KR20230166353A - 감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 mmp-1 발현 억제용 조성물 - Google Patents

감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 mmp-1 발현 억제용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 조성물을 통해 자외선에 대한 세포 보호 효과 및 MMP-1 발현 억제 효과를 얻을 수 있다.

Description

감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 MMP-1 발현 억제용 조성물{Composition comprising Ecklonia cava extract, citrus peel extract, and green tea extract for protecting cells from UV or suppressing expression of MMP-1}
본 발명은 감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 MMP-1 발현 억제용 조성물에 관한 것이다.
피부를 구성하는 세포는 크게 각질형성세포(keratinocyte), 멜라닌세포(melanocyte), 섬유아세포(fibroblast)로 구분된다. 이중에서 섬유아세포는 피부의 진피층(dermis)을 구성하는 세포로 콜라겐(collagen), 엘라스틴(elastin) 등을 합성하며 피부의 지지 역할을 하는 인자들을 주관한다고 알려져 있다.
이러한 피부 내 세포는 자외선 자극에 의해 손상될 수 있으며, 이러한 손상을 줄이는 성분은 직접적으로는 자외선에 대한 세포 보호 효과를 갖는다고 할 수 있고, 넓게는 피부 손상에 대한 회복과도 관련이 있을 수 있다.
특히 섬유아세포를 자외선으로부터 보호할 수 있는 성분은 콜라겐 및 엘라스틴 등의 합성을 유지할 수 있게 도와줌으로써 피부를 자극으로부터 보호하고 손상을 회복하는데 핵심적인 역할을 할 수 있다.
또한 콜라겐은 섬유 단백질로 인체의 피부, 뼈, 연골 등의 결합 조직의 대부분을 차지한다. 콜라겐의 피부 지지 효과는 피부 탄력과 관련이 깊으며 콜라겐이 분해되고 소실되면 피부의 지지가 약해지면서 피부가 쳐지는 주름 생성의 원인이 된다. 콜라겐은 섬유아세포에서 생성되어 세포 외로 분비되어 구조를 갖추며 단단한 결합조직이 되며, 콜라겐의 분해에는 콜라겐 분해 효소인 collagenase (Matrix Metalloproteinase-1, MMP-1)가 주요 역할을 한다.
이러한 자외선으로 인한 손상으로부터 피부 세포를 보호하고 MMP-1의 발현을 억제하여 피부 주름을 완화시킬 수 있는 조성물의 개발이 필요한 실정이다.
일본 등록특허 제16507505호 한국 공개특허 제2007-0022994호 미국 공개특허 제2006/0045926호 PCT 공개특허 제WO2007/103555호
본 발명에서는 자외선으로부터 피부 세포를 보호하는 효능과 함께 collagenase (MMP-1)의 발현을 억제함으로써 피부의 노화를 방지하고 피부 주름을 개선할 수 있는 조성물을 제공하고자 한다.
특히 세포 보호 효능과 MMP-1 발현 억제 효능이 절대적으로 높은 값을 보임과 동시에, MMP-1 생성 억제 효능이 농도 의존적으로 발현될 수 있는 조성물을 제공함으로써, 피부 주름의 길이, 깊이, 개수, 두께 등에 따라 선택할 수 있는 효능-등급화된 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명의 일 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 MMP-1 발현 억제용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 또는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 MMP-1 발현 억제용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 또는 피부 주름 개선용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 자외선에 대해 세포를 보호하거나 MMP-1 발현을 억제하기 위한 건강기능식품용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 피부 노화를 방지하거나 피부 주름을 개선하기 위한 건강기능식품용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는 피부를 화장하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제1 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계, 귤피 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제2 화장료 조성물을 상기 개체의 상기 피부에 적용하는 단계, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제3 화장료 조성물을 상기 개체의 상기 피부에 적용하는 단계를 포함하는 피부를 화장하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 조성물을 통해서 자외선으로부터 피부 세포를 보호하는 효능과 함께 collagenase (MMP-1)의 발현을 억제함으로써 피부의 노화를 방지하고 피부 주름을 개선할 수 있는 효능을 얻을 수 있다.
특히 세포 보호 효능과 MMP-1 발현 억제 효능이 절대적으로 높은 값을 보임과 동시에, MMP-1 생성 억제 효능이 농도 의존적으로 발현될 수 있는 조성물을 제공함으로써, 피부 주름의 길이, 깊이, 개수, 두께 등에 따라 선택할 수 있는 효능-등급화된 효과를 얻을 수 있다.
도 1은 시험예 1에서 감태 추출물의 자외선에 대한 세포 보호 효과에 대해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 2는 시험예 2에서 제주 풋귤피 추출물의 자외선에 대한 세포 보호 효과에 대해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 3은시험예 3에서 제주 감태 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능에 대해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 4는 시험예 4에서 제주 풋귤피 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능에 대해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 5는 시험예 5에서 녹차 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능에 대해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 6은 시험예 6에서 감태 추출물, 풋귤피 추출물, 녹차 추출물을 이용한 순차적 처리의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능에 대해 분석한 결과를 보여주는 그래프이다.
이하에서, 본 발명의 여러 측면 및 다양한 구현예에 대해 더욱 구체적으로 살펴보도록 한다.
