方法により、被験体の生体試料中に原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、リケッチ
ア、クラミジア、ウイルス等に由来する糖鎖抗原が含まれているか否かを確認することが
でき、糖鎖抗原が含まれている場合、被験体は原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、
リケッチア、クラミジア、ウイルス等による感染症に罹患していると判断することができ
る。例えば、Ａ群β溶血性レンサ球菌（Streptococcus pyogenes）、大腸菌、レジオネラ
、カンピロバクター等の感染の有無を検出することができる。
ムノアッセイ、すなわち抗原抗体反応を利用したアッセイで測定し得る糖鎖抗原である。
抗原としては亜硝酸抽出処理によって抽出される細菌の細胞壁に存在する糖鎖抗原である
多糖体等が挙げられる。これらの物質を含む原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、リ
ケッチア、クラミジア、ウイルス等も測定し得る。本発明のイムノクロマト試験片を用い
た方法により、被験体の生体試料中に原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、リケッチ
ア、クラミジア、ウイルス等に由来する糖鎖抗原が含まれているか否かを確認することが
でき、糖鎖抗原が含まれている場合、被験体は原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、
リケッチア、クラミジア、ウイルス等による感染症に罹患していると判断することができ
る。例えば、Ａ群β溶血性レンサ球菌（Streptococcus pyogenes）、大腸菌、レジオネラ
、カンピロバクター等の感染の有無を検出することができる。
本発明のイムノクロマト試験片を用いた方法は、イムノクロマト試験片に、亜硝酸塩又
は酸性試薬と中和試薬を含浸させる場合に限らず、イムノクロマト試験片上に複数個、す
なわち２個からn個の効果の異なる試薬であって、保存中の反応を避けるべき試薬を含浸
させる際にも利用することができる。
は酸性試薬と中和試薬を含浸させる場合に限らず、イムノクロマト試験片上に複数個、す
なわち２個からn個の効果の異なる試薬であって、保存中の反応を避けるべき試薬を含浸
させる際にも利用することができる。
本発明を以下の実施例によって具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって
限定されるものではない。
以下の実施例において、％は、特に断らない場合はw/v％を示す。
限定されるものではない。
以下の実施例において、％は、特に断らない場合はw/v％を示す。
実施例１
A群溶連菌連鎖球菌測定イムノクロマト試験片の例
亜硝酸塩、固形状酸性試薬及び中和試薬として以下のものを用いた。亜硝酸塩（液状試
薬） 2.0M亜硝酸ナトリウム
固形状酸性試薬(イムノクロマト試験片に含浸) 500mM クエン酸、0.0～2.5% TritonX-10
0
中和試薬（イムノクロマト試験片に含浸） 3.0Mトリス塩酸塩（Trizma BASE）
A群溶連菌連鎖球菌測定イムノクロマト試験片の例
亜硝酸塩、固形状酸性試薬及び中和試薬として以下のものを用いた。亜硝酸塩（液状試
薬） 2.0M亜硝酸ナトリウム
固形状酸性試薬(イムノクロマト試験片に含浸) 500mM クエン酸、0.0～2.5% TritonX-10
0
中和試薬（イムノクロマト試験片に含浸） 3.0Mトリス塩酸塩（Trizma BASE）
１．抗Streptococcus pyogenes（Ａ群β溶血性レンサ球菌）抗体のニトロセルロースメン
ブレン（支持体）への固定化
抗Streptococcus pyogenes抗体を希釈した液及び抗ウサギIgG抗体を準備し、PETフィル
ムで裏打ちされたニトロセルロースメンブレンのサンプルパッド側に抗Streptococcus py
ogenes抗体、吸収帯側に抗ウサギIgG抗体をそれぞれ線状に塗布した。その後、ニトロセ
ルロースメンブレンを乾燥させ、抗Streptococcus pyogenes抗体固定化メンブレンを得た
。このメンブレンを本実施例において、「抗体固定化メンブレン」と呼ぶ。
ブレン（支持体）への固定化
抗Streptococcus pyogenes抗体を希釈した液及び抗ウサギIgG抗体を準備し、PETフィル
ムで裏打ちされたニトロセルロースメンブレンのサンプルパッド側に抗Streptococcus py
ogenes抗体、吸収帯側に抗ウサギIgG抗体をそれぞれ線状に塗布した。その後、ニトロセ
ルロースメンブレンを乾燥させ、抗Streptococcus pyogenes抗体固定化メンブレンを得た
。このメンブレンを本実施例において、「抗体固定化メンブレン」と呼ぶ。
２．抗Streptococcus pyogenes抗体の着色ポリスチレン粒子への固定化
抗Streptococcus pyogenes抗体希釈液に着色ポリスチレン粒子を加え、攪拌後、カルボ
ジイミドを加え、さらに攪拌する。遠心操作により上清を除き、緩衝液に再浮遊し、抗St
reptococcus pyogenes抗体結合着色ポリスチレン粒子浮遊液を得た。この粒子を、本実施
例において、「抗体固定化粒子(着色ポリスチレン）」と呼ぶ。
抗Streptococcus pyogenes抗体希釈液に着色ポリスチレン粒子を加え、攪拌後、カルボ
ジイミドを加え、さらに攪拌する。遠心操作により上清を除き、緩衝液に再浮遊し、抗St
