KR102149177B1 - 참취 및 무화과를 이용한 피부 미백 효능이 증진된 식초 및 이의 제조방법 - Google Patents

참취 및 무화과를 이용한 피부 미백 효능이 증진된 식초 및 이의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 (a) 참취에 에탄올을 첨가한 후 추출하여 참취 에탄올 추출물을 제조하는 단계; (b) 무화과 농축액에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 접종한 후 발효하는 단계; 및 (c) 상기 (b)단계의 발효한 발효물에 상기 (a)단계의 제조한 참취 에탄올 추출물 및 초산균을 접종하여 초산 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 피부 미백 효능이 증진된 식초의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 피부 미백 효능이 증진된 식초에 관한 것이다.

Description

참취 및 무화과를 이용한 피부 미백 효능이 증진된 식초 및 이의 제조방법{Vinegar with enhanced skin whitening effect using Aster scaber and Ficus carica and production method thereof}
본 발명은 무화과 발효물에 참취 에탄올 추출물 및 초산균을 접종하여 초산 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 피부 미백 효능이 증진된 식초의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 피부 미백 효능이 증진된 식초 및 상기 식초를 유효성분으로 함유하는 피부 미백 개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
식초는 전통적으로 동서양을 막론하고 오랜 역사를 지닌 발효 식품으로 간장, 된장과 함께 우리 식생활과 밀접한 관련을 맺고 있는 중요한 조미료의 하나이다. 식초는 미생물을 이용하여 당류나 전분질을 함유하고 있는 여러 원료를 알코올 발효한 후 초산 발효하여 제조하는 원리이며, 신맛을 내는 초산성분을 비롯하여 25여 종의 유기산과 20여 종의 아미노산, 20여 종의 에테르 및 각종 영양물질이 함유된 복합 산미 조미료이자 건강식품이라 할 수 있다.
식초는 식품 보존 효과뿐만 아니라 식품 방향제 또는 치료제로 널리 사용되고 있다. 일반적으로 식초는 음식물 자체의 맛을 좋게 할 뿐만 아니라 짠맛을 덜어주고 지방을 중화시켜 주는 작용을 한다. 또한, 식초는 피를 맑게 하며 피로 회복에 효과가 크고 각종 성인병을 치료하는데 좋은 원료로 널리 알려져 있다. 또한, 식초에 함유되어 있는 유기산과 아미노산 등은 질병에 대한 저항력을 높여 주고 위에서 흡수되어 산성체질을 개선하는 효과가 있다.
식초는 초산 이외의 각종 휘발성 및 비휘발성 유기산류, 당류, 아미노산류, 에스테르류를 함유하고 있어 식욕을 자극하는 방향과 맛을 가지며 생체 조직 내에서 쉽게 분해되어 다른 열량원보다 빠르게 칼로리를 발생하는 스테미너 식품으로 알려져 있다. 천연식초는 동맥경화, 고혈압 등의 성인병 예방효과, 식중독균의 살균효과, 콜레스테롤 저하효과, 체지방 감소 및 피로회복 효과 등에 관한 연구가 보고되면서 기능성 식품으로 인정되고 있고 다양한 용도로의 개발이 진행되고 있다. 또한, 천연식초는 우리 몸에 파로틴의 분비를 촉진하여 세포의 노화를 막고 뼈를 강하게 하고, 체내의 칼슘 흡착력을 높여 골의 질량을 늘리는 기능도 알려져 있다.
소득의 증가와 함께 건강한 삶을 위해 기능성 발효식품에 대한 수요가 급격히 증가하고 있다. 과일, 곡류, 산야초 등을 발효시켜 만든 식초는 초산을 비롯한 다양한 유기산, 아미노산 등의 기능성 성분이 풍부하여 만성질환의 예방, 면역력 증진 및 비만의 예방 등에 효과적인 것으로 알려져 있다.
최근에는 식초 음료 제품의 항비만 효능과 미백 효능, 향균활성을 기초로 슬리밍 기능과 피부미용 효능을 강조한 이너뷰티 컨셉의 뷰티푸드 및 기능성 화장품으로의 산업화 가능성이 기대되고 있다.