본 명세서 상에서 '포함한다', '갖는다', '이루어진다', '구성된다' 등의 표현은 '~만'이 사용되지 않는 한, 다른 부분이 추가될 수 있다. 또한, 본 명세서에서 구성요소를 단수로 표현한 경우에, 특별히 명시적인 기재 사항이 없는 한, 복수의 구성요소인 경우도 포함한다. 또한, 본 명세서에 기재된 수치 또는 수치 범위는 별도의 명시적 기재가 없더라도 오차 범위를 포함하는 것으로 해석한다. 또한, 본 명세서에서 수치 범위를 나타내는 "X 내지 Y"의 표현은 "X 이상 Y 이하"를 의미한다.
이하에서는 도면을 참조하여 본 발명의 실시예들을 구체적으로 설명하도록 한다. 다만, 하기의 설명 및 첨부된 도면에서 본 발명의 요지를 흐릴 수 있는 공지 기능 또는 구성에 대한 상세한 설명은 생략한다. 덧붙여, 명세서 전체에서, 어떤 구성 요소를 '포함'한다는 것은, 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라, 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명의 일 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 MMP-1 발현 억제용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 또는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 MMP-1 발현 억제용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 또는 피부 주름 개선용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 자외선에 대해 세포를 보호하거나 MMP-1 발현을 억제하기 위한 건강기능식품용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 피부 노화를 방지하거나 피부 주름을 개선하기 위한 건강기능식품용 조성물에 관한 것이다.
감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물 모두를 포함하는 혼합 추출물은 자외선에 대한 세포 보호 효능을 보일 뿐 아니라, 이들 각 추출물이 보이는 MMP-1 생성 억제 효능을 모두 합산한 것보다 크게 증가한 MMP-1 생성 억제 효능을 보일 수 있고, 또한 이를 통해 피부 노화 방지 또는 피부 주름 개선 효과를 보일 수 있다.
일 구현예에 있어서, 상기 화장료 조성물 내, 상기 감태 추출물의 농도는 0.05μg/mL 내지 7.5μg/mL이고, 상기 귤피 추출물의 농도는 2.5μg/mL 내지 150μg/mL이며, 상기 녹차 추출물의 농도는 0.5μg/mL 내지 30μg/mL이다.
앞서 살펴본 것처럼, 감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물 모두를 포함하는 혼합 추출물은 이들 각 추출물이 보이는 MMP-1 생성 억제 효능을 모두 합산한 것보다 크게 증가한 MMP-1 생성 억제 효능을 보일 수 있다.
다만 무수한 실험과 수많은 시행착오 결과, 이러한 상승 효과를 얻기 위해서는 감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물이 각각 위 농도 범위 내에 있어야 하고, 어느 하나의 추출물이라도 농도가 위 수치 범위를 벗어나는 경우 혼합 추출물의 MMP-1 생성 억제 효능은 각 추출물의 효능의 단순 합산에 그치거나 또는 이에 미치지 못할 수 있음을 확인하였다.
다른 구현예에 있어서, 상기 화장료 조성물 내, 상기 감태 추출물의 농도는 0.05μg/mL 내지 4μg/mL이다.
감태 추출물의 농도가 0.05μg/mL 미만인 경우 자외선으로부터 세포를 보호하는 효능이 미미하고, 4μg/mL를 초과하는 경우 감태 성분의 독성과 자외선의 독성이 복합되어 자외선으로부터 세포를 보호하는 효능은 기대할 수 없다.
또 다른 구현예에 있어서, 상기 화장료 조성물 내, 상기 귤피 추출물의 농도는 7.5μg/mL 내지 75μg/mL이며, 상기 녹차 추출물의 농도는 2.5μg/mL 내지 15μg/mL이다.
무수한 실험과 수많은 시행착오 결과, 귤피 추출물과 녹차 추출물의 농도가 각각 위 수치 범위 내에 있는 경우, 감태 추출물의 농도가 0.05μg/mL에서 7.5μg/mL의 범위에서 증가함에 따라 MMP-1의 발현 억제 효능이 증가하는 반면, 귤피 추출물과 녹차 추출물 중 어느 하나의 농도가 위 수치 범위 내에 있지 않으면 이러한 감태 추출물 농도에 의존적으로 증가하는 MMP-1 발현 억제 효능의 경향성은 보이지 않음을 확인하였다.
이러한 MMP-1 발현 억제 효능의 감태 추출물 농도 의존성은 감태 추출물의 농도만을 간단히 조절하여 MMP-1 발현 억제 효능을 미세하게 조절하여 화장료 조성물을 제조할 수 있어, 피부 주름의 길이, 깊이, 개수, 두께 등에 따라 선택할 수 있는 효능-등급화된 화장료 조성물을 제조할 수 있다는 장점이 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는 피부를 화장하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 측면은 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제1 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계, 귤피 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제2 화장료 조성물을 상기 개체의 상기 피부에 적용하는 단계, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제3 화장료 조성물을 상기 개체의 상기 피부에 적용하는 단계를 포함하는 피부를 화장하는 방법에 관한 것이다.
감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물 모두를 포함하는 혼합 추출물을 개체의 피부에 적용함으로써 자외선에 대한 세포 보호 효능을 기대할 수 있을 뿐 아니라, 이들 각 추출물이 보이는 MMP-1 생성 억제 효능을 모두 합산한 것보다 크게 증가한 MMP-1 생성 억제 효능을 기대할 수 있고, 또한 이를 통해 피부 노화 방지 또는 피부 주름 개선 효과를 얻을 수 있다.
일 구현예에 있어서, 상기 화장료 조성물 내, 상기 감태 추출물의 농도는 0.05μg/mL 내지 7.5μg/mL이고, 상기 귤피 추출물의 농도는 2.5μg/mL 내지 150μg/mL이며, 상기 녹차 추출물의 농도는 0.5μg/mL 내지 30μg/mL이다.