reptococcus pyogenes抗体結合着色ポリスチレン粒子浮遊液を得た。この粒子を、本実施
例において、「抗体固定化粒子(着色ポリスチレン）」と呼ぶ。
３．抗Streptococcus pyogenes抗体結合着色ポリスチレン粒子の塗布・乾燥
２で作製した抗体固定化着色ポリスチレン粒子浮遊液を不織布に所定量を塗布し、乾燥
させた。得られた不織布を、本実施例において、「C.Pad」と呼ぶ。
２で作製した抗体固定化着色ポリスチレン粒子浮遊液を不織布に所定量を塗布し、乾燥
させた。得られた不織布を、本実施例において、「C.Pad」と呼ぶ。
４．中和試薬（塩基性試薬）の塗布
上記の中和試薬（塩基性試薬）を濾紙に塗布した。
上記の中和試薬（塩基性試薬）を濾紙に塗布した。
５．固形状酸性試薬含浸パッドの作製
上記の固形状酸性試薬を疎水性を有する素材の不織布(ポリエステル・ポリエチレン混
合)に塗布した。塗布後に直ちに乾燥して、固形状酸性試薬含浸領域として固形状酸性試
薬含浸パッドを得た。
上記の固形状酸性試薬を疎水性を有する素材の不織布(ポリエステル・ポリエチレン混
合)に塗布した。塗布後に直ちに乾燥して、固形状酸性試薬含浸領域として固形状酸性試
薬含浸パッドを得た。
６．Streptococcus pyogenes検出用イムノクロマト試験片の作製
ストリップのバッキングシートに、まず抗体固定化メンブレン（支持体）を下流から20
mmの部分に貼付した。
ストリップのバッキングシートに、まず抗体固定化メンブレン（支持体）を下流から20
mmの部分に貼付した。
メンブレンの下流に、液を吸収させるための吸収帯を貼付した。
メンブレンの上流にメンブレンとの間に2mmの重なりをもたせて、抗体結合着色ポリス
チレン粒子が塗布された10mm幅のグラスファイバー（C.Pad）を貼付した。
メンブレンの上流にメンブレンとの間に2mmの重なりをもたせて、抗体結合着色ポリス
チレン粒子が塗布された10mm幅のグラスファイバー（C.Pad）を貼付した。
C.Padと中和試薬を含浸させたパッドの重なりが4mmとなるよう、中和試薬含浸パッド（
中和試薬含浸領域）を貼付した。
中和試薬含浸領域）を貼付した。
イムノクロマト試験片の上部にあわせて、PETシートであるトップラミネートシート(60
mm)を貼付した。
mm)を貼付した。
最後に、固形状酸性試薬を含浸させたパッド（固形状酸性試薬含浸領域）を、中和試薬
を含浸させたパッドの上に間にトップラミネートシートが介在し、なおかつ固形状酸性試
薬を含浸させたパッドと中和試薬を含浸させたパッドが接触するように、イムノクロマト
試験片の上流（下端）にあわせて貼付した。
を含浸させたパッドの上に間にトップラミネートシートが介在し、なおかつ固形状酸性試
薬を含浸させたパッドと中和試薬を含浸させたパッドが接触するように、イムノクロマト
試験片の上流（下端）にあわせて貼付した。
このようにして作製したイムノクロマト試験片の構造を図４に示す。また、図５に模式
図を各パーツ間の距離（mm)と共に示す。なお、図４及び図５において、固形状酸性試薬
を含浸させたパッドと中和試薬を含浸させたパッドは、両パッドの間にトップラミネート
が存在しない部位でも接触せずに離れているように表されるが、実際には、トップラミネ
ートがない部分で両パッドは接触している。
図を各パーツ間の距離（mm)と共に示す。なお、図４及び図５において、固形状酸性試薬
を含浸させたパッドと中和試薬を含浸させたパッドは、両パッドの間にトップラミネート
が存在しない部位でも接触せずに離れているように表されるが、実際には、トップラミネ
ートがない部分で両パッドは接触している。
固形状酸性試薬のTriton X-100の濃度が、(1)0.0%、(2)0.1%、(3)0.2%、(4)0.5%、(5)1
.0%、(6)1.5%、(7)2.0%、(8)2.5%のイムノクロマト試験片が得られた。
.0%、(6)1.5%、(7)2.0%、(8)2.5%のイムノクロマト試験片が得られた。
実施例２
実施例１で作製したイムノクロマト試験片にStreptococcus pyogenesを105cfc/mLに浮
遊した2M亜硝酸Na溶液2倍に倍々希釈した検体を75μL滴下して、経過を観察した。
実施例１で作製したイムノクロマト試験片にStreptococcus pyogenesを105cfc/mLに浮
遊した2M亜硝酸Na溶液2倍に倍々希釈した検体を75μL滴下して、経過を観察した。
界面活性剤の濃度が高い条件ほど、展開開始（判定窓に試料が見えるまでの時間）まで
の時間が短縮された。
の時間が短縮された。
また、(3)、(4)のように界面活性剤の濃度によって、亜硝酸による糖鎖抗原の抽出時間
をコントロールすることで、展開時間毎のシグナルの強さを調節することができた（表１
）。
をコントロールすることで、展開時間毎のシグナルの強さを調節することができた（表１
）。
１ 支持体（検出領域を含む）
２ 標識体領域
３ 検出領域
５ 固形状酸性試薬領域
６ 中和試薬領域
７ 吸収帯
８ バッキングシート
９ トップラミネートシート
１０ サンプルパッド
２ 標識体領域
３ 検出領域
５ 固形状酸性試薬領域
６ 中和試薬領域
７ 吸収帯
８ バッキングシート
９ トップラミネートシート
１０ サンプルパッド
本発明のイムノクロマトデバイスを用いてＡ群β溶血性レンサ球菌の感染を正確に検出
することができる。
することができる。
Claims (8)