사람의 피부색을 결정하는 데는 여러 요인들이 관여하는데, 그 중에서도 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께 및 카로티노이드, 빌리루빈 등의 인체 내외의 색소 관련 요인들이 중요하다. 특히, 가장 중요한 요인은 인체 내의 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 색소이다. 피부의 색소침착은 자외선이나 염증 등의 자극에 의해 야기되며 또 유전적 요인이나 호르몬, 식품 등과 화학물질 등의 인자에 의해서도 발생된다고 알려져 있다. 특히 기미, 주근깨, 색소침착 등과 같은 피부색소 이상침착 증상에 프로스타글란딘(prostaglandins), 히스타민(histamine), 알파-MSH(alpha-MSH), NO(Nitric oxide) 같은 염증 관련 인자가 관여되어 멜라노사이트(melanocyte) 내에서 멜라닌 생성을 활성화시키는 것은 잘 알려져 있다. 또한, 조직의 손상과 재생과정에서도 면역학적 매개체에 의해 과색소 침착이 수반된다는 보고도 있다.
멜라닌 색소 합성을 구체적으로 살펴보면 멜라닌 세포(melanocytes)가 여러 요인에 의해 자극을 받으면 티로시나아제(tyrosinase)가 멜라노좀(melanosome)에서 멜라닌을 생성한다. 즉, 멜라닌 세포 내 티로신은 티로시나아제의 작용으로 도파(dopa)로 변하고, 이어 도파옥시다제(dopaoxidase)의 작용으로 도파퀴논(dopaquinone)으로 변한 후, 티로시나아제 관련 단백질-1(tyrosinase-related protein-1, 이하 TRP-1이라고 명기)과 티로시나아제 관련 단백질-2(tyrosinase-related protein-2, 이하 TRP-2이라고 명기)의 작용에 의하여 멜라닌을 생성한다. 이러한 일련의 반응에서 티로시나아제는 멜라닌 색소 형성 과정의 속도-제한 반응을 활성화시키므로, 멜라닌 형성은 티로시나아제의 활성 및 발현에 의하여 1차적으로 제어된다. 또한, DOPA 크롬 상호변이효소로 알려진 TRP-2는 DOPA 크롬의 5,6-디하이드록시인돌-2-카르복실산(DHICA)로의 반응을 활성화시키고, TRP-1는 DHICA를 카르복실 인돌-퀴논으로 산화시킨다. 결과적으로 TRP-1 및 TRP-2는 불용성 색소인 멜라닌 형성의 최종단계인 중합반응에 관여한다. 이들 티로시나아제(tyrosinase), TRP-1(tyrosinase-related protein-1), TRP-2(tyrosinase-related protein-2)는 염증 매개물질에 의해 활성이 증가되어 멜라닌의 합성이 증가된다는 보고가 있다.
현재 개발된 미백제로는 코지산, 알부틴, 글루타치온, 비타민 C 등이 있지만 소비자들이 만족할 만한 미백효과를 갖지 못하고 있으며, 피부 안전성 때문에 그 사용량이 제한적이다. 따라서 멜라닌 합성단계별로 다양한 시도가 이루어져 왔다.
무화과는 뽕나무과에 속하는 반교목성 과수로, 발진 및 궤양에 이용되어 왔으며 한방에서는 청열해독의 약리효능과 주독 및 어독 등의 치료제로 사용되어 왔다. 또한, 당질, 무기질 및 섬유소가 풍부하며 유용한 생리활성이 알려져 있으며, 피신(ficin)을 다량 함유하고 있어 육연화제로 이용되기도 한다. 또한, 민간요법에서는 변비개선 및 혈류개선 효능이 우수하다고 알려져 여성들에게 인기가 높다. 이러한 효능을 가지는 무화과가 저장성이 떨어져 주로 생과일로 사용되고 있다.
참취(Aster scaber Thunb.)는 국화과의 여러해살이풀로 어린잎은 식용하며 성숙한 잎은 약용한다. 성분으로는 프리에델린(friedelin), α-스피나스테롤(α-spinasterol), 쿠마린(coumarin) 등을 함유하고 있고, 타박상과 독사교상을 치료하는데 사용하여 왔다. 참취는 미역취, 곰취 등과 같은 취나물에 속하며 이명은 취, 취나물, 동풍채라고 부른다. 참취가 속하는 취나물의 생산량은 약 12,267톤이며, 산과 들에서 자라며 한국, 일본, 중국 등지에 분포한다. 참동의학사전에 따르면 참취는 예로부터 해독제거, 혈액순환 촉진, 소화 장애, 장염으로 인한 복통 등에 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 논문 및 특허에서는 항산화, 항고지혈, 항암, 피로회복 등의 연구가 진행되어 있다.