앞서 살펴본 것처럼, 감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물 모두를 포함하는 혼합 추출물은 이들 각 추출물이 보이는 MMP-1 생성 억제 효능을 모두 합산한 것보다 크게 증가한 MMP-1 생성 억제 효능을 보일 수 있다.
다만 무수한 실험과 수많은 시행착오 결과, 이러한 상승 효과를 얻기 위해서는 감태 추출물, 귤피 추출물, 및 녹차 추출물이 각각 위 농도 범위 내에 있어야 하고, 어느 하나의 추출물이라도 농도가 위 수치 범위를 벗어나는 경우 혼합 추출물의 MMP-1 생성 억제 효능은 각 추출물의 효능의 단순 합산에 그치거나 또는 이에 미치지 못할 수 있음을 확인하였다.
다른 구현예에 있어서, 상기 화장료 조성물 내, 상기 감태 추출물의 농도는 0.05μg/mL 내지 4μg/mL이다.
감태 추출물의 농도가 0.05μg/mL 미만인 경우 자외선으로부터 세포를 보호하는 효능이 미미하고, 4μg/mL를 초과하는 경우 감태 성분의 독성과 자외선의 독성이 복합되어 자외선으로부터 세포를 보호하는 효능은 기대할 수 없다.
또 다른 구현예에 있어서, 상기 화장료 조성물 내, 상기 귤피 추출물의 농도는 7.5μg/mL 내지 75μg/mL이며, 상기 녹차 추출물의 농도는 2.5μg/mL 내지 15μg/mL이다.
무수한 실험과 수많은 시행착오 결과, 귤피 추출물과 녹차 추출물의 농도가 각각 위 수치 범위 내에 있는 경우, 감태 추출물의 농도가 0.05μg/mL에서 7.5μg/mL의 범위에서 증가함에 따라 MMP-1의 발현 억제 효능이 증가하는 반면, 귤피 추출물과 녹차 추출물 중 어느 하나의 농도가 위 수치 범위 내에 있지 않으면 이러한 감태 추출물 농도에 의존적으로 증가하는 MMP-1 발현 억제 효능의 경향성은 보이지 않음을 확인하였다.
이러한 MMP-1 발현 억제 효능의 감태 추출물 농도 의존성은 감태 추출물의 농도만을 간단히 조절하여 MMP-1 발현 억제 효능을 미세하게 조절하여 화장료 조성물을 제조할 수 있어, 피부 주름의 길이, 깊이, 개수, 두께 등에 따라 선택할 수 있는 효능-등급화된 화장료 조성물을 제조할 수 있다는 장점이 있다.
본 발명에 따른 여러 조성물은 위에서 살펴본 농도 범위 내에서 본 발명에 따른 추출물을 유효한 양으로 포함할 수 있는데, 상기 유효한 양은 개체에 따라 적절하게 선택할 수 있다. 질환 내지 상태의 중증도, 개체의 연령, 체중, 건강, 성별, 개체의 추출물에 대한 민감도, 적용 또는 투여 시간, 적용 또는 투여 경로 및 배출 비율, 적용 또는 투여 기간, 상기 조성물과 배합 또는 동시 사용되는 다른 조성물을 포함한 요소 및 기타 생리 내지 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.
상기 조성물이 화장료 조성물인 경우, 추출물은 화장수(스킨로션), 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양 로션, 마사지크림, 영양 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양 에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 현탁액, 겔, 분말, 페이스트, 마스크팩 또는 시트 또는 에어로졸 조성물을 포함하는 제형으로 제조될 수 있다.
이러한 제형의 조성물은 당해 분야에서 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 상기 화장료 조성물은 보존제, 안정화제, 계면활성제, 용해제, 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제 등을 더 포함할 수 있다. 상기 보습제 등의 추가 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 내지 5 중량%, 구체적으로 0.01 내지 3 중량%일 수 있다.
상기 추출물은 피부 노화 방지 또는 피부 주름 개선용 피부 외용제 조성물일 수 있다. 상기 피부 외용제 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다. 구체적으로는, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클렌저의 제형을 포함한다.
상기 조성물이 건강기능식품용 조성물인 경우, 당해 기술분야에 공지되어 있는 통상적인 건강기능식품의 제형으로 제제화될 수 있다. 상기 건강기능식품용 조성물은 예를 들어 산제, 과립제, 정제, 환제, 캅셀제, 현탁액, 유제, 시럽제, 침제, 액제, 엑스제 등의 일반적인 제형으로 제조될 수도 있고, 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 젤리, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등의 임의의 건강식품 형태로 제조될 수도 있다.
상기 건강식품의 제제화를 위해 식품학적으로 허용 가능한 담체 또는 첨가제를 사용할 수 있으며, 제조하고자 하는 제형의 제조에 당해 기술분야에서 사용 가능한 것으로 공지되어 있는 임의의 담체 또는 첨가제가 이용될 수 있다. 상기 첨가제로서 각종 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 이외에도 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 첨가제 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 첨가제의 비율은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001중량% 내지 5중량%, 구체적으로 0.01중량% 내지 3중량%일 수 있다.
상기 건강기능식품용 조성물 중의 상기 추출물의 함량은 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 전체 식품 중량의 0.01중량% 내지 15중량%로 포함할 수 있으며, 음료로서 제조될 경우 100mL를 기준으로 0.02g 내지 10g, 바람직하게는 0.3g 내지 1g의 비율로 함유할 수 있다.