- 亜硝酸塩又は酸性溶液と混合した検体を添加するサンプルパッド、糖鎖抗原に対する抗体を標識した標識抗体を含む標識体領域及び前記糖鎖抗原に対する抗体を固相化した検出領域を含み、検出領域において抗体-糖鎖抗原-標識抗体の複合体を形成させ、糖鎖抗原を測定するイムノクロマト試験片であって、前記標識体領域の上流に中和試薬を含浸させた領域を有し、さらに該中和試薬を含浸させた領域の上流に、亜硝酸塩と混合した検体を用いるときには固形状酸性試薬を含浸させた領域を有し、酸性溶液と混合した検体を用いるときには亜硝酸塩を含浸させた領域を有する、検体中の糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片であって、
亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させた領域に界面活性剤を含浸させた疎水性の不織布を用いることを特徴とする、イムノクロマト試験片。 - ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルがTriton X-100である、請求項１記載のイムノクロマト試験片。
- サンプルパッド上に固形状酸性試薬若しくは亜硝酸塩を含浸させた領域が存在する、請求項１又は２に記載のイムノクロマト試験片。
- 固形状酸性試薬が、マロン酸、リンゴ酸、マレイン酸、クエン酸及び酒石酸からなる群から選択される、請求項１～３のいずれか１項に記載のイムノクロマト試験片。
- 中和試薬が、トリスヒドロキシルメチルアミノメタン又は水酸化ナトリウムである、請求項１～４のいずれか１項に記載のイムノクロマト試験片。
- 糖鎖抗原が、原生動物、真菌、細菌、マイコプラズマ、リケッチア、クラミジア又はウイルスの糖鎖抗原である、請求項１～５のいずれか１項に記載のイムノクロマト試験片。
- 請求項１～６のいずれか１項に記載のイムノクロマト試験片と亜硝酸塩溶液若しくは酸性溶液を含むイムノクロマト試験キット。
- 請求項１～６のいずれか１項に記載のイムノクロマト試験片を用いてイムノクロマト法により検体中の糖鎖抗原を測定する方法であって、
イムノクロマト試験片が固形状酸性試薬を含浸させた領域を有するときには検体を亜硝酸溶液と混合し、イムノクロマト試験片が亜硝酸塩を含浸させた領域を有するときには検体を酸性溶液と混合し、前記イムノクロマト試験片のサンプルパッドに添加することを含み、
固形状酸性試薬を含浸させた領域又は亜硝酸塩を含浸させた領域において、亜硝酸塩と固形状酸性試薬の反応により発生した亜硝酸の作用により検体から糖鎖抗原が抽出され、 中和試薬を含浸させた領域において、前記糖鎖抗原を含む酸性溶液が中和され、
検出領域において、抗体-糖鎖抗原-標識抗体の複合体が形成される、イムノクロマト法により、イムノクロマト試験片上での検体の展開のスピードや方向を制御し、酸性試薬と亜硝酸塩と中和試薬による処理を制御して、検体中の糖鎖抗原を測定する方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2023045690A JP2023078370A (ja) | 2019-01-29 | 2023-03-22 | 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2019012974A JP7250539B2 (ja) | 2019-01-29 | 2019-01-29 | 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
| JP2023045690A JP2023078370A (ja) | 2019-01-29 | 2023-03-22 | 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019012974A Division JP7250539B2 (ja) | 2019-01-29 | 2019-01-29 | 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2023078370A true JP2023078370A (ja) | 2023-06-06 |
Family
ID=71841793
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019012974A Active JP7250539B2 (ja) | 2019-01-29 | 2019-01-29 | 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
| JP2023045690A Pending JP2023078370A (ja) | 2019-01-29 | 2023-03-22 | 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019012974A Active JP7250539B2 (ja) | 2019-01-29 | 2019-01-29 | 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20220236266A1 (ja) |
| EP (1) | EP3919904A4 (ja) |
| JP (2) | JP7250539B2 (ja) |
| KR (1) | KR20210121094A (ja) |
| CN (1) | CN113439211B (ja) |
| WO (1) | WO2020158765A1 (ja) |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE602005024965D1 (de) | 2004-06-07 | 2011-01-05 | Denka Seiken Kk | Chromatographische nachweisvorrichtung |