한국등록특허 제1321611호에는 구절초 및 진주조개껍질을 함유하는 미백 효과를 갖는 기능성 식초의 제조방법이 개시되어 있고, 한국공개특허 제2013-0077911호에는 미백 효능을 가지는 죽순발효 식초의 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 참취 및 무화과를 이용한 피부 미백 효능이 증진된 식초와는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로서, 본 발명자는 무화과 발효물에 참취 에탄올 추출물 및 초산균을 접종하여 초산 발효하여 제조된 식초가 피부 미백 개선 효과가 증진되는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (a) 참취에 에탄올을 첨가한 후 추출하여 참취 에탄올 추출물을 제조하는 단계; (b) 무화과 농축액에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 접종한 후 발효하는 단계; 및 (c) 상기 (b)단계의 발효한 발효물에 상기 (a)단계의 제조한 참취 에탄올 추출물 및 초산균을 접종하여 초산 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 피부 미백 효능이 증진된 식초의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 방법으로 제조된 피부 미백 효능이 증진된 식초를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 식초를 유효성분으로 함유하는 피부 미백 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 식초를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 방법으로 제조된 식초는 폴리페놀 및 항산화 활성이 우수할 뿐만 아니라, 멜라닌 생성 및 티로시나아제 활성을 효과적으로 억제하여 피부 미백 효과가 증진되는 효과가 있다. 따라서, 본 발명의 식초를 피부 미백 개선을 위한 이너뷰티 제품으로 활용이 가능할 것으로 판단된다.
도 1은 식초의 농도별 피부 미백 효능을 검증하기 위한 티로시나아제 활성(A) 및 멜라닌 생합성량(B)을 분석한 그래프이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(a) 참취에 에탄올을 첨가한 후 추출하여 참취 에탄올 추출물을 제조하는 단계;
(b) 무화과 농축액에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 접종한 후 발효하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 발효한 발효물에 상기 (a)단계의 제조한 참취 에탄올 추출물 및 초산균을 접종하여 초산 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 피부 미백 효능이 증진된 식초의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 식초의 제조방법에서, 상기 (a)단계의 참취 에탄올 추출물은 바람직하게는 참취에 65~75%(v/v) 에탄올을 8~12배(v/w) 첨가한 후 1~3시간 동안 추출하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 참취에 70%(v/v) 에탄올을 10배(v/w) 첨가한 후 2시간 동안 추출하여 제조할 수 있다. 상기와 같이 제조된 참취 에탄올 추출물은 총 폴리페놀 함량 및 항산화 활성이 우수하여 품질이 우수한 식초 제조에 적합한 추출물로 제조할 수 있었다.
또한, 본 발명의 식초의 제조방법에서, 상기 (c)단계에서 접종된 초산균은 바람직하게는 아세토박터 속(Acetobacter sp.)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 방법으로 제조된 식초는 멜라닌 생합성 및 티로시나아제 저해능이 우수하여, 피부 미백 효능을 나타내는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 식초의 제조방법은, 보다 구체적으로는
(a) 참취에 65~75%(v/v) 에탄올을 8~12배(v/w) 첨가한 후 1~3시간 동안 추출하여 참취 에탄올 추출물을 제조하는 단계;
(b) 무화과 농축액에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 접종한 후 28~32℃에서 3~5일 동안 발효하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 발효한 발효물에 상기 (a)단계의 제조한 참취 에탄올 추출물 6~8%(v/v) 및 초산균을 접종하여 28~32℃에서 2~4일 동안 초산 발효하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(a) 참취에 70%(v/v) 에탄올을 10배(v/w) 첨가한 후 2시간 동안 추출하여 참취 에탄올 추출물을 제조하는 단계;
(b) 무화과 농축액에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 접종한 후 30℃에서 4일 동안 발효하는 단계; 및
(c) 상기 (b)단계의 발효한 발효물에 상기 (a)단계의 제조한 참취 에탄올 추출물 7%(v/v) 및 초산균을 접종하여 30℃에서 3일 동안 초산 발효하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 피부 미백 효능이 증진된 식초를 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 식초를 유효성분으로 함유하는 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 멜라닌 색소 과다 침착 질환은 주근깨, 노인성 반점, 간반, 기미, 갈색 또는 흑점, 일광 색소반, 푸른흑피증(cyanic melasma), 약물 사용 후의 과다 색소 침착, 찰상, 화상 또는 피부염으로 인한 염증 후 과다 색소 침착 또는 임신성 갈색반(gravidic chloasma)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 건강기능식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 양은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 건강기능식품 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강을 목적으로 하는 장기간의 섭취인 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 상기 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함시킬 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등), 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등) 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 함유할 수 있다. 