상기 음료는 상기 추출물 이외의 다른 성분을 더 포함할 수 있으며, 통상적으로 음료에 사용되는 다양한 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 더 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물로는 단당류(예: 포도당, 과당 등), 이당류(예: 말토즈, 수크로즈 등), 다당류(예: 덱스트린, 시클로덱스트린 등)와 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이 함유될 수 있다. 또한, 향미제로서 천연 향미제(예: 타우마틴, 스테비아 추출물 등) 및 합성 향미제(예: 사카린, 아스파탐 등)를 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 음료 100mL 당 일반적으로 약 1g 내지 20g, 바람직하게는 약 5g 내지 12g으로 함유될 수 있다.
본 발명에 있어서, '추출물'이란 감태 또는 귤피 또는 녹차를 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물은 구체적으로 추출 후 동결 건조하여 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
본 발명에 있어서, 감태 또는 귤피 또는 녹차를 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올, 헥산 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있으며, 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 일 예로서 C1 내지 C4의 알코올을 사용할 수 있다. 다른 예로서 본 발명의 감태 또는 귤피 또는 녹차 추출물은 구체적으로는 열수 추출물일 수 있다.
또한, 상기 추출물은 추출 또는 분획 과정을 수행한 이후, 감압 여과 과정을 수행하거나 추가로 농축 및/또는 동결건조를 수행하여 농축하거나 용매를 제거할 수 있으며, 상기 수득한 감태 또는 귤피 또는 녹차 추출물은 사용 시까지 급속 냉동 냉장고에 보관할 수 있다.
본 발명에 있어서, '분획물'이란 여러 다양한 구성 성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 감태 또는 귤피 또는 녹차를 추출하여 얻은 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데에 사용되는 분획 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 등의 극성 용매; 헥산(Hexane), 에틸아세테이트(Ethyl acetate), 클로로포름(Chloroform), 디클로로메탄(Dichloromethane) 등의 비극성 용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 분획 용매 중 알코올을 사용하는 경우에는 구체적으로 C1 내지 C4의 알코올을 사용할 수 있다.
이하에서 실시예 등을 통해 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 하며, 다만 이하에 실시예 등에 의해 본 발명의 범위와 내용이 축소되거나 제한되어 해석될 수 없다. 또한, 이하의 실시예를 포함한 본 발명의 개시 내용에 기초한다면, 구체적으로 시험 결과가 제시되지 않은 본 발명을 통상의 기술자가 용이하게 실시할 수 있음은 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연하다.
또한 이하에서 제시되는 시험 결과는 상기 실시예 및 비교예의 대표적인 시험 결과만을 기재한 것이며, 아래에서 명시적으로 제시하지 않은 본 발명의 여러 구현예의 각각의 효과는 해당 부분에서 구체적으로 기재하도록 한다.
실시예
제조예 1: 감태 추출 파우더 및 추출물 원액의 제조
시험에 이용된 제주 감태는 건조 원물 형태로 상온에 보관하다가 시험에 사용하기 전 추출하였다. 추출 방법은 제주 감태 30g을 정제수에 가볍게 세척한 후 1L의 정제수 넣어 7시간 동안 열수 추출하고 여과지로 2회 여과하여 불순물을 제거하였다. 여과액은 2일간 감압하여 총 5.8g의 파우더를 수득하였다.
수득된 파우더와 정제수 용매를 이용하여 농도가 1g/mL인 추출물 원액을 제조하였다. 세포에는 이 원액을 그대로 또는 희석하여 처리하였으며, 대조군은 동일한 양의 정제수로 처리하였다.
제조예 2: 제주 풋귤피 추출 파우더 및 추출물 원액의 제조
시험에 이용된 제주 풋귤피는 건조 원물 형태로 보관하다가 시험에 사용하기 전 추출하였다. 추출 방법은 제주 풋귤피 50g을 정제수에 가볍게 세척한 후 1L의 정제수 넣어 7시간 동안 열수 추출하고 여과지로 2회 여과하여 불순물을 제거하였다. 여과액은 2일간 감압하여 총 7.2g의 파우더를 수득하였다.
수득된 파우더 및 정제수 용매를 이용하여 농도가 1g/mL인 추출물 원액을 제조하였다. 세포에는 이 원액을 그대로 또는 희석하여 처리하였으며, 대조군은 동일한 양의 정제수로 처리하였다.
제조예 3: 녹차 추출 파우더 및 추출물 원액의 제조
시험에 이용된 녹차 잎은 건조 원물 형태로 보관하다가 시험에 사용하기 전 추출하였다. 추출 방법은 녹차 잎 50g을 정제수에 가볍게 세척한 후 1L의 정제수 넣어 7시간 동안 열수 추출하고 여과지로 2회 여과하여 불순물을 제거하였다. 여과액은 2일간 감압하여 총 8.4g의 파우더를 수득하였다.
수득된 파우더 및 정제수 용매를 이용하여 농도가 1g/mL인 추출물 원액을 제조하였다. 세포에는 이 원액을 그대로 또는 희석하여 처리하였으며, 대조군은 동일한 양의 정제수로 처리하였다.
실시예 1: 감태 추출물의 제조
제조예 1에서 제조한 감태 추출물 원액을 정제수로 희석하여 농도가 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL인 감태 추출물을 각각 제조하였다.
실시예 2: 제주 풋귤피 추출물의 제조
제조예 2에서 제조한 제주 풋귤피 추출물 원액을 정제수로 희석하여 농도가 5μg/mL, 10μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL인 제주 풋귤피 추출물을 각각 제조하였다.