| JP6217141B2 (ja) | 2013-05-30 | 2017-10-25 | 藤倉化成株式会社 | 細菌の検出方法、及び、検出器具 |
| JP6675834B2 (ja) * | 2015-05-21 | 2020-04-08 | デンカ生研株式会社 | イムノクロマト試験片及びそれを用いたイムノクロマト法 |
| CN106290880B (zh) * | 2015-05-27 | 2019-01-04 | 江苏雷森生物科技有限公司 | 一种用于犬冠状病毒的免疫层析用试剂组合物及检测方法 |
| JP6709745B2 (ja) | 2017-03-14 | 2020-06-17 | デンカ生研株式会社 | 検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
| JP6832758B2 (ja) | 2017-03-14 | 2021-02-24 | デンカ株式会社 | 非特異反応を防止し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 |
| JP6815232B2 (ja) | 2017-03-14 | 2021-01-20 | デンカ株式会社 | 糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマトデバイス |
| JP2019012974A (ja) | 2017-06-30 | 2019-01-24 | 株式会社デンソーテン | 通信装置、通信システム、通信方法および通信プログラム |
-
2019
- 2019-01-29 JP JP2019012974A patent/JP7250539B2/ja active Active
-
2020
- 2020-01-29 US US17/426,561 patent/US20220236266A1/en active Pending
- 2020-01-29 WO PCT/JP2020/003066 patent/WO2020158765A1/ja unknown
- 2020-01-29 EP EP20748645.7A patent/EP3919904A4/en active Pending
- 2020-01-29 KR KR1020217026001A patent/KR20210121094A/ko unknown
- 2020-01-29 CN CN202080011365.8A patent/CN113439211B/zh active Active
-
2023
- 2023-03-22 JP JP2023045690A patent/JP2023078370A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2020158765A1 (ja) | 2020-08-06 |
| US20220236266A1 (en) | 2022-07-28 |
| EP3919904A1 (en) | 2021-12-08 |
| CN113439211A (zh) | 2021-09-24 |
| CN113439211B (zh) | 2024-04-26 |
| JP7250539B2 (ja) | 2023-04-03 |
| KR20210121094A (ko) | 2021-10-07 |
| EP3919904A4 (en) | 2022-11-09 |
| JP2020122663A (ja) | 2020-08-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2018168905A1 (ja) | 糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマトデバイス | |
| KR102269104B1 (ko) | 비특이 반응을 방지할 수 있는, 당쇄항원을 추출하고 측정하기 위한 이뮤노크로마토그래피 시험편 | |
| EP3598132B1 (en) | Immunochromatographic test piece capable of controlling development of specimens and being for extracting and measuring carbohydrate antigens | |
| WO2017213228A1 (ja) | 糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片及びそれを用いたイムノクロマト法 | |
| JP7250539B2 (ja) | 疎水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 | |
| JP7250538B2 (ja) | 親水性素材に亜硝酸塩又は固形状酸性試薬を含浸させることにより、検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験片 | |
| JP7313830B2 (ja) | 検体の展開を制御し得る、糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマト試験キット | |
| WO2021066139A1 (ja) | 糖鎖抗原を抽出し測定するためのイムノクロマトデバイス |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20230322 |