이러한 상기 첨가되는 성분의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강기능식품 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명은 또한, 상기 식초를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 피부 미백효과란, 자외선 노출, 호르몬 밸런스의 변화, 유전적 프로그램 등의 각종 요인에 의해 발생하는 거뭇한 피부나 기미, 주근깨, 다크서클을 개선 또는 방지하는 효과, 피부를 투명감 있는 아름다운 것으로 하는, 혹은 투명감 있는 아름다운 피부를 유지하는 효과, 피부의 칙칙함을 경감하여 윤기ㆍ팽팽함을 증가시키는 효과 등을 의도하고 있다. 일반적으로, 거뭇한 피부나 기미, 주근깨, 다크서클은 자외선에 의한 자극이나 호르몬 밸런스의 변화 등에 의해 멜라노사이트(melanocyte)가 자극되고, 이로 인해 생합성된 멜라닌 색소가 피부에 침착하여 발생한다고 알려져 있다. 따라서, 멜라닌의 생성을 억제할 수 있다면, 거뭇한 피부나 기미, 주근깨, 다크서클을 예방ㆍ개선하는 것이 가능하다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 피부 미백용 화장료 조성물은 스킨, 스킨 소프트너, 스킨 토너, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징워터, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 및 파우더 중에서 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형으로 이루어진 화장료 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 유효성분 이외에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 피부 미백 활성 성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 피부 미백 활성 성분으로는 코지산 및 이의 유도체, 알부틴, 아스코르브산 및 이의 유도체, 하이드로퀴논 및 이의 유도체, 레조르시놀, 사이클로알카논, 메틸렌디옥시페닐 알칸올, 2,7-디니트로인다졸 또는 덩굴귤 추출물, 쌀 추출물, 감초 추출물과 같은 식물 추출물 등이 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 아세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습제, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당 유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.
이하, 본 발명의 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1. 참취 +무화과 식초 제조
1) 참취 에탄올 추출물 제조
건조한 후 분쇄한 참취 3 g에 70%(v/v) 에탄올을 30 mL을 넣고, 상온에서 180 rpm으로 2시간 동안 교반하여 추출한 후, 3,000 rpm에서 10분 동안 원심 분리한 뒤 0.2 ㎛ 필터로 여과하여 참취 에탄올 추출물을 제조하였다.
2) 무화과 초산 발효 식초 제조
65 brix의 무화과 농축액을 배지에 10% 첨가한 후, 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 접종한 후 30℃에서 96시간 동안 알코올 발효하였다. 상기 알코올 발효한 발효물에 상기 1)에서 제조한 참취 에탄올 추출물을 7% 첨가한 후, 초산 균주인 아세토박터 속(Acetobacter sp.)을 접종하여 30℃에서 180 rpm으로 72시간 배양하여 초산 발효하였다. 발효된 초산 발효액은 12,000 rpm에서 15분 동안 원심 분리한 뒤 여과하여 시료로 사용하였다.
비교예 1. 무화과 식초 제조
상기 제조예 1의 방법으로 식초를 제조하되, 1)에서 참취 대신 무화과를 사용하여 제조한 무화과 에탄올 추출물을 이용하여 식초를 제조하였다.
비교예 2. 참취 식초 제조
상기 제조예 1의 방법으로 식초를 제조하되, 2)에서 무화과 대신 참취를 사용한 알코올 발효물을 이용하여 식초를 제조하였다.
비교예 3. 참취 +삼백초+당귀+무화과 식초 제조
상기 제조예 1의 방법으로 식초를 제조하되, 1)에서 참취 3 g 대신 참취 1 g, 삼백초 1 g 및 당귀 1 g을 사용하여 제조한 에탄올 추출물을 이용하여 식초를 제조하였다.
비교예 4. 참취 +무화과 식초 제조
상기 제조예 1의 방법으로 식초를 제조하되, 1)에서 참취 대신 무화과를 사용하여 제조한 무화과 에탄올 추출물과 2)에서 무화과 대신 참취를 사용한 알코올 발효물을 이용하여 식초를 제조하였다.
실시예 1. 참취 추출물의 추출 수율, 총 폴리페놀 함량 및 항산화능 측정
참취 물 추출물과 제조예 1의 1)단계에서 제조된 참취 에탄올 추출물을 가지고 추출 수율, 폴리페놀 함량 및 항산화 활성을 측정한 결과는 하기 표 1과 같다. 참취 물 추출물은 건조한 후 분쇄한 참취 3 g에 물 30 mL을 넣고 100℃에서 2시간 동안 추출한 후, 3,000 rpm에서 10분 동안 원심 분리한 뒤 0.2 ㎛ 필터로 여과하여 참취 물 추출물을 제조하였다.