실시예 3: 녹차 추출물의 제조
제조예 3에서 제조한 녹차 추출물 원액을 정제수로 희석하여 농도가 1μg/mL, 5μg/mL, 10μg/mL, 20μg/mL인 녹차 추출물을 각각 제조하였다.
실시예 4: 감태와 풋귤피 및 녹차의 혼합 추출물 제조
실시예 1 내지 3에서 제조한 추출물을 정제수로 희석하여, 풋귤피 농도는 50μg/mL이고 녹차 농도는 5μg/mL이며 감태 농도는 각각 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL인 4종의 혼합 추출물을 제조하였다.
실시예 5: 감태와 풋귤피 및 녹차의 혼합 추출물 제조
풋귤피 농도는 5μg/mL이고 녹차 농도는 1μg/mL인 점을 제외하고는 실시예 4와 동일한 방법으로 4종의 혼합 추출물을 제조하였다.
실시예 6: 감태와 풋귤피 및 녹차의 혼합 추출물 제조
풋귤피 농도는 100μg/mL이고 녹차 농도는 20μg/mL인 점을 제외하고는 실시예 4와 동일한 방법으로 4종의 혼합 추출물을 제조하였다.
시험 1: 자외선에 대한 세포 보호 효과 시험
(1) 시험세포
인간 섬유아세포(HDFn)를 대상으로 시험함으로써 사람 피수에서 실재 발현될 결과와 유사한 효과가 평가되도록 하였다. 이러한 인간 섬유아세포(HDFn)를 대상으로 하여 자외선 손상에 대한 실시예 등의 추출물의 세포 보호 효능을 평가하였다.
(2) 시험의 의의
세포의 자외선 자극에 대한 손상을 줄이는 시료는 직접적으로는 자외선에 대한 세포 보호 효과를 갖는다고 할 수 있으며, 넓게는 피부 손상에 대한 회복과도 관련이 있을 수 있다.
특히 섬유아세포를 자외선으로부터 보호할 수 있는 시료는 콜라겐 및 엘라스틴 등의 합성을 유지할 수 있게 도와줌으로써 피부를 자극으로부터 보호하고 손상을 회복하는데 핵심적인 역할을 할 수 있다.
이러한 효과를 평가하기 위해, 실시예 등의 추출물을 이용하여 인간 섬유아세포(HDFn)를 이용하여 자외선에 대한 보호효과가 있는지를 평가하였다.
(3) 시험방법
자외선 보호 효과에 대한 시험방법은 하기와 같다.
① 인간섬유아세포(HDFn)를 배양하여 접종하였다.
② 세포를 1일간 starvation히??다.
③ 의뢰 시료를 처리한 배지에서 1일간 세포 배양하였다.
④ UVB로 세포 손상을 유도한 후 의뢰 시료를 처리한 배지에서 3일 간 배양하였다.
⑤ CCK-8 방법으로 세포 활성을 측정하고 분석하였다. CCK-8시험법은 비색법으로 색의 변화 정도를 분광광도계를 이용하여 측정하고 분석하는 시험방법이다. 시험은 모두 3반복으로 진행하였다.
시험 2: Collagenase (MMP-1) 억제 시험
(1) 시험세포
인간 섬유아세포(HDFn)를 대상으로 시험함으로써 사람 피수에서 실재 발현될 결과와 유사한 효과가 평가되도록 하였다. 이러한 인간 섬유아세포(HDFn)를 대상으로 실시예 등의 추출물이 콜라겐 분해 효소인 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능을 갖는지에 대해 평가하였다.
(2) 시험의 의의
콜라겐은 섬유 단백질로 인체의 피부, 뼈, 연골 등의 결합 조직의 대부분을 차지한다. 콜라겐의 피부 지지 효과는 피부 탄력과 관련이 깊으며 콜라겐이 분해되고 소실되면 피부의 지지가 약해지면서 피부가 쳐지는 주름 생성의 원인이 된다. 콜라겐은 섬유아세포에서 생성되어 세포 외로 분비되어 구조를 갖추며 단단한 결합조직이 되는데 콜라겐의 분해에는 콜라겐 분해 효소인 collagenase (MMP-1)가 주요 역할을 한다.
시험은 시료의 처리에 따른 collagenase (MMP-1) 발현 양을 확인하여 시료의 collagenase (MMP-1) 저해 효과를 검증하는 방법으로 수행되었는데, 구체적으로 자외선으로 collagenase (MMP-1) 발현을 증가시킨 후 시료가 이러한 발현을 감소시킬 수 있는지를 측정하고 분석하였다.
본 시험은 식품의약품안전처 '기능성화장품의 유효성 평가를 위한 가이드라인(II)-주름개선에 도움을 주는 기능성 화장품의 유효성 평가를 위한 가이드라인' 에 의거하여 진행하였다.
이에 대한 효과를 평가하기 위해 실시예 등의 추출물이 collagenase (MMP-1) 발현을 감소시키는지 평가하였다.
(3) 시험방법
Collagenase (MMP-1)의 측정은 국내 식약처 가이드라인을 참고하여 진행하였다.
① 인간섬유아세포(HDFn)를 2X105/6well로 접종하여 배양하였다.
② Starvation 상태로 1일간 배양하였다.
③ 시료를 농도별로 물질 처리 후 24시간 배양하였다.
④ 세포 수세 후 UV 를 조사하고 72시간 배양하였다.
⑤ 세포 배양 배지로 collagenase (MMP-1)의 발현 양을 측정하고 분석하였다.
시험예 1: 감태 추출물의 자외선에 대한 세포 보호 효과
실시예 1에서 제조한 농도 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL인 감태 추출물 각각에 관하여, 시험 1에 기재된 바에 따라 자외선으로 인해 인간섬유아세포(HDFn)에서 발생한 손상에 대한 세포 보호 효과를 평가하였다.
본 시험 전에 시료의 독성을 평가하기 위한 시험에서 상기 처리 농도 이상에서는 시료의 처리만으로도 독성이 확인되었으며, 따라서 시료로 인한 독성이 없는 구간에서 본 시험을 진행하였다. 본 시험에서 자외선 조건은 세포 활성에 50% 수준의 손상을 주는 정도를 기준으로 하였다. 시험은 3회 반복으로 진행되었으며, 세포 활성 증가가 보인 구간의 값은 통계적으로 유의함을 확인하였다.
분광광도계를 이용한 흡광도 측정 및 분석 결과, 자외선을 조사하고 정제수를 시료로 처리한 대조군을 100%로 환산했을 때, 제주 감태 추출물 처리 시 0.1μg/mL에서 107.4%, 0.5μg/mL에서 117.5%, 1μg/mL에서 105.7%로 각각 유의한 세포 활성 증가를 확인하였다. 다만, 5μg/mL로 처리 시에는 이러한 세포 보호 효과가 나타나지 않았다(도 1).
시험예 2: 제주 풋귤피 추출물의 자외선에 대한 세포 보호 효과
실시예 2에서 제조한 농도 10μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL인 제주 풋귤피 추출물 각각에 관하여, 시험 1에 기재된 바에 따라 자외선으로 인해 인간섬유아세포(HDFn)에서 발생한 손상에 대한 세포 보호 효과를 평가하였다.
본 시험 전에 시료의 독성을 평가하기 위한 시험을 진행하였으며 최고 농도 100 μg/mL까지 시료로 인한 세포 독성이 없음을 확인하였다. 본 시험에서 자외선 조건은 세포 활성에 50% 수준의 손상을 주는 정도를 기준으로 하였다. 시험은 3회 반복으로 진행되었으며, 세포 활성 증가가 보인 구간의 값은 통계적으로 유의함을 확인하였다.
분광광도계를 이용한 흡광도 측정 및 분석 결과, 자외선을 조사하고 정제수를 시료로 처리한 대조군을 100%로 환산했을 때, 제주 풋귤피 추출물 처리 시 1μg/mL에서 118.5%, 10μg/mL에서 118.0%, 20μg/mL에서 115.4%, 50μg/mL에서 113.7%, 100μg/mL에서 112.8%로 평가되어, 처리한 모든 농도 구간에서 유의한 세포 활성 증가를 확인하였다(도 2).
시험예 3: 제주 감태 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능
실시예 1에서 제조한 농도 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL인 감태 추출물 각각에 관하여, 시험 2에 기재된 바에 따라 자외선으로 인해 인간섬유아세포(HDFn)에서 collagenase (MMP-1)가 발현되는 것을 억제하는 효능을 평가하였다.
시험은 자외선으로 collagenase (MMP-1) 발현을 유도한 후 시료가 증가된 collagenase (MMP-1)의 발현을 억제할 수 있는지 평가하는 방법으로 진행하였으며, 자외선 조사와 시료의 처리에 의해 세포 독성이 나타나지 않는 농도 구간에서 시험을 진행하였다. 세포 독성의 판단은 시료 처리 없고 자외선 조사도 없는 군(blank) 대비 세포 활성이 80% 이하일 때를 기준으로 하였다.
자외선 조사에 의해 collagenase (MMP-1)의 발현 양은 collagenase (MMP-1) 표준 곡선을 구하여 확인하였으며, 이에 따라 양 분석을 진행하였다. 분석 결과는 다시 세포 활성 값으로 보정하여 최종적으로는 % of control로 나타내었으며, 이때 시료 처리 없이 자외선만 조사한 군을 대조군으로 보고 100%로 기준하였다. 먼저 자외선 조사 전 collagenase (MMP-1)의 평균 양 보정값은 2.9, 자외선 조사 후 55.1로 자외선 조사에 의해 collagenase (MMP-1)가 충분히 유도되었음을 확인하였다.
시료 처리 없이 자외선만 조사한 군의 collagenase (MMP-1)의 발현 양을 세포 활성으로 보정한 값을 100%으로 환산하였을 때, 제주 감태 추출물 처리 시 0.1μg/mL에서 collagenase (MMP-1) 발현 양은 87.8%로 분석되었으며, 0.5μg/mL에서 95.1%, 1μg/mL에서 100.1%, 5μg/mL에서 108.3%로 분석되었다(도 3). 따라서 collagenase (MMP-1) 억제율은 제주 감태 추출물 0.1μg/mL에서 12.2%, 0.5μg/mL에서 4.9% 억제됨을 확인하였다. 다른 농도 구간에서는 collagenase (MMP-1)의 발현이 억제되지 않았다. 이때 시험의 n=4이며, 통계 기법 Student's t-test 를 이용하여 분석한 결과 collagenase (MMP-1) 억제가 나타나는 제주 감태 추출물 0.1μg/mL, 0.5μg/mL 농도에서 유의성을 가짐을 확인하였다(도 3).
시험예 4: 제주 풋귤피 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능
실시예 2에서 제조한 농도 10μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL인 제주 풋귤피 추출물 각각에 관하여, 시험예 3에 기재된 바에 준하여 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능을 평가하였다.