참취 추출물의 추출 수율, 총 폴리페놀 함량, 항산화 활성
시료 추출 수율(%) 총 폴리페놀 함량(㎎/g) 라디칼 소거능(%)
ABTS DPPH
참취 물 추출물 21.52±0.32 132.27±1.60 37.32±0.13 52.06±8.45
참취 70% 에탄올 추출물 19.79±0.04 231.67±5.37 50.71±3.00 61.78±5.47
그 결과, 추출 수율은 참취 물 추출물이 참취 에탄올 추출물에 비해 좀 더 높게 나타났으나, 총 폴리페놀 함량 및 항산화 활성은 참취 에탄올 추출물이 더 높은 수치를 나타내었다.
실시예 2. 식초의 미백 효능 평가
멜라닌(Melanin) 생합성 측정은 B16F10 세포를 12 웰(well)에 0.5×105 cells/mL이 되도록 접종하여 배양하고, 24시간 뒤 각 웰(well)에 추출물(0.05, 0.1, 0.2 mg/mL)과 알부틴(100 ㎍/mL)을 48시간 동안 처리하였다. 처리 후 PBS(phosphate buffered saline)로 2회 세척한 후 원심 분리하여 세포 침전물을 만들었다. 10% DMSO(dimethyl sulfoxide)가 첨가된 1N NaOH 용액을 200 ㎕ 첨가하고 80℃에서 1시간 용해하였으며 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.
티로시나아제(Tyrosinase) 저해 활성 측정으로 반응구 0.1M 인산나트륨 완충액(pH 6.8) 1 mL에 10 mM L-DOPA(L-3,4-dihydroxypheny-lalanine)를 녹인 기질액 140 ㎕ 및 추출물 60 ㎕의 혼합액을 37℃에서 1시간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 490 nm에서 측정하였다. 티로시나아제(Tyrosinase) 저해 활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.
피부는 자외선에 노출되면 티로시나아제(Tyrosinase)에서 출발하여 일련에 산화 중합반응을 거쳐 생성된 멜라닌에 의해 기미, 노인성 홍반 등을 유발하며 피부 노화가 촉진된다. 이 과정에서 중요하게 작용하는 효소가 티로시나아제(tyrosinase)이며, 티로시나아제(tyrosinase) 효소의 억제는 멜라닌 생합성을 억제할 수 있는 것으로 알려져 있다.
제조예 1의 참취+무화과 식초와 비교예 1의 무화과 식초를 가지고 미백 효과를 평가한 결과는 도 1과 같다. 그 결과, 식초 처리로 멜라닌 생성을 억제하고 티로시나아제 억제 활성이 있는 것을 확인하였고, 특히 무화과 식초에 비해 참취+무화과 식초가 멜라닌 및 티로시나아제 억제 활성이 더 우수한 것으로 나타났다(도 1).
실시예 3: 식초의 관능검사
제조예 1과 비교예들의 식초를 가지고 5점 평점법으로 관능검사를 실시하였다. 관능검사는 20세 이상의 직장인 30명을 대상으로 식초를 기호에 맞게 물과 희석하여 시음하게 한 후 향, 맛 및 전체적인 기호도에 대한 관능검사를 3회 반복 실시한 후 그 결과를 평균하여 아래 표 2에 나타내었다.
식초의 관능검사
식초 종류 전체적인 기호도
제조예 1 4.5 4.6 4.6
비교예 1 4.0 3.9 4.0
비교예 2 3.8 3.7 3.8
비교예 3 3.9 3.5 3.7
비교예 4 4.1 4.1 4.2
그 결과, 향, 맛 및 전체적인 기호도에서 제조예 1의 식초가 가장 높은 점수를 나타내어, 제조예 1의 조건으로 식초를 제조하는 것이 가장 바람직함을 확인할 수 있었다.

Claims (5)

  1. (a) 참취에 65~75%(v/v) 에탄올을 8~12배(v/w) 첨가한 후 1~3시간 동안 추출하여 참취 에탄올 추출물을 제조하는 단계;
    (b) 무화과 농축액에 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 균주를 접종한 후 28~32℃에서 3~5일 동안 발효하는 단계; 및
    (c) 상기 (b)단계의 발효한 발효물에 상기 (a)단계의 제조한 참취 에탄올 추출물 6~8%(v/v) 및 초산균을 접종하여 28~32℃에서 2~4일 동안 초산 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 피부 미백 효능이 증진된 식초의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 제1항의 방법으로 제조된 피부 미백 효능이 증진된 식초.
  4. 제3항의 식초를 유효성분으로 함유하는 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
  5. 제3항의 식초를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물.
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