인간섬유아세포(HDFn)을 배양하고 위와 같이 추출물을 처리한 후 자외선을 조사한 결과, 제주 풋귤피 추출물이 자외선에 대해 세포 보호 효과를 보이는 농도에서 제주 풋귤피 추출물은 MMP-1의 생성 억제 효능을 보이지 않고, 오히려 MMP-1의 생성을 촉진시킬 수 있음을 확인하였다(도 4).
시험예 5: 녹차 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능
실시예 3에서 제조한 농도 1μg/mL, 5μg/mL, 10μg/mL, 20μg/mL인 녹차 추출물 각각에 관하여, 시험예 3에 기재된 바에 준하여 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능을 평가하였다.
인간섬유아세포(HDFn)을 배양하고 위와 같이 추출물을 처리한 후 자외선을 조사한 결과, 녹차 추출은 자외선에 의해 만들어지는 MMP-1의 생성을 농도 의존적으로 억제하는 결과를 보여주었다(도 5).
시험예 6: 감태 추출물, 풋귤피 추출물, 녹차 추출물을 이용한 순차적 처리의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능
시험예 4 내지 6에 근거하여 감태 추출물을 농도를 달리하여 처리하고 나서 MMP-1의 억제 효과가 없으나 세포 보호 효과를 보이는 풋귤피 추출물 50μg/ml과 녹차 추출물 5μg/ml로 각각 처리한 후, 자외선을 조사한 결과 자외선에 의해 만들어지는 MMP-1의 생성을 농도 의존적으로 크게 억제하는 결과를 확인하였다.
위 시험예 1 내지 5의 결과에 따르면, (i) 50μg/mL 농도의 풋귤피 추출물을 처리한 경우 MMP-1의 생성을 오히려 촉진시키고 있고(시험예 4), (ii) 5μg/mL 농도의 녹차 추출물을 처리한 경우 MMP-1 발현 억제가 4.9% 수준에 그치며(시험예 5), (iii) 감태 추출물은 처리 농도가 0.1μg/mL에서 5μg/mL로 증가할수록 MMP-1 발현 양이 87.8%에서 108.3%로 점점 증가하는 경향성을 보였으며(시험예 3), (iv) 감태 농도가 0.1μg/mL과 0.5μg/mL에서는 MMP-1 생성을 억제하였으나, 감태 농도가 1μg/mL인 경우 MMP-1 생성을 억제하지 못하고, 감태 농도가 5μg/mL인 경우에는 MMP-1의 생성을 오히려 촉진시키고 있다(시험예 3).
반면, 본 시험예에서 감태 추출물(농도 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL), 풋귤피 추출물(농도 50μg/mL), 녹차 추출물(농도 5μg/mL)을 모두 처리한 경우에는 (i) MMP-1 발현 억제가 15%에서 54.3%에 이를 정도로, 시험에 사용한 감태 농도 전 범위에서 감태 추출물의 MMP-1 발현 억제 효능과 녹차 추출물의 MMP-1 발현 억제 효능의 상가적 효과보다 현저하게 향상된 상승적 효과를 보일 뿐 아니라, (ii) 감태 추출물은 처리 농도가 0.1μg/mL에서 5μg/mL로 증가할수록 MMP-1 발현 양이 85%에서 45.7%로 점점 감소하는 경향성을 확인할 수 있다(도 6).
이러한 점에서, 감태 추출물과 풋귤피 추출물 및 녹차 추출물을 모두 처리하는 경우, 각각을 처리한 경우와 양적 현저할 뿐 아니라 질적으로도 전혀 상이한 효과를 보임을 확인하였다.
시험예 7: 감태와 풋귤피 및 녹차의 혼합 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능
감태 추출물, 풋귤피 추출물, 및 녹차 추출물을 순차적으로 처리하는 대신 실시예 4에서 제조한 감태와 풋귤피 및 녹차의 혼합 추출물 4종(풋귤피 농도 50μg/mL, 녹차 농도 5μg/mL, 감태 농도 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL)을 처리하는 것을 제외하고는 시험예 6과 동일하게 시험을 진행하였다.
그 결과, 감태 농도가 0.1μg/mL에서 5μg/mL로 증가함에 따라 MMP-1 발현 양이 84.7%에서 45.1%로 감소하여, MMP-발현의 절대적인 양과 경향성 면에서 시험예 6과 매우 유사한 결과를 보임을 확인하였다.
시험예 8: 감태와 풋귤피 및 녹차의 혼합 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능
실시예 4의 혼합 추출물 대신에 실시예 5의 혼합 추출물 4종(풋귤피 농도 5μg/mL, 녹차 농도 1μg/mL, 감태 농도 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL)을 사용하는 것을 제외하고는 시험예 7과 동일하게 시험을 진행하였다.
그 결과, 감태 농도가 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL로 변함에 따라 MMP-1 발현 양이 86.1%, 75%, 75.7%, 79%를 보여, 여전히 시험에 사용한 감태 농도 전 범위에서 감태 추출물의 MMP-1 발현 억제 효능(87.8%, 95.1%, 100.1%, 108.3%)과 녹차 추출물의 MMP-1 발현 억제 효능(의 상가적 효과보다 현저하게 향상된 상승적 효과를 보이기는 하였으나, 시험예 6 또는 시험예 7에서 보이는 감태 농도 의존성, 즉 감태 추출물의 농도가 0.1μg/mL에서 5μg/mL로 증가할수록 MMP-1 발현 양이 점점 감소하는 경향성은 보이지 않음을 확인하였다.
시험예 9: 감태와 풋귤피 및 녹차의 혼합 추출물의 collagenase (MMP-1) 발현 억제 효능
실시예 4의 혼합 추출물 대신에 실시예 6의 혼합 추출물 4종(풋귤피 농도 100μg/mL, 녹차 농도 20μg/mL, 감태 농도 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL)을 사용하는 것을 제외하고는 시험예 7과 동일하게 시험을 진행하였다.
그 결과, 감태 농도가 0.1μg/mL, 0.5μg/mL, 1μg/mL, 5μg/mL로 변함에 따라 MMP-1 발현 양이 53.1%, 64.2%, 69.4%, 71.3%를 보여, 여전히 시험에 사용한 감태 농도 전 범위에서 감태 추출물의 MMP-1 발현 억제 효능과 녹차 추출물의 MMP-1 발현 억제 효능의 상가적 효과보다 현저하게 향상된 상승적 효과를 보이기는 하였으나, 시험예 6 또는 시험예 7에서 보이는 감태 농도 의존성, 즉 감태 추출물의 농도가 0.1μg/mL에서 5μg/mL로 증가할수록 MMP-1 발현 양이 점점 감소하는 경향성은 보이지 않음을 확인하였다.

Claims (14)

  1. 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 MMP-1 발현 억제용 화장료 조성물.
  2. 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 또는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 화장료 조성물 내
    상기 감태 추출물의 농도는 0.05μg/mL 내지 7.5μg/mL이고,
    상기 귤피 추출물의 농도는 2.5μg/mL 내지 150μg/mL이며,
    상기 녹차 추출물의 농도는 0.5μg/mL 내지 30μg/mL인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 화장료 조성물 내
    상기 감태 추출물의 농도는 0.05μg/mL 내지 4μg/mL인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 제3항에 있어서, 상기 화장료 조성물 내
    상기 귤피 추출물의 농도는 7.5μg/mL 내지 75μg/mL이며,
    상기 녹차 추출물의 농도는 2.5μg/mL 내지 15μg/mL인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는 피부를 화장하는 방법.
  7. 감태 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제1 화장료 조성물을 개체의 피부에 적용하는 단계,
    귤피 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제2 화장료 조성물을 상기 개체의 상기 피부에 적용하는 단계, 및
    녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 제3 화장료 조성물을 상기 개체의 상기 피부에 적용하는 단계를 포함하는 피부를 화장하는 방법.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 화장료 조성물 내
    상기 감태 추출물의 농도는 0.05μg/mL 내지 7.5μg/mL이고,
    상기 귤피 추출물의 농도는 2.5μg/mL 내지 150μg/mL이며,
    상기 녹차 추출물의 농도는 0.5μg/mL 내지 30μg/mL인 것을 특징으로 하는 피부를 화장하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 화장료 조성물 내
    상기 감태 추출물의 농도는 0.05μg/mL 내지 4μg/mL인 것을 특징으로 하는 피부를 화장하는 방법.
  10. 제8항에 있어서, 상기 화장료 조성물 내
    상기 귤피 추출물의 농도는 7.5μg/mL 내지 75μg/mL이며,
    상기 녹차 추출물의 농도는 2.5μg/mL 내지 15μg/mL인 것을 특징으로 하는 피부를 화장하는 방법.
  11. 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 대한 세포 보호용 또는 MMP-1 발현 억제용 피부 외용제 조성물.
  12. 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 또는 피부 주름 개선용 피부 외용제 조성물.
  13. 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 자외선에 대해 세포를 보호하거나 MMP-1 발현을 억제하기 위한 건강기능식품용 조성물.
  14. 감태 추출물 또는 이의 분획물, 귤피 추출물 또는 이의 분획물, 및 녹차 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 피부 노화를 방지하거나 피부 주름을 개선하기 위한 건강기능식품용 조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060045926A1 (en) 2004-09-02 2006-03-02 Marcel Nimni Methods and compositions for enhancing collagen and proteoglycan synthesis in the skin
KR20070022994A (ko) 2005-08-23 2007-02-28 (주)아모레퍼시픽 녹차 유래의 캄페롤을 유효성분으로 함유하는 항노화용,주름 개선용, 및 피부 탄력 향상용 피부 외용제 조성물
WO2007103555A2 (en) 2006-03-08 2007-09-13 Nuviance, Inc. Transdermal drug delivery compositions and topical compositions for application on the skin
JP2016507505A (ja) 2012-12-21 2016-03-10 バイエル・ヘルスケア・エルエルシーＢａｙｅｒ ＨｅａｌｔｈＣａｒｅＬＬＣ レゴラフェニブを含有する局所眼科用医薬組成物

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060045926A1 (en) 2004-09-02 2006-03-02 Marcel Nimni Methods and compositions for enhancing collagen and proteoglycan synthesis in the skin
KR20070022994A (ko) 2005-08-23 2007-02-28 (주)아모레퍼시픽 녹차 유래의 캄페롤을 유효성분으로 함유하는 항노화용,주름 개선용, 및 피부 탄력 향상용 피부 외용제 조성물
WO2007103555A2 (en) 2006-03-08 2007-09-13 Nuviance, Inc. Transdermal drug delivery compositions and topical compositions for application on the skin
JP2016507505A (ja) 2012-12-21 2016-03-10 バイエル・ヘルスケア・エルエルシーＢａｙｅｒ ＨｅａｌｔｈＣａｒｅＬＬＣ レゴラフェニブを含有する局所眼科用医薬組成物

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